ORDEN SPIROCHAETALES FAMILIA TREPONEMATACEAE GNERO TREPONEMA

Infeccin por T. pallidum subespecie pallidum

Husped produce anticuerpos:

1. contra material lipoidal liberado por las clulas daadas (reaginas) 2. contra material lipoproteico y cardiolipina liberada por los treponemas (anticuerpos especficos)

Infeccin por T. pallidum subespecie pallidum

Anticuerpos antilipdicos:

Se detectan en etapa primaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Disminuyen en etapas posteriores Se producen en otras enfermedades Treponmicas Se producen en respuesta a enfermedades No treponmicas agudas o crnicas

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Microscopa Directa
(muestra de lesin o tejido)

Ex. Treponmicos

Ex. No Treponmicos

Ex. Serolgicos Ex. Treponmicos

(muestras de sangre y LCR)

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes No treponmicos Treponmicos Antgeno Cardiolipina T. pallidum Anticuerpo Reagina Especficos

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes serolgicos

No treponmicos (RPR, USR, VDRL) Treponmicos (MHA-TP, FTA-ABS, Inmunocromatografa, ELISA)

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes No treponmicos

VDRL en lmina USR RPR en Tarjeta

(Venereral Disease Research Laboratory) (Unheated Serum Reagin) (Rapid Plasma Reagin)

TCNICAS SEROLGICAS SFILIS

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes No treponmicos

Emplean antgeno lipoidal (cardiolipina, lecitina, colesterol) Son exmenes de floculacin (lmina o tarjeta) Fciles de realizar Miden anticuerpos IgG e IgM Examen cualitativo de tamizaje (RPR) Examen cuantitativo de seguimiento (VDRL, USR)

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes No treponmicos

Nivel aceptable de especificidad Sensibilidad alta Costo relativamente barato Lectura macroscpica (RPR) Lectura microscpica (VDRL, USR) Tiempo de ejecucin 40 a 90 minutos) Estabilidad ag. 12 hrs VDRL, 1 ao RPR, USR

Reacciones falsas positivas

Agudas

Hepatitis Neumonia viral Varicela Malaria Sarampin

Inmunizaciones

Mononucleosis Drogadiccin Error de laboratorio Embarazo

Reacciones falsas positivas

Crnicas Enfermedades autoinmunes Drogadiccin Lepra Edad Cncer

Tcnicas Serolgicas Sfilis

% Sensibilidad y % de Especificidad Exmenes No Treponmicos

Tcnicas Serolgicas Sfilis

RPR

USR Descarte Floculacin Cuali-cuanti Microscpica 40 min fecha expir. Suero

VDRL

APLICACIN REACCIN EXAMEN LECTURA TIEMPO ESTAB. AG. MUESTRA TCNICA MATERIAL

Descarte rp. Floculacin Cualitativo Macroscpica 40 min. 3 meses Suero Fcil Desechable

Rutina, monitor tto Floculacin Cuali y cuantitativo Microscpica 90 min. 12 horas Suero calentado y LCR sin calentar Fcil Fcil No desechable No desechable

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Anticuerpos anti-T. pallidum Se detectan en etapa primaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Permanecen de por vida

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Ex. de Microscopa Directa

Microscopa de campo oscuro (CO)

Examen de microscopa directa positiva

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Microscopa de Campo Oscuro

Lesiones hmedas Examen inmediato Observacin de organismos mviles

Requisitos Microscopio adecuado Capacitacin Buena toma de muestra Perseverancia

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Examen de Microscopa Directa Positiva

Demostracin del T. pallidum: Morfologa Movilidad Diagnstico de sfilis: Primaria Secundaria Congnita precoz Recada infecciosa

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Examen de Microscopa Directa Negativa

No descarta sfilis Tiempo o condicin de la lesin Tratamiento previo (local o sistmico) Mala toma de muestra Mala identificacin del T. pallidum

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes Treponmicos

FTA-ABS MHA-TP

(Fluorescent Treponemal Antibody Absorption) (Micro Hemagglutination Assay for antibodies to T.

pallidum

ELISA

Enzimoinmunoensayo

Inmunocromatografa

FTA-ABS REACTIVO

Examen Treponmico MHA-TP

Tcnica de inmunocromatografa

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Examen Treponmico ELISA Mtodo indirecto para detectar anticuerpos

El antgeno recubre los pocillos de la placa de microtitulacin Se agrega una dilucin de suero en pocillo para que los anticuerpos se unan al antgeno

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Examen Treponmico ELISA

Se usan Igs. antihumanas marcadas para detectar anticuerpos del paciente Se agrega un sustrato para su deteccin Si el paciente tiene anticuerpos a T. pallidum se produce una reaccin de color

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Examen Treponmico ELISA

La intensidad del color desarrollado es proporcional a la cantidad de anticuerpos presentes El cambio de color se lee en un lector ELISA Ventaja de la tcnica: elimina la interpretacin subjetiva de los resultados

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes Treponmicos Reacciones antgeno anticuerpo, de aglutinacin Antgeno T. pallidum subespecie pallidum Detectan anticuerpos dirigidos contra componentes treponmicos celulares Son exmenes cualitativos

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Exmenes Treponmicos

Son exmenes confirmatorios Son sensibles Son especficos Permanecen reactivos de por vida

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Uso de Tcnicas Treponmicas

Para distinguir reacciones debidas a sfilis de las falsas positivas en las pruebas No treponmicas. Para confirmar sfilis tarda en aquellos casos con ex. No treponmico No reactivos.

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Uso de Tcnicas Treponmicas

Para resolver casos con evidencia epidemiolgica de sfilis y la pareja presenta ex. No treponmico repetidamente No Reactivos. Si despus de efectuar repetidos ex. No treponmicos el diagnstico contina siendo dudoso. Si el ttulo de VDRL permanece estable con o sin tratamiento

Tcnicas Serolgicas Sfilis

Uso de Tcnicas Treponmicas

Si el ttulo de VDRL muestra una variacin de solo una dilucin (mayor o menor) en dos controles sucesivos con intervalo de ms de un mes. Para ayudar al dg. de sfilis en una madre que es No Reactiva al VDRL y que no presenta sntomas clnicos de sfilis pero tiene un hijo con sfilis congnita

Reacciones falsas positivas

Cirrosis Anemia hemoltica autoinmune Diabetes tipo 1 Lupus Usuario de drogas Enfermedad del colgeno VIH Embarazo

Tcnicas Treponmicas
FTA-ABS

MHA-TP confirmacin dg (excepto etapa primaria) eritrocitos sensib. con T.pallidum aglutin. ag.-anticpo cualitativo macroscpica 2 hrs. suero relativamente fcil y no muy cara

APLICACIN confirmacin dg. ANTGENO REACCIN EXAMEN LECTURA TIEMPO MUESTRA TCNICA T.pallidum antig-anticpo cualitativo microsc. IF 4 hrs. suero, LCR relativamente difcil, cara

EXMENES TREPONMICOS
% SENSIBILIDAD Y % ESPECIFICFIDAD