Laboratorio N5: Fotosntesis

Para entender la forma en que un organismo se nutre debemos conocer la manera en que obtiene la materia, principalmente el carbono que necesita para formar molculas orgnicas que componen su cuerpo y como obtiene la energa necesaria para su funcionamiento. Segn la forma en que los organismos obtienen el carbono es posible distinguir dos tipos de seres vivos. Auttrofos: organismos capaces de fijar carbono inorgnico, usando como fuente dixido de carbono del ambiente, Hetertrofos: organismo que no pueden fijar carbono, debiendo usar como fuente molculas orgnicas preformadas, producidas por otros organismos. La energa que los seres vivos requieren para realizar estos procesos puede ser obtenida a partir de dos fuentes: mediante la energa solar y la contenida en los compuestos qumicos. Es de esta forma que los organismos que usan la luz son conocidos como fotosintticos. La fotosntesis es el proceso que permite a los vegetales obtener la materia y la energa que necesitan para desarrollar sus funciones vitales, este proceso se lleva a cabo gracias a la presencia en las hojas y en los tallos jvenes, de pigmentos capaces de captar la energa lumnica. Estas transforman en sus hojas las sales minerales y el agua por intervencin del dixido de carbono (CO2) en sustancias orgnicas sencillas que despus pasan a formar la glucosa y finalmente el almidn, paralelamente desprendiendo oxigeno (O2) al ambiente. El aporte de energa en los tejidos vivos procede de la conversin de glucosa en dixido de carbono y agua para formar ATP. Para realizar la fotosntesis las plantas poseen pigmentos capaces de captar la energa, entre estos podemos mencionar: Clorofila: Se encuentra en los cloroplastos de cada clula. Este pigmento es indispensable para que se lleve a cabo la fotosntesis. Carotenos: Es un pigmento amarillo anaranjado que se encuentra en ciertas clulas vegetales, como por ejemplo en la zanahoria. Xantofilas: Son unas sustancias cristalinas de color amarillo oscuro, que se encuentra conjuntamente con la clorofila de los cloroplastos. En la fotosntesis se reconocen dos fases sucesivas: una dependiente de la luz (fase luminosa) y otra que no depende de ella (fase oscura). En la fase luminosa, la luz que incide (fotones) es absorbida por la clorofila de manera que esta libera un electrn. Simultneamente los fotones provocan la ruptura de la molcula del agua (fotolisis) en dos subproductos: oxigeno, que se libera al medio y los protones (H+). Los electrones liberados por la clorofila activada son captados por los protones por medio de transportadores, de manera que se forma el hidrogeno molecular (H2) que se utiliza para que la molcula de NADP (Nicotidamina adenina dinucleotido) se reduzca a NADP2. Los protones que se acumulen en el estroma pueden comportarse como enzimas activas catalizando la formacin de molculas de ATP a partir de ADP y P. En resumen: en la fase luminosa de la

fotosntesis el impacto de los fotones de luz sobre la clorofila y la fotolisis del agua son el origen de un estado de desequilibrio molecular (fenmeno qumico) que se reequilibra constantemente gracias al flujo de protones a travs de la membrana de los tilacoides (fenmeno fsico). La fase oscura es independiente de luz y sus reacciones tienen lugar en el estroma de los cloroplastos. En ella se utiliza la energa qumica almacenada en el ATP y el poder reductor del NADPH2, sintetizados en la fase luminosa, para la fijacin del CO2 atmosfrico. Este es incorporado a una molcula de 5 tomos de carbono: la ribulosa 1-5 difosfato que abunda en el estroma. El resultado, tras una molcula inestable de 6 tomos de carbono, es el acido 3-fosfoglicerico. Las reacciones oscuras forman un proceso llamado ciclo de Calvin. Por cada ciclo completo se produce una molcula de fosfogliceraldehido que es precursora de la glucosa y otros compuestos orgnicos. Durante este ciclo ocurre la fijacin del CO2 gracias a la energa proporcionada por al ATP y NADPH2 formados en la fase clara. La mayora de las plantas fijan el CO2 formando inmediatamente fosfoglicerato, molcula que tiene tres carbonos por los que se le llama plantas C3. Existen otras que fijan el CO2 en molculas de oxalacetato de cuatro carbonos y son las plantas C4. Existen tambin las plantas con el metabolismo del cido crasulaceo, muy similar a las plantas C4, con la diferencia que almacenan CO2 durante la noche porque durante el da tienen sus estomas cerradas por vivir en ambientes ridos, donde es difcil conservar agua. Objetivo: Observar el fenmeno de fotosntesis.

Actividad N 1: Movimientos protoplasmticos de Elodea canadencis

Materiales:

-Microscopio -Hoja de Elodea -Portaobjeto -Cubre objeto

Procedimiento:

a) Mantener la hoja de Elodea en condiciones normales en cuanto a salinidad (la misma agua de acuario en que la trajo). b) Tome una hoja de Elodea y pngala en un portaobjeto. Agregue una gota de agua de acuario. Observe los cloroplastos y su movimiento. Si los cloroplastos no se mueven intensifique la luz de su microscopio y espere unos minutos. c) Coloca entre el cubreobjetos una hoja de Elodea con una gota de agua, selecciona una clula y cuenta el nmero de cloroplastos. Haz lo mismo en diez clulas y obtn el promedio. Observa su forma y localizacin.

Actividad N2 Produccin de oxigeno en Elodea Materiales 1 Frasco de vidrio 3 tubos de ensayo 3 lmparas y 3 ampolletas (20,40 y 60 watts) Elodea Agua 3 gradillas Lpiz marcador para tubo

Procedimiento a. rotular los tubos de ensayo (1,2 y 3) b. Coloca una ramita de Elodea en interior de cada tubo con el pice hacia la base del tubo, y llnalos con agua, posteriormente ubcalos en cada gradilla c. Ilumina con una lmpara los tubos, utilizando una ampolleta de diferente potencia para cada tubo. d. Observa durante 5 minutos, anote la cantidad de burbujas que se desprenden cada 10 minutos Disea una tabla de datos y realice un grafico.

Actividad N3 Captacin de Co2 en Elodea. MATERIAL: 1 bombilla. 3 tubos con tapa MATERIAL BIOLOGICO: Elodea (Elodea canadensis; planta acutica). REACTIVOS: Agua mineral de cualquier marca. Azul de bromotimol. TCNICA: A. Colocar una gota de azul de bromotimol en dos tubos. B. En el primer tubo, diluir con agua corriente y el segundo tubo diluir con agua carbonatada el azul de bromotimol y observar la coloracin. (Nota: Tapar el tubo hermticamente evitar fugas de dixido de carbono). C. Colocar en otro tubo (tubo 3), una gota de azul de bromotimol y diluir con agua corriente (Nota: el pH del agua con que se trabaja debe tomarse en cuenta ya que modificar los resultados, en este caso debe ser neutra o ligeramente alcalina). D. Soplar con un bombilla dentro del agua hasta cambio de coloracin. Tapar el tubo. Anotar observaciones. E. Colocar dentro del tubo 3 una ramita de Elodea, taparlo nuevamente y esperar de 30 a 60 minutos.

Actividad N4 PRESENCIA DE GLUCOSA EN LAS HOJAS DE LAS PLANTAS VERDES MATERIAL: Mortero. Bao mara Pinzas para tubo de ensayo. Mechero Tubos de ensayo de 15 x 125 mm. Embudo mediano. Vaso de precipitado de 500 ml. Vaso de precipitado de 250 ml. Agitador de vidrio. Gasa. Pipeta de 5 ml. MATERIAL BIOLGICO: 6 7 hojas verdes de espinacas. REACTIVOS: Solucin de Fehling A Solucin de Fehling B.

TCNICA: a. Triturar perfectamente las hojas de espinacas en el mortero, posteriormente del triturado, colocarlas en un vaso de precipitado de 500 ml. b. Agregar agua corriente suficiente para cubrir el triturado y agitar hasta que obtengas una mezcla uniforme, cuidando que la mezcla no te quede muy diluida, deber quedar semilquida. c. Filtrar la mezcla en el segundo vaso de precipitado, esta filtracin la debers de hacer con la gasa para que sea un poco ms rpido y no tenga restos de las hojas que trituraste d. Listo ya el filtrado, toma de 3 a 4 ml, del mismo agregndolo al tubo de ensayo que debers tener listo. A este filtrado le debers agregar 2 ml de solucin de Fehling (1 ml de solucin de Fehling A y 1ml de solucin de Fehling B). Agitar vigorosamente durante aproximadamente un minuto. Esto es con el fin de mezclar perfectamente tu muestra. e. Proceder a calentar el tubo hasta ebullicin, cuidando de que no te vaya a saltar la muestra, y sufras algn tipo de quemadura. Mantn la muestra durante algunos minutos hasta que observes que el cambio de color se estabiliza. f. Observa qu coloracin toma tu muestra y con la tabla de comparacin, establece si hay presencia de glucosa (porcentaje) a partir de las hojas que trituraste. g. Realiza dibujos de lo que observo.

TABLA PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS (GLUCOSA) EN LAS HOJAS DE LAS PLANTAS VERDES SEGN BIURET, BENEDICT Y FEHLING. % DE GLUCOSA 20 POSITIVIDAD + INTENSIDAD DE COLOR Color verde, precipitado verde o amarillo. Color amarillo a verde, precipitado amarillo. Color amarillo anaranjado, precipitado amarillo a naranja.

50

++

75

+++

Negativa: Color azul claro (Puede formarse un precipitado amarillo). Trazas: Color verde azulado.

CUESTIONARIO: 1) Qu relacin tiene el CO2 con los cambios de color en la solucin de azul de bromotimol, en el proceso de fotosntesis observado en la actividad N3? 2) Realice un mapa conceptual sobre el proceso de fotosntesis. (max 1 hoja)