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LA DCADA PRODIGIOSA DE LAS CLULAS TRONCALES (1998-2008) Y LA MEDICINA REGENERATIVA Juan-Ramn Lacadena1 RESUMEN En el presente trabajo se hace una

revisin de los progresos cientficos que se han llevado a cabo durante la dcada 1998-2008 relacionados con las clulas troncales y su posible aplicacin en la Medicina regenerativa. En el contexto global de la reprogramacin nuclear, se hace referencia a las clulas troncales embrionarias (clulas ES), clulas troncales adultas (clulas AS), clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS) y clulas troncales embrionarias obtenidas por transferencia nuclear (clulas ES-SCNT). Tambin se hace referencia a la tcnica de reprogramacin directa que permite transformar un tipo de clula diferenciada en otro sin pasar por la fase pluripotente. Se discuten los aspectos ticos generales relativos a la obtencin de las clulas troncales y su utilizacin en la Medicina regenerativa. PALABRAS CLAVE: Reprogramacin nuclear clulas troncales embrionarias clulas ES clulas troncales adultas clulas AS clulas troncales pluripotentes inducidas clulas iPS clulas troncales embrionarias clnicas clulas ES-SCNT transferencia nuclear reprogramacin directa medicina regenerativa aspectos ticos de las clulas troncales y su utilizacin. ABSTRACT In the present article, scientific progress on stem cells and their utilization in regenerative Medicine carried out during the 1998-2008s decade is reviewed. In a global context of nuclear reprogramming, references are made to embryo stem cells (ES cells), adult stem cells (AS cells), induced pluripotent stem cells (iPS cells) and embryo stem cells obtained by somatic cell nuclear transfer (ES-SCNT cells). Direct reprogramming which transform a differentiated cell into another type without passing through a pluripotent state is also analyzed. General ethical aspects of stem cell research and the utilization in regenerative Medicine are discussed. KEY WORDS: Nuclear reprogramming embryonic stem cells ES cells adult stem cells AS cells induced pluripotent stem cells iPS cells nuclear transfer embryo stem cells ES-SCNT cells direct reprogramming regenerative medicine ethical aspects of stem cell research and applications.

Profesor Emrito, Departamento de Gentica, Facultad de Biologa, Universidad Complutense de Madrid, Espaa. Magster en Biotica. E-mail: jrlgbucm@bio.ucm.es

LA DCADA PRODIGIOSA DE LAS CLULAS TRONCALES (1998-2008) Y LA MEDICINA REGENERATIVA2 Juan-Ramn Lacadena Profesor Emrito de la Universidad Complutense, Madrid, Espaa jrlgbucm@bio.ucm.es INTRODUCCIN: REPROGRAMACIN NUCLEAR Desde el punto de vista gentico, por reprogamacin nuclear se entiende el cambio en la expresin gnica de una clase de clula a otro tipo de clula no relacionada con ella. Como sealan Gurdon y Melton3, las primeras evidencias experimentales sobre reprogramacin se obtuvieron en las dcadas de los 50 y 60 del siglo pasado con los trabajos sobre clonacin en anfibios. A partir de ah habra que tener en cuenta las tcnicas de clonacin por transferencia nuclear de clulas somticas en mamferos (SCNT, somatic cell nuclear transfer), la fusin celular, las clulas troncales embrionarias y adultas, la induccin de pluripotencia por expresin gnica ectpica (clulas iPS, induced pluripotent stem cells) y la reprogramacin directa que permite transformar un tipo de clula diferenciada en otra sin pasar por la fase intermedia equivalente de una clula pluripotente. En el presente artculo se tratarn los aspectos cientficos y ticos de las diferentes tcnicas de reprogramacin nuclear y sus aplicaciones en la Medicina Regenerativa. I. CLULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA

En 1981, Martin J. Evans4 aisl y cultiv las clulas troncales pluripotentes embrionarias en el ratn, siendo galardonado por ello con el premio Nobel de Medicina o Fisiologa en 2007. Diecisiete aos despus de la investigacin de Evans, en 1998, James A. Thomson5 identific y cultiv las clulas troncales pluripotentes de los blastocistos humanos, iniciando lo que ya se conoce como la dcada prodigiosa de las clulas troncales.

El presente trabajo est basado en otros previos del autor de los que selecciono especialmente LACADENA, J.R., Clulas troncales y reprogramacin celular: una esperanza tica para la terapia celular del futuro? Moralia 31 (2008) 65-95. De hecho, el presente artculo supone una actualizacin de los datos a febrero de 2009 as como una actualizacin y reorganizacin del tema dentro de un contexto general de la reprogramacin nuclear y celular. Asimismo, el lector interesado puede consultar varios artculos sobre el tema de las clulas troncales y la clonacin humana en la pgina web del autor sobre Gentica y Biotica del Centro Nacional de Informacin y Comunicacin Educativa, Ministerio de Educacin y Ciencia (http://w3.cnice.mec.es/tematicas/genetica).
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J.B. GURDON D.A. MELTON, Nuclear reprogramming in cells: Science 322 (2008) 1811-

1815.

M.J. EVANS M.H. KAUFMAN, Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos: Nature 292 (1981):154-156. J.A. THOMSON J. ITSKOVITZ-ELDOR S.S. SHAPIRO M.A. WAKNITZ J.J. SWIERGIEL V.S. MARSHALL J.M. JONES, Embryonic stem cells derived from human blastocystes: Science 282 (1998) 1145-1147.
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La terapia celular, basada en la transferencia de clulas o tejidos a los tejidos u rganos daados, es una de las grandes esperanzas de la Medicina Regenerativa del futuro. El establecimiento de cultivos celulares de tejidos humanos en el laboratorio es a veces difcil y en determinados casos, hasta ahora, incluso imposible. Por ello, desde el punto de vista clnico es innegable el avance que supondra la posibilidad de poner a punto tcnicas que permitieran obtener cualquier tipo de cultivos de tejidos y, acaso en un futuro ms lejano, de rganos. En este contexto, no cabe duda que el uso de las clulas troncales. o clulas madre puede resultar fundamental. Aunque en el lenguaje comn est muy extendido el uso del trmino clula madre yo prefiero utilizar el de clula troncal como cientficamente ms correcto habida cuenta que su origen procede del alemn stammzelle (Haeckel, 1868) y su traduccin inglesa stem cell (Wilson, 1896) cuyo significado cientfico en espaol es clula troncal, en el sentido biolgico de que del tronco (la clula indiferenciada) salen las ramas (las clulas diferenciadas que han de formar los diferentes tejidos). Originalmente, Haeckel (1868) utiliz por vez primera el trmino stammzelle con un significado evolutivo para describir el organismo unicelular del cual evolucionaron todos los organismos multicelulares (lo que hoy da se conoce como progenote). Tambin se utiliz en un contexto embriolgico de desarrollo (Hcker, 1892) y en el contexto de la hematopoyesis (Pappenheim, 1905) (ver Ramalho-Santos y Willenbring, 20076). Por clula troncal se entiende cualquier clula indiferenciada que tiene la doble capacidad de dividirse de forma ilimitada y, en un cierto momento, diferenciarse dando lugar a diferentes tipos de clulas especializadas. De acuerdo con esta segunda capacidad, las clulas troncales pueden ser totipotentes, pluripotentes y multipotentes en razn a su mayor o menor versatilidad o potencialidad, tal como se definen a continuacin: Clula totipotente: Clula troncal que tiene la capacidad de diferenciarse en el embrin y en tejidos y membranas extraembrinicas. Las clulas totipotentes contribuyen a todos los tipos celulares de un organismo adulto. La totipotencia es la capacidad funcional de una clula de dar lugar a un individuo completo tras un proceso de desarrollo normal. Las clulas totipotentes de un embrin muy temprano tienen la capacidad de diferenciarse en membranas y tejidos extraembrinicos, en el embrin y en todos los tejidos y rganos postembrinicos. En el embrin humano, parece ser que solamente son totipotentes los blastmeros hasta el estadio de mrula de 16 clulas. Clula pluripotente: Clula troncal presente en los estadios tempranos de desarrollo embrionario (blastocisto) que puede generar todos los tipos de clulas en el feto y en el adulto y es capaz de autorrenovacin. Las clulas pluripotentes, sin embargo, no son capaces de desarrollarse en un organismo completo. La pluripotencia es la capacidad funcional de una clula de dar lugar a varios linajes celulares o tejidos diferentes. Las clulas troncales embrionarias (ES) presentes en la masa celular interna (MCI) del blastocisto humano son pluripotentes, pero no totipotentes; es decir, pueden originar distintos tejidos u rganos pero no dar lugar al desarrollo completo de un embrin porque no
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M. RAMALHO-SANTOS H. WILLENBRING, On the origin of the term stem cell: Cell Stem Cell 1 (2007) 35-38.

pueden producir las membranas y tejidos extraembrinicos necesarios para el proceso de gestacin. No obstante, podra ocurrir que una clula pluripotente de la masa celular interna se convirtiera en totipotente. Clula multipotente: Clula troncal presente en los tejidos u rganos adultos que tiene una capacidad limitada de reactivar su programa gentico como respuesta a determinados estmulos que le permiten dar lugar a algunos, pero no todos, los linajes celulares diferenciados. La multipotencia es la capacidad funcional de una clula de dar lugar a alguno, pero no todos, los linajes celulares. Algunas clulas troncales presentes en tejidos u rganos adultos son multipotentes. A veces se utiliza el trmino plasticidad como equivalente a multipotencia.

Hay varias clases de clulas troncales (embrionarias, adultas, pluripotentes inducidas) cuya eficacia en el establecimiento de cultivos de tejidos en el laboratorio y sus valoraciones ticas y jurdicas son diferentes. Para una mejor comprensin global por parte del lector, se resumen a continuacin las distintas aproximaciones al problema que se van a tratar en este trabajo en cuanto se refiere a los diferentes tipos de clulas troncales (Cuadro 1) o de posibles aplicaciones clnicas (Cuadro 2): Cuadro 1. Diferentes clases de clulas troncales
(Se indican los principales autores responsables de la investigacin y las fechas en las que se hicieron los primeros experimentos fundamentales)

Clulas troncales embrionarias pluripotentes (clulas ES, embryo stem): ratn (Evans, 19817), humano (Thomson, 19988) Cluas troncales embrionarias pluripotentes a partir de un solo blastmero, sin destruccin del embrin: ratn (Lanza, 20069), humano (Lanza, 200610) Clulas troncales adultas multipotentes (clulas AS, adult stem): ratn (Vescovi, 199611 ; Mezey, 200012; Anversa, 200113; Verfaillie, 200214)

M.J. EVANS M.H. KAUFMAN, Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos: Nature 292 (1981) 154-156. 8 J.A. THOMSON J. ITSKOVITZ-ELDOR S.S. SHAPIRO M.A. WAKNITZ J.J. SWIERGIEL V.S. MARSHALL J.M. JONES, Embryonic stem cells derived from human blastocystes: Science 282 (1998) 1145-1147. Y. CHUNG I. KLIMANSKAYA S. BECKER J. MARH S-J. LU J. JOHNSON L. MEISNER R. LANZA, Embryonic and extraembryonic stem cell lines derived from single mouse blastomeres. Nature 439 (2006) 216-219. I. KLIMANSKAYA Y. CHUNG S. BECKER S-J. LU R. LANZA, Human embryonic stem cell lines derived from single blastomeres: Nature 444 (2006) 481-485. C.R.R. BJORNSON - R.L. RIETZE B.A. REYNOLDS M.C. MAGLI A.L. VESCOVI, Turning brain into blood: A hematopoietic fate adopted by adult neural stem cells in vivo: Science 283 (1999) 534-537. E. MEZEY K.J. CHANDROSS G. HARTA R.K. MAKI S.R. McKERCHER, Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens generated in vivo from bone marrow: Science 290 (2000) 1779-1782. D. ORLIC J. KAJSTURA S. CLIMENTI I. JAKONIOUK S.M. ANDERSON B. LI J. PICKEL R. McKAY B. NADAL-GINARD D.M. BODINE A. LERI P. ANVERSA, Bone marrow cells regenerate infarted myocardium: Nature 410 (2001) 701-705
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Clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS, induced pluripotent stem): ratn (Yamanaka, 200615, 200816; Jaenisch, 200717, 200918, Schler, 200919; Blasco, 200920), humano (Yamanaka, 200721; Thomson, 200722; Park, 200823; Jaenisch, 200824, 200918; Lowry, 200825; Izpisa Belmonte, 200826; Melton, 200827)

Y. JIANG B.N. JAHAGIRDAR R.L. REINHARDT R.E. SCHWARTYZ C.D. KEENE X.R. ORTIZ-GONZALEZ M. REYES T. LENVIK T. LUND M. BLACKSTAD J. DU S. ALDRICH A. LISBERG W.C. LOW D.A. LARGAESPADA C.M. VERFAILLIE, Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow: Nature 418 (2002) 41-49. K. TAKAHASHI S. YAMANAKA, Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors: Cell 126 (2006) 663-676. K. OKITA M. NAKAWAGA H. HYENJONG T. ICHISAKA S. YAMANAKA, Generation of mouse induced pluripotent stem cells without viral vectors: Science 322 (2008) 949-953. N. MAHERALI R. SRIDHARAN W. XIE J. UTIKAL S. EMINLI K. ARNOLD M. STADTFELD R. YACHENKO J. TC HIEU R- JAENISCH K. PLATH K. HOCHEDLINGER, Directly reprogrammed fibroblasts show global epigenetic remodelling and widespread tissue contribution: Cell Stem Cell 1 (2007) 55-70. M. WERNING A. MEISSNER R. FOREMAN T. BRAMBRINK M. KU K. HOCHEDLINGER B.E. BERNSTEIN R. JAENISCH, In vitro reprogramming of fibroblasts into a pluripotent ES-cell-like state: Nature 448 (2007) 318-324. J. HANNA M. WERNING S. MARKOULAKI CH-W. SUN A. MEISSNER J.P. CASSADI C. BEARD T. BRAMBRINKT L-CH. WU T.M. TOWNES R. JAENISCH, Treatment of sickle cell anemia mouse model with iPS cells generated from autologous skin: Science 318 (2007) 1920-1923. B.W. CAREY S. MARKOULAKI J. HANNA K. SAHA Q. GAO M. MITALIPOVA R. JAENISCH, Reprogramming of murine and human and somatic cells using a single polycistronic vector: Proc Nat Acad Sci 106 (2009):157-162. J.B. KIM V. SEBASTIANO G. WU M.J. ARAZO-BRAVO P. SASSE L. GENTILE K. KO D. RUAU M. EHRICH D. van den BOOM J. MEYER K. HBNER C. BERNEMANN C. ORTMEIER M. ZENKE B.K. FLEISCHMANN H. ZAEHRES - H.R SCHLER, Oct4-induced pluripotency in adult neural stem cells: Cell 136 (2009) 411-419 . R.M. MARION K. STRATI H. LI A. TEJERA S. SCHOEFTNER S. ORTEGA M. SERRANO M.A. BLASCO, Telomeres acquire embryonic stem cells characteristics in induced pluripotent stem cells: Cell Stem Cell 4 (2009) 141-154. K. TAKAHASHI K. TANABE M. OHNUKI M. NARITA T. ICHISAKA K. TOMODA S. YAMANAKA, Induction of pluripotent cells from adult human fibroblasts by defined factors: Cell 131 (2007) 1-12. J. YU M.A. VODYANIK K. SMUGA-OTTO J. ANTOSIEWICZ-BOURGET J.L. FRANE S. TIAN J. NIE G.A. JONSDOTTIR V. RUOTTI R. STEWART I.I. SLUKVIN J.A. THOMSON, Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells: Science 318 (2007) 1917-1920. I.H. PARK R. ZHAO J.A. WEST A. YABUUCHI H. HUO T.A. INCE P.H. LEROU M.W. LENSCH G.Q. DALEY, Reprogramming of human somatic cells to pluripotency with defined factors: Nature 451 (2008) 141-146. R. JAENISCH R. YOUNG, Stem cells, the molecular circuitry of pluripotency and nuiclear reprogrammimg: Cell 132 (2008) 567-582. W.E. LOWRY L. RICHTER R. YACHECHKO A.D. PYLE J. TCHIEU R. SRIDHARAN A.T. CLARK K. PLATH, Generation of human induced pluripotent stem cells from dermal fibroblasts: Proc Natl Acad Sci 105 (2008) 2883-2888. T. AASEN A. RAYA M.J. BARRERO E. GARRETA A. CONSIGLIO F. GONZLEZ R. VASSENA J. BILIC V. PEKARIK G. TISCORNIA M. EDEL S. BOU J.C. IZPISA BELMONTE, Efficient and rapid generation of induced pluripotent tem cells from human keratinocytes: Nature Biotechnology 26 (2008) 1276-1278.
26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15

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Aplicaciones teraputicas en ratn (anemia falciforme HbS, Jaenisch, 200717; hemofilia A, Ward y Ma, 200928) y en humano (esclerosis lateral amiotrfica, ELA, Eggan, 200829; distrofia muscular y enfermedad de Huntington, Park., 200830; atrofia muscular espinal, AME, Svendsen, 200931) Reprogramacin directa: transformacin de una clula diferenciada adulta en otra de otro tipo sin pasar por un estadio intermedio de reversin troncal pluripotente (Melton, 200832). Aplicacin teraputica: transformacin de clulas exocrinas de pncreas en clulas beta pancreticas (islotes de Langerhans) productoras de insulina en ratones adultos diabticos Clulas troncales embrionarias clnicas (embrin somtico, embrin SCNT, somatic cell nuclear transfer): primates no humanos, macaco rhesus (Mitalipov, 200733), humano (blastocistos SCNT) (French, 200834) Clulas troncales embrionarias partenogenticas: primates no humanos, macaco (Macaca fascicularis) (Cibelli y Lanza, 200235)

Para una mejor comprensin de la posible aplicacin clnica de las clulas troncales, se resumen en el Cuadro 2 las tcnicas utilizables segn se trate de transferencia celular heterloga (con posibles rechazos inmunolgicos) o autloga, con transferencia al propio paciente y, por tanto, sin rechazo inmunolgico:
D. HUANGFU K. OSAFUNE R. MAEHR W. GO A. EIJKELENBOOM S. CHEN W. MUHLESTEIN D.A. MELTON, Induction of pluripotent stem cells from primary human fibroblasts with only Oct4 and Sox2: Nature Biotechnology 26 (2008) 1269-1275. D. XU Z. ALIPIO L.M. FINK D.M. ADCOCK J. YANG D.C. WARD Y. MA, Phenotypic correction of murine hemophilia A using an iPS cell-based therapy: Proc Nat Acad Sci 106 (2009) 808-813. J.T. DIMOS K.T. RODOLFA K.K. NIAKAN L.M. WEISENTHAL H. MITSUMOTO W. CHUNG G.F. CROFT G. SAPHIER R. LEIBEL R. GOLAND H. WICHTERLE C.E. HENDERSON K. EGGAN, Induced pluripotent stem cells generated from patients with ALS can be differentiated into motor neurons: Science 321 (2008) 1218-1221.
30 31 29 28 27

I.H. PARK et al., Disease-specific induced pluripotent stem cells: Cell 134 (2008) 877-886.

A.D. EBERT J. YU F.F. ROSE Jr V.B. MATTIS C.L. LORSON J.A. THOMSON C.N. SVENDSEN, Induced pluripotent stem cells from a spinal muscular atrophy patient: Nature 457 (2009) 277-281. Q. ZHOU J. BROWN A. KANAREK J. RAJAGOPAL D.A. MELTON, In vivo reprogramming of adult pancreatic exocrine cells to -cells: Nature 455 (2008) 627-632. J.A. BYRNE D.A. PEDERSEN L.L. CLEPPER M. NELSON W.G. SANGER S. GOKHALE D.P. WOLF S.M. MITALIPOV, Producing primate embryonic stem cells by somatic cell nuclear transfer: 2007 Nature (2007) DOI:10.1038/nature 06357. A. J. FRENCH C.A. ADAMS L.S. ANDERSON J.R. KITCHEN M.R. HUGHES S.H. WOOD, Development of human cloned blastocysts following somatic cell transfer (SCNT) with adult fibroblasts: Stem Cells on line (2008). DOI: 10.1634/stem.cells 2007-0252. 35 J.B. CIBELLI K.A. GRANT K.B. CHAPMAN K. CUNNIFF T. WORST H.L. GREEN S.J. WALKER P.H. GUTIN L. VILNER V. TABAR T. DOMINKO J. KANE P.J. WETTSTEIN R.P. LANZA L. STUDER K.E. VRANA M.D. WEST, Parthenogenetic stem cells in nonhuman primates: Science 295 (2002) 819.
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Cuadro 2. Aplicacin clnica en la terapia celular Aproximacin clnica Transferencia celular heterloga Clulas ES de embriones obtenidos por FIV (sobrantes de tcnicas de reproduccin asistida o producidos ex profeso) Clulas AS de donante (transplante, diagnstico gentico preimplantacional histocompatible: seleccin de embriones con fines teraputicos) Transferencia celular autloga Clulas AS del paciente Clulas iPS del paciente Reprogramacin directa Clonacin teraputica (embrin somtico)

II.

CLULAS TRONCALES EMBRIONARIAS (CLULAS ES, EMBRYONIC STEM CELLS) Es evidente la posible utilizacin de las clulas ES en Medicina como terapia celular directa o como productoras de cultivos de tejidos in vitro para sustituir in situ los tejidos u rganos daados. En el organismo humano adulto se estima que existen algo ms de 200 tipos de clulas diferentes cuyo origen se puede retrotraer a las clulas troncales pluripotentes indiferenciadas presentes en la masa celular interna (MCI) del embrin en su fase de blastocisto. La cuestin cientfica est en llegar a conocer cules son las instrucciones por las que una clula pluripotente indiferenciada se diferencia hacia un determinado tipo celular. De dnde pueden obtenerse las clulas ES?, esencialmente de tres fuentes: 1) 2) 3) de la MCI de embriones producidos por FIV con el nico propsito de obtener cultivos de tejidos; de la MCI de embriones sobrantes de programas de FIV; de la MCI de embriones somticos obtenidos por tcnicas de clonacin mediante transferencia de ncleos: mtodo idneo para evitar el rechazo inmunolgico del trasplante al facilitar un posible autotrasplante. Este sera el caso de la aplicacin de la tcnica de transferencia nuclear a la clonacin no reproductiva con fines teraputicos. Se trata, por tanto, de transferir el ncleo de una clula somtica diferenciada al citoplasma de un ovocito previamente enucleado, convirtindolo as en el equivalente de un cigoto que puede iniciar un proceso de desarrollo embrionario normal. Sin embargo, el destino de este embrin no es el de ser transferido al tero de una mujer para dar lugar tras la

gestacin al nacimiento de un individuo clnico de la persona a quien perteneciera la clula somtica donadora del ncleo, sino el de mantenerlo en el laboratorio durante un tiempo mximo de catorce das a partir del momento de la transferencia del ncleo y utilizar sus clulas troncales pluripotentes para tratar de establecer en el laboratorio determinados cultivos de tejidos u rganos (esto ltimo parece, hoy por hoy, ms difcil de conseguir). Es fcil imaginar lo que supondra para un paciente poder ser trasplantado con su propio tejido (u rgano si fuera posible), evitando cualquier problema de rechazo inmunolgico. Tal como he argumentado en otras ocasiones anteriores36, en mi opinin, la utilizacin de las clulas troncales embrionarias tiene una valoracin tica negativa por cuanto implica la destruccin de embriones humanos, sea cual sea su origen. Por ello, tuvo mucha resonancia en los medios de comunicacin el que, en 2006, el grupo de investigacin dirigido por el Dr. Robert Lanza37, de la compaa biotecnolgica Advanced Cell Technology (Worcester, Massachussets, USA) y la Universidad de Wisconsin, haca pblico un trabajo en el que demostraban que no era imprescindible destruir completamente un embrin de ratn para obtener clulas troncales. En dicho trabajo, Lanza y colaboradores describan la obtencin de lneas celulares estables a partir de clulas troncales derivadas de blastmeros individuales biopsiados de embriones de ratn en fase de 8 clulas38. En condiciones adecuadas, dichos blastmeros daban lugar a lneas celulares troncales estables y pluripotentes capaces de diferenciarse en clulas y tejidos de las tres capas germinales (endodermo, mesodermo y ectodermo), mientras que, por otro lado, los embriones biopsiados de siete clulas eran capaces de evolucionar en un proceso normal de gestacin cuando se transferan al tero de un ratn hembra. Es decir, haban logrado obtener clulas troncales embrionarias sin destruir el embrin de ratn. Hasta entonces, normalmente las clulas troncales embrionarias (clulas ES) se haban obtenido de la masa celular interna (MCI) de los blastocistos39 aunque, en

J.R. LACADENA, Clulas troncales humanas: ciencia y tica: Moralia 24 (2001) 425-468. J.R. LACADENA, Clulas troncales embrionarias humanas: Fines y medios, en J.J. FERRER J.L. MARTNEZ (eds.), Biotica: un dilogo plural. Homenaje a Javier Gafo Fernndez, S.J., Universidad Pontificia Comillas, Madrid (2002) 117-152. J.R. LACADENA, Experimentacin con embriones. El dilema tico de los embriones sobrantes, los embriones somticos y los embriones partenogenticos. En J.L. Martnez (ed.) Clulas troncales embrionarias: Aspectos cientficos, ticos y legales. Col. Dilemas ticos de la Medicina actual, vol. 17, Univ. Pontificia Comillas, madrid, Editorial Desclee de Brouwer, Bilbao (2003) 67-102. J.R. LACADENA, Clonacin teraputica humana en el horizonte cientfico, en C.M. ROMEO CASABONA (dir.) Investigacin con clulas troncales, Monografas Humanitas, 4 (2004) 43-54. J.R. LACADENA, Clonacin humana con fines teraputicos: del imperativo categrico al imperativo tecnolgica, en P.F. HOOFT (coord.) Biotica, Jurisprudencia Argentina, Nmero especial (2005) 50-61. Y. CHUNG I. KLIMANSKAYA S. BECKER J. MARH S-J. LU J. JOHNSON L. MEISNER R. LANZA, Embryonic and extraembryonic stem cell lines derived from single mouse blastomeres: Nature 439 (2006) 216-219. Este trabajo fue ampliamente comentado por el autor en su pgina web: J.R. LACADENA, Clulas troncales embrionarias sin destruccin de embriones viables: Aspectos cientficos y ticos: Pgina web sobre Gentica y Biotica http://w3.cnice.mec.es/tematicas/genetica (octubre, 2005) M.J. EVANS M.H. KAUFMAN, Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos: Nature (1981) 292:154-156. J.A. THOMSON J. ITSKOVITZ-ELDOR S.S. SHAPIRO M.A. WAKNITZ J.J. SWIERGIEL V.S. MARSHALL J.M. JONES, Embryonic stem cells derived
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algunos pocos casos, se han podido obtener tambin a partir de embriones en fases previas de divisin (por ejemplo, mrula) en especies diferentes: monos40, ratn41, bovinos42 y humanos43. Por eso, la investigacin de Lanza y colaboradores tuvo tanta repercusin mundial. De hecho, los propios investigadores y todos los expertos del mundo aceptaban que el experimento abra las puertas de la esperanza a que pudieran aplicarse las mismas tcnicas en embriones humanos, salvando el serio obstculo tico que supone la destruccin de embriones en la obtencin de las correspondientes clulas troncales embrionarias. Y as fue, en efecto: unos meses ms tarde, el 23 de agosto de 2006, la revista Nature publicaba en versin online los resultados experimentales obtenidos de nuevo por el grupo de Lanza44: la obtencin de lneas celulares troncales embrionarias humanas (clulas hES, por human embryo stem) derivadas a partir de blastmeros individuales. Los medios de comunicacin social echaron las campanas al vuelo con titulares de prensa como el siguiente: cientficos de EEUU logran clulas madre sin destruir los embriones, cuyo verdadero significado ser comentado posteriormente. El trabajo de Lanza y colaboradores45 constaba de una serie de 10 experimentos separados en los que obtuvieron clulas troncales embrionarias humanas (hES) a partir de blastmeros individuales. De un total de 91 blastmeros obtenidos de los 16 embriones utilizados en los 10 experimentos, se obtuvieron 19 masas celulares de crecimiento similar a clulas ES y solamente dos lneas celulares hSE estables. Estas dos lneas mantuvieron su capacidad de proliferacin indiferenciada durante ms de ocho meses, mostrando ambas un cariotipo normal (46,XX) as como los marcadores moleculares de pluripotencia (Oct-4, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81, nanog y fosfatasa alcalina). Las clulas conservaban la capacidad de formar derivados de las tres capas germinales embrionarias (mesodermo, ectodermo y endodermo) tanto in vitro como en teratomas. Al tener conocimiento de los resultados experimentales de Lanza y colaboradores, la comunidad cientfica ha lanzado el mensaje de que ya estaban resueltos los problemas ticos que de alguna manera empaaban el horizonte de la aplicacin de las clulas troncales embrionarias humanas en la Medicina Regenerativa del futuro porque podan obtenerse sin necesidad de destruir los embriones puesto que los embriones biopsiados pueden ser transferidos al tero de la mujer sin aparente
from human blastocystes: Science (1998) 282:1145-1147. R. LANZA et al. (eds.) Essentials of Stem Cell Biology, Elsevier/Academic, San Diego 2006. M.A. SUKOYAN et al., Embryonic stem cells derived from morulae, inner cell mass, and blastocysts of mink: comparisons of their pluripotencies: Mol. Reprod. Dev. 36 (1993)148-158. F. DELHAISE, F. et al., Establishment of an embryonic stem cell line from 8-cell stage mouse embryos: Eur. J. Morphol. 34 (1996) 237-243. M. MITALIPOVA Z. BEYHAN N.L. FIRST, Pluripotency of bovine embryonic cell line derived from precompacting embryos: Cloning 3 (2001) 59-67. N. STRELCHENKO, N. et al., Morula-derived human embryonic stem cells: Reprod. BioMed. 9 (2004) 623-629. I. KLIMANSKAYA Y. CHUNG S. BECKER S-J. LU R. LANZA, Human embryonic stem cell lines derived from single blastomeres: Nature online, DOI:10.1038/05142, 599 (23 Agosto 2006) Para ms detalles del experimento ver J.R. LACADENA, Clulas troncales embrionarias sin destruccin de embriones viables: Aspectos cientficos y ticos: Pgina web sobre Gentica y Biotica http://w3.cnice.mec.es/tematicas/genetica (octubre, 2005)
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prdida de viabilidad en comparacin con embriones a los que no se les ha extrado ningn blastmero. De hecho, en programas de Reproduccin Humana Asistida mediante FIV se viene utilizando la tcnica de diagnstico gentico preimplantacional (DGP) en la que se analizan las caractersticas genticas del embrin a partir de un blastmero separado de un embrin en estadio de unas pocas clulas. No obstante, desde el punto de vista tico podran plantearse algunas dudas: 1) En primer lugar, habra que cuestionar si los cuerpos embrioides en los que derivan los blastmeros a travs de las varias etapas de manipulacin realmente no pueden equipararse con los blastocistos normales; especialmente en aquellos casos en los que se forman clulas troncales embrionarias (ES) y extraembrionarias (ET). Cul es el estatuto de los blastmeros individuales de un embrin de 8- o 10-clulas? son totipotentes y, por tanto, potencialmente capaces de originar un ser humano? A pesar de que se ha venido aceptando en tiempos anteriores que los blastmeros humanos mantenan su totipotencia hasta el estadio embrionario de 16 clulas, aseguran Lanza y colaboradores46 que nunca se ha demostrado en mamferos que puedan generarse organismos completos a partir de blastmeros individuales procedentes de mrulas en estadio de 8- a 16-clulas. Si al blastmero aislado del embrin se le agregan clulas troncales embrionarias para que les sirven de estmulo, eso implica que se ha tenido que destruir previamente otro embrin. Y otro tanto habra que decir de las clulas troncales embrionarias que se utilizan como co-cultivo. La nica solucin sera realizar la estimulacin del blastmero humano y el co-cultivo con clulas embrionarias de ratn, pero no sabemos si sera un procedimiento igualmente eficaz. Por otro lado, parece que lo que se pretende es eliminar el uso de clulas no humanas en el proceso. Cul ser el destino del embrin resultante de 7 clulas? Realmente las parejas que se sometan a un programa de FIV desearn correr el riesgo de que se manipulen innecesariamente sus embriones si no iban a realizar el DGP? Quin solicitar la aplicacin de esta tcnica a pesar de que se ofrezca la posibilidad de que se pueda crear un banco de lneas celulares del propio hijo?

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En este contexto hay que sealar que, en enero de 2008, la Comisin de Seguimiento y Control de la Donacin y Utilizacin de Clulas y Tejidos Humanos del Ministerio Sanidad y Consumo de Espaa aprob, en aplicacin de la Ley 14/2007 de Investigacin biomdica, el primer proyecto de investigacin espaol para la obtencin de lneas celulares troncales embrionarias derivadas de simples blastmeros sin destruir el embrin. El proyecto est dirigido por el Dr. Carlos Simn, del Centro de Investigacin Prncipe Felipe de Valencia, en colaboracin con el propio Dr. Robert Lanza47.
I. KLIMANSKAYA Y. CHUNG S. BECKER S-J. LU R. LANZA, Human embryonic stem cell lines derived from single blastomeres: Nature 444 (2006) 481-485. Es importante sealar que, en mi opinin, desde el punto de vista jurdico espaol no est claro cmo encaja esta tcnica dentro de la Ley 14/2006 sobre tcnicas de reproduccin humana asistida puesto que no se trata de un diagnstico gentico preimplantacional (Art. 12) ni de una manipulacin que
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III. CLULAS TRONCALES ADULTAS En cualquier caso, hay que tener presente la noticia esperanzadora de que podra ser innecesaria la utilizacin de clulas troncales embrionarias si llegan a hacerse una realidad clnica los datos experimentales que vienen producindose ao tras ao que parecen indicar la posibilidad de establecer los cultivos de tejidos a partir de clulas troncales adultas (clulas AS, adult tem cells) presentes en los propios rganos adultos. Esto evitara cualquier problema tico puesto que la manipulacin slo afectara a las clulas somticas del organismo humano sin necesidad de crear un embrin. En 2001, los National Institutes of Health (NIH) de los Estados Unidos sealaban algunas caractersticas de las clulas AS48: Las clulas AS pueden proliferar sin diferenciarse durante un largo perodo de tiempo (caracterstica conocida como autorrenovacin a largo plazo), pudiendo dar lugar a clulas maduras con formas caractersticas y funciones especializadas. Algunas clulas AS tienen la capacidad de diferenciarse en otros tejidos diferentes a aqul del que proceden (multipotencia, plasticidad) Las clulas AS son raras, difciles de identificar y de origen desconocido. Los mtodos de caracterizacin estn basados en la determinacin de marcadores de superficie celular y sus patrones de diferenciacin in vitro. Se han obtenido clulas AS a partir de cerebro, mdula sea, sangre perifrica, pulpa dental, cuerda espinal, vasos sanguneos, msculo esqueltico, epitelios de la piel y del sistema digestivo, crnea, retina, hgado y pncreas y en tejido muscular y adiposo; es decir, se han encontrado clulas AS en tejidos derivados de las tres capas germinales embrinicas.

La primera evidencia cientfica de la multipotencia o plasticidad de las clulas AS la obtuvieron Vescovi y colaboradores49 al demostrar que tras la inyeccin de clulas troncales del tejido nervioso en la mdula sea aquellas se transformaban en clulas sanguneas. Casi dos aos despus, otro grupo de investigacin ratificaba el resultado anterior, pero en direccin contraria: clulas troncales hematopoyticas podan generar neuronas50. Pero la posible aplicacin clnica de estas tcnicas no lleg hasta 2001 en que el cardilogo Anversa y colaboradores, utilizando ratones, demostraron la posibilidad de regenerar tejido cardiaco infartado a partir de clulas troncales hematopoyticas51. Estos experimentos con modelos animales han sido aplicados en la clnica humana con resultados variables. Aunque durante la primera
favorezca teraputicamente al propio embrin (Art. 13) ni de la utilizacin de preembriones con fines de investigacin (Art. 15.1.d) que son las situaciones que contempla la ley. COMMITTEE ON THE BIOLOGICAL AND BIOMEDICAL APPLICATIONS OF STEM CELL RESEARCH, NATIONAL RESEARCH COUNCIL AND INSTITUTE OF MEDICINE. Stem Cells and the Future of Regenerative Medicine: National Academy Press, Washington D.C. (2001) C.R.R. BJORNSON - R.L. RIETZE B.A. REYNOLDS M.C. MAGLI A.L. VESCOVI, Turning brain into blood: A hematopoietic fate adopted by adult neural stem cells in vivo: Science 283 (1999) 534-537. E. MEZEY K.J. CHANDROSS G. HARTA R.K. MAKI S.R. McKERCHER, Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens generated in vivo from bone marrow: Science 290 (2000) 1779-1782. D. ORLIC J. KAJSTURA S. CLIMENTI I. JAKONIOUK S.M. ANDERSON B. LI J. PICKEL R. McKAY B. NADAL-GINARD D.M. BODINE A. LERI P. ANVERSA, Bone marrow cells regenerate infarted myocardium: Nature 410 (2001) 701-705
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mitad de 2002 haba ms dudas que certezas sobre la verdadera plasticidad de las clulas troncales AS52, sin embargo, el 4 de julio de 2002 se public en la revista Nature un artculo referente a clulas troncales adultas que merece un comentario especial por la repercusin que ha tenido en este campo cientfico. Se trata de la investigacin realizada por un grupo de investigadores de la Universidad de Minnesota, dirigidos por la Dra. Catherine M. Verfaillie, en la que se demostraba que clulas troncales adultas de ratn procedentes del mesnquima de la mdula sea (clulas MAPC, por mesenchymal adult pluripotent cell) tienen muchas de las caractersticas pluripotenciales de las clulas troncales embrionarias53: En la primera parte de la investigacin, se tomaron clulas del mesnquima de la mdula sea de ratn y se marcaron genticamente con un gen chivato que produce fluorescencia azul. Algunas de estas clulas (entre 1 y 12) se inyectaron en embriones tempranos, comprobndose que en algunos casos los individuos quimricos que se desarrollaron mostraban el marcador fluorescente hasta en un 45 % de sus tejidos, lo cual demuestra la versatilidad (pluripotencia) de las clulas troncales adultas originarias. En la segunda parte del experimento, Verfaillie y colaboradores inyectaron en un ratn adulto las clulas mesenquimales genticamente marcadas y 24 horas ms tarde comprobaron que estaban creciendo colonias de tales clulas en diversas partes del ratn, especialmente en intestino, pulmn e hgado. La importancia de las investigaciones con clulas troncales adultas se pone de manifiesto por los datos suministrados en 2009 por los NIH (National Institutes of Health) de los Estados Unidos (informacin obtenida el 26 de enero de 2009 en www.ClinicalTrials.gov) segn los cuales actualmente hay en el mundo un total de 2.307 ensayos clnicos actualmente en marcha frente a solamente 5 con clulas troncales embrionarias. Por ejemplo, en Estados Unidos hay 1.642 investigaciones con clulas AS y slo 2 con clulas ES y en Israel hay 54 de clulas AS y 2 de clulas ES, mientras que en Europa, Canad y Australia hay, respectivamente, 442, 135 y 76 investigaciones con clulas AS y ninguna con clulas ES. Sin embargo, es posible que con la entrada en el gobierno de los Estados Unidos de la Administracin Obama se incremente el nmero de investigaciones con clulas embrionarias. Ya la empresa Geron ha anunciado el inicio de una investigacin clnica para tratar de corregir lesiones irreversibles de mdula espinal utilizando clulas troncales embrionarias. Casi simultneamente, en el Reino Unido se ha autorizado otra investigacin con clulas ES para tratar casos de infarto cerebral mediante la inyeccin de las clulas ES directamente en el cerebro de los pacientes. En ambos casos se trata, sobre todo, de comprobar que el tratamiento con las clulas ES no induce la produccin de tumores (investigacin en fase I). En el contexto de las aplicaciones clnicas de las clulas troncales adultas podra decirse que el negocio de las clulas corre ms que la ciencia54. Esta cita hace referencia a que, junto a los bancos privados de cordn umbilical que existen ya desde
Ver la discusin en L. MONTOLIU, Clulas troncales humanas: aspectos cientficos, en J.L. MARTNEZ (ed), Clulas troncales humanas: Aspectos cientficos, ticos y jurdicos. Col. Dilemas ticos de la Medicina Actual, Universidad Pontificia Comillas, Madrid, Descle de Brouwer, Bilbao (2003) 23-62. 53 Y. JIANG B.N. JAHAGIRDAR R.L. REINHARDT R.E. SCHWARTYZ C.D. KEENE X.R. ORTIZ-GONZALEZ M. REYES T. LENVIK T. LUND M. BLACKSTAD J. DU S. ALDRICH A. LISBERG W.C. LOW D.A. LARGAESPADA C.M. VERFAILLIE, Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow: Nature (2002) 418:41-49
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J. PRATS, El negocio de las clulas corre ms que la ciencia: El Pas Digital (28 enero 2009)

hace aos, han surgido en diversas partes del mundo compaas que conservan tambin clulas troncales mesenquimales procedentes de dientes de leche (algn da, el Hada de los Dientes -equivalente anglosajn al Ratn Prez espaol- le podra salvar la vida a tus hijos, dice el anuncio comercial de la empresa norteamericana Bioden), de sangre menstrual (la empresa CElle utiliza como eslogan publicitario tu milagro mensual) o de grasa corporal para un eventual uso del donante cuando se desarrollen aplicaciones teraputicas. Como seala el artculo periodstico en palabras del Dr. Matesanz, director de la Organizacin Nacional de Trasplantes de Espaa, este fenmeno de guardar cada vez ms muestras biolgicas encaja en toda una filosofa de sociedad rica. En Espaa, se estima que unas 25.600 familias han guardado muestras de cordn umbilical aunque la mayora (25.000) han optado por bancos extranjeros para evitar la legislacin espaola que obliga a compartir, en su caso, las muestras con quien las necesite, de manera que slo unas 600 familias han optado por alguna de entre la docena de empresas privadas que existen. Adems, es importante poner de manifiesto que la gente normalmente no sabe que, en cifras estimativas, en el mundo se han realizado unos 8.000 trasplantes con clulas troncales de donante frente a solamente cuatro casos de autotrasplante. IV. LA REPROGRAMACIN CELULAR: CLULAS TRONCALES PLURIPOTENTES INDUCIDAS (iPS), UNA ESPERANZA TICA PARA EL FUTURO

Como sealaba anteriormente, la historia de la clulas troncales embrionarias empez en 1981 cuando Sir Martin J. Evans que, como se ha indicado anteriormente, fue galardonado con el Premio Nobel de Fisiologa o Medicina en 2007 logr aislarlas y cultivarlas a partir de embriones de ratn en fase de blastocisto55. Aos ms tarde, en 1998, el grupo dirigido por James A. Thomson, de la Universidad de WisconsinMadison, consigui aislar y mantener en cultivo clulas troncales embrionarias a partir de blastocistos humanos56, continuando de alguna manera lo que Evans haba logrado en ratones en 1981. Esta investigacin de Thomson supuso el inicio de una dcada prodigiosa de investigacin con clulas troncales (ver el Cuadro 1 presentado en el apartado I) que se ha transformado en una especie de alquimia celular. Pero no slo fue sta la contribucin de Thomson, sino que en 2007 la revista Science public un trabajo del grupo liderado por Thomson57 en el que demostraron haber logrado reprogramar clulas somticas adultas humanas (procedentes de prepucio de recin nacido y de piel de feto) y convertirlas en clulas troncales pluripotentes, introduciendo en ellas mediante un vector viral cuatro genes (Oct4, Sox2, Nanog y Lin28) que regulan la transcripcin (factores de transcripcin). Estas clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS, induced pluripotent stem cells) tienen cariotipo normal, expresan actividad telomerasa, expresan marcadores celulares de superficie y genes que caracterizan a las clulas troncales embrionarias (ES) y mantienen el
M.J. EVANS M.H. KAUFMAN, Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos: Nature 292 (1981) 154-156. J.A. THOMSON J. ITSKOVITZ-ELDOR S.S. SHAPIRO M.A. WAKNITZ J.J. SWIERGIEL V.S. MARSHALL J.M. JONES, Embryonic stem cells derived from human blastocystes: Science 282 (1998) 1145-1147. J. YU M.A. VODYANIK K. SMUGA-OTTO J. ANTOSIEWICZ-BOURGET J.L. FRANE S. TIAN J. NIE G.A. JONSDOTTIR V. RUOTTI R. STEWART I.I. SLUKVIN J.A. THOMSON, Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells: Science 318 (2007) 1917-1920.
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potencial de desarrollo para diferenciarse en clulas de las tres capas germinales primarias. La eficacia de la tcnica es de una clula iPS obtenida por cada 10.000 clulas tratadas que, en trminos prcticos, es muy alta. La publicacin del trabajo del grupo de Thomson fue simultnea con la del grupo de Shinya Yamanaka de la Universidad de Kyoto, Japn, en la revista Cell58. Utilizando como vector un retrovirus introdujeron en clulas somticas humanas (clulas de la piel de la cara de una mujer de 36 aos y de tejido conectivo sinovial de un varn de 69 aos) cuatro genes reguladores de la transcripcin (Oct3/4, Sox2, c-Myc y Klf4) con una eficacia de una clula troncal pluripotente inducida (iPS) obtenida por cada 5.000 clulas de piel utilizadas en el tratamiento. Por su parte, Izpisa Belmonte y colaboradores59 mostraron que la utilizacin de queratinocitos de cabello humano resultaba cien veces ms eficaz y era el doble de rpido que cuando se utilizaban fibroblastos. Recientemente, en febrero de 2009, Mara Blasco y colaboradores han demostrado que es necesaria la presencia de la actividad telomerasa en la obtencin de clulas iPS en ratn60. Es importante sealar que ya en 2006 Yamanaka61 haba logrado la reprogramacin de clulas somticas de piel en ratn utilizando los mismos cuatro genes, por lo que se le puede acreditar la paternidad de la tcnica62 que fue ratificada por el grupo de investigacin de Rudolf Jaenisch63 del Whitehead Institute for Biomedical Research y del MIT, Cambridge, Massachusetts, USA. Un poco ms tarde, en una acelerada carrera cientfica, el 6 de diciembre de 2007, el mismo grupo de Jaenisch hizo pblico en la revista Science el xito de la aplicacin en ratones de la tcnica de Yamanaka para el tratamiento de la anemia falciforme humana en un modelo de ratn utilizando clulas pluripotentes inducidas (iPS) mediante reprogramacin de clulas de la piel64. Posteriormente, en 2009, Ward y colaboradores65 lograron corregir
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64 63 62 61 60 59 58

tambin en ratones la hemofilia de tipo A (producida por mutacin del factor VIII) de manera que al inducir un corte en la cola de ratones inyectados en el hgado con clulas iPS no sufran daos mayores mientras que los ratones control no inyectados moran en pocas horas. Estas investigaciones suponen un paso adelante esperanzador en la posible utilizacin de clulas iPS en la terapia celular humana del futuro, obviando los problemas ticos de la manipulacin de embriones. Efectivamente, en 2008, Eggan y colaboradores66 lograron mediante la tcnica de induccin de clulas iPS generar in vitro a partir de fibroblastos de piel clulas nerviosas motoras en un paciente de 82 aos que padeca esclerosis lateral amiotrfica (ELA), que son precisamente las clulas daadas por la enfermedad. La tcnica consisti en introducir en los fibroblastos los genes Klf4, Sox2, Oct4 y c-Myc utilizando como vector un retrovirus. Tambin Park y colaboradores indujeron la obtencin de clulas iPS en casos de distrofia muscular y de la enfermedad de Huntington67. Posteriormente, en 2009, Svendsen y colaboradores68 obtuvieron clulas iPS a partir de fibroblastos de piel de un nio afecto de atrofia muscular espinal (AME), enfermedad autosmica recesiva que suele manifestarse a partir de los 6 meses de edad y que produce la muerte del paciente en torno a los dos aos. Las clulas iPS obtenidas generaban neuronas motoras defectuosas de manera que, como dicen los autores del trabajo, se pueden estudiar comparativamente con las clulas nerviosas homlogas producidas por la madre fenotpicamente sana del nio enfermo y poder as estudiar los mecanismos de la enfermedad. En la tcnica se utilizaron los genes Oct4, Sox2, Nanog y Lin28 que fueron introducidos en los fibroblastos utilizando como vector un lentivirus. Pensando en una futura aplicacin clnica de estas tcnicas hay que sealar dos inconvenientes: en primer lugar, la utilizacin de un retrovirus como vector para introducir los genes reguladores que reprograman las clulas somticas y, en segundo lugar, en el caso de Yamanaka, la utilizacin del proto-oncogn c-Myc, lo cual puede suponer un obstculo para lograr la autorizacin para llevar a cabo la investigacin clnica. De hecho, un 20% de los ratones implantados con clulas iPS desarrollaron teratomas cancerosos. Para obviar estas dificultades clnicas se han introducido algunas mejoras tcnicas: por ejemplo, Yamanaka y colaboradores69 han obtenido las clulas iPS sin utilizar vectores virales en ratones. Para ello utilizaron la transfeccin repetida de dos plsmidos de expresin en fibroblastos de embriones, uno era portador de los ADNc
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(ADN complementario) de Oct3/4, Sox2 y Klf4 y el otro del de c-Myc. En las clulas iPS obtenidas no se produjo la integracin del plsmido en el genoma, evitando la formacin de teratomas. Por su parte, Jaenisch y colaboradores70, con objeto de reducir el nmero de partculas virales necesarias para la reprogramacin y por tanto disminuir el peligro de la mutagnesis inducida por la integracin de ADN viral en el genoma, lograron que los cuatro factores de reprogramacin Oct4, Sox2, Klf4 y c-Myc pudieran ser expresados a partir de un nico promotor viral, generando clulas iPS tanto a partir de clulas embrionarias o adultas de ratn como a partir de queratinocitos humanos. Por otro lado, Melton y colaboradores71 obtuvieron clulas iPS a partir de fibroblastos humanos utilizando solamente los factores Oct4 y Sox2, evitando la presencia de los proto-oncogenes Klf4 y c-Myc y sus posibles efectos dainos. Incluso, ms tarde, Schler y colaboradores72 demostraron que la presencia nica del gen Oct4 bastaba para obtener clulas iPS (que denominan 1FiPS) a partir de clulas troncales neuronales de ratn adulto. La importancia del descubrimiento de la posibilidad de obtener clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS) por reprogramacin celular de clulas somticas adultas mereci ser seleccionado por la revista Science73 como el segundo de los diez descubrimientos cientficos ms importantes del ao 2007 y como el ms importante del ao 200874. Considera la revista que la obtencin de clulas iPS es el logro de una hazaa largamente buscada de alquimia celular: as como los antiguos alquimistas buscaban convertir metales vulgares en oro, los cientficos actuales han logrado convertir clulas humanas de la piel en clulas iPS, el equivalente biolgico del oro. V. REPROGRAMACIN DIRECTA Un nuevo paso conceptualmente diferente a la tcnica de induccin de clulas troncales pluripotentes (iPS) de Yamanaka y Thomson lo ha dado el grupo de Douglas A. Melton75 al reprogramar in vivo clulas adultas de ratn (clulas exocrinas del pncreas) transformndolas directamente (reprogramacin directa) en clulas beta pancreticas capaces de producir insulina (islotes de Langerhans). Las clulas obtenidas son indistinguibles de las clulas beta pancreticas endgenas, tanto en tamao como en su forma y estructura. Para ello, utilizaron como vector un adenovirus en el que se haban incorporado tres factores de transcripcin (Ngn3, Pdx1 y MafA) que el grupo de Melton haba identificado previamente como responsables de la diferenciacin de las clulas beta pancreticas. El experimento realizado con ratones in vivo mostr que las clulas beta obtenidas mejoraban sensiblemente la condicin de hiperglicemia de los
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ratones diabticos. No cabe duda que estos resultados son esperanzadores para tratar de curar en el futuro la enfermedad de la diabetes tipo 1 en humanos. La nueva tcnica de reprogramacin directa se salta el paso intermedio de las clulas iPS por el que la clula tratada se revierte al estado de maduracin de una clula para que sea pluripotente. Es evidente que se ha abierto un nuevo y esperanzador campo para la medicina regenerativa del futuro. Adems, como en el caso de la utilizacin de las clulas troncales adultas (AS) y las clulas troncales pluripotentes inducidas (iPS), se obvian los problemas ticos que plantea la utilizacin de las clulas troncales pluripotentes embrionarias (ES). VI. CLULAS TRONCALES EMBRIONARIAS CLNICAS OBTENIDAS POR TRANSFERENCIA NUCLEAR (NT) EN PRIMATES NO HUMANOS Y EN HUMANOS

La publicacin de las investigaciones sobre reprogramacin celular antes mencionadas oscureci en alguna medida la que una semana antes (el 14 de noviembre de 2007) haban hecho pblico Mitalipov y colaboradores, del Oregon National Primate Research Center, en la revista Nature online76 quienes obtuvieron dos lneas celulares troncales embrionarias de un primate no humano (un macho adulto de 9 aos de macaco rhesus, Macaca mulata) mediante la tcnica de transferencia nuclear de clulas somticas (SCNT). En principio lograron la formacin de 35 blastocistos clnicos a partir de 213 transferencias nucleares (un 16% de xito), obteniendo finalmente dos lneas celulares troncales embrionarias a partir de 304 ovocitos procedentes de 14 hembras. El xito logrado en un primate no humano como el macaco rhesus hizo albergar esperanzas sobre la posibilidad de tener xito tambin en la especie humana. Y as fue, en efecto, porque el siguiente paso en esta acelerada carrera cientfica se dio poco despus, el 17 de enero de 2008, cuando el grupo que lidera el Dr. Andrew J. French77, de la empresa privada norteamericana Stemagen Corporation, La Jolla, California, hizo pblico en la versin on line de la revista Stem Cells que haban obtenido mediante la tcnica de transferencia nuclear 5 blastocistos humanos clnicos que llegaron a alcanzar una fase de desarrollo de entre 40 y 72 clulas. Ellos utilizaron 29 ovocitos procedentes de 3 mujeres jvenes (20-24 aos) a los que se transfirieron los ncleos de fibroblastos de dos donantes varones adultos, obteniendo 21 embriones SCNT (por somatic cell nuclear transfer) de los que 5 alcanzaron la fase de blastocisto. De los 5 posibles blastocistos SCNT, slo en uno de ellos se demostr su verdadera condicin clnica por anlisis tanto del ADN nuclear como del ADN mitocondrial (ADNmt) mientras que en otros dos solamente se confirm el ADN nuclear. En ningn caso se pudieron obtener las lneas celulares troncales porque los blastocistos fueron destruidos para poder realizar los anlisis del ADN. Estos intentos de abrir las puertas a la clonacin teraputica humana puede que resulten innecesarios si llega a hacerse una realidad clnica la reprogramacin de clulas somticas adultas utilizando tcnicas de Yamanaka, Thomson y Jaenisch antes descritas.
J.A. BYRNE D.A. PEDERSEN L.L. CLEPPER M. NELSON W.G. SANGER S. GOKHALE D.P. WOLF S.M. MITALIPOV, Producing primate embryonic stem cells by somatic cell nuclear transfer: Nature (2007) DOI:10.1038/nature 06357. A. J. FRENCH C.A. ADAMS L.S. ANDERSON J.R. KITCHEN M.R. HUGHES S.H. WOOD, Development of human cloned blastocysts following somatic cell transfer (SCNT) with adult fibroblasts: Stem Cells (2008) DOI: 10.1634/stemcells.2007-0252.
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En este contexto cabe sealar que el Dr. Ian Wilmut, de la Universidad de Edimburgo y padre cientfico de la oveja Dolly, ya ha anunciado que abandona la investigacin en clonacin teraputica humana para pasarse a la utilizacin de la tcnica de reprogramacin celular de Yamanaka. Tambin Jos B. Cibelli, uno de los pioneros de la clonacin humana78, se ha manifestado a favor de la nueva tcnica de reprogramacin mientras que, por ejemplo en Espaa, otros cientficos siguen aferrndose a la investigacin con clulas troncales embrionarias como a un clavo ardiendo. Por cierto que el Dr. Cibelli est colaborando en la actualidad con un grupo espaol de Andaluca. Los defensores de continuar investigando con clulas troncales embrionarias humanas defienden su posicin, argumentando que si no hubiera sido por estas investigaciones no se hubiera llegado a conocer el papel de los factores de transcripcin Oct3/4, Sox2, c-Myc, Klf4 , Nanog y Lin28 en el proceso de reprogramacin celular de clulas somticas adultas. VI. CUL ES EL ESTADO DE LA CUESTIN EN LA CLONACIN HUMANA POR TRANSFERENCIA NUCLEAR?

La clonacin humana mediante la tcnica de transferencia del ncleo de una clula somtica al citoplasma de un ovocito previamente desprovisto de sus cromosomas puede hacerse con fines reproductivos es decir, intentando el nacimiento de un nio o nia clnicos (clonacin reproductiva) o con fines no reproductivos de investigacin o fines teraputicos (clonacin teraputica). La valoracin tica y jurdica de ambas ha sido tratada por el autor en ocasiones anteriores79, a las que remito al lector. Aunque se habla mucho de la clonacin humana y la sociedad lo percibe como si fuera ya una realidad, lo cierto es que hasta la fecha son muy escasos los logros cientficos, tal como se resume en el Cuadro 3: Cuadro 3. Los intentos de clonacin humana por transferencia de ncleos (SCNT, somatic cell nuclear transfer) Cibelli y Lanza (2001)80: 19 ovocitos, 3 embriones (evolucionaron hasta el estadio de 6 clulas)

J.B. CIBELLI A.A. KIESSLING K. CUNNIFF C. RICHARDS R.P. LANZA M.D. WEST, Somatic cell nuclear transfer in humans: Pronuclear and early embryonic development: Ebiomed: The Journal of Regenerative Medicine (2001) 2:25-31. J.B. CIBELLI R.P. LANZA M.D. WEST C. EZZELL, The first human cloned embryo: Scient. Amer. 286 (2002) 42-49. J.R. LACADENA, Clulas troncales embrionarias humanas: Fines y medios, en J.J. Ferrer - J.L. Martnez, (eds.) Biotica: un dilogo plural (Homenaje a Javier Gafo Fernndez S.J.), Publ. Univ. Pontificia Comillas, Madrid (2002) 117-152. J.R. LACADENA, Experimentacin con embriones. El dilema tico de los embriones sobrantes, los embriones somticos y los embriones partenogenticos, en J.L. Martnez (ed.) Clulas troncales embrionarias: Aspectos cientficos, ticos y legales. Col. Dilemas ticos de la Medicina actual, vol. 17, Univ. Pontificia Comillas, Madrid, Editorial Desclee de Brouwer, Bilbao, (2003) 67-102. J.R. LACADENA, Clonacin Humana con fines teraputicos: del imperativo categrico al imperativo tecnolgico, en P.F. Hooft (coord.) Biotica, Jurisprudencia Argentina, Nmero especial, (2005) 50-61. J.R. LACADENA, Varios artculos de la Pgina Web del autor sobre Gentica y Biotica del Centro Nacional de Informacin y Comunicacin Educativa, Ministerio de Educacin y Ciencia (http://w3.cnice.mec.es/tematicas/genetica). J.B. CIBELLI A.A. KIESSLING K. CUNNIFF C. RICHARDS R.P. LANZA M.D. WEST, Somatic cell nuclear transfer in humans: Pronuclear and early embryonic development: E80 79

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Hwang (2004)81: 242 ovocitos, 30 embriones somticos (blastocistos SCNT), 1 lnea celular. Fraude cientfico. Hwang (2005)82: 185 ovocitos, 31 embriones somticos (blastocistos SCNT), 11 lneas (1 autloga y 10 heterlogas), ncleos de fibroblastos de 11 donantes (8 varones y 3 mujeres) con diversas enfermedades. Fraude cientfico. Stojkovic (2005)83: 36 ovocitos, 1 blastocisto SCNT procedente de una clula donadora indiferenciada. Zavos e Illmensee (2006)84: 3 ovocitos, 1 embrin somtico de 4 clulas transferido al tero. No implantacin. Intento de clonacin reproductiva. French (2008)85: 29 ovocitos de 3 mujeres, ncleos de fibroblastos de 2 donantes varones adultos, 21 embriones NT, 5 blastocistos NT (40 -72 clulas). Transferencia nuclear interespecfica: bovino-humano: Chang y col (2003)86, Zavos e Illmensee (2003)87: 13 ovocitos bovinos, 7 embriones somticos aloplsmicos (citoplasma bovino-ncleo humano); conejo-humano: Chen y col (2003)88 (citoplasma conejo-ncleo humano). Lanza y colaboradores

biomed: The Journal of Regenerative Medicine 2 (2001) 25-31. J.B. CIBELLI R.P. LANZA M.D. WEST C. EZZELL, The first human cloned embryo: Scient. Amer. 286 (2002) 42-49. W.S. HWANG Y.J. RIU J.H. PARK E.S. PARK E.G. LEE J.M. KOO H.Y. CHUN B.C. LEE S.K. KANG S.J. KIM C. AHN J.H. HWANG K.Y. PARK J.B. CIBELLI S.Y. MOON, Evidence of a pluripotent human embryonic stem cell line derived from a cloned blastocyst: Science 303 (2004)1669-1674. W.S. HWANG S.I. ROH B.CH. LEE S.K. KANG D.K. KWON S. KIM S.J. KIM S.W. PARK H.S. KWON CH.K. LEE J.B. LEE J.M. KIM C. AHN S.H. PAEK S.S. CHANG J.J. KOO H.S. ION J.H. HWANG Y.Y. HWANG Y.S. PARK S.K. OH H.S. KIM J.H. PARK S.Y. MOON G. SCHATTEN, Patient-specific embryonic tem cells derived from human SCNT blastocysts: Science 308 (2005) 1777-1783. M. STOJKOVIC P. STOJKOVIC C. LEARY V.J. HALL L. ARMSTRONG M. NESBITT M. HERBERT M. LAKO A.. MURDOCH, Derivation of a human blastocyst after heterologous nuclear transfer to donated oocytes: Reproductive BioMedicine Online 11 (2005) 226231. P.M. ZAVOS K. ILLMENSEE, Possible therapy of male infertility by reproductive cloning: one cloned human 4-cell embryo: Archives of Andrology 52 (2006) 243-254. A. FRENCH C.A. ADAMS L.S. ANDERSON J.R. KITCHEN M.R. HUGHES S.H. WOOD, Development of human cloned blastocysts following somatic cell transfer (SCNT) with adult fibroblasts: Stem Cells on line (2008) DOI: 10.1634/stemcells.2007-0252. K.H. CHANG J.M. LIM et al.. Blastocyst formation, karyotype, and mitochondrial DNA of interspecies embryos derived from nuclear transfer of human cord fibroblasts into enucleated bovine oocytes: Fertil Steril. 80 (2003) 1380-1387. P.M. ZAVOS K. ILLMENSEE, Development of bioassays using bovine model to measure the efficiency of SCNT in humans: Fertil. Steril. 80 Suppl. 3 (2003) 19-20. Y. CHEN Z.X. HE et al. Embryonic stem cells generated by nuclear transfer of human somatic nuclei into rabbit oocytes. Cell Research Online 13 (2003) 251-264. Y. CHUNG C.E. BISHOP N.R. TREFF S.J. WALKER V.M. SANDLER S. BECKER I. KLIMANSKAYA W-S. WUN R. DUNN R.M. HALL J. SU S-J. LU M. MASERATI Y-H. CHOI R. SCOTT A. ATALA R. DITTMAN R. LANZA, Reprogramming of human somatic cells using human and animal oocyte: Cloning and stem cells 2009 11(2) DOI: 10.1089/clo.2009.0004
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(2009)89 (citoplasma vaca, conejo, ratn-ncleo humano). Del anlisis del cuadro anterior se deduce que la nica investigacin realmente exitosa en el contexto de una posible obtencin de lneas celulares troncales en un futuro ms o menos prximo es la de French y colaboradores del ao 2008 puesto que en el trabajo del grupo de Cibelli y Lanza los 3 embriones clnicos obtenidos no pasaron del estadio de 6 clulas, el blastocisto nico de Stojkovic y colaboradores proceda de una clula indiferenciada (tcnicamente, por tanto, se tratara de una paraclonacin) y los dos trabajos del grupo surcoreano de Hwang resultaron ser fraudulentos. Finalmente, de las investigaciones de Zavos e Illmensee cabe sealar que en la realizada en 2006 se trataba de un experimento de clonacin reproductiva puesto que pretendan obtener el nacimiento de un ser humano clnico ya que el embrin SCNT de 4 clulas fue transferido al tero de la mujer aunque no lleg a implantarse. El procedimiento experimental fue autorizado por el Comit de Revisin Institucional de la compaa Reprogen Ltd. (Limassol, Chipre). Ambos investigadores, en contra de la opinin casi unnime de la comunidad cientfica y de la sociedad, estn decididos a llevar a trmino la clonacin humana reproductiva90. Desde hace unos pocos aos se viene intentando la transferencia nuclear interespecfica mediante la transferencia de ncleos somticos humanos a ovocitos de otras especies animales con objeto de estudiar el comportamiento del ncleo humano transferido y su capacidad de reprogramacin (desdiferenciacin y rediferenciacin). As, Zavos e Illmensee (2003) utilizaron ovocitos de vaca en lugar de ovocitos humanos, obteniendo 7 embriones somticos aloplsmicos (citoplasma bovino ncleo humano)91 que ellos llamaron ovocitos bovinos reconstruidos por transferencia nuclear de fibroblastos humanos (SCNT-reconstructed bovine oocytes). La excusa tica que se maneja para justificar esta tcnica es la de ahorrar la utilizacin de ovocitos humanos92. Mi opinin tica es negativa porque, en definitiva, se pone una informacin gentica humana en un ambiente citoplsmico de otra especie animal. Puesto que la interaccin ncleo-citoplsmica condiciona la fisiologa celular, se comprende que los organismos aloplsmicos puedan mostrar algn tipo de anomalas en su desarrollo en relacin con los individuos de la propia especie, dado que desde el punto de vista gentico el desarrollo puede definirse como el proceso regulado de crecimiento y diferenciacin resultante de la interaccin ncleo-citoplsmica, del ambiente celular

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P.M. ZAVOS, Human reproductive cloning: the time is near: Reprod BioMed Online 6 (2003)

397-399. Un comentario ms amplio sobre estas investigaciones puede verse en J.R. LACADENA, Saltando la barrera especfica humana: Pgina web sobre Gentica y Biotica del Centro Nacional de Informacin y Comunicacin Educativa, Ministerio de Educacin y Ciencia (http://w3.cnice.mec.es/tematicas/genetica) (Junio, 2006). J.R. LACADENA, Saltando la barrera especfica humana: aspectos ticos y legales, en P.F. Hooft (coord.) Biotica. Jurisprudencia Argentina, Fascculo N 6, Nmero Especial (2006) 18-25. Segn algunas estimaciones (J. Cibelli, comunicacin personal, febrero 2006), se han utilizado ms de 2.200 ovocitos de 125 mujeres para intentar obtener sin xito alguno lneas celulares estables procedentes de clulas troncales de blastocistos SCNT obtenidos por transferencia nuclear.
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interno del organismo y del medio externo mediante el cual se produce la formacin del individuo adulto a partir de una clula inicial nica: el cigoto93. En la Repblica China se han realizado otros experimentos de transferencia nuclear interespecfica utilizando tambin ovocitos de vaca94 y de conejo95. Ya he dicho antes que, en mi opinin, a pesar de que hay quien defiende este tipo de manipulacin argumentando que es una forma de evitar la utilizacin de ovocitos humanos, la valoracin tica de esta tcnica es negativa por dos motivos: en primer lugar, por lo que significa la produccin de un embrin somtico humano aloplsmico que, evidentemente, no es un embrin humano normal; en segundo lugar, porque la validez cientfica de la utilizacin de las clulas troncales aloplsmicas es poco slida ya que es muy probable que la interaccin ncleo-citoplsmica de tales clulas produzca efectos impredecibles. De hecho, la argumentacin que, utilizando una lgica gentica, hice hace tres aos (Lacadena, 200686) ha sido recientemente confirmada por Lanza y colaboradores (2009) quienes demostraron experimentalmente el comportamiento anormal de los embriones somticos aloplsmicos en los que el ncleo humano se haba transferido a ovocitos de vaca, de conejo y de ratn84. Es importante sealar que en enero de 2008, tras un debate pblico abierto durante el perodo abril-julio de 2007, la Human Fertilisation and Embryology Authority del Reino Unido ha autorizado este tipo de tcnicas, mal llamadas por los medios de comunicacin embriones hbridos o combinaciones hbridas puesto que el concepto de hbrido en Gentica hace referencia a la descendencia de un cruzamiento sexual. Lo cientficamente correcto sera denominarlos embriones somticos aloplsmicos, tal como se ha indicado anteriormente96.

VII.

REFLEXIONES TICAS: DEL IMPERATIVO CATEGRICO KANTIANO AL IMPERATIVO TECNOLGICO

Uno de los problemas bioticos que actualmente vivimos es el que contrapone al imperativo categrico kantiano con el imperativo tecnolgico. Siempre se ha dicho que a nuevos avances cientficos, nuevos problemas ticos, pero que intentar detener el avance cientfico es imposible. Cuando se oye decir que la ciencia es imparable se puede hacer una doble interpretacin: constatar que, efectivamente, el progreso cientfico es continuo o bien asumir que la ciencia es imparable porque los cientficos no estn dispuestos a parar, en cuyo caso podemos estar ante un problema biotico. Se oye decir con frecuencia que es imposible detener el progreso cientfico porque es lo mismo que querer poner puertas al campo ya que todo lo que se pueda hacer, se har o, todava con mayor radicalidad, como se puede hacer, hay que hacerlo, cayendo en el imperativo tecnolgico de un fundamentalismo cientfico. Cuando
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J.R. LACADENA, Gentica (4 ed.), (Captulo XIX), AGESA, Madrid (1988)

K.H. CHANG J.M. LIM et al.. Blastocyst formation, karyotype, and mitochondrial DNA of interspecies embryos derived from nuclear transfer of human cord fibroblasts into enucleated bovine oocytes: Fertil Steril. 80 (2003) 1380-1387.

Y. CHEN Z.X. HE et al. Embryonic stem cells generated by nuclear transfer of human somatic nuclei into rabbit oocytes. Cell Research Online 13 (2003) 251-264.
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El concepto gentico de aloplasmia fue definido por J.R. LACADENA, Cytoplasmic malesterility: A proposal on its terminology: Gentica Ibrica 20 (1968) 195-201 y recogido en R. RIEGER A. MICHAELIS M.M. GREEN, Glossary of Genetics and Cytogenetics. Classical and molecular (5th edition), Springer Verlag, Berlin - Heidelberg - New York (1991)

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muchas veces se oye decir que el fundamentalismo religioso es un obstculo para el progreso de la ciencia, habra que tener en cuenta tambin que muchos cientficos han hecho de la ciencia su religin cayendo en un autntico fundamentalismo cientfico. Como deca Hans Jonas97 en su obra El Principio de Responsabilidad. Ensayo de una tica para la civilizacin tecnolgica:
La tesis de partida de este libro es que la promesa de la tcnica moderna se ha convertido en una amenaza, o que la amenaza ha quedado indisolublemente asociada a la promesa Lo que hoy puede hacer el hombre y despus, en el ejercicio insoslayable de ese poder, tiene que seguir haciendo carece de parangn en la experiencia pasada

Un ejemplo real de la tesis de Jonas lo podemos encontrar en nuestra Ley 14/2007 de Investigacin biomdica cuando dice en su exposicin de motivos en definitiva, donde se explica la filosofa de la ley que la investigacin con gametos, embriones o clulas embrionarias se ha hecho imprescindible [la cursiva es ma] en el mbito de la terapia celular y la medicina regenerativa, cayendo en el imperativo tecnolgico de que todo lo que se pueda hacer, hay que hacerlo. ticamente sabemos que no todo lo que es tcnicamente posible, puede que sea ticamente deseable, que el fin no justifica los medios y que el hombre es un fin en s mismo y no un mero medio. En el Cuadro 2 se indicaban las posibles aplicaciones clnicas de las clulas troncales en la transferencia celular autloga para evitar el rechazo inmunolgico: las clulas troncales adultas (clulas AS), las clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS) y las clulas troncales procedentes del embrin somtico (SCNT) del propio paciente. Desde el punto de vista tico no hay duda que las dos primeras tcnicas seran aceptables para todos (la comunidad cientfica y la sociedad) mientras que la tercera es ticamente rechazada por muchos por el significado biolgico del embrin somtico (embrin SCNT) obtenido por transferencia nuclear que es equiparable a un embrin gamtico obtenido por un proceso normal de fecundacin. En ese proceso imparable de la ciencia podemos decir que no hay nada imposible: todo es cuestin de decisin, de recursos econmicos y de tica (o de falta de tica). Por qu no se toma la decisin de una vez por todas de buscar las soluciones que no plantean problemas ticos? por qu no se apuesta decididamente por la utilizacin de las clulas troncales adultas (clulas AS), por la reprogramacin celular de clulas somticas adultas (clulas troncales pluripoptentes inducidas, clulas iPS) o por la reprogramacin directa? Sealaba anteriormente, al hacer referencia a la reprogramacin celular y la obtencin de clulas troncales pluripotentes inducidas (clulas iPS) a partir de clulas somticas adultas, que muchos las vemos como la solucin biotica para la terapia celular de la Medicina Regenerativa En este contexto parece oportuno recordar alguna postura crtica respecto al avance ciego de la ciencia (algunos lo denominan fundamentalismo cientfico), siendo muy paradigmtico el caso de Jacques Testart, bilogo francs y padre cientfico de la primera nia probeta nacida en Francia en 1982. Testart mostr su postura crtica ante los derroteros por los que han derivado las tcnicas de reproduccin humana asistida, manifestando su opinin contraria a cualquier forma de diagnstico preimplantatorio, est o no justificada98. Su jarrte me detengo caus un gran
H. JONAS, El Principio de Responsabilidad. Ensayo de una tica para la civilizacin tecnolgica: Editorial Herder, Barcelona (1995), pp.15. 98 J. TESTART, Loef transparent, Flammarion Coll. Champs 1986 (traducido al espaol en 1988).
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impacto en la biotica y en la comunidad cientfica. Desde entonces se ha mostrado muy crtico con la eugenesia mdica en relacin con la procreacin medicalizada y el diagnstico gentico preimplantatorio99. Su declaracin reivindico una lgica del no descubrimiento, una tica de la no investigacin100 plantea un nuevo enfoque en la biotica que debera ser analizado y reflexionado en profundidad. En numerosas ocasiones he manifestado el inters que podra tener la confrontacin entre la tica de la no-investigacin de Testart y la tica de la responsabilidad en relacin con los derechos de las generaciones futuras de Hans Jonas. En dicha reflexin habra que tener en cuenta tambin las consecuencias que una decisin negativa tendra para las generaciones futuras. Por ejemplo, qu pensaramos las generaciones actuales si, como consecuencia de los primeros fracasos en los trasplantes de corazn hace 30 aos, los organismos internacionales hubieran decidido prohibirlos como atentatorios a la tica mdica? Actualizando la controversia, no piensan lo mismo los que actualmente defienden el uso de las clulas troncales embrionarias en la terapia celular de la Medicina Regenerativa del futuro? Ante una argumentacin similar que podran utilizar los partidarios del uso de las clulas troncales embrionarias en la terapia celular del futuro habra que defender las posibilidades clnicas de las clulas troncales adultas y de la naciente tcnica de reprogramacin celular que no comportan problema tico alguno. Es una cuestin biotica de fines y de medios.

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J. TESTART, La procration mdicalise, Flammarion Coll. Dominos 1993. J. TESTART, La eugenesia mdica: una cuestin de actualidad: Rev. Der. Gen. Hum. 8 (1998) 21-27. 100 E. CONAN, Jacques Testart, La Nacin, 23 octubre 1986.