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LA SEROLOGA Y LA LEISHMANIOSIS CANINA Llus Ferrer, med vet, PhD, Dipl ECVD (1).

Xavier Roura, med vet, PhD, Dipl ECVIM-CA. (2) (1) Miembro del grupo LeishVet. Facultad de Veterinaria, Universitat Autnoma de Barcelona. (2) Miembro del Grupo de Estudio de la Leishmaniosis Canina (GSLC). Hospital Clnic Veterinari, Universitat Autnoma de Barcelona. El mtodo ms extendido en la clnica veterinaria para diagnosticar la leishmaniosis es la deteccin de anticuerpos anti-Leishmania circulantes (principalmente IgG y especialmente IgG1 e IgG2) mediante tcnicas de diagnstico serolgico. Uno de los principales problemas de la leishmaniosis es el diagnstico [1]. En los casos avanzados, con los signos clnicos clsicos, bien descritos en la literatura, el diagnstico puede resultar fcil. Sin embargo, en muchos otros casos, debido a que los signos clnicos son muy pleomrficos y similares a los de otras enfermedades, a que las lesiones histopatolgicas no son patognomnicas y a que no existe un test diagnstico 100% sensible, llegar a un diagnstico definitivo de leishmaniosis supone evidentes quebraderos de cabeza. Por tanto, es importante conocer y profundizar en las principales tcnicas con las que contamos para el diagnstico de la leishmaniosis canina. Otro problema importante es el seguimiento posterior del animal durante y despus del tratamiento, donde no existe un protocolo consensuado y vara segn la experiencia personal de cada veterinario [2]. Debido a que los anlisis clnicos muestran alteraciones que no son patognomnicas, el diagnstico ms fiable de la infeccin por Leishmania es la observacin del parsito. Puede conseguirse con punciones de mdula sea (principalmente en costilla, aunque tambin en fmur y cresta ilaca) o de ganglio linftico y con su posterior tincin con el mtodo Diff-Quik o May-Grnwald-Giemsa [3]. Es un mtodo sencillo, rpido, econmico y relativamente poco traumtico. La presencia de un slo amastigote en el interior de los macrfagos se considera diagnstica de infeccin. Este mtodo lo trataremos en un prximo captulo, junto con la valoracin de las biopsias.

Diagnstico serolgico de leishmaniosis paso a paso

Deteccin de anticuerpos en sangre El mtodo ms extendido en la clnica veterinaria para diagnosticar la leishmaniosis es la deteccin de anticuerpos anti-Leishmania circulantes (principalmente IgG y especialmente IgG1 e IgG2) mediante tcnicas de diagnstico serolgico. En los perros enfermos de leishmaniosis, la respuesta humoral normalmente es muy alta, y los perros producen gran cantidad de IgGs, aunque esta respuesta no suele detener o eliminar la infeccin [4,5]. Esta produccin de anticuerpos o seroconversin se desarrolla durante los meses siguientes al momento de la infeccin, la media es de unos 5 meses (intervalo: 1-22) para la infeccin natural y 3 meses (intervalo: 1- 6 meses) para la infeccin experimental [6]. Slo en los perros con diseminacin del parsito los ttulos de anticuerpos tienden a ir aumentado. Las tcnicas de diagnstico disponibles son diversas. Algunas como el western blotting (WB), aunque han demostrado ser ptimas para el diagnstico, no se utilizan de forma habitual por razones de tiempo de realizacin y coste econmico. Las tcnicas ms utilizadas son la prueba de inmunomigracin rpida, la tcnica de ELISA y la de inmunofluorescencia indirecta (IFI), descritas de forma esquemtica a continuacin.

Se han realizado varios estudios sobre la utilidad de estas tcnicas. Las conclusiones ms interesantes son que la IFI, el ELISA y el WB ofrecen resultados muy parecidos. Aproximadamente, su sensibilidad oscila entre el 60 y el 100% segn los autores [14,15]. Interpretacin de los resultados analticos La presencia de un positivo, en cualquiera de estas pruebas, no indica la presencia de infeccin activa. No hay que olvidar que puede tratarse de un residuo de una antigua infeccin, ya controlada por el sistema inmunitario. Sin embargo, est claro que cuando los ttulos son altos, las posibilidades de falsos positivos disminuyen, pero siempre dependiendo de los lmites establecidos para cada tcnica. En general ttulos que sean 4 veces el valor que se considera positivo son altamente indicativos de infeccin real. Si disminuimos los lmites la sensibilidad aumenta el riesgo consiguiente de disminuir la especificidad. En los perros que dan titulaciones positivas dbiles o muy cerca de los lmites es preferible repetir el test aproximadamente a las 4-6 semanas para determinar si se trataba de un ttulo residual que va decreciendo o de una infeccin activa en progreso. En zonas endmicas es muy frecuente encontrar perros seropositivos sin infeccin activa [4,14,16] y al contrario, a veces en fases iniciales es posible encontrar perros seronegativos [17].

A estas dificultades en encontrar un test de sensibilidad y especificidad de 100% se une el hecho que ninguno de estos test, con la posible excepcin del WB [18], permiten el seguimiento de la evolucin de la enfermedad de una forma eficaz. Hay muchos perros en los que los ttulos disminuyen rpidamente durante el tratamiento, pero en cambio en otros son oscilantes o se mantienen elevados incluso sin signos clnicos [19]. Aunque los estudios en perros son limitados, es posible que la tcnica de WB permita determinar en qu fase de la enfermedad se encuentra el perro [18].

En resumen, las tcnicas serolgicas resultan una herramienta muy til en el diagnstico de la leishmaniosis canina, pero a veces de limitado valor a la hora de evaluar la presencia de Leishmania en el paciente durante la respuesta al tratamiento. Bibliografa 1. Denerolle PH. Leishmaniose canine: difficults du diagnostic et du traitement. Prat Md Chir Anim Comp 31:137-145, 1996. 2. Alvar J, Molina R, San Andrs M. et al. Canine leishmaniasis: clinical, parasitological and entomological follow-up after chemotherapy. Ann Trop Med Parasitol 88: 371-378, 1994. 3. Ferrer L. Leishmaniasis. En: RW. Kirk y JD. Bonagura, editores. Current Veterinary Therapy XI. Philadelphia: W.B. Saunders: 266-269, 1992. 4. Abranches P, Santos-Gmez G, Rachamin N. et al. An experimental model for canine visceral leishmaniasis. Parasite Immunol 13: 537-550, 1991. 5. Slappendel RJ and Ferrer L. Leishmaniasis. En: C.R. Greene, editor. Infectious Diseases of the Dog and Cat. Second Edition. Philadelphia: W.B. Saunders: 450458, 1998.

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