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MICROBIOLOGIA

LIC. CARLOS MEDINA PANTA

PARED CELULAR BACTERIANA


Existen diferencias en el espesor de esta estructura bsica, el peptidoglicano de las bacterias Gram positivas tienen una capa gruesa de 0,02 a 0,06 um en forma de multicapas, mientras que las bacterias Gram negativas y las bacterias cido alcohol resistentes la tienen ms fina, de 0,01 um. Al peptidoglicano se le unen otros componentes que son, por lo tanto, tambin integrantes de la pared. Son diferentes en las bacterias Gram positivas, negativas y cido alcohol resistentes. Pared de bacterias Gram negativas: Si observamos la pared de las bacterias Gram negativas al microscopio electrnico podemos observar 3 zonas: 1. La membrana citoplasmtica. 2. El espacio periplasmtico, ubicado entre la membrana citoplasmtica y el peptidoglicano. 3. Una fina capa de peptidoglicano. 4. Membrana externa que contiene fosfolpidos, el lipopolisacrido (LPS) caracterstico de estas bacterias y protenas (protenas de membrana externa). Esta capa est estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de la pared celular de las bacterias Gram negativas. En el lipopolisacrido se pueden distinguir 3 componentes diferentes bioqumicamente. La porcin lipdica, el lpido A, est inmersa en el centro de la membrana externa. En su sector externo la porcin polisacardica, el denominado polisacrido O, o antgeno O, est ubicado en la cara externa. Entre estos dos componentes est el core del LPS, que es tambin polisacardico. El antgeno O es muy variable en su composicin entre las diferentes familias y especies de bacterias Gram negativas, en cambio, el polisacrido del core es constante en las diferentes bacterias Gram negativas. Al lipipopolisacrido (LPS) se le denomina endotoxina, siendo el lpido A su la porcin txica. Como el lpido A est inmerso en el centro de la membrana slo ejerce sus efectos txicos cuando la clula es lisada, ya sea por ataque del complemento y fagocitosis, o por lisis celular como consecuencia de la accin de antibiticos. La membrana externa contiene adems numerosas protenas. Algunas de ellas la atraviesan de lado a lado, constituyendo canales, denominados porinas. Estos poros permiten el pasaje de molculas de bajo peso molecular, como nutrientes. Las grandes molculas no atraviesan la membrana externa, por esto estas bacterias, a diferencia de las Gram positivas, no son sensibles a una enzima, la lisozima que destruye el peptidoglicano. Incluso algunos antibiticos de alto peso molecular no pueden atravesar la membrana externa y, por lo tanto, las bacterias no son sensibles a ellos. Pared de las bacterias Gram positivas: Lo primero a sealar es la gruesa capa de peptidoglicano en forma de mltiples capas. Unidos a l se encuentran los cidos teicoicos (del griego techos, pared). Son polisacridos que se unen al cido Nacetil murmico del peptidoglicano. Algunos cidos teicoicos tienen unido un lpido (cidos lipoteicoicos). Los cidos lipoteicoicos estn embebidos en la membrana citoplasmtica por su porcin lipdica. Los cidos teicoicos tienen por funcin estabilizar la pared. La superficie externa del peptidoglicano de las bacterias Gram positivas est usualmente cubierta de protenas. Los diferentes grupos de bacterias Gram positivas y las diferentes especies, difieren en la composicin de sus protenas y cidos teicoicos, siendo esto til para la clasificacin serolgica y la identificacin. Composicin de la pared de las bacterias cido alcohol resistente (AAR): Algunas eubacterias presentan una pared celular distinta por que no se tean con la tincin de Gram, son las micobacterias y dentro de ellas el gnero ms conocido es el de Mycobacterium (tuberculosis). Tienen una elevada proporcin de lpidos complejos que llegan a suponer el 60% de peso seco y esto da aspecto de cubierta de cera altamente hidrofbica. Por su naturaleza no permite la entrada de alcohol ni colorante. Se usa la tincin de Ziehl Neelsen. Dentro de los lpidos de la pared celular los ms importantes son los cidos miclicos que son cidos grasos de cadena larga entre 60-90 carbonos que tienen el grupo CH en posicin y estn sustituidos en posicin

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Se pueden distinguir 4 capas (m.p-p.c): 1. Pptidoglicano 30%. 2. Capa de arabinosa y galactosa, formando arabinogalactano, que est unida covalentemente a la anterior. 3. Capa de los cidos miclicos. 4. Capa de glucolpidos unidos de forma no covalente con los cidos miclicos. Forman los micolatos de trehalosa que cuando aparecen se ven en las capas ms virulentas. Adems de estas capas existen otros componentes que estn unidos a la m.p a intervalos ms o menos constantes como es el lipoarabinomanano (LAM) y es el equivalente a los lipopolisacridos de las Grame (-). Parece ser que estos LAM van a ser usados como poros para que los nutrientes puedan atravesar la pared celular. Toda esta estructura hace que sean bacterias altamente impermeables. GLICOCALIX Algunas clulas bacterianas estn rodeadas por una capa de material viscoso llamada glicocalix. Este glicocalix est compuesto por polmeros de azcares (polisacridos). Si el glicocalix est organizado en una estructura definida y est unido firmemente a la pared celular se denomina cpsula. Si por el contrario est desorganizado, sin una forma definida y no est firmemente unido a la pared celular se denomina capa mucilaginosa. Composicin: polisacridos en menor proporcin polipptidos. Funcin: Existen diferentes funciones dependiendo de la especie bacteriana Adherencia: es la principal. Streptococcus mutans se adhiere a travs de la cpsula a la superficie de los dientes originando caries. Sin la cpsula el microorganismo se elimina fcilmente con la saliva. Resistencia a la desecacin: las cpsulas poseen muchos grupos polares que al retener molculas de H2O protegen a la clula frente a la desecacin. Material de reserva. Patogenicidad y virulencia: los neumococos sin cpsula son avirulentos. MEMBRANA CITOPLASMTICA Aproximadamente de 7,5 nm, est compuesta fundamentalmente de fosfolpidos (20% - 30%) y protenas (50% - 70%). Los fosfolpidos forman una bicapa donde se intercalan las protenas. En la bicapa lipdica, la parte polar soluble en H2O est alineada hacia afuera de la bicapa y la parte no polar hacia adentro. Estos fosfolpidos de la membrana la hacen fluda, permitiendo que las protenas se muevan alrededor. La mayor parte de las membranas citoplasmticas de procariotas no contienen como ocurre en los eucariotas esteroles tales como el colesterol por lo que son menos rgidas que las de los eucariotas. Funcin de la membrana citoplasmtica: - Acta como barrera para la mayor parte de las molculas solubles en H2O, siendo mucho ms selectiva que la pared celular. - Contiene enzimas biosintticos que actan en la produccin de energa y sntesis de la pared celular. - Las clulas bacterianas no contienen orgnulos como las mitocondrias y cloroplastos de las clulas eucariotas; sin embargo, la membrana citoplasmtica de muchas bacterias se extiende dentro del citoplasma formando unos tbulos que se llaman mesosomas. Estos mesosomas pueden localizarse cerca de la membrana citoplasmtica o ms adentro en el citoplasma. A estos ltimos, los mesosomas centrales, se une el material nuclear de la clula y se piensa que intervienen en la replicacin del DNA y divisin celular. Los mesosomas perifricos parecen estar implicados en la secrecin de ciertos enzimas como son las penicilinasas que destruyen la penicilina. Tambin actan como centros con actividad respiratoria o fotosinttica ya que este sistema de membranas aumenta la superficie disponible para estas actividades. REA CITOPLASMTICA El citoplasma es un fluido que contiene sustancias disueltas y partculas en suspensin como los ribosomas. El 80% del citoplasma corresponde a H2O y el resto lo componen cidos nucleicos, protenas, carbohidratos, lpidos, iones orgnicos, compuestos de bajo peso molecular y partculas. En este fluido

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espeso ocurren muchas reacciones qumicas tales como la sntesis del material celular a partir de los nutrientes (anabolismo). Ribosomas: son unas partculas donde tiene lugar la sntesis de protenas. Se encuentran tanto en procariotas como eucariotas. Sin embargo en las clulas bacterianas al no existir sistemas internos de membranas, los ribosomas se encuentran libres en el citoplasma o bien asociados a la parte interna de la membrana citoplasmtica. Los ribosomas estn compuestos de un 60% de RNA y un 40% de protenas. Los ribosomas bacterianos estn formados por dos subunidades de diferente tamao: 50 S y 30 S que conjuntamente forman el ribosoma bacteriano 70 S (S = Svedberg units, unidades de sedimentacin donde influyen el tamao y la forma): - 50 S: RNA 23 S + RNA 5 S + 35 protenas - 30 S: RNA 16 S + 21 protenas Inclusiones: diferentes tipos de sustancias qumicas pueden acumularse y formar depsitos insolubles en el citoplasma: Glbulos de sulfuro que sirven de reserva de energa para bacterias que oxidan el H2S. Grnulos de volutina o grnulos metacromticos que son de polifosfato. Acumulan fosfato cuando la sntesis de cidos nucleicos est impedida. Se tien de color prpura con azul de metileno y se usan para identificar ciertas bacterias. Poly--hidroxibutirato (PHB) es un material lipdico que acta como reserva de fuente de carbono y energa. Con sudam III se tien de negro. Glucgeno es un polmero de glucosa que se tie rojo con lugol. REA NUCLEAR Al contrario que los eucariotas, los procariotas no poseen una membrana que englobe al ncleo. El material nuclear en una bacteria ocupa la zona central de la clula y parece estar unido a los mesosomas. Este material nuclear llamado nucleoide est formado por un nico cromosoma circular. Tambin pueden existir plsmidos que son elementos extracromosmicos compuestos de DNA. FLAGELOS Son filamentos helicoidales que se extienden desde el citoplasma a travs de la pared celular. Los flagelos son los responsables de la movilidad de las bacterias en los lquidos, llegando a velocidades de 100 m / segundo, lo que equivale a 3000 veces la longitud de su cuerpo por minuto. El guepardo, uno de los animales ms veloces, alcanza una velocidad mxima de 1500 veces la longitud de su cuerpo por minuto. Un flagelo consta de tres partes: cuerpo basal, gancho y filamento. El cuerpo basal que se encuentra dentro de la clula est compuesto por un cilindro central y varios anillos. Las bacterias Gram (-) tienen 2 pares de anillos, los exteriores unidos a la pared celular y los interiores a la membrana citoplsmica. En las bacterias Gram (+) slo existe un par de anillos, uno est en la membrana citoplasmtica y el otro en la pared celular. Los flagelos funcionan rotando como un sacacorcho lo que permite a la bacteria moverse en los lquidos. Los anillos del cuerpo basal, a travs de reacciones qumicas que consumen energa, rotan el flagelo. El filamento est compuesto de molculas de una protena llamada flagelina. No todas las bacterias tienen flagelos (son raros en los cocos) pero en aquellas que los poseen (muchos bacilos y espirilos) se utilizan como criterio de clasificacin la posicin y el nmero de flagelos: Flagelos polares: monotricos, anfitricos y lofotricos Flagelos peritricos FIMBRIAS O PILI Son formaciones piliformes, no helicoidales, que no tienen nada que ver con el movimiento. Suelen ser ms cortos, ms delgados y ms numerosos que los flagelos. Si bien surgen del citoplasma, no se conoce que posean estructuras de anclaje a la clula. Estn formados por subunidades de una protena llamada pilina. Diferentes tipos de pili estn asociados a diferentes funciones siendo las ms conocidas la adherencia a superficies y la reproduccin sexual de bacterias (conjugacin; paso de plsmidos a travs del pili de una clula a otra).

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ENDOSPORAS BACTERIANAS Algunas especies de bacterias producen formas de resistencia llamadas esporas que pueden sobrevivir en condiciones desfavorables tales como el calor o la sequa. Estas formas son metablicamente inactivas, pero bajo condiciones ambientales apropiadas, pueden germinar (comenzar a crecer) y llegar a ser clulas vegetativas metablicamente activas las cuales crecen y se multiplican. Las esporas que se forman dentro de la clula se llaman endoesporas, producindose una por clula. Existen distintos tipos segn su forma (ovoide, esfrica) y localizacin dentro de la clula (centrales, subterminales y terminales). Son muy comunes en el gnero Clostridium y Bacillus. Cuando una endoespora se libera de la clula madre o esporangio es muy resistente al calor (varias horas hirviendo en el caso de Clostridium botulinum). Las causas de la resistencia al calor parecen ser debidas a que durante la esporulacin ocurre un proceso de deshidratacin por el cual se elimina la mayor parte del H2O de la espora. A parte, todas las esporas contienen grandes cantidades de cido dipicolnico (DPA) que no se encuentra en las clulas vegetativas. El DPA en forma de dipicolinato clcico supone el 5 - 10% del peso seco de la endoespora y parece localizarse en la parte central de la espora. Las endoesporas bacterianas se usan como proteccin al contrario que las esporas fngicas que se usan para reproduccin.

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PARED CELULAR GRAM POSITIVA

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