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Practica de Laboratorio de Biologa

Separacin de Pigmentos Vegetales

I.

Introduccin

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: Clorofila- a (verde intenso), Clorofila b (verde), Carotenos (Amarillo claro) y Xantofilas (amarillo anaranjado).

II.

Fundamento terico
Qu son los pigmentos?

Si es posible encontrar en el reino vegetal todos los matices y combinaciones de colores del espectro, existe un predominio general de los colores primarios: verde, amarillo, rojo, azul. Estos colores son conferidos a los vegetales por determinados compuestos qumicos definidos, llamados pigmentos. El color particular que presenta un determinado rgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro o la combinacin de ellos. Se debe tener claro que cuando un vegetal presenta un color blanco, es debido a la falta de tales pigmentos. La luz solar que incide sobre ellas no es absorbida selectivamente como ocurre en las partes coloreadas, sino que es transmitida o reflejada prcticamente sin sufrir modificacin. Las Clorofilas. El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es debido a la presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila a y clorofila b . Se encuentran prcticamente en todas las plantas con semilla, helechos, musgos y algas. Pueden formarse en las races, tallos, hojas y frutos a condicin de que estos rganos estn situados por encima del suelo y queden expuestos a la luz. Tambin aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen las otras sustancias colorantes de estas, puede comprobarse incluso all la presencia de las clorofilas, que estaban enmascaradas por los dems pigmentos. Estos pigmentos se encuentran en el interior de las clulas vegetales especficamente en una organera llamada cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plsmidos que contienen pigmentos cloroflicos. Los compuestos cloroflicos estn ligados qumicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado coloidal. Asociados con las clorofilas, existen tambin en los cloroplastos dos clases de pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son los xantofilas y carotenoides.

Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separacin cuando una solucin de las mismas asciende por capilaridad a travs de una tira de papel poroso (papel de cromatografa o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una pelcula de un disolvente orgnico (etanol), ya que las ms solubles se desplazarn a mayor velocidad, pues acompaarn fcilmente al disolvente a medida que ste asciende Aparecern, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o ms, dependiendo del material utilizado) que estarn ms o menos alejados de la disolucin alcohlica segn la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseern diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolucin.

III.

Objetivos

Separar los distintos pigmentos vegetales por medio de la cromatografa.

IV. Materiales y Procedimiento 4.1. Materiales Material biolgico Hoja de geranio Tomate y papa Maz, frejol corcho Material De Laboratorio Bistur Alcohol acetona Azul de metilo Laminas y laminillas

4.2.

Procedimiento

A. Comprobacin de las celdillas de las clulas muertas. Hacer un preparado en fresco, con un corte transversal fino de corcho. B. Observacin de las clulas vegetales. Extraer una fina catafilo de cebolla. Colocar en una lmina porta objetos y agregar 3 gotas de alcohol. Lavar y colocar colorante (azul de metilo) x3 min. Lavar y secar ; llevar al microscopio objetivo: 40x ocular: 10x

C. Morfologa Celular C.1. Clulas isodiometricas Hacer un preparado en fresco, con un corte transversal fino de Peciolo de geranio. Observar : Objetivo: 40x Ocular: C.2. Clulas alargadas Hacer un corte transversal de la hoja de geranio. Hacer un preparado en fresco. Observar: Objetivo: 40x Ocular: C.3. Clulas Irregulares Hacer un Preparado en fresco, con una epidermis de Hoja de Geranio. Observar: : Objetivo: Ocular: D. Organodes Citoplasmticos D.1. Observacin de Cloroplastos E. Observacin de inclusiones citoplasmticas E.1. Observacin de carotenos Hacer un preparado en fresco de la pulpa de tomate. Observar : Objetivo: 40x (Variar) Ocular: E.2. Observacin del Almidn Hacer un preparado en fresco, colocando muestras de papa, maz, frejol (cortados en forma transversal, fino) 10x 40x 10x 10x 10x

Observar :

Objetivo: Ocular:

40x (Variar) 10x

V.

Resultados y anlisis

A. Celdillas de Corcho

Resultados del corte transversal fino de corcho.

B. Observacin de Clulas Vegetales

Resultados del catafilo de la cebolla, se observan las clulas (pared celular y

ncleo), con el colorante bsico de Azul de metilo.

C. Morfologa Celular
C.1

Clulas isodimetricas

Peciolo de geranio.

C.2. Clulas Alargadas

Observacin de Tricomas De Geranio, clulas alargadas.

C.3. Clulas Irregulares

Parnquima especializa, Hoja de geranio cortada de manera transversal.

D. Organoides citoplasmticos Observacin de cloroplastos

Clorofila A Color verde, cloroplastos.

Clorofila B color verde oscuro.

E. Observacin de Inclusiones citoplasmticas E.1. Observacin de carotenos

Cromoplastos o carotenos. E.2. Observacin del almidn Maz

Frejol

Papa

VI.

Conclusiones

El pigmento mayoritario en el extracto es la clorofila a y b. Tambin existen otros pigmentos como el amarillo (xantofila) y anaranjados (carotenos). Esto pigmentos se encuentran normalmente ocultos por la abundancia de la clorofila. Estos pigmentos actan como accesorios, ayudando a la clorofila en la captacin de la luz.

VII. Bibliografa
Dawes C. 1989. Botnica General. editorial Limusa. Mxico. 209 pp. Jensen W. y F. Salisbury. Botnica. Mc Graw Hill. 762 pp. Informe del Ing. Agr. Carlos Gonzlez Fuentes de Informacin Direcciones Internet: Lecciones hipertextuales de botnica http://www.unex.es/botanica/presenta.htm Fotosntesis http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/fotosint.htm Cromatografa y pigmentos http://www.arrakis.es/rfluengo/pigmentosprc.html Laboratorio de cromatografa http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Biologia/tecnica s/separaciones_cromatograficas.htm http://www.monografias.com/trabajos76/pigmento-captan-luz-solarfotosintesis/pigmento-captan-luz-solar-fotosintesis2.shtml#ixzz2XjpJJRqU