Universidad Nacional de Ingeniera

Facultad de Ingeniera Ambiental

CRE CIMIE NTO, NUTRICIN Y ME T AB OL IS MO B ACTE RIANO

P rof. Alejandro Mendoza R ojas

Introduccin

Qu utilidad tiene conocer las condiciones que un microorganismos requiere para crecer?
Cultivo

# Obtenerlo en el laboratorio

# Combatirlo o evitar su proliferacin

Introduccin

Nutrientes esenciales o Bsicos

80 % de agua 20 % de peso seco:

Protenas cidos Nucleicos

P olisacridos
Lpidos P eptidoglucano

Asimilables por simple difusin o por transporte activo Agua Fuentes de Carbono Compuestos de nitrgeno Fsforo (fosfatos inorgnicos)

Otros compuestos de

peso molecular mas bajo

Introduccin
Biosntesis: Ingreso de substancias para transformarse en compuestos estructurales

Otros nutrientes
Iones potasio Iones Magnesio Factores de Crecimiento u orgnicos

Vitaminas Aminocidos

Oligoelementos
Hierro Cobre Cobalto

Nutrientes

Substancias necesarias para asegurar supervivencia. Proveen energa y elementos necesarios para sntesis de estructuras celulares. Ingreso por absorcin. Viabilidad: capacidad de reproduccin.

F actores E s timulantes

Influyen en el proces o de crecim iento. No s on im pres cindibles . E n pres encia de factores es timulantes crecen m as rpido y m ejor.

Categoras Nutritivas

F uente de Carbono
Carbono inorgnico: dixido de carbono auttrofas o littrofas Carbono orgnico: Hetertrofas u organtrofas

F uente de E nerga

F ottrofas Quimitrofas: energa suministrada por ATP

Categoras Nu tritivas

Categoras Nutritivas

Crecimiento Bacteriano

Aumento de nmero (no de tamao) Multiplicacin bacteriana: fisin simple o binaria

E longacin Auto duplicacin de ADN cromosmico T abicado central Invaginacin membrana celular Sntesis de pared

Tiempo de generacin

Tiempo necesario para la duplicacin celular Distintiva de cada especie Puede influirse por factores estimulantes Varan de 20 minutos (E scherichia coli) hasta 24 horas

Curva de Crecimiento Bacteriano

Bacteria en medio adecuado Grfico de coordenadas: nmero de bacterias (logaritmo) versus lapso de tiempo.
Distinta para cada bacteria

En todas se identifican cuatro etapas

Fase de Latencia

E l nmero de microorganismos no vara Adaptacin al medio, produccin de enzimas Tiempo variable: entre una hora a das. T amao relativo aumentado por divisin

Fase exponencial o de crecimiento logartmico

R elacin casi lineal entre el tiempo y el nmero de elementos. Actividad metablica incrementada Depende del tiempo de generacin de cada bacteria Los antimicrobianos son mas activos Puede haber variaciones entre el crecimiento in vitro e in vivo.

F ase E stacionaria

E n determinado punto el crecimiento disminuye La poblacin no aumenta Clulas nuevas reemplazan a las clulas muertas Actividad metablica mas lenta Clulas en animacin suspendida Produccin de metabolitos secundarios

Antibioticos T oxinas

Fase de E sporogenesis para las especies productoras de esporas

Fase exponencial o de crecimiento logartmico

R elacin casi lineal entre el tiempo y el nmero de elementos. Actividad metablica incrementada Depende del tiempo de generacin de cada bacteria Los antimicrobianos son mas activos Puede haber variaciones entre el crecimiento in vitro e in vivo.

Fase E stacionaria

E n determinado punto el crecimiento disminuye La poblacin no aumenta Clulas nuevas reemplazan a las clulas muertas Actividad metablica mas lenta Clulas en animacin suspendida Produccin de metabolitos secundarios
Antibioticos T oxinas

Fase de E sporogenesis para las especies productoras de esporas

Fase de declinacin o muerte

R ecuento de clulas disminuye sensiblemente E l numero de clulas muertas supera al nmero de clulas vivas Acumulacin de productos txicos Disminucin de nutrientes Aparicin rpida : autolimitar diseminacin infecciones

T cnicas para determ inar el nm ero y viabilidad de las clulas

Contar al m icros copio el nm ero de clulas en un volum en conocido E s tablecer el nm ero de clulas por turbidim etria R ecuento de elem entos viables por cultivo (Unidad F orm adora de Colonias o UF C)

E fecto de la T emperatura

Mesfilos

T emperatura mnima de crecimiento T emperatura ptima de crecimiento T emperatura mxima de crecimiento

R ango de temperaturas: 25 40 C T emperatura ptima: 37 C 1 C Agentes que afectan al hombre y los animales

S icrfilos

R equieren bajas tem peraturas 15 20 C L a mnima puede s er muy baja B acterias en el fondo del mar y en los polos

T ermfilos

T oleran altas temperaturas T emperatura ptima: 55 C T emperatura mxima: 80 C o mas .

Condiciones de pH

pH : P otencial Hidrgeno. Va desde 0 a 14. pH < 6,5 cido pH > 7,5 bsico o alcalino pH 6,5 7,5 neutro Mas adecuado para crecimiento bacteriano Bacterias que crecen hasta pH 4 Acidfilas (P or ejemplo: L actobacillus) Vibrio cholerae : medio alcalino

P res in Os m tica

L os s olutos (s ales y azcares ) dis ueltos s e des plazan a zonas de m enor concentracin. E l agua s e des plaza a zonas de m ayor concentracin de s olutos Una pres in os m tica alta caus a prdida de agua y plas m lis is de la clula Halfilas : bacterias que toleran altas concentraciones s alinas Halfilas facultativas : toleran has ta un 2 % de s ales

Condiciones atm s fricas

P otencial de xido-reduccin o R edox (E h) R es piracin bacteriana : reacciones de xidoreduccin, en cadena E l aceptor final de electrones o hidrogeniones es variable

Aerobios

R equieren oxgeno, aceptor final de hidrgeno F orm acin de H2O y CO2 P roduccin de enzim a Catalas a : des doblam iento del P erxido de hidrgeno (H2O2) en H2O y oxgeno P rueba de Catalas a para diferenciar m icroroganis m os (S taph ylococcus de S treptococcus )

Anaerobios

Anaerobios obligados: no utilizan O2 Anaerobios moderados: toleran de un 2 a un 8 % de O2 Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un tiempo en presencia de O2 Anaerobios facultativos: aceptan indistintintamente una situacin u otra

Microaerfilos

R equieren bajas concentraciones de O2 para crecer Utilizan el O2 com o fuente de energa pero a concentraciones < 15 % S us ceptibles a radicales s uperxido E nzim a S uperxido Dis m utas a (S OD) : trans form a radicales s uperxido en H2O2 Capnofilas : des arrollan m ejor con concentraciones de CO2 elevadas L a cavidad oral pres enta todas es tas variantes L as es pecies capnfilas aum entan en pers onas con alteraciones periodontales

Control de Microorganism os

Muchos factores estimulantes del desarrollo bacteriano se usan para preservar alimentos:
Baja temperatura S almueras Dulces Salados Ahumados

Metabolismo Bacteriano

Conjunto de reacciones o transformaciones quimicas que tienen lugar en un microorganismo para mantener su viabilidad Procesos o reacciones Catablicas
Degradan nutrientes
Liberan energa

Procesos o reacciones Anablicas

Tienden a

unir molculas

R eacciones de sntesis que consumen energa

E nzimas

Catalizadores orgnicos que aceleran las reacciones qumicas por su presencia, controlados geneticamente Actan sobre un sustrato R eciben su nombre por el sustrato sobre el que actan (Lipasa = acta sobre lpidos) E nzimas de la respiracin : deshidrogenasas y oxidasas Protenas de gran tamao Protenas mas fraccin no proteica (cofactor)

E nzima

Holoenzima: protena (apoenzima) mas cofactor Coenzima : el cofactor es ion metalico o molecula orgnica compleja Grupo prostetico: cofactor unido fuertemente a apoenzima Constitutivas: preformadas en la clula Inducibles o adaptativas: se forma en condiciones ambientales especiales o en presencia de sustratos apropiados

E nzim as

E nzimas

E xoenzimas de tipo hidroltico: unin de agua a macromolculas , unidades pequeas (bloques estructurales . F acilitan penetracin pasiva, facilitada o activa a travs de pared y membrana P ara ingreso activo: actividad de permeasas

E nzim as

E ndoenzim as : bios intes is para form ar m acrom olculas (Anabolis m o) Mecanis m os de R epres in Vas anfiblicas : los productos generados en la degradacin de un elem ento s e aprovechan en la s ntes is de otros

Vas m etablicas m as conocidas

Gluclis is

Como consecuencia del metabolismo hay produccin de toxinas, vitaminas, antibiticos, compuestos de inters industrial (alcoholes)

Vas metablicas mas conocidas