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21/2/2012

ANIMALES DE LABORATORIO

PALACIOS FARFAN CARMEN KATIA PALACIOS ORTIZ VICTOR GERARADO

ANIMALES DE LABORATORIO

INDICE

INTRODUCCIN OBJETIVOS ANIMALES DE LABORATORIO CARACTERSTICAS DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO Y EN EL BIENESTAR DEL MODELO ANIMAL Control sanitario e higiene CLASIFICACIN MICROBIOLGICA CATEGORA I: ANIMAL HALOXNICO (TRADICIONALMENTE CONVENCIONAL). CATEGORA II: ANIMAL MIROXNICO. CATEGORA III:ANIMAL GNOTOBITICO CON MICROBIOTA DEFINIDA CATEGORA IV: ANIMAL HETEROXNICO (LIBRE DE GRMENES PATGENOS, SPF) CATEGORA V: ANIMAL AXNICO (LIBRE DE GRMENES, GF) ADQUISICIN DE ANIMALES DE LABORATORIO BIOTERIO DE PRODUCCIN BIOTERIO DE EXPERIMENTACIN. BIENESTAR ANIMAL PERSONAL. NORMAS DE SEGURIDAD Y PROTECCIN DEL PERSONAL. CAPACITACIN DEL PERSONAL ANIMALES UTILIZADOS EN EL LABORATORIO . PRIMATES NO HUMANOS ANFIBIOS RATN..
TAXONOMA VENTAJAS DE SU USO COMO ANIMAL DE LABORATORIO DESVENTAJAS .. BIOLOGA GENERAL PRODUCCIN . Microambiente Macroambiente MANEJO. Identificacin

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ASPECTOS QUE MODULAN, REGULAN E INFLUYEN EN LA EXPERIMENTACIN 8

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Sexado ADMINISTRACIN DE FRMACOS Y OTROS COMPUESTOS. Tpica.. Oral Subcutnea. Intradrmica. Intracraneal.. Intramuscular Intraperitoneal. Intravenosa.. EXTRACCIN DE SANGRE.. Seno orbital.. Venas y arterias caudales. Intacardiaca.. EUTANASIA 22 22 22 23 23 23 23 24 24 24 24 25 25 25

RATA.. 26
ORIGEN 26 TAXONOMA.. BIOLOGA GENERAL. PRODUCCION .. Microambiente Macroambiente MANEJO 30 Sexado ADMINISTRACIN DE FRMACOS Y OTROS COMPUESTOS.. 31 26 26 28

Tpica 31 Oral.. 31 Subcutnea. 31 Intradrmica 31 Intraperitoneal. 31 Intramuscular.. 31 Intravenosa 32 Intracardiaca.. 32 COBAYO. 32


ORIGEN.. 32 TAXONOMA.. 32 BIOLOGA GENERAL.. 33 PRODUCCIN .. 34

Microambiente

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Macroambiente
MANEJO. 35

Identificacin CONEJO... 36
TAXONOMA.. 36 PRODUCCIN 36

Microambiente: Macroambiente:
MANEJO.. 37

Sujecin y sexado: Identificacin: ADMINISTRACION DE FARMACOS Y OTROS COMPUESTOS..38 HAMSTER.38


TAXONOMA.. 38 PRODUCCION .. 39

Microambiente: Macroambiente:
MANEJO.. 40

Sujecin y sexado: Identificacin:


ADMINISTRACION DE FARMACOS Y OTROS COMPUESTOS 40 EUTANASIA 41

ANESTESIA EN PEQUEOS ROEDORES DE LABORATORIO..41 RECOMENDACIONES PARA ESPECIFICACIONES SOBRE ANIMALES EN LA REDACCIN DE TRABAJOS CIENTIFICOS 42 ALTERNATIVAS AL USO DE ANIMALES DE LABORATORIO 43 METODOS ALTERNATIVOS 43 CONCLUSIONES 46 BIBLIOGRAFIA 47

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INTRODUCCIN

El

empleo

de

animales

en

la

investigacin

y enseanza

involucra

responsabilidad de

quienes los utilizan; por tanto, es un deber evitar la

crueldad y procurar su bienestar. Actualmente se impulsa una tendencia en pases de Europa y Estados Unidos para no utilizar animales en el laboratorio, universidades como Harvard o Stanford consideran su uso como un mtodo educativo obsoleto. La nueva posibilidad es utilizar herramientas alternativas para sustituir las prcticas con animales a travs del apoyo de simuladores por computadora, maniques, contar con laboratorios in vitro, estudios de campo o cadveres de animales que hayan muerto de manera natural. Se considera importante que los

estudiantes se formen con una cultura ms tica en el trato de animales. Sin embargo, cuando no se cuente con herramientas alternativas al uso de animales y se requiera de su utilizacin, los procedimientos que se realicen debern cumplir con un justificado propsito cientfico y de enseanza, poseer una expectativa razonable en cuanto a incrementar el conocimiento sobre los diferentes procesos biolgicos y proveer la habilidad necesaria para el manejo adecuado de tcnicas. Es necesario tomar en cuenta que esta tcnica slo se justifica en la ciencia cuando ese conocimiento sea en beneficio de la humanidad o de los animales. Es obligacin de quien manipula animales con fines de estudio procurar darles un trato y cuidado apropiado y digno, desde los procedimientos de captura y durante su mantenimiento en condiciones de cautiverio previo al manejo en el laboratorio. Asimismo, se deber contar con la preparacin adecuada y conocimientos actualizados para aplicar el principio de las 3R (Norma Oficial Mexicana NOM062-ZOO-1999) en el manejo de animales en el laboratorio: Reemplazar (utilizacin de alternativas que produzcan los mismos resultados, tales como experimentos in vitro, cultivos celulares, modelos inanimados, modelos por computadora), Reducir (utilizar un nmero mnimo de animales), Refinar (utilizar tcnicas adecuadas para evitar al mximo el sufrimiento).
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OBJETIVOS:

Conocer los tipos de animales utilizados en los laboratorios. Conocer el manejo y cuidado de cada animal de laboratorio. Conocer los tipos de clasificacin de animales de laboratorio. obtencin de animales biolgicamente uniformes, desde el punto de vista gentico y microbiolgico

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Se define como animal de laboratorio a cualquier tipo de ser vivo, con independencia de su categora filogentica o taxonmica, tanto vertebrado como invertebrado, que se utilice como instrumento de medida con fines cientficos.(2) El animal de laboratorio es aquel que: Es engendrado y producido en condiciones controladas. Mantenido en un entorno controlado. Posee claros antecedentes genticos y microbiolgicos. Existe una comprobacin sistemtica de estos antecedentes.

Tambin es definido como cualquier especie animal que, mantenido bajo determinadas condiciones controladas es utilizado como instrumento de

medida en experimentacin cientfica, desarrollo tecnolgico e innovacin, pruebas de laboratorio y docencia, para la generacin de datos, los cuales son utilizados como informacin. Ejemplo de estas especies son: el ratn, la rata, el hmster, el conejo, el perro, el mono etc.(1)

1. CARACTERSTICAS DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO El animal experimental como reactivo biolgico Se trata de un animal cuya calidad gentica y ambiental ha sido controlada y asegurada y, por tanto, es capaz de dar una respuesta fiable y reproducible a la pregunta experimental. Se suman a ello todas las consideraciones de cuidado para el bienestar de cada uno segn especie y sus requerimientos etolgicos, de manera que no se generen alteraciones o adaptaciones que modifiquen el modelo animal, alterando la respuesta investigativa.(1) Para obtener este tipo de animal es necesario conocer el concepto de "barrera" (que comprende las medidas y condiciones bajo las cuales se producen y reproducen los animales en los bioterios), para garantizar que mantenga condiciones definidas, tanto desde el punto de vista gentico como sanitario.(1)
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El concepto "homogeneidad del reactivo biolgico" implica definir las condiciones del animal en cuanto a caractersticas somticas -peso, sexo y edad-, genticas -igualdad o similitud biolgica de su informacin gentica a partir del mantenimiento de una tasa de consanguinidad elevada- y sanitarias segn los requerimientos del experimento: axnicos (sin grmenes),

gnotoxnicos (con grmenes controlados) o estndares con flora nativa. (1)

ASPECTOS

QUE

MODULAN,

REGULAN

INFLUYEN

EN

LA

EXPERIMENTACIN Y EN EL BIENESTAR DEL MODELO ANIMAL. El cuidado, la utilizacin apropiada y el trato humanitario de los animales empleados en investigacin, pruebas de laboratorio y educacin requieren de un conocimiento especializado de los ambientes, procesos y procedimientos relacionados con su uso y cuidado. Ello tambin implica el establecimiento de condiciones de infraestructura y ambientes de trabajo propios y especficos. En la actualidad, en la mayora de los pases que cuentan con esta ciencia y tecnologa desarrolladas se exige que dichas condiciones sean certificadas y categorizadas segn competencias y necesidades. Por eso, es importante la formulacin de un programa de aseguramiento de la calidad que incluya control sanitario y gentico, y entrenamiento y validacin permanente de procesos y procedimientos de laboratorio (dentro de ellos, el conocimiento de la etologa de cada especie animal utilizada). (1) Se debe planear un adecuado ambiente fsico y social, hospedaje, espacio y manejo para el albergue de los animales, considerando factores como: La especie, raza o cepa de animales y sus caractersticas individuales

tales como sexo, edad, tamao, conducta y salud.

La habilidad de los animales para integrar grupos con sus semejantes, a travs de la vista, olfato y posible contacto, ya sea que los animales se mantengan aislados o en grupos.

El diseo y construccin del alojamiento.


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La disponibilidad y adecuacin de elementos enriquecedores del medio ambiente.

Las metas del proyecto y el diseo experimental (por ejemplo: produccin, crianza, investigacin, pruebas de laboratorio y educacin). La intensidad de la manipulacin animal y el grado de alteracin, cambio o patologa que puedan causar los procedimientos.

La presencia de materiales peligrosos o que causen enfermedad. La duracin del perodo de permanencia de los animales.
Esto implica que el diseo de las reas de albergue, las zonas de trabajo y las reas de almacenamiento, lavado, esterilizacin y desplazamiento deben ser cuidadosamente diseados por personal experto en el tema. El equipo de trabajo, adems de ser idneo, debe contar con el apoyo de un CICUAL (Comit Institucional para el Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio), que vele porque cada proyecto de investigacin cumpla con los requisitos adecuados y humanitarios de trato y manejo de los animales, y garantice la capacitacin y entrenamiento requeridos por los investigadores y el personal que se aproxime a los animales. (1)

Control sanitario e higiene Constituye el programa bsico de cuidado de los animales en salas de experimentacin o bioterios. All los animales se integran a una serie de cuidados sanitarios que les protege de microorganismos no definidos como parte de su condicin y, por otro lado, se resguarda a quienes los manejan de no contaminarse de microorganismos, especialmente de tipo zoontico. Este programa incluye procedimientos de rutina diaria, semanal o mensual que permiten la ptima remocin de materiales y elementos potencialmente colonizables por microorganismos que pueden afectar el entorno y la condicin biolgica del mismo animal. (1)

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CLASIFICACIN MICROBIOLGICA

Los animales de laboratorio se clasifican de acuerdo a la presencia o ausencia de microorganismos patgenos. Los patgenos por controlar son parsitos, virus, bacterias y hongos.(1)

CATEGORA

I:

ANIMAL

HALOXNICO

(TRADICIONALMENTE

CONVENCIONAL).

Son animales mantenidos sin ningn proceso especial (instalaciones abiertas) tradicionalmente llamados convencionales. Deben estar libres de toda evidencia de enfermedades infecciosas, especialmente las trasmisibles al hombre, tanto en el examen clnico como en el post mrtem. Se refiere a las siguientes entidades biolgicas Toda Salmonella y Shigella. Mycobacterium tuberculosis. Yersinia pseudotuberculosis. Leptospira spp. Dermatofitos. Sarcoptes scabiei. Virus de la coriomeningitis linfocitaria (LCM).

CATEGORA II: ANIMAL MIROXNICO. Son comparables a los animales convencionales mantenidos bajo condiciones sanitarias estrictas y estndares. Albergan una fraccin inoculada de microorganismos no patgenos tomados de la microbiota de un haloxnico; deben mantener o ser del mismo estatus de la Categora I y adems estar libres de: Listeria monocytogenes. Bacillus piliformis (Clostridium piliformis). Estadios intermedios de cstodos y de artrpodos parsitos obligados. Especies determinadas demandan la ausencia de los virus: Ectromelia (ratn) y Myxomatosis (conejo).
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CATEGORA III: ANIMAL GNOTOBITICO CON MICROBIOTA DEFINIDA

Son comparables a los animales derivados de cesrea (axnicos) a los que se les introduce voluntariamente especies microbianas conocidas. Deben ser del mismo estatus de la Categora II y adems estar libres de: Bordetella bronchiseptica. Toda Pasteurella. Todas las Coccidias (Eimerias spp) y helmintos patgenos.

CENTRO NACIONAL DE PRODUCTOS BIOLGICOS / INS Adems, especies determinadas demandan la ausencia de: Streptobacillus moniliformis (ratones y ratas). Corynebacterium kutscheri (C. murium) (ratones). Streptococcus pneumoniae (cobayo y conejo). Todas las especies de Mycoplasma (ratones y ratas). Treponema cuniculi (sfilis del conejo/conejo)

CATEGORA IV: ANIMAL HETEROXNICO (LIBRE DE PATGENOS, SPF)

GRMENES

Son comparables a los animales descritos como libres de grmenes patgenos especficos (Specific Pathogens Free, SPF). Estos son derivados de un axnico o gnotobitico que adquiere una microbiota proveniente de su medio, son mantenidos en zonas protegidas (sistemas cerrados). Deben ser del mismo estatus de la Categora III y adems estar libres de:

Estreptococos (excepto grupo D). Neumococos. Helmintos. Protozoos patgenos.


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Virus que afectan a estas especies. Adems, especies determinadas demandan la ausencia de: Todas las especies de Mycoplasma (hamster y cobayo). Fusiformis necrophorus (conejos).

CATEGORA V: ANIMAL AXNICO (LIBRE DE GRMENES, GF)

Son animales que no albergan ninguna especie microbiana viviente detectable. Son el resultado del uso de sistemas cerrados estriles y se encuentran libres de todo organismo demostrable (virus, bacterias, hongos, parsitos y organismos saprfitos). Se les conoce como animales Germ Free o axnicos, los cuales son derivados por histerotoma (cesrea) o histerectoma asptica, criados y mantenidos en un aislador mediante tcnicas gnotobiticas. Estos animales no siempre se obtienen en la prctica, debido a los agentes transmitidos verticalmente.

Este esquema de clasificacin por categoras ha sido sujeto a revisiones regulares y a pesar de algunos cambios menores en cuanto al establecimiento y

definicin de las entidades microbianas (bacterias, hongos, parsitos y virus) que deben o no estar presentes, segn la categora especfica, ha resistido la prueba del tiempo.

ADQUISICIN DE ANIMALES DE LABORATORIO

La importacin de animales de laboratorio deber cumplir los requisitos zoosanitarios del Servicio Nacional de Sanidad Animal (SENASA) del Per.

La eleccin del animal del laboratorio debe cumplir las exigencias de la investigacin biomdica y reunir los requisitos genticos y microbiolgicos.

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BIOTERIO DE PRODUCCIN

Estructura fsica y organizacional especialmente diseada para la cra

mantenimiento de animales de laboratorio. De ubicacin exclusiva, fuera del alcance de peligros sanitarios. El objetivo principal de tener un bioterio es asegurar la procedencia de animales sanos para que no interfieran en los trabajos cientficos de las diferentes reas de investigacin, fabricacin vacunas, antgenos y su control. de

Los determinantes de un bioterio para un buen desempeo son: Aspecto de infraestructura. Animales definidos. Personal capacitado.

BIOTERIO DE EXPERIMENTACIN Destinado solamente para alojar animales durante el tiempo que dure un estudio o una investigacin. Se debe tener en cuenta que existan instalaciones con barreras sanitarias establecidas para la proteccin de las personas as como de los animales, con el equipamiento necesario y los procedimientos normativos operacionales correspondientes para dichos fines.

BIENESTAR ANIMAL RUSSELL Y BURCH: LAS 3R La teora de Russell y Burch, tal como se elabor a finales de los aos cincuenta, se ha convertido en un tema central de la ciencia de animales de laboratorio. Se trata de cmo instrumentar medidas para disminuir o eliminar los aspectos no humanitarios de la experimentacin animal, para ese fin se introdujo el concepto de las 3 R (refinamiento, reduccin y reemplazo) como base fundamental para el empleo responsable de los animales en los experimentos.

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Refinamiento: se refiere a las condiciones y calidad de vida que se le otorgan al animal en cautiverio. Incluye desde la caja o jaula, condiciones ambientales, de manejo, anestesia, analgesia, toma de muestras, inoculacin de sustancias e incorporacin en su ambiente de elementos que contribuyan favorablemente a su bienestar. Reduccin: se refiere a una disminucin del nmero de animales que se necesitan ara un experimento determinado. Esto se puede lograr eligiendo procedimientos experimentales apropiados, controlando los factores ambientales y estandarizando a la poblacin animal; temas en los se ha avanzado mucho en los ltimos aos. Remplazo: se refiere a la sustitucin del empleo de animales vivos por tcnicas in vitro, modelos normatizados, videos, etc. El experimento puede ser sustituido por un procedimiento alternativo que produce el mismo resultado sin utilizacin de animales vivos.

PERSONAL El personal que trabaja en un bioterio de produccin o de experimentacin debe ser lo suficientemente capacitado, de acuerdo con las caractersticas de las instalaciones, nmero de animales mantenidos y la naturaleza de la investigacin que se va a realizar. Es responsable de la atencin y mantenimiento correcto de los animales asignados.

NORMAS DE SEGURIDAD Y PROTECCIN DEL PERSONAL El personal debe adoptar normas y formas de proteccin, para brindar buenas condiciones de mantenimiento y salud a los ratones. Para ello deber contar con procedimientos e instrucciones normalizados como: Procedimiento de higiene de personal. Uso de la vestimenta completa. Procedimiento de ingreso al bioterio de produccin o bioterio de experimentacin.

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Procedimientos de limpieza de ambientes, con programas de limpieza y rotacin de desinfectantes, efectivo. Procedimientos de limpieza y desinfeccin de materiales. Procedimiento de eliminacin de desechos. Programa de control de plagas. Programa de capacitacin al personal. Flujo de personal y materiales por las zonas indicadas, para evitar diseminacin de material contaminado en zonas limpias.

Entre las normas de higiene y de seguridad ms importantes tenemos: Uso de una vestimenta completa y de uso exclusivo en el bioterio. Todo animal encontrado en la sala, libre, debe ser eliminado y no devuelto a la colonia. Se debe trabajar con el menor ruido posible y en forma de reducir el estrs ocasionado a los animales. Uso de gafas de seguridad cuando el procedimiento de investigacin lo requiera. Tener conocimiento de la localizacin del botiqun de primeros auxilios y rutas de evacuacin ante una emergencia Utilizar guantes quirrgicos para el manejo de los animales. No llevar nada a la boca mientras se est en el bioterio. Mantener el rea limpia. Uso de equipos en buenas condiciones. Eliminacin de desechos en la forma correcta. Uso de bolsas rojas para material biolgico contaminado y bolsas de color negro para material sucio o desechos no contaminados. Rotular correctamente las jaulas, especialmente en las salas de reproductores monogmicos. Restringir el acceso a personal extrao, permitir slo el acceso a personas autorizadas. Informar inmediatamente al jefe o coordinador, cualquier accidente. Si tiene problemas respiratorios (asma), neurolgicos o alergias infrmelo por escrito a su jefe inmediato.
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No debe permitirse al personal comer, beber, fumar o aplicarse cosmticos en las salas de animales

El uso de los elementos de proteccin del personal (mascarilla, guantes, gorros, etc.), los procedimientos normalizados de limpieza y desinfeccin de materiales e instalaciones conjuntamente con los flujos adecuados de personal y material, constituyen una verdadera barrera sanitaria, que se recomienda mantenerla vigente a pesar de las limitaciones en equipamiento infraestructura. e

CAPACITACIN DEL PERSONAL

El personal debe estar capacitado en: Identificar las principales enfermedades zoonticas que afectan a los animales de laboratorio. Manejo de animales de laboratorio, segn las buenas prcticas de crianza. Peligros microbiolgicos y fsicos (incluyendo aquellos relacionados con la radiacin y las alergias). Limpieza y sanitizacin de ambientes y materiales. Higiene personal. Salud y seguridad ocupacional. Manejo de materiales de desecho. Seguridad qumica e industrial. Manejo de equipos utilizados en la produccin: autoclaves, hornos, caldero, ablandador de agua, cabinas de seguridad biolgica y otros. Debern implementarse programas de capacitacin continua.

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ANIMALES UTILIZADOS EN EL LABORATORIO

PRIMATES NO HUMANOS

Las especies de primates empleadas ms extensamente en las investigaciones son Macaca mulatta (mono Rhesus), M. fascicularis (mono cinomolgus), M. nemestrina (mono de cola de cerdo), Certopitbecus aetbiops (mono verde africano, vervet), papio spp (mandriles), Saimir sciureus (mono ardilla), Aotus trivirgatus (mono bho), cebus spp (capuchinos), Ateles spp (mono araa), Saguinus spp (titis), Calubris spp (titis, tamarinos).

La importacin de primates no humanos a EE.UU, esta prohibida, excepto para propsitos cientficos educativos y de exhibiciones.

Los primates son suceptibles y pueden ser portadores de numerosas enfermedades infecciosas, muchas de las cuales son antropozoonosis y zoonosis. Se debe mantener al animales en cuarenetena durante 1 a 3 meses antes de su utilizacin, para permitir una evaluacin adecuada de su estado de salud y para que se adapte al ambiente del laboratorio

ANFIBIOS

Los anfibios utilizados ms ampliamente en la investigacin son las ranas leopardo (Rana pipiens), las ranas toro (Rana cateshiana), las ranas africanas con garra (Bufo marinus), las salamandras (Ambystoma spp), y los ajolotes mexicanos (Seridon mexicanum). La mayora de especmenes de laboratorio se capturan en estado salvaje, pero existen varias colonias de cra. La desnutricin, parasitismo y ciertas enfermedades bacterianas y vricas son

ms frecuentes. La buena alimentacin y atencin adecuada son las claves esenciales en el manejo de los anfibios destinados a su utilizacin en el laboratorio.

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RATN

El ratn es el animal ms utilizado en las pruebas de diagnstico e investigacin. Su pequeo tamao, su vida relativamente corta, su alta eficiencia reproductiva, su adaptacin a la explotacin en grandes colonias, el conocimiento completo de su genoma, su amplia variabilidad gentica y susceptibilidad a agentes qumicos y microbianos hacen de este animal un modelo apropiado para investigacin en diversas disciplinas, tales como embriologa, etiologa, gentica, gerontologa, microbiologa, oncologa, etc.(2)

TAXONOMA (2)

Clase:

Mammalia

Familia: Muridae Gnero: Mus Especie: Mus musculus.

VENTAJAS DE SU USO COMO ANIMAL DE LABORATORIO (1)

De fcil cuidado y mantenimiento, por su pequeo tamao. Bajos costo de manutencin. Cepa definida. Diversidad de caractersticas especificas que sirven como modelo. Eficiencia reproductiva. Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en ensayos crnicos de toxicologa, microbiologa, virologa, farmacologa, etc. Corto tiempo de generacin.
DESVENTAJAS (1)

Dificultad en la recoleccin de material biolgico. Dificultad la administracin de drogas. Dificultad en las tcnicas quirrgicas.

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BIOLOGA GENERAL

El ratn domestico es una especie cosmopolita, comensal del hombre. Se adapta ampliamente a una gran variedad de condiciones ambientales, desde zonas muy fras hasta regiones tropicales. En general, las especies prefieren lugares ms secos que hmedos. (2) Es de hbitos nocturnos. Posee un agudo sentido de la audicin y responde a un amplio rango de secuencias ultrasnicas; por ejemplo cuando la hembra sale del nido, sus cras emiten sonidos ultrasnicos que inmediatamente son percibidos por la madre. En el laboratorio, los ratones se alteran por sonidos de muy baja frecuencia, por lo que hay que tener cuidado con los equipos que se utilizan. (2) El sentido del olfato est muy desarrollado, no solo para detectar alimentos y depredadores, sino tambin para establecer un orden social. (2) La visin es muy pobre, la retina tiene muy pocos conos y, por lo tanto, no pueden percibir los colores. (2) El sistema social depende de la densidad de la poblacin; viven en grandes colonias y el rango est bien establecido. (2) Por su peque tamao corporal son muy susceptibles a cambios ambientales, an a pequeos cambios de temperatura (2-3C) que pueden afectar su temperatura corporal y modificar su fisiologa. (2) El tamao del ratn adulto vara entre 15 y 12 cm desde la punta de la nariz hasta la punta de la cola. El recin nacido pesa entre 1 hasta 2g, y gana rpidamente peso durante la lactacin. (2) En general, los ratones hbridos, producto del cruzamiento entre dos cepas puras, viven ms que los parenterales. Las cepas de ratones de corta vida, mueren entre el quinto y decimosexto mes, mientras que las cepas longevas llegan hasta los 24 y 36 meses. (2) El ratn de laboratorio es un animal sociable y se mantiene, habitualmente, en grupos sin ningn inconveniente; stos deben formarse de inmediato antes del

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destete; sin embrago, los machos de ciertas cepas como, por ejemplo, HRS/J, BALB/cJ, SJL/J, comienzan a demostrar su agresividad entre la sptima y dcima semana de edad, aun cuando estos grupos se hallan establecido en el momento del destete. Las hembras generalmente no son agresivas, aun cuando se hayan agrupado siendo adultas. El ratn normalmente divide su caja en reas especficas para dormir, comer, orinar y defecar. Las hembras ms parturientas construyen un nido y permanecen mucho tiempo cerca de l o sobre las cra. Tanto la hembra como el macho limpian a los neonatos y evitan que otras cras se acerquen. (2)

PRODUCCIN Microambiente Los ratones que se utilizan con propsitos experimentales se alojan tanto en cajas metlicas como de material plstico provisto de tapas de alambre galvanizado o de acero inoxidable. (2) En el caso de los ratones adultos (con un peso aproximado de 30g) se requiere una superficie mnima de 97cm2 por animal, la cual debe aumentarse hasta 390 cm2 en el caso de las hembras con la camada. En todos los casos, la altura de la caja no debe ser inferior a 15cm. (2) El lecho debe estar libre de polvillo, ser adsorbente, atxico, no producir alergias y ser esterilizable. En este sentido cabe sealar como el ms adecuado la viruta de madera de lamo. La limpieza y desinfeccin de las cajas debe realizarse como mnimo una vez por semana, dependiendo de la cepa, de la densidad animal y de la ventilacin del ambiente. (2) El agua se les administra en mamaderas o en bebederos automticos. Se puede esterilizar por medio de autoclave o por filtracin. El alimento se brinda ad libitum y generalmente se utilizan preparados comerciales. Para animales SPF, axnicos y gnobiticos, ste debe ser estril. La esterilizacin se puede realizar por medio de radiacin o autoclavado; en este ltimo caso, el alimento debe ser reforzado ya que el calor destruye gran parte de los nutrientes. (2)

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Macroambiente La temperatura de las habitaciones debe mantenerse entre los 18 y 25C, siendo la ms adecuada entre los 24C +/- 1 y la humedad relativa entre 40 y 70%. La ventilacin es importante para controlar la humedad, el calor y los gases txicos. Se deben realizar entre 10 y 14 recambios de aire/hora, dependiendo de la carga animal. La iluminacin es importante para la regulacin del ciclo estral y reproductivo. Se recomienda un ciclo de 12 horas luz/12 horas oscuridad. Los ratones son muy sensibles a los ruidos, por lo que estos deben evitarse cuando se trabaja con ellos. (2)

MANEJO Los ratones jvenes y adultos se sujetan y levantan tomndolos por la base de la cola o por el cuerpo, con los dedos o con pinzas pequeas, teniendo especial cuidado con los agresivos ya que pueden darse vuelta y morder. Una vez que se lo sujeta por la cola se lo examina. Luego se lo toma por la piel laxa del cuello y las orejas con los dedos ndice y anular, y se le da vuelta sujetando la cola entre el meique y la palma de la mano. En ningn caso se le debe sujetar por la punta de la cola, ya que podra desprenderse la piel de dicho apndice. Las pinzas son excelentes para manipular ratones salvajes y agresivos, tambin para tomar a los recin nacidos. (2)

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Identificacin Existe una gran variedad de mtodos para identificacin: permanentes y temporarios. Los mtodos de identificacin permanente incluyen caravanas de metal en las orejas, muescas, recorte de cola, tatuajes y marcas. La identificacin temporaria se puede lograr tiendo el pelo de los ratones albinos, cortando el pelo o haciendo marcas en la cola con tinta indeleble. Los dos primeros mtodos permiten la identificacin por 1 2 semanas y las marcas de tintas desaparecen en 1 2 das. (2) Sexado Los machos pueden reconocerse al momento del nacimiento por la mayor distancia anogenital (1,5-2 veces mayor que en la hembra), los testculos de color plido, visibles a travs de la pared abdominal, ye el mayor tamao de la papila genital. La hembra, a los 9 das de edad tiene las mamas ostensibles. (2)

ADMINISTRACIN DE FRMACOS Y OTROS COMPUESTOS Tpica La aplicacin tpica de los compuestos se realiza sobre la piel depilada de la cola, las orejas o el cuerpo en ratones normales o desnudos. ste es un procedimiento fcil, se debe evitar el lamido para que el animal no ingiera los compuestos aplicados. Se han desarrollado diversos dispositivos para ste propsito, como por ejemplo, el collar isabelino, bandas y tubos de vidrio o acrlico para la cola. (2) Oral La forma ms fcil de administrar un compuesto por va oral es mezclndolo con el alimento o con el agua de bebida, pero si le dan un sabor desagradable, se reduce considerablemente su consumo. Para asegurar la administracin oral de un compuesto se requiere una tcnica de infusin intragstrica contnua. Se debe tener un amplio conocimiento de la anatoma de la zona orofarngea, ya

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que el orificio esofgico es difcil de localizar en los ratones vivos. Una vez inmovilizado el ratn, se introduce la sonda lenta y suavemente a lo largo de la rama mandibular izquierda. En este punto, el ratn comienza a tragar y la sonda se inserta dentro del esfago. (2) Subcutnea La inyeccin subcutnea (en un volumen de 1-2ml en el ratn adulto) se realiza en la piel laxa del cuello o el flanco usando agujas 26 gauges. La aguja se inserta en la piel paralela a la columna vertebral. (2)

Intradrmica La inyeccin intradrmica se usa para evaluar reacciones inmunolgicas o para medir respuestas inmunes. Se pueden inyectar 0.05 ml en el pulpejo palmar o plantar. La aguja utilizada para esta maniobra es de 27 gauges. (2) Intracraneal Esta va se utiliza para el ensayo de virus neurotrpicos; como por ejemplo el virus rbico. Se utilizan animales lactantes. La guja debe ser de 27 gauges para neonatos y e 24 gauges para lactantes; sta se introduce bajo la piel en la regin central del hueso parietal lateralmente a la sutura central, lo que evita alcanzar el seno venoso transverso; luego se la rota lentamente hasta atravesar el hueso y se avanza hasta una profundidad de 1 a 4 mm, dependiendo del tamao del ratn. Se pueden inyectar 0.015 y 0.03 ml en neonatos y lactantes, respectivamente. Las soluciones deben tener una temperatura aproximada a la del cuerpo, y luego de la inyeccin, los animales deben mantenerse en lugares templados para reducir la posibilidad de un shock trmico. (2) Intramuscular Esta va es muy poco usada, debido a la pequea masa muscular del ratn. Las soluciones acuosas tienen la misma absorcin por la va subcutnea, pero se utiliza para las sustancias oleosas, siendo el volumen del inculo de 0.05 ml.

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Se realiza en la regin anterolateral del muslo (grupo de msculos cudriceps femorales), con agujas de 22 a 26 gauges. (2) Intraperitoneal Para evitar lesionar el hgado, el estmago y el bazo, la inoculacin intraperitoneal debe realizarse en el cuadrante derecho inferior del abdomen. El ratn se coloca en decbito dorsal y levemente inclinado hacia craneal, para que se produzca el desplazamiento visceral; luego se inserta en la piel una aguja de entre 23 y 26 gauges, se lleva hacia craneal 1 2 mm y se la introduce perpendicularmente en la cavidad abdominal; esto se hace para evitar que lo orificios de inoculacin coincidan y salga el inculo por ellos. Se puede inocular por esta va hasta 1 ml. (2) Intravenosa Esta inoculacin se realiza en las venas laterales y dorsales de la cola. Es relativamente fcil, inmoviliza previamente al ratn y se dilatan las venas con alcohol o calor. En los ratones albinos, las venas se visualizan fcilmente, siendo ms difcil en los animales con manto de color. La agujas a utilizar dependen del tamao del ratn; las medidas habituales, varan entre 26 y 30 gauges. Otros sitios para la inoculacin intravenosa son la vena yugular externa, la vena metatarsiana dorsal, la vena sublingual, y el plexo oftlmico. El volumen a inocular es de 001 a 0.2 ml. (2)

EXTRACCIN DE SANGRE Se han desarrollado varias tcnicas para la recoleccin de sangre en ratn. Seno orbital La sangre venosa se obtiene fcilmente del seno orbital, se sujeta al ratn y se retira suavemente la piel hacia caudal hasta la protucin del ojo.

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Con una pipeta Pasteur o un tubo capilar se inserta en el ngulo medial de la rbita, rotando con suavidad hasta penetrar el seno orbital; normalmente el ojo no se lesiona, pues el seno orbital se encuentra por debajo de l. El tuvo o la pipeta se llena por capilaridad rpidamente. Pueden obtenerse pequeas cantidades de sangre entre 30 y 80 l en ratones jvenes de 14-16 das de edad. De ratones se obtiene mayor cantidad de sangre, hasta 0.5 ml, utilizando el tubo o la pipeta con anticoagulante. (2) Venas y arterias caudales Se obtiene sangre en pequeos volmenes sencillamente por amputacin de la punta de la cola, y se la recolecta en tubos capilares heparinizados. (2) Intacardiaca Se pueden obtener mayores volmenes de sangre directamente por puncin cardiaca, utilizando diferentes tcnicas. Para realizar la tcnica de puncin cardiaca se coloca al ratn en decbito dorsal, se ubica la apfisis xifoides y se inserta la aguja perpendicularmente a la columna vertebral; si se punza el corazn, se percibe el choque cardiaco, se aspira con el mbolo y comienza a fluir la sangre (las medida de las agujas deben ser de 20 a 25 gauges). El volumen de sangre depender del peso corporal del ratn, se puede sangrar el 1% del peso corporal cada dos semanas, el 3% del peso corporal 1 vez al mes y el 6% es sangrado a blanco. Por ejemplo, si se quiere obtener un volumen del 1% del peso de un ratn de 20g, se sangran hasta 0.2 ml, del 3% se sangran hasta 0.6 ml y del 6% se obtienen hasta 1.2 ml. (2)

EUTANASIA Se conoce con este nombre el sacrificio deliberado de un animal, siguiendo una tcnica indolora, rpida que permita un trnsito tranquilo desde la plena conciencia hasta la muerte.

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Entre

los

mtodos

ms

empleados

se

encuentra

la

administracin

intraperitoneal, intravenosa e intracardiaca de una sobredosis de un anestsico inyectable. Se calcula una dosis de 3-4 veces mayor que la normal. Otro mtodo de eutanasia se realiza mediante la dislocacin cervical, slo, para un pequeo nmero de animales. (2)

RATA
ORIGEN

La rata de laboratorio es la variedad domstica de la rata noruega marrn, la cual se encuentra en climas fros, templados y subtropicales de Europa y Norteamrica. En la actualidad es una especie cosmopolita. (2)

TAXONOMA

Clase: mamfero. Orden: Rodentia. Familia: Muridae Gnero: Rattus Especie: norvgicus

BIOLOGA GENERAL La rata es una animal con alta adaptabilidad; al igual que el ratn, es capaz de sobrevivir a una amplia variedad de condiciones climticas y de hbitats. Puede ser solitaria o vivir en grandes grupos. En la naturaleza compite con el hombre por el alimento. El hacinamiento combinado con la escasez de alimento puede llevarlas a competir entre ellas, sucumbiendo las ms dbiles. En el laboratorio, el canibalismo se evita alimentndolas ad libitum. (2)

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Los sentidos del olfato y la audicin son muy desarrollados, pueden or altas frecuencias, ms de 80Khz en el rango ultrasnico. La mxima sensibilidad de audicin se sita en un rango de 15 a 25 KHz. La visin de la rata es pobre; su retina est compuesta casi enteramente de rodocitos y no muestra clulas de Purkinje. La rata es ciega a la luz de longitud de onda del rojo; la visin en colores no existe, pero es eficiente ante la luz de baja longitud de onda. Los receptores tctiles estn particularmente bien desarrollados sobre la cabeza, alrededor del hocico, en los pulpejos palmares y plantares y sobre la cola. Esta es utilizada por el animal para orientarse sobre el terreno y para el equilibrio durante el salto; adems sirve como principal rgano de regulacin de la temperatura. La rata tiene gran instinto exploratorio, pero es cautelosa y evita el peligro. Acostumbra a repetir estmulos por lo que puede ser entrenada para tolerar procedimientos no placenteros, tales como inyecciones. (2) Es capaz de controlar su consumo de alimento dejndolo o almacenndolo en la caja, pero puede volverse obesa si la caja no es suficientemente grande para hacer ejercicios. En la naturaleza, en condiciones de alimentacin o espacios restringidos, la rata roe todo, an metales como el hierro lo cual hace que sus dientes incisivos se afilen. Habitualmente va en busca de alimento y vuelve a su hbitat luego de una excursin nocturna. (2) Normalmente estos animales vives ms de 3 aos si estn en buen estado de salud, pero la mayora de ellos, en particular cuando son convencionales, presentan generalmente enfermedades respiratorias progresivas, por lo que su vida se reduce a 1 ao o ao y medio. (2) Los machos son ms agresivos que las hembras, pero, si se manejan adecuadamente, la agresin es rara, de forma que, al contrario de lo que ocurre con los ratones, pueden permanecer alojados en grupo; pero si hay peleas, el perdedor generalmente resulta herido o muerto. Si se observan signos de agresividad, por ejemplo lesiones en el dorso o en la cola, hay que sacar de la caja, tanto al agresor como al agredido. (2) Los machos y las hembras pueden mantenerse en la misma caja, pero es aconsejable sacar al macho antes del parto y durante la lactacin. Previo al

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parto, la hembra prepara el nido. El neonato permanece all cubierto con el material de la cama para mantener la temperatura corporal. Es muy raro que se produzcan fenmenos de canibalismo; ste puede ser indicador de mal manejo de la colonia o cuidados insuficientes. Si a estos animales se los maneja mal o hay alguna deficiencia nutricional, por ejemplo, avitaminosis, pierden su docilidad y atacan a las personas que los manejan. (2) Son de hbitos nocturnos, por lo que se tornan muy activos durante la noche.

PRODUCCION

Microambiente Las cajas o jaulas pueden ser de plstico o metlicas, con tapas soldadas de acero inoxidable o alambre galvanizado. En caso de emplear alambre, la malla no debe tener una seccin superior a los 0.85 cm 2. Los animales adultos con un peso corporal aproximado de 300g, tienen una exigencia de espacio de alrededor de 250 cm2. Las hembras con sus cras necesitan un espacio de 1000 cm2. (2) A medida que van creciendo y luego del destete, si se alojan en grupos numerosos, pierden peso debido a la densidad animal. Las ratas no poseen glndulas sudorpara, slo hay unas pocas en las almohadillas plantares. Al igual que en el ratn, la cola es la principal fuente de prdida de calor y por mecanismo de vasodilatacin de las venas caudales se produce la disipacin del calor hacia el medio ambiente. Si las ratas estn ascinadas y la temperatura ambiental es elevada, falla el sistema termorregulador, pero tienen un ltimo mecanismo de defensa, representado por una hipersalivacin determinada por el gran desarrollo de las glndulas salivales, que les permite cubrir todo su cuerpo con saliva; finalmente, si la temperatura sigue aumentando, la rata muere rpidamente de hipertermia. (2) El lecho debe tener las mismas caractersticas que para el ratn. La higiene de las cajas o jaulas se realiza con la frecuencia que se estime necesaria, con el objeto de mantener siempre a los animales limpios y secos. En general, de 1 a

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3 cambios por semana es suficiente, dependiendo de la densidad de animales por jaula y de la ventilacin. (2) La alimentacin es ad libitum, igual que en el ratn. En cuanto al agua, esta se suministra en bebederos automticos o en mamaderas. (2) Macroambiente La temperatura en las habitaciones debe mantenerse entre los 18 y 25C, aunque la ideal se sita en 24 +/- 1C. La humedad relativa debe ser entre el 50 y 60%; por debajo de esta y sumado a una temperatura elevada se produce el fenmeno de la cola anillada o ring tail (constricciones localizadas de la cola), sobre todo en animales jvenes. La ventilacin es muy importante; deben establecerse entre 10 y 15 cambios de aire por hora, ya que la concentracin de amonaco irrita el tracto respiratorio de las ratas. (2) Este animal es muy sensible a los polvos ambientales (aserrn, polvillo de los alimentos y medio ambiente) y gases (amonaco y sulfurados). Una de las primeras respuestas hacia estas irritaciones es el aumento de la actividad de las clulas caliciformes del epitelio traqueal y bronquial. (2) Tanto la irritacin interna como la crnica producen una firme acumulacin de tejido linftico a nivel pulmonar, de la bifurcacin bronquial, de los bronquiolos, y alrededor de los vasos sanguneos. En esta situacin, una infeccin como, por ejemplo, Micoplasama spp, Pasteurella spp, Virus Sendai, etc., puede llevar a una enfermedad pulmonar progresiva, de la cual el animal nunca se recupera completamente. El filtro de aire ofrece la posibilidad de prevenir estos inconvenientes. (2) Los ruidos afectan ms a las ratas que a los ratones, y cuando son muy intensos provocan fenmenos de canibalismo.

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La iluminacin es tan importante en la rata como en el ratn, especialmente en la regulacin del ciclo estral y reproductivo. Se recomiendan 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. (2)

MANEJO

La rata posee un temperamento tranquilo, an cuando se la someta a tratamientos continuos o no se la maneje por largos periodos. (2) Estos animales son pacficos si se los manipula correctamente. El adulto no debe levantarse por la cola, ya que esto le puede causar estrs. El pnico que sufre hace que el animal gire y se desprenda la piel de ste apndice. (2) Debe sujetarse firmemente por el cuello y el dorso con los dedos pulgar, ndice y medio, y con el anular y meique debajo del abdomen. En sta posicin, las ratas estn ms relajadas. Si el animal es grande, por ejemplo, ms de 250g, se usa la otra mano. (2) El xito de este mtodo depender de la presin aplicada inicialmente al tomar la rata: mucha presin dificulta la respiracin y si no es suficiente el animal intentar huir. (2) Hay que tener mucho cuidado cuando la hembra est en avanzado estado de preez, dndole sostn en los cuartos posteriores. Cuando se manejan las ratas con camada siempre hay que esperar que la madre salga del nido para tomarla. Para manejar a las cras se debe sacar a la madre previamente. (2) Sexado Los testculos evidentes a edades muy tempranas, especialmente si el animal se sostiene en forma vertical, lo que produce el paso de dichos rganos al escroto. Los machos poseen, asimismo, una amplia papila genital y una distancia urogenital mayor que la de las hembras (5mm en los machos y 2.5 mm en las hembras a los 7 das de edad). Entre los das octavo y decimoquinto es posible distinguir las mamas en las hembras. (2)

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ADMINISTRACIN DE FRMACOS Y OTROS COMPUESTOS Tpica Igual que en el ratn. (2) Oral Aquellas sustancias altamente palatables pueden administrarse mezclndolas con el agua de bebida o alimento; las no palatables pueden no administrarse por medio de sondas gstricas. Una sonda adecuada debe tener un dimetro de 15 a 16 gauges y de 10 a 12 cm de largo. para introducir la sonda, la rata debe asirse firmemente por la piel del dorso y el cuello; esto asegura que la cabeza y el cuello queden extendidos formando una sola lnea. Luego la sonda se introduce en la boca a travs del espacio interdental y avanza lentamente, rotando con suavidad para que sea fcil el pasaje dentro del esfago y el estmago. Hay que tener mucho cuidado de que la sonda no penetre por la trquea. (2) Subcutnea La tcnica es igual a la del ratn. La cantidad del inculo vara ente 1 y 2 ml. Intradrmica El sitio de inyeccin se ubica generalmente en la `piel laxa del dorso, previa depilacin de la zona. Se utiliza una aguja con un dimetro de 26 gauges y se la inocula paralela a la superficie de la piel. La aguja debe avanzar unos pocos milmetros, teniendo cuidado de no administrar el inculo por va subcutnea. La cantidad a inocular es de alrededor de 1l. (2) Intraperitoneal La tcnica utilizada ya fue descrita en el ratn. El volumen a inocular es de 2 a 3 ml. (2) Intramuscular El sitio de eleccin para esta va son los cudriceps femorales, o los trceps.

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La inyeccin en los miembros posteriores puede causar molestias al animal. Hay que tener cuidado de no daar el nervio citico. La inoculacin debe realizarse en pequeos volmenes para no causar irritacin ni dolor; se inocula entre 0.1 y 0.2 ml. (2) Intravenosa Los vasos ms utilizados son las venas laterales de la cola, que son fciles de ver en los animales jvenes. En las ratas adultas es ms dificultoso identificarlos. Hay que entibiar la cola, con una lmpara, o sumergida en agua tibia, para dilatar los vasos y as visualizarlos. La cantidad de inoculacin es de 1 ml, y debe administrarse lentamente con una aguja de hasta 23 gauges. (2) Intracardiaca Igual que en el ratn. (2)

COBAYO
ORIGEN

El cobayo es originado de Sudamrica y fue introducido en Europa por los espaoles en la mitad del siglo XVII, como mascota. No se sabe con exactitud la fecha cierta en la que se lo us por primera vez como animal de experimentacin, pero se estima que fue a comienzos del siglo XIX. No se conoce el origen exacto del cobayo (Cavia porcellus), pero se sabe que fue domesticado por las culturas preincaicas. (2)

TAXONOMA Clase: mamfero. Orden: Rodentia. Familia: Cavideae

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Gnero: Cavia Especie: porcellus

BIOLOGA GENERAL Son animales rpidos, que no hace cuevas, pero en la naturaleza viven en pequeos grupos, de 5 a 10 individuos, en cueva o en refugios abandonados por otros animales. Se adaptan rpidamente a la vida en cautiverio y son sociables. Cuando swe sujetan o transportan hay que tener en cuenta que, a pesar de no morder y parecer muy dciles, son muy sensibles a los movimientos y pueden quedar estticos durante 30 minutos o ms si sienten miedo o temor. (2) El largo del cuerpo, incluida la cabeza, es aproximadamente de 140 mm al nacer y de 310 mm en los animales adultos. Estos ltimos pesan entre 700 y 1300 g. No tienen cola y poseen 3 dedos en las patas traseras y 4 en las delanteras. La longevidad es de entre 4 o 5 aos, pero se puede acortar 2 aos en la hembra reproductora. (2) En los tipos salvajes, el pelaje es rstico, y el pelo, largo y grisceo, o amarronado. Sin embargo, los cobayos domsticos tienen el pelo largo y fino, y ste pude presentar remolinos con una gran variedad de colores. Son muy tmidos y generalmente dejan sus moradas a la noche para buscar alimento. Comen una amplia variedad de vegetales; les gusta especialmente la alfalfa. (2) Los machos son ms agresivos que las hembras, pelean vigorosamente, en particular en presencia de las hembras en estro o cuando se tiene que establecer la dominancia en una tribu. Esta est influenciada por la receptividad de una hembra con la cual el macho est asociado. (2) La vocalizacin parece jugar un papel importante en el comportamiento social de los cobayos y llama la atencin de los cuidadores. Se han registrado al

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menos 11 vocalizaciones diferentes, algunas de las cuales no son audibles para el humano. (2) Es frecuente que los animales de ms edad agredan y muerdan por lo comn en las orejas a los animales ms jvenes y/o subordinados. (2) PRODUCCIN Microambiente Para el alojamiento de esta especie hay una gran variedad de habitculos, incluyendo jaulas en estantes fijos o racks mviles. Las jaulas se presentan en una amplia diversidad de cajas y materiales: jaulas de metal, y plsticas, con piso slido o de alambre, o con piso slido y lecho, lo que permite a los animales vivir en un ambiente clido. La limpieza es trabajosa por el tamao de los cobayos, ya que para realizarla stos deben trasladarse a otras jaulas, lo cual es ms problemtico cuando la hembra est preada o con cras pequeas. (2) Lo que se utiliza actualmente son las jaulas con piso de alambre y bandeja inferior recolectora de acero inoxidable. No se pierde tanto tiempo en la limpieza y tampoco se cambia la cama tan frecuentemente. (2) Los animales adultos deben disponer de una superficie de 652 cm 2/ animal. El lecho puede ser de viruta de madera, tiras de papel absorbente o diversos productos vegetales, pero no debe ser palatable y debe ser abundante. Los bebederos pueden ser los que se utilizan para la rata y el ratn, pero el cobayo tiende a tomar agua con el alimento en la boca, lo que ocasiona que ste se introduzca dentro del bebedero y lo obture, por lo cual, en el caso de utilizar bebederos automticos, es importante controlarlos diariamente. (2) El alimento se le administra ad libitum en comederos tipo tolva, delante de la jaula, donde solo pueda introducir la cabeza, para evitar que defeque sobre el alimento. El cobayo es capaz de sintetizar vitamina C, por lo que requiere una dosis alimentaria diaria exgena de 10 mg po kg de peso vivo de cido ascrbico. Si los alimentos no lo contienen, debern aadirse 200 mg/ litro de

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vitamina C en el agua de bebida, teniendo en cuenta que la actividad de dicha vitamina en los bebederos disminuye en un 50% en el plazo de 24 horas debido a que se oxida n contacto con el aire. (2) Macroambiente La temperatura adecuada se encuentra en los 24 +/- 1C. la ventilacin es de 8 a 20 recambios de aire por hora. Las altas temperaturas ambientales, sin la correspondiente renovacin de aire, predisponen a los animales a contraer enfermedades respiratorias. La humedad relativa debe oscilar en funcin de la temperatura entre 30 y 70%. Los cobayos son muy sensibles a los ruidos, al igual que las otras especies. (2) El periodo luz/oscuridad debe ser de 12 a 16 horas luz/12 a 8 horas oscuridad. MANEJO Los cobayos son animales muy tmidos y nerviosos. Cuando el operador se aproxima, se asustan y corren a su caja o jaula, lo cual dificulta su sujecin. El animal debe sujetarse con ambas manos; una rodea las escpulas, y la otra soporta el peso del tren posterior. Se deben tomar con firmeza. Hay que tener cuidado porque ste animal, a pesar de que rara vez muerde, posee dientes muy largos y filosos. Cuando se sujeta a las hembras preadas, debe hacrselo delicadamente, sosteniendo siempre el peso del tren posterior del animal con la mano abierta. (2) Identificacin No hay un mtodo ideal de identificacin. Se utilizan tatuajes en las orejas con letras de 0.5 por 0.25 cm, tintas negras para (2)

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CONEJO

El conejo existe como silvestre y domestico y se utiliza como productor de piel , carne, de laboratorio y como mascota. Es originario de la pennsula ibrica y de all se extendi a distintas partes del mediterrneo. (2)
TAXONOMA

Clase: mamfero Orden: logomorpha Familia: leporidae Gnero: oryctolagus Especie: cuniculus

PRODUCCIN

Microambiente: Lo mismo de un animal de laboratorio el animal debe de disponer de una rea de alojamiento apropiado a su tamao de peso vivo inferior a 2 kg, es aconsejable una superficie de 0.14 m2, para animales de hasta 5 kg, con un rea de 0.28 m2. Actualmente se usan jaulas metlicas, que son fcil mantenimiento; las medidas ptimas son de 45 cm de ancho por 61 cm de largo por 46 cm de altura. Su pared anterior debe estar provista de comederos tipo tolva y de bebederos de madera o automticos. El tamao de la maya de alambre debe de ser de 26mm para evitar lesiones en los tarsos. Los animales destetados son trasladados a jaulas de 1.2 m de ancho por 1.5m de largo, por 0.7 de altura, cada jaula puede albergar cerca de 20 25 animales recin destetados.

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Macroambiente:

Luz natural, las horas de luz del da; temperatura de 15 a 20 c, con una buen ventilacin, humedad del 50- 55 %, los ruidos se deben de evitar para no afectar la reproduccin y el cuidado de las cras. (2)

MANEJO

Sujecin y sexado: La sujecin debe ser suave pero firme, los conejos perciben la inseguridad y forcejean y pueden producirse heridas en el animal y el manipulador. En cuanto al sexado los machos presentan una abertura genital protuberante, sumamente marcada, en cambio las hembras tienen un apertura poco manifiesta; en los machos adulto es perfectamente visible de localizacin inguinal y carente de pelo. (2)

Identificacin: Se utilizan mtodos permanentes como el uso de tatuajes, muescas, clips o botones de color con un nmero de cdigo en la oreja. Estos ltimos no se recomiendan ya que suele desengancharse y lastimarse. Para los recin nacidos se recomienda el marcado por muescas. (2)

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ADMINISTRACION DE FARMACOS Y OTROS COMPUESTOS

Sub cutnea: se inocula en la piel o el flanco. Intravenosa: en la vena marginal previamente se debe pasar alcohol para producir una previa vasodilatacin. Intraperitoneal e intracardiaca: igual que las dems especies. (2)

HAMSTER

Es originario del orine medio y es el ms usado como animal de laboratorio.


TAXONOMA:

Clase: mamfero Orden: Rodentia Familia: Cricetidae Gnero: Mesocricetus Especie: auratus

El hmster adulto puede llegar a pesar hasta 100 gr, con una longevidad de entre 18 meses y 2 aos, aunque existe constancia de que hay animales que han superado los rangos. (2) Bajo ciertas condiciones de temperatura por debajo de 4c, o ante las disminucin de alimento o alteracin de fotoperiodo, los hmster pueden entrar en un periodo de hibernacin, que en cualquier caso es reducido. (2)

Como caracterstica particular el hmster presentan formaciones anatmicas ubicadas en la zona de la articulacin mandibular, en formas de bolsas, de tejido epitelial altamente vascularizado, denominados abazones, que sirven para el transporte de sustancias alimenticias o de sus cras cuando la hembra construye un nuevo nido. (2) El hmster presenta condiciones inmunolgicas particulares, razn por la cual se le utiliza en estudias de trasplantes tumorales. Tambin en estas especies
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se puede producir experimentalmente caries dentales con cierta facilidad, por lo que son un buen modelo odontolgico. (2) Se han realizado muchos estudios sobre el comportamiento de este animal, en especial en la conducta maternal y en la psicolgica. El alojamiento es similar al de las ratas y los ratones, y se pueden colocar varios animales en una misma caja siempre y cuando se hayan agrupado despus del destete ya que hay agresin en animales adultos. (2)

PRODUCCION

Microambiente: El hmster se aloja en cajas plsticas, de suelo continuo, dotadas con tapa de acero inoxidable, cuya altura mnima debe ser de 15 cm. Puede presentar un ngulo para colocar los alimentos o apoyar el bebedero. En general los equipos de alojamiento de las ratas se acoplan perfectamente para alojar esta especie, cabe recalcar que el hmster roe el plstico, la madera y los metales blandos, de modo que hasta cierto punto, es relativamente fcil que escapen de las jaulas mal construidas o mal aseguradas. (2) La superficie requerida de los animales destetados es de 65cm2; paro los de entre 5 semanas y 3 meses, de 97cm2; la hembra con cra requiere de 970cm2. La eleccin de caja depender del sistema de crianza que se utilice. El animal necesita construir su nido por lo que requerir de material suficiente para este fin, notablemente se utiliza viruta como cama y otros productos vegetales (cascara de arroz, girasol, etc.). (2) Se alimentan de un concentrado comercial el cubra con sus necesidades nutricionales y que se suministra ad libitum, al igual que el agua de bebida. Las cras empiezan a beber agua a los 10 das de nacidos, por lo que los

bebederos deben de colocarse en una altura adecuada para que los alcancen. (2)

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Macroambiente:

Las condiciones ambientales para el mantenimiento de ratas y ratones son tambin las adecuadas para estos animales, aunque existen variaciones estacionales en cuanto al ciclo reproductivo. La temperatura ms adecuada para estas especies es de 18-22 C, siendo la ms recomendable 22 +/- 1 C; otra variable es la iluminacin. En efecto por debajo de las 12 horas diarias de luz para las hembras y 14 para los machos. (2) Se produce un bloqueo de la secrecin de gonadotropinas hipofisarias, lo que se traduce en prolongados periodos de anestro y atrofia testicular respectivamente. La humedad relativa debe oscilar entre 30% - 70% y en cuanto a la ventilacin debe haber entre 10-15 recambios de aire por hora. (2)

MANEJO

Sujecin y sexado: Si se los maneja en forma suave y no se les somete a situaciones de estrs, los animales son dciles. Para sujetarlos o levantarlos, es suficiente introducirlo en un recipiente de pequeo tamao, se recomienda utilizar guantes. El sexado en el macho se observa el margen perineal rodeado por la presencia del saco escrotal, mientras que la hembra presenta una forma puntiaguda; otro rasgo distintivo es la mayor distancia ano-genital y la existencia de una papila ms protuberante en el macho. (2)

Identificacin: Se puede identificar marcndolos en las orejas, al igual que las ratas, o con tatuajes, excepto los animales de piel oscura. (2)

ADMINISTRACION DE FARMACOS Y OTROS COMPUESTOS.

Las vas de administracin son la misma para la rata y el ratn. (2)

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EUTANASIA

Se realiza de la misma manera tanto para la rata como para el ratn. (2)

ANESTESIA EN PEQUEOS ROEDORES DE LABORATORIO

Los pequeos animales de laboratorio se anestesian tanto para realizar procedimientos experimentales como para proporcionar la sujecin humanitaria no traumtica y eliminar la percepcin del dolor durante los procedimientos quirrgicos. (2) Los frmacos deben asegurar una analgesia efectiva y una recuperacin sin accidentes, libre de efectos secundarios desagradables. (2) Los problemas que surgen cuando se anestesian a los roedores de laboratorio estn relacionados con el pequeo peso corporal de esta especie, con su pequeo tamao, por lo que son susceptibles a la hipotermia y por limitacin que existe a la administracin de frmacos va intravenosa, debido al tamao de las venas superficiales. (2) En las colonias de ratas y ratones convencionales, la aparicin de una enfermedad pulmonar subclnica puede causar un fallo respiratorio durante el periodo de anestesia o dar lugar al desarrollo de enfermedades respiratorias graves en el periodo posoperatorio, por eso es tan importante mantener a los animales libres de sus microorganismos patgenos especficos. (2)

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RECOMENDACIONES PARA ESPECIFICACIONES SOBRE ANIMALES EN LA REDACCIN DE TRABAJOS CIENTIFICOS

Todo informe de los resultados de estudio en los que se utilizan animales debe incluir suficiente informacin de estos y sobre las condiciones en que fueron mantenidos estos, de manera que el lector est en condiciones de interpretar, compara o extrapolar los resultados conociendo la manera en la quela investigacin se llevo a cabo. (3) La investigacin en ciencias biomdicas est basada en la acumulacin gradual de conocimientos obtenidos, ingresando y comparando datos experimentales provenientes de distintos lugares de laboratorio. Las

experiencias se podrn incorporar al intelecto solo si se conocen las condiciones bajo las cuales se ha realizado y las caractersticas de los modelos utilizados. (3) Cuando la base de un experimento biolgico es el animal de laboratorio, este tiene sus propios patrones y particularidades especficas siendo indiferente el hecho de que se lleve a cabo con el animal propiamente dicho o en rganos de tejidos del animal. (3) La informacin que debe proporcionarse sobre los animales en los trabajos cientficos deben de incluir la designacin de la cepa o raza utilizando la nomenclatura internacional, el origen, la categora gentica, el sexo la edad y el pesos al comenzar la experiencia; la categora microbiolgica, incluyendo las especificaciones de los microorganismos presentes o ausentes en el animal; el mtodo de transporte, el de cuarentena de adaptacin o de aclimatacin. Se deben definir las medidas que se instrumentaran para mantener el estatus microbiolgico y el equipamiento destinado al alojamiento, incluyendo el tipo y modelo de caja o jaula; tambin se deben especificar condiciones ambientales de temperatura, humedad iluminacin y tambin la alimentacin. (3) Por razones ticas se deber incluir el nmero de animales utilizados la duracin total, el intervalo de tiempo entre el muestreo y el procesamiento de la muestra y los pre-tratamientos a que fueron sometidos los animales. (3)

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ALTERNATIVAS AL USO DE ANIMALES DE LABORATORIO El uso de los animales ha sido fundamental para el desarrollo de la investigacin biolgica y biomdica. Para garantizar la mxima calidad y seguridad de los productos de consumo es necesario probarlos con seres vivos. Sin embargo, su uso requiere una justificacin vlida, cumplir una serie de requisitos y acuerdos universales y locales, y con la apropiacin de valores relacionados con el respeto, la dignidad, responsabilidad, justicia y equidad, los cuales deben ser evaluados por grupos interdisciplinarios desde la perspectiva tica. (3) Como respuesta a estas consideraciones surgi, desde hace ya ms de 50 aos, la necesidad de definir, crear y desarrollar mtodos alternativos al uso de animales de laboratorio, buscando reducir el nmero de animales utilizados y garantizar su bienestar. Estos acuerdos an no permean de manera suficiente a la comunidad latinoamericana, razn por la cual es necesario seguir buscando los mecanismos para su apropiacin por parte de la comunidad cientfica, los profesores y los encargados de definir las polticas de investigacin en nuestros pases. (3)

METODOS ALTERNATIVOS

Son mtodos y tcnicas en las que: 1) se incorpora un refinamiento de los procedimientos, de modo que se disminuye el dolor o malestar de los animales, asegurando su bienestar, 2) se reduce el nmero de animales estableciendo unas condiciones exigidas para su albergue y cuidado, 3) se reemplaza del uso de animales por sistemas que no requieren seres vivos, sin cambiar los resultados que podran generarse con su uso. El objetivo de estos mtodos es cumplir con el principio de las tres R, creado por Russell y Burch, que postula el concepto de ciencia humanitaria y sensible para el trabajo cientfico. (3) El concepto se origin en una proposicin hecha en 1954 por D. Hume, fundador de la Universities Federation For Animal Welfare (UFAW), organizacin que inici un estudio cientfico sobre tcnicas humanitarias en experimentos con animales de laboratorio. WM.S. Russell, zologo, y R.L.

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Burch, microbilogo, fueron los encargados de desarrollar el trabajo que llev a la publicacin de "Los Principios de las Tcnicas Experimentales

Humanitarias", en 1959. (3) Este principio busca garantizar el uso racional y respetuoso del animal experimental, reduciendo el nmero de animales usado en los proyectos de investigacin, definiendo para ello todas las condiciones genticas y medioambientales del animal (dramatipo); reemplazando el animal siempre que se posible por otro tipo de modelos (simuladores, modelos matemticos, cultivos de tejidos, etc.), y refinando los procedimientos de manipulacin mediante el estudio de su etologa (comportamiento), minimizando las molestias o el dolor que pueda sufrir y garantizando que los resultados de los proyectos de investigacin sean confiables. Esto se conoce como el principio de las tres R (reemplazo, reduccin y refinamiento). (3) Como resultado de esta definicin existe una gran variedad de tcnicas o abordajes (biolgicos y no-biolgicos) que pueden considerarse apropiados como alternativas, y que vienen siendo validadas por los mismos cientficos. Tambin ha tenido una influencia directa en los cambios al uso de los animales en docencia, reemplazndolos por otros modelos y ayudando a la mayor sensibilidad y respeto de los nios y estudiantes por los seres vivos y la naturaleza. (1) La aplicacin del principio de las tres R trae consigo una serie de ejercicios valricos que pueden servir como modelos para el estudio de escenarios alternativos de solucin de conflictos, adems de aquellos inherentes a la experiencia de la ciencia humanitaria. Esto ha llevado a sumarle otras erres como responsabilidad, rentabilidad, reproducibilidad, reconocimiento, etc. Si el investigador debe pensar y medir muy bien cada uno de los pasos y procedimientos involucrados en un proyecto de investigacin, para garantizar la validez y calidad de sus resultados, tambin debe actuar con responsabilidad, primero para no repetir proyectos ya realizados, lo que significa que debe establecer un estado del arte sobre el tema a tratar y justificar adecuadamente todo nuevo proyecto que contribuya al avance del conocimiento. Debe hacer acopio del principio de justicia, al racionalizar adecuadamente la inversin que

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la sociedad ha puesto en sus manos, para realizar slo aquellos proyectos que tengan pertinencia y relevancia para el conocimiento y para la comunidad. Al reemplazar el nmero de animales que utilizar en el proyecto, est expresando el respeto por los seres vivos, pues puede utilizar otras formas de trabajo sin alterar los resultados esperados; demuestra adems una actitud sensible frente al posible sufrimiento o malestar que pueda experimentar ese ser vivo que da su vida en favor de la ciencia. Cuando define los procedimientos de analgesia, eutanasia y bienestar debe estudiar previamente el comportamiento del animal, sus manifestaciones de tranquilidad, afectividad, estrs, miedo, angustia, dolor y malestar; es decir, debe analizar su etologa, contraponer estos principios contra sus requerimientos investigativos y, en ese momento, definir las condiciones de trabajo. Ello tambin le llevar a saber en qu condiciones se aproxima al animal, cmo desarrolla cada procedimiento sin alterarlo y tratando de hacer el bien a los animales, incluso en estas circunstancias. (1)

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CONCLUSIONES Los animales ms comunes usados en los laboratorios son en roedores (ratones, ratas, hmster, etc) aunque tambin tenemos chimpancs y ranas. Se considera que como todo procedimiento experimental causa un ataque al estado de bienestar animal, susceptible de causarle dolor, sufrimiento, angustia o agravio. Tiene como misin evidenciar o aclarar fenmenos biolgicos sobre especies animales determinadas.

El personal encargado de los animales deben ser instruidos, en el manejo y cuidado, para obtener resultados favorables sobre los estudios a realizar. Todo lo que le suceda al animal desde su nacimiento hasta su muerte debe ser preocupacin del investigador, ya que a lo largo de este lapso de tiempo se pueden introducir variables que afecten los resultados experimentales, para obtener resultados reproducibles se debe utilizar animales definidos y estandarizados.

Los animales de laboratorio pueden clasificarse en cinco grupos (animal haloxnico, animal miroxnico, animal gnotobitico con microbiota definida, animal heteroxnico, animal axnico). La importancia de la interpretacin de los resultados y la apreciacin de la extrapolacin de estos de una especie a otra depende del modelo experimental utilizado.

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BIBLIOGRAFIA

1. ALVARO QUEZADA SAPULVEDA, animal como sujeto experimental, aspecto tcnico y tico, Universidad de Chile, Primera edicin, 2007, pg. 225.

2. NESTOR OSCAR STANCHI, Microbiologa Veterinaria. ArgentinaBuenos aires, Primera edicin, 2007, Editorial Intermdica. 594 pginas.

3. Zuiga JM, Tur JA, Milocco SN, Pieiro R. Ciencia y Tecnologa en Proteccin y Experimentacin Animal, 2001, Ed. McGraw-Hill, Madrid Espaa.

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Ttulo

Revista biomdica: publicacin del Centro de Investigaciones Regionales "Dr. Hideyo Noguchi" y la Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Yucatn, Volmenes 10-11

Editor Procedencia del original Digitalizado

Ediciones de la Universidad Autnoma de Yucatn., 1999 Universidad de Texas 18 Abr 2008

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