Facultad Dr. Enrique Ortega Moreira de Ciencias Medicas Escuela de Medicina Ctedra de Bioqumica Nombres: Ma.

Victoria Meja; Carlos Proao. Fecha: 01-04-13 Titulo: Identificacin de azucares

Objetivos: Identificar los azcares: o reductores y no reductores, o aldosas y cetosas. o Polisacridos.

Marco Terico: Prueba de Benedict La reaccin o prueba de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C anomrico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de Benedict consta de: Sulfato cprico; Citrato de sodio; Carbonato anhidro de sodio. Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino (dado por el carbonatoanhdrido de sodio), elioncprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu. Este nuevo

ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O) Prueba de Seliwanoff La prueba de Seliwanoff es una reaccin para diferenciar cetosas de aldosas; aunque ambas dan la reaccin, las cetosas la dan rpidamente y las aldosas lentamente. Est basada en la formacin de durfural o en un derivado de ste y su posterior condensacin con el resorcinol dando un color rojo fuego para cetosas y rosa para aldosas. El reactivo consiste en resorcinol y cido clorhdrico concentrado:

La hidrlisis cida de polisacridos y oligosacridos da azucares simples Entonces la cetosa deshidratada reacciona con el resorcinol para producir un color rojo. Es posible que las aldosas reaccionen produciendo un leve color rosa.

La fructosa da positiva a esta prueba. La sacarosa da negativa a esta prueba ya que la molcula, si bien est constituida por glucosa y fructosa, en la unin alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras de la glucosa y la fructosa, por lo que no da positiva, la sacarosa da positiva cuando se le realiza una hidrolisis cida, lo que la convierte en un azcar invertido o invertasa, donde se rompe el enlace alfa (1-2) y permite que la reaccin con esta prueba d positivo. Prueba de Iodo La prueba del yodo es una reaccin qumica usada para determinar la presencia u alteracin de almidn u otros polisacridos. Una solucin de yodo - diyodo disuelto en una solucin acuosa de yoduro de potasio - reacciona con almidn produciendo un color prpura profundo. Esta reaccin es el resultado de la formacin de cadenas de poliyoduro a partir de la reaccin del almidn con el yodo. La amilosa, el componente del almidn de cadena lineal, forma hlices donde se juntan las molculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilopectina, el componente del almidn de cadena ramificada, forma hlices mucho ms cortas, y las molculas de yodo son incapaces de juntarse, conduciendo a un color entre naranja y amarillo. Al romperse o hidrolizarse el almidn

en unidades ms pequeas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece. En consecuencia, esta prueba puede determinar el final de una hidrlisis, cuando ya no hay cambio de color. La solucin de yodo tambin reaccionar con el glucgeno, aunque el color producido es ms castao y mucho menos intenso. Materiales y Reactivos: Reactivo de Seliwanoff Reactivo de Benedict Reactivo de lugol Soluciones al 2% de los siguientes azcares: o Sacarosa o Lactosa o Maltosa o Xilosa o Glucosa, o Fructuosa o Almidn Marcadores permanentes o lpiz graso. Tubos de ensayo Bao Mara Pipetas Gradillas

Procedimiento: Prueba de Benedict: 1. Numerar 4 tubos de ensayo y proceder de la siguiente manera: Tubo 1: Colocar 1 ml de la solucin de Glucosa. Tubo 2: Colocar 1 ml de la solucin de Lactosa. Tubo 3: Colocar 1 ml de la solucin de Sacarosa. Tubo 4: Colocar 1 ml de la solucin de Maltosa. 2. Agregar a cada tubo 1 ml del reactivo de Benedict y mezclar.

3. Llevar los tubos a bao de agua hirviente por 5 minutos. 4. Retirar los tubos del bao y enfriar. 5. Observar y anotar los resultados. Reaccin de Seliwanoff : 1. Identificar 3 tubos de ensayo a agregar a cada uno lo siguiente: Tubo A: 10 gotas de solucin de glucosa Tubo B: 10 gotas de solucin de fructosa Tubo C: 10 gotas de solucin de Sacarosa. 2. Adicionar a cada tubo 1 ml del reactivo de Seliwanoff. Mezclar 3. Llevar los tubos a un bao de agua hirviente por el lapso de 1 a 5 minutos. 4. Anotar el tiempo en el que ocurre la formacin de un complejo de color rojizo. Prueba del Iodo: 1. 1.Identificar 2 tubos de ensayo a agregar a cada uno lo siguiente: Tubo 1: 2 ml de la solucin de almidn Tubo 2: 2 ml de la solucin de xilosa 2. 2. Adicionar a cada tubo 3 gotas de una solucin de Lugol. Mezclar 3. 3. Observar. 5. Anotar los resultados.

Observaciones:

Resultados:

Prueba de Benedict Glucosa Lactosa Sacarosa Maltosa + + +

Reaccin de Seliwanoff : Glucosa Fructosa 0:52 min Sacarosa 1:35 min + +

Reaccin de Yodo : Almidn Xilosa -

Conclusiones: Ma. Victoria Meja F. Para poder de identificar la presencia de determinados azcares mediante pruebas de anlisis cualitativo basadas en la obtencin de compuestos coloreados que ponen de manifiesto la presencia de determinadas sustancias cuando reaccionan con ciertos reactivos. Para ello, realizaremos tres pruebas la de Benedict, Seliwanoff y de Yodo. La prueba de Benedict identifica azcares reductores despus de calentar por 5 minutos la glucosa, la maltosa y la lactosa dieron positivo ya que son azucares reductores es decir que tienen su OH anomrico libre, pero la sacarosa dio negativo para la prueba de Benedict, no da positivo porque sus OH anomricos estn siendo utilizados en el enlace glucsido.

En la prueba de Seliwanoff da positiva con cetosas y negativa con aldosas. Por lo tanto dio positivo para la sacarosa (un disacrido formado por glucosa y fructosa) y la fructosa dan positiva la reaccin, ya que el HCI del reactivo provoca a temperatura caliente la hidrlisis del compuesto liberando fructosa la cual es responsable de la reaccin positiva con el reactivo de Seliwanoff. La prueba de iodo sirve para identificar la presencia de almidn, al el iodo a la xilosa y al almidn y luego calentar despus de unos minutos no se produjo ningn cambio.

Carlos Proao Al mezclar el reactivo de Seliwanoff con la sacarosa y la fructosa, observamos que reacciona, cambiando el color a uno naranja. Mientras que con los dems reactivos no ocurre nada debido a que stas no son cetosas. Cuando mezclamos la sacarosa con el reactivo de Lugol, sta no reacciona ya que no es un polisacrido, pero s lo hace el almidn. A pesar de utilizar el reactivo de Benedict en vez del de Fehling obtuvimos que ste no reaccione con la sacarosa ni con el almidn. Por lo tanto, tanto el reactivo de Benedict como el de Fehling reaccionan con la glucosa, la xilosa, la fructosa y la lactosa. Todos los monosacridos y disacridos a excepcin de la sacarosa, son reductores. La fructosa, glucosa y xilosa son monosacridos; la sacarosa y lactosa son disacridos; y el almidn es un polisacrido. Los hemiacetales son reductores mientras que los hemicetales no lo son.

Bibliografa
Aderson, G. Experimentos de Qumica Orgnica. Armenia: Ediciones Elizcome. Berg, M. J. (2007). Bioquimica. Barcelona: Editorial Revert S.A. Donnersberger, B. A. (2002). Libro de Laboratorio de Anatoma y Fisiologa. Barcelona: Editorial Paidortibo. Rogelio, O. (2008). Curso prctico de qumica orgnica. Enfocado a biologa y alimentos. Universidad de Caldas. Segal, A. C. (2005). Manual de practicas. Biologa Molecular de la Clula I. Mexico: Facultad de Ciencias de la UNAN. Vjar, E. (2005). Prcticas de Bioqumica Descriptiva. Mexico: Editorial Unison.