Está en la página 1de 6

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

6ta PRCTICA Colimetria

Curso: Microbiologa pesquera

Alumna: Marilli Milagros Sosa Sarmiento

Profesora: Nancy Martinez Ordinola

Grupo: F*

Mesa: 1

Fecha de ejecucin: 23 mayo del 2011

Fecha de entrega: 1junio del 2011

2011

INTRODUCCION El desarrollo del ndice de bacterias coliformes totales y coliformes fecales en muestras de alimento. Organismos Coliformes totales: Son capaces de crecer aerbicamente en un rango de temperatura de 35 1C a 37 1C en un medio de cultivo liquido lactosado con produccin de cido y gas en un periodo de 48 horas. Estn constituidos por un grupo heterogneo y se aplica a todas aquellas bacterias semejantes a la Escherichia coli en su hbitat, morfologa y cultivo.

Organismos Coliformes fecales: Son aquellos capaces de crecer aerbicamente en Caldo EC con produccin de gas y turbidez en un periodo de 24 horas a una temperatura de 44 + 0.5C.

REVISION BIBLIOGRAFICA La utilizacin de ciertos grmenes del grupo E. arogenes como indicadores de contaminacin de origen fecal del agua y de alimentos en una practica establecida desde hace muchos aos. Primero se aplicaron en el agua, despus a la leche, a helados, a los moluscos bivalvos y otros alimentos. De forma independiente el cientfico Schardigeren Austria, en 1982 en Estados Unidos, dijo que las aguas potables deberan ser examinadas en busca de lo que mas tarde se llamara Eschericha coli.

E.coli y coliformes Principios, las investigaciones ecolgicas han puesto de manifiesto que E.coli , procede del intestino del hombre y de los intestinos de los animales de sangre caliente, si bien puede sobrevivir y aun multiplicarse en determinado substratos. Del origen fecal de E.coli, se concluye que si esta bacteria se encuentra en algn alimento ello indica que han tenido lugar una contaminacin de origen fecal y que, existe el riesgo de que hayan llegado al alimento en cuestin microorganismos patgenos de procedencia enterica.

La prueba de los coliformes Se utiliza 2 tipos de procedimientos para hacer la prueba de los coliformes. Mtodo del nmero ms probable (NMP) y el de filtracin a travs de una membrana (MF) El NMP, emplea medio de cultivo liquido en tubos de ensayo a los cuales se aaden las muestras de agua de bebidas El MF, la muestra de agua se pasa a travs de un filtro de membrana estril, que tiene las bacterias y luego el filtro se incuba en un medio de cultivo.

MATERIALES Y METODOS

1. NMP DE COLIFORMES TOTALES Materiales o o o o o o Tubos de ensayo Tubos durham Pipetas graduadas de 1.5 y 10 ml Incubadoras de 35+0.5 C Caldo laurel sulfato triptosa Caldo lactosa verde brillante bilis

Mtodos A. PRUEBA PRESUNTIVA o Sembrar 1ml de diluciones de la muestra por quintuplicado en caldo laurel sulfato triptosa. Incubar 37Cx 24H

B. PRUEBA CONFIRMATIVA o o Agitar cada tubo de caldo laurel sulfato triptosa de la prueba presuntiva Con el asa de kolle quemada y enfriada extraer una asada e inocular en los tubos de caldo lactosa verde brillante bilis. Incubar a 37CX24H

2. NMP DE COLIFORMES FECALES Materiales o o o o o o Tubos de ensayo Tubos dirham Pipetas graduadas de 1.5 y 10 ml Bao mara de 44.5+0.5C Caldo laurel sulfato triptosa Caldo escherichia coli

Mtodos B. PRUEBA CONFIRMATIVA o o Agitar los tubos de caldo lauril sulfato triptosa de la prueba presuntiva Con el asa de kolle transferir el inoculo desde el caldo lauril sulfato triptosa a los tubos con E.coli. incubar en bao mara 44.5C+0.2Cx24H

RESULTADOS Y DISCUSION

COLIFORMES TOTALES A. PRUEBA PRESUNTIVA o o o Presenta una reaccin positiva los 5 tubos de la dilucin 10-3 Presenta una reaccin positiva los 5 tubos de la dilucin 10-4 Presenta una reaccin positiva 4 tubos y una reaccin negativa 1tubo de la dilucin 10-5

B. PRUEBA CONFIRMATIVA o o o o luego de sacar de la incubadora los 11 tubos con caldo lactosa verde brillante bilis, se observ: los 5 tubos de la dilucin 10-3 todos presentan gas, reaccin positiva los 5 tubos de la dilucin 10-4 todos presentan gas, reaccin positiva 1 tubo de la dilucin 10-5 presenta gas, pero poca cantidad, reaccin positiva

En la prueba confirmativa se observo toda reaccin positiva pero con un grado menor otros con un grado mayor de burbujeo al que se puede decir que las diluciones 10-3,10-4,10-5. Presentan diversas formas de actuar con respecto a las diferentes diluciones en forma de cultivo de los coliformes totales.

COLIFORMES FECALES B. PRUEBA CONFIRMATIVA o o o o Luego de sacar del bao mara los 11 tubos con caldo E.coli, se observ: Los 5 tubos de la dilucin 10-3 todos presentan burbujeo, por lo tanto todos son reaccin positiva Los 5 tubos de la dilucin 10-4 4tubos presentan burbujeo, reaccin positiva y 1tubo no presenta burbujeo, reaccin negativa 1tubo de la dilucin 10-5 presenta burbujeo, reaccin positiva

En la prueba confirmativa tubo un resultado de las diluciones reaccin positiva. Pero la dilucin 10-4 4tubos reaccin positiva y reaccin negativa 1 tubo.

COLIFORMES TOTALES NMP/ g =32720 x 10-4/(100) =0.0327

COLIFORMES FECALES NMP/g =16902 x 10-4/(100) = 0.0169

CONCLUSIONES Podemos concluir con respecto a los objetivos antes relacionados que la determinacin de bacterias coliformes fecales y totales, pueden estar presentes tanto en los alimentos como en los sistemas de agua potable, ya que estos microorganismos se pueden transmitir a travs de las heces fecales ( E. coli). Hay crecimiento de microorganismos coliformes totales porque todos presentan reaccin positiva. Hay crecimiento de microorganismos coniformes fecales en la dilucin 10-3,10-5.hay crecimiento de microorganismos coliformes fecales en 4 tubos dilucin 10-4 y 1 tubo reaccin negativa no presenta crecimiento

RECOMENDACIONES Seguir el orden de los procedimientos en coliformes totales y coliformes fecales Observar con atencin las diluciones para saber si hubo burbujeo menor o mayor para detectar si es reaccin positiva o reaccin negativa no burbujeo

BIBLIOGRAFIA GARCIA, MONSES. Microbiologa de los alimentos. Pg.144-148. y otros J.M.J.A.Y. Microbiologa de los alimentos. Pg. 301-306. y otros. INN (Instituto Nacional de Normalizacin) Chile (1995). Aguas residuales Mtodos de Anlisis Parte 23: Determinacin de coliformes fecales en medio A-1. NCh 2313/23.Of 95. Santiago, Chile. ATLAS, RONALD M. Ecologa microbiana y microbiologa ambiental. Edicin: 4 ed. Madrid: pearson. 2002. 677 p. BROOCK. Biologa de los Microorganismos. Edicin: 10 ed. Mxico. 2002. 484 p.