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NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 719
1994-10-19

ALIMENTO PARA ANIMALES. DETERMINACIN DE LA DIGESTIBILIDAD CON PEPSINA DE LA PROTENA DE ORIGEN ANIMAL

E:

ANIMAL FOOD. DETERMINATION OF PEPSIN DIGESTIBILITY OF ANIMAL PROTEIN.

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES:

alimento para animales; protena animal.

pepsina;

I.C.S.: 65.120.00
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435

Prohibida su reproduccin

Segunda actualizacin

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 719 (Segunda actualizacin) fue ratificada por el Consejo Directivo de 1994-10-19. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 312201 Alimentos para animales.

AGROINDUSTRIAS U.V.E. S.A. BASF QUMICA COLOMBIANA S.A. CONYCAL DE COLOMBIA FINCA S.A. GRASAS S.A. INDUSTRIA ARROCERA DE LA SABANA ITALCOL S.C.A.

INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO INSTITUTO DE MERCADEO AGROPECUARIO LLOREDA GRASAS S.A. MINISTERIO DE AGRICULTURA NUTRIANLISIS SOLLA S.A.

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales. DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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NTC 719 (Segunda actualizacin)

ALIMENTO PARA ANIMALES. DETERMINACIN DE LA DIGESTIBILIDAD CON PEPSINA DE LA PROTENA DE ORIGEN ANIMAL

1.

OBJETO

1.1 Esta norma establece un mtodo cuantitativo para la determinacin de la digestibilidad con pepsina de la protena de origen animal. 1.2 El mtodo por filtracin que se describe en la presente norma es aplicable a toda protena de origen animal, pero no para protenas vegetales o mezcla de ambos tipos. 2. 2.1 ENSAYOS PRINCIPIO DEL MTODO

Consiste en someter la muestra previamente desengrasada a digestin durante 16 h con una solucin cida y caliente de pepsina, agitando constantemente. El residuo insoluble se separa por filtracin, se seca y se le determina la masa, bien sea para calcular el porcentaje de residuo o bien para determinar el contenido de protena no digerible; en el filtrado se cuantifica la protena digerible. 2.2 APARATOS

Agitador mecnico Microscopio (opcional) Tamiz ICONTEC de 1 mm (No.18) Embudo Gooch No. 4 Equipo para filtracin al vaco Papel de filtro tipo Whatman No.2 o su equivalente Estufa con control de temperatura Erlenmeyer de 250 cm3 de boca esmerilada con tapa. 1

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2.3 2.3.1 REACTIVOS Solucin al 0,002 % de pepsina

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Se disuelve pepsina de actividad 1:10 000 en cido clorhdrico a 0,075 N y se calienta a una temperatura entre 42 oC y 45 oC. La solucin debe agitarse suavemente hasta asegurar la completa disolucin de la pepsina. Debe prepararse justamente antes de emplearse. 2.3.2 2.4 2.4.1 Alcohol etlico PROCEDIMIENTO Extraccin

La muestra se muele de forma que pase a travs de un tamiz de 1 mm (No.18) y se somete a extraccin por el siguiente mtodo:

a)

Se prepara un dedal extractor con papel de filtro tipo Whatman No. 2 o su equivalente Se determina una masa de 1,0 g 0,001 g de muestra, se coloca dentro del dedal y se extrae durante 1 h con ter a una velocidad de 3 gotas a 4 gotas por segundo. Si se utiliza un extractor tipo Soxhlet, la parte superior del dedal debe extenderse sobre el tubo de sifoneamiento para evitar la prdida de partculas slidas. Si el papel que contiene la muestra est totalmente sumergido en el sifn del extractor, la muestra debe estar completamente envuelta en el papel. Debe observarse que el solvente no arrastre partculas slidas. Cuando se quiera calcular aproximadamente el contenido de grasa, se evapora el ter, se seca y se determina la masa del residuo Se retira del extractor el papel de filtro que contiene la muestra y se deja secar a la temperatura ambiente; se desenvuelve y mediante un pincel se transfiere cuantitativamente la muestra desengrasada al erlenmeyer de digestin (vase el numeral 2.2), evitando contaminaciones con las cerdas del pincel o las fibras del papel de filtro. Luego se contina como se indica en el numeral 2.4.2.

b)

c)

2.4.2

Digestin con pepsina

A la muestra desengrasada una vez transferida al frasco agitador o erlenmeyer de 250 cm3, se le agregan 150 cm3 de la solucin de pepsina-cido clorhdrico (vase el numeral 2.3.1) recin preparada y previamente calentada a temperatura de 42 oC a 45 oC; se tapa el frasco agitador o erlenmeyer, se coloca dentro del agitador a una baja velocidad para mantener una suave agitacin y se incuba durante 16 h a una temperatura de 45 oC. 2.4.3 Determinacin del residuo no digerible

a)

Una vez finalizada la incubacin, el contenido del frasco o erlenmeyer se filtra cuantitativamente a travs de un papel de filtro tipo Whatman No.2 o su equivalente (previamente pesado), mediante un equipo para filtracin al vaco. El residuo se lava con 3 porciones de 10 cm3 de agua caliente. El filtrado se completa a un volumen de 250 cm3 con agua destilada y se conserva para determinar la protena digerible. 2

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b)

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El residuo retenido en el filtro se lava con etanol y se succiona hasta sequedad. Se retira el papel de filtro con el residuo y se introduce en la estufa, que se ha calentado previamente a una temperatura de 105 oC 5 oC durante 30 min. Posteriormente se saca, se enfra, se determina la masa y se calcula el residuo no digerible.
Nota. El residuo seco se puede observar al microscopio si se desea.

2.4.4 Determinacin de la protena digerible. Del filtrado obtenido en el numeral 2.4.3.a), se toma una alcuota, se deposita en el baln de kjeldahl y se determina la protena digerida segn el procedimiento descrito en la NTC 282. En forma paralela debe cuantificarse el contenido de protena en un blanco de enzimas. 2.5 2.5.1 CLCULOS La digestibilidad se calcula mediante la siguiente ecuacin:

% D=

A x 100 B

Donde: = = = porcentaje de protena digerible protena digerida protena total

%D A B

2.5.2

El residuo no digerible se calcula mediante la siguiente ecuacin:

% ND =

C x 100 E

Donde: % ND = C E = = porcentaje de residuo no digerible residuo no digerido, en gramos masa de la muestra, en gramos

Nota. Para el clculo de la digestibilidad debe tenerse en cuenta el blanco de la protena de la enzima.

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3. 3.1 APNDICE

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NORMA QUE DEBE CONSULTARSE que, mediante la referencia dentro de este texto, el momento de la publicacin era vlida la edicin actualizacin; los participantes, mediante acuerdos posibilidad de aplicar la ltima versin de la norma

La siguiente norma contiene disposiciones constituye disposiciones de esta norma. En indicada. Todas las normas estn sujetas a basados en esta norma, deben investigar la mencionada a continuacin:

NTC 282: 1986, Mtodos de ensayo para la harina de trigo.

3.2

DOCUMENTO DE REFERENCIA

AMERICAN OFFICIAL ANALITICAL CHEMISTRY. Pepsin digestibility of animal protein feeds. Filtration method final action. USA. AOAC Official Methods of Analysis 1990, 15 th Edition (AOAC 971, 09).