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INSEMINACION ARTIFICIAL

CUALIDADES DE UN BUEN EYACULADO


Ausencia de organismos contagiosos Alta calidad Adecuada durabilidad o resistencia al almacenamiento Buena fertilidad Alto valor gentico Motilidad progresiva 60-70% Clulas espermticas anormales < 20% Nmero total de espermatozoides en el eyaculado 29-48 x 109 Durabilidad (resistencia al almacenaje) < 60% de motilidad progresiva despus de 48 horas de almacenado

VIRUS ENCONTRADOS EN EL SEMEN PORCINO


PESTE PORCINA AFRICANA PSEUDORABIA (AUJESZKY) PESTE PORCINA CLSICA PARVOVIRUS PORCINO VIRUS DEL PRRS CYTOMEGALOVIRUS ADENOVIRUS ENTEROVIRUS AFTOSA ENCEFALITIS JAPONESA REOVIRUS

ENFERMEDAD VESICULAR PORCINA


VIRUS DEL PAPILOMA GENITAL

BACTERIAS ENCONTRADAS EN EL SEMEN


COMUNES
STAPHYLOCOCCUS spp
PSEUDOMONAS spp ESCHERICHIA spp KLEBSIELLA spp CITROBACTER spp MICROCOCCUS spp EUBACTERIUM SUIS

INFRECUENTES
CORYNEBACTERIUM spp
STREPTOCOCCUS spp PROTEUS spp SERRATIA spp BACILLUS spp ENTEROBACTER spp AEROBACTER spp BORDETELLA spp MYCOPLASMA spp

INSEMINACION ARTIFICIAL
VENTAJAS GENETICAS: - Mayor difusin gentica de los sementales de calidad en un periodo de tiempo corto - Lotes homogneos, ms uniformidad en los cerdos para sacrificio y la produccin de canales con mejores caractersticas. - Aumento en el nmero de concepciones por macho. La proporcin de verracos/cerdas reproductoras es de 1/75-100 comparado con la monta natural 1/17-20.

VENTAJAS GENETICAS
Un reproductor logra producir ms lechones/ao y ms kilos de carne cerdo al ao. Facilita la prctica de cruzamientos interraciales para la produccin de hbridos comerciales. Aumenta la cantidad de hembras servidas por un reproductor y es ms rpida la transmisin de caractersticas deseadas

VENTAJAS SANITARIAS
Reduce el riesgo de transmitir enfermedades a travs del semen, siempre y cuando este provenga de granjas con un buen estado sanitario. Ayuda a detener los traumatismos y la propagacin de enfermedades de tipo reproductivo. Nos permite establecer programas de bioseguridad en el manejo del semen.

VENTAJAS ECONOMICAS
Menor costo por mantenimiento del reproductor. Se puede tener ms control de la calidad del semen que se est trabajando. Menor nmero de machos y mayor aprovechamiento de los mismos. Manejo de machos de diferente peso. Esto nos permite el manejo de las cerdas sin importar el peso y la edad. Ayuda a controlar la sobreutilizacin del macho.

DESVENTAJAS DE LA INSEMINACION ARTIFICIAL


- Posibilidades de errores humanos - Exposicin del semen a factores ambientales, sin la debida proteccin. - Requiere de una adecuada deteccin del celo, para establecer el momento ptimo de la inseminacin. - Elevados costos para el montaje de laboratorio en explotaciones pequeas

ENTRENAMIENTO MACHOS
PERSONAL CAPACITADO INTALACIONES ADECUADAS RECONOCIMIENTO DE LAS INSTALACIONES POR EL MACHO EDAD Y DESARROLLO ADECUADOS PRIMEROS INGRESOS DE EXPLORACION EVITAR LOS RUIDOS FUERTES NO PEGARLE AL MACHO MUCHA PACIENCIA SITIO ATEMPERADO MANIQUI CON OLOR

MANEJO REPRODUCTIVO DE MACHOS


Manejo individual Pubertad Edad Nutricin Entrenamiento Luminosidad Espacios (corrales) Evaluacin del comportamiento sexual

ENTRENAMIENTO DE MACHOS

REASONS FOR REPLACING BOARS AT AN AI STATION


Reason Breeding strategy
Genetic value Hereditary defect Leg problems

Number of boars 36 (12%)


18 1 17

Sperm production
Quality Quantity Libido/ejaculation

189 (61%)
145 27 17

Other
Leg problems Illness Death Aggressiveness Other

84 (27%)
20 13 20 6 25

PROCESO DE RECOLECCION
PREPARACION DEL MATERIAL DE RECOLECCION (TERMOS, FILTROS, VASOS) PREPARACION DEL MACHO (EVACUACION PREPUCIAL, RETIRO DE RESIDUOS, CONDUCCION A LA SALA) ASEPSIA DEL OPERARIO DE RECOLECION SECADO DEL PREPUCIO MONTA DEL MACHO AL MANIQUI ERECCION Y RECOLECCION SEPARACION DE LAS FRACCIONES OBSERVACION DEL SEMEN (OLOR, COLOR, IMPUREZAS) TRANSPORTE AL LABORATORIO

PROCESO DE RECOLECCIN

COMPOSICIN DEL EYACULADO DEL VERRACO


FRACCIN Pre-espermtica espermtica Postespermtica Tapioca CANTIDAD (%) 25 ml (20%) 40 - 1000 ml (30 -50%) 70 - 400 ml (50 60%) 20 -40 ml (8%) ORIGEN Prstata Epiddimo Epiddimo y vesculas seminales Glndulas bulbouretrales

FRACCIONES SEMINALES

1.Secrecin Uretral 2.Fraccin rica 3.Fraccin pobre 4.Fase gelatinosa

PROCESO DE RECOLECCIN
Tcnica de mano enguantada

PROCESAMIENTO DEL SEMEN


Evaluacin macro (olor, color, impurezas, otros)

CLASIFICACIN MICROSCOPICA (motilidad, tipo de movimiento, anormalidades)


Motilidad

Morfologa

EVALUACION MICROSCOPICA
1. MOTILIDAD Atemperar todo el equipo (cubre y portaobjetos, platina microscopio) Colocar gota de evaluacin pequea Poner en objetivo de 40 100x Porcentaje de espermatozoides en movimiento Registrar en hoja de vida macho

CALIFICACIN

MOTILIDAD

CARACTERSTICAS
Muy pocos espermatozoides presentan movimiento progresivo, gran cantidad sin movimiento. Una pequea proporcin de espermatozoides tiene movimiento progresivo, el movimiento es oscilatorio. Una buena proporcin tiene movimiento pero de tipo circular o fijo. La mayora de los espermatozoides tienen movimiento progresivo y vigoroso, pero un poco lento a travs del campo. La mayora de los espermatozoides muestran movimiento progresivo y vigoroso.

0 A 20%

20 A 40% 40 A 60%
60 A 80%

80 A 100%

2. TIPO DE MOVIMIENTO
TIPO 0
Espermatozoides sin movimiento.

TIPO 1
TIPO 2 TIPO 3 TIPO 4 TIPO 5

Espermatozoides sin movimiento progresivo girando sobre s mismos.


Espermatozoides con movimientos anormales y algunos progresivos. Espermatozoides con movimientos progresivos lentos y en zigzag. Espermatozoides con movimientos progresivo rpidos. Espermatozoides con movimientos progresivo muy rpidos.

Relationships among motility, sperm penetration rates, farrowing rates and number of pigs born alive for boar semen
Motilitya In vitro sperm (%) penetration rateb (%) 94.7 82.3 76.1 66.2 52.4 44.2 32.6 SEMD
a

Farrowing ratec (%) 86.9v (460) 87.1v (330) 84.5v (300) 86.1v (264) 72.4w (201) 72.3w (168) 51.7x (85) 5.8

Number born alive 10.6v 10.5v 10.5v 10.1v 9.2w 9.2w 7.8x 0.3

89.5v (58) 81.7v,w (55) 84.3v,w (50) 74.7w (44) 55.5x (40) 34.7y (28) 21.3z (17) 4.8

Motility is expressed as the average number of motility spermatozoa within the following classes:>90; 80-89; 7079; 60-69; 50-59; 40-49; and 30-39. b In vitro sperm penetration rate is defined as the percentage of eggs that that were fertilized. Numbers in parentheses represent the number of ejaculates within a motility category. c Numbers in parentheses represent the number of sows inseminated with semen within a motility category. d Standard error of the mean. v, w, x, y, z Means within the same column with different superscripts are significantly different (P < 0.05).

3.PRESENCIA DE CUERPOS EXTRAOS (AGLUTINACIONES)


POCA Menos de 2 aglutinaciones por campo.
Entre 3 y 5 aglutinaciones por campo. Ms de 5 aglutinaciones por campo.

+
++ +++

MEDIA

ABUNDANTE

Aglutinacin. Acmulo de clulas que se valora junto con la motilidad (0 a 3 cruces).

++

+++

Aglutinacin

4. CONTEO DE ESPERMATOZOIDES Se ubica la cmara de conteo (burker) Se pone el cubreobjetos Se adiciona una gota pequea que ingresa por capilaridad (previamente diluido en suero formolado) Se cuentan los espermatozoides en el interior de 40 cuadros Se hace el calculo de dosis as:

CONCENTRACIN

ESPECTROFOTOMETRA COLORIMETRA CITOMETRA DE FLUJO

CONCENTRACIN

CMARA DE BRKER
(WOELDERS, 1990; HAFEZ, 2000; NOAKES et al., 2001)

A X V N DE DOSIS = -----------300
DONDE : A = # De espermatozoides en 40 cuadros V = volumen de fraccin rica. con una concentracin de 3000 Millones de espermatozoides por Dosis de 100 CC.

CALCULO DE DOSIS SEMINALES


VOLUMEN= 250 ml.
CONTEO = 28 Espermat. En 40 cuadros N = 250 * 28 300 = 23.33 dosis

5. ANORMALIDADES ESPERMATICAS
Gota citoplasmtica proximal (mx.. 50%) Gota citoplasmtica distal (mx.. 80%) Colas en ltigo (mx.. 25%) Cabeza sin cola Doble cabeza Colas enrolladas Perdidas del acrosomas Aglutinaciones Anormalidades menores al 20% del total de los espermatozoides contados en 40 cuadros

Morfologa del espermatozoide. Durante el conteo en cmara de Brker, por tincin y fijacin de la muestra. Las ms comunes son colas en ltigo, gotas citoplasmticas proximales y distales.

Normal

Cola en ltigo

Gota citoplasmtica proximal

Gota citoplasmtica distal

Gota Citoplsmatica

Anormalidades

Integridad del acrosoma. El acrosoma es fundamental en la fecundacin, ya que contiene las enzimas necesarias par la penetracin en el vulo. El anlisis queda supeditado a laboratorios especializados que dispongan de microscopio de contraste de fases y personal cualificado que realice e interprete este tipo de anlisis. Los diferentes estados del acrosoma son: normal, daado, perdiendo y perdido.

normal

daado

perdiendo

perdido

Son vlidos estos espermatozoides?


Espermatozoides porcinos teidos mediante combinacin de SYBR/PI (Garner)

Spz con membrana funcional (vivos) aparecen verdes, teidos con SYBR-14 Spz con la membrana daada (muertos) se muestran rojos. Spz con marcajes intermedios se consideran moribundos.

Son vlidos estos espermatozoides?


Acrosomas teidos con PSA-FITC con permeabilizacin de membrana

Son vlidos estos espermatozoides?


Bisbenzimida/PI/SBTI Alexa Fluor/ Mitotracker Green

Espermatozoides viables con el acrosoma y la vaina mitocondrial intactas. Los ncleos de espermatozoides viables emiten una intensa fluorescencia azul (A)

Los acrosomas intactos y las vainas mitocondriales intactas emiten fluorescencia verde dbil y moderada respectivamente (B). 40x.

Son vlidos estos espermatozoides?


A

Bisbenzimida/PI/SBTI Alexa Fluor/ Mitotracker Green

MS

Espermatozoide viable con el acrosoma intacto (A) y la vaina mitocondrial intacta (MS). 40x.

MS

Espermatozoide viable con el acrosoma reaccionado (A) y la vaina mitocondrial intacta (MS). 40x.

ENVASADO

ALMACENAMIENTO
Despus de haber sido evaluado Envasar el semen ya diluido y evaluado en las botellas, cuidando de no dejar aire en su interior Rotular las botellas a almacenar (fecha, macho, hora) Dejar bajo una toalla las botellas acostadas durante 2 horas. Almacenar en la nevera entre 15 y 16 c No sacar antes de 24 horas en lo posible Voltear cada 12 horas.

ALMACENAMIENTO

CALENTAMIENTO DE DOSIS
Sacar las dosis y cubrir con una toalla, dejar reposar 15 minutos Introducir al bao Maria (37 c) durante otros 15 minutos Transportar en nevera a una temperatura de 37 c Transportar pocas dosis a la vez evitando cambios bruscos de temperatura Proteger siempre de la luz

TECNICA DE INSEMINACIN

CATETER DE MELLROSE

OTROS CATETERES DESECHABLES

TECNICA DE INSEMINACION PASO1

TECNICA DE INSEMINACIN PASO 2

TECNICA DE INSEMINACION PASO 3

TECNICA DE INSEMINACION PASO 4

USO DE ARNESES PARA INSEMINAR

USO DE ARNESES PARA INSEMINAR

USO DE ARNESES PARA INSEMINAR

TCNICA CONVENCIONAL
Actualmente la inseminacin es intracervical con aplicacin de 70 100 ml con 2.5 4 x 109 espermatozoides

Recientemente se redujo la dosis a 10 millones de espermatozoides en cada cuerno, aplicados quirrgicamente en la unin tero tubrica (Krueger y Rath, 2000)

TCNICA POST-CERVICAL 50 ML CON 1.5X109 ESPERMATOZOIDES 30 ML CON 1X109 ESPERMATOZOIDES CNULA POST-CERVICAL SOFT QUICK (IMPORVET ,ESPAA) DIMETRO EXTERNO DE 3.5 MM Y LONGITUD DE 72 CM, CON DOS ORIFICIOS EN SU CABEZA QUE PERMITEN LA SALIDA DEL SEMEN POR LA CNULA.

I IUP 1

Mediante cateterizacin transcervical con cateter flexible es posible inseminar con una dosis de 5 ml y una concentracin de 50 millones de esp. (Martinez et al, 2001)

I IUP 2

I IUP 3

I IUP 4

I IUP 5

I IUP 6

I IUP 7

I IUP 8

I IUP 9

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Tasa partos IAC 0.86 0.83 0.90 0.86 0.85 0.86 IIUP 0.78 1.00 1.00 0.64 0.69 0.80

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

TASA DE PARICION
1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0,00

0,86

0,80

IAC

IIUP

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Tamao camada IAC 11.22 11.40 11.82 10.98 10.51 11.19 IIUP 11.22 8.00 12.73 9.42 8.00 9.24

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

TAMAO DE CAMADA
12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

11,19 9,24

IAC

IIUP

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Nacidos vivos IAC 10.33 10.80 10.82 10.22 10.17 10.47 IIUP 7.80 7.73 11.73 9.04 7.50 8.70

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

NACIDOS VIVOS

12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

10,47 8,70

IAC

IIUP

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Nacidos muertos IAC 0.45 0.40 0.53 0.48 0.25 0.42 IIUP 0.12 0.67 0.55 0.21 0.26 0.35

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

NACIDOS MUERTOS

0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 IAC IIUP 0,42 0,35

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Nacidos momias IAC 0.44 0.20 0.47 0.28 0.08 0.30 IIUP 0.06 0.00 0.45 0.17 0.24 0.19

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

NACIDOS MOMIAS

0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 IAC IIUP 0,19 0,30

Nombre granja

Nmero inseminac. IAC IIUP 9 3 11 14 13 50

Nmero partos IAC 65 5 113 107 88 378 IIUP 7 3 11 9 9 39

Peso nacimiento IAC 1.42 1.19 1.57 1.57 1.59 1.47 IIUP 1.57 1.48 1.51 1.75 1.73 1.61

La Fabiola Montelindo Pontevedra Asturias El Trbol TOTAL

76 6 125 125 104 436

PESO AL NACIMIENTO

1,60 1,40 1,20 1,00 0,80 0,60 0,40 0,20 0,00 IAC IIUP 1,47 1,61

ASENTAMIENTO EN REGISTROS

METAS DE AREA DE SERVICIOS


Entrega de machos y hembras con capacidad de reproduccin Hembras de buen estado sanitario Machos con buena produccin de semen (monta ) y excelente estado sanitario y corporal Reproductores de buen potencial gentico para transmisin a su descendencia

Mortalidad Embrionaria

Dia 0

4-6

6-8

8 - 14

14 - 18

Principales causas de mortalidad embrionaria: Altas temperaturas ambientales Mezcla de las cerdas despus de la monta Lesiones en el aparato locomotor/ otras lesiones Marranas en jaula despus de la monta Problemas nutricionales

EL PERIODO DE LA GESTACIN

LUTEOLISIS
Ludwig et al. (1998)

CERDA CICLANDO EL MECANISMO SE ESTABLECE A LOS 12-14 DAS DEL CICLO


SE INICIA LA LISIS PROPIAMENTE A LOS 14-16 DAS DEL CICLO

CERDA RECIEN PREADA SE BLOQUEA 10-12 DAS DE INICIADA LA GESTACIN

RECONOCIMIENTO MATERNO DE LA PREEZ


El desarrollo de un ambiente uterino que soporte el crecimiento del conceptus es crtico para el establecimiento de la preez, y requiere primordialmente que la dominancia de la progesterona sobre el tero no sea interrumpida por los mecanismos luteolticos que normalmente ocurren durante el ciclo estral, o sea, que el cuerpo lteo permanezca funcional; este fenmeno se conoce con el nombre de reconocimiento materno de la preez (Cross y Roberts, 1989)

METAS EN LA GESTACIN
Bajo Retorno al Celo

Baja Mort. Embrionaria


Alta Fertilidad Buena Condicin Corporal Buen Peso de los Lechones al Nacimiento

MORTALIDAD PRENATAL
35 40% en el cerdo
20 a 30% durante los primeros 30 d de gestacin 10 a 20% entre 40 y 100 d de gestacin

Muchas prdidas embrionarias (75%) ocurren durante la periimplantacin, entre d 12 y 18 de gestacin (Webel and Dziuk, 1974; Pope, 1994; Anderson, 1993; Ford, 1997;)

Primeros 7 dias de Gestacin


Mucha Energia Menos Progesterona Menos Proteinas Uterinas
Mayor mortalidad embrionaria
Cantidad de racin, kg/dia 1,50 2,25 3,00 (Dyck et al, 1980) Mortalidad embrionaria,% 17,2 21,4 28,1 Progesterona en el Plasma,ng/ml 16,7 13,8 11,8

PRDIDAS EMBRIONARIAS Y FETALES DE LA OVULACIN HASTA EL PARTO

22 18 14 10 6

20

18

14

12,5 12 11,3

as di 25 as di 13 n ci la vu

4 11 as di

s do ci Na

s vo Vi s do s ci le ta Na To

El blastocisto de 5 a 6 mm (d 11 de gestacin) empieza a producir 17-estradiol (E2) trofoblstico (Wilson and Ford, 1997).

La produccin E2 tiene un pico entre d 12 y d 15 de gestacin (Geisert et al., 1994b; Pusateri et al., 1990) Como respuesta al E2 se producen cambios en el tero (endocrinos, inmunolgicos y vasculares), determinantes para la viabilidad del conceptus

(Engelhardt et al., 1997; Frank et al., 1977; Keys and King, 1995; Pope et al., 1982)

La implantacin comienza el da 12, si el embrin muere antes la cerda repetir el celo cclicamente (1823 das). El periodo embrionario termina cuando se inicia la osificacin (da 35).

Pasa de un cigote a animal maduro, a travs de procesos de hiperplasia e hipertrofia celular, acompaados de diferenciacin celular, bajo la influencia de factores genticos y ambientales, regulados por procesos enzimticos y hormonales.

Cerdo 21 das de Gestacin

CAPACIDAD UTERINA
Maximo nmero de fetos que la cerda puede soportar en su tero en una etapa especfica de la gestacin (Christenson et al., 1987)

Prdidas debidas a insuficiente capacidad uterina ocurren principalmente entre los 30 das de gestacin y el parto, con un pico entre 50 y 70 das

(Fenton et al., 1970; Webel and Dziuk, 1974; Knight et al., 1977)

PLACENTA FUNCIONAL
Finalizacin de la unin del trofoblasto al endometrio (d 19)
Final de la formacin del saco corioalantoideo (d 26) La mortalidad embrionaria y las caractersticas del embrin porcino durante este perodo podran estar relacionados con cambios morfolgicos y bioqumicos en el endometrio, de manera similar a como han sido asociados durante la periimplantacin

GRACIAS POR SU ATENCIN