PROTOCOLO DE TRABAJO PARA LA DETERMINACIN DEL SISTEMA "ABO" (TUBO) Nombre: Anais Sandoval Granda.

Lote: Fecha de inicio: Fecha de finalizacin: No. de muestras a correrse o evaluarse: Fecha de expiracin:

Fuente de las muestras: Obtenidas del rea de Hematologa Lab. Clnico del HPGDR MUESTRA: Sangre Total de Donante o Receptor
PROCEDIMIENTO VERIFICACION OBSERVACION SUGERENCIAS

Lugar: Lab. De Bioqumica UNACH

1

Colocar 1 gota de suero comercial Anti-A en el tubo de 12 x 75 mm. Colocar 1 gota de suero comercial Anti-B en el tubo de 12 x 75 mm. Colocar 1 gota de suero comercial Anti-AB en el tubo de 12 x 75 mm. Aadir a cada uno de los tubos 1 gota de Hemates suspendidos en solucin salina al 5%. Homogenizar suavemente y centrifugar por 15 a 30 seg. A 3500RPM. Suspender suavemente los sedimentos de hemates y examinar presencia o ausencia de aglutinado. Observar y anotar los resultados utilizando lmpara de luz blanca

Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado

Observar fecha de caducidad del reactivo. Observar fecha de caducidad del reactivo. Observar fecha de caducidad del reactivo. Suspensin 1:20 ( 50 ul hemates lavados + 950 ul de SSI) Utilizar preferentemente serfuga. Levar el botn celular a un lado visible del tubo La lmpara no debe emitir temperatura.

6 7

VALIDACION Realizacin de una prueba inversa para corroborar el resultado 1 obtenido

YO: Anais Sandoval G., Certifico que determin el Sistema ABO, tal como est descrito en este protocolo. Firma_____________________________ Fecha: .

PROTOCOLO DE TRABAJO PARA LA REALIZACIN DE LA PRUEBA SRICA INVERSA O REVERSA Nombre: Anais Sandoval Granda. Lote: Fecha de inicio: Fecha de finalizacin: No. de muestras a correrse o evaluarse: Fecha de expiracin:

Fuente de las muestras: Obtenidas del rea de Hematologa Lab. Clnico del HPGDR MUESTRA: Sangre Total
PROCEDIMIENTO VERIFICACION OBSERVACION SUGERENCIAS

Lugar: Lab. De Bioqumica UNACH

1

Colocar 1 gota de Hemates reactivos de grupo A1 en el tubo de 12 x 75 mm. Colocar 1 gota de Hemates reactivos de grupo B en el tubo de 12 x 75 mm. Colocar 1 gota de Hemates reactivos de grupo O en el tubo de 12 x 75 mm. Aadir a cada tubo 2 gotas de suero problema. Homogenizar suavemente y centrifugar por 15 seg. A 3500RPM. Examinar los tubos, en busca de presencia o ausencia de hemlisis o aglutinado. Resuspender el botn celular y anotar los resultados utilizando lmpara de luz intensa.

Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado

Preferencialmente clulas A1 Rh D negativo. Observar fecha de caducidad del reactivo. Observar fecha de caducidad del reactivo. No utilizar muestras hemolizadas. Utilizar preferentemente serfuga. Levar el botn celular a un lado visible del tubo La lmpara no debe emitir temperatura.

4 5

VALIDACION Realizacin de una prueba inversa 1 con las clulas reactivas ABO YO: Anais Sandoval G., Certifico que determin el grupo sanguneo de la muestra problema, dentro del Sistema ABO, tal como est descrito en este protocolo. Firma_____________________________ Fecha:

PROTOCOLO DE TRABAJO DETERMINACIN EN TUBO DE ANTIGENOS Rh Nombre: Anais Sandoval Granda. Lote: Fecha de inicio: Fecha de finalizacin: No. de muestras a correrse o evaluarse: Fecha de expiracin:

Fuente de las muestras: Obtenidas del rea de Hematologa Lab. Clnico del HPGDR MUESTRA: Sangre Total
PROCEDIMIENTO VERIFICACION OBSERVACION SUGERENCIAS

Lugar: Lab. De Bioqumica UNACH

1

Rotular los tubos con las letras D, C, E, c, e. Colocar 1 gota de Antisueros Anti-D, Anti-C, Anti-E, Anti-c, Anti-e. En cada uno de los tubos Aadir a cada tubo 1 gota de clulas suspendidas en solucin salina al 5%. Homogenizar suavemente y centrifugar por 15 seg. A 3500RPM. Examinar los tubos, en busca de presencia o ausencia de hemlisis o aglutinado.

Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado

Las pruebas con la rotulacin C, E, c, e son opcionales. Observar fecha de caducidad del reactivo. Suspensin 1:20 ( 50 ul hemates lavados + 950 ul de SSI) Utilizar preferentemente serfuga. Llevar el botn celular a un lado visible del tubo

VALIDACION Realizar la determinacin de la variante DU en caso de ser Rh D 1 negativo.

YO: Anais Sandoval G., Certifico que determin en tubo los antgenos Rh, tal como est descrito en este protocolo. Firma_____________________________ Fecha:

PROTOCOLO DE TRABAJO DETERMINACIN DE LA VARIANTE O VARIACION DU Nombre: Anais Sandoval Granda. Lote: Fecha de inicio: Fecha de finalizacin: No. de muestras a correrse o evaluarse: Fecha de expiracin:

Fuente de las muestras: Obtenidas del rea de Hematologa Lab. Clnico del HPGDR MUESTRA: Sangre Total
PROCEDIMIENTO VERIFICACION OBSERVACION SUGERENCIAS

Lugar: Lab. De Bioqumica UNACH

1

Rotular 2 tubos con D y Albminas (Autocontrol) Colocar 1 gota de Anti-D en tubo rotulado con D Colocar 1 gota de Albumina en tubo rotulado con Albumina Aadir a cada tubo 1 gota con suspensin de hemates problema Mezclar suavemente el contenido y centrifugar de 15 30 s a 3500 RPM.

Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado Utilizar tubo limpio/nuevo previamente rotulado

Observar fecha de caducidad del reactivo. Observar fecha de caducidad del reactivo.

Utilizar preferentemente serfuga. Levar el botn celular a un lado visible del tubo

Resuspender suavemente el botn de hemates y examinar en bsqueda de aglutinacin . Incubar a 37 C por 15 30 min. los 7 2 tubos Lavar los tubos 3 veces con solucin 8 salina decantando completamente la solucin despus de cada lavada Agregar a cada tubo 2 gotas de 9 suero Antiglobulina humana Mezclar, centrifugar , leer y anotar 10 los resultados con el tubo en la mano
6

Realizar cada lavado de 1 min.

VALIDACION Comprobar los resultados negativos 1 con clulas control de coombs

YO: Anais Sandoval G., Certifico que se determin la variacin Du , tal como est descrito en este protocolo. Firma_____________________________ Fecha: