Facultad de Medicina Universidad de los Andes

Elliot Jos Barrios Uzcategui CI: 18.779.193

ENSAYO DE METODOS PARA EVALUAR LA RESPUESTA INMUNE

Un joven de 24 aos se expone a una situacin de riesgo de infeccin por VIH:

A) Ud. como mdico Qu le recomendara al paciente? Lo principal es informarle del verdadero riesgo que supone la exposicin que ha tenido, luego facilitarle la informacin para que se realice las pruebas de deteccin bsica de laboratorio y eventualmente prescriba un tratamiento. Si la exposicin ha sido realmente de mucho riesgo, le recomendar la realizacin inmediata de un anlisis para ver si el paciente tiene ya anticuerpos, que procederan de una infeccin contrada previamente. Si el resultado es negativo, el anlisis debe repetirse a los tres y a los seis meses, y si contina siendo negativo se puede estar seguro que no existi contagio. En caso de exposicin accidental, por ejemplo tras haber sufrido un pinchazo con una aguja contaminada, o tras haber tenido una relacin sexual de alto riesgo, se puede prescribir un tratamiento para intentar prevenir la infeccin por el VIH. Este tratamiento debe iniciarse cuanto antes, si es posible en las primeras horas despus de la exposicin. Debe tenerse en cuenta que los medicamentos que se emplean para prevenir la infeccin por el VIH poseen efectos secundarios que a veces son desagradables. Por ello, su utilizacin slo es aconsejable si la exposicin ha sido realmente de riesgo. La decisin de tomar este tratamiento o no debe ser compartida entre el mdico y la persona afectada.

B) Por otra parte, el individuo decide ir a la semana a un laboratorio a hacerse una prueba de ELISA para evaluarse su estatus serolgico, en

el laboratorio le informan que ellos realizarn un ELISA de 4ta generacin, dicha prueba resulta positiva. As mismo, acude a un segundo laboratorio donde le realizan un ELISA de segunda generacin, que arroja un resultado negativo. Explique cul es la diferencia entre ambos tipos de ELISA y el porqu de la disparidad de los resultados. Las pruebas ELISA han ido evolucionando (existen cuatro generaciones) y refinndose. As, mientras que los ensayos de segunda generacin solo permitan detectar determinados anticuerpos, los de cuarta generacin detectan mltiples anticuerpos e incluso protenas del propio virus tales como el antgeno p24 que tiene una concentracin elevada en sangre durante la fase primaria de la infeccin-. De este modo, las pruebas ELISA de cuarta generacin permiten detectar infecciones por VIH a las dos semanas de producirse, a diferencia de las de segunda generacin, que nicamente podan detectar el virus transcurrido 2 meses desde su entrada al organismo, por esta razones se producen la disparidad de los resultados ya que uno es ms susceptible en un corto periodo despus de la infeccin. Si las pruebas rpidas o de deteccin ofrecen resultados negativos se considerar que la persona no est infectada. En el caso de que arrojen un resultado positivo es preciso llevar a cabo una prueba de confirmacin, denominada Western Blot, que permitir determinar si diagnstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma ms precisa. El motivo de que se utilice nicamente como prueba de confirmacin es su elevado coste.

C) En vista de los resultados obtenidos se le realiza una carga viral de VIH, la cual da un resultado de 500.000 copias/ml. Explique en que consiste la cuantificacin de carga viral por PCR real time, que sistemas de deteccin fluorescente se pueden emplear para llevar a cabo dicha cuantificacin. La PCR en tiempo real (o PCR cuantitativa) permite cuantificar adems de detectar y amplificar secuencias de ADN, se emplean sondas marcadas con fluorocromos. Las sondas de hidrlisis, frecuentemente empleadas en esta tcnica, son oligonucletidos que presentan fluorocromos en ambos extremos y tienen una secuencia complementaria a parte del fragmento de ADN que se quiere amplificar. Uno de los fluorocromos acta como donador de fluorescencia en el extremo 5 y el otro como aceptor de esta fluorescencia en el extremo 3. La ADN polimerasa se desplaza sobre la cadena de ADN sintetizando la cadena complementaria a partir de un fragmento de ADN que sirve de molde (cebador). Al llegar al punto en el que la sonda se ha hibridado, la hidroliza. El fluorocromo del extremo 5 de la sonda (el donador) es liberado. El fluorocromo aceptor no puede entonces absorber la fluorescencia del donador por estar alejado de l

espacialmente. Un detector realiza la medida de esta emisin de fluorescencia, que es proporcional a la cantidad de ADN presente, y la representa grficamente. Adems de proporcionar informacin cuantitativa. Son muchas las aplicaciones de esta tcnica en el campo de la medicina. Cabe destacar la cuantificacin viral, la cuantificacin de la expresin de genes, el control de la eficacia de frmacos, la deteccin de agentes infecciosos, el diagnstico de tumores y la deteccin de polimorfismos.

D) Luego de todas estas pruebas, explique cul es el estado serolgico de dicho paciente Basado en los resultados de la prueba de ELISA de 4ta generacin y dicha prueba resulta positiva, lo que quiere decir que hay presencia de p24 antes de que se produzcan los anticuerpos acortndose el periodo de ventana a 2 o 3 semanas en este caso de un positivo por pruebas rpidas, es preciso llevar a cabo una prueba de confirmacin, denominada Western Blot, que permitir determinar si diagnstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma ms precisa. La carga viral tampoco es un estudio de rutina ni se usa para evaluar la infeccin por VIH como tal salvo que la clnica lo amerite pero en este caso con una carga viral de VIH, la cual da un resultado de 500.000 copias/ml, esto indica una tasa alta de progresin de la enfermedad por lo que se recomienda el inicio de tratamiento. Los aumentos de la carga viral VIH-1 se deben valorar con mucha precaucin cuando lleven implcito la toma de decisiones teraputicas que supongan un cambio de tratamiento; decisiones precipitadas pueden conducir a la aparicin de resistencias, de resistencias cruzadas y al rpido agotamiento del corto arsenal de antirretrovirales existentes en la actualidad. Todos los estudios que sirven de base para establecer las recomendaciones iniciales que rigen en la actualidad slo han podido evaluar lo que est aconteciendo en un corto espacio de tiempo y no necesariamente implican que los datos que se obtengan con estudios a ms largo plazo respalden las recomendaciones iniciales.

Qu estudios adicionales le recomendara Ud. ha dicho joven? Ante un caso positivo es necesario hacerse pruebas de diagnstico ms especfico como es el caso de Western Blot, que permitir determinar si diagnstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma ms precisa. Tambin sera necesario realizar pruebas de tuberculosis. Usted puede estar infectado con tuberculosis y no saberlo. La tuberculosis no detectada puede

causar una grave enfermedad, pero puede ser tratado con xito si se detecta temprano Sera tambin necesario someterse a exmenes mdicos para otras enfermedades de transmisin sexual (ETS). Las ETS no detectadas pueden causar problemas de salud graves. Tambin es importante practicar los comportamientos sexuales seguros para que usted pueda evitar contraer las ETS.