RESUMEN

SEMINARIO CARACTERIZACIN DE ANTICUERPOS AUTORREACTIVOS EN SUERO DE PACIENTES CON DENGUE Y PROTENAS QUE RECONOCEN
Alumno: Daniel Nuez Avellaneda Directoras: Dra. Ma Isabel Salazar Snchez y Dra. Mara Eugenia Castro Mussot. Comit tutorial: Dra. Julieta Luna Herrera, Dra. Blanca Estela Prez Garca y Dr. Carlos Machain Williams. Se sabe que los anticuerpos en contra de protenas tanto estructurales como no estructurales del virus del dengue (DENV) pueden exhibir reactividad cruzada contra diversas protenas del hospedero. Los anticuerpos anti-NS1 se ha reportado se unen a la protena disulfuro isomerasa (PDI) tanto en plaquetas como en clulas endoteliales (Cheng et al., 2009) alterando su funcin. Mientras, algunos anticuerpos anti-E y anti-NS1 reconocen plasmingeno. Interesantemente, un reporte reciente muestra que un anticuerpo monoclonal anti-NS1 puede mediar la fibrinlisis (Chuang et al., 2011). En los casos graves de dengue, una de las caractersticas patolgicas ms sobresalientes es el profundo dao al sistema endotelial y de coagulacin. El mimetismo molecular documentado entre las protenas virales y protenas relacionadas con el sistema endotelial y de coagulacin, sugieren que los anticuerpos autorreactivos as como el isotipo/subclase de los mismos pudieran contribuir a la patognesis de la enfermedad. En este trabajo examinamos la presencia y frecuencia de anticuerpos contra clulas endoteliales humanes (HMEC-1) y plaquetas (de sangre perifrica). En ste estudio retrospectivo observacional, se utilizaron sueros de pacientes de la Pennsula de Yucatn infectados por dengue en brotes ocurridos entre el 2006 y 2011, y que presentaron casos de FD o FHD. Mediante inmunofluorescencia indirecta se confirm la presencia de anticuerpos que se unen a clulas endoteliales humanas en el 60% de pacientes con FHD y en el 52% con FD. Sin embargo, no parecen existir diferencias significativas entre ambos grupos. Adicionalmente pudimos establecer que anticuerpos de isotipo IgG se unen principalmente a tres protenas en estas clulas, cuyos pesos aproximados son 55, 100 y 140 kDa. Respecto a las plaquetas, la interaccin con una mezcla de sueros de pacientes con dengue provoc una discreta inhibicin de la agregacin plaquetaria como indic medicin de la transmitancia en un agregmetro. Aunque esta misma mezcla no mostr efecto importante en activacin plaquetaria mediada por 2B3A (activa). Sin embargo, an es necesario obtener los datos globales de los sueros individuales de pacientes con FD y FHD. Finalmente, identificamos anticuerpos en los sueros de los pacientes con dengue que se unen protenas plaquetarias que no han sido reportadas previamente. Para el caso de anticuerpos de isotipo IgM, stos reconocen protenas de 50 y 90 kDa en las plaquetas, mientras los IgG se unen a protenas de 32, 55, 110 y 140 kDa. As los anticuerpos autoreactivos parecieran no ser determinantes de casos graves de la enfermedad, aunque s parecen relevantes para la patognesis del dengue en general. Queda como perspectivas de este trabajo establecer la naturaleza de las protenas reconocidas en las clulas endoteliales y las plaquetas por estos anticuerpos.