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MEDIO DE CULTIVO Bacteriologa General Catlogo 1305

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AGAR ECD (Escherichia coli directo)
USO Medio de cultivo selectivo para aislamiento de enterobacterias y en especial para la deteccin rpida de Escherichia coli por fluorescencia con lmpara de luz ultravioleta y su confirmacin con la prueba del indol, a partir de diversas muestras.

PRINCIPIO
La peptona de casena proporciona los nutrientes necesarios para el crecimiento. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmtico y los fosfatos ayudan a controlar el pH. Las sales biliares inhiben la flora Gram positiva. Escherichia coli tiene la capacidad de utilizar el triptofano, formando como producto final el indol y su deteccin es una prueba adicional. El sustrato 4-metilumbeliferil--Dglucornido (MUG), es separado por la enzima -D-glucuronidasa de Escherichia coli dando lugar a la formacin de 4metilumbeliferona, que se caracteriza por ser fluorescente al irradiar con lmpara de luz UV de 366 de 366 nm. Las cepas de Escherichia coli tienen como caracterstica especfica producir la enzima Beta-D-glucuronidasa, contrariamente a esto, Escherichia coli O157 : H7 no puede formar esta enzima y al iluminar con una lmpara de luz UV de 366 nm, lo que permite su identificacin con facilidad. Sembrar la muestra en estudio en la superficie del medio de cultivo por estra cruzada. Incubar 18 - 24 h a 35C. De las colonias desarrolladas, las de Escherichia coli se detectan por la fluorescencia azul claro que se produce al iluminarlas con una lmpara de luz ultravioleta de 366 nm. Para confirmar realizar la prueba del indol, agregando sobre las colonias 1 o 2 gotas de reactivo de Kovacs, una coloracin roja del reactivo despus de 2 a 10 segundos se interpreta como reaccin positiva.

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA


Agar Cloruro de sodio Fosfato dipotsico Fosfato monopotsico Lactosa 15.0 5.0 4.0 1.5 5.0 pH 7.0 4-Metilumbeliferil--D-glucornido Peptona de casena Sales biliares Triptofano 0.2 0.1 20.0 1.5 1.0

PREPARACION
Rehidratar 53.1 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de presin) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri estriles. Conservar en refrigeracin de 2 a 8C. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Escherichia coli O157 : H7 Enterobacter cloacae Proteus vulgaris Staphylococcus aureus

CEPA
ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC 25922 35150 23335 13315 25923

CRECIMIENTO
Bueno, colonias fluorescentes al iluminar con luz UV de 366 nm Bueno, colonias no fluorescentes Bueno, colonias no fluorescentes Bueno, colonias no fluorescentes Inhibido

INDOL
+ + +

BIBLIOGRAFIA
Joseph Md State. Dept. Health. Procedures, 1960 Quality Assurance for Commercially prepared microbiological culture media-second edition; approved Standard. NCCLS M-22 A2 Vol. 16 No. 16 pp 8; 1996 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Sexta Edicin pp 192; 1994

PRESENTACION
No. Cat. 1305 1305-E 1305-A Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g No. Cat. 1305-P 1305-PP 1305-PR Preparado placa 90x15 mm individual Preparado paquete con 10 placas Preparado paquete con 20 placas DIBIcont-S

DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F.