INTEGRANTES

HUAMAN CRUZ, CLAUDIA SOLANO ROMANI MARGARET DIAZ MAMANI, ROXANA CURSO : QUIMICA ORGANICA PROFESOR :

CESAR FUERTES RUITON

CROMATOGRAFA DE OSAZONA
PROF. FUERTES
. . .

CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA INTRODUCCION :

El primer objetivo de la sntesis de un compuesto orgnico es determinar la solubilidad, para lo cual se tendr en cuenta la relacin del soluto y de los solventes, en cuanto a su grado de polaridad. Es decir, la solubilidad est asociada a la estructura del solvente y del compuesto orgnico que se quiere estudiar. No obstante que existe una serie de factores que favorecen o que la solubilidad de un compuesto orgnico, podemos afirmar que son importantes los siguientes casos. 1. La formacin de puentes hidrgenos, provenientes de compuestos hidroxilados, aminados o carboxilados, se solubilizan en solventes polares como el metanol, el etanol y el agua. 2. La presencia de halgenos incrementa la insolubilidad en solventes hidroflicos. 3. La cadena carbonada tambin favorece la solubilidad en solventes polares (ter etlico, cloroformo, etc.) e incrementa si insolubilidad en solventes polares (agua, metanol,etc.) MARCO TEORICO SINTESIS DE OSAZONA La formacin de la osazona destruye el centro asimtrico adyacente al grupo carbonilo. La conformacin de la porcin restante de la molcula no se afecta. La formacin de osazonas no se limita a los carbohidratos, sino que es tpica de los -hidroxialdehdos y las -hidroxicetonas en general (por ejemplo la benzona). Los azcares son en general solubles en agua y difcilmente pueden recristalizarse, sin embargo, sus osazonas fcilmente se cristalizan en ste disolvente y adems presentan un punto de fusin bien definido, por lo cual este tipo de derivados se utiliza para caracterizar carbohidratos, as como tambin para determinar sus configuraciones. Cuando se quiere conocer la composicin de una sustancia orgnica es necesario seguir tres etapas bsicas. 1. Obtener una muestra representativa de la muestra. 2. Separar o aislar cada una de las sustancias componentes de la mezcla para su posterior anlisis. 3. Identificacin de cada uno de los componentes de dicha muestra. La segunda de las etapas es una de las ms complejas, laboriosas y difcil de realizar El conocimiento de los mtodos de aislamiento y purificacin de un compuesto es fundamental en Qumica Orgnica por las siguientes razones:

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA Poder determinar su estructura En los procesos de sntesis. Seguimiento de las reacciones qumicas Estos mtodos estn basados en las diferencias que existen entre las propiedades fsicas de los componentes de una mezcla (puntos de ebullicin, densidad, presin de vapor,solubilidad, etc.) METODOS DE SEPARACION Filtracin, decantacin, cristalizacin, sublimacin, destilacin, extraccin CRISTALIZACIN Proceso de separacin de un soluto a partir de su disolucin, por sobresaturacin de la misma, aumento de la concentracin o por enfriamiento de esa disolucin. La cristalizacin permite separar solutos prcticamente puros. Cmo se sobresatura una disolucin para que comience a cristalizar el soluto? Saturando la disolucin en caliente con posterior enfriamiento de la misma Aumentando su concentracin evaporando una parte del disolvente Adicionando a la disolucin otra sustancia ms soluble en el disolvente que el compuesto que se desea separar

DEFINICIN DE CROMATOGRAFA Se entiende por cromatografa al conjunto de tcnicas analticas que se fundamentan en la separacin que se produce cuando una mezcla de compuestos es arrastrada por una fase mvil a lo largo de una fase estacionaria. La tcnica cromatogrfica de purificacin consiste en separar mezclas de compuestos en funcin de su diferente afinidad entre una fase estacionaria y una mvil. Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la distribucin de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles, una de ellas llamada fase activa o fase mvil, que transporta las sustancias que se separan, y que progresa en relacin a otra fase llamada fase estacionaria CLASIFICACIN DE LOS PROCESOS CROMATOGRFICOS E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA

CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA La fase mvil puede ser un lquido o un gas. La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido. Teniendo en cuenta la naturaleza de la fase estacionaria se establece la siguiente clasificacin. CROMATOGRAFA DE ADSORCIN: la fase estacionaria es un slido sobre el que se adsorben los componentes de la muestra. CROMATOGRAFA DE REPARTO: la fase estacionaria es un lquido sostenido por un slido inerte. CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIO INICO: la fase estacionaria es una resina de intercambio inico y la separacin se produce por la unin de los iones a la fase estacionaria. CROMATOGRAFA DE EXCLUSIN MOLECULAR: la fase estacionaria es una estructura parecida a un tamiz y la separacin se produce en funcin del tamao de las molculas.

OBJETIVOS : Determinar la solubilidad del producto a sintetizar. Purificar por el mtodo de cristalizacin. Identificar los productos obtenidos.

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA PARTE EXPERIMENTAL.MATERIAL Tubos de ensayo Beaker de 100 ml Papel filtro Embudo de filtracin Recipientes de vidrio o viales

REACTIVOS D-glucosa o D-galactosa Clorhidrato de fenilhidrazina Acetato de sodio Agua destilada Etanol N-Hexano Cloroformo METODO OPERATIVO 1. EN el tubo de ensayo se procedi a colocar una sustancia X en polvo, a la vez tambin se le agrego clorhidrato de fenilhidrazina, acetato de sodio y agua destilada en las siguientes cantidades: a. Agua destilada : 5ml b. Clorhidrato de fenilhidrazina : 0.40 gr c. Acetato de sodio : 0.60 gr d. Sustancia X ( glucosa o galactosa ) : 0.20 gr 2. Luego se procedi a combinar todo 3. Acto seguido se procedi a hacer bao maria a la muestra para lo cual se sumergi el tubo que contena la muestra en un beaker que contena agua la cual estaba calentndose ( el objetivo era llegar a realizar el bao maria hasta que el agua tuviera 100 C o hasta que se cristalizara la muestra para as extraer los cristales los cuales iban a ayudar a identificar la muestra en los procesos sigyientes 4. Luego se procedi a enfriar la muestra 5. Despus de enfriada la muestra se procedi a filtrarla con ayuda de agua destilada y papel filtro ( esto para quitarle el agua que tenia y quedarnos solo con los cristales). 6. Finalmente con ayuda de una esptula se retiro la muestra y se la guardo en un vial.

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA Muestra antes y despus de realizado el bao mara, se observa el cambio de coloracin y consistencia pasando de un color amarillo translucido a amarillo patito intenso y se ve que la consistencia cambia de liquido a cristales

ANTES

DESPUES REALIZANDO MUESTRA BAO MARIA A LA

FILTRACION DE LOS CRISTALES CON AYUDA DE UN EMBUDO, UN BEAKER Y UN PAPEL DE FILTRO. FINALMENTE LOS CRISTALES QUEDARAN EN EL PAPEL

LA MUESTRA FINAL SE OBTUVO SACANDO LOS CRISTALES DEL PAPEL FILTRO CON AYUDA DE UNA BAGUETA PARA FINALMENTE ALMACENARLO EN UN VIAL

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA GLOSARIO SOLUTO Se lo define al componente que se encuentra en menor concentracin en una solucin. SOLVENTE Se lo define como al componente que se encuentra en mayor concentracin en una solucin POLARIDAD La polaridad qumica o slo polaridad es una propiedad de las molculas que representa la desigualdad de las cargas elctricas en la misma. Esta propiedad se relaciona con otras propiedades qumicas y fsicas como la solubilidad, punto de fusin, punto de ebullicin, fuerza intermolecular, etc. SINTESIS Sntesis qumica es el proceso por el cual se obtienen compuestos qumicos a partir de sustancias ms simples. El objetivo principal de la sntesis qumica, adems de producir nuevas sustancias qumicas, es el desarrollo de mtodos ms econmicos y eficientes para sintetizar sustancias naturales ya conocidas, como por ejemplo el cido acetilsaliclico (presente en las hojas del sauce) o el cido ascrbico o vitamina C, que ya se encuentra de forma natural en muchos vegetales. OSAZONA Las osazonas son una clase de derivados de carbohidrato encontrados en qumica orgnica. Se forman cuando los azcares reaccionan con fenilhidrazina. Emil Fischer desarroll y us la reaccin para identificar azcares cuya estereoqumica difera por slo un carbono quiral. La reaccin involucra la formacin de un par de funcionalidades fenilhidrazona, concomitante con la oxidacin del grupo hidroximetileno adyacente al centro formilo. La reaccin puede ser usada para identificar monosacridos

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA CONCLUSIONES :

En la siguiente prctica se logro concluir que: Para que se forme la glucosazona primero reaccionan el acetato de sodio con el clorhidrato de fenilhidrazina y luego esto reacciona con el azcar. Otros componentes que se forman al reaccionar la glucosa, el clorhidrato de fenilhidrazina y el acetato de sodio aparte de la glucosazona son : agua, cloruro de sodio ( NaCl ) y CH3COOH. Se realizo bao maria para acelerar la reaccin de los compuestos. Las osazonas se forman cuando los azcares reaccionan con fenilhidrazina. Se forman dos aguas debido a que cuando las molculas se rompen liberan dos oxigenos los cuales reaccionan con los hidrogenos que se encuentran en el compuesto. Proceso de separacin de un soluto a partir de su disolucin :

DISCUSIONES

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En la prctica se utilizo el mtodo de cristalizacin debido a que es un proceso de separacin de un soluto a partir de su disolucin y con este mtodo a la vez se pueden obtener cristales del compuesto para as en un futuro realizar pruebas cromatograficas lo cual ayudara a determinar la pureza del compuesto y a identificar de que compuesto se trata. El bao mara se realizo debido a que como todos sabemos a ms temperatura se acelera la reaccin. Al filtrar se utilizo agua destilada ya que como sabemos esta no reacciona con los compuestos orgnicos, a la vez que como el compuesto ya contena agua destilada se saba que estos no iban a reaccionar o que la muestra no se iba a alterar Al calentar en bao mara no solo fue nuestro tubo de ensayo sino varios y se pudo observar k no todos empezaban a formar cristales al mismo tiempo, eso se deba a que unas eran D-Glucosa y otras D- Galactosa

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Las osazonas son una clase de derivados de carbohidrato encontrados en qumica orgnica. Se forman cuando los azcares reaccionan con fenilhidrazina. Emil Fischer desarroll y us la reaccin para identificar azcares cuya estereoqumica difera por slo un carbono quiral. La reaccin involucra la formacin de un par de funcionalidades fenilhidrazona, concomitante con la oxidacin del grupohidroximetileno adyacente al centro formilo. La reaccin puede ser usada para identificarmonosacridos. Involucra dos reacciones. Primero, la glucosa con la fenilhidrazina producen glucosafenilhidrazona por eliminacin de una molcula de agua del grupo funcional. El siguiente paso involucra la reaccin de un mol de glucosafenilhidrazina con dos moldes de fenilhidrazina (exceso). Primero, la fenilhidrazina est involucrada en la oxidacin del carbono alfa a un grupo carbonilo, y la segunda fenilhidracina involucra la remocin de una molcula de agua con el grupo formilo del carbono oxidado, y formando el enlace carbono-nitrgeon. El carbono alfa es atacado aqu porque es ms reactivo que los otros. Son compuestos altamente coloreados y cristalinos, y pueden ser detectados fcilmente.

Una reaccin general mostrando la formacin de una osazona. La D-glucosareacciona con fenilhidrazina para producir osazona de glucosa. EL mismo producto se obtiene de la mannosa.

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CROMATOGRAFA DE OSAZONA E.AP FARMACIA Y BIOQUIMICA MATERIALES Cuba de desarrollo cromatografico Placas cromatograficas de silicagel GF254 Pipetas tipo Pasteur Pipetas graduadas x 10 ml Pipetas graduadas x 1 ml Aspersor Lmpara de luz UV REACTIVOS Cloroformo Etanol METODO OPERATIVO 1. Se cogen dos tubos de ensayo, en un tubo se coloca una cierta cantidad de osazona impura y se le agrega 0.2 ml de etanol. En el segundo tubo tambin se coloca una cantidad de osazona pura, en este caso y tambin se le adiciona 0.2 ml de etanol. 2. Luego se procedi a remover el contenido de cada tubo. 3. Acto seguido con un fosforo, el cual es colocado en la parte media del capilar, para partirlo por la mitad, el cual servir despus para la absorcin de la mezcla realizada. 4. Despus a la mezcla del tubo con etanol y osazona impura; con la mitad del capilar se procede a absorber y en la placa cromatogrfica se dan de 20-25 puntadas; teniendo como lmite inferior 1 cm. El mismo procedimiento para el segundo tubo que contiene osazona pura y etanol. 5. Introducir la placa cromatogrfica en la cmara de desarrollo, all esperamos a que la fase mvil ascendiera sobre la fase estacionaria. Finalmente se saca la placa cromatogrfica de la cmara y se espera su secado para su mejor observacin.

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Muestra de osazona a la cual se le est agregando 0.2 ml de etanol.

Tubos con muestra de etanol con osazona pura en uno y osazona impura en el otro.

Se absorbe la mezcla de osazona pura mas etanol con el capilar; igualmente con la muestra de osazona impura con etanol. Posteriormente, por medio de puntadas (20 en total) se coloca poco a poco en la placa de silicagel.

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