D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

M E T O D O S O F I C I A L E S D E A N A L I S I S

Productos
derivados de
la uva,
aguardientes
y sidras
 PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva
edición de sus folletos de Métodos Analíticos en Ali-
mentaria, en la que podrán apreciar a simple vista
un cambio de formato respecto a las anteriores.

M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

Esta nueva imagen, pretende ser una expresión de

los cambios que con el tiempo hemos experimentado
en nuestros campos de actividad, puesto que si con-
tinuamos manteniendo una importante implanta-
ción en el sector alimentario como fabricantes de
reactivos para análisis PANREAC y de los aditivos
alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumen-
tado nuestra aportación de productos para el análisis
alimentario con nuestras líneas de Cromatografía en
Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo
Deshidratados para Microbiología CULTIMED.
La colección Métodos Analíticos en Alimentaria se
compone de 6 folletos monográficos, por campos de
alimentos, que recogen una transcripción íntegra
de los métodos oficiales de análisis en España, que
a su vez son publicados en los correspondientes
B.O.E. mencionados en el índice de cada
monografía incorporando los reactivos y productos
auxiliares PANREAC en la calidad considerada
más idónea, así como los medios de cultivo
CULTIMED.
 M
Los títulos de las 6 monografías son:

Aceites y grasas
Aguas potables
de consumo público
y aguas de bebida envasadas
Carne y productos cárnicos
Cereales, derivados de cereales
y cerveza
Leche y productos lácteos
Productos derivados de la uva,
aguardientes y sidras
Obviamente esta edición ha sido actualizada con las
disposiciones publicadas hasta el momento, que
establecen nuevos procedimientos o que modifican
notablemente características anteriormente estable-
cidas.
Por último, comentarles que están a su disposición
además de esta colección, nuestros:
Catálogo General de Reactivos PANREAC
Catálogo ADITIO de Aditivos Alimentarios
Catálogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshi-
dratados
Catálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y
Accesorios para Cromatografía en Capa Fina.
 Productos derivados
de la uva:
I N D I C E Vinos
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,
30-8-1979 Y 14-10-1981)
1- Examen organoléptico
(B.O.E. 22-7-1977) ............................ 9
2- Ensayos previos de conservación ....... 9
3a- Color (B.O.E. 14-10-1981) .................. 10
3b- Color de los vinos (aplicable a vinos
tintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ... 14
4a- Masa volúmica y densidad relativa
(método picnométrico) ........................ 14
4b- Masa volúmica y densidad relativa
(método areométrico) ......................... 15
5a- Título alcohométrico (método
picnométrico)...................................... 22
5b- Título alcohométrico (método
areométrico) (B.O.E. 23-7-1977) ......... 29
6- Extracto seco total ............................. 31
7a- Azúcares reductores (defecación
plúmbica) (provisional) ........................ 34
7b- Azúcares reductores (defecación
mercúrica) (provisional) ....................... 36
7c- Azúcares reductores (valoración)
(B.O.E. 30-8-1979) ............................. 37
8- Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977).. 38
9- 2,3-Butanodiol ................................... 40
10a- Sacarosa (método cualitativo
colorimétrico)...................................... 42
10b- Sacarosa (método cuantitativo) ........... 43
11- Cenizas ............................................. 43
12- Alcalinidad de cenizas ........................ 44
13- Fosfatos ............................................. 44
14- Calcio (método complexométrico) ....... 45
15- Magnesio ........................................... 46
16- Hierro (método colorimétrico del
sulfocianuro) ....................................... 47
17- Cobre ................................................ 48
18- Potasio (fotometría de llama) .............. 49
19- Sodio (fotometría de llama) ................. 49
20- Acidez total ........................................ 50
21- Acidez volátil ...................................... 51
22- Acido Sórbico en el destilado para
acidez volátil ...................................... 52
23- Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............ 53
24a- Acido Tartárico total (método del calcio
racemato)........................................... 53
24b- Acido Tartárico total (método
complexométrico) ............................... 54
25- Acido Láctico ..................................... 54
26- Acido Cítrico ...................................... 56
 M
27- Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ............... 58 7- Azúcares totales y reductores ............ 103
28a- Anhídrido Sulfuroso (método Paul) ......... 59 8- Acido Ascórbico ................................ 104
28b- Anhídrido Sulfuroso (método Ripper doble) 60 9- Relación glucosa/fructosa ................. 105
29- Acido Sórbico .................................... 61 10- Nitrógeno total .................................. 105
30- Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ............... 62 11- Etanol ............................................... 106
31- Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) .... 63 12- Indice de formol ................................ 107
32- Bromo total ....................................... 64 13- Prolina .............................................. 107
14- Acido Sórbico .................................... 108
33- Bromo orgánico ................................. 65
15- Acido Benzoico ................................. 108
34- Acidos Monobromoacético y
16- Hidroximetilfurfural ............................. 109
Monocloroacético de origen orgánico 17- Cenizas ............................................. 109
(método cualitativo) (provisional) ......... 66 18- Material mineral insoluble en Acido
35- Indice de Permanganato Clorhídrico al 10% ............................ 110
(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 67 19- Fósforo total ...................................... 110
36a- Determinación de presencia de vino 20- Sulfatos ............................................. 111
procedente de “híbridos productores 21- Anhídrido Sulfuroso ........................... 112
directos” (método cualitativo) ............. 68 22- Potasio .............................................. 112
36b- Determinación de presencia de vino 23- Sodio ................................................ 113
procedente de “híbridos productores 24- Arsénico ............................................ 113
directos” (provisional) ........................ 68 25- Hierro ................................................ 114
37- Metanol (Alcohol metílico) (método del 26- Plomo ............................................... 115
ácido cromotrópico) .......................... 69 27- Estaño ............................................... 115
38- Nitrógeno (método Kjeldhal) .............. 70 28- Cobre ............................................... 116
29- Zinc ................................................... 116
39a- Flúor (provisional) .............................. 71
39b- Flúor (B.O.E. 30-8-1979) ................... 73
40- Hidroximetilfurfural (provisional)
(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 74
Vinagres
41- Determinación cualitativa de Acido
Sórbico, Benzoico, p-Clorobenzoico, METODOS DE ANALISIS
Salicílico, p-Hidroxibenzoico y su éster (B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979
etílico ................................................ 75 Y 14-10-1981)
42- Investigación de derivados
monohalogenados del Acido Acético 1- Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) ....... 119
(B.O.E. 30-8-1979) ............................ 77 2- Acidez total (grado acético) ................ 119
43- Grado alcohólico en potencia ............ 78 3- Acidez fija ......................................... 119
4- Acidez volátil ..................................... 120
44- Grado alcohólico total ....................... 78
5- Sulfatos ............................................. 120
45- Colorantes sintéticos ......................... 78
6- Acetilmetilcarbinol (Acetoína)
46- Mercurio ............................................ 79 (B.O.E. 30-8-1979) ............................ 121
47- Plomo ................................................ 81 7- Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ............... 121
48- Relación P/a ..................................... 82 8- Indice de oxidación ........................... 122
49- Anhídrido Carbónico (método aprobado 9- Metanol (Alcohol Metílico), método del
pero no publicado en el B.O.E.) ......... 82 Acido Cromotrópico (B.O.E. 30-8-1979). 123
50- Etanal (método aprobado pero no 10a- Acido Tartárico (método cualitativo) .... 123
publicado en el B.O.E.) ...................... 84 10b- Acido Tartárico (método cuantitativo) .. 124
51- Presión del Anhídrido Carbónico 11- Cobre ............................................... 125
(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 85 12- Cloruros ............................................ 126
52- Antisépticos y Antifermentos (método 13- Grado alcohólico ................................ 126
microbiológico) .................................. 85 14- Arsénico ............................................ 127
15- Zinc ................................................... 128
Zumos de Uva 16-
17-
Prolina ..............................................
Acido Acético de síntesis
129

(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 129

METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 7-5-1988)
Orujos, Heces y Lías
1- Grado Brix ........................................ 89
2- Densidad .......................................... 98 METODOS DE ANALISIS
3- pH .................................................... 99 (B.O.E. 30-8-1979)
4- Acidez total ...................................... 99
5- Acidez volátil ..................................... 100 1- Contenido alcohólico en orujos, heces
6- Sólidos solubles ................................. 101 y lías ................................................. 133
Aguardientes 8-
9-
Sacarosa ...........................................
Acidez total .......................................
160
161
10- Materias reductoras
compuestos: (Azúcares reductores) ........................
11- Plomo ................................................
161
163
Whisky 12- Zinc ...................................................
13- Cobre ................................................
163
164
14- Arsénico ............................................ 164
METODOS DE ANALISIS (Anexo I de la
Orden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985)

1- Obtención del destilado ..................... 135

Anís
2- Furfurol ............................................. 135 METODOS DE ANALISIS
3- Extracto seco .................................... 136 (B.O.E. 13-5-1987)
4- Esteres .............................................. 136
5- Alcoholes superiores .......................... 137 1- Obtención del destilado ..................... 167
6- Metanol ............................................. 138 2- Peso específico del aceite esencial
7- Grado alcohólico ............................... 138 natural (en materia prima) ................... 167
8- Aldehídos .......................................... 139 3- Punto de fusión del aceite esencial
9- Acidez volátil ...................................... 140 natural (en materia prima) ................... 168
10- Cenizas (materia mineral total) ............ 140 4- Grado alcohólico ............................... 169
11- Plomo ................................................ 141 5- Azúcares totales ............................... 169
12- Zinc ................................................... 142 6- Anetol ............................................... 170
13- Cobre ................................................ 142 7- Metanol ............................................. 171
14- Arsénico ............................................ 142 8- Bases nitrogenadas ........................... 172
9- Aceites esenciales ............................. 173
10- Hidroximetilfurfural y furfural ............... 174
Ron 11-
12-
Arsénico ............................................
Plomo ...............................................
174
176
13- Zinc ................................................... 176
METODOS DE ANALISIS 14- Cobre ................................................ 177
(B.O.E. 24-10-1985)

1-
2-
Obtención del destilado ......................
Furfurol (Furfuraldehído) ......................
145
145
Sidras:
3-
4-
Extracto seco reducido ......................
Esteres ..............................................
146
147
Sidra y otras bebidas
5-
6-
Alcoholes superiores ..........................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
148
148
derivadas de la
7-
8-
Grado alcohólico ...............................
Aldehídos ..........................................
149
149
manzana
9- Acidez volátil ..................................... 150 METODOS DE ANALISIS
10- Azúcares reductores .......................... 150
(B.O.E. 28-7-1980)
11- Plomo ............................................... 153
12- Zinc ................................................... 153
13- Cobre ................................................ 154 1- Eliminación del Anhídrido
14- Arsénico ............................................ 154 Carbónico .......................................... 179
15- Sacarosa .......................................... 155 2- Grado alcohólico adquirido ................ 179
3- Azúcares reductores .......................... 179

Ginebra 4-
5-
Anhídrido Sulfuroso ............................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
179
179
6- Acidez volátil ..................................... 179
METODOS DE ANALISIS 7- Extrato seco total .............................. 179
(B.O.E. 25-10-1985) 8- Cenizas ............................................. 179
9- Hierro ................................................ 179
1- Obtención del destilado ..................... 157 10- Etanal ................................................ 179
2- Furfurol (Furfuraldehído) ..................... 157 11- Anhídrido Carbónico .......................... 180
3- Extracto seco .................................... 158
4- Bases nitrogenadas ........................... 158
5- Alcoholes superiores .......................... 158
6- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 159
7- Grado alcohólico ............................... 160
 M

Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos,
Productos derivados de
la Uva, Aguardientes
y Sidras ....................................... 184

Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial ................................. 190
Productos derivados
de la uva:
Vinos

NOTA: Se han consignado todos los métodos

oficiales de análisis de vinos publicados en el
B.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento
2676/90 de la C.E., por no estar suficientemente
extendidos en nuestro país y, por tanto, no tener
una aplicación generalizada.

METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,
30-8-1979 Y 14-10-1981)
1. EXAMEN ORGANOLEPTICO
1.1. Examen del color.
Determinar mediante apreciación visual las
características, bien definidas, del color del vino.
Observar el vino colocado en copas de cristal fino
e incoloro, o bien en tazas de plata o de fondo
plateado, el cual presentará diferentes formas
convexas o abolladas, para apreciar el vino en
diferentes espesores y sobre fondo brillante.
Utilizar las siguientes calificaciones del color
para vinos tintos: rojo rubí, rojo violáceo o mora-
do, viraje a tono cebolla o amarillento.
Según la intensidad del color, el vino tinto pue-
de calificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y si
tiene mucho o poco color dentro de estos tipos,
se dirá que tiene mucha o poca capa.
En vinos blancos, utilizar las calificaciones de
tono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro,
ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y en
todos los tipos, si el color es blanco, o si azulea,
pardea o ennegrece.
1.2. Formación de espuma.
Observar el aspecto de la espuma que se for-
ma al agitar el vino en la copa y determinar si es o
no abundante, si desaparece rápidamente o, en
caso de vinos tintos, si persiste unos momentos
el color más o menos intenso. El vino de mucha
capa o el vino enyesado produce espuma que tar-
da mucho en desaparecer.
1.3. Presencia de gas carbónico.
Verter vino en una copa. La formación de bur-
bujas indica la presencia de gas carbónico en el
vino. Este gas carbónico debe eliminarse para
continuar el examen de la muestra, agitando o en
la forma que se indica en los métodos analíticos.
1.4. Limpieza.
Apreciar en copa o en taza de plata, al mismo
tiempo que el color, si el vino está turbio, claro o
brillante.
Observar también si hay depósito y si al agitar
tiene aspecto cristalino o pulverulento que entur-
bie el vino.
1.5. Degustación o cata.
Proceder a la degustación recién destapada la
botella, consignando datos, referentes a la cali-
dad, origen, edad y posibles alteraciones del vino.
Coger una copa de cristal ovoide por su platillo
con los dedos pulgar, índice y central de la mano
derecha, quedando la copa libre para examinar el
vino. Llenar con vino sólo 1/3 o 1/4 de la copa,
para poder agitar bien y tener un espacio vacío
donde se concentren los aromas. Agitar haciendo
girar el vino y apreciar el aroma.
M
Apreciar y caracterizar el olor a “vinoso”, que
acusa vino nuevo, el “afrutado”, el del vino que
comenzó la “crianza”, la riqueza alcohólica, olores
ácidos volátiles, olores que acusen defectos de
elaboración, etc., y la presencia de enfermedades
y alteraciones.
En degustación de más precisión, como será
la necesaria para definir características de un tipo
de vino y que han de servir de referencia, es nece-
sario reunir un grupo determinado de buenos
catadores, y realizar un nú-mero de catas sufi-
cientes para obtener resultados satisfactorios
estadísticamente según las normas específicas
existentes.
1.6. Referencia.
1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: “Los
resultados de la cata del vino y del análisis quími-
co”. Boletín I.N.I.A., 31, 353-375, 1956.
2. ENSAYOS PREVIOS DE
CONSERVACION
2.1. Prueba del aire.
2.1.1. “Quiebras” tánico-férricas o fosfatoférri-
cas.- Dejar el vino en contacto con el aire (en una
copa mediada), en sitio fresco y al resguardo de la
luz. Observar al cabo de 12 o más horas. El entur-
biamiento o el ennegrecimiento pone de manifies-
to la posibilidad de “quiebras” tánico-férricas o
fosfato-férricas.
2.1.2. “Quiebra oxidásica”.- Proceder como en
2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pas-
terizada, para destruir la oxidasa, y la otra sin
pasterizar. La formación de color pardo y precipi-
tado pulverulento oscuro son señales característi-
cas de la “quiebra oxidásica”.
2.1.3. “Quiebra cuprosa”.- Poner la muestra
en botella cerrada, calentar en baño de agua a
357, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre es
suficiente, aparece enturbiamiento característico
de la “quiebra cuprosa”.
2.2. Prueba del frío.
Enfriar el vino a la temperatura que normal-
mente se suponga va a estar expuesto, y com-
probar si se produce precipitación de bitartrato.
2.3. Prueba de la estufa.
Mantener una muestra de vino en estufa a 22-257
durante 3-4 días. Examinar al microscopio el posible
desarrollo microbiano distinguiendo si se trata de
levaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder al 9
conteo y la identificación de los microorganismos.
2.4. Examen microscópico.
Realizar el examen microscópico sobre prepa-
ración del poso de la muestra, que puede apare-
cer después de reposo en estufa o a temperatura
ambiente.
 Si el vino se presenta turbio en el envase origi-
nal, hacer una preparación directamente del vino
o del poso obtenido por centrifugación de ese
vino. Si no se presenta depósito y el vino está
poco turbio, hacer una preparación del poso
obtenido por centrifugación.
Determinar en el examen microscópico si el
depósito es microbiano, distinguiendo levaduras y
bacterias.
3(a). COLOR
3.(a).1. Principio.
El color de los vinos se determina por trans-
parencia como se percibe por la vista, pero por
un procedimiento independiente de la aprecia-
ción personal, valiéndose de métodos espectro-
fométricos triestimulares de ordenadas seleccio-
nadas de Hardy, fundado en el sistema de la
Commisión Internationale de l’Echairage (C.I.E.),
con relación a la luz producida por un cielo nubla-
do (fuente C).
3(a).2.1. Espectrofotómetro para medida en
el espectro visible. Los valores de transmitancia
correspondientes a una misma muestra, no
deben acusar diferencias superiores a 0,005 y
cuando la escala del aparato esté graduada en
valores de transmitancia multiplicados por 100,
no debe haber diferencias superiores a 0,5.
Las cubetas de cuarzo o de vidrio de índice de
refracción máximo 1,5, de paredes paralelas y
espesor interno b que se expresa en centíme-
tros y con una aproximación de ± 0,002.b.
Conviene disponer de cuatro pares de cubetas
en las que los espesores b, sean de 0,1 cm;
0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm.
Según la intensidad del color se escogerán un
par de cubetas de tal forma que la absorbancia A
quede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia
0,5-0,2).
3(a).3. Procedimiento.
Si el vino no está limpio centrifugar previamen-
te. Eliminar el gas carbónico, si es necesario, por
agitación con vacío parcial.
Medir directamente con el espectrofotómetro
las transmitancias del vino a las cuatro longitudes
de onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleando
la cubeta de espesor conveniente, según intensi-
10 dad del color del vino.
3(a).4. Cálculo.
Utilizar 131074 Agua PA-ACS como líquido de
referencia.
3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) del
punto representativo del color del vino en el dia-
grama tricromático de la C.I.E.
X Y
x = ————— y = —————
X+Y+Z X+Y+Z
X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445
Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495
Z = 0,24 T495 + 0,94 T445
Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan las
proporciones de colores rojos, verdes y azules
que dan por mezcla el color del vino.
Cuando el espesor b de la cubeta sea inferior
a 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en la
siguiente forma T = T’1/b y si la transmitancia viene
expresada en porcentaje.
1/b
T’
T = ————–—
1/b -1
100 ( )
T = transmitancia referida a 1 cm de espesor
de cubeta.
T’ = transmitancia obtenida para b cm de
espesor de cubeta.
b = espesor en cm de la cubeta utilizada.
Como los espectrofotómetros están general-
mente graduados tanto en transmitancia T como
en absorbancia A, se puede también calcular la
transmitancia en 1 cm de espesor del vino a par-
tir de la absorbancia observada en el espesor b, si
la medida se ha hecho en cubeta de espesor infe-
rior a 1 cm, teniendo en cuenta que:
1
A = log ———
T
Con este fin, se calculan las absorbancias A en
un cm de espesor multiplicando respectivamente
por 2,5 y 10 las absorbancias leídas en un espe-
sor b de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen después
los valores correspondientes de transmitancia
bien por aplicación de la relación anterior, bien
refiriéndose a la tabla calculada a partir de esa
misma relación.
3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor de
Y, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0
y el incoloro y = 100).
3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cro-
maticidad (longitud de onda dominante y pureza)
se recurre al diagrama de cromaticidad, que
representa el “locus” de todos los colores del
espectro, considerando que a 400 nm, corres-
ponde el azul, a 520 nm corresponde el verde y
a 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a la
fuente luminosa utilizada, que, en este caso, es
el iluminante estándar Q, que representa la luz

de un día medianamente claro y cuyas coorde-
nadas son:
xo = 0,3101 e y o = 0,3163
3(a).4.4. Longitud de onda dominante.
Conocidas las coordenadas x e y del color, se
une el punto de esas coordenadas C al punto 0.
En el punto en el que esta recta corta al “Spec-
trum Locus” se encuentra la longitud de onda
dominante que corresponde al matiz de este
color. Así en el caso de vinos de tono teja, la lon-
gitud de onda dominante se sitúa entre 585 y 598
nm aproximadamente. Para los vinos de un color
tinto franco, se sitúa entre 599 y 650 nm, mien-
tras que para los vinos de tono rojo púrpura está
caracterizada por la longitud de onda dominante
del color complementario. Se obtiene el valor de
Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.
M
esta longitud de onda prolongando la recta en la
dirección de C hacia 0 para que ella corte el
“Spectrum Locus” como hemos visto antes.
Este color complementario en el caso de vinos
de tono rojo púrpura se sitúa en el verde. Se ano-
ta el valor de esta longitud de onda seguida de c
(complementario), por ejemplo 495 c.
3(a).4.5. Pureza.
La pureza se calcula determinando la distancia
relativa del punto C que representa el color del
vino examinado y del punto S que corresponde al
“Spectrum Locus” al punto 0 que representa al
iluminante.
Se expresa la pureza en porcentaje por la rela-
ción:
Distancia del punto C al punto 0
100 x —————————————––———
Distancia del punto 0 al punto S
11
 3(a).5. Observaciones.
3(a).5.1. El color de un vino queda completa-
mente definido por la luminosidad relativa Y en
porcentaje y las coordenadas tricromáticas x e y.
Se pueden preveer las características cromáti-
cas de una mezcla de varios vinos cuando se
conocen las características cromáticas de las
mismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de la
mezcla se obtienen por la suma de esos valores
multiplicando por su proporción para cada consti-
tuyente.

TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS

%
trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

0 3,00 2,70 2,52 2,40 2,30 2,22 2,15 2,10 2,05

1 2,00 1,96 1,92 1,89 1,85 1,82 1,80 1,77 1,74 1,72
2 1,70 1,68 1,66 1,64 1,62 1,60 1,59 1,57 1,55 1,54
3 1,52 1,51 1,50 1,48 1,47 1,46 1,44 1,43 1,42 1,41
4 1,40 1,39 1,38 1,37 1,36 1,35 1,34 1,33 1,32 1,31
5 1,30 1,29 1,28 1,28 1,27 1,26 1,25 1,24 1,24 1,23
6 1,22 1,21 1,21 1,20 1,19 1,19 1,18 1,17 1,17 1,16
7 1,15 1,15 1,14 1,14 1,13 1,13 1,12 1,11 1,11 1,10
8 1,10 1,09 1,09 1,08 1,08 1,07 1,07 1,06 1,06 1,05
9 1,05 1,04 1,04 1,03 1,03 1,02 1,02 1,01 1,01 1.00
10 1,00 1,00 0,99 0,99 0,98 0,98 0,97 0,97 0,97 0,96
11 0,96 0,95 0,95 0,95 0,94 0,94 0,93 0,93 0,93 0,92
12 0,92 0,92 0,91 0,91 0,91 0,90 0,90 0,90 0,89 0,89
13 0,89 0,88 0,88 0,88 0,87 0,87 0,87 0,86 0,86 0,86
14 0,85 0,85 0,85 0,84 0,84 0,84 0,84 0,83 0,83 0,83
15 0,82 0,82 0,82 0,82 0,81 0,81 0,81 0,80 0,80 0,80
16 0,80 0,79 0,79 0,79 0,78 0,78 0,78 0,78 0,77 0,77
17 0,77 0,77 0,76 0,76 0,76 0,76 0,75 0,75 0,75 0,75
18 0,74 0,74 0,74 0,74 0,73 0,73 0,73 0,73 0,73 0,72
19 0,72 0,72 0,72 0,71 0,71 0,71 0,71 0,71 0,70 0,70
20 0,70 0,70 0,69 0,69 0,69 0,69 0,69 0,68 0,68 0,68
21 0,68 0,68 0,67 0,67 0,67 0,67 0,67 0,66 0,66 0,66
22 0,66 0,66 0,65 0,65 0,65 0,65 0,65 0,64 0,64 0,64
23 0,64 0,64 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,62 0,62
24 0,62 0,62 0,62 0,61 0,61 0,61 0,61 0,61 0,60 0,60
25 0,60 0,60 0,60 0,60 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59
26 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,57 0,57 0,57 0,57
27 0,57 0,57 0,57 0,57 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56
28 0,55 0,55 0,55 0,55 0,55 0,54 0,54 0,54 0,54 0,54
29 0,54 0,54 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,52
30 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,51 0,51 0,51 0,51
31 0,51 0,51 0,51 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
32 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,48 0,48
33 0,48 0,48 0,48 0,48 0,48 0,47 0,47 0,47 0,47 0,47
34 0,47 0,47 0,47 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46
35 0,46 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,44
36 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,43 0,43
37 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,42 0,42 0,42 0,42
12 38
39
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,41
0,42
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
0,41
0,40
40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39
41 0,39 0,39 0,39 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38
42 0,38 0,38 0,38 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37
43 0,37 0,37 0,37 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36
44 0,36 0,36 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35
 M
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS
%
trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

45 0,35 0,35 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34
46 0,34 0,34 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33
47 0,33 0,33 0,33 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32
48 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31
49 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,30 0,30 0,30 0,30
50 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,29 0,29 0,29 0,29
51 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,28
52 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28
53 0,28 0,28 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27
54 0,27 0,27 0,27 0,27 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26
55 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
56 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,24
57 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24
58 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23
59 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,22 0,22 0,22 0,22
60 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22
61 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21
62 0,21 0,21 0,21 0,21 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20
63 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,19 0,19
64 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19
65 0,19 0,19 0,19 0,19 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18
66 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,17 0,17
67 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17
68 0,17 0,17 0,17 0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16
69 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16
70 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
71 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,14 0,14 0,14 0,14
72 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14
73 0,14 0,14 0,14 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13
74 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13
75 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12
76 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,11 0,11 0,11
77 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11
78 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10
79 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10
80 0,10 0,10 0,10 0,10 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09
81 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09
82 0,09 0,09 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
83 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
84 0,08 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
85 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
86 0,07 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06
87 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06
88 0,06 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
89 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
90 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04
91 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0.04
92 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03
93 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03
94
95
0,03
0,02
0,03
0,02
0,03
0,02
0,03
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
13
96 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,01
97 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01
98 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,00
99 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
100 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
 3(b). COLOR DE LOS VINOS
(Aplicable a vinos tintos y rosados)
3(b).1. Principio.
La intensidad de color se mide por la suma de
las absorbancias del vino para un espesor de 1
cm correspondientes a las longitudes de onda de
absorbancia mínima (420 nm) del vino tinto.
La tonalidad se expresa por el ángulo que for-
ma con el eje de longitudes de onda la cuerda
que une los puntos de la curva espectrofotométri-
ca representativos de las absorbancias corres-
pondientes a las longitudes de onda de 420 y
520 nm.
3(b).2. Material y aparatos.
Como en 3(a).2.
3(b).3. Procedimiento.
Como en 3(a).3, excepto que las longitudes de
onda utilizadas serán de 420 nm y 520 nm.
3(b).4. Cálculo.
Calcular la intensidad colorante y la tonalidad.
3(b).4.1. Intensidad colorante:
1 4(a).2.4. Balanza con aproximación de 0,1 mg.
I = (A420 + A520) –––––
b
A420 = absorbancia a 420 nm.
A520 = absorbancia a 520 nm.
b = espesor en cm de la cubeta.
3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide por
el ángulo cuya tangente es igual a la diferencia del
valor numérico de las dos absorbancias A 520-A420.
Conocido este valor, se puede determinar el valor
del ángulo por tablas expresadas en grados sexa-
gesimales.
3(b).5. Observaciones.
Con este método no se determina el color,
sino la intensidad y la tonalidad del color, que son
características cromáticas convencionales. Por su
rapidez y sencillez, es muy práctico para compro-
bar la evolución de la materia colorante durante
su “crianza” o añejamiento.
3(b).6. Referencias.
3(b).6.1. Determinación triestimular del color
de los vinos, método simplificado por C.Stella.
14 Comunicación al O.I.V. núm. 282 (2 febrero 1968).
3(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969.
4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
RELATIVA
(Método picnométrico)
4(a).1. Principio.
La masa volúmica es el cociente de la masa de
un cierto volumen de vino o de mosto por este
volumen, Se expresa en g por ml y su símbolo es
r20.
La densidad relativa es el cociente de la masa
volúmica del vino por la masa volúmica del agua.
Su símbolo es d ó simplemente d, cuando no
20
haya posibilidad de confusión.
La masa volúmica y la densidad relativa de un
vino se determinan a 20°C.
El método picnométrico consiste en la deter-
minación ponderal del contenido en alcohol de un
destilado por medio de un picnómetro.
4(a).2. Material y aparatos.
4(a).2.1. Picnómetro de vidrio de 50 ml de
capacidad, de cuello con diámetro interior de
3,5 mm. Embudo y sifón para picnómetros.
4(a).2.2. Termómetro contrastado dividido en
1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a
307C.
4(a).2.3. Termostato regulado a 207C ± 0,27.
4(a).3. Procedimiento.
Lavar bien el picnómetro y enjuagarlo después
con 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con Eter
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-
ACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamente
con paño de hilo o papel filtro el exterior, y con
corriente de aire seco el interior, tapar, dejar en
reposo en la caja de la balanza durante 30 minu-
tos aproximadamente, y pesar.
Llenar después con agua a 207 recién destila-
da, con cuidado de evitar burbujas de aire en el
interior del picnómetro. Sumergir en el agua a la
temperatura comprobada de 207.
Mantener el picnómetro en el termostato
durante 30 minutos, y enrasar el nivel del agua
con la marca del cuello. Tapar el picnómetro,
secar exteriormente con las precauciones
expuestas, dejar nuevamente 30 minutos en la
caja de la balanza y después pesar.
Vaciar el picnómetro, enjuagar nuevamente,
primero con agua y después con Etanol 96% v/v
PA y Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente,
llenar con el vino a temperatura de 207C, aproxi-
madamente, cuidando que no quede ninguna
burbuja de aire (en caso de que el vino tenga gas
carbónico, se eliminará previamente como luego
se indica). Dejar el picnómetro con el vino en el
termostato a 207C ± 0,27 durante 30 minutos, lle-
nar hasta volumen con el vino y pesar.
 M
4(a).4. Cálculo. un volumen de unos 250 ml del vino, en matraz
4(a).4.1. Cálculo de la densidad relativa a de 1.000 ml.
207C. Si el vino está turbio, se filtrará por papel de fil-
tración rápida, de pliegues y procurando airear lo
P” - P menos posible, tapando también el embudo con
d20
20 = –––––––– vidrio de reloj.
P’ - P Si el enturbiamiento es por suspensión de
levadura, la filtración corriente aludida no lo acla-
P = peso en g del picnómetro vacío. rará, siendo conveniente en este caso, dejar
P’ = peso en g del picnómetro más agua a decantar el vino en probeta tapada, durante dos o
207C. tres días en sitio fresco.
P” = peso en g del picnómetro más vino a
207C. 4(a).6. Referencia.

4(a).4.2. Cálculo de la masa volúmica r20. 4(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969.
r20 = 0,998203 d20
20
o bien 4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
c RELATIVA
r20 = d20
20 - –––––––– (Método areométrico)
1.000
4(b).1. Principio.
El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y Determinación de la masa volúmica a partir de
4(a).II. la lectura del areómetro que flota introducido
La aproximación de los resultados será de en el vino.
0,0003. Para mayor precisión, se tendrá en cuen-
ta el empuje del aire como en 5(a).5. 4(b).2. Material y aparatos.
4(b).2.1. Areómetro. Los areómetros empleados
4(a).5. Observaciones. deben responder a las siguientes normas (I.S.O.):
Si el vino contiene cantidad sensible de gas Parte cilíndrica sumergible y tallo de sección
carbónico, se eliminará todo lo posible agitando circular de 3 mm de diámetro como mínimo. Para

TABLA 4(a). I

Cálculo de la masa volúmica (r20) a partir de la densidad

relativa 20/20 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100

Correcciones c 1,73 1,76 1,80 1,84 1,87 1,91 1,94 1,98
Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260
Correcciones c 2,02 2,05 2,09 2,12 2,16 2,20 2,23 2,27
Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400
Correcciones c 2,30 2,34 2,38 2,41 2,45 2,48 2,52

TABLA 4(a). II

Cálculo de la masa volúmica (r15) a partir de la densidad

relativa 15/15 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100

Correcciones c 0,86 0,88 0,90 0,92 0,94 0,95 0,97 0,99 15
Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260
Correcciones c 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,13
Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400
Correcciones c 1,15 1,17 1,19 1,21 1,22 1,24 1,25
 vinos secos, la graduación será de 0,983 a 1,003 r = lectura del tallo graduado del areómetro.
t

en milésimas y 0,2 milésimas. Las divisiones de c = valor de la corrección correspondiente a la

milésimas deben ser de 5 mm como mínimo. Para temperatura del vino en el momento de la lectura.
vinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventual- Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b).
mente para mostos, se recomienda un juego de 5 II.
areómetros graduados de 1,000-1,030; 1,030- t = temperatura del vino en el momento de la
1,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150. lectura.
Estos aparatos estarán graduados en masas Los resultados se obtendrán con una precisión
volúmicas a 207C, en milésimas y 0,5 milésimas de 0,0003.
por lo menos. Cada división de una milésima será
de 3mm como mínimo. En los aparatos se indica- 4(b).5. Observaciones.
rá que las lecturas deben hacerse por la parte Si se utilizan areómetros que den d15 20
4 o d 20,
superior del menisco. hay que corregir la lectura en las tablas corres-
4(b).2.2. Termómetro contrastado, graduado pondientes, y después expresar los resultados en
por lo menos en 1/2 grados. d 20
20 o r 20 , empleando las fórmulas y tablas si-
4(b).2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diá- guientes:
metro interior y 320 mm de altura.
4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelación, C
para mantener vertical la probeta sobre ella colo- d20 15
20 = d 4 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). III.
cada. 1.000

4(b).3. Procedimiento. C
Colocar en la probeta descrita 250 ml del vino d20 15
20 = d15 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). IV.
e introducir el areómetro y el termómetro. 1.000
El areómetro y especialmente el tallo graduado
deberán estar limpios y desengrasados. C
Agitar para uniformar la temperatura. Un minu- r20 15
20 = d 4 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). V.
to después, hacer la lectura del termómetro. Reti- 1.000
rar el termómetro y hacer la lectura de la masa
aparente sobre el tallo del areómetro, después de C
un minuto de reposo. r20 15
20 = d15 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). VI.
1.000
4(b).4. Cálculo.
Calcular la masa volúmica referida a 207C. 4(b).6. Referencias.
4(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
c (_ si t es inferior a 207C) d’Analyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26.
r20 = rt ± –––––– 4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
1.000 (+ si t es superior a 207C) correspondance entre les diverses tables Alcoo-
métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
r20= masa volúmica referida a 207. 111-141, 1966.

TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207
Tem- GRADOS ALCOHOLICOS
pera-
turas 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34

11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94
16 13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52

15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29

16º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,93 0,99 1,05
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81
 M
TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207

Tem- GRADOS ALCOHOLICOS

pera-
turas 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28

20º

21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24

25º 1.16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57

26º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99

30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38

Tem- GRADOS ALCOHOLICOS

pera-
turas 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27

10º 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66

15º 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,23

16º 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46

20º

21º 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95

25º 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,45

26º 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º
28º
2,35
2,73
2,44
2,83
2,53
2,93
2,63
3,03
2,72
3,14
2,82
3,26
2,93
3,38
3,04
3,50
3,14
3,62
3,25
3,75
3,37
3,85
3,48
4,00
17
29º 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54

30º 3,40 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
 TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 137

Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18

11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78

12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61

15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19

16º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78

17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48

20º

21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47

22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90

25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40

26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87

27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37

30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92

TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207
MASAS VOLUMICAS VINOS DE 157
Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,51 2,85 3,20 3,54 3,86 4,02 4,46

11º 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02

12º 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61
13º 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19
14º 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77

15º 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32

16º 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88

17º 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44
18º 0,60 0,66 0,73 0,80 0,86 0,91 0,97
19º 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51

20º

21º 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50

22º 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98
18 23º
24º
0,97
1,32
1,06
1,44
1,16
1.54
1,25
1,66
1,34
1,78
1,42
1,89
1,51
2,00

25º 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52

26º 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01

27º 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52
28º 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07
29º 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59

30º 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16

 M
TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 177

Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74

11º 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28

12º 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94

15º 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,47

16º 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00

17º 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53

20º

21º 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53

22º 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,43 1,55 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11

25º 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66

26º 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17

27º 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82

30º 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42

TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207
MASAS VOLUMICAS VINOS DE 197
Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07

11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57

12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13

15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62

16º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13

17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56

20º

21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56

22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10
23º
24º
1,15
1,55
1,30
1,67
1,34
1,77
1,43
1,89
1,51
2,00
1,60
2,11
1,68
2,23
19
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71

26º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35

27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08

30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71

 TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 217

Tempera-
turas 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41

11º 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88

12º 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33

15º 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,80

16º 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26

17º 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59

20º

21º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59

22º 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,25 1,34 1,44 1,53 1,61 1,70 1,78
24º 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36

25º 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,97

26º 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54

27º 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36

30º 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,02

TABLA 4(b). III

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4

Vinos secos (d15

4 comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1

Correcciones c 0,9 0,8 0,8 0,8 0,7 0,7 0,7
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 0,6 0,6 0,5 0,5 0,4 0,3 0,3
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 0,2 0,1 0,0 0,0 -0,1 -0,2 -0,3

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

20

{
107 0,7 0,5 0,3 0,1 0,0 -0,2 -0,3
137 0,6 0,4 0,2 0,0 -0,1 -0,3 -0,4
Grados 157 0,5 0,2 0,0 -0,2 -0,3 -0,5 -0,6
Alcohólicos 177 0,4 0,1 -0,1 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7
197 0,2 -0,1 -0,3 -0,5 -0,6 -0,8 -0,9
217 0,0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,7 -0,9 -1,0
 M
TABLA 4(b). IV

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1

Correcciones c 0,1 0,1 0,1 0,2 0,2 0,2 0,3
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 0,3 0,4 0,4 0,5 0,6 0,6 0,7
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 0,9 0,9 1,0 1,0 1,1 1,2 1,2

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

{
107 0,2 0,4 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1
137 0,3 0,5 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2
Grados 157 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4
Alcohólicos 177 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2 1,4 1,5
197 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4 1,6 1,7
217 1,0 1,1 1,2 1,4 1,5 1,7 1,8

TABLA 4(b). V

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/4

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1

Correcciones c 0,9 1,0 1,0 1,0 1,1 1,1 1,1
Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 1,2 1,2 1,3 1,3 1,4 1,5 1,5
Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

21

{
107 1,1 1,3 1,5 1,7 1,8 2,0 2,1
137 1,2 1,4 1,6 1,8 1,9 2,1 2,2
Grados 157 1,3 1,6 1,8 2,0 2,1 2,3 2,4
Alcohólicos 177 1,4 1,7 1,9 2,1 2,2 2,4 2,5
197 1,6 1,9 2,1 2,3 2,4 2,6 2,7
217 1,8 2,0 2,2 2,4 2,5 2,7 2,8
 TABLA 4(b). VI

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/15

15
Vinos secos (d 15 comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,11 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1

Correcciones c 1,81 1,9 1,9 1,9 2,0 2,0 2,0
Grados alcohólicos 12,11 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1
Correcciones c 2,11 2,1 2,2 2,2 2,3 2,4 2,4
Grados alcohólicos 19,11 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1
Correcciones c 2,65 2,6 2,7 2,7 2,8 2,9 3,0

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

{
107 2,0 2,2 2,4 2,6 2,7 2,9 3,1
137 2,1 2,3 2,5 2,7 2,8 3,1 3,2
Grados 157 2,2 2,5 2,7 2,9 3,0 3,3 3,4
Alcohólicos 177 2,3 2,6 2,8 3,0 3,1 3,4 3,5
197 2,5 2,8 3,0 3,2 3,3 3,6 3,7
217 2,7 2,9 3,1 3,3 3,4 3,7 3,8

5(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1) 5(a).2.2. Picnómetro.- Como en 4(a).2.1, de

(Método picnométrico)
5(a).1. Principio.
El título alcohométrico es igual al número de
litros de etanol contenidos en 100 l de vino, medi-
dos ambos volúmenes a 207C, y se expresa en
grados alcohólicos volumétricos, con una preci-
sión de 0,17C.
Se determina por destilación simple de líquido
alcalinizado y medida de la densidad del destilado
por picnometría.
5(a).2. Material y aparatos.
5(a).2.1. Aparato de destilación.- Consta de
las siguientes partes:
5(a).2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml
con rodaje esmerilado.
5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm de
largo.
5(a).2.1.3. Disco metálico o de amianto con un
orificio de 8 cm de diámetro.
5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de
longitud, con circulación rápida de agua y dis-
22 puesto verticalmente.
vidrio pyrex.
5(a).2.3. Tara del picnómetro.- Recipiente de
vidrio del mismo volumen exterior que el picnómetro.
Se llena casi por completo con una solución de sodio
cloruro, de densidad tal que la masa de esta tara sea
igual a la masa del picnómetro lleno de un líquido de
densidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Su
capacidad exterior debe ser igual a la del picnómetro
lleno, con una aproximación de 1 ml de diferencia.
5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en
4(a).2.
5(a).2.5. Balanza analítica de 0,1 mg y 100 g
de carga.
5(a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural,
escoriforme QP
131325 Fenolftaleína PA-ACS
211835 Piedra Pómez gránulos QP
5(a).3.1. Lechada de cal. Solución de 120 g
de Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.

(1).- Denominación adoptada para el grado alcohólico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).

5(a).4. Procedimiento.
Para vinos jóvenes o espumosos, eliminar
previamente el gas carbónico. Agitar 250 ml de vino
en un matraz de 500 ml previamente siliconado el
interior del matraz por tres gotas de solución al 1%,
de silicona soluble en agua, y después de bien seco,
añadir el vino.
5(a).4.1. Destilación.- Medir 250 ml de vino en un
matraz aforado con cuello de 12 mm de diámetro
interior como máximo, y anotar la temperatura.
Introducir el vino en un matraz de destilación que
contenga una docena de fragmentos de materia
porosa Piedra Pómez gránulos QP. Lavar el matraz
cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Añadir
10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante del
vino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinos
muy ácidos, puede comprobarse por toques exter-
nos el viraje de la Fenolftaleína PA-ACS. Recoger el
destilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendo
unos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumer-
girse el pico del tubo afilado, prolongación del refrige-
rante. Destilar por lo menos 200 ml. Después agitar y
llenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la misma
temperatura que se midió el vino inicialmente.
5(a).4.2. Tarado del picnómetro vacío.- Poner en
un platillo de la balanza la tara y en el otro el picnóme-
tro vacío, limpio y seco, y a su lado, las masas nece-
sarias p, para entre ambos equlibrar la balanza.
La masa equivalente a la de la tara será:
Masa del picnómetro + m + p
m = 0,0012 V.
m = masa en g del aire contenido en el picnóme-
tro vacío.
V = volumen en ml del picnómetro.
0,0012 g/ml = masa volúmica del aire.
El volumen del picnómetro se considera, con sufi-
ciente aproximación, que es numéricamente igual a la
masa de Agua PA-ACS que llene el picnómetro.
Para calcular esta masa, colocar el picnómetro
lleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p’
es la masa que hay que colocar a su lado para equi-
librar la de la tara, la masa m será:
m = (p - p’) . 0,0012
Operar siempre a 207 exactamente para realizar el
enrase, utilizando el termostato. Si se opera a t7, para
conocer el volumen del picnómetro a 207, hay que
multiplicar (p - p’) por un factor F, que da la tabla 5 (a). I
para picnómetro del vidrio pyrex.
Repetir estas operaciones de tara tres veces
seguidas. Al cabo de un año, volver a comprobar la
tara del picnómetro.
Con balanza monoplato, proceder análogamente.
Primero poner la tara, hacer la lectura correspondien-
te en la escala de pesos y después poner el picnó-
metro vacío. Anotar los pesos p que hay que añadir
hasta marcar la pesada que alcanzó la tara.
Tara = picnómetro + aire + p
5(a).4.3. Determinación picnométrica.- Llenar el
picnómetro lavado y seco con las precauciones
M
expuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohólico a la
temperatura ambiente, llevar después al termosta-
to, agitar el líquido haciendo girar el picnómetro por
dos o tres veces, hasta que la temperatura que
marca el termómetro del picnómetro sea constante.
Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secar
éste, colocarlo sobre el tapón receptor (para peque-
ños rebordes) y anotar la temperatura tº utilizando
una lupa. Secar con el mismo cuidado el exterior
del picnómetro y llevarlo al platillo de la balanza.
Equilibrar la tara del picnómetro colocada en el otro
platillo.
5(a).5. Cálculo.
Calcular el título alcohométrico expresado en gra-
dos alcohólicos volumétricos.
5(a).5.1. Cálculo de la masa volúmica aparente.
p + m - p’
r t = ——————————————
volumen del picnómetro a 20º
r t = masa volúmica aparente.
m = masa del aire contenido en el picnómetro
vacío.
p = diferencia de masa entre la tara y el picnóme-
tro lleno con destilado alcohólico.
5(a).5.2. Cálculo de grado alcohométrico.
Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V. a
207C utilizando la tabla 5(a). I de masa volúmicas a t7
corregidas del empuje del aire.
Buscar sobre la línea horizontal correspondiente a
la cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifra
de la masa volumen inmediatamente superior a rt. El
grado alcohólico que encabeza la columna donde se
encuentra esta cifra será la parte entera del grado
alcohólico a 207C.
Determinar la masa volúmica r correspondiente a
la parte entera de la temperatura, t, utilizando la dife-
rencia tabular que se lee por debajo de la masa
volúmica inmediatamente superior a rt antes encon-
trada, y la cifra decimal t, r = rt + (diferencia tabular x
parte decimal de t) 10-5.
Hallar la parte decimal del grado alcohólico a 207,
buscando en las tablas sobre la línea horizontal que
comienza con la cifra de los enteros de la temperatu-
ra, t, la masa volúmica r‘ que sea inmediatamente
superior a r, y dividiendo la diferencia r‘ - r por la
diferencia tabular que está a la derecha de la cifra de
la masa volúmica r‘.
5(a).6. Referencias.
23
5(a).6.1 Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969.
5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de corres-
pondance entre les diverses tables alcoométriques”.
Société Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.
 24
TABLA 5 (a). I
Masas volúmicas aparentes de mezclas hidroalcohólicas (picnómetro Pyrex)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe-
raturas 0 1 2 3 4 5 6

10º 999 61 1 50 998 11 1 46 996 65 1 43 995 22 1 39 993 83 1 34 992 49 1 30 991 19 1 25

9 8 8 9 9 10 9
11º 999 52 1 49 998 03 1 46 996 57 1 44 995 13 1 39 993 74 1 35 992 39 1 29 991 10 1 26
10 10 10 10 10 10 1
12º 999 42 1 49 997 93 1 46 996 47 1 44 995 03 1 39 993 64 1 35 992 29 1 30 990 99 1 26
11 11 11 11 11 11 12
13º 999 31 1 49 997 82 1 46 996 36 1 44 994 92 1 39 993 53 1 35 992 18 1 31 990 87 1 26
12 12 13 12 13 13 13
14º 999 19 1 49 997 70 1 47 996 23 1 43 994 80 1 40 993 40 1 35 992 05 1 31 990 74 1 26
14 14 13 14 14 14 14
15º 999 05 1 49 997 56 1 46 996 10 1 44 994 66 1 40 993 26 1 35 991 91 1 31 990 60 1 27
14 14 15 14 14 15 16
16º 998 91 1 49 997 42 1 47 995 95 1 43 994 52 1 40 993 12 1 36 991 76 1 32 990 44 1 27
16 16 15 16 16 16 16
17º 998 75 1 49 997 26 1 46 995 80 1 44 994 36 1 40 992 96 1 36 991 60 1 32 990 28 1 28
17 17 17 17 18 18 18
18º 998 58 1 49 997 09 1 46 995 63 1 44 994 19 1 41 992 78 1 36 991 42 1 32 990 10 1 28
18 18 18 18 18 19 19
19º 998 40 1 49 996 91 1 46 995 45 1 44 994 01 1 41 992 60 1 37 991 23 1 32 989 91 1 29
19 19 20 20 19 19 20
20º 998 21 1 49 996 72 1 47 995 25 1 44 993 81 1 40 992 41 1 37 991 04 1 33 989 71 1 29
20 20 20 20 21 21 21
21º 998 01 1 49 996 52 1 47 995 05 1 44 993 61 1 41 992 20 1 37 990 83 1 33 989 50 1 30
21 21 21 21 21 22 22
22º 997 80 1 49 996 31 1 47 994 84 1 44 993 40 1 41 991 99 1 38 990 61 1 33 989 28 1 30
22 22 22 23 23 23 23
23º 997 58 1 49 996 09 1 47 994 62 1 45 993 17 1 41 991 76 1 38 990 38 1 33 989 05 1 31
24 24 24 23 24 24 25
24º 997 34 1 49 995 85 1 47 994 38 1 44 992 94 1 42 991 52 1 38 990 14 1 34 988 80 1 31
24 24 24 25 25 25 25
25º 997 10 1 49 995 61 1 47 994 14 1 45 992 69 1 42 991 27 1 38 989 89 1 34 988 55 1 31
25 25 25 25 25 26 26
26º 996 85 1 49 995 36 1 47 993 89 1 45 992 44 1 42 991 02 1 39 989 63 1 34 988 29 1 32
26 26 27 27 27 27 28
27º 996 59 1 49 995 10 1 48 993 62 1 45 992 17 1 42 990 75 1 39 989 36 1 35 988 01 1 32
27 28 27 27 28 28 28
28º 966 32 1 50 994 82 1 47 993 35 1 45 991 90 1 43 990 47 1 39 989 08 1 35 987 73 1 33
28 28 28 29 28 28 29
29º 996 04 1 50 994 54 1 47 993 07 1 46 991 61 1 42 990 19 1 39 988 80 1 36 987 44 1 33
29 29 29 29 30 30 30
30º 995 75 1 50 994 25 1 47 992 78 1 46 991 32 1 43 989 89 1 39 988 50 1 36 987 14 1 34
 TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 7 8 9 10 11 12
raturas

10º 989 94 1 19 988 75 1 16 987 59 1 13 986 46 1 11 985 35 1 08 984 27 1 04

10 11 11 12 13 14
11º 989 84 1 20 988 64 1 16 987 48 1 14 986 34 1 12 985 22 1 08 984 13 1 05
11 12 12 13 15 15
12º 989 73 1 21 988 52 1 16 987 36 1 15 986 21 1 14 985 07 1 09 983 98 1 07
12 12 14 15 15 17
13º 989 61 1 21 988 40 1 18 987 22 1 16 986 06 1 14 984 92 1 11 983 81 1 07
13 14 15 15 16 17
14º 989 48 1 22 988 26 1 19 987 07 1 16 985 91 1 15 984 76 1 12 983 64 1 09
15 16 16 17 18 19
15º 989 33 1 23 988 10 1 19 986 91 1 17 985 74 1 16 984 58 1 13 983 45 1 10
16 16 17 18 19 20
16º 989 17 1 23 987 94 1 20 986 74 1 18 985 56 1 17 984 39 1 14 983 25 1 11
17 18 18 19 20 21
17º 989 00 1 24 987 76 1 20 986 56 1 19 985 37 1 18 984 19 1 15 983 04 1 12
18 18 19 20 21 22
18º 988 82 1 24 987 58 1 21 986 37 1 20 985 17 1 19 983 98 1 16 982 82 1 13
20 20 21 21 22 23
19º 988 62 1 24 987 38 1 22 986 16 1 20 984 96 1 20 983 76 1 17 982 59 1 14
20 21 22 23 23 34
20º 988 42 1 25 987 17 1 23 985 94 1 21 984 73 1 20 983 53 1 18 982 35 1 16
22 22 22 23 24 25
21º 988 20 1 25 986 95 1 23 985 72 1 22 984 50 1 21 983 29 1 19 982 10 1 17
22 23 24 24 26 27
22º 987 98 1 26 986 72 1 24 985 48 1 22 984 26 1 23 983 03 1 20 981 23 1 17
24 25 25 16 26 27
23º 987 74 1 27 986 47 1 24 985 23 1 23 984 00 1 23 982 77 1 21 981 56 1 18
25 25 26 27 27 28
24º 987 49 1 27 986 22 1 25 984 97 1 24 983 73 1 23 982 50 1 22 981 28 1 20
25 26 27 27 29 30
25º 987 24 1 28 985 96 1 26 984 70 1 24 983 46 1 25 982 21 1 23 980 98 1 20
27 27 27 29 29 30
26º 986 97 1 28 985 69 1 26 984 43 1 26 983 15 1 25 981 92 1 24 980 68 1 21
28 29 29 29 31 31
27º 986 96 1 29 985 40 1 26 984 14 1 26 982 88 1 27 981 61 1 24 980 37 1 23
29 29 30 31 31 33
28º 986 40 1 29 985 11 1 27 983 84 1 27 982 57 1 27 981 30 1 26 980 04 1 23
29 30 31 31 32 33
29º 986 11 1 30 984 81 1 28 983 53 1 27 982 26 1 28 980 98 1 27 979 71 1 24
31 31 31 32 33 34
30º 985 80 1 30 984 50 1 28 983 22 1 28 981 94 1 29 980 65 1 28 979 37 1 25
M

25
 26
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 13 14 15 16 17 18
raturas

10º 983 23 1 02 982 21 99 981 22 98 980 24 94 979 30 94 978 36 91

15 16 18 19 21 22
11º 983 08 1 03 982 05 1 01 981 04 99 980 05 96 979 09 95 978 14 93
17 18 19 20 22 23
12º 982 91 1 04 981 87 1 02 980 85 1 00 979 85 98 978 87 96 977 91 95
17 19 20 22 23 25
13º 982 74 1 06 981 68 1 03 980 65 1 02 979 63 99 978 64 98 977 66 96
19 19 21 22 24 25
14º 982 55 1 06 981 49 1 05 980 44 1 03 979 41 1 01 978 40 99 977 41 97
20 22 22 24 25 26
15º 982 35 1 08 981 27 1 05 980 22 1 05 979 17 1 02 978 15 1 00 977 15 97
21 22 24 24 26 28
16º 982 14 1 09 981 05 1 07 979 98 1 05 978 93 1 04 977 89 1 02 976 87 1 00
22 23 24 26 27 28
17º 981 92 1 10 980 82 1 08 979 74 1 07 978 67 1 05 977 62 1 03 976 59 1 02
23 24 26 27 28 30
18º 981 69 1 11 980 58 1 10 979 48 1 08 978 40 1 06 977 34 1 05 976 29 1 03
24 25 26 28 29 30
19º 981 45 1 12 980 33 1 11 979 22 1 10 978 12 1 07 977 05 1 06 975 99 1 05
26 27 28 28 30 32
20º 981 19 1 13 980 06 1 12 978 94 1 10 977 84 1 09 976 75 1 08 975 67 1 06
26 27 28 30 31 32
21º 980 93 1 14 979 79 1 13 978 66 1 12 977 54 1 10 976 44 1 09 975 35 1 08
27 29 30 31 32 33
22º 980 66 1 16 979 50 1 14 978 36 1 13 977 23 1 11 976 12 1 10 975 02 1 09
28 29 30 31 33 33
23º 980 38 1 17 979 21 1 15 978 06 1 14 976 92 1 13 975 79 1 11 974 68 1 11
30 30 32 33 34 36
24º 980 08 1 17 978 91 1 17 977 74 1 15 976 59 1 14 975 45 1 13 974 32 1 11
30 32 32 34 34 36
25º 979 78 1 19 978 59 1 17 977 42 1 17 976 25 1 14 975 11 1 15 973 96 1 13
31 32 34 34 36 37
26º 979 47 1 20 978 27 1 19 977 08 1 17 975 91 1 16 974 75 1 16 973 59 1 14
33 33 34 36 37 38
27º 979 14 1 20 977 94 1 20 976 74 1 19 975 55 1 17 974 38 1 17 973 21 1 15
33 35 35 36 37 38
28º 978 81 1 22 977 59 1 20 976 39 1 20 975 19 1 18 974 01 1 18 972 83 1 17
34 35 36 37 39 40
29º 978 47 1 23 977 24 1 21 976 03 1 21 974 82 1 20 973 62 1 19 972 43 1 18
35 36 37 38 39 40
30º 978 12 1 24 976 88 1 22 975 66 1 22 974 44 1 21 973 23 1 20 972 03 1 20
 TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe- 19 20 21 22 23 24
raturas

10º 977 45 89 976 56 90 975 66 91 974 75 91 973 84 94 972 90 94

24 25 27 29 32 32
11º 977 21 90 976 31 92 975 39 93 974 46 94 973 52 94 972 58 97
25 27 28 30 31 34
12º 976 96 92 976 04 93 975 11 95 974 16 95 973 21 97 972 24 98
26 27 30 31 33 35
13º 976 70 93 975 77 96 974 81 96 973 85 97 972 88 99 971 89 1 00
26 29 30 32 34 35
14º 976 44 96 975 48 97 974 50 98 973 53 99 972 54 1 00 971 54 1 02
28 29 31 33 35 37
15º 976 16 97 975 19 99 974 20 1 00 973 20 1 01 972 19 1 02 971 17 1 04
29 31 32 33 35 37
16º 975 87 99 974 88 1 00 973 88 1 01 972 87 1 03 971 84 1 04 970 80 1 06
30 31 33 35 36 38
17º 975 57 1 00 974 57 1 02 973 55 1 03 972 52 1 04 971 48 1 06 970 42 1 08
31 32 34 36 38 40
18º 975 26 1 01 974 25 1 04 973 21 1 05 972 16 1 06 971 10 1 08 970 02 1 09
32 34 35 36 38 39
19º 974 94 1 03 973 91 1 05 972 86 1 06 971 80 1 08 970 72 1 09 969 623 1 11
33 34 36 38 39 41
20º 974 61 1 04 973 57 1 07 972 50 1 08 971 42 1 09 970 33 1 11 969 22 1 13
34 35 36 38 40 41
21º 974 27 1 05 973 22 1 08 972 14 1 10 971 04 1 11 969 93 1 12 968 81 1 15
34 36 38 39 41 43
22º 973 93 1 07 972 86 1 10 971 76 1 11 970 65 1 13 969 52 1 14 968 38 1 16
36 37 38 40 41 43
23º 973 57 1 08 972 49 1 11 971 38 1 13 970 25 1 14 969 11 1 16 967 95 1 17
36 38 40 41 42 44
24º 973 21 1 10 972 11 1 13 970 98 1 14 969 84 1 15 968 69 1 18 967 51 1 19
38 39 40 41 44 45
25º 972 83 1 11 971 72 1 14 970 58 1 15 969 43 1 18 968 25 1 19 967 06 1 20
38 40 41 43 44 45
26º 972 45 1 13 971 32 1 15 970 17 1 17 969 00 1 19 967 81 1 20 966 61 1 22
39 40 42 43 44 46
27º 972 06 1 14 970 92 1 17 969 75 1 18 968 57 1 20 967 37 1 22 966 15 1 24
40 41 42 44 46 47
28º 971 66 1 15 970 51 1 18 969 33 1 20 968 13 1 22 966 91 1 23 965 68 1 25
41 43 44 45 46 48
29º 971 25 1 17 970 08 1 19 968 89 1 21 967 68 1 23 966 45 1 25 965 20 1 26
42 42 44 45 47 48
30º 970 83 1 17 969 66 1 21 968 45 1 23 967 22 1 24 965 98 1 26 964 72 1 28
M

27
 28
TABLA 5 (a). I
(Continuación)

GRADOS ALCOHOLICOS
Tempe-
25 26 27 28 29 30
raturas

10º 971 96 94 971 02 97 970 05 99 969 06 1 01 968 05 1 03 967 02 1 08

35 37 39 41 43 45
11º 971 61 96 970 65 99 969 66 1 01 968 65 1 03 967 62 1 05 966 57 1 09
35 38 40 42 44 46
12º 971 26 99 970 27 1 01 969 26 1 03 968 23 1 05 967 18 1 07 966 11 1 12
37 38 40 42 44 46
13º 970 89 1 00 969 89 1 03 968 86 1 05 967 81 1 07 966 74 1 09 965 65 1 14
37 40 42 44 46 47
14º 970 52 1 03 969 49 1 05 968 44 1 07 967 37 1 09 966 28 1 10 965 18 1 16
39 40 42 44 46 48
15º 970 13 1 04 969 09 1 07 968 02 1 09 966 93 1 11 965 82 1 12 964 70 1 17
39 41 43 44 46 48
16º 969 74 1 06 968 68 1 09 967 59 1 10 966 49 1 13 965 36 1 14 964 22 1 20
40 42 43 46 47 49
17º 969 34 1 08 968 26 1 10 967 16 1 13 966 03 1 14 964 89 1 16 963 73 1 20
41 42 45 46 48 50
18º 968 93 1 09 967 84 1 13 966 71 1 14 965 57 1 16 964 41 1 18 963 23 1 23
41 44 45 47 49 50
19º 968 52 1 12 967 40 1 14 966 26 1 16 965 10 1 18 965 92 1 19 962 73 1 25
43 44 46 48 49 51
20º 968 09 1 13 966 96 1 16 965 80 1 18 964 62 1 19 963 43 1 21 962 22 1 26
43 45 46 48 50 52
21º 967 66 1 15 966 51 1 17 965 34 1 20 964 14 1 21 962 93 1 23 961 70 1 27
44 45 47 49 50 52
22º 967 22 1 16 966 06 1 19 964 87 1 22 963 65 1 22 962 43 1 25 961 18 1 29
44 47 48 49 52 53
23º 966 78 1 19 965 59 1 20 964 39 1 23 963 16 1 25 961 91 1 26 960 65 1 31
46 47 49 51 52 53
24º 966 32 1 20 965 12 1 22 963 90 1 25 962 65 1 26 961 39 1 27 960 12 1 32
46 48 50 51 52 55
25º 965 86 1 22 964 64 1 24 963 40 1 26 962 14 1 27 960 87 1 30 959 57 1 33
47 48 50 51 53 54
26º 965 39 1 23 964 16 1 26 962 90 1 27 961 63 1 29 960 34 1 31 959 03 1 36
48 49 50 52 54 55
27º 964 91 1 24 963 67 1 27 962 40 1 29 961 11 1 31 959 80 1 32 959 58 1 36
48 50 52 53 54 56
28º 964 43 1 26 963 17 1 29 961 88 1 30 960 58 1 32 959 26 1 34 957 92 1 38
49 51 52 54 55 57
29º 963 94 1 28 962 66 1 30 961 36 1 32 960 04 1 33 958 71 1 36 957 35 1 40
50 51 53 54 56 57
30º 963 44 1 29 962 15 1 32 960 83 1 33 959 50 1 35 958 15 1 37 956 78 1 40
 M
5(b). TITULO ALCOHOMETRICO 5(b).4.2. Determinación areométrica.- Como
(Método areométrico) en 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza desti-
lado en vez de vino, y que el tallo del areómetro
5(b). 1.Principio. viene graduado en grados alcohólicos aparentes.
Como en 5(a).1. Hacer al menos tres lecturas del grado alcohólico
aparente, sirviéndose si es preciso de una lupa.
5(b).2. Material y aparatos.
5(b).2.1. Aparatos de destilación.- Como en 5(b).5. Cálculo.
5(a).2.1. Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V.
5(b).2.2. Aparatos de areometría. a 207C, utilizando la tabla 5(b).I, añadiendo o res-
5(b).2.2.1. Alcohómetro. tando al grado alcohólico aparente a t7 la correc-
5(b).2.2.2. Termómetro. ción correspondiente.
5(b).2.2.3. Probeta.
5(b).6. Referencias.
5(b).3. Reactivos. 5(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
Como en 5(a).3. d’Analyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969.
5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
5(b).4. Procedimiento. correspondance entre les diverses tables alcoo-
Las generalidades como en 5(a).4. métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
5(b).4.1. Destilación.- Como en 5(a).4.1. 111, 141, 1966.

TABLA 5 (b). I
Correcciones a efectuar sobre el grado alcohólico aparente
para corregir la acción de la temperatura

Tempe- Grados alcohólicos aparentes

raturas
0 1 2 3 4 5 6 7 8

10º 0,84 0,87 0,88 0,92 0,96 1,01 1,08 1,16 1,24

11º 0,80 0,81 0,83 0,86 0,90 0,96 1,01 1,08 1,16
12º 0,74 0,76 0,78 0,80 0,84 0,88 0,94 1,00 1,07
SUMAR

13º 0,67 0,69 0,70 0,73 0,76 0,80 0,85 0,90 0,95
14º 0,60 0,61 0,62 0,65 0,68 0,71 0,75 0,79 0,85

15º 0,51 0,52 0,54 0,56 0,58 0,61 0,64 0,68 0,72

16º 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,53 0,55 0,58
17º 0,32 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46
18º 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,30 0,31
19º 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16

20º - - - - - - - - -

21º - 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16

22º - 0,26 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,32 0,34
23º - 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51
24º - 0,56 0,57 0,58 0,59 0,61 0,64 0,67 0,70

25º - 0,71 0,72 0,73 0,75 0,78 0,81 0,84 0,89

29
RESTAR

26º - 0,86 0,88 0,91 0,93 0,96 1,00 1,04 1,09

27º - - 1,05 1,08 1,10 1,14 1,18 1,23 1,28
28º - - 1,22 1,25 1,28 1,33 1,38 1,44 1,50
29º - - 1,40 1,44 1,48 1,52 1,58 1,64 1,71

30º - - 1,59 1,62 1,66 1,71 1,77 1,85 1,93

 TABLA 5 (b). I (continuación)
Tempe- Grados alcohólicos aparentes
raturas
9 10 11 12 13 14 15 16 17
10º 1,34 1,44 1,58 1,73 1,89 2,06 2,24 2,43 2,63
SUMAR

11º 1,25 1,34 1,46 1,59 1,73 1,88 2,04 2,21 2,38
12º 1,15 1,23 1,32 1,43 1,55 1,68 1,82 1,97 2,13
13º 1,02 1,10 1,18 1,28 1,38 1,48 1,60 1,72 1,85
14º 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,39 1,49 1,59
15º 0,77 0,82 0,87 0,94 1,01 1,09 1,17 1,26 1,34
16º 0,62 0,66 0,71 0,76 0,82 0,88 0,94 1,01 1,08
17º 0,48 0,51 0,55 0,58 0,63 0,67 0,71 0,76 0,81
18º 0,33 0,34 0,36 0,39 0,42 0,45 0,47 0,50 0,53
19º 0,16 0,17 0,18 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
20º - - - - - - - - -
21º 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
22º 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54
23º 0,54 0,56 0,60 0,63 0,67 0,71 0,74 0,78 0,82
24º 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04 1,09
25º 0,93 0,98 1,02 1,07 1,12 1,18 1,24 1,32 1,38
RESTAR

26º 1,14 1,19 1,24 1,30 1,36 1,43 1,51 1,57 1,65
27º 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,85 1,93
28º 1,56 1,62 1,68 1,75 1,83 1,92 2,02 2,11 2,21
29º 1,78 1,85 1,92 2,00 2,08 2,17 2,28 2,39 2,50
30º 2,00 2,07 2,15 2,23 2,33 2,45 2,55 2,67 2,79
TABLA 5 (b). I (continuación)
Tempe- Grados alcohólicos aparentes
raturas
18 19 20 21 22 23 24 25 26
10º 2,84 3,01 3,15 3,29 3,44 3,58 3,70 3,82 3,93
SUMAR

11º 2,56 2,71 2,84 2,95 3,08 3,21 3,32 3,42 3,52
12º 2,27 2,40 2,51 2,63 2,73 2,84 2,93 3,02 3,10
13º 1,99 2,11 2,20 2,29 2,38 2,47 2,57 2,64 2,71
14º 1,71 1,81 1,89 1,96 2,03 2,11 2,19 2,25 2,30
15º 1,44 1,51 1,58 1,64 1,71 1,77 1,82 1,87 1,91
16º 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36 1,40 1,45 1,49 1,53
17º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15
18º 0,56 0,60 0,63 0,65 0,68 0,70 0,72 0,75 0,76
19º 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37
20º - - - - - - - - -
21º 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38
22º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,71 0,73 0,74
23º 0,86 0,90 0,94 0,98 1,00 1,03 1,06 1,08 1,11
24º 1,14 1,21 1,27 1,31 1,35 1,38 1,42 1,46 1,50
30 25º 1,44 1,51 1,60 1,65 1,69 1,72 1,76 1,81 1,86
RESTAR

26º 1,73 1,82 1,90 1,97 2,02 2,06 2,12 2,18 2,23
27º 2,02 2,12 2,22 2,30 2,36 2,42 2,47 2,53 2,59
28º 2,31 2,43 2,54 2,63 2,70 2,76 2,83 2,90 2,96
29º 2,62 2,73 2,85 2,96 3,05 3,11 3,18 3,25 3,32
30º 2,91 3,04 3,16 3,28 3,38 3,38 3,46 3,54 3,61
 6.4. Observaciones. 6.5. Referencia.
El extracto seco se expresa por la cantidad de 6.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
sacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da una d’ Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.
solución de la misma densidad que el residuo sin
alcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalen-
cia de esta densidad, en extracto, expresada en
sacarosa.
TABLA 6. I
Contenido en extracto seco (g/l)

Densidad Tercer decimal de la densidad

con dos
deci-
males 0 1 2 3 4 5

Gramos de extracto por litro

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8

1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0

1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2
1,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6

1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7

1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3

1,20 527,8 - - - - -

32
 M
TABLA 6. I
(Continuación)

Densidad Tercer decimal de la densidad

con dos
deci-
males 6 7 8 9

Gramos de extracto por litro

1,00 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 41,3 43,9 46,5 49,1

1,02 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 171,6 174,3 176,9 179,5

1,07 197,8 200,5 203,1 205,8
1,08 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 303,3 305,9 308,6 311,2

1,12 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 436,4 439,0 441,7 444,4

1,17 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 - - - -

TABLA INTERCALAR

4º decimal
de la densidad Extracto g/l

1 0,3
2 0,5
3 0,8
4 1,0
5 1,3
6 1,6
7
8
1,8
2,1
33
9 2,3
 7 (a). AZUCARES REDUCTORES
(Defecación plúmbica)
(Provisional)
7(a).1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reduc-
toras distintas de los azúcares por defecación con
plomo acetato neutro, y valoración basada en la
acción reductora sobre solución cupro-alcalina.
Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muy
intenso.
7(a).2. Material y aparatos.
7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran-
te de reflujo.
7(a).2.2. Filtro de vidrio G3 con capa fina de
amianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo.
7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco de
seguridad intermedio.
7(a).3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121212 Calcio Carbonato precipitado PA
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA
121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato
PA-ACS-ISO
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV
(o preparar con 131527 Potasio Permangana-
to PA-ACS-ISO)
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS
7(a).3.1. Solución de Plomo II Acetato (aproxi-
madamente saturada). Añadir a 250 g de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS
caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución com-
pleta.
7(a). 3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA
7(a).3.4. Solución Cúprica A. Mezclar 40 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua
PA-ACS hasta 1 l.
34 7(a).3.5. Solución Tartrato-Alcalina B. Mezclar
200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-
ISO con 150 g de Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1 l.
7(a).3.6. Solución de Hierro III C. Mezclar 50 g
de Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua PA-
ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta solución
poniendo en un vaso de vidrio 30 ml de solución
C, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de Hierro
II-1, 10 Fenantrolina. La coloración amarillo-ver-
dosa de esta mezcla debe virar a verde puro con
una sola gota de Potasio Permanganato 0,02
mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, añadir Potasio
Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la solución
hasta conseguir el viraje descrito. Generalmente
es necesario añadir 1-3 ml de Potasio Permanga-
nato 0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solución C.
7(a).3.7. Solución de Hierro II-1,10 Fenantroli-
na. Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato p2-hidra-
to PA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de
1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS.
7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 g
de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en Agua
PA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solución por
valoración con una solución de di-Sodio Oxalato
PA-ACS
7(a).4. Procedimiento.
7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino a
un matraz aforado de 125 ml, añadir (V-0,5) ml de
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-
men de solución N/10 utilizada para valorar la
acidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Aña-
dir agitando 5 ml de solución saturada de Plomo
II Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitado
PA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lo
menos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS,
añadir 0,6 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforado
de 100 ml colocar un volumen de vino variable
según su riqueza en azúcar. Para vinos dulces con
masa volúmica comprendida entre 1,005 y 1,038,
tomar 20 ml de líquido a analizar, diluido al 20%.
Para vinos abocados con masa volúmica entre
0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido.
Añadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitado
PA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,5-
2,0 ml) de solución saturada de Plomo II Acetato
hasta el límite del enturbiamiento, agitar y dejar
reposar durante 15 minutos por lo menos, agi-
tando de cuando en cuando. Enrasar, añadir
0,2 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml de
vino dulce y 0,20 ml de vino abocado.
En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml de
solución Cúprica A, 20 ml de solución Tartrato-
Alcalina B, 20 ml de solución azucarada conte-
niendo de 10 a 100 mg de azúcar reductor. Hacer
hervir con reflujo (o con la boca del matraz tapada
con un pequeño embudo) durante 3 minutos,
enfriar inmediatamente bajo una corriente de
Agua PA-ACS hasta refrigeración completa, dejar
posar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyer
en un cristalizador con algodón y descansando el

cuello en el borde), filtrar después por el filtro G3
con la capa de amianto, ayudando la filtración con
la trompa de vacío. Tener la precaución de que, en
lo posible, haya una capa de líquido sobre el pre-
cipitado adherido al fondo, tanto en el filtro como
en el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavar
el precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACS
hirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres veces
la operación, agitar cada vez con precacución de
operar rápidamente para no dejar al descubierto
el precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kita-
sato y proceder a la disolución del Cobre I Oxido,
añadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml de
solución C de Hierro III Sulfato, que disuelve rápi-
damente el precipitado y verter la solución en el fil-
tro. Disolver el precipitado que queda en el filtro,
agitando con varilla de vidrio para facilitar la diso-
lución. Repetir tres veces estas adiciones y lavar
Erlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml de
M
Agua PA-ACS fría cada vez.
Valorar el Hierro II Sulfato formado, que se
encuentra en el líquido del Kitasato, con Potasio
Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, añadiendo
previamente una gota de solución de Hierro II-
1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoración
cuando el color pase de verde-naranja a verde
franco.
7(a).5. Cálculo.
La cantidad de azúcar contenida en la solución
azucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I.
7(a).6. Referencias.
7(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969.
7(a).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, págs.
170-171, 1951.

TABLA 7 (a). I
KMn04 Azúcar KMn04 Azúcar KMn04 Azúcar
N/10 invertido N/10 invertido N/10 invertido
ml mg ml mg ml mg
4,0 12,4 12,0 39,1 20,0 68,7
4,2 13,0 12,2 39,7 20,2 69,3
4,4 13,6 12,4 40,5 20,4 70,1
4,6 14,3 12,6 41,2 20,6 70,9
4,8 14,9 12,8 42,0 20,8 71,6
5,0 15,5 13,0 42,6 21,0 72,4
5,2 16,2 13,2 43,3 21,2 73,2
5,4 16,8 13,4 44,1 21,4 74,1
5,6 17,5 13,6 44,7 21,6 74,9
5,8 18,1 13,8 45,5 21,8 75,6
6,0 18,8 14,0 46,3 22,0 76,4
6,2 19,4 14,2 47,0 22,2 77,2
6,4 20,1 14,4 47,6 22,4 78,0
6,6 20,7 14,6 48,4 22,6 78,7
6,8 21,4 14,8 49,1 22,8 79,5
7,0 22,0 15,0 49,8 23,0 80,3
7,2 22,7 15,2 50,5 23,2 81,1
7,4 23,4 15,4 51,3 23,4 81,9
7,6 24,1 15,6 52,1 23,6 82,7
7,8 24,7 15,8 52,7 23,8 83,5
8,0 25,5 16,0 53,5 24,0 84,4
8,2 26,1 16,2 54,2 24,2 85,2
8,4 26,8 16,4 55,0 24,4 86,0
8,6 27,5 16,6 55,7 24,6 86,7
8,8 28,1 16,8 56,4 24,8 87,5
9,0 28,8 17,0 57,2 25,0 88,4
9,2 29,5 17,2 57,9 25,2 89,2
9,4 30,1 17,4 58,7 25,4 90,0
9,6 30,8 17,6 59,4 25,6 90,9
9,8 31,5 17,8 60,1 25,8 91,6
10,0 32,2 18,0 61,0 26,0 92,5
10,2 32,9 18,2 61,6 26,2 93,3
10,4
10,6
33,6
34,3
18,4
18,6
62,4
63,2
26,4
26,6
94,1
95,0 35
10,8 35,0 18,8 64,0 26,8 95,8
11,0 35,6 19,0 64,8 27,0 96,6
11,2 36,4 19,2 65,4 27,2 97,3
11,4 37,0 19,4 66,2 27,4 98,2
11,6 37,7 19,6 67,1 27,6 99,1
11,8 38,4 19,8 67,8 27,8 99,9
 7(b). AZUCARES REDUCTORES
(Defecación mercúrica)
(Provisional)
7(b).1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reduc-
toras distintas de los azúcares por defecación con
mercurio II acetato, y valoración por la acción
reductora de los azúcares sobre la solución
cupro-alcalina. Aplicable a vinos jóvenes, de color
intenso y ricos en azúcar, o cuando se va a reali-
zar una valoración polarimétrica. Este método
proporciona la menor pérdida de azúcares reduc-
tores.
7(b).2. Material y aparatos.
7(b).2.1. Aparato generador de ácido sulfhídri-
co. Filtrar el gas producido por la acción del ácido
clorhídrico diluido sobre el hierro II sulfuro por
paso a través de lana de vidrio y lavado en un
frasco lavador con agua.
7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso de
ácido sulfhídrico. Eliminar el ácido sulfhídrico en
exceso después de la precipitación del exceso de
mercurio, mediante aspiración conectada al tubo
lateral de un Kitasato, en el que se encuentra el
líquido a tratar. Tapar el matraz con un tapón atra-
vesado por un tubo que se sumerge en el líquido.
Humedecer el aire aspirado que entra en el tubo
por borboteo en un matraz de un litro lleno hasta
la mitad de agua.
7(b).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
131325 Fenolftaleína PA-ACS
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA
131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV
(o preparar con 131527 Potasio Permanganato
PA-ACS-ISO
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
36 131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS
141783 Zinc metal, polvo PRS
7(b).3.1. Solución de Mercurio II. Mezclar 240 g
de Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 ml
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadir
Agua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolución
completa, enfriar y añadir Agua PA-ACS hasta 1
litro.
7(b).3.2. Solución de Sodio Hidróxido 4N apro-
ximadamente. Tomar Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N)
SV y diluir convenientemente. Esta solución debe
poder neutralizar exactamente un volumen igual al
suyo, de la solución de Mercurio II en presencia de
Fenolftaleína PA-ACS. Se debe comprobar esta
correspondencia antes de su empleo, en particu-
lar si se observa un depósito en la solución de
Mercurio II y si es necesario diluir la solución só-
dica.
7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminar
el exceso de Mercurio.
7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8).
7(b).4. Procedimiento.
7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que se
propone determinar el azúcar y la desviación pola-
rimétrica. Colocar 100 ml de vino en una cápsula
de 10-12 cm de diámetro y adicionar (V-0,5) ml de
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-
men de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
empleado para valorar la acidez total de 10 ml de
vino, como en 20.4. Evaporar en baño de agua
hirviendo con corriente de aire caliente sobre la
superficie del líquido, hasta reducir el volumen a
50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de
100 ml, lavar tres veces la cápsula con Agua PA-
ACS, añadir 5 ml de solución de Mercurio II y, agi-
tando, 5 ml de solución de Sodio Hidróxido que
se corresponde, volumen a volumen, con la de
Mercurio II (solución de Sodio Hidróxido 4N apro-
ximadamente), dejar reaccionar 5 minutos por lo
menos; añadir 2 ml de solución de Mercurio II
Acetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el fil-
trado en un Kitasato de 500 ml.
Tratar el filtrado con una corriente de Acido
Sulfhídrico para precipitar el Mercurio en forma de
Sulfuro negro (este tratamiento puede detenerse
cuando el precipitado tome color negro). Después
se hace barbotar aire (previamente saturado de
vapor de agua) a través del líquido, hasta que
haya perdido todo su olor a Acido Sulfhídrico
(5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado corres-
ponde a 1 ml de vino. Este líquido se emplea sin
dilución cuando se trata de vino seco o con unos
5 g/l de azúcar.
Con vino más rico en azúcar conviene diluir
después del examen polarimétrico y antes del
análisis químico.
7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que sola-
mente se va a realizar el análisis del azúcar por el
método químico y no por polarografía. Tomar
20 ml de vino sin diluir o diluido según norma
anterior, añadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de
solución de Mercurio II Acetato y añadir, agitando,
1 ml de la solución sódica.
Dejar actuar 5 minutos por lo menos, añadir
 M
1 ml de solución de Mercurio II, enrasar con agua posterior valoración basada en la acción reducto-
y filtrar. Tratar con Acido Sulfhídrico y aire húmedo ra de los azúcares sobre una solución cupro-alca-
barbotando en la forma antes expuesta, y filtrar. lina.
Continuar como en 7(a). 4 después de la defe-
cación. 7(c).2. Material y aparatos.
7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran-
7(b).5. Observaciones. te de reflujo.
En los análisis de azúcar por el método quími- 7(c).2.2. Material necesario para volumetría.
co, para vinos no muy ricos en azúcar, en vez de 7(c).2.3. Baño de agua.
eliminar el exceso de mercurio por el ácido sulfhí-
drico, es más práctico eliminarlo mediante la adi- 7(c).3. Reactivos.
ción de Zinc metal, polvo PRS, de la siguiente 131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
forma: Añadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS al 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
líquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuando 131074 Agua PA-ACS
en cuando, y filtrar. 171096 Almidón soluble RE
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
7(b).6. Referencias. 211835 Piedra Pómez gránulos QP
7(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales 131542 Potasio Yoduro PA-ISO
d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969. 131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
7(b).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, pág. 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
176, 1951. 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

7(c). AZUCARES REDUCTORES 7(c).3.1. Solución Cupro-Alcalina:

(Valoración)
7(c).1. Principio.
Eliminación de las materias reductoras distin-
tas de los azúcares reductores por defecación, y
Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfa-
to 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-
ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en
300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Car-
bonato 10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de Agua

TABLA 7(c).I
Azúcares reductores, expresados en mg

ml sodio Primera cifra decimal

tiosulfato
0,1N 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,9
1 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,1
2 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,4
3 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,7
4 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,1
5 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,5
6 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,9
7 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,3
8 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,7
9 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0
10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,5
11 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,0
12 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,5
13 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,0
14 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,5
15 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,0
16 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,6
17 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,4
18 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,1
19 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,0 37
20 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,9
21 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,8
22 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,8
23 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,8
24 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,8
25 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8
 PA-ACS caliente. Mezclar la solución de Acido
Cítrico y la de Sodio Carbonato. Añadir a continua-
ción la solución de Cobre II Sulfato y completar el
volumen con Agua PA-ACS hasta un litro.
7(c).3.2. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
Conservar en frasco topacio.
7(c).3.3. Solución de Acido Sulfúrico al 25% en
volumen.
7(c).3.4. Solución de Engrudo de Almidón de
5 g/l; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro PA-
ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta
solución debe ser mantenida diez minutos en ebu-
llición en el momento de su preparación.
7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.
7(c).4. Procedimiento.
Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de la
solución Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previa-
mente defecado según 7(a) o 7(b). Este volumen
añadido no debe contener más de 60 mg de azú-
cares reductores.
Añadir algunos granos de Piedra Pómez grá-
nulos QP, y llevar a ebullición, que debe ser alcan-
zada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al
refrigerante de reflujo y mantener exactamente
durante diez minutos la ebullición.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yodu-
ro al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico
al 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A conti-
nuación, valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV.
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo
los 25 ml del vino previamente defecados por
igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se
ha indicado antes para la muestra.
7(c).5. Cálculo.
La cantidad de azúcar, expresada en azúcar
invertido contenida en la muestra analizada, se
obtiene en la tabla 7(c).1 en función del n’ - n de
ml de tiosulfato utilizado.
Siendo:
n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N
utilizados en la valoración de la muestra.
n’ = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N
utilizados en la prueba en blanco.
Expresar el contenido del vino en g de azúcar
invertido por litro, teniendo en cuenta las dilucio-
nes efectuadas en el curso de la defecación del
volumen de la muestra analizada.
38 7(c).6. Referencia.
7(c).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31.
8. GLICEROL (Glicerina)
8.1. Principio.
La glicerina separada del vino, previa defeca-
ción, por extracción con acetona, se oxida con
ácido peryódico a formaldehído. La reacción
coloreada del formaldehído con la fluoroglucina
permite la determinación espectrofotométrica a
480 nm. La presencia de sorbitol y de manitol
son causa de error en la determinación de glice-
rina.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Aparato de destilación. Compuesto de
las siguientes partes:
8.2.1.1. Matraz esférico de 500 ml.
8.2.1.2. Columna rectificadora.
8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aisla-
miento.
8.2.1.4. Termómetro con escala de 0-1107 C.
8.2.1.5. Refrigerante.
8.2.2. Frascos con tapón esmerilado de 1 l y de
60 ml.
8.2.3. Matraz aforado de 50 ml.
8.2.4. Matraz aforado de 200 ml.
8.2.5. Matraces con tapón esmerilado de 60 ml.
8.2.6. Matraces aforados de 100 ml.
8.2.7. Kitasato o recipiente para vacío de 250 ml.
8.2.8. Filtro de porosidad número 4.
8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574
de 12,5 cm de diámetro o similar.
8.2.10 Espectrofotómetro con cubetas de 1 cm
de espesor interior.
8.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
131188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO
Fluoroglucina 0,2%
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
211456 Piedra Pómez gránulos QP
121523 Potasio meta-Peryodato PA
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
8.3.1. Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO.
8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP
8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO
8.3.4. Sodio Hidróxido 1N SV.
8.3.5. Piedra Pómez gránulos QP
8.3.6. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (IN) SV
8.3.7. Solución 0,05 M de Acido Peryódico. En un
matraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasio
meta-Peryodato (KIO4) y aproximadamente unos 800
a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada es
K2H3IO6 se pesan 15,2 g. Añadir en seguida 15 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-

te en baño de agua hasta disolución completa. Enfriar
a la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen.
8.3.8. Solución de Fluoroglucina 0,2%. Esta
solución debe ser renovada cada 15 días.
8.3.9. Solución madre de Glicerina. Diluir unos
20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determi-
nar después la concentración exacta de esta solu-
ción midiendo su índice de refracción, y después,
por diluciones convenientes y sucesivas, llevar su
concentración a 0,1 g por l.
8.4. Procedimiento.
Extraer los polioles y valorar la glicerina.
8.4.1. Separación de polioles.- Introducir en un
matraz de 100 ml, de tapón esmerilado, 5 g de
Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 g
de Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml de
vino, que se deja deslizar por la pared del matraz.
Si el vino contiene más de 120 g de azúcar por
litro, se opera sólo con 5 ml.
Agitar enérgicamente durante 30 segundos y
dejar en reposo, agitando de cuando en cuando.
Añadir después 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO y
agitar otra vez durante 30 segundos. Llevar el
matraz a un termostato a 45ºC durante 5 minutos,
agitando enérgicamente cada minuto.
Filtrar la solución caliente por un crisol filtrante de
porosidad número 4 dispuesto sobre Kitasato de
vidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PA-
ACS y 5 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACS-
ISO, removiendo el precipitado con una espátula.
Escurrir después el precipitado lo más posible. Tras-
vasar después este precipitado al matraz del apara-
to destilador, enjuagando bien el Kitasato con Ace-
tona PA-ACS-ISO.
TABLA 8.I
FACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINA
DE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARES
Contenido en
azúcar g/l Factor
5 1,020
10 1,030
20 1,045
30 1,060
40 1,073
50 1,086
60 1,099
70 1,111
M
Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que el
termómetro marque 100ºC, y destilar después
20 ml más de Agua PA-ACS.
Añadir al residuo de la destilación aún caliente,
5 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejar
enfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Se
enrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar y
filtrar por filtro de papel.
8.4.2. Valoración de la glicerina.- Esta operación
hay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguien-
tes a la separación de los polioles.
Llevar una alícuota de 5 ml del filtrado anterior a
matraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PA-
ACS.
Introducir 20 ml de esta dilución en un matraz de
60 ml con tapón esmerilado. Añadir 10 ml de solu-
ción de Acido Peryódico 0,05 M. Agitar y dejar en
reposo 5 minutos.
Añadir después sucesiva y rápidamente, desli-
zando a lo largo de la pared, las siguientes solucio-
nes: 10 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y
10 ml de solución de Fluoroglucina. Agitar después
de la adición de cada una de las soluciones.
Llevar rápidamente la mezcla de soluciones a la
cubeta del espectrofotómetro y medir la absorban-
cia a 480 nm en un minuto, porque la coloración
violeta que se obtiene es muy fugaz.
Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
solución obtenida, al sustituir en las operaciones
anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-
ACS, dé una densidad óptica 0.
8.4.3. Obtención de la curva patrón.
Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solución
inicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml.
Tomar después 20 ml de cada una de estas dilu-
ciones y 20 ml de la solución inicial, y llevar a fras-
Contenido en
azúcar g/l Factor
80 1,123
90 1,134
100 1,145
110 1,156
120 1,168
39
130 1,180
140 1,191
150 1,202
 cos de 60 ml con tapón esmerilado y tratar como en
8.4.2 para los 20 ml de la dilución del filtrado. Medir
después las densidades ópticas correspondientes,
ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.
Esta escala corresponde a riquezas en glicerina
en 0,2 ml de vino, que varían de 0 a 2 mg
8.5. Cálculo.
Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l.
P 9.4. Procedimiento.
Glicerina = 50 —— f g/l
V 9.4.1. Separación de polioles. Como en 8.4.1.
P = peso en g de glicerina obtenido de la curva
patrón.
V = volumen en ml de la muestra de vino.
f = 1 para contenido de azúcar en vinos inferiores a
5 g/l.
f = valor del factor de corrección según la tabla 8.I
para contenidos de azúcar en vinos superiores a
5 g/l.
8.6. Referencia.
8.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969.
9. 2,3-BUTANODIOL
9.1. Principio.
El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defe-
cación, por extracción con acetona, se oxida con
ácido peryódico a acetaldehído. La reacción colo-
reada del acetaldehído con el sodio nitroprusiato y
la piperidina permite la determinación espectrofoto-
métrica a 570 nm.
9.2. Material y aparatos.
9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1,
2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10).
9.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
Acido Peryodico 0,05 M
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
121188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA
124551 2,3-Butanodiol PA
211456 Piedra pómez granulos QP
162377 Piperidina PS
121523 Potasio meta-Peryodato PA
40 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA
9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5;
6 y 7).
9.3.8. Solución de Sodio Acetato al 27%.
9.3.9. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.
Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente.
9.3.10. Solución de Piperidina al 10%. Renovar
cada 15 días.
9.3.11. Solución madre de 2,3-Butanodiol. Utili-
zar 2,3-Butanodiol rectificado, desechando el pri-
mero y el último tercio. Pesar con exactitud 2 g y
disolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solución hasta
1/10.
Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol.
9.4.2. Valoración del 2,3-Butanodiol.
Esta operación hay que realizarla antes de las 2
o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.
Llevar a un matraz de 60 ml con tapón esmerila-
do 5 ml del filtrado, 5 ml de solución de Sodio Ace-
tato al 27% y 10 ml de solución de Acido Peryódico
0,05M.
Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Añadir
deslizando por las paredes del frasco: 5 ml de
solución de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de la
solución de Piperidina al 10%. Agitar después de
la adición de cada una de las soluciones. Llevar
inmediatamente la solución a la cubeta de 1 cm
y hacer la lectura en el espectrofotómetro a
570 nm. La coloración violeta que se obtiene con
la reacción alcanza el máximo de intensidad a los
30-40 segundos y después disminuye rápida-
mente.
Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
solución obtenida al sustituir en las operaciones
anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-
ACS dé una densidad óptica 0.
9.4.3. Obtención de la curva patrón.
Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solu-
ción inicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una de
estas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los
5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamente
las densidades ópticas máximas correspondientes,
ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.
Esta curva proporciona valores de contenido en
2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varían de 0 a
0,7 mg.
9.5. Cálculo.
9.5.1. Vinos con contenido en azúcar inferior a
5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vino
es igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg con-
tenido en 5 ml del filtrado.
9.5.2. Vinos cuyo contenido en azúcar está
comprendido entre 5 y 120 g/l.
La cantidad calculada según 9.5.1 se corrige
sumando o restando el factor encontrado en la tabla
9.I.
9.5.3. Vinos con contenidos en azúcar superio-
res a 120 g/l.- (La defecación se realiza sobre 5 ml
de vino). La cantidad calculada según 9.5.1 se corri-
 M
ge como en 9.5.2, utilizando sólo la mitad del con- 9.6. Referencia.
tenido en azúcar. El resultado multiplicado por 2 es 9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
el contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino. nalyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.

TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en

2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/l

Butanodiol
g/l
10 20 30 40 50 60 70 80

0- 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035

0,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03
0,4 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03

0,5 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,6 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,7 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 -0,01
0,8 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00
0,9 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01

1,0 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02

1,1 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03

1,2 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,03 +0,04
1,3 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,05
1,4 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07

1,5 0,00 +0,01 +0,02 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,08

1,6 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10

1,7 +0,01 +0,03 +0,04 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12
1,8 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,13
1,9 +0,02 +0,04 +0,06 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15

2,0 +0,02 +0,05 +0,07 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15 +0,17

41
 TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en

2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/l

Butanodiol
g/l 90 100 110 120 130 140 150

0 - 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035

0,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03
0,4 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,5 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,02 -0,01

0,6 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00

0,7 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00 +0,01
0,8 0,00 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02
0,9 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03 +0,03

1,0 +0,02 +0,03 +0,03 +0,03 +0,03 +0,04 +0,05

1,1 +0,04 +0,04 +0,04 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07

1,2 +0,05 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08
1,3 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10
1,4 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10 +0,11 +0,11 +0,12

1,5 +0,09 +0,10 +0,11 +0,12 +0,13 +0,13 +0,14

1,6 +0,11 +0,12 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0 17

1,7 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0,17 +0,18 +0 19
1,8 +0,15 +0,16 +0,18 +0,19 +0,20 +0,21 +0,22
1,9 +0,17 +0,18 +0,20 +0,21 +0,23 +0,24 +0,25

2,0 +0,19 +0,20 +0,22 +0,24 +0,26 +0,27 +0,28

10(a). SACAROSA 121086 Etanol absoluto PA

(Método cualitativo colorimétrico)
10(a).1. Principio.
El vino se defeca por plomo acetato, magnesio y
potasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defe-
cado a 100°C con difenilamina en medio clorhídrico
y acético. El producto de condensación obtenido en
presencia de sacarosa se extrae por cloroformo que
se colorea de azul.
10(a).2. Material y aparatos.
42 10(a).2.1. Baño de agua con temperatura con-
trolada.
10(a).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121828 Difenilamina PA
211276 Magnesio Oxido QP
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-
ISO.
10(a).3.2. Magnesio Oxido QP.
10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%.
10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO.
10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml de
solución de Difenilamina PA al 10% en Etanol absolu-
to PA, añadir 20 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-
ISO y 70 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.

Para comprobar la pureza de este reactivo aña-
dir 2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de Agua
PA-ACS, calentar en baño de agua hirviendo duran-
te 5 minutos. Enfriar la solución bruscamente por in-
mersión en agua fría y extraer con 1 ml de Tricloro-
metano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO, no
debiendo presentar el líquido extraído coloración
azul.
10(a).4. Procedimiento.
Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mg
de Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.
Llevar al baño de agua que se mantiene a 90-95°C
durante 3 a 5 minutos. Añadir 2 ml del vino que
debe estar limpio y con una riqueza en azúcar infe-
rior al 1%.
Diluir la muestra si la riqueza en azúcar es supe-
rior a la indicada como límite.
Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato
3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva,
lo que disminuiría la sensibilidad de la reacción. Para
ello añadir gota a gota, al líquido que sobrenada,
una solución concentrada de Plomo II Acetato,
hasta que no se acuse enturbiamiento al caer la
gota sobre el líquido. Añadir entonces solución
saturada de Sodio Sulfato para eliminar el exceso
de Plomo.
Añadir 0,5 ml de la solución de Potasio Perman-
ganato y mantener la mezcla en el baño de agua a
90-95° durante 10 minutos.
Enfriar bruscamente por inmersión en agua fría,
y filtrar.
Puede aparecer una débil coloración amarilla,
pero no influye en la reacción.
Poner en un tubo de ensayo 2 ml del líquido fil-
trado, añadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; man-
tener en baño de agua hirviendo, durante 5 minutos
exactamente. Enfriar por inmersión en agua fría,
añadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con eta-
nol PA-ACS-ISO y observar la coloración que se
forma.
10(a).5. Expresión de los resultados.
Los vinos secos no adicionados con sacarosa
pueden dar una coloración gris-azulada muy ligera,
pero, en presencia de sacarosa, aparece una franca
coloración azul.
Los vinos ricos en azúcar dan una coloración
amarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en pre-
sencia de ésta, la coloración es verde franco.
Los resultados son sensibles para riquezas de
sacarosa desde 0,2 mg.
10(a).6. Referencia.
10(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969.
M
10(b). SACAROSA
(Método cuantitativo)
10(b).l. Principio.
La sacarosa se determina por la diferencia de los
poderes reductores antes y después de la hidrólisis
clorhídrica del líquido procedente de la defecación
del vino.
10(b).2. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
10(b).2.1. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.
10(b).3. Procedimiento.
Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml
cada uno el mismo volumen del líquido de defeca-
ción, según las normas indicadas para el análisis de
azúcares. La defecación se realiza como en 7(b) con
eliminación previa del alcohol.
Añadir a cada matraz un volumen de Acido Clor-
hídrico 35% PA-ISO a razón de 0,3 ml por 10 ml de
líquido azucarado.
En uno de los matraces añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N (disolver Sodio Hidró-
xido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y
ajustar a la concentración indicada), por cada
10 ml de líquido azucarado procediendo a la valora-
ción de los azúcares reductores.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutra-
lizar a baño de agua hirviendo durante 2 minutos.
Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxi-
do 12N que al otro matraz y valorar.
10(b).4. Cálculo.
La diferencia entre las cantidades de azúcares
reductores encontrada en los resultados de estas
dos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riqueza
en sacarosa de la muestra en estudio.
Este resultado se expresa en g por l de vino,
teniendo presentes las diluciones efectuadas even-
tualmente en el curso de la defecación y del volumen
de la muestra de vino que se sometió a la defecación.
10(b).5. Referencia.
10(b).5.l. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-80
11. CENIZAS
11.1. Principio. 43
Se denominan cenizas de un vino, al conjunto de
los productos de incineración del residuo de evapo-
ración de un volumen conocido del vino, realizada
de manera que se puedan obtener todos los catio-
nes (excepto amonio) en forma de carbonatos y
otras sales minerales anhidras.
 11.2. Materiales y aparatos.
11.2.1. Horno eléctrico regulable.
11.2.2. Baño de agua y baño de arena.
11.2.3. Lámpara de infrarrojo.
11.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de
70 mm de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.
11.3. Procedimiento.
Colocar 20 ml de vino en una cápsula tarada en
balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con pre-
caución en baño de agua, después de evaporar
hasta consistencia siruposa, continuar el calenta-
miento sobre baño de arena con moderación y
durante una media hora. Es conveniente ayudar a la
evaporación con la aplicación de rayos infrarrojos
hasta carbonización. Cuando ya no se desprendan
vapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C
± 25° y con aireación continua.
Después de 5 minutos de carbonización com-
pleta, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y aña-
dir 5 ml de agua que se evaporan en baño de agua,
y llevar de nuevo al horno a 525°C.
Si la combustión de las partes carbonosas no se
consigue en 15 minutos, volver a comenzar la ope-
ración de adición de agua, evaporación y recalcina-
ción.
Cuando se trate de un vino rico en azúcares, se
recomienda adicionar unas gotas de aceite puro
vegetal al extracto, antes de comenzar la calcina-
ción para impedir el desbordamiento de la masa del
contenido. La duración de la primera carbonización
deberá ser en este caso 15 minutos.
Después de enfriar en el desecador cápsula y
cenizas, se pesan.
11.4. Cálculo.
Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l.
Cenizas = 50 P g/l
P = peso en g de las cenizas contenidas en 20 ml
de vino.
Dar los resultados con una aproximación de
0,03 g/l.
11.5. Referencias.
11.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969.
11.5.2. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”,
pág. 106. Ministerio de Agricultura, 1956.
12. ALCALINIDAD DE CENIZAS
44 12.1. Principio.
Se denomina alcalinidad total de cenizas la suma
de los cationes, diferentes del amonio, combinados
con los ácidos orgánicos del vino.
La valoración se funda en la volumetría con
ácido sulfúrico, valorando en retorno después de
disolver en el mismo y en caliente, las cenizas, y
empleando el anaranjado de metilo como indicador.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Baño de agua.
12.2.2. Pipeta de 10 ml.
12.2.3. Varilla de vidrio.
12.2.4. Bureta de valoraciones.
12.3. Reactivos.
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE
181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV
12.3.1. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
12.3.2. Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE.
12.3.3. Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV.
12.4. Procedimiento.
Añadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de Acido
Sulfúrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cápsula a un
baño de agua hirviendo durante un cuarto de hora,
frotando varias veces el fondo de la cápsula con una
varilla de vidrio para activar la disolución de las par-
tículas difíciles de disolver. Añadir en seguida dos
gotas de Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE y
valorar el exceso de Acido Sulfúrico con Sodio
Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicador
vire a amarillo.
12.5. Cálculo.
Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadas
en meq/l o en g/l de potasio carbonato.
Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/l
Alcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l de
potasio carbonato.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N utili-
zados.
Dar los resultados con una aproximación de
0,5 g por l en potasio carbonato.
12.6. Referencia.
12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A7, 1-2, 1969.
13. FOSFATOS
13.1. Principio.
Oxidación del vino, evaporación e incineración.
Pre-cipitación del ácido fosfórico en ácido nítrico al
estado de amonio fosfomolibdato. Esta sal se
disuelve por acción de un exceso de sodio hidróxi-
do 0,5N en presencia de formaldehído. Valoración
del exceso de sodio hidróxido por ácido clorhídrico
0,5N en presencia de fenolftaleína.

13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Cápsula de sílice de 70 mm de diámetro.
13.2.2. Baño de arena.
13.2.3. Horno de mufla.
13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml.
13.2.5. Vasos de precipitados y elementos para
volumetría.
13.2.6. Agitador mecánico.
13.3. Reactivos.
181022 Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV
121737 Acido Nítrico 53% PA
131074 Agua PA-ACS
131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v estabili-
zado con metanol PA-ACS
181692 Sodio Hidróxido 0,5mol/l (0,5N) SV
13.3.1. Solución de Acido Nítrico al 25% (d
1,153). Añadir a 440 ml de Acido Nítrico 53% PA
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
13.3.2. Solución de Amonio Nitrato. Añadir, a
340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PA-
ACS hasta 1.000 ml.
13.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Añadir, a
30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO,
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
13.3.4. Solución de lavado. 50 g de Amonio
Nitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Nítrico al 25%
y Agua PA-ACS hasta 1 l.
13.4. Procedimiento.
Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cápsu-
la de cuarzo en sucesivas adiciones. Añadir des-
pués 4 ml de Acido Nítrico 53% PA y calentar pro-
gresivamente en el baño de arena y después en el
horno de mufla.
Añadir a las cenizas 2 ml de Acido Nítrico 53%
PA y evaporar a sequedad en el baño de agua para
insolubilizar la sílice. Añadir 10 ml de Acido Nítrico al
25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavar
la cápsula y filtro con 5 ml del mismo ácido y des-
pués con 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el fil-
trado en un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar
25 ml de solución de Amonio Nitrato de 340 g por l
y agitar.
Después añadir de una vez 80 ml de solución de
Amonio Molibdato 3% y agitar mecánicamente
durante 12 minutos a razón de 200 sacudidas por
minuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego el
precipitado con 75 ml de líquido de lavado dos
veces. Cada lavado no debe durar más de 10 minu-
tos. Lavar 8 veces más con Agua PA-ACS.
Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con
50 ml de Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Aña-
dir 12,5 ml de Formaldehído 36,5-38% p/v, estabili-
zado con metanol PA-ACS neutralizado en presen-
M
cia de Fenolftaleína solución 1% RE, para disolver el
precipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro y
extender sobre la pared del vaso, por encima del
líquido de la solución. Valorar el exceso de sodio
hidróxido con Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV,
hasta decoloración de la Fenolftaleína, habiendo
sumergido al final nuevamente el filtro.
13.5. Cálculo.
Calcular el contenido en fosfatos expresado en
meq de ácido fosfórico (considerado como triácido),
o en g de P 0 por l de vino.
2 5
Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de ácido fosfórico.
Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P205 por l de
vino.
V = volumen en ml de solución de ácido clorhí-
drico 0,5N.
Dar los resultados con una aproximación de
0,01 g/l.
13.6. Referencia.
13.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969.
14. CALCIO
(Método complexométrico)
14.1. Principio.
Valoración del calcio por complexometría sobre la
solución nítrica o clorhídrica de las cenizas del vino.
14.2. Material y aparatos.
14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml.
14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml.
14.3. Reactivos.
182318 Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV
182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido
EDTA Na 2) (o preparar con 131669
Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO)
Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftila-
zo)-4-Naftalensulfónico, Sal Sódica
(CALCON)
131074 Agua PA-ACS
182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV
(o preparar con 121212 Calcio Carbo-
nato precipitado PA)
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV.
45
14.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di-
sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto añadir
a 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS
hasta 1.000 ml y disolver.
 14.3.3. Lejía de Sodio Hidróxido al 40%. Añadir
a 40 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO
Agua PA-ACS hasta 100 ml.
14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g de
Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Nafta-
lensulfónico, Sal Sódica con 100 g de Sodio Cloru-
ro PA.
14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. En
su defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato pre-
cipitado PA en la cantidad necesaria de Acido Clor-
hídrico diluido y completar a 1 litro. Valorar esta
solución por medio de Acido Etilendiaminotetra-
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en pre-
sencia de Calcon en la forma que luego se des-
cribe.
14.4. Procedimiento.
Evaporar a sequedad en baño de agua hirviendo
50 ml de vino colocados en cápsulas preferente-
mente de platino. Incinerar el residuo como en 11.
Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhídrico
0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de
50 ml; lavar varias veces la cápsula con Agua
PA-ACS vertiéndola en el matraz. Enrasar y agitar.
Tomar 20 ml de la solución de cenizas y calentar
hasta ebullición, en un Erlenmeyer de unos 100 ml.
Dejar enfriar y después añadir 0,5 ml de solución de
Sodio Hidróxido al 40%, 10 ml de Acido Etilendia-
minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
y 100 mg aproximadamente de indicador Calcon.
Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, añadir
Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05
mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparición de color
azul-violeta.
Evitar una cantidad de Acido Etilendiaminotetra-
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exce-
so relativamente grande, que enmascara el punto
de viraje.
Valorar el exceso de Acido Etilendiaminotetra-
acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV añadien-
do Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indica-
dor Calcon virará de azul violeta a rojo-vinoso al final
de la reacción.
14.5. Cálculo.
Calcular el contenido en calcio como iones Ca
en meq/l, o como iones Ca expresados en g/l.
Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca.
Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca.
46 V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M.
14.6. Referencias.
14.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso-
metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista
de Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.
14.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A26, 2-3, 1969.
15. MAGNESIO
15.1. Principio.
Valoración del magnesio por complexometría
sobre la solución nítrica o clorhídrica de las cenizas
del vino.
15.2. Material y aparatos.
15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6).
15.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV
(diluir o preparar como se indica en 15.3.4)
211276 Magnesio Oxido QP (*)
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
171730 Solución Tampón pH 10 RE
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO,
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y 131074 Agua
PA-ACS)
15.3.1 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disó-
dica 0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2.
15.3.2. Solución Tampón pH 10 RE. En su
defecto preparar disolviendo 50 g de Amonio Clo-
ruro PA-ACS-ISO en 350 g de Amoníaco 25% (en
NH3) PA y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar
1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS,
con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
15.3.4. Solución de Magnesio Cloruro 0,05M. En
un matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de Mag-
nesio Cloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar con
Agua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g de
Magnesio Oxido QP en la cantidad necesaria de
Acido Clorhídrico diluido y llevar después el volumen
a 1 litro. Valorar esta solución con Acido Etilendia-
minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
(15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T
(15.3.3) como se indica a continuación.
15.4. Procedimiento.
Tomar 20 ml de la solución de cenizas antes pre-
parada, llevar a ebullición en un Erlenmeyer de unos
100 ml, dejar enfriar y añadir 10 ml de Acido Etilen-
diaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M)
SV, 5 ml de Solución Tampón pH 10 RE, 50 mg
aproximadamente de indicador Negro de Eriocro-
mo T.
Valorar después el exceso de Acido Etilendiami-
notetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV

con la solución de Magnesio Cloruro 0,05M. El indi-
cador vira del azul al rojo vinoso.
15.5. Cálculo.
Calcular el contenido en magnesio expresado en
meq/l o en g/l de iones Mg.
Magnesio = (V - V’) x 5 meq/l
Magnesio = (V - V’) x 0,06075 g/l de iones Mg.
V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utili-
zado para valorar el exceso de ácido EDTA Na2
0,05M en la determinación del calcio (14.4).
V’ = volumen en ml de solución de magnesio
cloruro 0,05M.
(*) El magnesio óxido del comercio está general-
mente carbonatado, aun puro, por lo que debe cal-
cinarse. Tomar 5 g en cápsulas de platino; llevar al
rojo durante más de 30 minutos. Dejar enfriar y
pesar los 2,25 g.
15.6. Referencias.
15.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso-
metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista di
Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.
15.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969.
16. HIERRO
(Método colorimétrico del
sulfocianuro)
16.1. Principio.
El hierro oxidado por el agua oxigenada se com-
bina con el ion sulfociánico en medio clorhídrico. El
color rojo se compara con escala patrón o se mide
por espectrofotometría. Para los vinos tintos, el hie-
rro sulfocianuro se extrae con éter. Para valorar
solamente el hierro trivalente, se suprime la adición
del agua oxigenada.
16.2. Material y aparatos.
16.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro para
lectura a 508 nm de longitud de onda.
16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm.
16.2.3. Bola de decantación de 50 ml.
16.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO
131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidrato
PA-ACS-ISO
M
121085 Etanol 96% v/v PA
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BTH PA-ACS-ISO
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
211934 Hierro metal, granulado fino QP
121534 Potasio Tiocianato PA
141699 Sodio metal, barras PRS
(o 121237 Carbón Activo polvo PA o
142367 Manganeso IV Oxido 85%
precipitado PRS)
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA
16.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
16.3.2. Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Usese Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS y
diluir convenientemente.
16.3.3. Eter Dietílico. Destilar el Eter Dietílico estabi-
lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de su
empleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal,
barras PRS o Carbón Activo polvo PA o Manganeso IV
Oxido 85% precipitado PRS.
16.3.4. Solución de Potasio Tiocianato. Añadir a
200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta
1litro, y disolver.
16.3.5. Solución de Hierro III Cloruro de 0,1 g de
Hierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 g
de Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS.
Añadir 1 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriar
y añadir Agua PA-ACS hasta 1 litro.
También puede prepararse la siguiente solución de
Hierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato
12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PA-
ACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml.
(*). En el original indica “amonio”, entendemos se
trata de Amonio Cloruro.
16.3.6. Etanol de 20º. Usese Etanol 96% v/v PA y
diluir convenientemente.
16.4. Procedimiento.
16.4.1. Determinación del hierro total. (Férrico +
ferroso).
16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar
10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, añadir 1 ml
de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas de
Hidrógeno Peróxido y 1 ml de solucion de Potasio Tio-
cianato.
A la aparición del color añadir 20 ml de Eter Dietíli-
co, agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar y 47
dejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia del
líquido decantado en espectrofotómetro colorímetro a
508 nm. Ajustar el espectrofotómetro a cero, utilizando
como prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con
1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluidos
con 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-
 sa la influencia del color del vino y de la posible apari-
ción de color o del reavivado del vino, ambas coloracio-
nes debidas a la acidez añadida al vino.
Obtener una curva, procediendo en la forma
anteriormente descrita y utilizando en vez de 10 ml
de vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20° y por-
ciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadas
hasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas con-
tendrán, respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l de
hierro.
16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, pero
utilizando sólo 0,2 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extracción
del hierro sulfocianuro por el éter.
16.4.2. Determinación del hierro trivalente.
Como en 16.4.1, pero sin adicionar Hidrógeno
Peróxido.
16.5. Cálculo.
Calcular el contenido en hierro expresado en
mg/l por comparación de la absorbancia con la
curva patrón.
16.6. Observaciones.
En lugar del éter algunos autores (16.7.2) reco-
miendan el empleo del etilo acetato, que no tiene el
inconveniente de la posible presencia de peróxidos;
sin embargo, en algunos vinos de intenso color de
nuestro país se ha observado extracción de parte
de la materia colorante con el etilo acetato, lo que
no sucede con el éter.
16.7. Referencias.
16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E.
“Analyse et Controle des Vins”, pág. 194, 1958.
16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis,
J.C. “Dosage direct du fer dans les vins”. Société
Pharmacie Montpellier, 24:2, 1964.
17. COBRE
17.1. Principio.
El sodio dietilditiocarbamato reacciona con el
cobre (reacción de Delepine), dando la sal corres-
pondiente a este metal y coloración amarilla oro,
cuya intensidad se mide por colorimetría o espec-
trofotometría.
Para evitar interferencias debidas a la presencia
de hierro y otros cationes polivalentes presentes en
el vino se emplea la sal disódica del ácido etilendia-
48 minotetraacético, que forma complejos solubles y
muy estables a pH = 8. También puede utilizarse el
amonio citrato para evitar la interferencia del hierro.
17.2. Material y aparatos.
17.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro con fil-
tro para longitud de onda de 420 nm.
17.2.2. Bola de decantación de unos 100 ml.
17.3. Reactivos.
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
(Acido EDTA Na2 2-hidrato) (o 131120
di-Amonio Hidrógeno Citrato PA-ACS)
131074 Agua PA-ACS
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO
131091 Metanol PA-ACS-ISO
131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidrato
PA-ACS
17.3.1. Solución acuosa al 0,1% de Sodio Dietil-
ditiocarbamato.
17.3.2. Suspensión de Acido Etilendiaminotetra-
acético Sal Disódica al 20%, o bien solución acuo-
sa de Amonio Citrato al 20%.
17.3.3. Solución amoniacal al 15%. Diluir conve-
nietemente el Amoníaco 25% (en NH3) PA con Agua
PA-ACS.
17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO.
17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO.
17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla tam-
bién para la preparación de reactivos.
17.4. Procedimiento.
Poner en una bola de decantación 10 ml del
vino, añadir 5 ml de una suspensión del Acido EDTA
Na2 2-hidrato (o 5 ml de soluciónde Amonio Citrato)
y llevar a pH 8 con la solución amoniacal. Añadir
1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y
5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsión),
y agitar durante 1 minuto.
Extraer varias veces con Carbono Tetracloruro
PA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto)
hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restos
de agua, pues éstos dan enturbiamiento con el Car-
bono Tetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa alguna
gota, filtrar por papel de filtro puro, quedando las
trazas de agua en el papel.
Determinar la absorbancia en el espectrofotóme-
tro a 420 nm de longitud de onda.
Para la prueba en blanco utilizar los mismos
reactivos en las mismas proporciones, sustituyendo
el volumen de vino por otro igual de Agua bidestila-
da en aparato de vidrio.
La curva que previamente será construida a
partir de lecturas correspondientes a escala de
diferentes riquezas de cobre es una línea recta,
por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el inter-
valo en que se opera con 1 ml de reactivo pueden
valorarse 10 ppm de cobre; para valores superio-
res, se añadirán 2 ml o se toma menor volumen
de muestra.
17.5. Cálculo.
El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm

se lleva a la curva patrón y se expresa el correspon-
diente contenido en cobre en ppm.
17.6. Referencia.
17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. “Methodi uffi-
ciali di analisi per i mosti, i vini e gli aceti”, pág. 75,
1958.
18. POTASIO
(Fotometría de llama)
18.1. Principio.
Se utiliza una solución de referencia con 100 mg
de potasio por litro y con diversos aniones, cationes
y materia orgánica en proporciones tales que den
un compuesto similar a un vino diluido a 1/10 con
agua.
18.2. Material y aparatos.
18.2.1. Fotómetro de llama y accesorios.
18.2.2. Pipetas de 10 ml.
18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml.
18.3. Reactivos.
131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Alilo Isotiocianato
121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA
121085 Etanol 96% v/v PA
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP
121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA
131621 Sacarosa PA-ACS
131965 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato
PA-ACS
141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
18.3.1. Solución de referencia. Disolver 481,3 mg
de Potasio Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de
Agua PA-ACS muy caliente y mezclar con una solu-
ción de 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg de
Aido Cítrico anhidro PA-ACS, 300 mg de Sacarosa
PA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfa-
to 1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhi-
dro 95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Cloruro
p50% MgCl2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS.
Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
Añadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para con-
servación más segura de la solución.
18.3.2. Solución de dilución. Igual que la ante-
rior, cambiando el Potasio Hidrógeno Tartrato PA
por 383 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.
Para preparar la solución de referencia, comen-
zar por disolver 481,3 mg de Potasio Hidrógeno
Tartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muy
caliente y mezclar esta solución con los otros com-
M
ponentes, previamente disueltos en 400 ml de Agua
PA-ACS; enrasar después a 1 litro exactamente.
Para la conservación más segura de esta solu-
ción se añaden 2 gotas de Alilo isotiocianato.
Con vinos dulces, añadir una cantidad de Saca-
rosa PA-ACS igual a la décima parte de la que con-
tenga el vino.
Añadir a la solución de referencia una cantidad
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS
equivalente al contenido en sodio del vino cuando
este contenido sea superior al equivalente a 20 mg
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS.
En el caso del fraude por adición de 1 g/l de
Sodio Salicilato, añadir 100 mg de Sodio Salicilato
(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la solu-
ción de referencia y de dilución. El Sodio Salicilato
tiene una influencia muy marcada en el resultado del
análisis.
18.4. Procedimiento.
Regular el aparato y establecer una curva de
calibración con la solución de referencia pura y con
diversas diluciones de la solución de referencia dilui-
da a 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solución de dilu-
ción.
Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determi-
nación en el fotómetro.
Si la lectura no queda comprendida entre los
valores 40 y 100 de la escala del galvanómetro,
diluir convenientemente el vino con solución de dilu-
ción.
18.5. Cálculo.
Calcular el contenido en potasio expresado en
g/l con una aproximación de ±0,02 g/l.
Potasio = 10 L g/l
L = valor correspondiente a la lectura de la esca-
la del galvanómetro en la curva de calibración.
18.6. Referencia.
18.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A8, 1-6, 1969.
19. SODIO
(Fotometría de llama)
19.1. Principio.
Como en 18.1, referido a sodio.
19.2. Material y aparatos.
Como en 18.2. 49
19.3. Reactivos.
131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Alilo Isotiocianato
 121221 Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA
121085 Etanol 96% v/v PA
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP
131621 Sacarosa PA-ACS
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
19.3.1. Solución de referencia.- Como en
18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-Hidró-
geno Fosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg de
Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
19.3.2. Solución de dilución.- Como en 18.3.2,
suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PA-
ACS-ISO.
19.4. Procedimiento.
Como en 18.4. Para la curva de calibración, uti-
lizar la solución de referencia diluida a 1/20, 1/10,
1/2, 3/4.
19.5. Cálculo.
Calcular el contenido en sodio expresado en g/l
con una aproximación de ± 0,05 g/l.
19.6. Referencia.
19.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A25, 1-2, 1969.
20. ACIDEZ TOTAL
20.1. Principio.
La acidez total de un vino se considera como la
suma de los ácidos titulables cuando se lleva el vino
a pH = 7 por adición de un licor alcalino valorado. El
ácido carbónico y el anhídrido sulfuroso libre y com-
binado no se consideran comprendidos en la acidez
total.
El gas carbónico se elimina previamente del vino
por agitación en frío y con vacío parcial.
20.2. Material y aparatos.
20.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.
20.2.2. Agitador magnético.
20.2.3. Puente con solución saturada de ClK
para evitar la introducción del electrodo de calome-
lanos en el vino.
20.2.4. Kitasato de un litro.
20.2.5. Pipeta de 20 ml.
20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad.
50 20.2.7. Bureta de 50 ml.
20.3. Reactivos.
171495 Potasio Cloruro solución saturada RE
171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
20.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.
20.4. Procedimiento.
Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l de
capacidad, conectar al vacío agitando al mismo
tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se
aprecia a los pocos momentos. Observar atenta-
mente el momento en que dejan de desprenderse
las burbujas, desconectar del vacío.
Tomar 20 ml del vino sin CO2 y llevar a un vaso
de unos 100 ml de capacidad, introducir el electro-
do de vidrio en el vino y el de calomelanos en vaso
lateral con Potasio Cloruro solución saturada RE.
Disponer un puente de la misma solución en tubo
de vidrio con los extremos uno en cada vaso esta-
bleciendo contacto.
Poner en marcha el agitador y añadir desde
bureta Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vino
hasta que la aguja del potenciómetro marque pH =
7, manteniendo el agitador en marcha durante la
operación, que no debe durar más de cinco minu-
tos.
20.5. Cálculo.
Calcular la acidez total expresada en meq/l con
una aproximación de 0,1 meq/l o en g de ácido tar-
tárico.
V
Acidez total = 10 —— - 0,35 V - 0,25 V” meq/l
2
V
Acidez total = 0,75 ( —— - 0,035 V’ - 0,025 V”) g/l
2
de ácido tartárico.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.
V’ = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
la oxidación de anhídrido sulfuroso libre (21.-).
V” = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
la oxidación del anhídrido sulfuroso combinado (21.-).
20.6. Referencias.
20.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A10, 1-3, 1969.
20.6.2. Jaulmes, P. ”La mesure de l’acidité total
des vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,
556, 1955.
NOTA: Organismos como la American Society of
Enologist y la Association of Official Analytical Che-
mist, aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2
en lugar de 7,0 por tratarse de una valoración de
ácidos débiles con una base fuerte.

21. ACIDEZ VOLATIL
21.1. Principio.
La acidez volátil está constituida por la parte de
ácidos grasos pertenecientes a la serie acética que
se encuentra en los vinos, ya sea en estado libre o
de sal. Se determina mediante la separación de los
ácidos volátiles por arrastre con vapor de agua y
rectificación de los vapores. Se debe evitar con pre-
caución la presencia de gas carbónico en el destila-
do. La acidez del anhídrido sulfuroso libre y combi-
nado arrastrados con el destilado no deben com-
prenderse en la acidez volátil, por lo que hay que
restar la equivalencia de su acidez de la del destila-
do, así como la del ácido sórbico eventualmente
presente. Para estas correcciones se sigue la norma
Jaulmes (21.7.2), en la que se considera como
completa la influencia de SO2 libre y sólo la mitad de
la del combinado.
21.2. Material y aparatos.
21.2.1. Aparato para destilación aislada (fig.21.I).
21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de
3.500 ml.
El agua condensada en el tubo de unión del
matraz con el barbotador se purga por el purgador
(c).
21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilíndrico de
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo repo-
sa sobre un disco de amianto de 15 cm de diáme-
tro, con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) por
el que entra el vapor en el barbotador debe llegar a
1 cm del fondo.
21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituida
por un tubo cilíndrico de 20 mm de diámetro y
50 cm de altura, conteniendo una hélice de tela de
acero inoxidable número 100 plegada, con 15 mm
de paso.
21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm de
longitud activa, colocado verticalmente.
21.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131066 Acido L (+)-Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE
(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE)
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
21.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
21.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol
M
96% v/v PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
convenientemente.
21.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
determinar el factor.
21.3.4. Almidón soluble RE.
21.4. Procedimiento.
Alimentar el generador de vapor con Agua de
Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta unos
2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 ml
del vino exento de gas carbónico como en 20.4.
Añadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartárico PA-
ACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor,
manteniendo abierta la salida del tubo purgador del
vapor; después de cerrar ésta, calentar el barbota-
dor. Durante la operación se regula el calentamien-
to de forma que el volumen de líquido en el barbo-
tador no pase sensiblemente de los 20 ml iniciales.
Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml.
Valorar con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
en presencia de dos gotas de Fenolftaleína como
indicador.
Valorar el sulfuroso libre en este destilado, aña-
diendo al terminar la anterior valoración una gota de
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, para acidular
nuevamente y valorar el SO2 libre con solución de
Yodo 0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón
soluble RE como indicador y un cristal de Potasio
Yoduro PA-ISO.
Para determinar el Acido Sulfuroso combinado
con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución satu-
rada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-
ISO (el líquido toma un color rosa pálido) y valorar
nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
21.5. Cálculo.
Calcular la acidez volátil expresada en meq/l,
con una aproximación de 0,2 ml, o en g/l de ácido
sulfúrico o de ácido acético, con una aproximación
de 0,1 g/l.
Acidez volátil = 5 (V - V’/10 - V”/20) meq/l
0,49
Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
2
ácido sulfúrico.
0,6
Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
2 51
ácido acético.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.
V’= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
oxidación del anhídrido sulfuroso libre.
V”= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
 oxidación del anhídrido sulfuroso combinado con el
acetaldehído.
21.6. Observaciones.
En la destilación del vino para la determinación
de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su
totalidad al destilado, junto con el ácido acético, fal-
seando el resultado del análisis. Para corregir el
resultado, determinar el ácido sórbico en el destila-
do como en 29, procediendo en la siguiente forma
simplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidez
volátil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor inter-
no, añadir 1,5 ml de la solución (a), dejar la cubeta
al aire durante unos minutos y medir después la
absorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm.
Graduar el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solu-
ción (b) y 1,5 ml de la solución (a).
21.7. Referencias.
21.7.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969.
21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed.,
1951.
52
Figura 21.I.- Aparato para destilación aislada
22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADO
PARA ACIDEZ VOLATIL
22.1. Principio.
En la destilación del vino para la determinación
de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su
totalidad al destilado junto con el ácido acético, fal-
seando el resultado del analísis. Para valorar este
ácido sórbico se parte de una muestra de 0,5 ml de
destilado (lo que no supone un error sensible) y se
valora por espectrofotometría en el ultravioleta.
22.2. Material y aparatos.
22.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta.
22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm.
22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.
22.3. Reactivos.
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
131074 Agua PA-ACS
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121531 Potasio Sorbato PA
121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA

22.3.1. Solución a): Mezclar 0,5 g de Sodio
Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre II
Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-
ACS hasta un litro.
22.3.2. Solución b): Llevar 20 mg de Acido Sór-
bico (USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro que
contenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar,
dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de Acido
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse
26,8 g de Potasio Sorbato PA.
22.4. Procedimiento.
Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez volátil,
llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, aña-
dir 1,5 ml de la solución a), dejar la cubeta al aire
durante unos minutos y medir después la absor-
bancia en el espectrofotómetro a 256 nm. Graduar
el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución b) y
1,5 ml de la solución a).
22.5. Cálculo.
Un gramo de ácido sórbico corresponde a
8,92 ml de solución normal y a 0,438 g de ácido sul-
fúrico. Para todo vino adicionado con 200 mg de
ácido sórbico por litro la corrección sustractiva que
corresponde hacer a la acidez volátil es de 1,7 meq
o 0,088 g del ácido sulfúrico o 0,107 g de ácido
acético por litro de vino.
22.6. Referencia.
22.6.1.Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. All, 3.
23. ACIDEZ FIJA
23.1. Principio.
Se considera convencionalmente como acidez
fija la diferencia entre acidez total y acidez volátil,
ambas expresadas en ácido tartárico.
No es necesario hacer las correcciones por
eventual presencia de anhídrido sulfuroso combina-
do y libre.
24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL
(Método del calcio racemato)
24(a).1. Principio.
Adición al vino de ácido tartárico levógiro que en
unión con el ácido tartárico dextrógiro del vino y en
presencia de solución de calcio, forman en condi-
ciones determinadas calcio racemato insoluble.
En el método adoptado se determinan las con-
diciones de precipitación del calcio racemato, fijan-
do la solubilidad del calcio tartrato levógiro (que
también se forma) y las del calcio racemato en fun-
ción del pH y de la riqueza en iones de calcio. Con
estos datos se ha fijado un pH conveniente para
M
que precipite el calcio racemato y se solubilice el
tartrato levógiro.
24(a).2. Material y aparatos.
24(a).2.1. Vaso cilíndrico de 600 ml.
24(a).2.2. Filtros de porosidades números 4 y 2.
24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vacío.
24(a).2.4. Material accesorio para una volume-
tría.
24(a).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Amonio D(-)-Tartrato
121212 Calcio Carbonato precipitado PA
24(a).3.1. Solución de Calcio Acetato de 10 g de
Calcio por litro. Mezclar en matraz aforado de
1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PA
con 40 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
enrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En un
vaso, introducir 20 ml de una solución de Acido
L(+)-Tartárico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PA-
ACS, 20 ml de una solución de Amonio Tartrato
levógiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solución de
Calcio Acetato.
Dejar precipitar durante dos horas. Recoger el
precipitado sobre un filtro de porosidad número 4,
lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estu-
fa a 70° hasta peso constante. Se obtienen unos
340 mg de Calcio Racemato cristalizado.
Conservar en frasco tapado.
24(a).3.3. Licor de precipitación. Introducir en
matraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)-
Tartrato levógiro, 8,8 ml de solución de Calcio de
10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS.
Por ser el Calcio Racemato ligeramente soluble
en este licor, conviene saturarlo antes de su empleo,
añadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de este
licor. Agitar durante 12 horas y filtrar.
24(a).4. Procedimiento.
24(a).4.1. Precipitación del Racemato.- En un
vaso cilíndrico de 600 ml introducir 500 ml de licor
de precipitación y 10 ml de vino. Mezclar y dejar
precipitar durante 24 horas.
24(a) 4.2. Valoración gravimétrica.- Filtrar sobre
filtro poroso número 2, tarado y puesto sobre el
Kitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso en
el que se ha efectuado la precipitación y arrastrar las
últimas partículas de precipitado con el líquido ya fil-
trado.
Secar en estufa a 70° hasta peso constante. 53
24(a).5. Cálculo.
Calcular el ácido tartárico expresado en g/l de
vino o en g de potasio bitartrato.
Acido tartárico = 28,84 x P g/l
 Acido tartárico = 36,15 x P g de potasio bitar-
trato.
P = peso en g del calcio racemato, cristalizado
con cuatro moléculas de agua.
24(a).6. Referencia.
24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J.
“Comunicación número 304 de Métodos de Análisis
de Vinos”. 0. I. V., 1969.
24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL
(Método complexométrico)
24(b).1. Principio.
Como en 24(a).1.
24(b).2. Material y aparatos.
24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4).
24(b).3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
(Acido EDTA Na2 0,05M SV) (o prepa-
rar con 131669 Acido EDTA Na2
2-hidrato PA-ACS-ISO)
131074 Agua PA-ACS
211276 Magnesio Oxido QP
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
272172 Tampón, Solución pH 9,00 ±0,02 (20ºC) ST
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro
PA-ACS-ISO, 121129 Amoníaco 25% (en NH3)
PA y Agua PA-ACS)
24(b).3.1. Solución Tampón pH 9,00 ±0,02
(20ºC) ST, o preparar mezclando 54 g de Amonio
Cloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amoníaco 25% (en
NH3) PA y completar con Agua PA-ACS hasta un
litro.
24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T.
Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645)
RE-ACS con 100 g de Sodió Cloruro PA-ACS-ISO.
24(b).3.3. Solución de Magnesio 0,05M. Disolver
2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar que
no esté carbonatado se recomienda calcinar 5 g de
Magnesio Oxido QP al rojo en horno eléctrico
durante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer la
disolución en cantidad necesaria de Acido Clorhídri-
co diluido (10%) y luego se enrasa a un litro.
54 Valorar esta solución con Acido Etilendiaminote-
traacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en
presencia de Negro de Eriocromo T.
24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di-
sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver
18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica
2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS.
24(b).3.5. Acido Clorhídrico diluido a 1/5 (v/v).
Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-
ACS.
24(b).3.6. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
24(b).4. Procedimiento.
Disolver en 10 ml de Acido Clorhídrico diluido el
precipitado de Racemato recogido sobre el crisol fil-
trante. Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml de
Agua PA-ACS. Añadir un volumen de Sodio Hidró-
xido 1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar la
solución (unos 20-22 ml). Añadir después 5 ml de
Solución Tampón pH = 9, 5 ml de sal de magnesio
0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T.
Valorar con Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV.
24(b).5. Cálculo.
Acido tartárico en g/l de vino = (V - 5) 3,75.
Acido tartárico expresado en g/l de potasio bitar-
trato = (V - 5) 4,70.
V = volumen en ml de ácido EDTA Na2 0,05M.
La expresión de los resultados será en potasio
bitartrato y con una aproximación de 0,5 miliequiva-
lentes por litro, o de 0,05 g / l.
25. ACIDO LACTICO
25.1. Principio.
Aislamiento del ácido láctico mediante columna
de resinas cambiadoras de aniones, oxidación a
acetaldehído y valoración colorimétrica por la reac-
ción coloreada del acetaldehído con la piperidina.
25.2. Material y aparatos.
25.2.1. Espectrofotómetro y accesorios.
25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm de
diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte
inferior.
25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP.
25.2.4. Resina Lewatit ® MP 600 (*) (aniónica fuerte l)
25.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS
182105 Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA
211376 Lana de Vidrio lavada QP
162377 Piperidina PS
Resina Lewatit ® MP 600
(aniónica fuerte I)
131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
181691 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
141717 Sodio Sulfito anhidro PRS

25.3.1. Solución de Cerio IV Sulfato 0,1M en
Acido Sulfúrico 0,7N. Disolver en frío 40,431 g de
Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de Acido
Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. No
calentar, pues se formaría un cerio IV óxido insolu-
ble. Llevar la solución a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
25.3.2. Solución valorada de Sodio Hidróxido
2,5N. Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-
ISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentración
indicada y determinar el factor.
25.3.3. Solución de Sodio Acetato al 27%. Disol-
ver 270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS en
Agua PA-ACS y completar 1.000 ml.
25.3.4. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.
25.3.5. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.
Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA en
Agua PA-ACS, después completar a 100 ml. Con-
servar tapado en la oscuridad. La solución no debe
tener más de ocho días.
25.3.6. Solución de Piperidina al 10%. Llevar a
un matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enra-
sar a 100 ml con Agua PA-ACS.
(*). En el original indica “resina cambiadora de anio-
nes”. Consideramos apropiada la aniónica fuerte I.
25.4. Procedimiento.
25.4.1. Preparación de la columna de resinas
aniónicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en el
fondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapón de
2-3 mm de altura proximadamente, añadir Agua PA-
ACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapón
de Lana de Vidrio, lavada QP. Añadir después la
Resina Lewatit ® MP 600, que estará conservada en
Acido Acético glacial al 30%, agitar esta suspensión
y añadir rápidamente un volumen de unos 10 ml.
Dejar sedimentar y después depositar en la superfi-
cie un tapón de Lana de Vidrio lavada QP que se
conduce a través del líquido sin resinas con una
varilla de vidrio.
La Resina Lewatit ® MP 600 no sirve más que
para una sola vez.
25.4.2. Aislamiento del Acido Láctico. Abrir la
llave inferior de la columna y dar salida al Acido Acé-
tico diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapón
de lana superior. Añadir unos 10 ml de Acido Acéti-
co al 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estos
lavados cuatro veces.
Después del último lavado, y con llave cerrada,
adicionar 10 ml del vino y señalar la altura alcan-
zada, con lápiz graso. Dejar salir goteando el vino
a razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por
minuto). Vaciar hasta el nivel del tapón de Lana de
Vidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo la
columna con Acido Acético al 0,5% hasta la señal
de lápiz graso. Dejar salir a la misma velocidad
que la vez anterior y lavar después en la misma
forma siete veces, cada vez con 10 ml de Agua
PA-ACS.
M
Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan-
do el nivel del líquido se encuentre un poco más arri-
ba del tapón de Lana de Vidrio lavada QP superior.
Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml.
Eluir los ácidos fijados en el cambiador de aniones
mediante adiciones de solución de Sodio Sulfito
0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidro
PRS en Agua PA-ACS), hasta la señal trazada en el
tubo.
Resulta práctico, para realizar esta operación,
colocar un frasco con la solución de Sodio Sulfito
unido por el cuello a la columna mediante un man-
guito de caucho y con unas pinzas para regular la
caída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así en
comunicación los dos aparatos (frasco y bureta o
tubo), abrir las pinzas del caucho de unión y la llave
inferior, dejando caer el líquído a la bureta hasta
unos 10 cm de altura, y sin que queden huecos
vacíos. Se regula la salida del líquido a la proporción
de 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz re-
ceptor hasta el enrase.
25.4.3. Valoración del Acido Láctico. Introducir
10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredes
que no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidad
con tapón. Añadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sul-
fato. Agitar e introducir el tubo de ensayo en un ter-
mostato a 65°C durante 10 minutos exactamente.
Inmediatamente después de la inmersión en el líqui-
do, destapar durante unos segundos, para dar sali-
da al aire dilatado. Cerrar rápidamente con el ta-
pón para evitar pérdidas del Acetaldehído formado.
Después de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo con
agua corriente hasta la temperatura de 20°C.
Añadir 5 ml de la solución de Sodio Hidróxido
2,5N, mezclar bien y filtrar.
Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta de
tapón esmerilado de 50 ml de capacidad, que con-
tenga 5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y
2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. Añadir ade-
más 5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y mez-
clar bien. Añadir después 5 ml de solución de Pipe-
ridina, mezclar rápidamente, introducir en seguida
en la cubeta del espectrofotómetro de 10 mm
de espesor. Medir la coloración producida, que
varía, de verde a violeta, con relación al aire a la lon-
gitud de onda de 570 nm. Esta coloracion aumenta
al principio, pero disminuye en seguida rápidamen-
te. Tomar como valor definitivo el valor máximo de la
lectura de absorbancia.
Si el eluido es muy rico en Acido Láctico y la
densidad óptica es muy elevada, diluir el eluido con
solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
25.4.4. Curva patrón. Tomar 10 ml de una solu- 55
ción de Acido Láctico 1N exacta, y añadir 10 ml de
Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y completar a un
litro con solución de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5,
10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducir
cada alícuota en un matraz aforado de 100 ml.
Enrasar con solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
 Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones así
obtenidas y determinar los valores de las absorban-
cias respectivas.
Las diferentes soluciones corresponden a eluido
del vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25
g/l de Acido Láctico.
La representación gráfica de las absorbancias
de estas soluciones en función de la riqueza en
Acido Láctico, es una recta.
25.5. Cálculo.
Llevar los valores de absorbancia obtenidos a la
curva patrón y deducir los correspondientes conte-
nidos en ácido láctico expresados en g/l.
25.6. Observaciones.
Si el vino tiene más de 250 mg por litro de sulfu-
roso total, el resultado puede ser erróneo, por la
presencia de ácido aldehído sulfuroso. En determi-
naciones de precisión, conviene realizar una correc-
ción en la forma siguiente:
Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta de
tapón esmerilado, en la que se habrá añadido 5 ml
de sodio acetato al 27% y 2 ml de ácido sulfúrico
1,55N (77,5 ml de ácido sulfúrico 2N diluidos a
100 ml con agua destilada). Añadir 5 ml de sodio
nitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%.
Mezclar y hacer la determinación espectrofotométri-
ca a 570 nm que da el factor de corrección:
L = L’ - C x 0,25
L = contenido real de ácido láctico expresado en
g/l.
L’ = contenido aparente de ácido láctico expre-
sado en g/l.
C = factor de corrección en g/l.
25.7. Referencia.
25.7.1. Rebelein, M. “Deutsche Lebens-mittel
Rudshan”, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963.
26. ACIDO CITRICO
26.1. Principio.
El ácido cítrico es fijado junto con los otros áci-
dos del vino por una resina cambiadora de aniones.
Después se procede a la elución, la que se realiza
56 fraccionadamente y separando el ácido citromálico
que es causa de error en la valoración del ácido
cítrico.
El ácido cítrico es transformado por oxidación
cuidadosa en acetona, la que se separa por destila-
ción. El etanal arrastrado se oxida a ácido acético y
se valora sola la acetona por yodometría.
26.2. Material y aparatos.
26.2.1. Columna cambiadora de aniones. En
una bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocar
un tapón de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondo
y verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2.
Someter la Resina a dos ciclos completos de
regeneración con pasos alternos de Acido Clorhídri-
co 1mol/l (1N) SV y Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Lavar después con 50 ml de Agua PA-ACS, agitan-
do la Resina Dowex cuando los primeros ml de
Agua PA-ACS pasan por la columna para despe-
garla del fondo de la bureta.
Saturar la Resina de iones acetato, mediante el
paso de 250 ml de una solución de Acido Acético
4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS.
26.2.2. Aparato para la oxidación. Aparato com-
puesto de matraz de cuello largo, atravesado late-
ralmente por el tubo afilado de embudo con llave, y
en comunicación con refrigerante, según dimensio-
nes y forma del diseño (fig. 26.I).
26.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA
211376 Lana de Vidrio, lavada QP
131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS
211456 Piedra Pómez gránulos QP
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV
Resina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas)
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas)
26.3.2. Solución de Acido Acético 4N. Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS a la concentración indicada y determinar el
factor.
26.3.3. Solución de Acido Acético 2,5N. Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS a la concentración indicada y determinar el
factor.
26.3.4. Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV.
26.3.5. Acido Sulfúrico diluido al 1/5 (v/v). Diluir
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
26.3.6. Solución Tampón pH = 3,2-3,4. En un
matraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio di-
Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido

orto-Fosfórico (d = 1,689) y enrasar con Agua PA-
ACS. (Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
con Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indi-
cada)
26.3.7. Solución de Manganeso Sulfato de 50 g/l.
Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS en
Agua PA-ACS.
26.3.8. Piedra Pómez gránulos QP.
26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV.
26.3.10. Acido Sulfúrico diluido a 1 (v/v).
26.3.11. Solución de Potasio Permanganato 2N.
Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS, ajustar a la concentración indicada y
determinar el factor.
26.3.12. Solución de Hierro II Sulfato de 40 g por
100.
26.3.13. Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV.
26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV.
26.3.15. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N.
Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor.
26.3.16. Almidón soluble RE.
M
Agua PA-ACS hasta este volumen: añadir después
4,5 ml de Acido Sulfúrico al 1/3 y 5 ml de una solu-
ción de Potasio Permanganato 2N.
Si el volumen del destilado excede de los 90 ml,
completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar la
dosis doble de reactivos.
En estas condiciones (medio Acido Sulfúrico
0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etíli-
co es oxidado a ácido acético y la acetona perma-
nece intacta.
Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45
minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de este
tiempo se destruye el exceso de permanganato adi-
cionando solución de Hierro II Sulfato.
Destilar después y recoger 50 ml aproximada-
mente de destilado en un frasco de tapón esmerila-
do que contenga 5 ml de Sodio Hidróxido 5 mol/l
(5N) SV.

26.4. Procedimiento.
26.4.1. Separación de los ácidos cítrico y citro-
málico. Hacer pasar 25 ml del vino a través de la
columna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 en
forma acética a razón de 3 ml cada dos minutos.
Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS en
tres veces. Eluir los ácidos con 200 ml de solución
de Acido Acético 2,5N que se hace pasar por la
columna a la misma velocidad. En esta fracción de
eluido se encuentra, entre otros ácidos, el ácido
citromálico que interesa eliminar.
Eluir los ácidos cítricos y tartáricos haciendo
pasar a través de la columna 100 ml de Sodio
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en el
matraz del aparato de oxidación y destilación des-
crito
26.4.2. Oxidación. En el matraz que contiene ya
el eluido anterior, añadir Acido Sulfúrico diluido al
1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 ml
de Solución Tampón pH = 3,2-3,4, 1 ml de solución
de Manganeso II Sulfato y algunos gramos de Pie-
dra Pómez gránulos QP. Tapar y conectar el matraz
con el refrigerante, calentando hasta ebullición.
Separar los primeros 50 ml destilados.
Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter en
el matraz a razón de una gota por segundo, cayen-
do en el eluido en ebullición. El destilado se recoge
en frasco de 500 ml de tapón esmerilado que con-
57
tiene unos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxida-
ción hasta que la coloración parda del líquido acuse
un exceso de permanganato.
26.4.3. Separación de la acetona. Si el volumen
del destilado es inferior a 90 ml, completar con Figura 26.l
 26.4.4. Valoración de la acetona, añadir al conte-
nido del frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV,
si la dosis de Acido Cítrico es superior a 0,5-0,6 g/l
será necesario añadir más solución de Yodo, hasta
que quede color amarillento que indicará este exce-
so. Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegar
a este punto, pero si la riqueza en Acido Cítrico es
mayor de 1,5 g, comenzar otra vez el análisis con
sólo 10 ml de vino.
Dejar en contacto el Yodo añadido durante 20
minutos permaneciendo el frasco tapado. Añadir
8 ml de Acido Sulfúrico al 1/5 y valorar el exceso de
yodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia de
Almidón soluble RE.
Hacer una valoración en blanco en las mismas
condiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por
50 ml de Agua PA-ACS.
26.5. Cálculo.
Calcular el contenido en ácido cítrico expresado
en g/l.
V’ - V”
Acido cítrico = 0,64 ———— g/l
V
V = volumen en ml de la muestra de vino.
V’ = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti-
lizado en la valoración en blanco.
V” = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti-
lizado en la valoración del yodo en exceso.
26.6. Referencia.
26.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969.
27. SULFATOS
27.1. Principio.
Precipitación del bario sulfato en el vino, previa-
mente desprovisto de anhídrido sulfuroso por ebulli-
ción al abrigo del aire.
27.2. Material y aparatos.
27.2.1. Matraz cónico (Erlenmeyer) de 500 ml,
provisto de ampolla con llave de 100 ml y de des-
prendimiento de vapor, atravesando ambos el
tapón. El matraz se coloca sobre disco metálico de
15 cm de diámetro con abertura circular de 8 cm de
diámetro.
58 27.2.2. Vaso cilíndrico de 400 ml.
27.2.3. Baño de agua o plancha caliente a 60°C.
27.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
27.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.
27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2-
hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.
27.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
27.4. Procedimiento.
27.4.1. Eliminación del anhídrido sulfuroso del
vino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descri-
to 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhídri-
co 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución para eli-
minar el aire del aparato. Introducir 100 ml del vino
por la ampolla de llave evitando que la ebullición se
pare durante esta adición. Continuar la ebullición
hasta reducir el volumen del líquido a unos 100 ml,
eliminando así todo el SO2.
27.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
residuo de la evaporación anterior a un vaso de
400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
(2N) y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota 10 ml
de solución de Bario Cloruro, con la precaución de
no parar la ebullición y dejar reposar en caliente,
colocando el vaso sobre placa a 60° durante cuatro
horas y en baño de agua hirviendo durante dos
horas. En el caso de pequeñas cantidades de preci-
pitado, se recomienda un segundo reposo en frío
durante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavar
el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente
hasta que no dé reacción con Plata Nitrato PA-
ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado a
crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, des-
pués de enfriar en un desecador, pesar.
27.5. Cálculo.
Calcular el contenido de sulfatos expresado en
meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-
ción de ± 0,05 g/l.
Sulfato = 85,68 P meq/l.
Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
P = peso de las cenizas en g.
27.6. Referencias.
27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. “Industries Ali-
mentaires et Agricoles”, 71: 1, 23 y 5, 427,1954.
27.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.

28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO
(Método Paul)
28(a).1. Principio.
Liberación de sulfuroso “libre” por acidificación
del vino, arrastre por corriente de aire, oxidación por
barboteo en agua oxigenada neutra y valoración
con sodio hidróxido del ácido sulfúrico formado.
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso
“combinado”, que queda en el vino después de la
extracción del sulfuroso “libre”, y análogo tratamien-
to que en la determinación del sulfuroso “libre”. El
sulfuroso “total” es la suma del sulfuroso “libre” y el
sulfuroso “combinado”. Puede determinarse acidifi-
cando el vino y calentando y procediendo como en
los dos casos anteriores.
28(a).2. Material y aparatos.
Utilizar el aparato representado en la figura
28(a).I.
28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml.
28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola hue-
ca en un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mm
de diámetro alrededor del círculo máximo hori-
zontal.
Figura 28(a).I. Las dimensiones están indicadas en mm. Los diámetros interiores de los cuatro tubos con-
céntricos que constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm
M
28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores y
deje pasar el gas en recorrido seguro.
28(a).2.4. Frasco con agua y con tapón atrave-
sado por el tubo que comunica con el barbotador
para hacer vacío, y otro tubo sumergido en el agua
para acusar la intensidad del vacío por la depresión
de la columna de agua en el interior del tubo,
depresión que debe mantenerse entre 20-30 cm.
El gasto de vapor será de 40 l/h.
28(a).2.5. Baño de agua regulable a 10°C.
28(a).3. Reactivos.
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC
121085 Etanol 96% v/v PA
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
28(a).3.1. Acido Fosfórico aI 25% (p/v). Diluir
convenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-
ACS-ISO con Agua PA-ACS.
28(a).3.2. Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes
59
 por 100. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxi-
do 30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS.
28(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,01N. En un matraz
aforado diluir a 1:10, Sodio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor
de la solución obtenida 0,01N.
28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo de
Metilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Meti-
leno (C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50°.
Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA con
Agua PA-ACS.
28(a).4. Procedimiento.
28(a).4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre.
En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml del
vino y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 25%, colo-
cando acto seguido el matraz en su sitio. Si la rique-
za en SO2 del vino es pequeña, se emplea el matraz
de 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino.
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10°C.
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3
volúmenes y dos gotas del reactivo Indicador en el
barbotador y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con
Sodio Hidróxido 0,01N.
Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbo-
tar el aire (o nitrógeno) durante 12-15 minutos.
Arrastrar el anhídrido sulfuroso libre y después oxi-
dar a H2SO4. Retirar el barbotador y valorar el ácido
formado con solución de Sodio Hidróxido 0,01N.
28(a).4.2. Análisis del anhídrido sulfuroso combi-
nado. Después de terminar la valoración del anhídri-
do sulfuroso libre, colocar en el barbotador ya lim-
pio, los 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado
y con las dos gotas del indicador. Calentar con lla-
ma pequeña hasta llevar a la ebullición el vino que
quedó en el matraz despojado del anhídrido sulfuro-
so libre por la determinación anterior. Aplicar el fue-
go directo sobre el fondo del matraz, que des-
cansará sobre chapa metálica perforada con orificio
de 30 mm de diámetro, para evitar la pirogenación
de las materias extractivas del vino sobre las pare-
des del matraz. Mantener el paso del aire o nitróge-
no durante la ebullición, que durará 12-15 minutos,
tiempo que se considera suficiente para arrastrar
todo el sulfuroso combinado, y después oxidarlo.
Continuar como en 28(a).4.1 a partir de “Colocar
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido...”.
28(a).4.3. Anhídrido sulfuroso total. Puede
determinarse por la suma anhídrido sulfuroso libre
más anhídrido sulfuroso combinado, pero tam-
bién puede determinarse directamente, actuando
60 desde un principio con corriente de aire y con
calor.
28(a).5. Cálculo.
Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso
expresado en mg/l con una aproximación de
10 mg/l.
Anhídrido sulfuroso = 32 V mg/l.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.
28(a).6. Observaciones.
Para vino sensiblemente picado (con más de
2 g/l de acidez acética) puede arrastrarse con el
anhídrido sulfuroso, ácidos volátiles, especialmente
cuando la corriente de aire es intensa.
Corregir determinando la acidez volátil presente
en el líquido del barbotador, operando de la siguien-
te forma:
Después de la neutralización con el sodio hidró-
xido al valorar la acidez, añadir un cristal de 131066
Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO y llevar el conteni-
do del barbotador al aparato de determinación de la
acidez volátil por destilación en corriente de vapor.
Restar despues del resultado anterior la parte de
acidez correspondiente a los ácidos volátiles.
28(a).7. Referencias.
28(a).7.1. Paul, F. “Mitteilungen Klosternenberg”,
A: 8, 21, 1958.
28(a).7.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969.
28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO
(Método Ripper doble)
28(b).1. Principio.
Valoración yodométrica del SO2 operando direc-
tamente con el vino.
Para evitar el error introducido por la recombina-
cion del sulfuroso liberado de su combinación con
los aldehídos, durante la valoración volumétrica, se
hace una segunda valoración, después de nueva
liberación del SO2 recombinado.
28(b).2. Material y aparatos.
28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material para
una volumetría.
28(b).3. Reactivos.
Acetaldehído
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
(Acido EDTA Na2 2-hidrato)
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121428 Mercurio II Yoduro rojo PA
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
28(b).3.1. Sodio Hidróxido 4N. En un matraz
aforado diluir a 4:5, Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-
ción 4N obtenida.

28(b).3.2. Acido Sulfúrico al 1/10 en volumen
(180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
28(b).3.3. Engrudo de almidón preparado de la
siguiente forma:
Pesar 2,5 g de Almidón soluble RE y triturarlo en
un mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yoduro
rojo PA. Llevar a un vaso y añadir un volumen de
Agua PA-ACS suficiente para poder hervir la sus-
pensión con fluidez. Llevar después ésta a matraz
con 1 litro de Agua PA-ACS en ebullición, que se
mantiene durante 10 minutos. El líquido obtenido
estará limpio y si es necesario se filtra.
28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matraz
aforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l
(0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor
de la solución 0,01N obtenida.
28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
28(b).4. Procedimiento.
Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml del
vino, 3 ml de Acido Sulfúrico al 1/10, 5 ml de Engru-
do de Almidón y 30 mg de Acido Etilendiaminote-
traacetico Sal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (con
el fin de evitar la oxidación del SO2 libre durante la
valoración).
Homogeneizar la solución y añadir con bureta
Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloración azul
del almidón, que primero será fugaz, y netamente
persistente después, durante 10-15 segundos,
considerándola entonces aceptable. Sea V el volu-
men del yodo empleado.
Añadir 8ml de solución de Sodio Hidróxido 4N,
agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5
minutos. Después verter, de un solo golpe y agitan-
do enérgicamente, 10 ml de Acido Sulfúrico a 1/10.
Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V’ el volumen en ml
de solución de yodo empleado.
Se añade después 20 ml de Sodio Hidróxido
4N, se deja en contacto durante 5 minutos después
de haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 ml
de Agua PA-ACS bien fría, agitar después enérgica-
mente y añadir 30 ml de Acido Sulfúrico al 1/10 y
valorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 libe-
rado. Sea V” el volumen en ml de la solución de
yodo empleado.
Con estas valoraciones se corrige el error que
puede originarse por la recombinación de parte del
SO2 ya liberado de los aldehídos, con el mismo
aldehído que estará presente en el líquido que se
valora.
También es posible causa de error, y especial-
mente cuando se trate de vinos tintos ricos en color
y extractos, el consumo de yodo por estas sustan-
cias; para corregir este error se opera de la manera
siguiente:
M
Adicionar a 50 ml del vino, colocados en un
Erlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehído
para que sea capaz de combinarse con todo el SO2
libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml de
solución de Acetaldehído, de 7 g por litro. Se tapa
el matraz y después de un reposo de 30 minutos,
como mínimo, se añaden 3 ml de Acido Sulfúrico
diluido al 1/10 y después los de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidón.
Sea V’’’ el volumen en ml necesarios.
La presencia de ácido ascórbico también puede
ser causa de error. Descontar el yodo correspon-
diente, considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de ácido
ascórbico.
28(b).5. Cálculo.
SO2 libre = 32 (V - V’’’) mg/l.
SO2 combinado = 32 (V’ + V”) mg/l.
SO2 total = 32 (V + V’ + V” - V’’’) mg/l.
Con aproximación de 10 mg/l.
28(b).6. Observaciones.
Para vinos pobres en SO 2, es conveniente
emplear yodo más diluido, solución 0,02N, reem-
plazando entonces el coeficiente 32 por el de 12,8
en los cálculos.
En los vinos tintos es conveniente, para apreciar el
viraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyer
donde está el vino. Hay dispositivos sencillos a
base de simple bombilla con filtro preparado con
solución de potasio cromato, o bien con luz amarilla
de lámpara de vapor de sodio.
Cuando haya un interés especial en la determi-
nación del SO2 libre, debe dejarse la muestra en
reposo durante 4 días, al abrigo del aire y a tempe-
ratura de 20°C. El análisis se realizará también a
20ºC.
28(b).7. Referencias.
28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. “Méthode
Ripper double d’analyse de SO2. Bol.”. O. I. V., 274.
52-54, 1959.
28(b).7.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.
29. ACIDO SORBICO
29.1. Principio.
El ácido sórbico arrastrado por el vapor de agua
(constante de volatilidad 0,59), se valora en el desti-
61
lado por espectrofotometría en el ultravioleta.
29.2. Material y aparatos.
29.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta y cubetas
de cuarzo de 1 cm de espesor.
 29.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro.
29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.
29.3. Reactivos.
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
(o 121531 Potasio Sorbato PA)
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA
29.3.1. Solución (a) (destinada a catalizar la oxi-
dación del ácido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 g
de Sodio Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
29.3.2. Solución (b) de Acido Sórbico (USP-NF)
PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de Acido
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz afora-
do de 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACS
caliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro.
En vez de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
puede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA.
29.4. Procedimiento.
Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionado
de 1-2 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.
Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir la
más completa extracción del Acido Sórbico (USP-
NF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml más
que los necesarios para la acidez volátil.
Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matraz
aforado 20 ml y enrasar con la solución (a).
Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de
1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire durante
unos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm.
Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de desti-
lado por 5 ml de Agua PA-ACS.
Para obtener la curva patrón, determinar la
absorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1,
2,5 y 5 mg/l de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-
CODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS la
solución (b). La gráfica correspondiente a estos
valores es una línea recta.
29.5. Cálculo.
Calcular el ácido sórbico expresado en mg/l.
Acido sórbico = 0,2 . C . V mg/l.
C = contenido en mg/l de ácido sórbico determi-
62 nado por comparación con curva patrón.
V = volumen en ml de destilado.
29.6. Referencias.
29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B.
“Annales des Falsifications et de l’Expertise Chimi-
que”, 111, 1961.
29.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969.
30. CLORUROS
30.1. Principio.
Determinación directa de cloruros por potencio-
metría utilizando el electrodo Ag/AgCl.
30.2. Material y aparatos.
30.2.1. pH-metro con escala que permita apre-
ciar 2mV.
30.2.2. Agitador magnético.
30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una solución
saturada de potasio nitrato como electrolito.
30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
30.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
30.3.1. Solución patrón de cloruros.- Disolver
2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
puro para análisis (máximo 0,005% de bromo) pre-
viamente desecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro.
1 ml de esta solución contiene 1 mg de ion Cloro.
30.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver
4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una solu-
ción al 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PA-
ACS, hasta un litro. 1 ml de esta solución corres-
ponde a 1 mg de ion Cloro.
30.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
30.4. Procedimiento.
30.4.1. Determinación del potencial del punto de
equivalencia.
Introducir 5,0 ml de la solución patrón de cloru-
ros en un vaso de 150 ml.
Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PA-
ACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70%
PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos.
Añadir 10 ml de la solución de Plata Nitrato, agitan-
do moderadamente: adicionar los cuatro primeros
ml en fracciones de 1 ml y leer las correspondientes
lecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, en
fracciones de 0,2 ml y continuar adicionando en
fracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzado
un total de 10 ml. Después de cada adición esperar
unos treinta segundos antes de hacer la correspon-
diente lectura en milivoltios. Llevar los valores así
obtenidos sobre un papel milimetrado en función
de los correspondientes ml de solución de Plata
Nitrato y a partir del punto singular de la curva
obtenida determinar el potencial del punto de equi-
valencia.
Para comprobar el potencial del punto de equi-
valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la

solución patrón de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS
y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Introducir
el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el
potencial del punto de equivalencia.
Repetir esta operación hasta obtener una buena
concordancia de resultados. Este control debe
efectuarse antes de determinar la concentración de
cloruros en cada serie de muestras a analizar.
30.4.2. Determinación.
Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino.
Añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de Acido
Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuación
siguiendo el procedimiento descrito anteriormente
hasta alcanzar el potencial del punto de equiva-
lencia.
30.5. Cálculo.
La cantidad de cloruros se determina mediante
las expresiones:
0,02 n en g de ion cloro.
0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-
ro.
0,0329 n en g de sodio cloruro por litro.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de plata nitrato
necesario para alcanzar el potencial del punto de
equivalencia.
30.6. Referencia.
30.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. A 15j.
31. ACIDO BENZOICO
31.1. Principio.
Extracción por el éter del ácido benzoico pre-
sente en el vino. Tratamiento del extracto por la
mezcla nitro-sulfúrica y formación del ácido 3,5-
dinitrobenzoico, que es extraído con éter y después
recogido por la mezcla acetona-alcohol. La adición
de sodio hidróxido da origen a una coloración viole-
ta. Esta reacción es sensible, específica y cuantitati-
va, siempre que se opere en condiciones que ase-
guren la transformación del ácido benzoico en
compuesto coloreado medible en el espectrofotó-
metro a 570 nm.
31.2. Material y aparatos.
31.2.1. Espectrofotómetro que permita lecturas
a 570 nm.
31.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.
31.2.3. Matraces de 100 ml aforados.
31.2.4. Cápsulas.
31.2.5. Baño de agua.
31.2.6. Matraces aforados de 50 ml.
31.2.7. Erlenmeyer de 50 ml.
M
31.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
121014 Acido Benzoico PA
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121086 Etanol absoluto PA
121085 Etanol 96 v/v PA
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
131524 Potasio Nitrato PA-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
31.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO.
31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 ml
de Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanol
absoluto PA.
31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfúrico: Añadir a 10 g de
Potasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO.
31.3.4. Solución Sodio Hidróxido-Etanol al 5%.
Añadir a 5 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-
ISO (sin Na2 CO3) 50 ml de Agua PA-ACS.
Después de fría la mezcla se añade Etanol 96%
v/v PA hasta 100 ml.
La solución debe quedar limpia.
31.4. Procedimiento.
Vinos secos o con riqueza en azúcar de 100 g/l.
Añadir a 10 ml de vino puestos en ampolla de
decantación 2 ml de Acido Sulfúrico al 25% y 25 ml
de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrar
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz afo-
rado de 50 ml y enrasar.
Poner 20 ml de la solución de Eter Dietílico en
Erlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vapo-
res mediante vacío, permaneciendo el Erlenmeyer
sumergido en baño de agua fría. Añadir al residuo
5 ml de la mezcla Nitrosulfúrica cuidando de empa-
par bien todo el residuo. Llevar después al baño de
agua hirviendo durante 35 minutos y agitando de
cuando en cuando, sobre todo al principio.
Enfriar en agua fría, añadir 5 ml de Agua PA-
ACS, seguir enfriando y verter el contenido en una
ampolla de decantación de 250 ml. Enjuagar el
Erlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a ver-
ter el contenido en la ampolla y añadir 30 ml de Eter
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-
ISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosa
después de cuidadosa decantación y lavar el Eter 63
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-
ISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cui-
dado (un lavado más prolongado originaría pérdidas
de dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que es
preferible decantar bien, que volver a lavar).
Filtrar el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
 de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con Sodio
Sulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en segui-
da con 10 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado en
una pequeña cápsula a 35°, arrastrar con tres adi-
ciones de 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previa-
mente enfriado en nevera). Recoger todos estos
líquidos en un tubo de ensayo de tapón esmerilado
y aforado a 15 ml.
En un tubo de ensayo de tapón esmerilado y
con trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml de
la anterior solución. Este volumen debe variar con la
riqueza supuesta, para obtener la reacción colorea-
da con el ácido dinitrobenzoico originado por 0,1 a
0,5 mg de Acido Benzoico PA. El método es válido
entre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz de
medir absorbancias superiores a 1,5.
Diluir el volumen de líquido puesto en el tubo,
con la mezcla Acetona-Etanol fría, hasta 14,7 ml y
añadir después 0,3 m Sodio Hidróxido lentejas PA-
ACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar y
sumergir en hielo fundente.
Hacer la determinación en cubeta de 1/2-1 cm a
570-580 nm después de 30 minutos y antes de 70
minutos a partir del momento de la mezcla.
Utilizar como solución compensadora para com-
paración una mezcla de 14,5 de Acetona-Etanol
con 0,3 ml de Sodio Hidróxido al 5%.
Para obtener la curva patrón, preparar una solu-
ción valorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en
100 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solución a 1/10 con
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-
ACS-ISO y tratar 10 ml de esta solución de 50 mg
por litro, como se ha indicado antes para la mues-
tra.
La densidad de óptica varía linealmente con la
cantidad de Acido Benzoico.
31.5. Cálculo.
Llevar la absorbancia obtenida a la curva patrón
y expresar el correspondiente contenido de ácido
benzoico en mg/l.
31.6. Referencia.
31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M.
“Zeitschrift für Lebenmittel Untersuchung und Fors-
chung”, 1958.
32. BROMO TOTAL
32.1. Principio.
64 Saponificación cuidadosa, para evitar pérdidas,
de los ésteres del ácido brómico, eventualmente
presentes en el vino, transformación del rojo de
fenol en azul de bromofenol, y valoración colorimé-
trica o espectrofotométrica.
32.2. Material y aparatos.
32.2.1. Cápsula de sílice de 7 cm de diámetro.
32.2.2. Baño de agua.
32.2.3. Horno eléctrico, recomendable con
regulador automático, para regular a 525°.
32.2.4. Espectrofotómetro o colorímetro capa-
ces para lectura a 584 nm.
32.3. Reactivos.
182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
121489 Potasio Bromuro PA
171615 Rojo de Fenol RE-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
32.3.1. Solución de Sodio Hidróxido al 50%.
Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS.
32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxido
natural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS).
32.3.3. Solución de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 g
de Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidróxi-
do 0,1 mol/l (0,1N) SV. Añadir Agua PA-ACS hasta
1.000 ml.
32.3.4. Solución Tampón pH = 4,65. Mezclar
500 ml de Acido Acético 2 mol/l (2N) SV, 250 ml de
Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de Agua
PA-ACS.
32.3.5. Solución oxidante. A 2 g de Cloramina T
3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX añadir Agua
PA-ACS hasta un litro.
Preparar esta solución 48 horas antes de su
empleo y sólo será válida hasta quince días.
32.3.6. Solución reductora. Añadir a 25 g de
Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Agua
PA-ACS hasta un litro.
32.3.7. Solución valorada de Potasio Bromuro.
Añadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PA-
ACS hasta un litro.
Esta solución contiene 1 g de Bromuro por litro.
En el momento de su empleo se hacen dos dilucio-
nes sucesivas a 1/10 y se tendrá la solución a em-
plear que contiene 10 microgramos de Bromo por ml.
32.4. Procedimiento.
Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidróxido al 50% y
1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino coloca-
dos en una cápsula de cuarzo de 7 cm de diámetro.
Esta adición proporciona un soporte infusible que
permite una buena combustión del carbón. Si el vino
es muy ácido conviene añadir antes sodio hidróxido
para llevarlo a pH 10 por lo menos.

Si el vino contiene compuestos orgánicos de
bromo o antisépticos bromados, dejar por lo menos
24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando la
cápsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturar
los ésteres del ácido bromoacético, que son muy
volátiles.
Evaporar el líquido de la cápsula en baño de
agua, calentar el residuo con pequeña llama o en
baño de arena para eliminar las últimas trazas de
agua. Incinerar hasta cenizas blancas en el horno
eléctrico regulado a 525°C, sin pasar de esta tem-
peratura para evitar pérdidas por sublimación.
Para facilitar la obtención de cenizas blancas,
retirar la cápsula después de 15 minutos de incine-
ración, dejar enfriar y humedecer las cenizas aún gri-
sáceas con unas gotas de Agua PA-ACS, evaporar
y volver al horno, repitiendo esta operación las
veces necesarias hasta conseguir cenizas blancas.
Añadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACS
hirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,6-
4,5 con Acido Sulfúrico diluido 1:10 y ajustar con
Acido Sulfúrico diluido a 1/100 y completar con
Agua PA-ACS hasta 10 ml.
Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a aña-
dir, tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por consi-
derar el aumento de volumen Agua PA-ACS más
Acido Sulfúrico, equivalente a 0,2 ml, que habrá sido
arrastrado en la precipitación de los 334 mg de Cal-
cio Sulfato hidratado, formado al reaccionar parte
del Acido Sulfúrico con la Lechada de Cal 4N aña-
dida.
Las restantes causas de pequeña variación de
volumen (como las del H2SO4 al pasar a Na2SO4 y
K2SO4), se consideran sin sensible influencia.
Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato preci-
pitado y remover bien.
Diluir, si es necesario, la solución de cenizas has-
ta un contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproxi-
madamente. Para comprobar cualitativamente si el
contenido en bromo del vino es superior o inferior a
1 mg/l, tomar 1 ml de la solución de cenizas del
vino, poner en tubo de ensayo y añadir una gota de
solución tampón pH 4,65, una gota de solución
Rojo de Fenol y una gota de solución Cloramina T.
Después de un minuto exactamente, detener la
reacción añadiendo una gota de solución de Sodio
Tiosulfato. Si la solución es amarilla, amarillo-parda
o amarillo-verdosa, el contenido en bromo es apro-
ximadamente inferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta o
violeta fugaz, el contenido en bromo es superior a
1 mg/l, siendo necesario diluir la solución.
Decantar el líquido y trasvasar a un tubo de
ensayo.
Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solución de
cenizas y añadir 0,25 ml de Solución Tampón,
0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T.
Después de un minuto exactamente, paralizar la
reacción con 0,25 ml de solución de Sodio Tiosulfa-
to 5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorban-
M
cia con fotocolorímetro o espectrofotómetro
mediante medida a 584 nm.
Para obtener la curva patrón, tomar la solución
de Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro,
alícuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00
y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS.
El contenido en bromo de estas soluciones es,
respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l.
Tratar cada una de estas soluciones de 5 ml
como la solución de cenizas y hacer las correspon-
dientes determinaciones en el espectrofotómetro a
584 nm.
32.5. Cálculo.
Calcular el contenido en bromo expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.
32.6. Referencias.
32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. “Valoration du
brome dans les vins”. Annales des Falsifications et
de Fraudes. 1952.
32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. “Medida
espectrofotométrica de reacciones coloreadas muy
fugaces”. Boletín I. N. I. A. 19, 60, 40.
33. BROMO ORGANICO
33.1. Principio.
El coeficiente de dilución del ácido monobromo-
acético entre el éter y el agua acidulada con ácido
sulfúrico (que anula la ionización) es próximo a 5.
Los ésteres del ácido monobromoacético son
menos solubles en el agua que el mismo ácido, por
lo que es más fácil su extracción por el éter. Tres
lavados con un volumen de éter igual al del vino son
suficientes para extraer todo el bromo orgánico.
33.2. Material y aparatos.
33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4).
33.2.5. Ampollas de decantación de 50 y
500 ml.
33.3. Reactivos.
182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm 65
de BHT PA-ACS-ISO
121489 Potasio Bromuro PA
171615 Rojo de Fenol RE-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
 182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-
ISO
33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4;
5; 6 y 7).
33.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
33.4. Procedimiento.
Colocar en una ampolla de decantación 20-200 ml
de vino (según la riqueza supuesta), añadir 5 g de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO por litro de vino, se
añade después un volumen de Eter Dietílico estabi-
lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual al
volumen de vino, agitar y decantar cuidadosamente
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operación. Fil-
trar el Eter Dietilico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, evaporar en frío en cápsula de
cuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidróxido al
50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Después de
unas 24 horas de saponificación de los ésteres,
durante las que permanece la cápsula tapada con
un vidrio de reloj, incinerar progresivamente el resi-
duo a la temperatura de 550°C. Arrastrar y disolver
las cenizas como en 32, realizando también en igual
forma la valoración colorimétrica del bromo.
33.5. Cálculo.
Calcular el contenido en bromo expresado en
mg/l a partir de la correspondiente curva patrón.
34. ACIDOS MONOBROMOACETICO Y
MONOCLOROACETICO DE ORIGEN
ORGANICO
(Método cualitativo) (Provisional)
34.1. Principio.
Siendo fraudulenta la presencia de compuestos
orgánicos monohalogenados, es suficiente para
investigar el fraude un análisis cualitativo.
Extracción de compuestos monohalogenados
en medio ácido con éter y transformación por adi-
ción de amonio en glicocola y sal de amonio por
combinación del halógeno desplazado. Separación
cromatográfica y revelado con plata nitrato, obte-
niéndose una mancha blanca para la plata cloruro y
otra negra para la plata bromuro.
34.2. Material y aparatos.
34.2.1. Frascos de tapón esmerilado que ajuste
perfectamente, de 500 ml de capacidad.
66 34.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.
34.2.3. Agitador mecánico de unas 150 agita-
ciones por minuto.
34.2.4. Papel Watman número 1 para cromato-
grafía.
34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capila-
res divididas en milésimas.
34.2.6. Secador de aire.
34.2.7. Campana o recipiente para cromatogra-
fía y accesorios.
34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulveriza-
ción fina.
34.2.9. Campana de luz infrarroja.
34.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
121050 Acido Pirogálico PA
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121118 Amonio Bromuro PA
131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
121085 Etanol 96% v/v PA
131313 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
34.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
34.3.2. Solución de Acido Sulfúrico: solución en
Agua PA-ACS al 1/3 en volumen.
34.3.3. Amoníaco 25% (en NH3) PA (sin cloru-
ros).
34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-Agua
PA-ACS en la proporción 100/20 en volumen.
34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar
85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de Agua
PA-ACS, 5 ml de Amoníaco 25% (en NH3) PA y Eta-
nol 96% v/v PA hasta 200 ml.
34.3.6. Revelador de Acido Pirogálico. Disolver
13 mg de Acido Pirogálico PA en 200 ml de Etanol
96% v/v PA. La solución puede durar tres días si se
conserva fría y al abrigo de la luz.
34.3.7. Solución testigo de Cloro. Disolver 100
mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PA-
ACS y enrasar a 1.000 ml.
34.3.8. Solución testigo de Bromo. Disolver
100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS y
enrasar a 1.000 ml.
34.4. Procedimiento.
34.4.1. Extracción del compuesto halogenado.
Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 ml
con tapón esmerilado, añadir 5 ml de Acido Sulfúri-
co 1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietílico
estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
Agitar brevemente hasta formación de ligera emul-
sión, destapar unos momentos el frasco y observar
la facilidad de separación.
A veces, como especialmente sucede con vino
de prensa, la separación es difícil, siendo necesario
nueva adición de Acido Sulfúrico 1/3 y de Eter Dietí-
lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
Observar si hay facilidad de separación y llevar
el frasco a un agitador mecánico, agitando durante
tres horas. Poner en ampolla de decantación de

250 ml de capacidad con el fin de separar el vino de
la fracción etérea; eliminar el Eter Etílico por com-
pleto filtrando rápidamente por ligera capa de al-
godón.
Añadir inmediatamente 10 ml de Amoníaco 25%
(en NH3) PA, agitar fuertemente durante tres minu-
tos, con el fin de iniciar la formación del aminoácido
correspondiente (glicocola) y evitar la de otros com-
puestos. En este momento se forma la sal de amo-
nio por combinación del halógeno desplazado.
Dejar reposar 24 horas para que la reacción sea
completa y proceder a la cromatografía.
34.4.2. Análisis cromatográfico.- Depositar con
micropipeta sobre papel Whatman número 1 para
cromatografía (28 x 15 cm) a lo largo de una línea
paralela al borde inferior y situada a 2,5 cm de este
borde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, y
de 0,02 a 0,06 ml, según el contenido en halogena-
do, de las muestras de vino, separando cada apli-
cación 2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colo-
car en el fondo de la cubeta con el disolvente y en la
cámara o campana de cromatografía.
Retirar el papel de la cubeta cuando el frente
del líquido ascendente se encuentre a 1 cm del
borde superior del papel, y dejar secar. Pulverizar
con la solución de Plata Nitrato y, estando húmedo
el papel, pulverizar nuevamente con solución de
Acido Pirogálico. Para mayor uniformidad del reve-
lado, conviene desecar el papel con lámpara infra-
rroja.
La mancha correspondiente al Cl es de color
blanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha corres-
pondiente al Br es de color marrón y tiene un Rf de
0,59.
34.5. Referencia.
34.5.1. Morales, J., y Vega, R. “Comunicación
de los Métodos Internacionales de Análisis”. O. I. V.,
número 245, 1967.
35. INDICE DE PERMANGANATO
35.1. Principio.
Valoración con una solución de permanganato
del poder reductor en frío de las sustancias polife-
nólicas del vino. Como todos los componentes
fenólicos del vino, a igual concentración no reducen
la misma cantidad de permanganato, se trata de
una valoración global que da un índice, al que se
denomina “índice de permanganato”; I Mn.
Constituye una expresión del contenido en sus-
tancias fenólicas que están en relación con los
caracteres gustativos de dureza, astringencia o
aterciopelado sin que la relación sea absoluta. Es
una determinación especial para vinos tintos; en
blancos es poco apreciable y se presta a confusio-
nes por consumo de permanganato por otros com-
ponentes del vino, que aquí tiene una influencia
relativa más marcada.
M
35.2. Material y aparatos.
Los elementos necesarios para una volumetría.
35.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
251246 Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC
121085 Etanol 96% v/v PA
121515 Potasio Hidróxido lentejas 85% PA
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV
35.3.1. Solución de Potasio Permanganato
0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de Pota-
sio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En un
matraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato
0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determi-
nar el factor de la solución 0,01N obtenida.
35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una solu-
ción de 3 g/l de Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC.
Filtrar, tomar 50 ml de esa solución, añadir 50 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta
1.000 ml. Mezclar bien.
35.4. Procedimiento.
Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador de
Indigo antes indicado y añadir 2 ml del vino. Inme-
diatamente adicionar gota a gota la solución de
Potasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vez
más lentamente, hasta desaparición completa del
color azul y aparición de amarillo oro.
En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por lo
que conviene tomar sólo 1 ml de muestra.
Hacer la prueba testigo para eliminar el perman-
ganato por sustancias no polifenoles, sustituyendo
los 2 ml de vino por 2 ml de una solución de Acido
L(+)-Tartárico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitad
con solución de Potasio Hidróxido y encabezada
hasta 10° de Etanol 96% v/v PA.
35.5. Cálculo.
Calcular el índice de permanganato o el título de
materias oxidables en frío del vino por permangana-
to expresado en meq/l.
Indice de permanganato = 5 (V-V’).
Materias oxidables en frío = 5 (V-V’) meq/l.
V = volumen en ml de solución de potasio per-
manganato 0,01N para oxidar el vino.
67
V’ = volumen en ml de solución de potasio per-
manganato 0,01N gastados en la prueba testigo.
35.6. Referencia.
35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. “Analyse et
Contrôle des Vins”. página 320, 1958.
 36(a). DETERMINACION DE PRESENCIA
DE VINO PROCEDENTE DE
“HIBRIDOS PRODUCTORES
DIRECTOS”
(Método cualitativo)
36(a).1. Principio.
Transformación de la malvina, por la acción con-
trolada de un oxidante apropiado, en una sustancia
que a la luz de Wood acusa viva fluorescencia de
color verde muy sensible.
36(a).2. Material y aparatos.
36(a).2.1. Lámpara que emita luz fluorescente
de 366 nm de longitud de onda (luz de Wood).
36(a).2.2. Tubos de ensayo.
36(a).3. Reactivos.
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
Amoníaco (gas)
121085 Etanol 96% v/v PA
131703 Sodio Nitrito PA-ACS
36(a).3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.
36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver Sodio
Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la con-
centración indicada.
36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amo-
níaco (gas)
36(a).4. Procedimiento.
36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos intro-
ducir en el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gota
de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml de
Sodio
Nitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, después
añadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% de
Amoníaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrar
y observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvi-
na se apreciará la fluorescencia color verde.
36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introducir
en el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas de
Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de Sodio
Nitrito al 1%.
Agitar, esperar dos minutos y añadir después
Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas).
Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm).
36(a).5. Cálculo.
La intensidad de la fluorescencia verde es muy
sensible y puede acusar netamente la presencia de
68 una dosis de 0,2% de híbrido Oberlein en el vino,
siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de rique-
za de híbrido Oberlein.
36(a).6. Referencia.
36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E.
“Analyse et Contrôle des Vins”, pág. 320, 1958.
36(b). DETERMINACION DE PRESENCIA
DE VINO PROCEDENTE DE
“HIBRIDOS PRODUCTORES
DIRECTOS”
(Provisional)
36(b).1. Principio.
Determinación de malvina en vinos tintos secos
por cromatografía de papel. La fase móvil es la
solución Britten-Robinson, en las condiciones del
método. Observación del cromatograma a la luz de
Wood de 366 nm.
Como escala de comparación se emplea una
serie de manchas de soluciones de pinacianol, que
da fluorescencia similar a la de la malvina, aunque
con coloración verdosa en vez de la roja ladrillo de
la malvina, pero con intensidades de la fluorescen-
cia proporcionales a las dosis aplicadas, haciendo
comparativos los resultados.
36(b).2. Material y aparatos.
36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm).
36(b).2.2. Cámara o campana para cromatogra-
fía y accesorios (soporte, pinzas, etc.).
36(b).2.3. Papel Arches para cromatografía.
36(b).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
Pinacianol o Azul de Quinaldina
(Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
36(b).3.1. Solución Britten-Robinson. Mezclar
3,92 g de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO,
2,40 g de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
4,48 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO y añadir Agua
PA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solución es
1,81.
36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yodu-
ro de 1,1’-Dietilcarbocianina).
36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. Destilar
Etanol 96%v/v PA rectificado en presenia de Sodio
Hidróxido lentejas PA (5 g/l).
36(b).4. Procedimiento.
Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul de
vino cada una, sobre papel a 2 cm del borde infe-
rior, de tal forma que aparezcan manchas rectangu-
lares de 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes.
Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secando
cada vez con corriente de aire a temperatura no
superior a 30°.
Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con la
solución Britten-Robinson. Sumergir el papel sólo
1 cm y retirarlo cuando el líquido llegue a 1 cm del

borde superior. Ayudar a la desecación con corrien-
te de aire no superior a 30° y terminar la desecación
al ambiente.
Para obtener una escala patrón preparar una
soIución en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianol
o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcar-
bocianina) de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alí-
cuotas de 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 ml
y completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. A
estas mezclas les corresponde un contenido con-
vencional de híbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y
50%, respectivamente.
Aplicar cada una de estas mezclas como ante-
riormente. Secar las manchas, recortar y pegar
mediante una cola celulósica (aplicar en pequeñas
dosis para que no desborde) a lo largo del borde de
una tira de cartulina negra.
Renovar la escala cada 30 o 45 días, pues pier-
de intensidad, por lo que hay que conservarla al
abrigo de la luz.
Observar las manchas del cromatograma a la luz
de Wood (366 nm) en cámara oscura y hacer rápi-
damente la comparación con la escala.
Para comprobar la eficacia de la lámpara se
hace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad con
Etanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatogra-
fía. Aplicar solución alcohólica de Pinacianol de
1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y la
misma cantidad diluida a la mitad de una mancha
no visible en las mismas condiciones de observa-
ción. Regular la distancia de la lámpara a la hoja
para conseguir este efecto.
36(b).5. Cálculo.
Si al observar el cromatograma del vino a la luz
de Wood en las condiciones expuestas se aprecian
manchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de un
Rf = 0,55 ± 0,09 será clara manifestación de pre-
sencia de malvina.
Para el análisis cuantitativo, comparar con la
escala patrón.
La intensidad del color de cada mancha de la
escala testigo de solución de pinacianol será valora-
da por el número de mg de pinacianol por litro de
solución alcohólica con que se ha hecho la mancha
sobre el papel.
Con esta definición convencional de la intensi-
dad del color de las manchas puede establecerse
también, por comparación de estas manchas con
las correspondientes a las de cromatogramas de
vinos con mezcla conocida de “híbrido”, un coefi-
ciente proporcional a la riqueza de éste presente en
los mismos.
La sensibilidad de las manchas pueden acusar
el 1% de híbrido Oberlein (elegido como patrón).
La dosis correspondiente al valor 2 de la escala
convencional, o sea el 2% de híbrido Oberlein, es la
máxima tolerada provisionalmente por la Conven-
ción Internacional.
M
36(b).6. Referencias.
36(b).6.1. Dorier y Verelle. “Comunication a la
Société des Experts-Chemistes de France”. 6 enero
1965.
36(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969.
37. METANOL
(Alcohol Metílíco)
(Método del ácido cromotrópico)
37.1. Principio.
Oxidación del alcohol metílico a formaldehído
por potasio permanganato en presencia de ácido
fosfórico y medida espectrofotométrica de la reac-
ción coloreada del formaldehído con ácido cromo-
trópico. Coloración violeta específica del formal-
dehído.
37.2. Material y aparatos.
37.2.1. Matraces aforados de 50 ml.
37.2.2. Baño de agua con regulación a 60-75°.
37.2.3. Espectrofotómetro que permita lectura a
575 nm.
37.2.4. Matraz esférico de cuello largo, de
500 ml y refrigerante con alargadera.
37.3. Reactivos.
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131091 Metanol PA-ACS-ISO
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
131698 Sodio Disulfito PA-ACS
141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
37.3.1. Solución de Potasio Permanganato.
Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
y 15 ml de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
en 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensual-
mente.
37.3.2. Solución de Acido Cromotrópico Sal
Disódica 2-hidrato. Solución al 5%. Filtrar si no que-
da clara. Preparar semanalmente.
37.3.3. Solución al 2% p/v de Sodio Sulfito anhi-
dro PRS.
37.4. Procedimiento.
Diluir o ajustar la muestra hasta una concen- 69
tración total de alcohol de 5-6% en volumen.
Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destila-
dor simple, recogiendo 40 ml de destilado en
baño de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PA-
ACS (si se ha determinado previamente el alcohol,
el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-
 ción de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si hay
más de 0,05% de metanol por volumen, diluir hasta
aproximadamente esa concentración con Etanol
96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con Agua
PA-ACS. Para muestras que contengan menos de
0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador efi-
ciente de fraccionamiento, colocar el sistema de
destilación reflujo total durante 15 minutos y luego
destilar lentamente a elevada proporción de reflujo
(por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado y
diluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS.
Pipetear 2 ml de solución de Potasio Perman-
ganato en un matraz aforado de 50 ml. Enfriar en
baño de hielo, añadir 1 ml de muestra diluida y fría y
dejar 30 minutos en baño de hielo. Decolorar con un
poco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y añadir
1 ml de solución de Acido Cromotrópico. Añadir len-
tamente con agitado y en baño de hielo 15 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutos
en baño de agua caliente (60-75°). Enfriar, añadir
una cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevar
aproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar y
diluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la tempera-
tura ambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utili-
zando como reactivo en blanco Etanol al 5,5% trata-
do análogamente a la forma descrita. Tratar solución
patrón de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga
0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, en
Etanol al 5,5% simultáneamente en la misma forma,
y leer la absorbancia (la temperatura del patrón y de
la muestra no debe diferir en más de 1°, ya que la
temperatura afecta a la intensidad del color).
37.5. Cálculo.
Calcular el contenido en metanol expresado en
porcentaje.
A 38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pul-
Metanol = 0,025 —— F
A’
A = absorbancia de la muestra.
A’ = absorbancia de la solución patrón de metanol.
F = factor de dilución de la muestra.
37.6. Observaciones.
Si el color de la muestra es demasiado intenso,
diluir con reactivo en blanco. No diluir más de tres
veces porque la relación de ácido cromotrópico a
metanol se reduce demasiado.
37.7. Referencia.
70 37.7.1. “Association of Official Agricultural Che-
mists”. Official Methods of Analysis, pág.138, 1965.
(*). En el original indica NaHSO3 seco. El Sodio
Bisulfito como tal fórmula sólo existe en solución
acuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito,
seco, de fórmula Na2S2O5.
38. NITROGENO
(Método Kjeldhal)
38.1. Principio.
Transformación del nitrógeno orgánico en amo-
nio sulfato por ataque con ácido sulfúrico en ebulli-
ción en presencia de sustancias catalizadoras que
acortan el tiempo de la mineralización y adición de
sal potásica que eleve el punto de ebullición. Desti-
lación por ebullición de vapor recogiendo el destila-
do en volumen conocido de solución de ácido sul-
fúrico.
Valoración con solución de sodio tiosulfato, del
yodo liberado por el ácido sulfúrico al añadir al
destilado solución de potasio yoduro-potasio
yodato.
38.2. Material y aparatos.
38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal.
38.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
182102 Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
Papel Tornasol
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
131540 Potasio Yodato PA-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
141625 Selenio metal, polvo PRS
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
38.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
verizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO,
20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio
metal, polvo PRS.
38.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel
Tornasol.
38.3.4. Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.
38.3.5. Potasio Yoduro solución al 4%. Disolver
Potasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a la
concentración indicada.
38.3.6. Potasio Yodato solución al 5%. Disolver
Potasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a
la concentración indicada.
38.3.7. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N. En
un matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1
mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el
factor de la solución 0,02N obtenida.
38.3.8. Solución concentrada de Almidón solu-
ble RE.
38.4. Procedimiento.
Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, eva-
porar a ebullición lenta hasta unos 10 ml, añadir
10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 0,6 g de

la mezcla pulverizada y bien uniformada de Cobre
II Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS y
Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentan-
do primero lentamente y después enérgicamente,
hasta decoloración, y proseguir unos minutos
más. Si es necesario se van añadiendo nuevas
dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO de 5 en
5 ml.
Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de
100 ml arrastrando el residuo con pequeñas porcio-
nes de Agua PA-ACS para enjuagar varias veces el
matraz, comprobando que los últimos lavados no
dan trazas de reacción ácida al papel de tornasol.
Tomar una alícuota de 20 ml y llevar al matraz
del aparato de destilación, adicionando unas gotas
de Fenolftaleína solución 1% RE. En un vaso cilín-
drico de unos 200 ml, se añaden 10 ml de Acido
Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.
Añadir al matraz solución de Sodio Hidróxido 1
mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para viraje
de la Fenolftaleína solución 1% RE y se encaja rápi-
damente en su sitio. Conectar el aparato de destila-
ción con el generador de vapor de agua y comen-
zará el arrastre del amoníaco pasando al
refrigerante y recogiendo el destilado en la Solución
Sulfúrica.
Después de 15-20 minutos, comprobar con
papel tornasol si una gota del destilado no acusa
reacción alcalina. En este caso separar el vaso y
proceder a la valoración.
Añadir al vaso con el Acido Sulfúrico 0,01 mol/l
(0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml de
Potasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla y
después de 20 minutos valorar el yodo liberado
con solución de Sodio Tiosulfato 0,02N emplean-
do como indicador 5-10 ml de solución de Almi-
dón.
38.5. Cálculo.
Calcular el nitrógeno expresado en meq/l o en
mg/l.
10 - V
Nitrógeno = ——— x 100 meq/l
50
10 - V
Nitrógeno = ——— x 100 x 14 mg/l
50
V = volumen en ml de solución de sodio tiosulfa-
to 0,02N.
M
39(a). FLUOR
(Provisional)
39(a).1. Principio.
Incineración de 525° del vino en presencia de un
exceso de calcio o magnesio, destilación en
corriente de vapor del ácido fluorhídrico a 135-
140°, valoración del ácido destilado a pH 3,6 por
solución de torio nitrato en presencia de alizarina
sodio suifonato.
39(a).2. Material y aparatos.
39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta de
generador de vapor, barbotador de pared doble,
ampolla para la introducción de la solución sulfúrica
de las cenizas magnéticas, refrigerante de retorno y
refrigerante de West para la salida del destilado
(figura 39.I.).
39(a).2.2. Cápsula de platino o níquel para las
cenizas.
39(a).2.3. Horno eléctrico regulable para 525°.
39(a).2.4. Matraz de 250 ml.
39(a).2.5. Dos cápsulas de porcelana iguales, de
unos 10 cm de diámetro.
39(a).2.6. Material para volumetría.
39(a).3. Reactivos.
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE
211376 Lana de Vidrio lavada QP
131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS
211276 Magnesio Oxido QP
141801 Plata Sulfato PRS
171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
Tetracloroetano
Torio Nitrato 4-hidrato
39(a).3.1. Solución Tampón de pH = 3,1. Mez-
clar 100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE,
303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhídri-
co 1 mol/l (1N) SV.
39(a).3.2. Solución de Torio Nitrato 0,01N. Disol-
ver 1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litro
de Agua PA-ACS.
39(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
39(a).3.4. Acido Sulfúrico al 1/10. Diluir conve-
nientemente Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua
71
PA-ACS.
39(a).3.5. Azul de Bromotimol solución 0,04%
RE.
39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensión
de Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.
 39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. Disolver
Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PA-
ACS.
39(a).3.8. Solución Spadns. Añadir a 0,02 g de
Spadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadns
resulta de la combinación del Acido Sulfanílico PA-
ACS con el Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE. Su proceso de preparación es labo-
rioso. Se encuentra preparado por Eastman-Kodak.
39(a).3.9. Plata Sulfato PRS.
39(a).4. Procedimiento.
39(a).4.1. Incineración.- Poner 20 ml de vino en
cápsula de platino o de níquel, añadir 2 ml de sus-
pensión de Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de Mag-
nesio Acetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinar
en el horno a 550°C.
39(a).4.2. Destilación.- Colocar en el barbotador
del aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfúrico 96%
PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g de
Lana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata Sulfato
PRS, con el fin de retener el Acido Clorhídrico. Lle-
var el barbotador a 146°C por ebullición del Tetra-
cloroetano (punto de ebullición 146°) en la doble
pared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a la
velocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar pre-
viamente el Tetracloroetano en la doble pared del
aparato antes de que barbote el vapor en el líquido,
por haberse observado que así se evitan la forma-
ción de burbujas de espuma, que son un peligro
por posible desborde y paso al refrigerante de sali-
da.
Se continúa la destilación hasta recoger unos
100 ml de destilado.
Con estas operaciones queda el aparato des-
provisto de posible presencia de flúor.
Disolver las cenizas en el menor volumen posible
de Acido Sulfúrico al 1/10 e introducir en el barbota-

REFRIGERANTE DE BOLAS
DE REFUERZO 30 CM.
BOCAS 14 / 23
REFRIGERANTE LIEBIG-WEST
40 cm, BOCAS 14/23

Figura 39.I. Aparato de Truhaut

72 El barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146°. El tubo de entrada de
vapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongándose verticalmente hasta casi el fondo.
El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B).
La ampolla (F), con llave y tapón esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta la
misma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refri-
gerante de West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que con-
tiene el matraz receptor.

dor, enfriando previamente el líquido del barbotador
antes de verter en él la solución sulfúrica de ceni-
zas. Proseguir la destilación con el barboteo de
vapor, comenzando por calentar previamente,
como se ha indicado, el Tetracloroetano contenido
en la doble pared. Recoger unos 100 ml de destila-
do en un matraz de 250 ml que contenga 5 ml de
Agua PA-ACS, de forma que quede sumergido el
pico de la alargadera del refrigerante.
39(a).4.3. Valoración.- Descarbonatar el destila-
do por agitación en frío y con vacío neutralizar con
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia de
Azul de Bromotimol solución 0,04% RE como indi-
cador. Llevar después a una cápsula de porcelana
blanca bien limpia, siendo recomendable frotar pre-
viamente su interior con pasta silícea y enjuagarla
con Agua PA-ACS.
Añadir a 50 ml del destilado 1 ml de solución
acuosa de Spadns y 1 ml de Solución Tampón de
pH = 3,1. Añadir con microbureta solución de Torio
Nitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta.
Para apreciar el punto del viraje se compara la
tonalidad del color con la de una valoración testigo
hecha en otra cápsula igual y con el mismo volumen
de Solución Tampón, 1 ml de Spadns y 0,05 ml de
solución de Torio Nitrato. Se ha observado que con
0,1 ml de Torio Nitrato es más clara la comparación
de colores.
Restar del volumen de Torio Nitrato gastado en
el líquido problema los 0,05 y 0,1 ml añadidos al
testigo.
39(a).5. Cálculo.
Equivalencia: 1 ml de solución de torio nitrato
0,01N < > 0,19 mg de flúor.
Expresar los resultados en mg de flúor por litro y
con una aproximación de unos 0,5 mg.
39(a).6. Referencia.
39(a).6.1. Fabré, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., y
Bernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca.
Sciences.1965, 240, pág. 211; 1959, 248, pág.
504.
39(b). FLUOR
39(b).1. Principio.
Determinación directa del flúor total por poten-
ciometría utilizando un electrodo iónico específico.
Para eliminar las posibles causas de error se le
adiciona al vino una solución tampón.
39(b).2. Material y aparatos.
39(b).2.1. pH-metro con escala que permita
apreciar 0,1 mV.
39(b).2.2. Electrodo selectivo de flúor.
39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomela-
nos.
M
39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
39(b).2.5. Recipientes de plástico de 50-100 ml
de capacidad para mezclas y matraces en material
de plástico para conservar las soluciones patrón.
39(b).2.6. Pipetas de precisión graduadas en
microlitros.
39(b).2.7. Agitador magnético.
39(b).3. Reactivos.
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO
39(b).3.1. Solución patrón de fluoruros 10–2M
–
conteniendo 190 mg de F por litro. Pesar 0,4198 g
de Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durante
cuatro horas a 106°C antes de su utilización), disol-
ver y enrasar a un volumen de 1.000 ml.
39(b).3.2. Solución Tampón de Acido orto-Fos-
fórico 0,75 M. Diluir convenientemente Acido orto-
Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
39(b).4. Procedimiento.
39(b).4.1. Verificación del electrodo y determina-
ción de su pendiente.
A partir de la solución 3.1 preparar, mediante
diluciones, soluciones de concentraciones conoci-
dasde 10–3M, 10–4M y 10–5M, que contienen, res-
pectivamente, 19; 1,9 y 0,19 mg de F – por litro.
Tomar dos vasos de precipitados; en uno de
–
ellos colocar 25 ml de la disolución 10–3M de F ,
adicionar 5 ml de solución Tampón de Acido orto-
Fosfórico y determinar su potencial agitando de
forma moderada mientras dure la medida. En el otro
–
vaso, poner 25 ml de disolución 10–4M de F , 5 ml
de solución Tampón de Acido orto-Fosfórico y
determinar su potencial, agitando como anterior-
mente. La diferencia entre los dos potenciales es la
pendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser,
aproximadamente, 59 mV.
39(b).4.2. Determinación.
Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la solu-
ción Tampón y determinar su potencial (E1). A conti-
nuación, y en el mismo vaso, adicionar un ml de
–
disolución 10–3M de F y determinar su potencial (E2)
Si el salto de potencial es pequeño, indica que la
–
concentración de F es muy alta y hay que diluir la
muestra hasta que el salto alcanzado esté com-
prendido alrededor de 20-40 mV.
Los volúmenes de muestra y solución Tampón
pueden ser modificados en función de la forma y
disposición de los electrodos utilizados.
73
39(b).5. Cálculo.
La cantidad de flúor, expresada en mg/l, nos
viene determinada por la fórmula:
 V.C
CF- = ———————————
mE
25 [(antilog —— ) - 1]
S
Siendo:
–
CF- = concentración, en mg/l, de F en el medio.
V = volumen, en ml, de solución patrón de fluo-
ruro añadida.
C = concentración, en mg/l, de la solución
patrón adicionada.
S = pendiente del electrodo.
m E = diferencia de los potenciales E1 y E2 obte-
nidos en 39(b).4.2.
Este valor se deberá multiplicar por el factor de
dilución correspondiente, en caso de haber sido ne-
cesario efectuarla.
39(b).6. Observaciones.
39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservar
una temperatura próxima a 25°C ±1°C durante la
medida .
39(b).7. Referencias.
39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I.
V. 317/FV/518 y 133/FV/439.
39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux,
1974. Determination des fluor dans les vins et eaux
minerales naturelles au moyen d’une electrode ioni-
que specifique.
40. HIDROXIMETILFURFURAL
(Provisional)
40.1. Principio.
El hidroximetilfurfural se produce al calentar en
exceso los mostos para su concentración, desulfita-
ción o pasterización. La presencia de hidroximetil-
furfural en ciertos vinos dulces se considera como
indicio de la adición de mostos.
Este método está basado en la reacción de
Winckler (formación de un complejo rojo para la
acción del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina y
ácido barbitúrico). Se utiliza para los vinos blancos y
tintos, previa extracción con éter etílico en los
segundos.
40.2. Material y aparatos.
40.2.1. Espectrofotómetro y accesorios (cubeta
para 1 cm de espesor del líquido).
40.2.2. Matraces aforados.
40.2.3. Embudo de decantación con tapón
74 esmerilado y de 100 ml de capacidad.
40.2.4. Cápsula de porcelana de unos 10 cm de
diámetro.
40.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
Acido Barbitúrico
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
162378 P-Toluidina PS
40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g de
p-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACS-
ISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, añadir
10 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y com-
pletar hasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO.
Este reactivo dura 4 días.
40.3.2. Reactivo de Acido Barbitúrico. Se intro-
duce en matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de Acido
Barbitúrico desecado a 105°C y unos 70 ml de
Agua PA-ACS. Se calienta ligeramente en baño de
agua, se enfría y enrasa con Agua PA-ACS.
40.4. Procedimiento.
Llevar 10 ml del vino a embudo de decantación
y añadir 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minu-
tos, decantar el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a cápsula de porcelana
que contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatro
veces la extracción del residuo del embudo con
otros 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantar
igualmente a la cápsula. Dejar evaporar el éter en
medio ambiente. Al residuo de evaporación añadir
Agua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml para
análisis.
Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivo
de p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitúrico lle-
vándolos inmediatamente a la cubeta del espectro-
fotómetro (de un cm de espesor del líquido) y hacer
rápidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm.
Emplear como líquido de referencia el Agua
PA-ACS en lugar de Acido Barbitúrico, o sea, 3 ml
de Agua PA-ACS más 5 ml de Reactivo de p-Tolui-
dina.
40.5. Cálculo.
Determinar el contenido en hidroximetilfurfural
expresado en mg/l por comparación con la corres-
pondiente curva patrón teniendo en cuenta el factor
de dilución.
40.6. Observaciones.
En el caso de vinos turbios centrifugar previa-
mente. Si hay presencia de CO2 eliminarlo agitando
el vino en un matraz.
40.7. Referencias.
40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. “Puesta a
punto de un método para análisis cuantitativo
espectrofotométrico de hidroximetilfurfural en los
vinos”. Boletín I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967.
40.7.2. Amerine, M. A. “Hydroximethyl-furfural in
California Wines”. Food Research. 13: 264-269, 1948.

41. DETERMINACION CUALITATIVA DE
ACIDO SORBICO, BENZOICO,
p-CLOROBENZOICO, SALICILICO,
p-HIDROXIBENZOICO Y SU
ESTER ETILICO
41.1. Principio.
Extracción con éter etílico de los antisépticos del vino
previamente acidificados. Separación por cromato-
grafía de capa fina. Identificación a la luz ultravioleta y
reveladores específicos.
41.2. Material y aparatos.
41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I)
que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8
cm de diámetro. La parte superior va unida a un refri-
gerante de bolas mediante boca esmerilada 34-25. A
30 cm de la base y formando un ángulo de 60º se
encuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, for-
mando un ángulo de 120°. Este tubo lateral termina
en una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permi-
te su unión a un matraz de 50 ml que se calienta
sobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas de
vidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y
1,2 cm de diámetro, terminando en una placa de
vidrio poroso.
41.2.2. Agitador mecánico (ver 41.6.1).
41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada.
41.2.4. Baño María.
41.2.5. Estufa eléctrica (200º C).
41.2.6. Embudos de separación de 500 ml.
41.2.7. Cápsulas de porcelana de 70-80 cm de
diámetro.
41.2.8. Equipo de cromatografía de capa fina.
41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm.
41.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
121014 Acido Benzoico PA
182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV
Acido p-Clorobenzoico
163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS
141045 Acido Salicílico (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Acido Tiobarbitúrico
131074 Agua PA-ACS
121086 Etanol absoluto PA
121085 Etanol 96% v/v PA
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
BHT PA-ACS-ISO
132063 n-Hexano PA-ACS
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
164542 4-Nitroanilina PS
122006 n-Pentano PA
Polvo de Poliamida para Cromatografía
M
131500 Potasio Dicromato PA-ISO
Revelador F 254
131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
131703 Sodio Nitrito PA-ACS
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
131091 Metanol PA-ACS-ISO
41.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO.
41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.
41.3.3. Etanol 96% v/v PA
41.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO diluido a
20% (v/v) con Agua PA-ACS.
41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO.
41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografía
Macherey-Nagel o Merck.
41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente.
41.3.8. Solventes:
n-Pentano PA: 10 partes.
n-Hexano PA-ACS: 10 partes.
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO: 3 partes.
41.3.9. Soluciones patrones. Preparar solucio-
nes de 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA con
los Acidos Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Cloro-
benzoico, Salicílico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
4-Hidroxibenzoico PS y sus ésteres. Preparar una
solución de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA
con el Acido Benzoico PA.
41.3.10. Preparación de las placas. 10 g de
Poliamida con el 3% de indicador fluorescente se
homogenizan durante 20 segundos en agitador
mecánico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y
25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-
ACS-ISO. Las placas impregnadas se secan duran-
te 1 hora a 80°C.
41.3.11. Solución hidroalcohólica conteniendo
0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO
(41.6.2).
41.3.12. Solución saturada de Acido Tiobarbitú-
rico en Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente)
(41.6.2).
41.3.13. Solución de 0,5 g de 4-Nitroanilina en
100 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3).
41.3.14. Solución de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3).
Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS.
41.3.15. Solución de Sodio Acetato al 20%
(41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS en
Agua PA-ACS.
41.3.16. Solución de Sodio Carbonato al 15%
(41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PA-
ISO en Agua PA-ACS. 75
41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g de
Acido Sulfanílico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhí-
drico 2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solución a
500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solución dilui-
da se enfrían con hielo), se le añaden 10 ml de solu-
ción acuosa de Sodio Nitrito al 4,5% también fría. El
 reactivo resultante se mantiene durante 15 minutos
a 0°C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 días)
y se le añade un volumen igual de solución acuosa
de Sodio Carbonato al 10% en el momento de pul-
verizar las placas (41.6.4).
41.4. Procedimiento.
Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml de
Acido Sulfúrico al 20%.
76
Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin
Extraer tres veces con 20 ml de Eter Dietílico
estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO
cada vez, reuniendo las soluciones etéreas; o bien,
durante 6 horas en el extractor continuo de Palkin
con 175 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflu-
jo de 500-600 ml/hora.
Los extractos etéreos se desecan con 6 g de
Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12
horas. Filtrar y el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedad
en baño María 40-45°. El residuo se disuelve en un
ml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a
10 el para cromatografía. Mediante el tratamiento
de los extractos etéreos con 5 ml de Sodio Hidróxi-
do 2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
con Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 ml
de Acido Sulfúrico al 20% se obtendrá en los cro-
matogramas las manchas correspondientes a los
ácidos liberados por efecto de la saponificación.
Para obtener el desarrollo de los cromatogra-
mas, depositar la muestra en forma de manchas
puntuales de 5-10 el.
El desarrollo se lleva a cabo en cámara saturada
con el eluyente y a temperatura ambiente. Dejar
migrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm
(una hora y media a dos horas y media).
Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a la
temperatura ordinaria.
41.5. Cálculo.
Observación a la luz ultravioleta (360 nm).
Los conservadores aparecen de abajo arriba en
el siguiente orden: ácido 4-hidroxibenzoico, éste-
res del ácido 4-hidroxibenzoico, ácido salicílico,
ácido p-clorobenzoico, ácido benzoico y ácido
sórbico.
Para detectar el ácido sórbico pulverizar prime-
ramente el cromatograma con la solución 41.3.11 y
seguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a
80°C, 5-10 minutos. La mancha de ácido sórbico
aparece de color rojo sobre fondo ocre.
Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxi-
benzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi-
co, pulverizar la placa con una mezcla compues-
ta de 2 ml de 41.3.13 más 3-5 gotas de 41.3.14
más 8 ml de 41.3.15, añadiéndolos en este
orden. Una vez seca la placa aparecen las man-
chas correspondientes a los tres componentes
citados de color amarillo. La materia colorante
propia de los vinos toma colores que van del
amarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con la
solución 41.3.16. La manchas del ácido 4-hidro-
xibenzoico toman color rojo; las del éster etílico
del ácido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las del
acido salicílico, amarillo limón. Los distintos com-
ponentes de la materia colorante toman colores
que van desde distintos tonos de ocre al pardo y
también verde y azulado.

Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico y
salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi-
co se utiliza empleando el reactivo 41.3.17.
41.6. Observaciones.
41.6.1. Para el análisis cualitativo.
41.6.2. Para detectar el ácido sórbico.
41.6.3. Para detectar los ácidos salicílico y 4-hi-
droxibenzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxiben-
zoico.
41.6.4. Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoi-
co y salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxi-
benzoico.
42. INVESTIGACION DE DERIVADOS
MONOHALOGENADOS DEL
ACIDO ACETICO
42.1. Principio.
Extracción de los derivados monohalogenados
del ácido acético con éter etílico previamente acidi-
ficado. Formación de tioindigo, de color rojo, que se
extrae con cloroformo.
El método permite detectar de 1,5 a 2 mg/l de
ácido monocloroacético y las cantidades corres-
pondientes de otros derivados monohalogenados.
42.2. Material, aparatos y reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Acido Tiosalicílico
131074 Agua PA-ACS
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS
181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV
182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
42.2.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO.
42.2.2. Acido Sulfúrico (1 + 4) (v/v) . Diluir Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
desecado en estufa a 105°C.
42.2.4. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.
42.2.5. Acido Tiosalicílico (2 Mercaptobenzoico)
al 3% (p/v) en Sodio Hidróxido 1,5N (diluir Sodio
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajus-
tar a la concentración indicada).
42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (preparar
inmediatamente antes de usar). Disolver Potasio
Hexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS.
42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO.
42.2.8. Baño de agua.
42.2.9. Estufa eléctrica.
42.2.10. Embudos de separación.
M
42.2.11. Cápsulas de porcelana 70-80 mm Ø.
42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapón
esmerilado.
42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave infe-
rior.
42.3. Procedimiento.
Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y boca
esmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfúrico
(1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietílico estabiliza-
do con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuando
en un agitador durante una hora.
Separar en embudo de decantación y descartar
la capa inferior. Añadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhi-
dro PA-ACS-ISO al extracto éter, agitando vigorosa-
mente. Verter el éter en otro embudo de 500 ml,
agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml de
Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando un
minuto cada vez y reuniendo las tres capas inferio-
res alcalinas obtenidas en un tubo con tapón esme-
rilado, en el cual se habrá vertido previamente 1 ml
de la solución de Acido Tiosalicílico. Agitar enérgi-
camente durante treinta segundos y transferir el
contenido del tubo a una cápsula de porcelana,
evaporando durante una hora en baño de agua
(90-100°C), tiempo que habrá de respetarse aun
cuando el agua se evapore mucho antes.
Si se formara una costra sobre la superficie, es
conveniente romperla con una varilla fina de vidrio, lo
que facilitará la evaporación. Pasado este tiempo,
llevar la cápsula con el residuo seco a la estufa man-
tenida a 200°C durante treinta minutos exactamen-
te, pasados los cuales se retira y se deja enfriar a la
temperatura ambiente. Añadir 2 ml de Agua PA-ACS
que disolverá la mayor parte del extracto y recoger
en un tubo con llave en su parte inferior; agregar
otros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cápsula y,
por último, 3 ml de solución de Potasio Ferricianuro,
recogiendo todo ello con los primeros, agitando bien
el tubo durante treinta segundos para facilitar la oxi-
dación. Conviene asegurarse de que todo el residuo
se disolvió bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antes
de añadir la solución de Potasio Ferricianuro. En pre-
sencia de un derivado monohalogenado se desarro-
llará una coloración rojo-anaranjado (apenas percep-
tible para contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar
3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-
ACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces y
decantar. Si el extracto clorofórmico inferior se colo-
rea de rojo-fucsia o rosado, indica la presencia de
derivados monohalogenados del ácido acético.
42.4. Referencias. 77
42.4.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. A 35h.
42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determi-
nación de derivados monohalogenados del ácido
acético. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA,
vol. II, núm. 1, páginas 145-151).
 43. GRADO ALCOHOLICO EN
POTENCIA
43.1. Principio.
Es el volumen en litros de alcohol susceptible de
obtenerse por fermentación total de los azúcares
contenidos en 100 litros de vino.
43.2. Material y aparatos.
Como en 7(a).2 o 7(b).2.
43.3. Reactivos.
Como en 7(a).3 o 7(b).3.
43.4. Procedimiento.
Como en 7(a) o 7(b).
43.5. Cálculo.
N-1
Grado alcohólico en potencia = ————
17
donde:
N = g/l de azúcares reductores de la muestra.
44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL
44.1. Principio.
Se considera el grado alcohólico total como la
suma del grado alcohólico adquirido determinado
según 5(a) o 5(b), y del grado alcohólico potencial,
determinado según 43.
44.2. Cálculo.
Grado alcohólico total = Grado alcohólico adquirido +
+ Grado alcohólico potencial.
45. COLORANTES SINTETICOS
45.1. Principio.
Concentración mediante ebullición, extracción
con éter etílico y fijación de colorantes sintéticos
básicos y ácidos sobre lana y posterior confirmación
por cromatografía en papel.
45.2. Material y aparatos.
45.2.1. Hebras de lana blanca previamente
desengrasadas con Eter Dietílico estabilizado con
p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas.
78 Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escori-
forme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de Potasio
Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS.
Introducir en esta solución 10 g de hebras de lana
blanca, previamente desengrasadas con Eter Dietí-
lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO
y secas, agitar durante una hora y dejar reposar de
dos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar a
temperatura ambiente.
45.2.3. Papel para cromatografía Whatman
número 1 o similar.
45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad.
45.2.5. Ampolla de decantación de 200 ml de
capacidad.
45.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131082 1-Butanol PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme
(BP, F. Eur.) PRS-CODEX
141128 Amoníaco 20% (en NH3) PRS
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
45.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO.
45.3.2. Sodio Hidróxido al 5%. Disolver Sodio
Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
45.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
45.3.4. Acido Acético diluido, 1/18 (v/v). Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
45.3.5. Acido Clorhídrico diluido 1/10 (v/v). Diluir
Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.
45.3.6. Amoníaco 20% (en NH3) PRS.
45.3.7. Solvente número 1 para cromatografía
de colorantes de carácter básico:
1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO . . . 10 ml
Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
45.3.8. Solvente número 2 para la cromatografía
de colorantes de carácter ácido:
1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
Amoníaco 20% (en NH3) . . . . . . . . . . 10 ml
Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
45.4. Procedimiento.
45.4.1. Determinación de colorantes de carácter
básico.
Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml
y llevar a ebullición hasta que el vino se reduzca a un
tercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con la
solución de Sodio Hidróxido al 5% hasta claro vira-
je del color natural del vino. Extraer dos veces, con
30 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fases
etéreas; en ellas se encuentran eventualmente los
colorantes básicos; el residuo de la extracción debe
ser conservado con objeto de investigar los colo-

rantes ácidos. Lavar dos veces el Eter Dietílico esta-
bilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO emplea-
do en la extracción con 5 ml de Agua PA-ACS, con
el objeto de eliminar el Sodio Hidróxido; a continua-
ción, añadir 5 ml de Acido Acético diluido a la fase
etérea; la presencia de un colorante básico colorea
la fase ácido-acuosa; la presencia de este coloran-
te puede confirmarse por su fijación sobre lana mor-
dentada.
La fase ácido-acuosa obtenida se alcaliniza con
Amoníaco 20% (en NH3) PRS previamente diluido al
5% con Agua PA-ACS; añadir 0,5 g de lana mor-
dentada y llevar a ebullición durante un minuto;
aclarar la lana bajo el chorro de agua fría; de per-
manecer coloreada, el vino contiene un colorante
básico.
45.4.1.1. Caracterización por cromatografía de
papel. A partir de la fase acético-acuosa que con-
tiene el colorante básico, concentrar hasta 0,5 ml.
Si el colorante ha sido fijado sobre lana, añadir a
ésta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de Acido
Acético glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullición, y
una vez retirada la lana previamente escurrida, con-
centrar la solución hasta 0,5 ml.
Depositar sobre papel de cromatografía 20
microlitros de la anterior solución concentrada a
3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior.
Introducir dicho papel en una cubeta que conten-
ga el solvente 45.3.7. de forma que su borde infe-
rior esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y
dejar secar al aire cuando se haya alcanzado una
altura del frente del solvente comprendido entre 20
o 25 cm. Identificar el colorante por medio de
soluciones de colorantes sintéticos básicos
depositados simultáneamente sobre el cromato-
grama.
45.4.2. Determinación de colorantes de carácter
ácido.
Partir del residuo de vino concentrado a un ter-
cio y neutralizado después de su extracción con
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO; si no se realizó la determinación de
colorante de carácter básico, poner 200 ml de vino
en un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebullición
hasta que el vino se reduzca a un tercio de su volu-
men. En uno u otro caso, añadir 3 ml de Acido Clor-
hídrico diluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervir
durante cinco minutos, decantar el líquido y lavar la
lana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenme-
yer que contiene la lana, añadir 100 ml de Agua PA-
ACS y 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5);
hervir durante cinco minutos, decantar el líquido
ácido y repetir esta operación hasta que el líquido
de lavado sea incoloro. Después de haber lavado
bien la lana, para eliminar completamente el líquido
ácido añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas de
Amoníaco 20% (en NH3) PRS; llevar a ebullición
suave durante diez minutos a fin de disolver la mate-
ria colorante artificial que eventualmente se haya
M
fijado sobre la lana. A continuación, retirar la lana del
Erlenmeyer, llevar el volumen de líquido a 100 ml y
hervir hasta evaporación completa del Amonio
Hidróxido; una vez conseguida dicha evaporación,
añadir 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5)
(comprobar que el líquido haya adquirido reacción
francamente ácida, llevando una gota de éste sobre
el papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mg
de lana blanca y llevar a ebullición durante cinco
minutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro de
agua fría. Si después de esta operación la lana toma
coloración roja, cuando se trata de vino tinto, o
amarilla, si se trata de vino blanco, confirma la pre-
sencia de materia colorante orgánica artificial de
naturaleza ácida. Si la coloración adquirida es débil
o dudosa, repetir el tratamiento con Amoníaco 20%
(en NH3) PRS y hacer una segunda fijación sobre
una hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida esta
segunda fijación se obtiene una coloración rosa,
aunque sea débil, se deduce la presencia de colo-
rante ácido. Recurrir para un análisis más completo
a nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operan-
do siempre de forma idéntica a la empleada para la
segunda fijación hasta que se obtenga una colora-
ción rosácea que, aunque sea pálida, no ofrece
lugar a dudas.
45.4.2.1. Caracterización por cromatografía de
papel.
Añadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml de
Agua PA-ACS, 10 gotas de Amoníaco 20% (en NH3)
PRS y llevar a ebullición; retirar la lana previamente
escurrida y concentrar la solución amoniacal hasta
0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografía 20
microlitros de la anterior solución concentrada, a
3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior;
introducir dicho papel en una cubeta que contenga
el solvente 45.3.8 de forma que su borde inferior
esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejar
secar al aire cuando se haya alcanzado una altura
del frente del solvente comprendida entre 20 o
25 cm. Identificar el colorante por medio de solu-
ciones de colorantes sintéticos ácidos depositados
simultáneamente sobre el cromatograma.
45.5. Referencia.
45.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. A43k, páginas 1-6.
46. MERCURIO
46.1. Principio.
Oxidación de la materia orgánica con ácido nítri- 79
co y crómico, reducción de las sales mercúricas por
acción de Sn2+, volatilización del Hg metálico, arras-
tre del mismo por corriente de aire y determinación
de su absorbancia a 253,7 nanómetros.
Este método es aplicable a concentraciones de
mercurio superiores a 0,05 mg/l.
 46.2. Material y aparatos.
46.2.1. Espectrofotómetro de absorción.
46.2.2. Lámpara de mercurio.
46.2.3. Aparato para la reducción del ion mercú-
rico a mercurio metal y posterior arrastre de éste
con corriente de aire (figura 46.1).
46.2.4. Matraces de reacción de forma cónica
de 100 ml de capacidad.
46.2.5. Bomba peristáltica accionada con motor
provisto de vaciador de velocidad.
46.2.6. Llave de purga en T de teflón.
46.2.7. Tubo flexible de tigón de 1/8 pulgada de
diámetro interior y un metro, aproximadamente, de
longitud.
46.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
471058 Acido Sulfúrico 95-98%
(máx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO
80
Figura 46.l. Esquema de la instalación
131074 Agua PA-ACS
471153 Cromo VI Oxido
(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS
471303 Estaño ll Cloruro
(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO
121925 Hidroxilamonio Sulfato PA
313186 Mercurio solución patrón
Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA
251450 Parafina P. F. 55-60º C en pastilla DC
46.3.1. Acido Sulfúrico 95-98% (máximo
0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio.
46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS.
46.3.3. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
PA-ACS exento de mercurio.
46.3.4. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
PA-ACS exento de mercurio.
46.3.5. Solución de Acido Crómico al 5%. Llevar
a un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y

disolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Añadir lenta-
mente y agitando Acido Sulfúrico concentrado
hasta enrasar a 500 ml cuando la solución esté fría.
46.3.6. Solución reductora.- Solución al 40% de
Estaño II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada con
Acido Sulfúrico.
46.3.7. Solución patrón.- Mercurio solución
patrón Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disol-
viendo 1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amari-
llo PA en 100 ml de 131019 Acido Clohídrico 35%
PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilu-
ción 1/1.000 se obtiene la solución de 1 mg/l.
46.4. Procedimiento.
46.4.1. Preparación de la muestra.
Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de un
matraz cónico. Añadir 2 ml de Acido Nítrico 70% PA-
ACS-ISO. Cerrar con película de Parafina P. F. 55-
60°C en pastilla DC y dejarlo en digestión durante
sesenta minutos a temperatura ambiente. Añadir 5 ml
de Acido Crómico al 5%, refrigerando durante la adi-
ción en baño de hielo. Tapar el matraz y dejarlo
durante sesenta minutos, agitando cada diez minu-
tos. Transcurrido este tiempo, añadir 15 ml de Agua
PA-ACS, enfriando durante la adición con baño de
hielo. Una vez fríos los matraces, añadir 2 g, aproxima-
damente, de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y aco-
plar los matraces al aparato de medida. Añadir 10 ml
de solución reductora. Continuar como en 46.4.3.
46.4.2. Construcción de la curva patrón.
A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml.
Tratarlas a continuación como se indica en 46.4.1.
Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y
0,5 partes por millón de Hg. Anotar las absorban-
cias obtenidas frente a las concentraciones corres-
pondientes.
46.4.3. Determinación.
Efectuar la lectura de la absorbancia de la mues-
tra. Una vez preparada según 46.4.1.
46.5. Referencias.
46.5.1. A. Bouchard: “Determination of mercury
aftersoon temperature digestion by flamaless ato-
mic absorption.” Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12,
número 5 (115-117), 1973.
46.5.2. A. García de Jalón y J. Frías: “Un méto-
do para la determinación de mercurio en vinos me-
diante espectrofotometría de absorción atómica sin
llama.” Ministerio de Agricultura. Abril 1972.
47. PLOMO
47.1. Principio.
Determinación del plomo por A. A. después de
una concentración previa con objeto de conseguir
resultados suficientemente precisos.
47.2. Material y aparatos.
47.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.
M
47.2.2. Lámpara de plomo.
47.2.3. Cápsula de platino de 100 ml de capaci-
dad o similar.
47.2.4. Baño de arena.
47.2.5. Mufla con circulación de aire.
47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml de
capacidad.
47.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
47.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
47.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
47.3.3. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
47.3.4. Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo
1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
47.4. Procedimiento.
47.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
de la muestra en una cápsula de platino y llevarla a
evaporación hasta consistencia siruposa en baño
de arena. Añadir a continuación 2 ml de Acido Sul-
fúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena. Seguidamente introducir la cápsula
en la mufla y mantenerla durante dos horas a
450°C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla
enfriar. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO,
evaporar en el baño de arena e introducir en la
mufla, repitiendo esta operación hasta obtener ceni-
zas blancas. Disolver a continuación las cenizas con
1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de
Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger el
filtrado en un matraz de 10 ml, lavando la cápsula y
el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.
47.4.2. Construcción de la curva patrón.- A par-
tir de la solución patrón 47.3.4, tomar alícuotas de
0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con Acido
Nítrico al 1% (v/v).
El contenido en plomo de estas soluciones es,
respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar las
absorbancias obtenidas frente a las concentracio-
nes correspondientes.
47.4.3. Determinación.- Efectuar la lectura direc-
ta de la muestra preparada según 47.4.1 a 283,3 nm.
47.5. Cálculo. 81
Calcular el contenido en plomo, expresado en
ppm mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilu-
ción.
 48. RELACION P/a TABLA I

48.1. Principio. p/at K

Estimación de los contenidos relativos de gluco-
sa y fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas, - 1,19 0,006
mediante el establecimiento de la relación entre azú- - 1,41 0,007
cares reductores y desviación polarimétrica a 20°C. - 1,73 0,008
- 2,24 0,009
48.2. Material y aparatos. - 2,64 0,012
48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2. - 3,20 0,012
48.2.2. Polarímetro con luz monocromática ama- - 4,06 0,013
rilla (lámpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm. - 5,56 0,014
- 8,8 0,022
48.3. Procedimiento. - 21 0,042
48.3.1. Determinar el contenido en azúcares
reductores según el método 7(a), 7(b) o 7(c).
48.3.2. Medida de la desviación polarimétrica.
Una vez verificado el correcto reglaje del polarí-
metro, comprobando la correspondencia del valor
“cero” con la existencia de un campo luminoso uni-
forme, ajustándolo si es necesario, introducir en el
tubo del polarímetro el líquido de defecación, sin 49. ANHIDRIDO CARBONICO
diluir, incoloro y limpio, utilizando para la determina- (Método aprobado pero no
ción de azúcares reductores, evitando la formación publicado en el B.O.E.)
de burbujas de aire. Anotar la temperatura del líqui-
do que debe ser lo más próxima posible a 20°C. 49.1. Principio.
Efectuar la lectura de la desviación polarimétrica Después de la oxidación en frío del anhídrido
varias veces sucesivas, tomando la media de los sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presencia
resultados obtenidos. del ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplaza-
do del vino por una solución tampón de fosfato y
48.4. Cálculo. ácido fosfórico es arrastrado en frío en circuito
Determinar el poder rotatorio y la relación P/a cerrado por una corriente de aire mediante una
aplicando las fórmulas siguientes: pequeña bomba de circulación hacia una solución
a20 = at+ at (t - 20) x K valorada de bario hidróxido. El exceso de esta base
P/a20 (expresado con su correspondiente signo) se determina inmediatamente con una solución
valorada de ácido clorhídrico en presencia de un
siendo: indicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.
Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l.
P = g/l de azúcares reductores.
49.2. Material y aparatos.
at = poder rotatorio en divisiones sacarimétricas 49.2.1. Aparato de vidrio para extracción del
a t°C (un grado polarimétrico = 4,615 divisiones CO2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de:
sacarimétricas). - un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola
a20 = poder rotatorio en divisiones sacarimétri- antiespuma sobre la que va adaptada una
cas a20°C. bureta (5);
t = temperatura del líquido en el momento de la - dos barboteadores (2) y (3);
lectura. - una bomba (4) que garantice la circulación del
aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).
K = coeficiente variable con la naturaleza de los
azúcares, dado por la tabla I en función del valor 49.3. Reactivos.
P / at . 181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
82 48.5. Referencias. 131074 Agua PA-ACS
48.5.1. J. Blouin. Manual practique d’analyse 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
des Moûts et Vins. 1977. 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Scien- 121085 Etanol 96% v/v PA
ces et Techniques du Vin. Tome I. 1972. 131325 Fenolftaleína PA-ACS
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS

121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV
171739 Timolftaleína RE
49.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N: En un
matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio
Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.
49.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g de
BaCl2. 2H20 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidra-
to PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
49.3.3. Solución de Bario Hidróxido.
Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario
Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución de
Sodio Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que
evite la carbonatación.
49.3.4. Solución tampón:
Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida
400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y
añadir 50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20°C =
1,63): Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
con Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que
corresponde a, aproximadamente, 79,4% y com-
pletar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente
hervida.
49.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).
Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g
de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en
100 g de solución.
Utilizarla 15 días después de su preparación
para lograr la decantación del eventual Na2CO3.
Esta solución debe ser transparente.
49.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10
volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2
por litro y libera 10 veces su volumen de oxígeno
por descomposición catalítica con MnO2 en medio
alcalino.
49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,
pulverizado.
49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y
0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA,
neutro y completar hasta 100 ml.
49.3.9. Acido Clorhídrico 0,2N. En un matraz
aforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-
ción 0,2N obtenida.
49.4. Procedimiento.
49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g de
CO2 por litro.
La botella de vino se debe mantener en posición
horizontal durante una noche a 0°C.
Colocar en el barboteador (2) 150 ml exacta-
mente medidos de solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) algunos cristales de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, con
cuidado, en un matraz previamente enjuagado y
M
enfriado a 0°C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1)
en el circuito y esperar 10 minutos.
Conectar la bomba, e introducir mediante la
bureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en fun-
cionamiento 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 ml
de la solución de Bario Hidróxido; valorarla con Aci-
do Clorhídrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 el
número de ml gastados.
Es indispensable valorar diariamente el Bario
Hidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de ml
de Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.
49.4.2. Vinos que contienen más de 4 g de CO2
por litro.
La botella debe mantenerse en posición horizon-
tal a 0°C durante una noche. Abrir la botella con
precaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml
del vino por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%
haciendo resbalar suavemente la solución por el
cuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente y
homogeneizar su contenido agitándola; colocarla
seguidamente en un baño de agua a 20°C.
Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de
solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) unos cristales de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Introducir lentamente la pipeta en la botella para
evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml del
vino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y
dejarlo reposar 10 minutos.
El volumen del vino tomado se deberá reducir a
25 ml, si éste contiene más de 8 g/l de anhídrido
carbónico.
Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)
con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.
Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 ml
de la solución de Bario Hidróxido. Valorarla con Aci-
do Clorhídrico 0,2N en presencia de indicador mix-
to. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1 el
número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumi-
dos para valorar 150 ml de solución de Bario Hidró-
xido.
49.5. Cálculo.
49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 g
de CO2 por litro.
Cantidades de CO2 en gramos por l en el vino.
CO2(g/l) = 0,088 (V1- 3V2).
49.5.2. Para vinos que contienen más de 4 g de
CO2 por litro. 83
Medir el volumen de líquido que queda en la bote-
lla y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para la
determinación. Sea V el volumen total así determina-
do. Calcular seguidamente el factor de corrección f,
necesario para tener en cuenta los 50 ml de Sodio
Hidróxido al 50% introducidos en la botella:
 V 50. ETANAL
f = ————
V - 50
Si la muestra para la determinación es de 50 ml,
la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es (2V1 -
6V2) . 0,088 . f.
Este resultado debe multiplicarse por 2 si la
toma de muestra es de 25 ml.
49.6. Referencias.
49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n° 422;
Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n° 708, 96-109.
49.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.
84
Figura 1
(Método aprobado pero no
publicado en el B.O.E.)
50.1. Principio.
El etanal se determina en el vino, previamente
decolorado con carbón, midiendo a 570 nm la colo-
ración verde o violeta que da con el sodio nitropru-
siato y la piperidina.
50.2. Material y aparatos.
50.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar
lecturas a 570 nm.
50.3. Reactivos.
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131064 Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121237 Carbón Activo polvo PA
Etanal
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
162377 Piperidina PS
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA
181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV
50.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).
Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml
de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
50.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%
(p/v).
En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g de
Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.
Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.
50.3.3. Carbón Activo polvo PA.
50.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)
(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemen-
te Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua
PA-ACS.
50.3.5. Solución alcalina.
Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en
400 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Comple-
tar hasta un litro con Agua PA-ACS.
50.4. Procedimiento.
50.4.1. Determinación del Etanal.
Colocar 25 ml de líquido a analizar en un Erlen-
meyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbón
Activo polvo PA. Agitar enérgicamente durante
algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos
y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para
obtener un filtrado claro.
2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlen-
meyer de 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de solu-
ción de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución de
Piperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mez-
cla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La
 M
coloración obtenida que varía del verde al violeta, se contiene Etanal libre, no combinado con el SO2 será
mide a 570 nm con relación al aire. Esta coloración necesario, antes de empezar a determinar el Etanal
aumenta para disminuir seguidamente con rapidez. total, pasarlo previamente al estado de combina-
Elegir como valor definitivo la máxima absorbancia ción con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una
que se obtiene al cabo de unos 50 segundos. parte del líquido a analizar un pequeño exceso de
La cantidad de Etanal contenido en el líquido SO2 libre y esperar algunas horas antes de proce-
analizado se deduce de una curva patrón. der a la determinación.
50.4.2. Construcción de la curva patrón.
Solución patrón de Etanal combinado con el 50.7. Referencias.
Anhídrido Sufuroso. 50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.
Tomar Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS, Rdsch 1970. 66, 5-6.
valorar en SO 2 determinar su cantidad exacta 50.7.2. Recueil des Méthodes Internationales
midiéndola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV. d’Analyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978.
En un matraz aforado de 1 litro colocar el volu-
men de esta solución que corresponda a 1.500 mg
51. PRESION DEL ANHIDRIDO
de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un
CARBONICO
embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado
recientemente y recogido sobre una mezcla refrige-
51.1. Principio.
rante. Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar y
Medida de la presión gaseosa de un recipiente
dejar durante la noche.
cerrado herméticamente mediante un aparato ade-
La cantidad exacta de esta solución patrón de
cuado que disponga de un manómetro.
Etanal combinada con el SO2 debe determinarse
como sigue:
51.2. Material y aparatos.
En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de
51.2.1. Equipo manométrico que conste de las
solución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del Acido
siguientes partes:
Clorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxi-
51.2.1.1. Aguja perforadora del tapón o del reci-
dar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en pre-
piente, hueca, con válvula que obture el orificio de
sencia de solución de Almidón soluble RE hasta
entrada de gas a la misma y sistema estanco
coloración azul débil.
de adaptación al tapón o recipiente.
Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%
51.2.1.2. Conducto que ponga en comunica-
RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapa-
ción la aguja con el manómetro.
rición de la coloración azul y aparición de color rosa.
51.2.1.3. Manómetro que permita lecturas de
Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo
hasta 10 kg/cm2.
0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloración azul débil. Sien-
do n el volumen gastado, la solución patrón de Eta-
51.3. Procedimiento.
nal combinado con el SO2 contiene: 44,05 n mg de
Mantener la muestra en reposo durante dos
Etanal por litro.
horas al menos. Llevar la temperatura aproximada-
Preparación de la curva patrón:
mente a 20°C y perforar el tapón o el recipiente
En matraces aforados de 100 ml colocar sucesi-
según el caso. Abrir la válvula con lo que el gas
vamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.
pasa al manómetro. Leer la presión que indica el
Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corres-
manómetro.
ponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80-
120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilu-
51 4. Expresión de los resultados.
ciones debe calcularse a partir del contenido en
La presión se expresará en atmósferas a 20°C.
Etanal de la solución patrón determinada anterior-
mente.
1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm2
Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de
cada una de estas soluciones como se indica ante-
riormente. La representación gráfica de las absor- 52. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS
bancias de estas soluciones en función de la canti- (Método microbiológico)
dad de Etanal es una recta que no pasa por el
origen. 52.1. Principio.
Comparación del desarrollo, en vino problema y 85
50.5. Cálculo testigo, de las levaduras contenidas en láminas de
Calcular el contenido en Etanal mediante com- agar-extracto de levadura glucosado, tras perma-
paración con la correspondiente curva patrón. necer sumergidas 48 horas en ellos.

50.6. Observaciones. 52.2. Material y aparatos.

Si, de forma excepcional, el líquido a analizar 52.2.1. Hematímetro.
 52.2.2. Cajas Petri.
52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag.
52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm de
diámetro.
52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml.
52.2.6. Tubos capaces de contener portaobje-
tos normales de microscopía.
52.2.7. Autoclave.
52.2.8. Microscopio.
52.2.9. Estufa de cultivo.
52.3. Reactivos y medios de cultivo.
141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
131074 Agua PA-ACS
Etanal
403687 Extracto de levadura CULTIMED
121341 D(+)-Glucosa PA
52.3.1. Solución acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 ml
de esta solución combina 10 mg de SO2).
52.3.2. Mosto de 10º Bé. peptonado al 1 por
1.000. Esterilizar en autoclave a 112°C durante 20
minutos.
52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado:
Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 g
D(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 g
Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 g
Agua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 g
Una vez fundido en baño de agua, distribuir a razón
de 10 ml por tubo y esterilizar a 120°C durante 20
minutos.
52.3.4. Capa de levadura: Saccharomyces
bayanus.
te sobre la superficie de cada portaobjeto, forman-
do una lámína de agar. Acto seguido colocar hori-
zontalmente los portaobjetos apoyando sobre los
dos brazos de la varilla en U y dejar en reposo
durante un par de horas.
52.4.4. Formación de colonias: Asegurada la
solidificación del medio sembrado, sumergir com-
pletamente los portaobjetos en los tubos que con-
tienen el vino problema y el vino testigo. Tapar no
herméticamente los tubos y mantener en la estufa
de cultivo a 25°C durante 48 horas.
Finalizado este período eliminar el vino de los
tubos, dejando los portaobjetos en el interior de
ellos en contacto con el aire y a 25°C.
52.4.5. Observación microscópica: Observar las
láminas inmediatamente después de sacadas del
vino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubar
en estufa a 25°C y repetir la observación microscó-
pica a las 24, 48 y 72 horas si es necesario.
En los vinos de alto grado alcohólico puede
retrasarse aún más el desarrollo de las colonias,
como se comprueba en el vino testigo.
52.5. Interpretación de los resultados.
La presencia franca de colonias indica la ausen-
cia de antisépticos y antifermentos.
52.6. Referencia.
52.6.1. Método biológico español-argentino
para la investigación de la presencia de antisépticos
en los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr.
N 2. 1975.

52.4. Procedimiento.
52.4.1. Preparación del vino problema: Si la
dosis de SO2 libre es superior a 15 mg/l, proceder a
combinación del exceso mediante la solución acuo-
sa de Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desde
su adición. Comprobar de nuevo que el contenido
de SO2 libre es inferior a 15 m/l.
52.4.2. Preparación del vino testigo: Utilizar un
vino de características lo más parecidas posibles al
vino problema, especialmente en grado alcohólico.
Respecto al SO2 libre se procederá como en 52.4.1
52.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX y formación de la película: Una vez
fundidos en baño de agua los tubos con 10 ml de
agar-extracto de levadura glucosado y cuando la
temperatura baja a 45-50°C, sembrar, tras conteo
con hematímetro, 5 millones de levaduras/ml (50
86 millones por tubo) de un cultivo de 72 horas en
mosto peptonado de 10° Bé.
Tras homogeneizar rápidamente los tubos sem-
brados, verter su contenido sobre los portaobjetos
rayados, situados en posición inclinada, apoyados
sobre un brazo de la varilla en U colocada dentro de
la caja Petri; el agar fundido deslizará uniformemen-
M

87
 Productos derivados
de la uva:
Zumos de uva

88

METODOS DE ANALISIS
1. GRADO BRIX
1.1. Principio.
Medida del índice de refracción y conversión en
grados Brix mediante las tablas adjuntas.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Refractómetro provisto del equipo nece-
sario para mantener la temperatura a 20ºC.
1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cie-
rren herméticamente.
1.3. Procedimiento.
Colocar el refractómetro en un lugar iluminado
con luz difusa o frente a una fuente de luz artificial.
Circular agua a temperatura constante a 20°C a
través de los prismas del refractómetro. Ajustar el
instrumento colocando unas gotas de agua destila-
da entre los prismas. El índice de refracción deberá
M
ser 1,3330; si no es así corregir adecuadamente la
lectura.
Situar el zumo de uva en un envase hermética-
mente cerrado en un baño a 20°C y esperar a que
alcance dicha temperatura. Tomar con una pipeta
un poco de zumo de uva y poner unas gotas entre
los prismas del refractómetro. Medir el índice de
refracción.
1.4. Expresión de los resultados.
A partir del valor obtenido del índice de refrac-
ción se obtiene el grado Brix mediante la tabla I.
1.5. Observaciones.
1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medir
el índice de refracción, utilizar la tabla II para la
corrección de temperatura a 20°C .
1.6. Referencias.
Official Methods of Analysis, AOAC-1984.

TABLA I

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3330 0,009 1,3357 1,885 1,3384 3,736 1,3411 5,562

1,3331 0,078 1,3358 1,954 1,3385 3,804 1,3412 5,629
1,3332 0,149 1,3359 2,023 1,3386 3,872 1,3413 5,696
1,3333 0,253 1,3360 2,092 1,3387 3,940 1,3414 5,763
1,3334 0,288 1,3361 2,161 1,3388 4,008 1,3415 5,830
1,3335 0,358 1,3362 2,230 1,3389 4,076 1,3416 5,897
1,3336 0,428 1,3363 2,299 1,3390 4,144 1,3417 5,964
1,3337 0,498 1,3364 2,367 1,3391 4,212 1,3418 6,031
1,3338 0,567 1,3365 2,436 1,3392 4,279 1,3419 6,098
1,3339 0 637 1,3366 2,505 1,3393 4,347 1,3420 6,165
1,3340 0,707 1,3367 2,574 1,3394 4,415 1,3421 6,231
1,3341 0,776 1,3368 2,642 1,3395 4.483 1,3422 6,298
1,3342 0,846 1,3369 2,711 1,3396 4,550 1,3423 6,365
1,3343 0,915 1,3370 2,779 1,3397 4,618 1,3424 6,432
1,3344 0,985 1,3371 2,848 1,3398 4,686 1,3425 6,498
1,3345 1,054 1,3372 2,917 1,3399 4,753 1,3426 6,565
1,3346 1,124 1,3373 2,985 1,3400 4,821 1,3427 6,632
1,3347 1,193 1,3374 3,053 1,3401 4,888 1,3428 6,698
1,3348 1,263 1,3375 3,122 1,3402 4,956 1,3429 6,765
1,3349 1,332 1,3376 3,190 1,3403 5,023 1,3430 6,831
1,3350
1,3351
1,401
1,470
1,3377
1,3378
3,259
3,327
1,3404
1,3405
5,091
5,158
1,3431
1,3432
6,898
6,964
89
1,3352 1,540 1,3379 3,395 1,3406 5,225 1,3433 7,031
1,3353 1,609 1,3380 3,463 1,3407 5,293 1,3434 7,097
1,3354 1,678 1,3381 3,532 1,3408 5,360 1,3435 7,164
1,3355 1,747 1,3382 3,600 1,3409 5,427 1,3436 7,230
1,3356 1,815 1,3383 3,668 1,3410 5,494 1,3437 7,296
 TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3438 7,362 1,3490 10,763 1,3542 14,079 1,3594 17,311

1,3439 7,429 1,3491 10,828 1,3543 14,141 1,3595 17,373
1,3440 7,495 1,3492 10,892 1,3544 14,204 1,3596 17,434
1,3441 7,561 1,3493 10,957 1,3545 14,267 1,3597 17,496
1,3442 7,627 1,3494 11,021 1,3546 14,330 1,3598 17,557
1,3443 7,693 1,3495 11,086 1,3547 14,393 1,3599 17,618
1,3444 7,759 1,3496 11,150 1,3548 14,456 1,3600 17,679
1,3445 7,825 1,3497 11,215 1,3549 14,518 1,3601 17,741
1,3446 7,891 1,3498 11,279 1,3550 14,581 1,3602 17,802
1,3447 7,957 1,3499 11,343 1,3551 14,644 1,3603 17,863
1,3448 8,023 1,3500 11,407 1,3552 14,707 1,3604 17,924
1,3449 8,089 1,3501 11,472 1,3553 14,759 1,3605 17,985
1,3450 8,155 1,3502 11,536 1,3554 14,832 1,3606 18,046
1,3451 8,221 1,3503 11,600 1,3555 14,894 1,3607 18,107
1,3452 8,287 1,3504 11,664 1,3556 14,957 1,3608 18,168
1,3453 8,352 1,3505 11,723 1,3557 15,019 1,3609 18,229
1,3454 8,418 1,3506 11,792 1,3558 15,082 1,3610 18,290
1,3455 8,484 1,3507 11,856 1.3559 15.144 1,3611 18,351
1,3456 8,550 1,3508 11,920 1,3560 15,207 1,3612 18,412
1,3457 8,615 1,3509 11,984 1,3561 15,269 1,3613 18,473
1,3458 8,681 1,3510 12,048 1,3562 15,332 1,3614 18,534
1,3459 8,746 1,3511 12,112 1,3563 15,394 1,3615 18,595
1,3460 8,812 1,3512 12,175 1,3564 15,456 1,3616 18,655
1,3461 8,878 1,3513 12,240 1,3565 15,518 1,3617 18,716
1,3462 8,943 1,3514 12,304 1,3566 15,581 1,3618 18,777
1,3463 9,008 1,3515 12,368 1,3567 15,643 1,3619 18,837
1,3464 9,074 1,3516 12,431 1,3568 15,705 1,3620 18,898
1,3465 9,139 1,3517 12,495 1,3569 15,767 1,3621 18,959
1,3466 9,205 1,3518 12,559 1,3570 15,829 1,3622 19,019
1,3467 9,270 1,3519 12,623 1,3571 15,891 1,6223 19,080
1,3468 9,335 1,3520 12,686 1,3572 15,953 1,3624 19,141
1,3469 9,400 1,3521 12,750 1,3573 16,016 1,3625 19,201
1,3470 9,466 1,3522 12,813 1,3574 16,078 1,3626 19,262
1,3471 9,531 1,3523 12,877 1,3575 16,140 1,3627 19,322
1,3472 9,596 1,3524 12,940 1,3576 16,201 1,3628 19,382
1,3473 9,661 1,3525 13,004 1,3577 16,263 1,3629 19,443
1,3474 9,726 1,3526 13,067 1,3578 16,325 1,3630 19,503
1,3475 9,791 1,3527 13,131 1,3579 16,387 1,3631 19,564
1,3476 9,856 1,3528 13,194 1,3580 16,449 1,3632 19,624
1,3477 9,921 1,3529 13,258 1,3581 16,511 1,3633 19,684
1,3478 9,986 1,3530 13,321 1,3582 16,573 1,3634 19,745
1,3479 10,051 1,3531 13.384 1,3583 16,634 1,3635 19,805
1,3480 10,116 1,3532 13,448 1,3584 16,696 1,3636 19,865
1,3481 10,181 1,3533 13,551 1,3585 16,758 1,3637 19,925
1,3482 10,246 1,3534 13,574 1,3586 16,819 1,3638 19,985
90 1,3483 10,331 1,3535 13,637 1,3587 16,881 1,3639 20,045
1,3484 10,375 1,3536 13,700 1,3588 16,943 1,3640 20,106
1,3485 10,440 1,3537 13,763 1,3589 17,004 1,3641 20,166
1,3486 10,505 1,3538 13,826 1,3590 17,065 1,3642 20,226
1,3487 10,570 1,3539 13,890 1,3591 17,127 1,3643 20,286
1,3488 10,634 1,3540 13,953 1,3592 17,189 1,3644 20,346
1,3489 10,699 1,3541 14,016 1,3593 17,250 1,3645 20,406
 M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3646 20,466 1,3698 23,544 1,3750 26,551 1,3802 29,488

1,3647 20,525 1,3699 23,603 1,3751 26,608 1,3803 29,544
1,3648 20,585 1,3700 23,661 1,3752 26,665 1,3804 29,600
1,3649 20,645 1,3701 23,720 1,3753 26,722 1,3805 29,655
1,3650 20,705 1,3702 23,778 1,3754 26,779 1,3806 29,711
1,3651 20,765 1,3703 23,836 1,3755 26,836 1,3807 29,767
1,3652 20,825 1,3704 23,895 1,3756 26,893 1,3808 29,823
1,3653 20,884 1,3705 23,953 1,3757 26,950 1,3809 29,878
1,3654 20,944 1,3706 24,011 1,3758 27,007 1,3810 29,934
1,3655 21,004 1,3707 24,070 1,3759 27,064 1,3811 29,929
1,3656 21,063 1,3708 24,128 1,3760 27,121 1,3812 30,045
1,3657 21,123 1,3709 24,186 1,3761 27,178 1,3813 30,101
1,3658 21,183 1,3710 24,244 1,3762 27,234 1,3814 30,156
1,3659 21,242 1,3711 24,302 1,3763 27,291 1,3815 30,212
1,3660 21,302 1,3712 24,361 1,3764 27,348 1,3816 30,267
1,3661 21,361 1,3713 24,419 1,3765 27,405 1,3817 30,323
1,3662 21,421 1,3714 24,477 1,3766 27,462 1,3818 30,378
1,3663 21,480 1,3715 24,535 1,3767 27,518 1,3819 30,434
1,3664 21,540 1,3716 24,593 1,3768 27,575 1,3820 30,489
1,3665 21,599 1,3717 24,651 1,3769 27,632 1,3821 30,544
1,3666 21,658 1,3718 24,709 1,3770 27,688 1,3822 30,600
1,3667 21,718 1,3719 24,767 1,3771 27,745 1,3823 30,655
1,3668 21,777 1,3720 24,825 1,3772 27,802 1,3824 30,711
1,3669 21,836 1,3721 24,883 1,3773 27,858 1,3825 30,766
1,3670 21,895 1,3722 24,941 1,3774 27,915 1,3826 30,821
1,3671 21,955 1,3723 24,998 1,3775 27,971 1,3827 30,876
1,3672 22,014 1,3724 25,056 1,3776 28,028 1,3828 30,932
1,3673 22,073 1,3725 25,114 1,3777 28,084 1,3829 30,987
1,3674 22,132 1,3726 25,172 1,3778 28,141 1,3830 31,042
1,3675 22,192 1,3727 25,230 1,3779 28,197 1,3831 31,097
1,3676 22,251 1,3728 25,287 1,3780 28,253 1,3832 31,152
1,3777 22,310 1,3729 25,345 1,3781 28,310 1,3833 31,207
1,3678 22,369 1,3730 25,403 1,3782 28,366 1,3834 31,262
1,3679 22,428 1,3731 25,460 1,3783 28,422 1,3835 31,317
1,3680 22,487 1,3732 25,518 1,3784 28,479 1,3836 31,372
1,3681 22,546 1,3733 25,576 1,3785 28,535 1,3837 31,428
1,3682 22,605 1,3734 25,633 1,3786 28,591 1,3838 31,482
1,3683 22,664 1,3735 25,691 1,3787 28,648 1,3839 31,537
1,3684 22,723 1,3736 25,748 1,3788 28,704 1,3840 31,592
1,3685 22,781 1,3737 25,806 1,3789 28,760 1,3841 31,647
1,3686 22,840 1,3738 25,863 1,3790 28,816 1,3842 31,702
1,3687 22,899 1,3739 25,921 1,3791 28,872 1,3843 31,757
1,3688 22,958 1,3740 25,978 1,3792 28,928 1,3844 31,812
1,3689 22,017 1,3741 26,035 1,3793 28,984 1,3845 31,867
1,3690 23,075 1,3742 26,093 1,3794 29,040 1,3846 31,922
1,3691 23,134 1,3743 26,150 1,3795 29,096 1,3847 31,976 91
1,3692 23,193 1,3744 26,207 1,3796 29,152 1,3848 32,031
1,3693 23,251 1,3745 26,265 1,3797 29,208 1,3849 32,086
1,3694 23,310 1,3746 26,322 1,3798 29,264 1,3850 32,140
1,3695 23,369 1,3747 26,379 1,3799 29,320 1,3851 32,195
1,3696 23,427 1,3748 26,436 1,3800 29,376 1,3852 32,250
1,3697 23,486 1,3749 26,493 1,3801 29,432 1,3853 32,304
 TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3854 32,359 1,3906 35,167 1,3958 37,914 1,4010 40,604

1,3855 32,414 1,3907 35,220 1,3959 37,967 1,4011 40,655
1,3856 32,468 1,3908 35,274 1,3960 38,019 1,4012 40,706
1,3857 32,523 1,3909 35,327 1,3961 38,071 1,4013 40,757
1,3858 32,577 1,3910 35,380 1,3962 38,123 1,4014 40,808
1,3859 32,632 1,3911 35,434 1,3963 38,175 1,4015 40,860
1,3860 32,686 1,3912 35,487 1,3964 38,228 1,4016 40,911
1,3861 32,741 1,3913 35,540 1,3965 38,280 1,4017 40,962
1,3862 32,795 1,3914 35,593 1,3966 38,332 1,4018 41,013
1,3863 32,849 1,3915 35,647 1,3967 38,384 1,4019 41,064
1,3864 32,904 1,3916 35,700 1,3968 38,436 1,4020 41,115
1,3865 32,958 1,3917 35,753 1,3969 38,488 1,4021 41,166
1,3866 33,013 1,3918 35,806 1,3970 38 540 1,4022 41,217
1,3867 33,067 1,3919 35,859 1,3971 38 592 1,4023 41,268
1,3868 33,121 1,3920 35,912 1,3972 38,644 1,4024 41,318
1,3869 33,175 1,3921 35,965 1,3973 38,696 1,4025 41,369
1,3870 33,230 1,3922 36,019 1,3974 38,784 1,4026 41,420
1,3871 33,284 1 3923 36,072 1,3975 38,800 1,4027 41,471
1,3872 33,338 1,3924 36,125 1,3976 38,852 1,4028 41,522
1,3873 33,392 1,3925 36,178 1,3977 38,904 1,4029 41,573
1,3874 33,446 1,3926 36,231 1,3978 38,955 1,4030 41,623
1,3875 33,500 1,3927 36,284 1,3979 39,007 1,4031 41,674
1,3876 33,555 1,3928 36,337 1,3980 39,059 1,4032 41,725
1,3877 33,609 1,3929 36,389 1,3981 39,111 1,4033 41,776
1,3878 33,663 1,3930 36,442 1,3982 39,163 1,4034 41,826
1,3879 33,717 1,3931 36,495 1,3983 39,214 1,4035 41,877
1,3880 33,771 1,3932 36,548 1,3984 39,266 1,4036 41,928
1,3881 33,825 1,3933 36,601 1,3985 39,318 1,4037 41,978
1,3882 33,879 1,3934 36,654 1,3986 39,370 1,4038 42,029
1,3883 33,933 1,3935 36,706 1,3987 39,421 1,4039 42,080
1,3884 33,987 1,3936 36,759 1,3988 39,473 1,4040 42,130
1,3885 34,040 1,3937 36,812 1,3989 39,525 1,4041 42,181
1,3886 34,094 1,3938 36,865 1,3990 39,576 1,4042 42,231
1,3887 34,148 1,3939 36,917 1,3991 39,628 1,4043 42,282
1,3888 34,202 1,3940 36,970 1,3992 39 679 1,4044 42,332
1,3889 34,256 1,3941 37,023 1,3993 39 731 1,4045 42,383
1,3890 34,310 1,3942 37,075 1,3994 39,782 1,4046 42,433
1,3891 34,363 1,3943 37,128 1,3995 39,834 1,4047 42,484
1,3892 34,417 1,3944 37,180 1,3996 39,885 1,4048 42,534
1,3893 34,471 1,3945 37,233 1,3997 39,937 1,4049 42,585
1,3894 34,524 1,3946 37,286 1,3998 39,988 1,4050 42,635
1,3895 34,578 1,3947 37,338 1,3999 40,040 1,4051 42,685
1,3896 34,632 1,3948 37,391 1,4000 40,091 1,4052 42,736
1,3897 34,685 1,3949 37,443 1,4001 40,142 1,4053 42,786
1,3898 34,739 1,3950 37,495 1,4002 40,194 1,4054 42,836
92 1,3899 34,793 1,3951 37,548 1,4003 40,245 1,4055 42,887
1,3900 34,846 1,3952 37,600 1,4004 40,295 1,4056 42,937
1,3901 34,900 1,3953 37,653 1,4005 40,348 1,4057 42,987
1,3902 34,953 1,3954 37,705 1,4006 40,399 1,4058 43,037
1,3903 35,007 1,3955 37,757 1,4007 40,450 1,4059 43,088
1,3904 35,060 1,3956 37,810 1,4008 40,501 1,4060 43,138
1,3905 35,114 1,3957 37,862 1,4009 40,553 1,4061 43,188
 M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4062 43,238 1,4114 45,820 1,4166 48,350 1,4218 50,833

1,4063 43,288 1,4115 45,869 1,4167 48,399 1,4219 50,880
1,4064 43,338 1,4116 45,918 1,4168 48,447 1,4220 50,928
1,4065 43,388 1,4117 45,967 1,4169 48,495 1,4221 50,975
1,4066 43,439 1,4118 46,016 1,4170 48,543 1,4222 51,022
1,4067 43,489 1,4119 46,065 1,4171 48,591 1,4223 51,069
1,4068 43,539 1,4120 46,114 1,4172 48,639 1,4224 51,116
1,4069 43,589 1,4121 46,163 1,4173 48,687 1,4225 51,164
1,4070 43,639 1,4122 46,212 1,4174 48,735 1,4226 51,211
1,4071 43,689 1,4123 46,261 1,4175 48,784 1,4227 51,258
1,4072 43,739 1,4124 46,310 1,4176 48,832 1,4228 51,305
1,4073 43,789 1,4125 46,359 1,4177 48,880 1,4229 51,352
1,4074 43,838 1,4126 46,408 1,4178 48,928 1,4230 51,399
1,4075 43,888 1,4127 46,457 1,4179 48,976 1,4231 51,446
1,4076 43,938 1,4128 46,506 1,4180 49,023 1,4232 51,493
1,4077 43,988 1,4129 46,555 1,4181 49,071 1,4233 51,540
1,4078 44,038 1,4130 46,604 1,4182 49,119 1,4234 51,587
1,4079 44,088 1,4131 46,652 1,4183 49,167 1,4235 51,634
1,4080 44,138 1,4132 46,701 1,4184 49,215 1,4236 51,681
1,4081 44,187 1,4133 46,750 1,4185 49,263 1,4237 51,728
1,4082 44,237 1,4134 46,799 1,4186 49,311 1,4238 51,775
1,4083 44,287 1,4135 46,848 1,4187 49,359 1,4239 51,822
1,4084 44,337 1,4136 46,896 1,4188 49,407 1,4240 51,859
1,4085 44,386 1,4137 46,945 1,4189 49,454 1,4241 51,916
1,4086 44,436 1,4138 46,994 1,4190 49,502 1,4242 51,963
1,4087 44,486 1,4139 47,043 1,4191 49,550 1,4243 52,010
1,4088 44,535 1,4140 47,091 1,4192 49,598 1,4244 52,057
1,4089 44,585 1,4141 47,140 1,4193 49,645 1,4245 52,104
1,4090 44,635 1,4142 47,188 1,4194 49,693 1,4246 52,150
1,4091 44,684 1,4143 47,237 1,4195 49,741 1,4247 52,197
1,4092 44,734 1,4144 47,286 1,4196 49,788 1,4248 52,244
1,4093 44,783 1,4145 47,334 1,4197 49,836 1,4249 52,291
1,4094 44,833 1,4146 47,383 1,4198 49,884 1,4250 52,338
1,4095 44,882 1,4147 47,431 1,4199 49,931 1,4251 52,384
1,4096 44,932 1,4148 47,480 1,4200 49,979 1,4252 52,431
1,4097 44,981 1,4149 47,528 1,4201 50,027 1,4253 52,478
1,4098 45,031 1,4150 47,577 1,4202 50,074 1,4254 52,524
1,4099 45,080 1,4151 47,625 1,4203 50,122 1,4255 52,571
1,4100 45,130 1,4152 47,674 1,4204 50,169 1,4256 52,618
1,4101 45,179 1,4153 47,722 1,4205 50,217 1,4257 52,664
1,4102 45,228 1,4154 47,771 1,4206 50,264 1,4258 52,711
1,4103 45,278 1,4155 47,819 1,4207 50,312 1,4259 52,758
1,4104 45,327 1,4156 47,868 1,4208 50,359 1,4260 52,804
1,4105 45,376 1,4157 47,916 1,4209 50,407 1,4261 52,851
1,4106 45,426 1,4158 47,964 1,4210 50,454 1,4262 52,897
1,4107 45,475 1,4159 48,013 1,4211 50,502 1,4263 52,944 93
1,4108 45,524 1,4160 48,061 1,4212 50,549 1,4264 52,990
1,4109 45,574 1,4161 48,109 1,4213 50,596 1,4265 53,037
1,4110 45,623 1,4162 48,158 1,4214 50,644 1,4266 53,083
1,4111 45,672 1,4163 48,206 1,4215 50,691 1,4267 53,130
1,4112 45,721 1,4164 48,254 1,4216 50,738 1,4268 53,176
1,4113 45,770 1,4165 48,302 1,4217 50,786 1,4269 53,223
 TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4270 53,269 1,4322 55,661 1,4374 58,011 1,4426 60,320

1,4271 53,316 1,4323 55,707 1,4375 58,056 1,4427 60,364
1,4272 53,362 1,4324 55,752 1,4376 58,101 1,4428 60,408
1,4273 53,408 1,4325 55,798 1,4377 58,145 1,4429 60,452
1,4274 53,455 1,4326 55,844 1,4378 58,190 1,4430 60,496
1,4275 53,501 1,4327 55,889 1,4379 58,235 1,4431 60,540
1,4276 53,548 1,4328 55,935 1,4380 58,279 1,4432 60,584
1,4277 53,594 1,4329 55,980 1,4381 58,324 1,4433 60,623
1,4278 53,640 1,4330 56,026 1,4382 58,369 1,4434 60,672
1,4279 53,686 1,4331 56,071 1,4383 58,413 1,4435 60,716
1,4280 53,733 1,4332 56,116 1,4384 58,458 1,4436 60,759
1,4281 53,779 1,4333 56,162 1,4385 58,503 1,4437 60,803
1,4282 53,825 1,4334 56,207 1,4386 58,547 1,4438 60,847
1,4283 53,871 1,4335 56,253 1,4387 58,592 1,4439 60,891
1,4284 53,918 1,4336 56,298 1,4388 58,637 1,4440 60,935
1,4285 53,964 1,4337 56,343 1,4389 58,681 1,4441 60,979
1,4286 54,010 1,4338 56,389 1,4390 58,726 1,4442 61,023
1,4287 54,056 1,4339 56,434 1,4391 58,770 1,4443 61,066
1,4288 54,102 1,4340 56,479 1,4392 58,815 1,4444 61,110
1,4289 54,148 1,4341 56,525 1,4393 58,859 1,4445 61,154
1,4290 54,194 1,4342 56,570 1,4394 58,904 1,4446 61,198
1,4291 54,241 1,4343 56,615 1,4395 58,984 1,4447 61,241
1,4292 54,287 1,4344 56,660 1,4396 58,993 1,4448 61,285
1,4293 54,333 1,4345 56,706 1,4397 59,037 1,4449 61,329
1,4294 54,379 1,4346 56,751 1,4398 59,082 1,4450 61,372
1,4295 54,425 1,4347 56,796 1,4399 59,126 1,4451 61,416
1,4296 54,471 1,4348 56,841 1,4400 59,170 1,4452 61,460
1,4297 54,517 1,4349 56,887 1,4401 59,215 1,4453 61,503
1,4298 54,563 1,4350 56,932 1,4402 59,259 1,4454 61,547
1,4299 54,609 1,4351 56,977 1,4403 59,304 1,4455 61,591
1,4300 54,655 1,4352 57,022 1,4404 59,348 1,4456 61,634
1,4301 54,701 1,4353 57,067 1,4405 59,392 1,4457 61,678
1,4302 54,746 1,4354 57,112 1,4406 59,437 1,4458 61,721
1,4303 54,792 1,4355 57,157 1,4407 59,481 1,4459 61,765
1,4304 54,838 1,4356 57,202 1,4408 59,525 1,4460 61,309
1,4305 54,884 1,4357 57,247 1,4409 59,569 1,4461 61,852
1,4306 54,930 1,4358 57,292 1,4410 59,614 1,4462 61,895
1,4307 54,976 1,4359 57,337 1,4411 59,658 1,4463 61,939
1,4308 55,022 1,4360 57,382 1,4412 59,702 1,4464 61,983
1,4309 55,067 1,4361 57,427 1,4413 59,746 1,4465 62,026
1,4310 55,113 1,4362 57,472 1,4414 59,791 1,4466 62,070
1,4311 55,159 1,4363 57,517 1,4415 59,835 1,4467 62,113
1,4312 55,205 1,4364 57,562 1,4416 59,879 1,4468 62,156
1,4313 55,250 1,4365 57,607 1,4417 59,923 1,4469 62,200
1,4314 55,296 1,4366 57,652 1,4418 59,967 1,4470 62,243
94 1,4315 55,342 1,4367 57,697 1,4419 60,011 1,4471 62,287
1,4316 55,388 1,4368 57,742 1,4420 60,056 1,4472 62,330
1,4317 55,433 1,4369 57,787 1,4421 60,100 1,4473 62,373
1,4318 55,479 1,4370 57,832 1,4422 60,144 1,4474 62,417
1,4319 55,524 1,4371 57,877 1,4423 60,188 1,4475 62,460
1,4320 55,570 1,4372 57,921 1,4424 60,232 1,4476 62,503
1,4321 55,616 1,4373 57,966 1,4425 60,276 1,4477 62,547
 M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4478 62,590 1,4530 64,823 1,4582 67,019 1,4634 69,181

1,4479 62,633 1,4531 64,865 1,4583 67,061 1,4635 69,222
1,4480 62,677 1,4532 64,908 1,4584 67,103 1,4636 69,263
1,4481 62,720 1,4533 64,950 1,4585 67,145 1,4637 69,304
1,4482 62,763 1,4534 64,992 1,4586 67,186 1,4638 69,346
1,4483 62,806 1,4535 65,035 1,4587 67,228 1,4639 69,387
1,4484 62,849 1,4536 65,078 1,4588 67,270 1,4640 69,428
1,4485 62,893 1,4537 65,120 1,4589 67,312 1,4641 69,469
1,4486 62,936 1,4538 65,163 1,4590 67,354 1,4642 69,510
1,4487 62,979 1,4539 65,205 1,4591 67,396 1,4643 69,551
1,4488 63,022 1,4540 65,248 1,4592 67,437 1,4644 69,593
1,4489 63,065 1,4541 65,290 1,4593 67,479 1,4645 69,634
1,4490 63,108 1,4542 65,333 1,4594 67,521 1,4646 69,675
1,4491 63,152 1,4543 65,375 1,4595 67,563 1,4647 69,716
1.4492 63,195 1,4544 65,417 1,4596 67,604 1,4648 69,757
1,4493 63,238 1,4545 65,460 1,4597 67,646 1,4649 69,798
1,4494 63,281 1,4546 65,502 1,4598 67,688 1,4650 69,839
1,4495 63,324 1,4547 65,544 1,4599 67,729 1,4651 69,880
1,4496 63,367 1,4548 65,587 1,4600 67,771 1,4652 69,921
1,4497 63,410 1,4549 65,629 1,4601 67,813 1,4653 69,962
1,4498 63,453 1,4550 65,672 1,4602 67,854 1,4654 70,003
1,4499 63,496 1,4551 65,714 1,4603 67,895 1,4655 70,044
1,4500 63,539 1,4552 65,756 1,4604 67,938 1,4656 70,085
1,4501 63,582 1,4553 65,798 1,4605 67,979 1,4657 70,126
1,4502 63,625 1,4554 65,841 1,4606 68,021 1,4658 70,167
1,4503 63,668 1,4555 65,883 1,4607 68,063 1,4659 70,208
1,4504 63,711 1,4556 65,925 1,4608 68,104 1,4660 70,249
1,4505 63,754 1,4557 65,967 1,4609 68,146 1,4661 70,290
1,4506 63,797 1,4558 66,010 1,4610 68,187 1,4662 70,331
1,4507 63,840 1,4559 66,052 1,4611 68,229 1,4663 70,372
1,4508 63,882 1,4560 66,094 1,4612 68,270 1,4664 70,413
1,4509 63,925 1,4561 66,136 1,4613 68,312 1,4665 70,453
1,4510 63,968 1,4562 66,178 1,4614 68,353 1,4666 70,494
1,4511 64,011 1,4563 66,221 1,4615 68,395 1,4667 70,535
1,4512 64,054 1,4564 66,263 1,4616 68,436 1,4668 70,576
1,4513 64,097 1,4565 66,305 1,4617 68,478 1,4669 70,617
1,4514 64,139 1,4566 66,347 1,4618 68,519 1,4670 70,658
1,4515 64,182 1,4567 66,389 1,4619 68,561 1,4671 70,698
1,4516 64,225 1,4568 66,431 1,4620 68,602 1,4672 70,739
1,4517 64,268 1,4569 66,473 1,4621 68,643 1,4673 70,780
1,4518 64,311 1,4570 66,515 1,4622 68,685 1,4674 70,821
1,4519 64,353 1,4571 66,557 1,4623 68,726 1,4675 70,861
1,4520 64,396 1,4572 66,599 1,4624 68,768 1,4676 70,902
1,4521 64,439 1,4573 66,641 1,4625 68,809 1,4677 70,943
1,4522 64,481 1,4574 66,683 1,4626 68,850 1,4678 70,984
1,4523 64,524 1,4575 66,725 1,4627 68,892 1,4679 71,024 95
1,4524 64,567 1,4576 66,767 1,4628 68,933 1,4680 71,065
1,4525 64,609 1,4577 66,809 1,4629 68,974 1,4681 71,106
1,4526 64,652 1,4578 66,851 1,4630 69,016 1,4682 71,146
1,4527 64,695 1,4579 66,893 1,4631 69,057 1,4683 71,187
1,4528 64,737 1,4580 66,935 1,4632 69,098 1,4684 71,228
1,4529 64,780 1,4581 66,977 1,4633 69,139 1,4685 71,268
 TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4686 71,309 1,4738 73,405 1,4790 75,469 1,4842 77,502

1,4687 71,349 1,4739 73,445 1,4791 75,508 1,4843 77,541
1,4688 71,390 1,4740 73,485 1,4792 75,547 1,4844 77,580
1,4689 71,431 1,4741 73,524 1,4793 75,587 1,4845 77,619
1,4690 71,471 1,4742 73,564 1,4794 75,626 1,4846 77,657
1,4691 71,512 1,4743 73,604 1,4795 75,666 1,4847 77,696
1,4692 71,552 1,4744 73,644 1,4796 75,705 1,4848 77,735
1,4693 71,593 1,4745 73,684 1,4797 75,744 1,4849 77,774
1,4694 71,633 1,4746 73,724 1,4798 75,784 1,4850 77,812
1,4695 71,674 1,4747 73,764 1,4799 75,823 1,4851 77,851
1,4696 71,714 1,4748 73,804 1,4800 75,862 1,4852 77,890
1 4697 71,755 1,4749 73,844 1,4801 75,901 1,4853 77,928
1 4698 71,795 1,4750 73,884 1,4802 75,941 1,4854 77,967
1,4699 71,836 1,4751 73,924 1,4803 75,980 1,4855 78,006
1,4700 71,876 1,4752 73,963 1,4804 76,019 1,4856 78,045
1,4701 71,917 1,4753 74,003 1,4805 76,058 1,4857 78,083
1,4702 71,957 1,4754 74,043 1,4806 76,098 1,4858 78,122
1,4703 71,998 1,4755 74,083 1,4807 76,137 1,4859 78,160
1,4704 72,038 1,4756 74,123 1,4808 76,176 1,4860 78,199
1,4705 72,078 1,4757 74,162 1,4809 76,215 1,4861 78,238
1,4706 72,119 1,4758 74,202 1,4810 76,254 1,4862 78,276
1,4707 72,159 1,4759 74,242 1,4811 76,294 1,4863 78,315
1,4708 72,199 1,4760 74,282 1,4812 76,333 1,4864 78,353
1,4709 72,240 1,4761 74,321 1,4813 76,372 1,4865 78,392
1,4710 72,280 1,4762 74,361 1,4814 76,411 1,4866 78,431
1,4711 72,320 1,4763 74,401 1,4815 76,450 1,4867 78,469
1,4712 72,361 1,4764 74,441 1,4816 76,489 1,4868 78,508
1,4713 72,401 1,4765 74,480 1,4817 76,528 1,4869 78,546
1,4714 72,441 1,4766 74,520 1,4818 76,567 1,4870 78,585
1,4715 72,482 1,4767 74,560 1,4819 76,607 1,4871 78,623
1,4716 72,522 1,4768 74,599 1,4820 76,646 1,4872 78,662
1,4717 72,562 1,4769 74,633 1,4821 76,685 1,4873 78,700
1,4718 72,602 1,4770 74,678 1,4822 76,724 1,4874 78,739
1,4719 72,643 1,4771 74,718 1,4823 76,763 1,4875 78,777
1,4720 72,683 1,4772 74,758 1,4824 76,802 1,4876 78,816
1,4721 72,723 1,4773 74,797 1,4825 76,841 1,4877 78,854
1,4722 72,763 1,4774 74,837 1,4826 76,880 1,4878 78,892
1,4723 72,803 1,4775 74,876 1,4827 76,919 1,4879 78,931
1,4724 72,843 1,4776 74,916 1,4828 76,958 1,4880 78,969
1,4725 72,884 1,4777 74,956 1,4829 76,997 1,4881 79,008
1,4726 72,924 1,4778 74,995 1,4830 77,036 1,4882 79,046
1,4727 72,964 1,4779 75,035 1,4831 77,075 1,4883 79,084
1,4728 73,004 1,4780 75,074 1,4832 77,113 1,4884 79,123
1,4729 73,044 1,4781 75,114 1,4833 77,152 1,4885 79,161
1,4730 73,084 1,4782 75,153 1,4834 77,191 1,4886 79,199
96 1,4731 73,124 1,4783 75,193 1,4835 77,230 1,4887 79,238
1,4732 73,164 1,4784 75,232 1,4836 77,269 1,4888 79,276
1,4733 73,204 1,4785 75,272 1,4837 77,308 1,4889 79,314
1,4734 73,244 1,4786 75,311 1,4838 77,347 1,4890 79,353
1,4735 73,285 1,4787 75,350 1,4839 77,386 1,4891 79,391
1,4736 73,325 1,4788 75,390 1,4840 77,425 1,4892 79,429
1,4737 73,365 1,4789 75,429 1,4841 77,463 1,4893 79,468
 M
TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado

20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,4894 79,506 1,4946 81,480 1,4998 83,425 1,5050 85,343

1,4895 79,544 1,4947 81,518 1,4999 83,463 1,5051 85,379
1,4896 79,582 1,4948 81,555 1,5000 83.500 1,5052 85,416
1,4897 79,620 1,4949 81,593 1,5001 83,537 1,5053 85,452
1,4898 79,659 1,4950 81,631 1,5002 83,574 1,5054 85,489
1,4899 79,697 1,4951 81,668 1,5003 83,611 1,5055 85,525
1,4900 79,735 1,4952 81,706 1,5004 83,648 1,5056 85,562
1,4901 79,773 1,4953 81,744 1,5005 83,685 1,5057 85,598
1,4902 79,811 1,4954 81,781 1,5006 83,722 1,5058 85,635
1,4903 79,850 1,4955 81,819 1,5007 83,759 1,5059 85,672
1,4904 79,888 1,4956 81,856 1,5008 83,796 1,5060 85,703
1,4905 79,925 1,4957 81,894 1,5009 83,833 1,5061 85,744
1,4906 79,964 1,4958 81,932 1,5010 83,870 1,5062 85,781
1,4907 80,002 1,4959 81,969 1,5011 83,907 1,5063 85,817
1,4908 80,040 1,4960 82,007 1,5012 83,944 1,5064 85,854
1,4909 80,078 1,4961 82,044 1,5013 83,981 1,5065 85,890
1,4910 80,116 1,4962 82,082 1,5014 84,018 1,5066 85,927
1,4911 80,154 1,4963 82,119 1,5015 84,055 1,5067 85,963
1,4912 80,192 1,4964 82,157 1,5016 84,092 1,5068 86,000
1,4913 80,231 1 4965 82,194 1,5017 84,129 1,5069 86,036
1,4914 80,269 1 4966 82,232 1,5018 84,166 1,5070 86,072
1,4915 80 307 1,4967 82,269 1,5019 84,203 1,5071 86,109
1,4916 80 345 1,4968 82,307 1,5020 84,240 1,5072 86,145
1,4917 80,383 1,4969 82,344 1,5021 84,277 1,5073 86,182
1,4918 80,421 1,4970 82,381 1,5022 84,314 1,5074 86,218
1,4919 80,459 1,4971 82,419 1,5023 84,351 1,5075 86,254
1,4920 80,497 1,4972 82,456 1,5024 84,333 1,5076 86,291
1,4921 80,534 1,4973 82,494 1,5025 84,424 1,5077 86,327
1,4922 80,572 1,4974 82,531 1,5026 84,461 1,5078 86,363
1,4923 80,610 1,4975 82,569 1,5027 84,498 1,5079 86,399
1,4924 80,648 1,4976 82,606 1,5028 84,535
1,4925 80,686 1,4977 82,643 1,5029 84,572
1,4926 80,724 1,4978 82,681 1,5030 84,609
1,4927 80,762 1,4979 82,718 1,5031 84,645
1,4928 80,800 1,4980 82,755 1,5032 84,682
1,4929 80,838 1,4981 82,793 1,5033 84,719
1,4930 80,876 1,4982 82,830 1,5034 84,756
1,4931 80,913 1,4983 82,867 1,5035 84,792
1,4932 80,951 1,4984 82,905 1,5036 84,829
1,4933 80,989 1,4985 82,942 1,5037 84,866
1,4934 81,027 1,4986 82,979 1,5038 84,903
1,4935 81,065 1,4987 83,016 1,5039 84,939
1,4936 81,103 1,4988 83,054 1,5040 84,976
1,4937 81,140 1,4989 83,091 1,5041 85,013
1,4938 81,178 1,4990 83,128 1,5042 85,049
1,4939 81,216 1,4991 83,165 1,5043 85,086 97
1,4940 81,254 1,4992 83,202 1,5044 85,123
1,4941 81,291 1,4993 83,240 1,5045 85,159
1,4942 81,329 1,4994 83,277 1,5046 85,195
1,4943 81,367 1,4995 83,314 1,5047 85,233
1,4944 81,405 1,4996 83,351 1,5048 85,269
1,4945 81,442 1,4997 83,388 1,5049 85,306
 TABLA Il

GRADO BRIX
Temp.
°C 0 5 10 15 20 25 30 40 50 60 70

10 0,50 0,54 0,58 0,61 0,64 0,66 0,68 0,72 0,74 0,76 0,79
11 0,46 0,49 0,53 0,55 0,58 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,71
12 0,42 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,61 0,63
13 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0.48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
14 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48
RESTAR
15 0,27 0,29 0,31 0,33 0,34 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39 0,40
16 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,28 0,30 0,30 0,31 0,32
17 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23 0,24
18 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16 0,16
19 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08

21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08
22 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,16
23 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24
24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32
25 0,33 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,40 0,40 0,40
SUMAR
26 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,48 0,48 0,48
27 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,55 0,55 0,56 0,56 0,56 0,56
28 0,56 0,57 0,60 0,61 0,62 0,63 0,63 0,64 0,64 0,64 0,64
29 0,64 0,66 0,68 0,69 0,71 0,72 0,72 0,73 0,73 0,73 0,73
30 0,72 0,74 0,77 0,78 0,79 0,80 0,80 0,81 0,81 0,81 0,81

2. DENSIDAD 2.4. Procedimiento.

Si el líquido a analizar contiene una apreciable
2.1. Principio. cantidad de gas carbónico, conviene eliminar
La densidad (20°/20ºC) del líquido a analizar completamente éste agitando fuertemente en un
se determina por medio del picnómetro. Erlenmeyer y filtrarlo a continuación por medio de
un filtro cubierto de un vidrio de reloj.
2.2. Material y aparatos. 2.4.1 Determinación del peso del picnómetro
2.2.1. Estufa. vacío: Limpiar el picnómetro con Mezcla crómica
2.2.2. Desecador. DERQUIM, caliente si es necesario; después
2.2.3. Baño a 20°C. enjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS.
2.2.4. Balanza analítica sensible a 0,1 mg. Secar durante tres horas en la estufa a 105-
2.2.5. Picnómetro Reischauer de 50 ml o si- 108ºC. Enfriar en desecador hasta temperatura
milar. ambiente y expresar el resultado con cuatro cifras
El picnómetro Reischauer consiste en un decimales.
matraz de 50 ml de capacidad, cerrado con 2.4.2. Determinación del peso del picnómetro
un capuchón esmerilado provisto de un cuello de lleno de agua. Llenar el picnómetro hasta la marca
6 cm de longitud y 4 mm de diámetro interior. con Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un baño de
2.2.6. Erlenmeyer de 500 ml. agua a 20ºC durante veinte minutos. Estando la
98 2.2.7. Embudo de 10 cm de diámetro. temperatura equilibrada, enrasar el picnómetro
2.2.8. Tubos capilares. (siempre sumergido en el baño de agua) con la
ayuda de un capilar.
2.3. Reactivos. Secar la parte vacía del cuello del picnómetro
131074 Agua PA-ACS por medio del papel de filtro.
502612 DERQUIM Mezcla crómica Colocar el tapón, retirar el picnómetro del
Papel de filtro baño de agua y secar cuidadosamente. El peso

del picnómetro lleno de agua debe ser determina-
do con una precisión de cuatro cifras decimales.
2.4.3. Determinación del peso del picnómetro
lleno de muestra: Después de haber vaciado el
picnómetro, lavar varias veces con la muestra y
proceder como en 2.4.2., sustituyendo el Agua
PA-ACS por zumo de uva.
2.5. Cálculos.
Calcular la densidad 20º/20°C aplicando la
siguiente fórmula:
c-a
d = ———
b-a
Siendo:
a = Peso picnómetro vacío.
b = Peso picnómetro lleno de agua hasta la
marca.
c = Peso picnómetro lleno de líquido para
analizar hasta la marca.
La densidad obtenida debe expresarse con
una precisión de cuatro cifras decimales.
2.6. Referencias.
Federation Internationale des Producteurs de
Jus de Fruits. Método número 1, 1968.
3. pH
3.1. Principio.
Medida potenciométrica a 20ºC, previa elimi-
nación del dióxido de carbono por agitación en
frío y con vacío parcial.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. pH-metro.
3.2.2. Electrodo/s para medida de pH.
3.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO
272168 Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02
(20ºC) ST
272170 Tampón, Solución pH 7,00 ± 0,02
(20ºC) ST
3.3.1. Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02
(20ºC) ST o prepararla disolviendo 10,211 g de
Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO (KHC6H 4O 4)
(secado una hora a 105ºC) en un litro de Agua PA-
ACS a 20ºC.
3.4. Procedimiento.
Introducir un volumen adecuado de muestra
en un kitasato. Conectar a vacío agitando al mis-
mo tiempo el matraz, hasta eliminación del gas
carbónico.
M
Tomar un volumen de muestra exento de dióxi-
do de carbono y determinar el pH.
3.5. Expresión de los resultados.
Expresar el pH medido a 20ºC con uno o dos
decimales, según la precisión del aparato.
3.6. Observaciones.
3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar los
electrodos con agua destilada y secarlos con
papel de filtro.
3.6.2. El electrodo de calomelanos debe ser
llenado de tiempo en tiempo de solución saturada
de ClK.
3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conser-
vado en agua y el de calomelanos en solución
saturada de ClK. Los electrodos combinados
deben ser conservados en solución saturada de
ClK.
3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de las
soluciones tampones siguiendo las indicaciones
particulares del fabricante del aparato.
3.7. Referencias.
Federation International des Producteurs de
Jus de Fruits. Método número 11, año 1968.
4. ACIDEZ TOTAL
4.1. Principio.
Valoración potenciométrica a pH=8,1 de la aci-
dez del zumo de uva, previa eliminación del dióxi-
do de carbono.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidas
de pH.
4.2.2. Agitador magnético.
4.3. Reactivos.
171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
4.4. Procedimiento.
Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dióxi-
do de carbono, obtenido como en 3.4, y llevar a
un vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner en
marcha el agitador y valorar con solución 4.3 has-
ta pH 8,1 a 20ºC.
Mantener en marcha el agitador durante la
operación, que debe durar, como mínimo, cinco
minutos.
4.5. Cálculos. 99
Calcular la acidez total expresada en meq/l,
con una aproximación de 0,1 meq/l, o en gramos
de ácido tartárico/l.
 V 181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
Acidez total (meq/l) = 10 ——
2 5.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Eta-
V convenientemente.
Acidez total (g ac.tartárico/l) = 0,75 ——
2 0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
Siendo:
V= Volumen, en ml, de solución de Sodio
Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
4.6. Referencias
Recuil des Méthodes Internationales d’Analyse
des Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3.
5. ACIDEZ VOLATIL
5.1. Principio.
Separación de los ácidos volátiles del zumo de
uva por arrastre con vapor de agua, evitando la
presencia de dióxido de carbono en el destilado.
Valoración con solución de sodio hidróxido, des-
contando los contenidos de ácido sórbico y de
dióxido de azufre libre y total.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Aparato para destilación (ver figura 21.I
pág. 52).
5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml
(a). El agua condensada en el tubo de unión del
matraz con el borboteador, se purga por el purga-
dor (c).
5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilíndrico de
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo
reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de
diámetro con un orificio central de 29 mm. El tubo
(d) por el que entra el vapor en el borboteador
debe llegar a 1cm del fondo.
5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mm
de diámetro y 50 cm de altura.
5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm de
longitud útil, colocado verticalmente.
5.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131066 Acido L(+) Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE
(o 171071 Agua de Barita solución
saturada RE)
131074 Agua PA-ACS
100 171096 Almidón soluble RE
121085 Etanol 96% PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
182153 Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV
5.3.1. Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV
nol 96% PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
5.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
determinar el factor.
5.3.4. Almidón soluble RE.
5.4. Procedimiento
Alimentar el generador de vapor con Agua de
Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta
unos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador
20 ml de zumo de uva exento de gas carbónico,
como en 3.4. Añadir al zumo de uva unos 0,5 g de
Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marcha
el generador de vapor, manteniendo abierta la sali-
da del tubo purgador del vapor; después de cerrar
éste, calentar el borboteador. Durante la operación
se regula el calentador de forma que el volumen del
líquido en el borboteador no pase sensiblemente
de los veinte ml iniciales.
Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml.
Valorar con Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N)
SV en presencia de dos gotas de Fenolftaleína
como indicador.
Valorar el dióxido de azufre libre en este mismo
destilado, añadiendo al terminar la valoración
anterior una gota de Acido Clorhídrico 37%
PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valoran-
do el dióxido de azufre libre con solución de Yodo
0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón solu-
ble RE como indicador y un cristal de Potasio
Yoduro PA-ISO.
Para determinar el dióxido de azufre combina-
do con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución
saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-
ACS-ISO (el liquido toma un color rosa pálido) y
valorar nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
5.5. Cálculos.
Calcular la acidez volátil expresada en meq/l o
en g de ácido acético/l.
Acidez volátil (meq/l)=5(V/2-V’/10-V’’/20)
Acidez volátil (g/l ácido acético)=0,3(V/2-
V’/10-V”/20)
Siendo:
V = Volumen en ml utilizados de solución de
sodio hidróxido 0,05N.
V’ = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
la oxidación del dióxido de azufre libre.
V” = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
la oxidación del dióxido de azufre combi-
nado con el acetaldehído.

5.6. Observaciones.
5.6.1. La determinación de la acidez volátil se
efectuará inmediatamente después de la apertura
del envase.
5.6.2. En la destilación del zumo de uva para
la determinación de la acidez volátil, el ácido sór-
bico pasa casi en su totalidad al destilado, fal-
seando el resultado del análisis. Efectuar la
corrección.
100 mg de ácido sórbico equivalen a 0,892
meq = 0,0535 g de ácido acético.
5.6.3. La corrección de la acidez volátil se rea-
M
liza según la norma Jaulmes, descontándose Ia
totalidad del contenido en dióxido de azufre libre y
la mitad del contenido de dióxido de azufre total.
6. SOLIDOS SOLUBLES
El contenido en sólidos solubles expresado en
g/l se calcula a partir del valor de la densidad,
obtenida según el método oficial número 2 y utili-
zando la tabla adjunta.

TABLA 6.1

Estracto seco total (g/l)

Densidad Tercer decimal de la densidad relativa

relativa
con dos
decimales 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,8
1,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2 101
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 527,8 530,5 533,3 536,0 538,7 541,4 544,1 546,8 549,6 552,3

1,21 555,0 557,7 560,4 563,1 565,8 568,5 571,2 573,9 576,6 579,3
 TABLA 6.1

(Continuación)

Densidad Tercer decimal de la densidad relativa

relativa
con dos
decimales 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

1,22 582,0 584,8 587,5 590,2 593,0 595,7 598,4 601,1 603,9 606,6
1,23 609,3 612,1 614,8 617,5 620,3 623,0 625,7 628,4 631,2 633,9
1,24 636,6 639,4 642,1 644,9 647,4 650,3 653,1 655,8 658,6 661,3

1,25 664,0 666,8 669,5 672,3 675,0 677,7 680,5 683,2 686,0 688,7

1,26 691,4 694,2 697,0 699,8 702,5 705,3 708,1 710,8 713,6 710,4
1,27 719,1 721,9 724,7 727,4 730,2 732,9 735,7 738,5 741,2 744,0
1,28 746,7 749,5 752,3 755,1 757,8 760,6 763,4 766,1 768,9 771,7
1,29 774,4 777,2 780,0 782,8 785,6 788,3 791,1 793,9 796,7 799,5

1,30 802,3 805,0 807,8 810,6 813,4 816,2 819,0 821,8 824,6 827,4

1,31 830,2 833,1 835,9 838,7 841,5 844,3 847,1 849,9 852,7 855,5
1,32 858,3 861,2 864,0 866,8 869,6 872,4 875,3 878,1 880,9 883,7
1,33 886,5 889,4 892,2 895,0 897,9 900,7 903,5 906,4 909,2 912,0
1,34 914,8 917,7 920,5 923,3 926,2 929,0 931,8 934,7 937,5 940,3
1,35 943,1

TABLA DE INTERPOLAR

4° decimal
de la densidad
relativa g/l del extracto seco

1 0,26
2 0,52
3 0,78
4 1,04
5 1,30
6 1,56
7 1,82
102 8 2,08
9 2,34

7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES
7.1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reducto-
ras distintas de los azúcares por defecación, inver-
sión y posterior valoración basada en la acción
reductora de los azúcares sobre una solución
cupro-alcalina.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Material necesario para volumetrías.
7.2.2. Baño de agua.
7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de
reflujo.
7.3. Reactivos
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato
PA-ACS
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE
131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV
121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA
7.3.1. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
7.3.2. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.
7.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
7.3.4. Solución de Potasio Hidróxido al 30%.
Disolver unos gramos de Potasio Hidróxido 85%
lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de Agua
PA-ACS.
7.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%. Use-
se Potasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PA-
ACS hasta la concentración deseada. Conservar en
frasco topacio.
7.3.6. Solución de Almidón al 1%. Disolver 1 g
de Almidón soluble RE con Agua PA-ACS, enra-
sando a 100 ml.
7.3.7. Solución de Carrez I:
Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3-
hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS.
7.3.8. Solución de Carrez II:
Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en un
litro de Agua PA-ACS.
7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien pre-
pararlo de la siguiente forma:
M
Disolver 50 g de Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-
ISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de Sodio
Carbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de Agua
PA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclar
con cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml
de Agua PA-ACS. Añadir a la solución anterior y
enrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l.
7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
7.3.11. Solución de Fenolftaleína: Disolver 0,1 g
de Fenolftaleína PA-ACS en 100 ml de Etanol 96%
v/v PA.
7.4. Procedimiento.
7.4.1. Preparación de la muestra: Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de
500 ml. Añadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de la
solución Carrez I; mezclar y añadir 5 ml de la solu-
ción Carrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS.
Dejar en reposo diez minutos y filtrar.
7.4.2. Inversión de los azúcares: Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra preparada según (7.4.1.)
y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, según la dilu-
ción a emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 ml
y añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 1-hidrato PA-
ACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70°C en
un baño de agua, mantenerlo durante cinco minu-
tos a esa temperatura. Comprobar la temperatura
con un termómetro introducido en la disolución.
Enfriar inmediatamente el matraz a 20°C, quitar el
termómetro y aclararlo. Neutralizar el contenido con
solución de Potasio Hidróxido al 30%, utilizando
Fenolftaleína como indicador. Añadir unas gotas de
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO hasta que el
color de la Fenolftaleína desaparezca. Enrasar el
matraz con Agua PA-ACS.
7.4.3. Determinación de los azúcares totales:
La solución de la muestra no debe contener más
de 50 mg de azúcares reductores. Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra preparada según
(7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de la
solución de Luff-Schoorl (7.3.9.). Añadir al matraz
unas perlas de vidrio y conectar el refrigerante de
reflujo. Calentar el matraz con llama potente
durante dos minutos y mantener a ebullición
durante diez minutos exactos. Enfriar inmediata-
mente en agua. Cuando esté completamente frío,
añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
(7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solución de
Acido Sulfúrico (7.3.1.). Añadir 2 ml de la solución
de Almidón (7.3.6.) y valorar el contenido del
matraz con solución de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l
(0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloración 103
blanca cremosa. Si se hubieran empleado menos
de 5 ml en la valoración, repetir la determinación
utilizando una dilución de la muestra más ade-
cuada.
Realizar en paralelo una determinación en blan-
co, empleando 25 ml de Agua PA-ACS.
 7.4.4. Azúcares reductores: Para la determina-
ción de azúcares reductores seguir el mismo proce-
dimiento suprimiendo la inversión (7.4.2.).
7.5. Cálculos.
Sea D la diferencia entre lo gastado de Sodio
Tiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra.
La concentración de azúcares totales expresados
en glucosa se obtiene del valor D en la tabla, inter-
polando en caso necesario y multiplicando por el
factor de dilución.
7.6. Referencias.
Federation International des Producteurs de Jus
de Fruits. Método número 4. Año 1985.
8. ACIDO ASCORBICO
8.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del
ácido ascórbico por cromatografía de líquidos de
alta eficacia, detectándolo en el ultravioleta a
268 nm.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Equipo de filtración de muestra y disolven-
te para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.
8.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con
detector de ultravioleta de longitud de onda variable
y registrador.
8.2.3. Columna NH 2 - Lichorsob de 250 x
4,6 mm fr 10 mm o similar.

8.3. Reactivos.
263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC
131013 Acido L(+)-Ascórbico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
Tabla 7,1 PA-ACS-ISO

Para 25 ml de reactivo de Luff-Schoorl 8.3.1. Solución patrón de Acido Ascórbico de

300 mg/l, preparada con Acido L(+) - Ascórbico
D = ml de Tiosulfato mg de Glucosa Diferencia PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada en
matraz color topacio.
1 2,4 2,4 8.3.2. Solución A: Tampón fosfato pH 3,5. Diso-
2 4,8 2,4 lución 0,005M de Potasio di-Hidrógeno Fosfato
3 7,2 2,5 PA-ACS-ISO (KH2PO4): Filtrar esta solución con
4 9,7 2,5 (8.2.1.).
5 12,2 2,5 8.3.3. Solución B: Acetonitrilo-gradiente HPLC.
6 14,7 2,6
7 17,2 2,6 8.4. Procedimiento.
8 19,8 2,6 8.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:
9 22,4 2,6 Fase móvil: Tampón Potasio di-Hidrógeno Fosfa-
10 25,0 2,6 to/Acetonitrilo-gradiente HPLC: 60/40 (v/v).
11 27,6 2,7 Flujo : 1 ml/minuto.
12 30,3 2,7 8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
13 33,0 2,7 entre 10 y 20 ml de la solución patrón (7.3.1.) y cal-
14 35,7 2,7 cular el factor de respuesta.
15 38,5 2,8
16 41,3 2,9 Co
17 44,2 2,9 Factor de respuesta (F) = ––––
18 47,1 2,9 Ap
19 50,0 3,0
20 53,0 3,0 Siendo:
21 56,0 3,0 Co = Concentración en mg/l de ácido ascór-
22 59,1 3,1 bico.
23 62,2 Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.

104 8.4.3. Determinación: Homogeneizar. Filtrar

mediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cro-
matógrafo.

8.5. Cálculos.
El contenido de ácido ascórbico, expresado en

mg/l (sin decimales), se obtendrá mediante la
siguiente fórmula:
Acido ascórbico (mg/l) = F x Ac
Siendo:
F = Factor de respuesta.
Ac = Area del pico del ácido ascórbico en la
muestra.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La determinación del ácido ascórbico se
realizará inmediatamente después de la apertura
del envase.
8.6.2. Con este método no se determina ácido
dehidroascórbico.
9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA
9.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de
glucosa y fructosa por cromatografía de líquidos de
alta eficacia con detector de índice de refracción.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Equipos de filtración de muestra y disol-
ventes para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.
9.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con
detector de índice de refracción y registrador.
9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna que
permita la separación de glucosa y fructosa.
9.2.4. Horno para columna.
9.3. Reactivos.
124559 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódico Cálcica PA
131074 Agua PA-ACS
212236 Agua Desionizada QP
121211 Calcio Acetato x-hidrato PA
142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP)
PRS-CODEX
121341 D(+)-Glucosa PA
9.3.1. Soluciones patrón de Glucosa y Fructosa
al 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolvien-
do 10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRS-
CODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PA-
ACS.
9.4. Procedimiento.
9.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas
para la columna Sugar-Pack:
Fase móvil: Solución de 20 mg/l de Calcio Ace-
tato x-hidrato PA o Acido Etilendiaminotetraacético
Sal Disódico Cálcica PA en Agua Desionizada QP y
Agua PA-ACS.
Flujo : 0,4-0,5 ml/min.
Temperatura del horno : 90-95° C.
M
9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatógrafo una
cantidad conocida de la solución patrón y calcular
los factores de respuesta.
Co
Factor de respuesta (F) = ––––
Ap
Siendo:
Co = Concentración en g/l del patrón.
Ap = Area del pico patrón en el cromatograma.
9.4.3. Determinación: Filtrar la muestra mediante
los equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una can-
tidad conocida en la columna.
9.5. Cálculos
El contenido en glucosa y fructosa, expresado
en g/l, se obtiene mediante la siguiente fórmula:
Glucosa (g/l) = F1 x A1 x f
Fructosa (g/l) = F2 x A2 x f
Siendo:
F1 = Factor de respuesta de la glucosa.
F2 = Factor de respuesta de la fructosa.
f = Factor de dilución.
A1 = Area del pico de glucosa en la muestra.
A2 = Area del pico de fructosa en la muestra.
9.6. Observaciones.
Los factores de respuesta deben calcularse
varias veces durante una sesión. Es pues recomen-
dable tener termostatizado el detector.
10. NITROGENO TOTAL
10.1. Principio.
Digestión del producto con ácido sulfúrico con-
centrado, en presencia de catalizador, en la cual se
transforma el nitrógeno orgánico en iones amonio,
que en medio fuertemente básico es desplazado en
forma de amoníaco, y recogido sobre ácido bórico.
La posterior valoración con ácido clorhídrico per-
mite el cálculo de la cantidad inicialmente presente
de nitrógeno orgánico y amoniacal en la muestra.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Aparato Kjeldahl.
10.3. Reactivos. 105
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
121085 Etanol 96% v/v PA
 171327 Fenolftaleína solución 1% RE
Papel Tornasol
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
141625 Selenio metal polvo PRS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
171759 Verde de Bromocresol indicador
RE-ACS
10.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulve-
rizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g de
Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal pol-
vo PRS.
10.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel Tor-
nasol.
10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo
(C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromo-
cresol indicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Eta-
nol 96% v/v PA.
10.3.5. Solución de Acido Bórico al 1%. Pesar
10 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO, disolver con Agua
PA-ACS, añadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasar
a 1 litro con Agua PA-ACS.
10.3.6. Solución de Sodio Hidróxido al 40%. Disol-
ver Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.
10.3.7. Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV.
10.4. Procedimiento.
Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo de
uva y añadir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Evaporar hasta consistencia siruposa. Añadir 10 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador
(10.3.2.), continuar calentando primero lentamente y
después enérgicamente hasta decoloración, prose-
guir unos minutos más. Si es necesario se van aña-
diendo nuevas dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
de 5 en 5 ml.
Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionar
unas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y llevarlo
al aparato de destilación. En un vaso cilíndrico de
unos 200 ml añadir 25 ml de Acido Bórico PA-ACS-
ISO (10.3.5.). Añadir al matraz solución de Sodio
Hidróxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para viraje
de la Fenolftaleína solución 1% RE. Conectar el apa-
rato de destilación con el generador de vapor de agua
y comenzar el arrastre del Amoníaco recogiendo el
destilado en la solución de Acido Bórico (10.3.5.).
Después de quince-veinte minutos, comprobar
con Papel de Tornasol si una gota del destilado no
acusa reacción alcalina. En este caso separar el vaso
106 y proceder a la valoración. Valorar con Acido Clorhídri-
co 0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7).
10.5. Cálculo.
El contenido en nitrógeno expresado en mg/l
vendrá por la siguiente fórmula:
700 (V1- V0)
Nitrógeno (mg/l) = –––––––––––––
V
Siendo:
V = Volumen, en ml, utilizados de muestras.
V1 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-
hídrico empleado en la valoración.
V0 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-
hídrico empleado en el blanco.
10.6. Observaciones.
Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podrán
utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos,
adaptándose a las especificaciones del equipo.
10.7. Referencias.
Recueil des Methodes Internationales d’Analyse
des Vins. O. I. V. A. (40). 1969.
11. ETANOL
11.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del
etanol por cromatografía gaseosa.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
11.2.2. Columna cromatográfica. Columna de
2 m de longitud y 2 mm de diámetro interno, relleno
de Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otra
columna que permita la separación y cuantificación
del etanol.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
351085 Etanol 96% v/v CG
354457 2-Propanol CG
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Condiciones cromatográficas: Las condi-
ciones cromatográficas orientativas para la columna
de Porapak son: Gas portador nitrógeno 35 ml/min.;
temperatura del horno: 130° C; temperatura del
inyector y del detector: 180° C.
11.4.2. Calibrado.
11.4.2.1. Patrón interno: Solución al 10% (v/v) de
2-Propanol CG en Agua PA-ACS
11.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución
de Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga el
porcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra.
11.4.2.3. Solución de calibrado: A 100 ml de la
solución patrón (11.4.2.2.) se le ha de añadir 1 ml de
la solución del patrón interno (11.4.2.1.) y se inyecta
1 microlitro en el cromatógrafo.
11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la mues-
tra añadir 1 ml de la solución patrón interno
(11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatógrafo.

11.5. Cálculos.
Calcular el factor de respuesta y la concentra-
ción de etanol en la muestra, aplicando las fórmulas
siguientes:
Ci x Ap
Factor de respuesta (FR) = –––––––––
Ai
Concentración en la muestra
Aim
(% en volumen) = FR x –––––––
Apm
Siendo:
Ci = Porcentaje en volumen del etanol en la
solución patrón.
Ap = Area del patrón interno en la solución
patrón.
Ai = Area del etanol en la solución patrón.
Aim = Area del etanol en la muestra problema.
Apm = Area del patrón interno en la muestra
problema.
11.6 Observaciones.
La determinación de etanol se efectuará inme-
diatamente después de la apertura del envase.
12. INDICE DE FORMOL
12.1. Principio.
Valoración de la acidez de los compuestos for-
mados por la reacción del formaldehído con los a-
aminoácidos.
12.2. Material y aparatos.
pH metro.
12.3. Reactivos.
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v
estabilizado con metanol PA-ACS
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
182155 Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV
12.3.1. Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV.
12.3.2. Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS.
12.3.3. Solución de Formaldehído. Llevar el For-
maldehído 36,5-38% p/v estabilizado con metanol
PA-ACS, a pH 8,1 mediante la solución de Sodio
Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizando
el pH-metro. Comprobar cada hora.
12.4. Procedimiento.
Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de pre-
cipitados y neutralizar con Sodio Hidróxido
0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utili-
zando el pH-metro. Añadir 10 ml de la solución de
M
Formaldehído (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de un
minuto efectuar la valoración potenciométrica de la
solución problema con la solución de Sodio Hidróxi-
do 0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1.
Si se hubieran utilizado más de 20 ml de la solu-
ción de Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV,
deberá realizarse de nuevo la valoración empleando
15 ml de solución de Formaldehído, en lugar de
10 ml.
Si la muestra contiene Anhídrido Sulfuroso, aña-
dir algunas gotas de Hidrógeno Peróxido 30% p/v
(100 vol.) PRS antes de la neutralización.
12.5 Expresión de los resultados.
El índice de formol de la muestra analizada es
igual a la cantidad de solución alcalina utilizada en la
valoración expresada en ml de sodio hidróxido 0,1N
y que corresponden a 100 ml de zumo de uva.
12.6. Referencias.
Federation Internationale des Producteurs de
Jus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Año 1984.
13. PROLINA
13.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reac-
ción con ninhidrina en medio ácido.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.
13.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita efectuar lecturas a 517 nm.
13.3. Reactivos.
131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
132362 Ninhidrina PA-ACS
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
del Etilenglicol PRS
13.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS
13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS
1:1 (v/v).
13.4. Procedimiento.
Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a
50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluida
e introducirla en un tubo de ensayo con tapón de
rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico 98% PA-
ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al 3%. Cerrar 107
herméticamente el tubo e introducirlo en un baño de
agua hirviendo durante catorce o quince minutos,
añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de
2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v).
A continuación efectuar la lectura de la absor-
ción a 517 nm después de cinco minutos y antes
 de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo el
procedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de Agua
PA-ACS en vez de la solución problema.
13.5. Interpretación de los resultados.
Calcular el contenido en prolina por compara-
ción con una curva patrón que comprenda concen-
traciones entre 5 y 50 mg/l.
13.6. Referencias.
C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228.
Co
Factor de respuesta (F) = –––––
Ap
Siendo:
Co = Concentración en mg/l de ácido sórbico.
Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.
14.4.3. Determinación: Poner 10 ml de zumo de
uva en un matraz de 50 ml y enrasar con Metanol
HPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectar
entre 10 y 20 µl en el cromatógrafo.

14.5. Cálculos.
14. ACIDO SORBICO El contenido en ácido sórbico expresado en mg/l
se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
14.1. Principio. Acido Sórbico (mg/l) = F x A1 x f
Separación, identificación y cuantificación del
ácido sórbico por cromatografía de líquidos de alta Siendo:
eficacia y detección en ultravioleta a 230 nm. F = Factor de respuesta.
A1 = Area del pico del ácido sórbico en la
14.2. Material y aparatos. muestra.
14.2.1. Equipos de filtración de muestra y de f = Factor de dilución de la muestra.
solventes, para eliminar partículas superiores a
0,5 mm. 14.6. Observaciones.
14.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con La sensibilidad puede aumentarse efectuando
detector de ultravioleta de longitud de onda variable lecturas a 250 nm.
y registrador.
14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mm 14.7. Referencias.
o similar. T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmit-
tel-Rundschau 80, Jahrf/Heft 3/1984.
14.3. Reactivos.
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
15. ACIDO BENZOICO
131074 Agua PA-ACS
261091 Metanol HPLC 15.1 Principio.
122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato Separación, identificación y cuantificación del
PA ácido benzoico por cromatografía de líquidos de
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato alta eficacia y detección en el ultravioleta a 230 nm.
PA-ACS-ISO
15.2. Material y aparatos.
14.3.1. Solución patrón de 50 mg/l de Acido Como en 14.2.
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC.
14.3.2. Solución tampón de fosfatos de pH = 15.3. Reactivos.
6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrógeno Fosfato 121014 Acido Benzoico PA
3-hidrato PA (K2HPO4.3H2O) y 2,5 g de Potasio di- 131074 Agua PA-ACS
Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4) en un 261091 Metanol HPLC
litro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solución con 122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato
(12.4.1.). PA
14.3.3. Metanol HPLC. 131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Condiciones cromatográficas orientati- 15.3.1. Solución patrón de Acido Benzoico PA
vas: Fase móvil: Metanol HPLC-tampón fosfato en Metanol HPLC de 50 mg/l.
108 10:90 (v/v). 15.3.2. Como en 14.3.2.
Flujo : 1 ml/min. 15.3.3. Como en 14.3.3.
14.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
entre 10 y 20 ml de la solución patrón (14.3.1.) y 15.4 Procedimiento.
calcular el factor de respuesta. Como en 14.4., siendo en este caso Co la concen-
tración en mg/l de Acido Benzoico en la solución
patrón (15.3.1.).
 M
15.5. Cálculos. Siendo:
El contenido en ácido benzoico expresado en Co = Concentración, en mg/l, de hidroximetilfur-
mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula: fural.
Acido benzoico (mg/l) = F x A1 x f Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.
Siendo:
F = Factor de respuesta. 16.4.3. Determinación: Inyectar en el cromató-
A1 = Area del pico del ácido benzoico en la grafo 20 µl de la muestra filtrada.
muestra.
f = Factor de dilución de la muestra. 16.5. Cálculos.
El contenido en hidroximetilfurfural expresado en
15.6. Observaciones. mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
La sensibilidad puede aumentarse efectuando Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A1 x f
lecturas a 217 nm.
Siendo:
15.7. Referencias. F = Factor de respuesta
Como en 14.7. A1 = Area del pico de HMF en la muestra
f = Factor de dilución de la muestra.
16. HIDROXIMETILFURFURAL

16.1 Principio. 17. CENIZAS

Separación, identificación y cuantificación del
hidroximetilfurfural por cromatografía de líquidos de
alta eficacia y detección en el ultravioleta a 285 nm.
16.2. Material y aparatos.
16.2.1. Equipos de filtración de muestra y de
solventes, para eliminar partículas superiores a
0,5 µm.
16.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con
detector ultravioleta de longitud de onda variable y
registrador.
16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 µm
o similar.
16.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Hidroximetilfurfural
261091 Metanol HPLC
16.3.1. Solución patrón: Solución de 20 mg/l de
Hidroximetilfurfural recientemente destilado en
Metanol HPLC.
16.4. Procedimiento.
16.4.1. Condiciones cromatográficas orientati-
vas: Fase móvil: Agua Destilada y Desionizada.
tiempo de retención aproximado: 7 minutos.
Flujo 1 ml/min.
16.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
20 µl de la solución patrón (16.3.1.) y calcular el fac-
tor de respuesta.
Co
Factor de respuesta (F) = ––––––
Ap
17.1 Principio.
Incineración del residuo obtenido tras la evapo-
ración del zumo de uva realizada de manera que se
puedan obtener todos los cationes (excepto amo-
nio) en forma de carbonatos y otras sales minerales
anhidras.
17.2. Material y aparatos.
17.2.1. Cápsulas de platino o cuarzo, de unos
80 mm de diámetro, con fondo plano.
17.2.2. Baño de agua y arena.
17.2.3. Horno eléctrico regulable.
17.2.4. Balanza analítica con sensibilidad de
0,1 mg.
17.3. Procedimiento.
Poner 25 ml de zumo de uva en cápsula tarada.
Evaporar con precaución en baño de agua (17.2.2.)
hasta consistencia siruposa.
Añadir al residuo unas gotas de aceite de oliva,
calentar lentamente en baño de arena (17.2.2.),
hasta que la mayor parte de la sustancia orgánica
esté carbonizada. Introducir la cápsula en el horno
(17.2.3.) a 525° C hasta que el residuo esté blanco
(generalmente a las seis u ocho horas). Enfriar
enseguida la cápsula en un desecador (unos treinta
minutos) y pesar rápidamente.
Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no se
quema completamente. En este caso, humidificar
las cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo y
calcinar. Si fuera necesario, repetir esta operación 109
varias veces.
17.4. Cálculos.
El contenido en cenizas, expresado en gramos
por litro, vendrá dado por la siguiente fórmula:
Cenizas (g/l) = 40 x P
 Siendo:
P = Peso en g de las cenizas contenidas en
25 ml de zumo de uva.
17.5. Observaciones.
Un ligero color marrón rojizo de las cenizas, posi-
blemente de Fe2O3 es aceptado y no requiere un
posterior tratamiento.
17.6. Referencias.
Federation International des Producteurs de Jus
de Fruits. Método N° 9. Año 1962.
18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLE
EN ACIDO CLORHIDRICO AL 10%
18.1. Principio.
Tratamiento de las cenizas con ácido clorhídrico
al 10%, en las condiciones que se especifica en el
método.
18.2. Material y aparatos.
18.2.1. El mismo que en (17.2.).
18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidad
media o crisol filtrante número 3.
18.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
18.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
18.3.2. Solución de Acido Clorhídrico al 10%
(p/p).
18.3.3. Solución de Plata Nitrato de 100 g/l.
Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS hasta la concentración deseada.
18.4. Procedimiento.
Añadir a las cenizas totales en la misma cápsula
que se ha utilizado para su preparación, de 15 a
25 ml de la solución de Acido Clorhídrico (18.3.2.).
Llevar la cápsula y mantener a ebullición durante
diez minutos. Recubrir la cápsula con vidrio de reloj,
para impedir cualquier proyección.
Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cápsula a
través del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar el
papel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta que
las aguas de lavado estén exentas de Acido Clorhí-
drico, lo que se comprueba con la solución de Plata
Nitrato (18.3.3.).
110 Evaporar cuidadosamente e incinerar en el hor-
no regulado a 525° C durante una hora. Dejar
enfriar la cápsula o el crisol y pesar con una preci-
sión de 0,001 g. Repetir las operaciones de incine-
ración hasta que la diferencia de masa entre dos
determinaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g.
18.5. Cálculos.
El contenido en cenizas insoluble en ácido,
expresadas en mg/l, vendrá dado por la siguiente
expresión:
Cenizas insolubles mg/l = (P1-P0) x 40
Siendo:
P0 = Peso, en mg, de la cápsula vacía o el crisol
vacío.
P1 = Peso, en mg, de la cápsula o crisol con las
cenizas insolubles en ácido.
18.6. Referencias.
Instituto de Racionalización y Normalización del
Trabajo, UNE 34-096-81.
19. FOSFORO TOTAL
19.1. Principio.
Transformación de los compuestos fosforados y
posterior valoración espectrofotométrica como fos-
fomolibdovanadato.
19.2. Material y aparatos.
19.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro de
efectuar lecturas a 400 nm.
19.2.2. Cápsula de platino, cuarzo o similar.
19.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
122352 Amonio meta-Vanadato PA
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
19.3.1. Solución patrón de fosfatos. Disolver
0,2397 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-
ISO (KH2PO4), desecado previamente en estufa
durante dos horas a 105° C, en Agua PA-ACS y enra-
sar a 250 ml.
19.3.2. Solución de Amonio Molibdato. Disolver
60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en
900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a
1 litro.
19.3.3. Solución de Amonio meta-Vanadato.
Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en
690 ml de Agua PA-ACS caliente, añadir 300 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1
litro.
19.3.4. Solución de metamolibdovanadato. Añadir
lentamente la solución de Amonio Molibdato (19.3.2.)
sobre la solución de Amonio meta-Vanadato
(19.3.3.), agitando. Conservar la solución en frascos
de polietileno.

19.3.5. Solución de Acido Clorhídrico. Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en
(1 + 3) (v/v).
19.3.6. Solución de Acido Clorhídrico. Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en
(1 + 9) (v/v).
19.4. Procedimiento.
19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la solu-
ción patrón (19.3.1.) preparar una serie de solucio-
nes que contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20;
0,25; 0,30 y 0,35 mg de P2O5/10 ml respectiva-
mente. A continuación poner alícuotas de 10 ml de
cada solución en matraz aforado de 50 ml. Rápida-
mente añadir a cada matraz 5 ml del reactivo de
Metamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar y
tapar. Dejar reposar al menos treinta minutos.
Efectuar las lecturas de los patrones frente a la
solución 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Repre-
sentar gráficamente concentraciones frente a
absorbancias leídas.
19.4.2. Preparación de la muestra. Tomar 25 ml
de zumo de uva y obtener las cenizas según méto-
do oficial número 17. Disolver las cenizas en 10 ml
de solución de Acido Clorhídrico (19.3.5.) y evapo-
rar en baño de agua. Disolver el residuo obtenido en
10 ml de solución de Acido Clorhídrico (19.3.6.)
calentar en baño maría y transferir a matraz de
100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar y
filtrar para eliminar las materias insolubles presen-
tes.
19.4.3. Determinación. Tomar 10 ml de filtrado y
continuar como en la curva de calibrado (19.4.1.).
Si el contenido de P2O5 en las cenizas es supe-
rior a 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100
ml o efectuar diluciones hasta que el contenido de
P2O5 en la alícuota sea menor a 0,35 mg.
19.5. Cálculos.
El contenido en mg de P2O5 en 100 ml de mues-
tra se obtendrá mediante la curva de calibrado,
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
Para expresar el resultado como mg de P en
100 ml de muestra, multiplicar el resultado anterior
por 0,437.
19.6. Referencias.
Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª edi-
ción, 1984.
20. SULFATOS
20.1. Principio.
Previa eliminación del dióxido de azufre por ebu-
llición, se precipitan los iones sulfato como Bario
Sulfato, se calcina y se pesa.
20.2. Material y aparatos.
20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto de
M
ampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendi-
miento de vapor, atravesando ambos el tapón. El
matraz se coloca sobre disco metálico de 15 cm de
diámetro con abertura circular de 8 cm de diámetro.
20.2.2. Baño de agua y plancha caliente.
20.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
20.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.
20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro
2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-
ACS.
20.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
20.4. Procedimiento.
20.4.1. Eliminación del dióxido de azufre del
zumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparato
descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución
para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml de
zumo de uva por la ampolla de llave evitando que la
ebullición se pare durante esta adición. Continuar la
ebullición hasta reducir el volumen del líquido a unos
100 ml eliminando todo el dióxido de azufre.
20.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
residuo de la evaporación anterior a un vaso de
400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
(2N) SV y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota
10 ml de solución de Bario Cloruro, con la precau-
ción de no parar la ebullición y dejar reposar en
caliente, colocando el vaso sobre placa a 60°C
durante cuatro horas y en baño de agua hirviendo
durante dos horas. En el caso de pequeñas canti-
dades de precipitado, se recomienda un segundo
reposo en frío durante 12 horas. Filtrar por filtro sin
cenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PA-
ACS caliente hasta que no dé reacción con Plata
Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente
plegado a crisol de porcelana tarado, desecar, cal-
cinar y, después de enfriar en un desecador, pesar.
20.5. Cálculos.
Calcular el contenido de sulfatos expresado en
meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-
ción de ± 0,05 g/l.
Sulfato = 85,68 P meq/l. 111
Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
P = peso de las cenizas en g.
20.6. Referencias.
Recueil des Méthodes Internationales d’Analyse
des Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.
 21. ANHIDRIDO SULFUROSO
21.1. Principio.
Liberación del sulfuroso “libre” por acidificación
del zumo de uva, arrastre por corriente de aire,
oxidación por borboteo en agua oxigenada neutra
y valoración con sosa del ácido sulfúrico formado.
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso
“combinado”, que queda en el zumo de uva des-
pués de la extracción del sulfuroso “libre” y análo-
go tratamiento que en la determinación del sulfu-
roso “libre”. El sulfuroso “total” es la suma del
sulfuroso “libre” y el sulfuroso “combinado”. Puede
determinarse acidificando el zumo de uva y calen-
tando y procediendo como en los dos casos ante-
riores.
Este método es aplicable para contenidos en
anhídrido sulfuroso superiores a 10 mg/l.
21.2. Material y aparatos.
Como en 28 (a).2. de Métodos de Análisis de
Vinos pág. 59.
21.3. Reactivos.
Como en 28 (a).3. de Métodos de Análisis de
Vinos pág. 59.
21.4. Procedimiento.
21.4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. En
el matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml de
zumo de uva y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al
25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio.
Si la riqueza en SO2 del vino es pequeña, se emplea
el matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva.
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10° C.
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3 volú-
menes y dos gotas del reactivo indicador en el
matraz B y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con
Sodio Hidróxido 0,01N.
Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotear
aire (o, nitrógeno) durante 12-15 minutos. Retirar el
matraz B y valorar el ácido sulfúrico formado con
Sodio Hidróxido 0,01 N.
21.4.2. Análisis de anhídrido sulfuroso combina-
do. Después de terminar la valoración del anhídrido
sulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado y con
las dos gotas del indicador. Calentar con llama
pequeña hasta llevar a la ebullición el zumo de uva
que quedó en el matraz después de la determina-
ción anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo
del matraz, que descansará sobre chapa metálica
112 perforada con orificio de 30 mm de diámetro, para
evitar la pirogenación de los azúcares del zumo de
uva sobre las paredes del matraz.
Mantener el paso del aire o nitrógeno durante la
ebullición que durará 12-15 minutos, tiempo que se
considera suficiente para arrastrar todo el sulfuroso
combinado y después oxidarlo. Retirar el matraz B
y valorar el ácido sulfúrico formado con Sodio
Hidróxido 0,01N.
21.4.3. Anhídrido sulfurososo total. Puede deter-
minarse por la suma del anhídrido sulfuroso libre
más el anhídrido sulfuroso combinado, pero tam-
bién puede determinarse directamente, actuando
desde un principio con corriente de aire o nitrógeno
y con calor.
21.5. Cálculos.
Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso
expresado en mg/l, con una aproximación de
10 mg/l.
320 V1
Anhídrido sulfuroso = –––––––– mg/l
V2
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastados
en la valoración.
V2 = Volumen, en ml, de muestra para el análi-
sis.
21.6. Referencias.
21.6.1. Paul, F. “Mitteinlungen Klosternenberg”,
A : 8, 21, 1958.
21.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969.
22. POTASIO
22.1. Principio.
El potasio se determina por fotometría de llama
previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza-
ción parcial de los metales en la llama.
22.2. Material y aparatos.
22.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
22.2.2. Material de uso normal en laboratorio.
22.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
141392 Litio Cloruro PRS
313190 Potasio solución patrón
K = 1,000 ± 0,002 g/l AA
22.3.1. Potasio solución patrón K = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de
131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro de
Agua PA-ACS.
22.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g
de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.
22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y
7 mg/l preparadas a partir de la solución de Pota-
sio, previa adición de la cantidad necesaria de Litio
Cloruro PRS, para que el Litio se encuentre en una
proporción de aproximadamente 2.000 mg/l.

22.4. Procedimiento.
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml con
Agua PA-ACS (previa adición de la cantidad necesa-
ria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuen-
tre en una proporción de aproximadamente
2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama frente
a las soluciones de referencia a 766-770 nm.
22.5. Cálculos.
El contenido de potasio se calcula a partir del
valor obtenido en el espectrofotómetro por compa-
ración con la curva patrón, teniendo en cuenta la
dilución efectuada. Los resultados se expresan en
mg de Potasio/ 100 ml de la muestra.
22.6. Observaciones.
Puede utilizarse una solución de 40 g/l de cloruro
de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en este
caso la concentración adecuada de cloruro de cesio
en las disoluciones de la muestra y patrones entre
0,1-0,4%.
22.7. Referencias.
22.7.1. Federation International des Producteurs
de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.
23. SODIO
23.1. Principio.
El Sodio se determina por fotometría de llama
previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza-
ción parcial de los metales en la llama.
23.2. Material y aparatos.
23.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.
23.2.2. Material de uso normal en laboratorio.
23.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
141392 Litio Cloruro PRS
313192 Sodio solución patrón
Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA
23.3.1. Sodio solución patrón Na = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 2,542 g de
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en un
litro de Agua PA-ACS.
23.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g
de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.
23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/l
preparadas a partir de la solución de Sodio, previa
adición de la cantidad necesaria de Litio Cloruro
PRS, para que el Litio se encuentre en una propor-
ción de aproximadamente 2.000 mg/l.
23.4. Procedimiento.
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver
23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adición de la can-
M
tidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio
se encuentre en una proporción de aproximada-
mente 2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama
frente a las soluciones de referencia a 589 nm.
23.5. Cálculos.
El contenido de sodio se calcula a partir del valor
obtenido en el espectrofotómetro por comparación
con la curva patrón, teniendo en cuenta la dilución
efectuada. Los resultados se expresan en mg de
sodio/l de la muestra.
23.6. Observaciones.
23.6.1. Puede utilizarse una solución de 40 g/l de
cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo
en este caso la concentración adecuada de cloruro
de cesio en las disoluciones de la muestra y patro-
nes entre 0,1 y 0,4%.
23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias para
que la muestra esté en el rango de la curva.
23.7. Referencias.
23.7.1. Federation International des Producteurs
de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.
23.7.2. Métodos Associations of Official Analyti-
cal Chemist. Ed. 1984.
24. ARSENICO
24.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con
generador de hidruros.
24.2. Material y aparatos.
24.2.1. Material de uso normal en laboratorio.
24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
24.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
24.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.
24.2.5. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
24.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS 113
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas
PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
 24.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
24.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico al 32%
v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
24.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico al 1,5%.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1.000 ml.
24.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
24.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
24.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%
(p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-
ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
24.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%
(p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y
disolverlo hasta 100 ml con la solución de Sodio
Hidróxido al 1%.
24.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidra-
to al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacé-
tico Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolver-
lo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
24.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 23,5 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-
men de 100 ml.
24.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
24.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
24.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000
± 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsé-
nico III Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al
20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-
rico 1% (24.3.11.).
24.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (24.3.12.), en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
24.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de
Arsénico (24.3.13.), en un matraz aforado de
100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
24.4. Procedimiento.
24.4.1. Preparación de la muestra: En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con
114 20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullición
hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disol-
ver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la
solución resultante.
24.4.2. Preparación de los patrones de trabajos
y del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml
de la solución de Arsénico (24.3.14.) y someterlo al
mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solu-
ción contiene 10 nanogramos de Arsénico. Prepa-
rar un blanco con todos los reactivos utilizados
siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
24.4.3. Condiciones del espectrofotómetro:
Encender la fuente de alimentación de las lámparas
de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
para que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo
con las condiciones del aparato. Encender el gene-
rador de hidruros, colocando la temperatura de la
celda a 900° C, esperando hasta que se alcanza
dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del
generador de hidruros según las especificaciones
del aparato. Ajustar el flujo de argón de acuerdo
con las características del aparato.
24.4.4. Determinación: Las determinaciones de
la concentración de Arsénico se realizan por el
método de adición de patrones, por medio de
medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
condiciones especificadas en (24.4.3.), añadiendo
al matraz de reacción 3 ml de la solución (24.3.8.).
Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de
Arsénico. Lavar los matraces antes y después de
cada uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (24.3.3.). Al
construir la gráfica de adición hay que descontar el
valor de absorbancia del blanco obtenido en las
mismas condiciones anteriores, pero añadiendo
3 ml de la solución blanco. En estas condiciones el
límite de detección de la técnica es de 5 ng.
25. HIERRO
25.1. Principio.
Determinación del hierro por absorción atómica
previa mineralización de la muestra.
25.2. Material y aparatos.
25.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
25.2.2. Lámpara de hierro.
25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
25.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313182 Hierro solución patrón
Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA
25.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
25.3.2. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la con-
centración indicada.
25.3.3. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.

25.3.4. Hierro solución patrón Fe = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365
Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml de
la solución de Acido Nítrico (1+1) y diluir hasta
1.000 ml con Acido Nítrico 1% (v/v).
25.4. Procedimiento.
25.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(26.4.1.).
25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la solu-
ción patrón (25.3.4.), preparar una serie de solucio-
nes conteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro,
con Acido Nítrico al 1% (v/v).
25.4.3. Determinación. Igual que para el Plomo.
Efectuar las lecturas a 248,3 nm.
25.5. Cálculos.
Obtener el contenido de hierro de la muestra por
interpolación a partir de la curva de calibrado y
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
26. PLOMO
26.1. Principio
Determinación del plomo por absorción atómica
previa mineralización de la muestra.
26.2. Material y aparatos.
26.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
26.2.2. Lámpara de plomo.
26.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.
26.2.4. Baño de arena o placa calefactora.
26.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura.
26.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
26.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
26.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.
26.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000
± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
1000 ml con Acido Nítrico al 1%.
26.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
26.4 Procedimiento.
26.4.1. Preparación de la muestra.- Poner
100 ml de la muestra en una cápsula de platino o
cuarzo y llevarla a evaporación hasta consistencia
siruposa en baño de arena. Añadir a continuación
2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el
residuo en el baño de arena. Seguidamente introdu-
M
cir la cápsula en la mufla y mantenerla durante dos
horas a 450°C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla y
dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
cas. Un ligero color marrón rojizo en éstas, posible-
mente de Fe 2O3 es aceptado y no requiere un
posterior tratamiento.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matraz
de 10 ml, lavando la cápsula y el filtro con Agua PA-
ACS hasta el enrase.
26.4.2. Curva patrón.- Diluir alícuotas apropia-
das de la solución patrón con Acido Nítrico al 1%
para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6;
8 y 10 mg/l.
26.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
cificaciones del aparato, usando llama de aire-aceti-
leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada,
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
26.5. Cálculos.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor dilu-
ción.
26.6. Referencias.
26.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
27. ESTAÑO
27.1. Principio.
Determinación de estaño por absorción atómica,
previa digestión ácida.
27.2. Materiales y aparatos.
27.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
27.2.2. Lámpara de estaño.
27.2.3. Material de uso normal en laboratorios.
27.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
212236 Agua Desionizada QP
313180 Estaño patrón Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
27.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. 115
27.3.2. Solución de Acido Clorhídrico 7N. Diluir
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS hasta la concentración deseada.
27.3.3. Agua Desionizada
27.3.4. Estaño solución patrón Sn = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
 141304 Estaño metal, granalla PRS en 100 ml de
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta
1.000 ml con Agua Desionizada.
27.4. Procedimiento.
27.4.1. Preparación de la muestra.- Medir de 1 a
5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer.
Añadir 25 ml de solución de Acido Clorhídrico 7N.
Llevar a ebullición y mantenerla a fuego lento duran-
te cinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamen-
te a un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PA-
ACS. Agitar y filtrar con papel Watman número 1.
27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la solu-
ción patrón de Estaño, preparar una serie de solu-
ciones conteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l de
Estaño.
27.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
cificaciones del aparato usando una llama reductora
de óxido nitroso-acetileno. Medir las absorbancias
de la muestra y patrones a 286 nm.
27.5. Cálculos.
Obtener el contenido de estaño de la muestra
por interpolación a partir de la curva de calibrado.
28. COBRE
28.1. Principio
Determinación del cobre por absorción atómica,
previa mineralización de la muestra.
28.2. Material y aparatos.
28.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
28.2.2. Lámpara de cobre.
28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
28.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
28.3.1. Los utilizados para el plomo en (26.3.1.),
(26.3.2.) y (26.3.4.)
28.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir después a
116 un litro con Acido Nítrico al 1%.
28.4 Procedimiento.
28.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
el Plomo en (26.4.1.).
28.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón de Cobre
con Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones
que contengan de 1 a 5 mg de Cobre.
28.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.
Medir a 324,7 nm.
28.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de Cobre de la muestra,
teniendo en cuenta el factor de dilución.
29. ZINC
29.1. Principio.
Determinación del zinc por absorción atómica,
previa mineralización de la muestra.
29.2. Material y aparatos.
29.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-
mica.
29.2.2. Lámpara de zinc.
29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
29.3 Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.),
(26.3.2.) y (26.3.4.).
29.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783
Zinc metal, polvo PRS en el mínimo volumen nece-
sario de Acido Nítrico diluido con Agua PA-ACS
(1:1) y diluir a un litro con Acido Nítrico al 1% (v/v).
29.4. Procedimiento.
29.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
el Plomo (26.4.1.).
29.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (29.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5
a 1 mg/l.
29.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,5 nm.
29.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zinc para la
muestra, teniendo en cuenta el factor concentra-
ción o dilución.
M

117
 Productos derivados
de la uva:
Vinagres

118

1. EXTRACTO TOTAL
1.1. Principio.
El extracto seco total se define como el conjunto
de todas las sustancias que, en condiciones físicas
determinadas, no se volatilizan. En estas condicio-
nes físicas deben fijarse de tal manera que las sus-
tancias componentes del extracto sufran el mínimo
de alteración.
El método está basado en una evaporación del
vinagre en baño de agua con secado posterior en
estufa regulable a 100 - 105°C.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Balanza con aproximación de 0,001 g.
1.2.2. Estufa con ventilación de aire regulable de
100 a 105°C.
1.2.3. Desecador de vidrio con ácido sulfúrico
concentrado o gel de sílice (sílice amorfa impreg-
nada con sustancia reveladora) como sustancia
desecadora.
1.2.4. Baño de agua.
1.2.5. Cápsulas de fondo plano de 5 cm de diá-
metro construidas en platino, níquel o cuarzo.
1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble en-
rase.
1.3. Procedimiento.
Agitar la muestra y filtrar a través de un papel de
filtro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagre
filtrado en una cápsula previamente tarada. Evapo-
rar en baño de agua hirviente durante 30 minutos y
mantener en la estufa durante dos horas y media a
105°C. Dejar secar la cápsula en el interior del
desecador y, una vez fría, pesar en la balanza de
precisión.
1.4. Cálculo.
El valor del extracto total del vinagre , en porcen-
taje, se hallará mediante la fórmula siguiente:
Extracto total: (M - m) 10
en la que:
M = masa, en gramos, de la cápsula con el
extracto seco.
m = masa, en gramos, de la cápsula vacía.
1.5. Referencias.
1.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 519, 30.061.
2. ACIDEZ TOTAL
(Grado acético)
2.1. Principio.
La acidez total se define como la totalidad de los
M
ácidos volátiles y fijos que contiene el vinagre expre-
sada en gramos de ácido acético por 100 ml de
vinagre.
La determinación se efectúa mediante una volu-
metría de neutralización en presencia de solución
alcohólica de fenolftaleína como indicador.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en décimas de
ml.
2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.
2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capa-
cidad.
2.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV
2.3.1. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.
2.3.2. Solución indicadora de Fenolftaleína. Se
disuelven 10 g de Fenolftaleína PA-ACS en Etanol
96% v/v PA y se completa a un litro con el mismo
solvente.
2.4. Procedimiento.
Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, en
un Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 ml
de Agua PA-ACS recién hervida y fría hasta conse-
guir una solución débilmente coloreada. Añadir seis
gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína y
agregar Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV conte-
nido en la bureta gota a gota y agitando hasta viraje
del indicador.
2.5. Cálculo.
El valor de la acidez total o grado acético del
vinagre en porcentaje se hallará mediante la fórmula
siguiente:
Acidez total o grado acético = a x 10 x 0,0300
en la que :
a =volumen, en ml, de sodio hidróxido 0,5N.
2.6. Referencias.
2.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
2.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed , página 520, 30. 068.
3. ACIDEZ FIJA
119
3.1. Principio.
La acidez fija se define como la totalidad de los áci-
dos fijos que contiene el vinagre, expresada en gra-
mos, de ácido acético por 100 ml de vinagre.
 3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Baño de agua.
3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduada
en décimas de ml.
3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.
3.2.4. Cápsulas de 200 ml de capacidad.
3.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
3.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
3.3.2. Disolución indicadora de Fenolftaleína PA-
ACS al 1% en Etanol 96% v/v PA.
3.4. Procedimiento.
Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y lle-
varlo a una cápsula de porcelana. Evaporar a
sequedad en baño de agua. Añadir de 5 a 10 ml
Agua PA-ACS recientemente hervida y volver a eva-
porar a sequedad, repitiendo esta operación cinco
veces más. Añadir, aproximadamente, 180 ml de
Agua PA-ACS recientemente hervida y fría, añadir
seis gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína
y agregar Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV con-
tenido en la bureta, gota a gota y agitando, hasta
viraje del indicador.
3.5. Cálculo.
El valor de la acidez fija del vinagre, expresado
en gramos de ácido acético por 100 ml, se hallará
mediante la fórmula siguiente:
Acidez fija = a x 10 x 0,00600
en la que:
a = volumen, en ml de sodio hidróxido 0,1N.
3.6. Referencias.
3.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
3.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 520, 30.069.
4. ACIDEZ VOLATIL
4.1. Principio.
Se define convencionalmente como valor de la
acidez volátil de un vinagre la diferencia entre los
valores de su acidez total y fija, expresadas ambas
120 en gramos de ácido acético por 100 ml de vinagre.
4.2. Cálculo.
El valor de la acidez volátil del vinagre, expresa-
do en gramos de ácido acético por 100 ml, se halla-
rá mediante la fórmula siguiente:
At - Af = acidez volátil
en la que :
At = acidez total o grado acético, expresado en
gramos de ácido acético por 100 ml.
Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre,
expresada en gramos de ácido acético por
100 ml.
4.3. Referencias.
4.3.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
4.3.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 520, 30.070.
5. SULFATOS
5.1. Principio.
Precipitación del bario sulfato en medio ácido.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml.
5.2.2. Baño de agua.
5.2.3. Estufa.
5.2.4. Desecador.
5.3. Reactivos.
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
171461 Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
5.3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.
5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO.
5.4. Procedimiento.
A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de
250 ml añadir 2 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N)
SV, calentar a ebullición e ir añadiendo gota a gota
10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g
/100 ml de BaCl2.2H2O) sin que deje de hervir la
solución. Continuar hirviendo cinco minutos mante-
niendo el volumen constante, añadiendo Agua PA-
ACS caliente siempre que sea necesario. Dejar en
reposo hasta que el sobrenadante esté claro (una
noche es suficiente, aunque no conviene sobrepa-
sar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de poro
fino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que no
dé reacción con Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
las aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar en
desecador y pesar.
5.5. Cálculo.
La proporción de sulfatos = 7,465 P g/l de K2SO4
siendo;
P = peso, en g, del producto de la calcinación.
5.6. Referencias.
5.6.1. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed. (1970).

5.6.2. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33-104-73.
6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA)
6.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la acetoína por
cromatografía de gases.
6.2. Material y aparatos.
6.2.1. Equipo de cromatografía de gases com-
puesto por:
6.2.1.1. Detector de ionización de llama.
6.2.1.2. Horno con temperatura regulable.
6.2.1.3. Registrador.
6.2.1.4. Gases: Aire-nitrógeno.
6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre Chromo-
sorb G (HP), añadiéndose un 0,5 de un reductor de
colas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 m
de longitud y 1/8 de pulgada de diámetro externo
de la columna.
6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 µl.
6.3. Reactivos.
Acetoína
131074 Agua PA-ACS
121884 1-Pentanol PA
121086 Etanol absoluto PA
142400 Calcio Hidróxido polvo 90% (USP)
PRS-CODEX
6.3.1. Acetoína.
6.3.2. 1-Pentanol PA.
6.3.3. Etanol absoluto PA.
6.3.4. Calcio Hidróxido polvo 90 % (USP) PRS-
CODEX.
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Disolución patrón.
6.4.1.1. De Acetoína: A partir de Acetoína purifi-
cada de su posible contenido en Diacetilo mediante
destilación, obtener soluciones de Acetoína que
cubran un rango de concentraciones de 10 a
500 mg/l en Agua PA-ACS.
6.4.1.2. De patrón interno: Añadir 2 ml de
1-Pentanol PA en 100 ml de Solución Hidroalcohóli-
ca al 50%.
6.4.2. Determinación.
6.4.2.1. Condiciones cromatográficas. Gas por-
tador: Nitrógeno (flujo de 12,5 mg/min.).
Temperatura horno: 70° C.
Temperatura inyector: 180° C.
Inyección : 4 o 2 µl.
Patrón interno: 1-Pentanol PA.
6.4.2.2. Método operatorio.
A cada una de las soluciones patrón de Acetoína
preparadas en 6.4.1.1., añadir solución de 1-Penta-
M
nol PA de tal forma que a las soluciones que con-
tengan de 10 a 50 mg/l de Acetoína se le añadan
15 µl y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se le
añadan 35 µl e inyectarlas a continuación, obtenien-
do la curva de calibrado (se deben efectuar dos
curvas de calibrado, una que cubra el rango de
0-50 mg/l de Acetoína y otra de 50 a 300 mg/l).
La inyección de la muestra puede efectuarse
directamente del vinagre, una vez añadido el patrón
interno, pero teniendo en cuenta que el tiempo de
retención es elevado y la concentración del acético
es muy grande, obliga a esperar un largo período
de tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Para
evitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7
las muestras, preferiblemente con Calcio Hidróxido
polvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variacio-
nes de volumen. Téngase en cuenta que la concen-
tración de Acetoína en el medio neutro puede variar
con tiempo, por lo que la neutralización debe hacer-
se inmediatamente antes de inyectar en el cromató-
grafo.
6.5. Cálculo.
Los cromatogramas obtenidos de las distintas
soluciones patrón permiten representar gráfica-
mente la relación existente entre el cociente:
Area del pico de la acetoína
–––––––––––––––––––––––––––––––
Area del pico del alcohol n-amílico
La relación de áreas obtenida para la muestra se
compara con la curva de calibrado (concentración
de acetoína /relación de áreas ), obteniéndose la
cantidad de acetoína de la muestra.
6.6. Referencia.
6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Peña y M.
C. Gómez Cordobés. Instituto de Fermentaciones
Industriales.
7. CENIZAS
7.1. Principio.
Se denominan cenizas de un vinagre el conjunto
de los productos de incineración del residuo de
evaporación de un volumen conocido del vinagre,
realizada de manera que se puedan obtener todos
los cationes en forma de carbonatos y otras sales
minerales anhidras.
7.2. Material y aparatos.
121
7.2.1. Horno eléctrico regulable.
7.2.2. Baño de agua y baño de arena.
7.2.3. Lámpara de infrarrojo.
7.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 70 mm
de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.
 7.3. Procedimiento.
Colocar 20 ml de vinagre en una cápsula tarada
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con
precaución en baño de agua hasta consistencia
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de
arena con moderación y durante una media hora.
Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli-
cación de rayos infrarrojos hasta carbonización.
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp-
sula al horno eléctrico a 525 ± 25° C y con aireación
continua. Después de cinco minutos de carboniza-
ción completa, sacar la cápsula del horno, dejar
enfriar y añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se eva-
poran en baño de agua, y llevar de nuevo al horno a
525°C.
Si la combustión de las partes carbonosas no
se consigue en 15 minutos, volver a comenzar la
operación de adición de Agua PA-ACS, evapora-
ción y recalcinación.
Después de enfriar en el desecador, pesar la cápsu-
la con las cenizas.
7.4. Cálculo.
Calcular el contenido en cenizas expresado
en g/l.
Cenizas = 50 P g/l.
P = peso, en g, de las cenizas contenidas en
20 ml de vinagre.
Dar los resultados con una aproxinación de
0,03 g/l.
7.5. Referencias.
7.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
d'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969.
7.5.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,
Ministerio de Agricultura, 1971, pág. 66.
8. INDICE DE OXIDACION
8.1. Principio.
Oxidación con potasio permanganato de las
sustancias volátiles fácilmente oxidables de los
vinagres.
8.2. Materiales y aparatos.
8.2.1. Matraz de destilación de 250 ml de capa-
cidad provisto de dispositivo de entrada de vapor
de agua para destilación por arrastre de vapor.
8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidad
122 provisto de boca esmerilada y tapón.
8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad.
8.2.4. Refrigerante de serpentín de 25 cm de
capacidad útil.
8.2.5. Calderín generador de vapor.
8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10;
20; 25 y 50 ml de capacidad.
8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduada
en décimas de ml.
8.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón Soluble RE
181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV
8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
8.3.2. Disolución valorada de Sodio Tiosulfato
1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1
Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS
y determinar el factor de la solución 0,5N obtenida.
8.3.3. Disolución de Potasio Yoduro PA-ISO al
50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO en
Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
8.3.4. Disolución indicadora de Almidón. Disol-
ver 5 g de Almidón soluble RE en 20 ml de Agua
PA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hir-
viente. Se continúa la ebullición durante cinco minu-
tos y se deja enfriar antes de su empleo. Conviene
guardarla en frascos esterilizados.
8.3.5. Disolución de Acido Sulfúrico al 50% en
volumen. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total,
expresada en ácido acético. Tomar 50 ml de vina-
gre, con la acidez debidamente ajustada, e introdu-
cir en el matraz de destilación. Pasar a su través
una corriente de vapor de agua procedente del cal-
derín descrito, a una velocidad regulada, de manera
que cuando se hayan recogido 50 ml de destilado
se conserven en el matraz de destilación aproxima-
damente 45 ml. Comprobar que la temperatura del
destilado no sobrepase 25°C. Pasar los 50 ml del
destilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Añadir
10 ml de la solución de Acido Sulfúrico 96% PA-
ACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N)
SV. Mantener el matraz durante una hora en el baño
de agua a 25°C.
Trascurrido ese tiempo, añadir 20 ml de la diso-
lución de Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclar
bien su contenido. Inmediatamente valorar el yodo
liberado con la dilolución de Sodio Tiosulfato 1 mol/l
(1N) SV. Simultáneamente, a la muestra de vinagre
llevar, en las mismas condiciones, un blanco en que
el destilado se sustituya por 50 ml de Agua PA-
ACS.
8.5. Cálculo.
El valor del índice de oxidación de hallará
mediante la fórmula siguiente:

a -b
I = –––––– x grado acético del vinagre original
8
donde:
I = índice de oxidación.
a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l
(1N) SV consumido en la valoración de la
muestra en blanco.
b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll
(1N) SV consumido en la valoración de la
muestra de vinagre diluido.
8.6. Observaciones.
8.6.1. Si el índice de oxidación resulta mayor que
15, ha de repetirse la determinación, usando 25 ml
del vinagre ajustando a 4 grados acéticos, aña-
diendo 25 ml de agua. Repetir esta reducción a la
mitad hasta que el índice de oxidación sea menor
que 15. Calcular el índice de oxidación, teniendo en
cuenta las diluciones efectuadas.
8.6.2. Esta disolución no se debe usar si presen-
ta color amarillento.
8.7. Referencias.
8.7.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33-102-73.
8.7.2. Métodos Oficiales de Análisis de la Asso-
ciation of Official Agricultural Chemists de Estados
Unidos (ed. 1970).
9. METANOL (Alcohol Metílico),
METODO DEL ACIDO
CROMOTROPICO
9.1. Principio.
Como en 37.1 de los métodos oficiales de análi-
sis de vinos.
9.2. Material y aparatos.
Como en 37.2 de los métodos oficiales de análi-
sis de vinos y matraz aforado de 25 ml.
9.3 Reactivos.
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE
131032 Acido orto-Fosfórico 85%
PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
131698 Sodio Disulfito PA-ACS
141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
9.3.1. Como 37.3.1 de los métodos oficiales de
análisis de vinos.
9.3.2. Idem.
M
9.3.3. Idem.
9.3.4. Etanol 96% v/v PA.
9.4. Procedimiento.
Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destilador
simple y recoger 15 ml de destilado en matraz afo-
rado de 25 ml sumergido en baño de hielo. Añadir
el Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vez
enrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentra-
ción del Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.).
Continuar como en 37.4. de los métodos oficiales
de análisis de vinos.
9.5.Cálculo.
Como en 37.5 de los métodos oficiales de análi-
sis de vinos.
9.6. Observaciones.
9.6.1. En vinagres normales suele ser suficiente
añadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA.
9.7. Referencia.
9.7.1. Association of Official Agricultural Che-
mists Official Methods of Analysis,1965, página
138.
10 (a). ACIDO TARTARICO
(Método cualitativo)
10 (a).1. Principio.
Precipitación del ácido tartárico en forma de po-
tasio bitartrato.
10 (a).2. Material y aparatos.
10 (a).2.1. Centrífuga.
10 (a).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO
121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
10 (a).3.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
10 (a).3.2. Solución de Precipitación. Disolver
300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g de
Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y
1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasar
a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
A baja temperatura la solución deposita peque- 123
ños cristales, por lo que se debe calentar ligera-
mente antes de emplearse.
10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA.
10 (a).4. Procedimiento.
Poner en un tubo de centrífuga 10 ml de vinagre,
 0,4 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO, 7,5 ml
de la solución de Precipitación y 2 ml de Etanol
96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hasta
que aparezca un enturbiamiento cristalino aproxi-
madamente a los diez segundos. Mantener el tubo
durante una hora a 8°C aproximadamente. Al cabo
de este tiempo agitar enérgicanente el contenido
del tubo con una varilla de vidrio, con la precaución
de mezclar bien con la solución que sobrenada.
Dejar en reposo aproximadamente a 8°C durante
una hora. Transcurrido este tiempo centrifugar.
10 (a).5. Interpretación de resultados.
La aparición de precipitado indica la presencia
de ácido tartárico en la muestra.
10 (a) .6. Referencia.
10 (a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h.
10 (b). ACIDO TARTARICO
(Método cuantitativo)
10(b).1 Principio.
Aislamiento del ácido tartárico mediante colum-
na de resinas cambiadoras de aniones y posterior
valoración colorimétrica.
10(b).2. Material y aparatos.
10(b).2.1. Resinas aniónicas de basicidad fuerte
(III Merck o equivalente). Las resinas deben de
encontrarse en forma de acetato. Para ello deben
estar al menos veinticuatro horas en contacto con
una solución de ácido acético al 30 %.
10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm de
diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte
inferior.
10(b).3. Reactivos.
131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)SV
182105 Acido Sulfúrico 1mol/l (2N) SV
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
122352 Amonio meta-Vanadato PA
141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX
211376 Lana de Vidrio, lavada QP
Resina Lewatit MP 600 (aniónica fuerte I)
131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
181691 Sodio Hidróxido 1mol/l 1N SV
124 121700 Sodio meta-Peryodato PA
121716 Sodio Sulfato anhidro PA
10(b).3.1. Acido Acético al 30 % (v/v).- Introducir
300 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un
matraz aforado y completar a 1.000 ml con Agua
PA-ACS.
10(b).3.2. Acido Acético al 0,5 % (v/v).- Introdu-
cir 5 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un
matraz aforado y completar hasta 1.000 ml con
Agua PA-ACS
10(b).3.3. Solución de Sodio Sulfato al 7,1 %
(0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA y
completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.4. Reactivo Vanádico.- Disolver 10 g de
Amonio meta-Vanadato PA en 150 ml de Sodio
Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solución a un
matraz aforado de 500 ml, añadir seguidamente
200 ml de una solución de Sodio Acetato anhidro
PA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a
500 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.5. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.
10(b).3.6. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
10(b).3.7. Solución de Acido Peryódico 0,1N
(0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-Peryo-
dato PA en un matraz aforado de 1.000 ml, añadir
50 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV y com-
pletar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.8. Solución de Glicerina al 10 %.- Pesar
10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.9. Solución de Acido Tartárico de 1 g
por l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver
500 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO en 6,6
ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar con
solución de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml.
10(b).4. Procedimiento.
10(b).4.1. Preparación de las columnas de resi-
nas aniónicas. Colocar en el fondo de la columna
[10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formando
tapón de 2-3 mm de altura, aproximadamente, y
añadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos
5 mm sobre el tapón de Lana de Vidrio lavada QP.
Añadir la Resina Lewatit® MP 600 aniónica (*) con-
servada en Acido Acético al 30 %, agitar esta sus-
pensión y agregar rápidamente un volumen de unos
10 ml, evitando la formación de burbujas de aire,
depositando en la superficie un tapón de Lana de
Vidrio lavada QP, que se conduce con una varilla de
vidrio con el fin de no remover las resinas en los
sucesivos lavados anteriores en su superficie. Las
resinas solamente pueden servir para una sola vez.
10(b).4.2. Aislamiento del Acido Tártarico.- Abrir
la llave inferior de la columna y dar salida al Acido
Acético diluido hasta unos 2-3 ml por encima del
tapón superior de Lana de Vidrio lavada QP. Añadir
seguidamente unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%
y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavados
cuatro veces.
Después del último lavado y con la llave cerrada,
adicionar 10 ml de vinagre a analizar y señalar la
altura alcanzada con un lápiz graso, abrir a conti-
nuación la llave y dejar salir vinagre goteando a
razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por
minuto) hasta un poco por encima del tapón supe-

rior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo la
columna con Acido Acético al 0,5 % hasta la señal
del lápiz graso y dejar salir a la misma velocidad que
la vez anterior y lavar después en la misma forma
siete veces con 10 ml de Agua PA-ACS.
Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan-
do el nivel del líquido se encuentre un poco más
arriba del tapón superior de Lana de Vidrio lavada
QP.
Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluir
los ácidos fijados en el cambiador de aniones,
mediante adiciones de solución de Sodio Sulfato
[10(b).3.3.] hasta la señal trazada en el tubo.
Para hacer esta operación resulta práctico colo-
car un frasco con solución de Sulfato unido por el
cuello a la columna mediante un manguito de cau-
cho y con unas pinzas para regular la caída del líqui-
do en la bureta o tubo. Puestos así en comunica-
ción los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrir
las pinzas del caucho de unión y la llave inferior,
dejando caer el líquido a la bureta unos 10 cm de
altura y sin que queden huecos vacíos. Regular la
salida del líquido en la proporción de 2-3 gotas por
segundo, para llenar el matraz receptor hasta el
enrase.
10(b).4.3. Determinación del ácido Tartárico.- En
dos matraces cónicos de 100 ml (A) y (B) introducir
20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida y
el matraz (B), en el cual el Acido Tartárico es destrui-
do por el Acido Peryódico, constituye el testigo.
Añadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l
(2N) SV, 5 ml de Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N)
SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEX
al 10%.
En el matraz (B), añadir 2 ml de Acido Sulfúrico
1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Peryódico 0,1N,
esperar quince minutos y añadir 1 ml de Glicerina al
10 % para destruir el exceso de Acido Peryódico.
Esperar dos minutos.
Verter a continuación, agitando, primero en el
matraz (B) e inmediatamente después en el matraz
(A), 5 ml del Reactivo Vanádico. Disparar inmediata-
mente un cronómetro e introducir el contenido de
dichos matraces en las cubetas de caras paralelas
de 10 mm de espesor del espectrofotómetro. Al
cabo de un minuto y treinta segundos medir la den-
sidad óptica a 490 nm del líquido procedente del
matraz (A) (medida) después de haber reglado el
aparato para obtener la transmisión al 100 % con la
cubeta conteniendo el líquido testigo (B).
10(b).5. Cálculo
10(b).5.1. Preparación de la curva patrón.-
Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solución
10(b).3.9. e introducir cada alícuota en un matraz
aforado de 100 ml. Enrasar con solución de sodio
sulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones corres-
ponden a eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4
y 5 g de ácido tartárico por litro.
M
En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 ml
de cada una de estas soluciones y tratarlas idénti-
camente igual a los eluidos del vinagre anteriormen-
te descrito.
La representación gráfica de las densidades
ópticas de estas soluciones está en función de la
cantidad de ácido tartárico. Para ello es recomen-
dable y más preciso partir de concentraciones 0,1;
0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de ácido
tartárico.
10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en el
ensayo con los correspondientes de la curva
patrón.
10(b).6. Referencia.
10(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. A12h.
(*). En el original indica “Resina cambiadora de
aniones”, entendemos que es apropiada la Resina
Lewatit“ MP 600 aniónica fuerte I.
11. COBRE
11.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.
11.2. Material y aparatos.
Espectrofotómetro de absorción atómica, con lám-
para específica de cobre.
11.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 + 0’002 g/l AA
11.3.1 Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0’002 g/l AA o preparar disolviendo 1’000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO previamente
diluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS.
11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/l
de Cobre.- Diluir partes alícuotas de la solución
patrón con Acido Acético al 5 % en Agua PA-ACS.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparato
a una longitud de onda de 324,7 nm en condicio-
nes tales que se obtenga una respuesta lineal al
introducirse las series de patrones preparados.
11.4.2. Determinación.- Efectuar la lectura direc- 125
ta de la absorbancia.
11.5. Interpretación de los resultados.
Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,
hallar mediante la curva de patrón las concentracio-
nes de cobre de la muestra.

11.6. Referencias.
11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: “Analyse quanti-
tative minerale”. El Masson, París (1955), 749-752.
11.6.2. H.E. Parker: “Atomic Absorption News-
letter” (1963), 13
11.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu.
Analytical Methods for atomic absorbtion spectro-
photometry “Perkin-Elmer”.
11.6.4. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed. Paris (1968),
págs 59-144.
12. CLORUROS
12.1. Principio.
Determinación directa de cloruros por potencio-
metría utilizando el electrodo Ag/AgCl.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. pH-metro con escala que permita apre-
ciar 2 mV.
12.2.2. Agitador magnético.
12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una solución
saturada de potasio nitrato como electrolito.
12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
12.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
12.3.1. Solución patrón de Cloruros.- Disolver
2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de bro-
mo), para análisis, previamente desecado en Agua
PA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solución contiene
1 mg de ion Cloro.
12.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver
4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al
10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PA
con Agua PA-ACS. 1 ml de esta solución corres-
ponde a 1 mg de ion Cloro.
12.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Determinación del potencial del punto de
equivalencia.- Introducir 5,0 ml de la solución
patrón de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluir
aproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS y
acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-
126 ISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Añadir la
solución de Plata Nitrato agitando moderadamente.
Los cuatro primeros ml se adicionan en fraccio-
nes de 1 ml y se leen las correspondientes lecturas
en milivoltios; los dos siguientes ml, en fracciones
de 0,2 ml y se continúa adicionando en fracciones
de 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de
10 ml. Después de cada adición se debe esperar
unos treinta segundos antes de hacer la correspon-
diente lectura en minivoltios. Los valores así obteni-
dos se llevan sobre un papel milimetrado en función
de los correspondientes ml de solución de Plata
Nitrato, y a partir del punto singular de la curva
obtenida, determinar el potencial del punto de equi-
valencia.
Para comprobar el potencial del punto de equi-
valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
solución patrón de Cloruros, 95 ml de Agua PA-
ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70 % PA-ACS-ISO.
Introducir el electrodo y valorar agitando, justamen-
te hasta el potencial del punto de equivalencia.
Repetir esta operación hasta obtener una buena
concordancia con los resultados.
Este control debe efectuarse antes de determi-
nar la concentración de cloruros en cada serie de
muestras a analizar.
12.4.2. Determinación.- Llevar a un vaso de
150 ml, 50,0 ml de vinagre. Añadir 50 ml de Agua
PA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
Valorar a continuación, siguiendo el procedimiento
descrito anteriormente, hasta alcanzar el potencial
del punto de equivalencia.
12.5. Cálculo.
La cantidad de cloruros se determina mediante
las expresiones:
0,02 n en gramos de ion cloro.
0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-
ro.
0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro.
Siendo:
n = volumen en ml de solución de plata nitrato
necesario para alcanzar el potencial del
punto de equivalencia.
12.6. Referencia.
12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. OIV A-15j.
13. GRADO ALCOHOLICO
13.1. Principio.
Separación del alcohol por destilación, oxidación
del mismo por potasio dicromato y determinación
del contenido por valoración del exceso de dicro-
mato.
13.2. Material y aparatos.
Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1;
5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los Métodos
Oficiales de Análisis de Vinos.
13.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

131074 Agua PA-ACS
131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato
PA-ISO
211229 Calcio Hidróxido natural, polvo QP
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO
131500 Potasio Dicromato PA-ISO
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
13.3.1. Solución de Potasio Dicromato.- Disolver
33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una can-
tidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta
un litro a 20° C. Esta solución corresponde al grado
alcohólico internacional O.I.V. 1 ml de esta solución
oxida 7,8934 mg de alcohol.
13.3.2. Solución de Amonio Hierro II Sulfato.-
Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato
PA-ISO y 20 ml de Acido Sulfúrico 96 % PA-ISO en
una cantidad de Agua PA-ACS suficiente y comple-
tar hasta 1 litro, un volumen de esta solución
corresponde a medio volumen de solución de Pota-
sio Dicromato cuando está recientemente prepara-
da. Esta solución se oxida lentamente, por lo que
debe ser valorada frecuentemente en la misma que
se realiza la determinación del alcohol, sustituyendo
la disolución alcohólica por Agua PA-ACS.
13.3.3. Solución de Potasio Permanganato.-
Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PA-
ACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA-
ACS y completar hasta 1 litro.
13.3.4. Solución de Acido Sulfúrico diluido.- A
500 ml de Agua PA-ACS añadir, poco a poco y agi-
tando, 500 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Des-
pués de enfriado, completar hasta 1 litro con Agua
PA-ACS.
13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.-
Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-
ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, añadir 1,485 g
de 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentar
para favorecer la disolución.
13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desleír en la con-
centración conveniente, Calcio Hidróxido natural,
polvo QP con Agua PA-ACS.
13.4 Procedimiento.
13.4.1. Destilación.- Medir 200 ml de vinagre en
matraz aforado y anotar la temperatura. Introducir el
vinagre en el matraz de destilación que contenga
unos fragmentos de material poroso. Lavar el
matraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS.
Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal
4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de
100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma tem-
peratura que se midió el vinagre inicialmente.
13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapón
esmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de solución
valorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sul-
fúrico diluido y agitar. Añadir 10 ml de destilado
M
exactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar y
esperar por lo menos treinta minutos, agitando de
vez en cuando.
13.4.3. Valoración.- Valorar el exceso de Dicro-
mato con la solución de Amonio Hierro II Sulfato.
Cuando la coloración verde de la solución vire a ver-
de azulado, añadir cuatro gotas de reactivo de
1,10-Fenantrolina. Detener la adición de solución de
Amonio Hierro II cuando el líquido vire a marrón.
A menudo se puede llegar a pasar el viraje, sien-
do entonces necesario volver al punto preciso adi-
cionando solución de Potasio Permanganato. Un
décimo del volumen empleado de esta solución se
resta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato.
Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 ml
de destilado por Agua PA-ACS.
13.5. Cálculo.
n’ - n
Grado alcohólico = –––––––
n’
Siendo:
n = volumen, en ml, gastados en la valoración.
n’ = volumen, en ml, gastados en la prueba en
blanco.
13.6. Observaciones.
Si el grado alcohólico del vinagre es superior a
0,8°, repetir la oxidación utilizando 10 ml de destila-
do diluido a 1/2.
13.7. Referencia.
13.7.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyses des vins. O. I. V. A-2-16.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
Reducción del arsénico a arsenamina gaseosa
que reacciona con plata dietilditiocarbamato (disuel-
to en piridina), dando un complejo de color rojo.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Aparato Quickfit (figura I)
14.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita lecturas a 538 nm.
14.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 127
131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
Arsénico
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
131303 Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131457 Piridina PA-ACS

Figura 14.1
122382 Plata Dietilditiocarbamato PA
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
Zinc metal, granulado, exento
de Arsénico.
14.3.1. Solución de Plata Dietilditiocarbamato
PA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml de
Piridina PA-ACS. Esta solución puede conservarse
algunas semanas.
14.3.2. Plomo II Acetato en algodón.- Impregnar
el algodón hidrófilo en solución acuosa de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir el
líquido en exceso y desecar al vacío.
14.3.3. Solución acuosa de Potasio Yoduro PA-
ISO al 15%.
14.3.4. Solución acuosa de Cobre II Sulfato
5-hidrato PA-ACS-ISO al 2%
14.3.5. Solución de Estaño Cloruro.- Disolver
0,33 g de Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
en 100 cc de Acido Clorhídrico al 32% (d=1,16).
128 Diluir Acido Clorhídrico 35 % PA-ISO con Agua PA-
ACS.
14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arséni-
co.
14.3.7. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
14.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
14.3.9. Solución de 100 mg/l de Arsénico.
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra.- En un matraz
Kjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con
100 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, para evi-
tar las pérdidas de As. Llevar a ebullición hasta redu-
cir el volumen a 10 ml, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO y continuar la ebullición adicionando
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta la
total decoloración. Después de la expulsión de los
vapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml de
Agua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Una
vez frío el matraz, trasvasar el residuo al matraz de
valoración utilizando 40 ml de Agua PA-ACS.
14.4.2. Valoración.- Poner en el tubo en U, 3 ml
de la solución de Plata Dietilditiocarbamato. Colocar
en la parte superior del tubo intermedio del aparato
el algodón impregnado en Plomo II Acetato al 10 %
con objeto de retener el sulfhídrico y la fosfamina
que puedan desprenderse al mismo tiempo que la
arsenamina.
Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyer
de 100 ml del aparato descrito y añadir sucesiva-
mente 10 ml de la solución de Estaño II Cloruro, 5 ml
de la solución de Potasio Yoduro y 1 ml de la solu-
ción de Cobre II Sulfato. Después de quine minutos
añadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rápidamente el
aparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasar
vapores por lo menos durante una hora.
14.4.3. Preparación de la curva de patrón.- A
partir de una solución 14.3.9, preparar soluciones
que contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11;
12 mg de Arsénico por litro.
14.5. Cálculo.
Calcular el contenido en arsénico utilizando la
correspondiente curva patrón.
14.6. Observaciones.
14.6.1. Interfiere en la determinación el antimonio
cuyo complejo absorbe a 510 nm.
14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entre
las concentraciones de 0 y 15 microgramos de As.
14.6.3. Este método tiene un límite de detección
de 0,2 microgramos.
14.7. Referencias.
14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy
46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Lla-
guno. An. Bromatología XXVI-2 (1974), 167-176.
14.7.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyses des Vins. O. I. V. A-34f.
15. ZINC
15.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.

15.2. Material y aparatos.
15.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.
15.2.2. Lámpara de zinc.
15.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 + 0,002 g/l AA
15.3.1. Zinc solución patrón Zinc = 1,000 +
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zinc
puro en el mínimo volumen necesario de Acido
Nítrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con Acido
Nítrico al 1% (v/v) (diluir Acido Nítrico 60% PA-ISO
con Agua PA-ACS).
15.4. Procedimiento.
15.4.1. Preparación de la muestra.- No se nece-
sita preparación especial. En caso de elevada con-
centración, realizar una o varias diluciones hasta
quedar dentro del rango de medida.
15.4.2. Determinación.- Diluir partes alícuotas de
la solución (15.3.1.) con Acido Acético al 5% (diluir
Acido acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-
ACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y
2 ppm. Aspirar las soluciones patrón y a continua-
ción la muestra, anotando las absorbancias obteni-
das a 213,8 nm.
15.5. Interpretación de resultados.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos, hallar las concentraciones de zinc de la muestra.
15.6. Referencias.
15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions News-
letter (1963), 13.
15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu.
Analytical Methods for atomic absorption spectro-
photometry “Perkin-Elmer”.
16. PROLINA
16.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reac-
ción con ninhidrina en medio ácido.
16.2. Material y aparatos.
16.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.
16.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita efectuar lecturas a 517 nm.
16.3. Reactivos.
131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
M
132362 Ninhidrina PA-ACS
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
del Etilenglicol PRS.
16.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS.
16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
1:1 (v/v)
16.4. Procedimiento.
Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a
0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de mues-
tra diluida e introducirla en un tubo de ensayo con
tapón de rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico
98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al
3%. Cerrar herméticamente el tubo e introducirlo en
un baño de agua hirviendo durante catorce o quin-
ce minutos. Enfriarlo a unos 200°C de cinco a diez
minutos, añadiendo mientras se enfría 5 ml de solu-
ción de 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
1:1 (v/v).
A continuación efectuar la lectura de la absor-
ción a 517 nm después de cinco minutos y antes
de treinta minutos.
Efectuar un blanco siguiendo el procedimiento
anterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS en
vez de la solución problema.
16.5. Interpretación de resultados.
Calcular el contenido en prolina por comparación
con una curva patrón que comprenda concentra-
ciones entre 0,05 y 0,50 milimoles/ml.
16.6. Referencia.
16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3),
pág. 228 (1969).
17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS
17.1. Principio.
Separación del ácido acético mediante extrac-
ción con éter iso-propílico y medida de su conteni-
do en C14 mediante espectrofotometría de cente-
lleo líquido.
17.2. Material y aparatos.
17.2.1. Pipeta automática de 100 µl.
17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml.
17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajo
contenido en potasio, dotados de un sistema de
cierre de material plástico para evitar el ataque del
ácido acético.
129
17.2.4. Extractor líquido-líquido en continuo, con
capacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros de
disolvente orgánico.
17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longi-
tud y 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos
 rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerrada cpm(M)
al vacío. A1 = –––––––––––––––
17.2.6. Columna de destilación fraccionada de 0,4 x E1 x g x e
40 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, relle-
na de anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa cpm(F)
aislante cerrada al vacío y llave de salida a los A2 = –––––––––––––––
20 cm. 0,4 x E2 x g x c
17.2.7. Espectrofotómetro de centelleo líquido.
cpm (M+P) - cpm(M)
17.3. Reactivos. E1 (Eficacia de la muestra) = –––––––––––––––––
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO dpm (P)
Butil-PBD.
131314 Eter Di-iso-Propílico estabilizado con cpm (F+P) - cpm(F)
~50 ppm de BHT PA-ACS E2 (Eficacia del fondo ) = –––––––––––––––––––
Tolueno marcado con C14 dpm (P)

17.3.1. Eter Di-iso-Propílico estabilizado con g= gramos de la muestra o fondo en el vial.

~ 50 ppm de BHT PA-ACS. c= gramos de ácido acético por gramo de muestra
17.3.2. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. o de fondo.
17.3.3. Tolueno marcado con C14. cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestra
17.3.4. Solución de 8 g/l de Butil-PBD en Tolue- más el patrón.
no para centelleo. cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo más el
patrón.
17.4. Procedimiento. cpm (M) = cuentas por minuto de la muestra.
17.4.1. Extracción y purificación del ácido acéti- cpm (F) = cuentas por minuto del fondo.
co.- Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acéticos dpm (P) = desintegraciones por minuto del patrón.
(o la cantidad correspondiente si se trata de vina-
gres de otra graduación) en continuo con 3,5 litros
de Eter Di-iso-Propílico estabilizado con ~ 50 ppm
de BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con lo
que se obtiene un extracto que debe contener
aproximadamente el 70% de ácido acético presen-
te en el vinagre.
Eliminar el disolvente por destilación en la colum-
na 17.2.5. y rectificar el residuo en la columna
17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centro
de la columna, la fracción que destila a 114° des-
preciando las primeras gotas de destilado. El desti-
lado debe tener una riqueza de ácido acético mayor
del 95% en peso.
17.4.2. Medidas espectrofotométricas.
17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 g
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 10 ml del
líquido del centelleo (17.3.4.).
17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en los
viales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 ml
de líquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos
2 viales por cada muestra problema y uno para el
fondo de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Cada
vial se lee 300 minutos como mínimo.
Una vez efectuado el conteo añadir a cada vial
un volumen de patrón interno (17.3.3.) que dé apro-
130 ximadamente 40.000 dpm y contar durante 4 minu-
tos.

17.5. Cálculo.
Actividad específica (dpm C14/g de C) = A1 - A2
siendo:
M

131
 Productos Derivados
de la Uva:
Orujo, Heces y Lías.

132
 M
METODOS DE ANALISIS Destilar a continuación recogiendo 200 ml, o
bien las tres cuartas partes de este volumen
1. CONTENIDO ALCOHOLICO EN (150 ml).
ORUJOS, HECES Y LIAS. Añadir al destilado más gotas de Tornasol tintura
RE y comprobamos que el destilado toma color
1.1. Principio. azul, de franca alcalinidad, debida al NH3 que con-
Se determina por destilación de la muestra alca- tiene.
linizada y medida del contenido alcohólico por alco- Seguidamente, con una pipeta se adiciona Aci-
hometría. do Sulfúrico al 10% en cantidad suficiente para que
el destilado vire a rojo, añadiendo un poco más
1.2. Material y aparatos. (0,5 ml) para que el medio quede francamente áci-
1.2.1. Aparato de destilación.- Consta de las do.
siguientes partes: Completar con Agua PA-ACS el contenido de
1.2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml con los 200 ml del matraz y se procede a una segunda
rodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca ancha destilación, como si de un vino se tratase.
o de boca estrecha. El destilado recogido de esta segunda destila-
1.2.1.2. Columna de rectificación de 20 cm de ción está ya en condiciones para determinar su gra-
largo. do alcohólico por aerometría y efectuar la correc-
1.2.1.3. Disco metálico o de amianto con un ori- ción a 20° C.
ficio de 8 cm de diámetro.
1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longi- 1.5. Expresión de los resultados.
tud con circulación rápida de agua. El resultado se puede expresar:
1.2.2. Equipo de medida. - cm3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra.
1.2.2.1. Alcohómetros.
1.2.2.2. Termómetros.- Graduados en grados y 1.6. Referencias.
décimas de grado y comprendiendo el intervalo de 1.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
0 a 30°. nalyses des Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19.
1.2.2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diáme- 1.6.2. De Bernadi, P.; García Viana, E. 1969.
tro y 320 mm de altura. “Determinación de grado alcohólico de heces y
1.2.3. Granatorio. lías”. Estación Enológica de Requena.
1.2.4. Matraz aforado de 200 ml.
1.2.5. Vaso de precipitados.

1.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP
171748 Tornasol tintura RE

1.3.1. Lechada de Cal. Solución de 120 g de

Calcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.
1.3.2. Acido Sulfúrico al 10%. Diluir Acido Sulfú-
rico al 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

1.4. Procedimiento.
El producto a analizar es vertido en un vaso de
precipitados donde es agitado para su homogenei-
zación y al mismo tiempo para favorecer la expul-
sión de CO2 que pueda contener.
En el caso de orujos, el muestreo se realiza de
forma que la muestra sea lo más homogénea posi-
ble. 133
Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciar
en el matraz de destilación, añadiendo 200 ml de
Agua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan para
enjuagar el vaso que ha contenido la muestra y a
continuación se añade Lechada de Cal hasta neu-
tralizar el exceso (10 ml aproximadamente). Figura 1.1
 Aguardientes
compuestos:
Whisky

134

METODOS DE ANALISIS
1. OBTENCION DEL DESTILADO
1.1. Principio.
Destilación de la muestra en condiciones deter-
minadas.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm de
longitud) o similar.
1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml de
capacidad.
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
antes de enrasar se mantiene en baño de agua de
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las pare-
des del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al
matraz de destilación, lavando tres veces consecu-
tivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de
Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de
lavado al matraz de destilación. Cuando se trate de
bebidas siruposas, por su gran contenido en azú-
car, el lavado debe efectuarse consecutivamente
con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Pro-
ceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
ma inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría
a menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetre por lo menos 4-6 cm
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-
tro del mismo baño, enrasarse con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
homogeneizar su contenido, antes de proceder a la
determinación del etanol.
M
1.4.2. Muestras con más de 60% de etanol.
El procedimiento anteriormente descrito, difiere
únicamente en que la muestra se mide en matraz
aforado de 100 ml, que se lava varias veces con
agua hasta alcanzar un volumen de aproximada-
mente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
barse en ambos casos como sigue:
Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar en
la última destilación el título alcohométrico del desti-
lado que no debe ser menor de 9,9% en volumen
de etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
do que el flujo del destilado sea uniforme.
1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre 45 y 90 minutos.
1.6. Referencia.
1.6.1. Instituto Español de Normalización.
UNE 33-112-75.
2. FURFUROL
2.1. Principio.
Destilación y posterior medida espectrofotométrica
de su absorción a 277 nm.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
vapor, según figura I.
135
Figura 2.1
 2.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol v/v 96% PA
141334 Furfuraldehído PRS
2.3.1. Disolución patrón de furfurol (furfuraldehí-
do) de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfu-
raldehído PRS recogiendo solamente la fracción de
punto de ebullicion, 161,2°C. De este destilado
tomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 ml
enrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml de
esta disolución y diluir con alcohol al 50% en volu-
men en un matraz aforado de 500 ml.
2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de
(2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y
5 mg/l de Furfuraldehído PRS.
2.4. Procedimiento.
2.4.1. Preparación de la muestra.
Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descri-
to en (2.2.4.) recogiendo 200 ml.
Si se observa turbidez en el destilado añadir un
volumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hasta
lograr total limpidez en el destilado.
2.4.2. Determinación.
Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a
277 nm, comparando con las lecturas efectuadas a
las disoluciones de referencia o bien calculando la
absorbancia de una disolución que contenga 1 mg/l
de Furfuraldehído PRS (valor aproximado 0,15).
2.5. Cálculo.
El contenido en furfuraldehído se obtiene me-
diante la fórmula:
A 4. ESTERES
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F
A’
Siendo:
A = Absorbancia de la muestra.
A’ = Absorbancia de una disolución que contie-
ne 1 mg/l de furfuraldehído.
F = Factor de dilución.
2.6. Observaciones.
2.6.1. La disolución de referencia se debe pre-
parar inmediatamente antes de efectuar la medida.
2.7. Referencia.
2.7.1. Instituto Español de Normalización.
UNE 33-109-74.
136
3. EXTRACTO SECO
3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105° C y pesada
posterior del residuo.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.
3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo
plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de
altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-
cias desecadoras.
3.2.4. Baño de agua.
3.2.5. Balanza analítica.
3.3. Procedimiento.
Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-
viamente desecadas y taradas, en baño de agua
hirviente y mantener en la estufa a 105° C durante
30 minutos.
Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-
cador y una vez frías pesar en la balanza.
3.4. Cálculo.
El valor del extracto total de la muestra, en gra-
mos por litro, se hallará mediante la fórmula si-
guiente:
Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40
Siendo:
M = Peso, en g, de la cápsula con el extracto
seco.
m = Peso, en g de la cápsula vacía.
3.5. Referencia.
3.5.1. Instituto Español de Normalización.
UNE 33-106-74.
4.1. Principio.
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxi-
lamina en solución alcalina, formación de ácido
hidroxámico, acidificación, formación de un com-
plejo coloreado con iones férricos y medida del
color desarrollado a 525 nm.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que per-
mita lecturas a 525 nm.
4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y diá-
metro interno 2,5 cm.
4.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO
131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO
141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

4.3.1. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
2M. Conservar en nevera.
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5N.
4.3.3. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
1M en Sodio Hidróxido 1,75 N. Mezclar inmediata-
mente antes de su uso, volúmenes iguales del reac-
tivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas.
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.
4.3.5. Disolución de Hierro Tricloruro 0,37M.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos
PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matraz
aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhí-
drico 4N y enrasar con agua.
4.4. Procedimiento.
4.4.1. Construcción de la curva patrón.
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo Ace-
tato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de
50° (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y Agua
PA-ACS).
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y
300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solución
(4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml intro-
duciéndolos en matraces de 250 ml de capacidad y
completar con alcohol de 50° hasta el enrase.
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de la
solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.) mez-
clándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y
añadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones
(4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensa-
yo (4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones
(4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).
Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos.
Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico 4N
y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
Cloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto al
de la solución de referencia como a los de las solu-
ciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimétricas
a una longitud de onda de 525 nm.
Obtener las gráficas de calibrado mediante la
representación de las diferencias de absorción de
las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
referencia, en función de la concentración de Etilo
Acetato.
4.4.2. Preparación de la muestra.
Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el
método oficial nº 1.
4.4.3. Determinación.
Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y
4 ml de disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
(4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minu-
tos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídri-
co (4.3.4.) y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de
Hierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colori-
métrica a 525 nm inmediatamente, tomando como
blanco la solución de referencia preparada de la
siguiente forma:
Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu-
ción de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml de
M
la solución de Acido Clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
añadir 2 ml de destilado. Añadir 2 ml de la disolu-
ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
4.5. Cálculo.
A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-
tenido en ésteres expresados en etilo acetato,
mediante las gráficas de calibrado.
4.6. Observaciones.
4.6.1. El mismo blanco puede ser usado para
una serie de muestras de distinto contenido en
ésteres, pero de semejente graduación alcohólica.
4.7. Referencias.
4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1975-9053-59.
4.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE
33-111-77.
5. ALCOHOLES SUPERIORES
5.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de los
alcoholes superiores al etanol, por cromatografía de
gases.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Cromatógrafo de gases equipados con
detector de ionización de llama.
5.2.2. Columna cromatográfica.- Columna de
4 m de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena
de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
80-100 mallas, lavado a los ácidos.
5.2.3. Microjeringas de 1 ml.
5.3. Reactivos.
5.3.1. Patrones cromatográficos:
351082 1-Butanol CG
354330 iso-Butanol CG
353851 2-Butanol CG
354539 2-Metil-1-Butanol CG
351079 3-Metil-1-Butanol CG
352516 4-Metil-2-Pentanol CG
351885 1-Propanol CG
5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.
5.4. Procedimiento.
5.4.1. Condiciones cromatográficas.- Las condi-
ciones cromatográficas orientativas son: Gas porta-
dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno
137
35°C, temperatura del inyector y del detector
150°C.
5.4.2. Calibrado.
5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta-
nol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.
 5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución TABLA 1
en etanol de 40° en las proporciones que se indican ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
en la Tabla 1. Compuesto Concentración (mg/l)
5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de la ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de la 2-Butanol 10
solución del patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1-Propanol 125
1 ml en el cromatógrafo. iso-Butanol 175
5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestra 1-Butanol 15
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno 2-Metil-1-Butanol 100
(5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condicio- 3-Metil-1-Butanol 300
nes en que se hizo para el calibrado. ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

5.5. Cálculo.
6. METANOL
Una vez identificados los picos por sus retencio-
nes relativas al patrón interno se calculan los facto-
6.1. Principio.
res de respuesta para cada uno de ellos y las con-
Separación, identificación y cuantificación del
centraciones en la muestra problema aplicando las
alcohol metílico por cromatografía gaseosa.
fórmulas:
6.2. Material y aparatos.
Ci x Ap
Como en (5.2.).
Factor de respuesta (Fr) = ––––––––
Ai
6.3. Reactivos.
Etanol pureza cromatográfica.
Aim
Metanol pureza cromatográfica
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f
352516 4-Metil-2-Pentanol CG
Apm

Siendo:
6.4. Procedimiento.
Ci = Concentración del compuesto en la solu-
6.4.1. Condiciones cromatográficas.
ción patrón.
Como en (5.4.1.)
Ap = Area del patrón interno en la solución
6.4.2. Calibrado.
patrón.
6.4.2.1. Patrón interno.- Como en (5.4.2.1.).
Ai = Area del compuesto en la solución
6.4.2.2. Solución patrón.- Preparar una solución
patrón.
de Metanol, en Etanol a 40º C, de concentración
Aim = Area del compuesto en la muestra pro-
similar a la esperada en la muestra.
blema.
6.4.2.3. Solución de calibrado.- A 10 ml de la
Apm = Area del patrón interno en la muestra
solución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de la
problema.
solución del patrón interno (6.4.2.1.), y se inyecta
f = Factor de dilución de la muestra.
1 ml en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema.
El contenido en alcoholes superiores vendrá
Como en (5.4.3.).
dado por la suma de los valores individuales obteni-
dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
6.5. Cálculo.
ml de alcohol absoluto.
Como en (5.5.).
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Che- 7. GRADO ALCOHOLICO
mists
7.1. Principio.
Se determina por destilación del producto y
medida de la densidad del destilado por areometría.
Para bebidas con un contenido en extracto seco
138 menor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuará
directamente, sin destilación.

7.2. Material y aparatos.

7.2.1. Aparatos de destilación como en (1.2.).
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de
d 20/20 debidamente contrastado.

7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-
metro interior y 320 mm de altura.
7.2.5. Baño termostático a 20°C.
7.3. Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado.- Según método
oficial nº 1 en el caso de bebidas con extracto seco,
sea mayor de 600 mg/100 ml.
7.3.2. Determinación areométrica.- Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo. Dejar que
el alcohómetro, termómetro, probeta y muestra,
alcancen en el baño termostatizado la temperatura
de 20ºC.
Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probeta
que contiene el termómetro. Echar la muestra en la
probeta hasta un volumen conveniente, inclinarla
unos 45° para evitar la agitación y las burbujas (al
introducir luego el alcohómetro, el nivel del líquido
debe estar justo por debajo del borde de la probe-
ta). Tapar la probeta con la palma de la mano, e
invertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturas
de la probeta y del líquido. Secar el líquido de la
parte exterior de la probeta (no poner las manos
sobre la probeta para no calentar el líquido conte-
nido).
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bul-
bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas
décimas de grados estén mojadas.
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo
justo debajo del plano de la superficie del líquido,
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-
cie varíe de elipse a una línea recta.
Anotar el punto en que esta línea intersecciona
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-
ra del alcohómetro.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-
tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el
alcohómetro y en el termómetro, comprobando así
las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-
metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-
tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir
la probeta con la muestra varias veces para que se
equilibre térmicamente todo el conjunto. Volver a
atemperar el alcohómetro, secar el vástago y reali-
zar nuevas lecturas en el alcohómetro y en el termó-
metro. Los valores calculados son válidos si tienen
aproximación de 0,1 grados alcohólicos, si no fuera
así, realizar lecturas adicionales y calcular la media.
7.4. Cálculo.
7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de
600 mg en 100 ml:
M
El grado alcohólico real es el leído en el destilado
obtenido según (7.3.1.).
Si en la obtención del destilado, 100 ml de
muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-
nida, debe ser multiplicada por 2.
7.4.2. Muestras con extracto seco menor o igual
a 600 mg en 100 ml:
Para obtener el grado alcohólico real, adicionar
al grado alcohólico aparente (leído directamente en
la muestra sin destilar) 0,2 grados alcohólicos por
cada 100 mg de extracto/100 ml.
7.5. Referencia.
7.5.1. Association of Official Analytical Chemist.
Edición 1980-9015-9.
8. ALDEHIDOS
8.1. Principio.
Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de
mililitro.
8.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución 40%
p/v QP
182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.
8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Pre-
parar esta disolución a partir de Sodio Hidrógeno
Sulfito solución 40% p/v QP y Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Poner 100 ml del destilado (obtenido según
Método Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Añadir
100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la diso-
lución (8.3.3.) calculado de modo que equivalga
por lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV.
Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutos
agitando de vez en cuando.
Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Valorar el exceso de Yodo añadido con Sodio Tio-
sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloración
139
completa.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en
blanco, para comprobar en cada serie de ensayos
la estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosul-
fato por ser tan diluidas.
 8.5. Cálculo. a 100°C durante 30 minutos. Disolver y transferir el
El contenido en aldehídos, expresado como residuo con varias porciones de alcohol (llevando
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula: previamente a pH 8,2) de una graduación similar a
la muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA en
total.
Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100 Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
= (V - V1 ) x –––––––––––
de etanol absoluto) 2 (9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.
A
9.5. Cálculo.
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 9.5.1. Acidez total (en V1 x 1,2 x 100
= ––––––––––––––
gastado en la muestra. mg/100 ml de etanol absoluto)
V2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato A
gastado en el blanco.
A = Grado alcohólico. Siendo :
V1 = Volumen, en ml de sodio hidróxido
8.6. Observaciones. empleados en (9.4.1.).
8.6.1. La disolución de sodio bisulfito tiene A = Grado alcohólico de la muestra.
mayor tiempo de estabilidad si se le añade un 10 %
de alcohol. En cualquier caso esta solución es esta-
ble como máximo una semana. 9.5.2. Acidez fija (en V2 x 1,2 x 100
= ––––––––––––––
mg/100 ml de etanol absoluto)
8.7. Referencias. A
8.7.1. Association of Official Agricultural Che-
mists 1980-9052. Siendo:
8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE V2 = Volumen, en ml, de sodio hidróxido
33-107-74. empleados en (9.4.2.)
A = Grado alcohólico de la muestra.

9. ACIDEZ VOLATIL 9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en

mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
9.1. Principio. vendrá dado por la fórmula:
Se define convencionalmente como la diferencia Acidez volátil = Acidez total - Acidez fija.
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco- 9.6. Referencia.
hol absoluto. 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1980-9046-9045.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.
9.2.2. pH-metro. 10. CENIZAS
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana. (Materia mineral total)

9.3. Reactivos. 10.1. Principio.

131074 Agua PA-ACS Se denominan cenizas de un whisky, al conjunto
121086 Etanol absoluto PA de los productos de incineración del residuo de
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV evaporación de un volumen conocido del whisky.

9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N. 10.2. Material y aparatos.

Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidróxido 0,1
mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS.
9.3.2. Etanol absoluto PA.
140 9.4. Procedimiento.
9.4.1. Acidez Total.
Valorar 50 ml de la muestra con la disolución de
Sodio Hidróxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pH-
metro.
9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño maría, en
una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
10.2.1. Horno eléctrico regulable.
10.2.2. Baño de agua y baño de arena.
10.2.3. Lámpara de infrarrojo.
10.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de
77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura, fon-
do plano.
10.2.5. Balanza analítica.
10.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS

10.4. Procedimiento.
Colocar 25 ml de whisky en una cápsula tarada
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con
precaución en baño de agua hasta consistencia
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de
arena con moderación y durante una media hora.
Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli-
cación de rayos infrarrojos hasta carbonización.
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp-
sula al horno eléctrico a 525°C ± 25°C y con airea-
ción continua.
Después de cinco minutos de carbonización
completa, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y
añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora en
baño de agua, y llevar de nuevo al horno a 525° C.
Si la combustión de las partes carbonosas no se
consigue en quince minutos, volver a comenzar la
operación de adición de Agua PA-ACS, evapora-
ción y recalcinación.
Después de enfriar en el desecador, pasar la
cápsula con las cenizas.
10.5. Cálculo.
El contenido en cenizas vendrá dado por la
siguiente fórmula:
Cenizas (g/l) = 40 x P
Siendo:
P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidas
en 25 ml de whisky.
10.6. Referencias.
10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969.
10.6.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,
Ministerio de Agricultura, 1971, pág 66.
11. PLOMO
11.1. Principio.
Determinación del plomo por A.A., previa mine-
ralización de la muestra.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.2.2. Lámpara de plomo.
11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150°C.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de
vitrina de extracción de humos.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de
capacidad.
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
M
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
11.3.3. Acido Nítrico al 1% v/v en Agua PA-ACS.
11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra.- Poner
100 ml de la muestra en la cápsula (11.2.3.) y llevar-
la a evaporación hasta consistencia siruposa en
baño de arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el resi-
duo en el baño de arena o placa. Seguidamente
introducir la cápsula en la mufla y mantenerla duran-
te dos horas a 450°C, transcurrido dicho tiempo,
sacarla y dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y no
requiere un tratamiento posterior.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas del
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
11.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
alícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)
con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curva
de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
11.4.3. Determinación.- Operar según las espe-
cificaciones del aparato; usando llama de aire-aceti-
leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
11.5 Cálculo.
Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l
mediante comparación con la correspondiente cur-
va patrón y teniendo en cuenta el factor de concen-
tración o dilución.
11.6. Referencia.
11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
141
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del Zinc por A.A. previa mineraliza-
ción de la muestra.
 12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
12.2.2. Lámpara de Zinc.
12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
12.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),
(11.3.2.) y (11.3.3.).
12.3.2. Zinc solución patron Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc
metal , granalla PRS en el mínimo volumen necesario
de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico
del 1% (v/v).
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(11.4.1.).
12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.
La lectura se efectuará a 213,8 nm.
12.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zinc para la mues-
tra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilu-
ción.
12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newslet-
ter (1963), 13.
13. COBRE
13.1. Principio.
Determinación del cobre por A.A., mineralización
por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a la
lectura con objeto de conseguir resultados suficiente-
mente precisos.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
13.2.2. Lámpara de cobre.
142 13.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
13.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),
(11.3.2.) y (11.3.3.).
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro
en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico (1:1)
y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
13.4. Procedimiento.
13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(11.4.1.).
13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) con
Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de cobre/l.
13.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
13.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de cobre de la muestra.
13.6. Referencias.
13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newslet-
ter (1963),13”.
13.6.2. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed. París (1968), pág
59-144.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con gene-
rador de hidruros.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g.
14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
capacidad.
14.2.3. Pipetas de doble aforo.
14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
14.2.8. Registro gráfico.
14.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido 97%, lentejas
PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
(d= 1,19 g/ml).
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volu-
men de 1.000 ml.
14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84).
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución de Acido Etilendiaminotetra-
acético al 1%. Pesar un gramo de Acido Etilendia-
minotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-
ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-
men de 100 ml.
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido
al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-
rico 1% (14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de
concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la
solución de Arsénico (14.3.13.), en un matraz
aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con
Agua PA-ACS.
M
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con
20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a
5 ml.
Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un
matraz de 50 ml la solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de
trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la
solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mis-
mo tratamiento que la muestra.
1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de
Arsénico.
Preparar un blanco con todos los reactivos utili-
zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.
Encender la fuente de alimentación de las lámparas
de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
para que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-
tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de
acuerdo con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcanza dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de
hidruros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con las
características del aparato.
Encender el registrador.
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
la concentración de Arsénico se realizan por el
método de adición de patrones, por medio de
medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendo
al matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),
más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solu-
ción (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,
20 y 50 ng de Arsénico.
Lavar los matraces antes y después de cada
uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.).
Al construir la gráfica de adición hay que des-
contar el valor de absorbancia del blanco obtenido
en las mismas condiciones anteriores, pero aña-
diendo 3 ml de la solución blanco.
En estas condiciones el límite de detección de la
técnica es de 5 ng.
143
 Aguardientes
compuestos:
Ron

144

METODOS DE ANALISIS
1. OBTENCION DEL DESTILADO
1.1. Principio.
Destilación de la muestra en condiciones deter-
minadas.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de
longitud) o similar.
1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de
capacidad.
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS
1.4 Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
antes de enrasar se mantiene en baño de agua a
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las pare-
des del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al
matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-
ACS cada vez, añadiendo las aguas del lavado al
matraz de destilación. Cuando se trate de bebidas
siruposas, por su gran contenido en azúcar, el lava-
do debe efectuarse consecutivamente con tres por-
ciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
Proceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
mante inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría,
a menos de 10° C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetra por lo menos 4-6 cm
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-
tro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
M
homogeneizar su contenido antes de proceder a la
determinación del etanol.
1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. El
procedimiento anteriormente descrito difiere única-
mente en que la muestra se mide en matraz afora-
do de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximada-
mente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.5 Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
barse en ambos caso como sigue:
Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinar
en la última destilación el título alcohométrico del
destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volu-
men de etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
do que el flujo del destilado sea uniforme.
1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre cuarenta y cinco y noventa
minutos.
1.6. Referencia.
1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE
33-112-75.
2. FURFUROL
(Furfuraldehído)
2.1. Principio.
Destilación y posterior medida espectrofotomé-
trica de su absorción a 277 nm.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
vapor, según figura 1.
2.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
121086 Etanol absoluto PA
141334 Furfuraldehído PRS
2.3.1. Disolución patrón de Furfuraldehído de
aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehído
PRS recogiendo solamente la fracción del punto de
ebullición 161,2°C. De este destilado tomar 1 ml,
llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasando 145
con Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de esta
disolución y diluir con Etanol al 50% en volumen en
un matraz aforado de 500 ml.
2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de
(2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y
5 mg/l de Furfuraldehído.
 2.6. Observaciones.
2.6.2. La disolución de referencia se debe prepa-
rar inmediatamente antes de efectuar la medida.

2.7. Referencia.
2.7.1. Instituto Español de Normalización. UNE
33-109-74.

3. EXTRACTO SECO REDUCIDO

3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105°C y pesada
posterior del residuo, y aplicación de una fórmula
empírica.

3.2. Material y aparatos.

3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a los
105°C.
3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo pla-
no, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-
cia desecadora.
3.2.4. Baño de agua.
3.2.5. Balanza analítica.

Figura 2.1 3.3. Procedimiento.

Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-
viamente desecadas y taradas, en baño de agua
hirviente y mantener la estufa a 105ºC, durante
2.4. Procedimiento. treinta minutos.
2.4.1. Preparación de la muestra. Destilar 25 ml Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-
de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.), cador y una vez frías pesar en la balanza de preci-
recogiendo 200 ml. sión.
Si se observa turbidez en el destilado, añadir un
volumen conocido de Etanol 95% hasta lograr total 3.4. Cálculo.
limpidez en el destilado. El valor del extracto total de la muestra, en gra-
2.4.2. Determinación. Leer la absorbancia en el mos por litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:
espectrofotómetro a 277 nm, comparando con las
lecturas efectuadas a las disoluciones de referencia Extracto total (g/l) = (M-m)x40
o bien calculando la absorbancia de una disolución
que contenga 1 mg/l de Furfuraldehído PRS (valor Siendo:
aproximado 0,15). M = peso, en g, de la cápsula con el extracto
seco.
2.5. Cálculo. m = peso, en g, de la cápsula vacía.
El contenido en Furfuraldehído se obtiene mediante
la fórmula: El extracto seco reducido se calcula mediante la
fórmula siguiente:
A Extracto seco reducido = ESR en (g/l)
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F Extracto seco total = EST en (g/l)
146 A’ Azúcares totales = AT en (g/l) = sacarosa +
azúcares reductores
Siendo: ESR = EST - AT
A = absorbancia de la muestra.
A’ = absorbancia de una disolución que 3.5. Referencia.
contiene 1 mg/l de Furfuraldehído. 3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE
F = factor de dilución. 33-106-74.

4. ESTERES
4.1. Principio.
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidro-
xilamina en solución alcalina, formación de ácido
hidroxámico, acidificación, formación de un com-
plejo coloreado con iones férricos y medida del
color desarrollado a 525 nm.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita lectura a 525 nm.
4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y
diámetro interno 2,5 cm.
4.3. Reactivos
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO
131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO
141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos
PRS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
4.3.1. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro
2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio Clo-
ruro PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservar
en nevera.
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5 N.
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
4.3.3. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro 1M
en Sodio Hidróxido 1,75N: mezclar inmediata-
mente antes de su uso, volúmenes iguales del
reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis
horas.
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.
Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35%
PA-ISO en Agua PA-ACS.
4.3.5. Disolución de Hierro III Cloruro 0,37M.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, tro-
zos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un
matraz aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Aci-
do Clorhídrico 4N y enrasar con agua.
4.4. Procedimiento.
4.4.1. Construcción de la curva patrón.
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo
Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol
96% v/v PA convenientemente diluido en Agua
PA-ACS hasta concentración 50º.
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250
y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomar
de la solución (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y
15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 ml
de capacidad y completar con Etanol de 50° has-
ta el enrase.
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de
M
la solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.)
mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mez-
clar y añadir 2 ml de una cualquiera de las solu-
ciones (4.4.1.2.).
Introducir en una serie de tubos de ensayo
(4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones
(4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).
Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinte
minutos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido
Clorhídrico 4N y mezclar. Añadir 2 ml de la disolu-
ción de Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de los
matraces, tanto al de la solución de referencia
como a los de las soluciones (4.4.1.2.).
Efectuar las lecturas colorimétricas a una longi-
tud de onda de 525 nm.
Obtener las gráficas de calibrado mediante la
representación de las diferencias de absorción de
las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
referencia, en función de la concentración de Etilo
Acetato.
4.4.2. Preparación de la muestra. Destilar
siguiendo el procedimiento descrito en el método
oficial número 1.
4.4.3. Determinación. Introducir en un tubo
(4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolución de
Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejar
reaccionar entre uno y veinte minutos. Añadir 2 ml
de la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) y
mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
Cloruro (4.3.5.)
Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nm
inmediatamente, tomando como blanco la solu-
ción de referencia preparada de la siguiente for-
ma:
Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu-
ción de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml de
la solución de ácido clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
añadir 2 ml del destilado. Añadir 2 ml de la disolu-
ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
4.5 Cálculo.
A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-
tenido en ésteres, expresados en mg de etilo ace-
tato por 100 ml de alcohol absoluto, mediante las
gráficas de calibrado.
4.6. Observaciones.
4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado para
una serie de muestras de distinto contenido en
ésteres, pero de semejante graduación alcohóli-
ca.
4.7. Referencias. 147
4.7.1. Association of Official Analytical Che-
mists. Edición 1975-9053-59
4.7.2. Instituto Español de normalización. UNE
33-111-77.
 5. ALCOHOLES SUPERIORES
5.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de los
alcoholes superiores al etanol por cromatografía de
gases.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m
de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena de
Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
80-100 mallas, lavado a los ácidos.
5.2.3. Microjeringas de 1 µl.
5.3. Reactivos.
5.3.1. Patrones cromatográficos:
131082 1-Butanol PA-ACS-ISO
354330 iso-Butanol CG
353851 2-Butanol CG
354539 2-Metil-1-Butanol CG
351079 3-Metil-1-Butanol CG
4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)
351885 1-Propanol CG
Aim
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x –––––– x f
Apm
Siendo:
Ci = concentración del compuesto en la solu-
ción patrón.
Ap = área del patrón interno en la solución
patrón.
Ai = área del compuesto en la solución patrón.
Aim = área del compuesto en la muestra proble-
ma.
Apm = área del patrón interno en la muestra pro-
blema.
f = factor de dilución de la muestra.
El contenido en alcoholes superiores vendrá
dado por la sumo de los valores individuales obteni-
dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
ml de alcohol absoluto.
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Che-
mists 1980, 9075.

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica. TABLA 1

–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
5.4. Procedimiento. Compuesto Concentración (mg/l)
5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condi- –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
ciones cromatográficas orientativas son: gas porta- 2-Butanol 10
dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno 1-Propanol 125
85°C, temperatura del inyector y del detector iso-Butanol 175
150°C. 1-Butanol 15
5.4.2. Calibrado. 2-Metil-1-Butanol 100
5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta- 3-Metil-1-Butanol 300
nol de 40° C 4-Metil-2-Pentanol. –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución
en alcohol de 40° en las proporciones que se indi- 6. METANOL
can en la tabla 1. (Alcohol Metílico)
5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de la
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de 6.1. Principio.
la solución patrón interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 µl Separación, identificación y cuantificación del
en el cromatógrafo. metanol por cromatografía gaseosa.
5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno 6.2. Material y aparatos.
(5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condicio- Como en 5.2.
nes en que se hizo para el calibrado.
6.3. Reactivos.
5.5. Cálculo. Metanol pureza cromatográfica.
Una vez identificados los picos por sus retencio- 4-Metil 2-Pentanol (Patrón interno).
nes relativas al patrón interno se calculan los facto- Etanol pureza cromatográfica.
148 res de respuesta para cada uno de ellos y las con-
centraciones en la muestra problema aplicando las 6.4. Procedimiento.
fórmulas. 6.4.1. Condiciones cromatográficas.- Como en
5.4.1.
Ap 6.4.2. Calibrado.
Factor de respuesta ( Fr ) = Ci x ––––– 6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.
Ai 6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución

de Metanol en Etanol a 40°, de concentración simi-
lar a la esperada en la muestra.
6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de la
solución del patrón interno (6.4.2.2.), se le añade
1 ml de la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se
inyecta 1 µl en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.
6.5. Cálculo.
Como en 5.5.
6.6. Referencia.
Como en 5.6.
7. GRADO ALCOHOLICO
7.1. Principio
Se determina por destilación del producto y
medida de la densidad del destilado por areometría.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de
d 20/20 debidamente contrastado.
7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-
metro interior y 320 mm de altura.
7.2.5. Baño termostático a 20°C.
7.3. Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado. Según método
oficial número 1.
7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo.
Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos
45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar la
probeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4
veces para igualar las temperaturas de la probeta y
el líquido.
Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta y
destilado, alcance en el baño termostatizado la
temperatura de 20°C.
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bul-
bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas
décimas de grados estén mojadas.
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo
justo debajo del plano de la superficie del líquido,
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-
cie varíe de elipse a una línea recta.
Anotar el punto en que esta línea intersecciona
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-
ra del alcohómetro.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-
tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el
M
alcohómetro y en el termómetro, comprobando así
las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-
metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-
tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir
la probeta con la muestra varias veces (el termóme-
tro quede en su sitio), para que se equilibre térmica-
mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alco-
hómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas
en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores
calculados son válidos si tienen aproximación de
0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lectu-
ras adicionales y calcular la medida.
7.4. Cálculo.
El grado alcohólico real es el leído en el destilado
obtenido según 7.3.1.
Si en la obtención del destilado, 100 ml de
muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-
nida, debe ser multiplicada por 2.
7.5. Referencia.
7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1980-9015-9.
8. ALDEHIDOS
8.1. Principio.
Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de
ml.
8.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución
40% p/v QP
182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.
8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluir
convenientemente Sodio Hidrógeno Sulfito solución
40% p/v QP en Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Poner 100 ml del destilado (obtenido según
Método oficial número 1) en un matraz de 500 ml
de Agua PA-ACS y un exceso de la disolución 149
(8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lo
menos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Dejar el matraz, bien tapado, durante treinta
minutos, agitando de vez en vez.
Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Valorar el exceso de yodo añadido con Sodio Tio-
 sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloración
completa.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en
blanco, para comprobar en cada serie de ensayos
la estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfato
por ser tan diluidas.
8.5. Cálculo.
El contenido en aldehídos, expresado como
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:
con la disolución de Sodio Hidróxido (9.3.1.) a
pH 8,2 utilizando el pH-metro.
9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño María, en
una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
a 100° C durante treinta minutos. Disolver y transfe-
rir el residuo con varias porciones de Etanol absolu-
to PA (llevando previamente a pH 8,2) de una gra-
duación similar a la muestra usando 50 ml de Etanol
absoluto PA en total.
Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.

Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100 9.5. Cálculo.

de alcohol absoluto) = (V2
- V1) x ––––––––––
A
Siendo: 9.5.1. Acidez fija (en V1 x 1,2 x 100
V1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta- mg/100 ml de etanol absoluto) = –––––––––––––––
do en la muestra. A
V2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta- Siendo:
do en el blanco. V1 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-
A = grado alcohólico. pleados en 9.4.1.
A = grado alcohólico de la muestra.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La solución de sodio bisulfito tiene mayor
tiempo de estabilidad si se le añade un 10% de 9.5.2. Acidez fija ( en V2 x 1,2 x 100
alcohol. En cualquier caso esta solución es estable, mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––
como máximo una semana. A
Siendo:
8.7. Referencias. V2 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-
8.7.1. Association of Official Agricultural Che- pleados en 9.4.2.
mists 1980-9052. A = grado alcohólico de la muestra.
8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE
33-107-74. 9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en
mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
vendrá dado por la fórmula :
9. ACIDEZ VOLATIL
Acidez volátil = acidez total - acidez fija.
9.1. Principio.
Se define convencionalmente como la diferencia 9.6. Referencia.
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco- Edición 1980-9046-9048.
hol absoluto.
10. AZUCARES REDUCTORES
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas. 10.1 Principio.
9.2.2. pH-metro. Eliminación previa de todas las materias reduc-
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana. toras distintas de los azúcares reductores por defe-
cación y posterior valoración basada en la acción
9.3. Reactivos. reductora de los azúcares sobre una solución
131074 Agua PA-ACS cupro-alcalina.
121086 Etanol absoluto PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO 10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeración
150 9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N. de reflujo.
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas 10.2.2. Material necesario para volumetría.
PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 10.2.3. Baño de agua.
9.3.2. Etanol absoluto PA.
10.3. Reactivos.
9.4. Procedimiento. 131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestra 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
 M
131074 Agua PA-ACS 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación
171096 Almidón soluble RE valorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
121212 Calcio Carbonato precipitado PA Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-
211835 Piedra Pómez gránulos QP ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO 10.5. Cálculo.
122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA La cantidad de azúcar, expresada en azúcares
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO reductores contenida en la muestra analizada, se
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV obtiene en la tabla adjunta en función del número
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV n’ - n de ml de tiosulfato utilizado.

10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato Siendo:

PA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Añadir a n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, fato 0,1 N, utilizados para la valoración de la
Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta muestra.
disolución completa. n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. fato 0,1 N, utilizados en la prueba en blanco.
10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.
10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por Expresar el contenido en gramos de azúcares
separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA- reductores por litro, teniendo en cuenta las dilucio-
ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Aci- nes efectuadas en el curso de la defecación del
do Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA- volumen de la muestra analizada.
ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en
300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la
10.6. Referencia.
solución de Cobre Sulfato y completar el volumen
10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
con Agua PA-ACS hasta un litro.
d’Analyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defeca-
10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
ción y 126-127 (valoración).
Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO
con Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio.
10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l. Diluir con-
venientemente 5 g de Almidón soluble RE en 1 l de
Agua PA-ACS; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro
PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta
solución debe ser mantenida diez minutos en ebulli-
ción en el momento de su preparación.

10.4. Procedimiento.
10.4.1. Defecación plúmbica. Llevar 100 ml de
ron a un matraz aforado de 125 ml. Añadir agitando
5 ml de solución saturada de Plomo II Acetato y 1 g
de Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar varias
veces y dejar sedimentar, por lo menos quince
minutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 ml
más de Agua PA-ACS y filtrar.
10.4.2. Valoración. Poner en el Erlenmeyer de
300 ml 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 ml
de ron previamente defecado. Añadir unos gramos
de Piedra Pómez granulos QP y llevar a ebullición, 151
que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptan-
do a Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener
exactamente durante diez minutos la ebullición.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al
 152
TABLA 10.I
Azúcares reductores expresados en mg de glucosa

Primera cifra decimal

ml sodio
tiosulfato 0,1N
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,9
1 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,1
2 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,4
3 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,7
4 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,1
5 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,5
6 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,9
7 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,3
8 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,7
9 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0
10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,5
11 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,0
12 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,5
13 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,0
14 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,5
15 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,0
16 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,6
17 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,4
18 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,1
19 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,0
20 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,9
21 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,8
22 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,8
23 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,8
24 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,8
25 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

11. PLOMO
11.1. Principio.
Determinación del plomo por A.A., previa mine-
ralización de la muestra.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.2.2. Lámpara de plomo.
11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150° C.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de
vitrina de extracción de humos.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capa-
cidad.
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS
(v/v).
11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,589 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
de la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevarla a eva-
poración hasta consistencia siruposa en baño de
arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena o placa. Seguidamente introducir la
cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas
a 450° C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y
dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Fe2O3 ) es aceptado y no requiere
un tratamiento posterior.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas de
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
11.4.2. Construcción de la curva de patrón.
Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón
(11.3.4.) con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener
una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
M
11.4.3. Determinación. Operar según las especi-
ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-
no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
11.5. Cálculo.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de con-
centración o dilución.
11.6. Referencia.
11.6.1. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”.
Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del zinc por A.A. previa minerali-
zación de la muestra.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
12.2.2. Lámpara de zinc.
12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3.,
11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,
11.3.2. y 11.3.3.
12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782
Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumen
necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y
diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra. Como en
11.4.1.
12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.) con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,2;
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,8 nm. 153
12.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zn para la mues-
tra, teniendo en cuenta el factor concentración o
dilución.
 12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. “Atomic Absorption News-
letter” (1963),13.
13. COBRE
13.1. Principio.
Determinación del cobre por A.A., mineralización
por cenizas a < 450° C y concentración previa a la
lectura con objeto de conseguir resultados suficien-
temente precisos.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
13.2.2. Lámpara de cobre.
13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3.,
11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.
13.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
313193 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
13.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,
11.3.2. y 11.3.3.
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico del 1% (v/v).
13.4. Procedimiento.
13.4.1. Preparación de la muestra. Como en
11.4.1.
13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) con
Acido Nítrico del 1%, para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cu/l.
13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
13.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de cobre de la muestra.
13.6. Referencia.
13.6.1. H. E. Parker “Atomic Absorption News-
letter” (1963),13.
13.6.2. F. Rousselet “Spectrophotometrie par
154 absorption atomique Boudin”. Edición París (1968),
páginas 59-144.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con gene-
rador de hidruros.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de
0,1 g.
14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
capacidad.
14.2.3. Pipetas de doble aforo.
14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
14.2.8. Registrador gráfico.
14.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1000 ml.
14.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y
disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta
100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución al 1% de Acido Etilendiamino-
tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta
100 ml con Agua PA-ACS.
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO

y disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de
100 ml.
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).
Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua
PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al
20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfúrico al 20%
(14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1%
(14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concen-
tración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé-
nico (14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concen-
tración 0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé-
nico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml, introducir 10 ml de muestra con
20 ml de Acido Nítrico (14.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfú-
rico (14.3.5.).
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5ml
Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un
matraz de 50 ml la solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de tra-
bajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la solu-
ción de Arsénico (14.3.14.), y someterlo al mismo tra-
tamiento que la muestra.
Un ml de la solución contiene 10 nanogramos de
Arsénico.
Preparar un blanco con todos los reactivos utiliza-
dos siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro. En-
cender la fuente de alimentación de las lámparas de
descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para
que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo
con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcance dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de hidru-
ros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las carac-
terísticas del aparato.
Encender el registrador.
14.4.4. Determinación. Las determinaciones de la
concentración de Arsénico se realizan por el método
de adición de patrones por medio de medidas dupli-
cadas en el espectrofotómetro en las condiciones
especificadas en 14.4.3., añadiendo al matraz de
M
reacción 3 ml de la solución 14.4.1., más 3 ml de la
solución 14.3.2. y 10 ml de la solución 14.3.8. Como
patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
Lavar los matraces antes y después de cada uso,
con Acido Clorhídrico (14.3.3.).
Al construir la gráfica de adición hay que descon-
tar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las
mismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 ml
de la solución blanco.
En estas condiciones el límite de detección de la
técnica es de 5 ng.
15. SACAROSA
15.1. Principio.
La sacarosa se determina por la diferencia de los
poderes reductores antes y después de la hidrólisis
clorhídrica del líquido procedente de la defecación del
ron.
15.2. Reactivos
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
15.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
15.2.2. Sodio Hidróxido 12 N. Diluir convenien-
temente Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS
15.3 Procedimiento.
Poner en dos matraces Erlenmeyer, de 200 ml
cada uno, el mismo volumen del líquido defecado
según el método oficial número 10. Añadir a cada
matraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO, por cada 10 ml de líquido defecado.
En uno de los matraces añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12 N, por cada 10 ml de
líquido defecado, procediendo a la valoración de los
azúcares reductores según el método oficial número
10.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutrali-
zar a baño de agua hirviendo durante 3 minutos. Aña-
dir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido
12 N que al otro matraz y valorar como en el caso
anterior.
15.4. Cálculo.
La diferencia entre las cantidades de azúcares
reductores encontrada en los resultados de estas dos
valoraciones, multiplicada por 0,95 de la riqueza en
sacarosa de la muestra de estudio.
Este resultado se expresa en g/l de ron teniendo
presentes las diluciones efectuadas eventualmente en 155
el curso de la defecación y del volumen de la muestra
de ron que se sometió a la defecación.
15.5. Referencia.
15.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
nalyses des Vins. O. I. V. AS, 4, 1969.
 Aguardientes
compuestos:
Ginebra

156

METODOS DE ANALISIS
1. OBTENCION DEL DESTILADO
1.1. Principio.
Destilación de la muestra en condiciones deter-
minadas.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad,
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de
longitud) o similar.
1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de
capacidad.
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS.
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
antes de enrasar se mantiene en baño de agua a
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las pare-
des del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al
matraz de destilación lavando tres veces consecuti-
vas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua
PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de lavado
al matraz de destilación. Cuando se trate de bebi-
das siruposas, por su gran contenido en azúcar, el
lavado debe efectuarse consecutivamente con tres
proporciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
Proceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
mante inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría
a menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetre, por lo menos, 4-6 cm
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido, aproximadamente,
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-
tro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
M
homogeneizar su contenido antes de proceder a la
determinación del etanol.
1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. El
procedimiento anteriormente descrito difiere única-
mente en que la muestra se mide en matraz afora-
do de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de, aproxima-
damente, 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
barse en ambos casos como sigue:
Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
10% en volumen cinco veces consecutivas. Deter-
minar en la última destilación el título alcoholimétrico
del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en
volumen de etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
do que el flujo del destilado sea uniforme.
1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre cuarenta y cinco y noventa
minutos.
1.6. Referencia.
1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE
33-112-75.
2. FURFUROL
(Furfuraldehído)
2.1. Principio.
El furfurol se combina con la anilina en presencia
del ácido acético para dar un compuesto de color
rojo.
2.2. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
141156 Anilina PRS
2.2.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
2.2.2. Anilina PRS recientemente destilada. Al
destilar debe pasar, como mínimo, un 95% entre
183°C y 185°C.
2.3. Procedimiento.
Poner 10 ml de destilación de ginebra (obtenido
según el método oficial número 1) o la ginebra
directamente, si no contiene ni extracto ni color, en
un tubo de tapón esmerilado. Añadir 0,5 ml de Ani-
lina PRS y 2 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-
ISO. Agitar.
157
2.4. Cálculo.
Si antes de veinte minutos no aparece ninguna
coloración rosa salmón, la muestra se considera
exenta de furfurol.
 2.5. Referencia.
2.5.1. Codex Oenologique International. OIV.
3. EXTRACTO SECO
3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105°C y pesada
posterior del residuo.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.
3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo
plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de
altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga
141058 Acido Sulfúrico 95-98% (USP-NF,BP) PRS-
CODEX o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indica-
dor QP.
3.2.4. Baño de agua.
3.2.5. Balanza analítica.
3.3. Procedimiento.
Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
sequedad, en cápsulas correspondientes previa-
mente desecadas y taradas, en baño de agua hir-
viente y mantener la estufa a 105°C durante treinta
minutos.
Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-
cador y una vez frías pesar en la balanza.
3.4. Cálculo.
El valor del extracto total de la muestra, en gra-
mos por litro, se hallará mediante la fórmula si-
guiente:
Extracto total (g/l) = (M - m) x 40
Siendo:
M = Peso en g de la cápsula con el extracto
seco.
m = Peso en g de la cápsula vacía.
3.5. Referencia.
3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE
33-106-74.
4. BASES NITROGENADAS
4.1. Principio.
Fijación del amoníaco y las bases nitrogenadas
mediante ácido fosfórico, seguida de una primera
158 destilación. Liberación del amoníaco y las bases
nitrogenadas con sodio hidróxido, segunda destila-
ción y posterior valoración con ácido clorhídrico del
segundo destilado.
El límite de detección del método es de 1 mg/l.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. Matraz de 200 ml de capacidad.
4.2.2. Según (1.2.2.), (1.2.3.), (1.2.4.) y (1.2.5.).
4.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA
131074 Agua PA-ACS
121086 Etanol absoluto PA
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
171688 Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE
4.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA.
4.3.2. Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE.
4.3.3. Solución de Acido Clorhídrico 0,01N.
Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-
ISO en Agua PA-ACS.
4.3.4. Solución de Rojo de Metilo (C.I. 13020)
RE-ACS, disolver con 50 ml de Etanol absoluto PA
al 90% de volumen.
4.4. Procedimiento.
En un matraz de 200 ml, introducir 50 ml de
muestra, adicionar 40 ml de Agua PA-ACS y dos
gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar y
desechar los primeros 80 ml.
Enfriar el matraz y al residuo frío adicionar 2 ml
de Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE (o 20 ml
de solución de sodio hidróxido al 1%, si hay pro-
yecciones). Destilar de nuevo recogiendo alrededor
de 7 ml de destilado en un tubo de ensayo en el
que previamente se han introducido 2 ml de Agua
PA-ACS y una gota de solución de Rojo de Metilo,
procurando que el destilado caiga en el fondo del
tubo con la ayuda de una alargadera. Valorar a
continuación con una solución de Acido Clorhídri-
co 0,01N hasta que el indicador vire a rojo.
4.5. Cálculo.
Nitrógeno (mg de nitrógeno/litro) = 2,8 n.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de ácido clorhí-
drico, 0,01N gastados en la valoración.
4.6. Referencia.
4.6.1. Codex Oenologique International. OIV,
1978, pág. 17.
5. ALCOHOLES SUPERIORES
5.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de los
alcoholes al etanol, por cromatografía de gases.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
 M
5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m Aim = área del compuesto en la muestra
de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena de problema.
Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W Apm = área del patrón interno en la muestra
80-100 mallas, lavado a los ácidos. problema.
5.2.3. Microjeringas de 5 µl. f = factor de dilución de la muestra.

5.3. Reactivos. El contenido en alcoholes superiores vendrá

5.3.1. Patrones cromatográficos:
353851 2-Butanol CG
351885 1-Propanol CG
354330 iso-Butanol CG
131082 1-Butanol PA-ACS-ISO
354539 2-Metil-1-Butanol CG
351079 3-Metil-1-Butanol CG
352516 4-Metil-2-Pentanol CG
dado por la suma de los valores individuales obteni-
dos de cada uno de ellos y se expresará en
mg/100 ml de alcohol absoluto.
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Che-
mists 1980, 9075.

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.

TABLA 1
5.4. Procedimiento. ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condi- Compuesto Concentración (mg/l)
ciones cromatográficas orientativas son : Gas porta- ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno 2-Butanol 10
85°C, temperatura del inyector y del detector 150°C. 1-Propanol 125
5.4.2. Calibrado. 2-Metil-1-Propanol 175
5.4.2.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l en Eta- 1- Butanol 15
nol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol. 2-Metil-1-Butanol 100
5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución 3-Metil-1-Butanol 300
en alcohol de 40° en las proporciones que se indi- ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
can en la tabla 1.
5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de la
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de
la solución patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1µl 6. METANOL
en el cromatógrafo. (Alcohol Metílico)
5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra
llevada a 40° se le añade 1 ml de patrón interno 6.1. Principio.
(5.4.2.1.) e inyectar un µl en las mismas condiciones Separación, identificación y cuantificación del meta-
en que se hizo para el calibrado. nol por cromatografía gaseosa.

5.5. Cálculo. 6.2. Material y aparatos.

Una vez identificados los picos por sus retencio- Como en 5.2.
nes relativas al patrón interno se calculan los facto-
res de respuesta para cada uno de ellos y las con- 6.3. Reactivos
centraciones en la muestra problema aplicando las 6.3.1. Metanol pureza cromatográfica
fórmulas: 6.3.2. 4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)
6.3.3. Etanol pureza cromatográfica
Ap
Factor de respuesta (Fr) = Ci x –––– 6.4. Procedimiento.
Ai 6.4.1. Condiciones cromatográficas. Como en
5.4.1.
Aim 6.4.2. Calibrado.
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f 6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.
Apm 6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución
de Metanol pureza cromatográfica a 40°C, de con-
centración similar a la esperada en la muestra.
159
Siendo:
Ci = concentración del compuesto en la 6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de la
solución patrón. solución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de
Ap = área del patrón interno en la solución la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se inyecta
patrón. 1 µl en el cromatógrafo.
Ai = área del compuesto en la solución patrón. 6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.
 6.5. Cálculo.
Como en 5.5.
6.6. Referencia.
6.6.1. Association of Official Agricultural Che-
mists 1980, 9075.
7. GRADO ALCOHOLICO
7.1. Principio.
Se determina por destilación del producto y
medida de la densidad del destilado por areometría.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1°C de
d 20/20 debidamente contrastado.
7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-
metro interior y 320 mm de altura.
7.2.5. Baño termostático a 20°C.
7.3 Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado. Según método
oficial número 1.
7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo.
Echar el destilado en la probeta, inclinar a unos
45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar la
probeta con la palma de la mano, e invertirla tres o
cuatro veces para igualar las temperaturas de la
probeta y del líquido.
Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta y
destilado, alcance en el baño termostatizado la
temperatura de 20°C.
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a
abajo cinco o seis veces, de manera que alcance la
misma temperatura y que se distribuya cualquier
cambio de temperaturas en todo el líquido. Mante-
ner el bulbo del alcohómetro en el líquido, secar el
vástago, dejarlo en reposo de modo que sólo unas
pocas décimas de grados estén mojadas.
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo
justo debajo del plano de la superficie del líquido,
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-
cie varíe de elipse a una línea recta.
Anotar el punto en que esta línea intersecciona
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-
ra del alcohómetro.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-
160 tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el
alcohómetro y en el termómetro, comprobando así
las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-
metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-
tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir
la probeta con la muestra varias veces (el termóme-
tro queda en su sitio), para que se equilibre térmica-
mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alco-
hómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas
en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores
calculados son válidos si tienen aproximación de
0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lectu-
ras adicionales y calcular la media.
7.4. Cálculo.
El grado alcohólico real es el leído en el destilado
según 7.3.1.
Si en la obtención del destilado, 100 ml de
muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-
nida, debe ser multiplicada por 2.
7.5. Referencia.
7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1980-9015-9
8. SACAROSA
8.1. Principio.
La sacarosa se determina por la diferencia de los
poderes reductores antes y después de la hidrólisis
clorhídrica del líquido procedente de la defecación
de la ginebra.
8.2. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
8.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
8.2.2. Sodio Hidróxido 12N. Diluir conveniente-
mente Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS
8.3. Procedimiento.
Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml
cada uno, el mismo volumen del líquido defecado
según el método oficial número 10. Añadir a cada
matraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-
ISO por cada 10 ml de líquido defecado.
En uno de los matraces, añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N, por cada 10 ml de
líquido defecado, procediendo a la valoración de los
azúcares reductores, según el método oficial núme-
ro 10.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutra-
lizar a baño de agua hirviendo durante tres minutos.
Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidró-
xido 12N que al otro matraz y valorar como en el
caso anterior.
8.4. Cálculo.
La diferencia entre las cantidades de azúcares
reductores encontrada en los resultados de estas
dos valoraciones, multiplicadas por 0,95, da la
riqueza en sacarosa de la muestra de estudio.

Este resultado se expresa en g/l de ginebra,
teniendo presentes las diluciones efectuadas even-
tualmente en el curso de la defecación y del volu-
men de la muestra de ginebra que se sometió a la
defecación.
8.5. Referencia.
8.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
nalyses des Vins. OIV, A5, 4. 1968.
9. ACIDEZ TOTAL
9.1. Principio.
La acidez total de la ginebra se considera como
la suma de los ácidos titulables cuando se lleva la
ginebra a pH=7 por adición de un licor alcalino valo-
rado. El ácido carbónico no se considera compren-
dido en la acidez total.
El gas carbónico se elimina previamente de la
ginebra por agitación en frío y con vacío parcial.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.
9.2.2. Agitador magnético
9.2.3. Kitasato de un litro.
9.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N
recientemente preparada.
9.4. Procedimiento.
Poner 150 ml de ginebra en un Kitasato de 1 l de
capacidad, conectar al vacío agitando al mismo
tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se
aprecia a los pocos momentos. Observar atenta-
mente el momento en que dejan de desprenderse
las burbujas, desconectar del vacío.
Tomar 100 ml de la ginebra sin CO2 y llevar a un
vaso de unos 250 ml de capacidad, introducir el
electrodo del vidrio en la ginebra.
Poner en marcha el agitador procurando que no
se formen burbujas y añadir desde bureta solución
de Sodio Hidróxido (9.3.1.) a la ginebra hasta que la
aguja del potenciómetro marque pH=7, mantenien-
do el agitador en marcha durante la operación, que
no debe durar más de cinco minutos.
9.5. Cálculo.
Calcular la acidez total expresada en meq/l con una
aproximación de 0,1 meq/l o en mg de ácido acé-
tico.
Acidez total = 6 v mg ácido acético /l
v = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.
9.6. Referencias.
M
9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-
nalyses des Vins. OIV, A 10, 1 3, 1969.
9.6.2. Jaulmes, P.: “La mesure de l’acidité total
des Vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,
556, 1955.
10. MATERIAS REDUCTORAS
(Azúcares reductores)
10.1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reduc-
toras distintas de los azúcares por defecación y
posterior valoración basada en la acción reducto-
ra de los azúcares sobre una solución cupro-alca-
lina.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de
reflujo.
10.2.2. Material necesario para volumetría.
10.2.3. Baño de agua.
10.3. Reactivos.
131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121212 Calcio Carbonato precipitado PA
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
211835 Piedra Pómez gránulos QP
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato
(aproximadamente saturada). Añadir a 250 g de
Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-
ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución
completa.
10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.
10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por
separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-
ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Aci-
do Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-
ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en
300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la
solución de Cobre Sulfato y completar el volumen
con Agua PA-ACS hasta 1 l. 161
10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO en
Agua PA-ACS. Conservar el frasco en topacio.
10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico 25% en
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
 10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.
10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l; contendrá
200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegu-
rar su conservación. Esta solución debe ser mante-
nida diez minutos en ebullición en el momento de
su preparación.
10.4. Procedimiento.
10.4.1. Defecación plúmbica.
Llevar 100 ml de ginebra a un matraz aforado de
125 ml. Añadir agitando 5 ml de solución saturada
de Plomo II Acetato 3-anhidro PA-ACS-ISO y 1 g de
Calcio Carbonato precipitado PA, agitar varias
veces y dejar sedimentar, por lo menos quince
minutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 ml
más de agua y filtrar.
10.4.2. Valoración.
Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solu-
ción cupro-alcalina y 25 ml de ginebra previamente
defecado. Añadir unos gramos de Piedra Pómez
QP y llevar a ebullición, que debe ser alcanzada en
dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigeran-
te de reflujo y mantener exactamente durante diez
minutos la ebullición.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al
25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación
valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los
25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-
ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.
10.5. Cálculo.
La cantidad de azúcar, expresada en azúcares
reductores contenida en la muestra analizada, se
obtiene en la tabla adjunta en función del número
n’-n de ml de tiosulfato utilizado.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
fato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados en la valora-
ción de la muestra.
n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-
fato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados para la prueba
en blanco.
Expresar el contenido en gramos de azúcares
reductores por litro, teniendo en cuenta las dilucio-
nes efectuadas en el curso de la defecación del
volumen de la muestra analizada.
10.6. Referencia.
10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyses des Vins. OIV, A4e, 106-107 (defeca-
ción) y 126-127 (valoración).

ml sodio Primera cifra decimal

tiosulfato
0,1N 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,9
1 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,1
2 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,4
3 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,7
4 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,1
5 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,5
6 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,9
7 23,2 23 5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,3
8 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,7
9 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0
10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,5
11 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,0
12 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,5
13 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,0
14 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,5
15 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,0
16 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,6
17 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,4
18 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,1
162 19
20
65,5
69,4
65,9
69,8
66,3
70,2
66,7
70,6
67,1
71,0
67,5
71,4
67,8
71,7
68,2
72,1
68,6
72,5
69,0
72,9
21 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,8
22 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,8
23 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,8
24 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,8
25 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

11. PLOMO
11.1. Principio
Determinación del plomo A.A., previa mineraliza-
ción de la muestra.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.2.2. Lámpara de plomo.
11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150°C.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de
vitrina de extracción de humos.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de
capacidad.
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.
11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000
ml con Acido Nítrico al 1%.
11.4 Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
de la muestra en la cápsula (11.2.3.) llevarla a eva-
poración hasta consistencia siruposa en baño de
arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena o placa. Seguidamente introducir la
cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas
a 450°C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejar-
la enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere
un tratamiento posterior.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas del
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
11.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
alícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)
con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curva
de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
M
11.4.3. Determinación. Operar según las especi-
ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-
no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
11.5. Cálculo.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuente el factor de con-
centración o dilución.
11.6. Referencia.
11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del zinc por A.A. previa mineraliza-
ción de la muestra.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
12.2.2. Lámpara de zinc.
12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),
(11.2.4.) (11.2.5.) y (11.2.6.)
12.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),
(11.3.2.) y (11.3.3.)
12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782
Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumen
necesario de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con
Acido Nítrico del 1 % (v/v).
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(11.4.1.).
12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,8 nm. 163
12.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zn para la mues-
tra, teniendo en cuenta el factor concentración o
dilución.
 12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption News-
letter (1963), 13.
13. COBRE
13.1. Principio.
Determinación del cobre por A.A., mineralización
por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a la
lectura con objeto de conseguir resultados suficien-
temente precisos.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
13.2.2. Lámpara de cobre.
13.2.3. Los utilizados para el plomo, en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
13.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),
(11.3.2.) y (11.3.3.)
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de
HNO3 (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 %
(v/v).
13.4. Procedimiento.
13.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(11.4.1.).
13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), con
Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cobre/l.
13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
13.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de cobre de la muestra.
13.6 Referencias.
13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption News-
164 letter (1963),13”
13.6.2 F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed Paris (1968), pág.
59-144
14. ARSENICO
14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con
generador de hidruros.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de
0,1 g.
14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
capacidad.
14.2.3. Pipetas de doble aforo.
14.2.4. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
14.2.8. Registrador gráfico.
14.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver
32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver
15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml.
14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiami-
notetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetra-acético PA-
ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-
ACS.
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-
 M
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu- condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendo
men de 100 ml. al matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20% más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solu-
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO ción (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,
(14.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 20 y 50 ng de Arsénico.
100 ml. Lavar los matraces antes y después de cada
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% uso, con Acido Clorhídrico (14.3.3.).
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Al construir la gráfica de adición hay que des-
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. contar el valor de absorbancia del blanco obtenido
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ± en las mismas condiciones anteriores, pero aña-
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arséni- diendo 3 ml de la solución blanco.
co III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxi- En estas condiciones el límite de detección de la
do al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico técnica es de 5 ng.
al 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sul-
fúrico 1% (14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de
Arsénico (14.3.13.), en un matraz aforado de
100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con
20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5 ml.
Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un
matraz de 50 ml la solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de
trabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de la
solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mis-
mo tratamiento que la muestra.
1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de
Arsénico.
Preparar un blanco con todos los reactivos utili-
zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.
Encender la fuente de alimentación de las lámparas
de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
para que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-
tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de
acuerdo con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcance dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de
hidruros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con las 165
características del aparato.
Encender el registrador.
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
la concentración de Arsénico se realizan por el
método de adición de patrones, por medio de
medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
 Aguardientes
compuestos:
Anís

166

1. OBTENCION DEL DESTILADO
1.1. Principio.
Destilación de la muestra en condiciones deter-
minadas.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de
longitud) o similar.
1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de
capacidad.
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
antes de enrasar se mantiene en baño de agua a
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-
piando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las pare-
des del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al
matraz de destilación, lavando tres veces consecu-
tivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de
Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas del
lavado al matraz de destilación. Cuando se trate de
bebidas siruposas, por su gran contenido en azú-
car, el lavado debe efectuarse consecutivamente
con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
Proceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-
litar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespu-
mante inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale sin salpicadura
por la pared del matraz, que debe estar dentro de
un baño de hielo o agua fría, a menos de 1°C.
El refrigerante debe ir dotado de una alargadera
que penetra por lo menos 4-5 cm en el cuello del
matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a
20°C.
Cuando se alcance dicha temperatura, dentro
del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
M
homogeneizar su contenido antes de proceder a la
determinación del etanol.
1.4.2. Muestras con más del 60% del Etanol.
El procedimiento anteriormente descrito difiere úni-
camente en que la muestra se mide en matraz afo-
rado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximada-
mente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe compro-
barse en ambos caso como sigue: Destilar 200 ml
de una mezcla hidroalcohólica al 10 por 100 en
volumen cinco veces sucesivas. Determinar en la
última destilación el título alcohométrico del destila-
do, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de
etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-
do que el flujo del destilado sea uniforme.
1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre 45 y 90 minutos.
1.5.4. El destilado podrá tener aspecto lechoso
como consecuencia de la emulsión de los aceites
esenciales.
1.6. Referencias.
1. Métodos Oficiales de análisis del ron, ginebra y
whisky.
2. PESO ESPECIFICO DEL ACEITE
ESENCIAL NATURAL
(En materia prima)
2.1. Principio.
Se basa en la determinación de la densidad rela-
tiva del aceite esencial respecto al agua a la misma
temperatura.
Se determinará esta densidad relativa a 25°C
para evitar la posible solidificación de la muestra.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Baño de agua termostatizado a 25 ± 0,1°C.
2.2.2. Picnómetro de 50 ml, según figura adjunta
(fig. 2.1.).
2.2.3. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en
décimas de grado.
2.2.4. Tubo capilar.
2.2.5. Balanza analítica.
2.3. Procedimiento.
167
2.3.1. Llenar completamente el picnómetro con
agua recientemente destilada, tapar y colocar en
2.2.1., de forma que el nivel del agua del baño esté
ligeramente por encima del nivel de enrase del pic-
nómetro.
 2.3.2. Después de treinta minutos quitar el tapón
y con 2.2.4. ajustar el nivel del agua hasta que la
parte inferior del menisco sea tangente con la señal
de enrase del picnómetro.
2.3.3. Sacar el picnómetro del baño. Con un
pequeño rollo del papel de filtro secar el interior del
cuello del picnómetro y el tapón. Introducirlo en
baño a temperatura ambiente durante quince minu-
tos para acelerar la atemperación del líquido. Pasa-
do este tiempo sacar el picnómetro del baño,
secarlo cuidadosamente, dejarlo otros quince minu-
tos a temperatura ambiente y pesar.
2.3.4. Vaciar el picnómetro, enjuagar con aceto-
na y secar completamente con corriente de aire.
Dejar quince minutos a temperatura ambiente,
tapar y pesar.
Según lo descrito:
Pa = Peso aparente del agua = Peso del picnó-
metro lleno - Peso del picnómetro vacío.
2.3.5. Del mismo modo que con el agua, se pro-
cede con el líquido problema, siendo:
Pw = Peso del picnómetro lleno - Peso del pic-
nómetro vacío.
168
Figura 2.l
2.4. Cálculos:
Pa
Peso específico : P 25/25 = –––––
Pw
2.5. Observaciones.
Para evitar la solidificación de la muestra, es
conveniente que la temperatura de la habitación
esté próxima a los 25° C.
2.6. Referencias.
1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 13ª
edición, 1984 : 9.020-9.022.
3. PUNTO DE FUSION DEL ACEITE
ESENCIAL NATURAL
(En materia prima)
3.1. Principio.
Observación, con un sistema adecuado, de la
temperatura a la que se produce la fusión del aceite
esencial, previamente congelado. Como el aceite
esencial no es un compuesto puro, no tendrá punto
de fusión fijo, sino que fundirá en un rango determi-
nado desde que se observan los primeros síntomas
en los cristales hasta que la muestra se vuelve com-
pletamente líquida.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Agitador.
3.2.2. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en
décimas de grado.
3.2.3. Tubos capilares de vidrio.
3.2.4. Lupa o lente de aumento.
3.2.5. Vaso de precipitado de 1.000 ml, forma baja.
3.3. Procedimiento.
Se dispone de un sencillo sistema de medida
consistente en un agitador magnético con placa de
calefacción variable, un vaso de precipitado de
600 ml, un termómetro y una lupa.
Preparar un tubo capilar cerrado en su extremo,
donde se hace llegar una gota del aceite esencial
con la ayuda de otro tubo capilar más fino.
Introducir la punta del tubo capilar en un baño de
hielo, durante dos horas, para que se congele.
Llevar el vaso aproximadamente a la mitad con
agua destilada e introducir la punta del capilar y el
termómetro de forma que queden al menos 30 milí-
metros por debajo de la superficie.
Empezando 8-10°C por debajo del punto de
fusión de la muestra, calentar suavemente para
incrementar la temperatura del baño 0,5°C/minuto,
aproximadamente, agitando simultáneamente el
agua del baño con ayuda del agitador.
Anotar la temperatura a la que se produce la
fusión completa de la muestra, que se observará
con la ayuda de una lupa o lente de aumento.

3.4. Resultado.
El punto de fusión del aceite esencial será la
media aritmética de tres determinaciones sucesivas
que deberán coincidir en un rango de 0,5°C.
3.5. Referencias.
1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª
edición, 1984: 28.014.
4. GRADO ALCOHOLICO
4.1. Principio.
Destilación del producto y posterior medida de la
densidad del destilado por areometría.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. Aparato de destilación como en el Método
Oficial número 1.
4.2.2. Alcohómetro graduado en décimas de
grado de d 20/20, debidamente contrastado.
4.2.3. Termómetro graduado en décimas de gra-
do centígrado.
4.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-
metro interior y 320 mm de altura.
4.2.5. Baño termostático a 20°C.
4.3. Procedimiento.
4.3.1. Obtención del destilado: Según Método
Oficial número 1.
4.3.2. Determinación areométrica:
Limpiar y secar el alcohómetro antes de su
empleo.
Verter el destilado debidamente homogeneizado
en la probeta.
Introducir el alcohómetro y el termómetro en el
líquido.
Esperar veinte minutos para que el termómetro,
el alcohómetro y el destilado adquieran la tempera-
tura del baño termostático.
Alcanzada esta temperatura, sacar el termóme-
tro, secar el vástago del alcohómetro y dejarlo intro-
ducir en el destilado con un ligero movimiento de
rotación.
Anotar el grado alcohólico leído.
Repetir estas operaciones varias veces. Las lec-
turas obtenidas son válidas si tienen aproximación
de 0,1 grados alcohólicos. Si no fuera así, realizar
lecturas adicionales y calcular la media.
4.4. Cálculos.
El grado alcohólico es la lectura obtenida en
4.3.2., expresada en grados y décimas de grado de
alcohol.
Si en la obtención del destilado 100 ml de mues-
tra se destilaron a 200 ml, la lectura hay que multi-
plicarla por dos.
Nota: No quedando claro el párrafo anterior,
interpretamos:
M
En el caso de muestras de más de 60% de
alcohol, sólo se toman 100 ml que se diluyen a
200 ml por lo cual, hay que multiplicar la lectura por
dos.
4.5. Referencias.
1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª
edición, 1984 : 9.023-9.024.
5. AZUCARES TOTALES
5.1. Principio.
Dilución previa de la muestra, inversión y poste-
rior valoración basada en la acción reductora de los
azúcares sobre una solución cuproalcalina.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Erlenmeyer de 250 ml con boca esmeri-
lada.
5.2.2. Refrigerante de reflujo de 30 cm de longi-
tud útil.
5.2.3. Material necesario para volumetría.
5.2.4. Baño de agua con termostato.
5.3. Reactivos.
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
141270 Cobre II Sulfato 5-hidrato
(USP, BP) PRS-CODEX
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
121647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
5.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
5.3.2. Solución de Sodio Hidróxido 12N, prepa-
rada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-
ISO y Agua PA-ACS.
5.3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
5.3.4. Solución cuproalcalina:
Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-
hidrato (USP,BP) PRS-CODEX (SO4Cu.5H2O) en
100 ml de Agua PA-ACS, 50 g de Acido Cítrico
1-hidrato PA-ACS-ISO en 300 ml de Agua PA-ACS
y 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA en
300-400 ml de agua caliente. Mezclar cuidadosa-
mente las soluciones de Acido Cítrico y Sodio Car-
169
bonato. Añadir enseguida la solución de Cobre Sul-
fato y llevar a un litro.
5.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30% (p/v),
preparada a partir de Potasio Yoduro PA-ISO y
Agua PA-ACS.
 Conservar en frasco topacio. Es aconsejable no distinto de anís, tener en cuenta para los cálculos
preparar más de lo que se vaya a consumir diaria- el factor de dilución.
mente.
5.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25% en 5.7. Referencias
volumen, preparada a partir de Acido Sulfúrico 96% 1. Recueil des méthodes internationales d'analy-
PA-ISO. se des vins OIV A4-126-127.
5.3.7. Engrudo de almidón de 5 g/l. Para prepa-
rar esta solución mantenerla en ebullición durante
diez minutos. Añadir 200 g de Sodio Cloruro PA- ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
ACS-ISO por litro para asegurar su conservación. D = ml
Mg Diferencia
5.3.8. Solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l de tiosulfato
(0,1N) SV. ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
1 2,4 2,4
5.4. Procedimiento. 2 4,8 2,4
Pipetear 10 ml de anís ( o el volumen adecuado en 3 7,2 2,5
función del contenido en azúcares) en un matraz de 4 9,7 2,5
500 ml, enrasándose con Agua PA-ACS (solución 5 12,2 2,5
A). 6 14,7 2,6
En un matraz de 200 ml se pipetean 25 ml de la 7 17,2 2,6
solución A, enrasándose con Agua PA-ACS. 8 19,8 2,6
Se realiza la inversión de la forma siguiente: 9 22,4 2,6
En un matraz de 50 ml pipetear 20 ml de solu- 10 25,0 2,6
ción B. 11 27,6 2,7
Se añaden 3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA- 12 30,3 2,7
ACS-ISO, llevándose durante cinco minutos a un 13 33,0 2,7
baño a 75°C. 14 35,7 2,7
Se saca y se deja enfriar. 15 38,5 2,8
Se añade Fenolftaleína solución 1% RE y se neu- 16 41,3 2,9
traliza con solución de Sodio Hidróxido 12N hasta 17 44,2 2,9
cerca del punto de viraje y posteriormente con solu- 18 47,1 2,9
ción de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV hasta 19 50,0 3,0
viraje. Se enrasa con Agua PA-ACS y se procede 20 53,0 3,0
al análisis de los azúcares reductores totales 21 56,0 3,0
(solución M). 22 59,1 3,1
En un Erlenmeyer se ponen 25 ml de la solu- 23 62,2 ––
ción cuproalcalina y 25 ml de la solución M, se ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
somete a ebullición con refrigerante de reflujo
manteniendo la ebullición diez minutos; se enfría 6. ANETOL
rápidamente, se añaden 2 ml de almidón, 10 ml
de solución de Potasio Yoduro y 25 ml de Acido 6.1. Principio.
Sulfúrico al 25%, valorándose inmediatamente Separación, identificación y cuantificación del
con solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) anetol por cromatografía de gases.
SV. Se repite la valoración con un blanco, sustitu-
yendo los 25 ml de solución M por 25 ml de Agua 6.2 Material y aparatos.
PA-ACS. 6.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
5.5. Cálculos. 6.2.2. Columna de acero inoxidable de 3 m de
Sea D la diferencia entre lo gastado por el longitud de 1/8 pulgadas de diámetro interno,
blanco y lo gastado por la muestra. rellena de SE 52 al 4% sobre Chromosob. AW.
La concentración de azúcares totales en la DMCS, de 100-120 mallas.
muestra se obtiene a partir del valor D en la tabla, 6.2.3. Microjeringa de 1 µl.
interpolando en cada caso necesario y multipli-
170 cando el valor obtenido por 40 (factor de dilu- 6.3. Reactivos.
ción). 131074 Agua PA-ACS
Concentración azúcares totales 121086 Etanol absoluto PA
gramos/litros = Valor obtenido en tabla x 40. 142961 L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
5.6. Observaciones. Trans-anetol
5.6.1. En el caso de haber tomado un volumen

6.3.1. Trans-anetol patrón con un contenido en
cis-anetol menor de 0,5%.
6.3.2. L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
6.3.3. Etanol absoluto PA.
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Curva de calibrado.
6.4.1.1. Patrón interno.
Pesar 0,25 g de L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX y llevar a un matraz aforado de
100 ml, disolver en 40 ml de Etanol absoluto PA y
enrasar con Agua PA-ACS.
6.4.1.2. Solución patrón.
Pesar 1 g de anetol y disolver en 400 ml de Eta-
nol absoluto PA, enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS.
Ese patrón debe estar en el momento de su utiliza-
ción recientemente preparado.
6.4.1.3. Solución de calibrado. A partir de la solu-
ción 6.4.1.2. preparar soluciones que contengan
0,1; 0,25; 0,50; 0,75 y 1 g/l en alcohol de 40°C.
A 100 ml de estas soluciones se le añade 5 ml
de la solución 6.4.1.1.
Estas soluciones se inyectan en el cromatógrafo
obteniendo la curva de calibrado, representándose:
Area del Patrón
––––––––––––––––––––– frente a concentraciones.
Area del patrón interno
6.4.2. Condiciones cromatográficas aproxi-
madas.
Temperatura del horno: 130°C.
Temperatura del inyector: 220°C.
Temperatura del detector: 220°C.
6.4.3. Preparación de la muestra:
Tomar 100 ml del destilado, según método 1.
Añadir 5 ml de patrón interno e inyectar en el cro-
matógrafo.
6.5. Cálculos.
Aim
6.5.1. Calcular la relación –––– y llevar a la curva
Apm
de calibrado, obteniéndose el valor de la concentra-
ción de anetol en la muestra problema.
6.5.2. También se puede emplear un patrón de
concentración fija de anetol, calculándose el factor
de respuesta y la concentración de la muestra apli-
cando las fórmulas siguientes:
Ap
Fr = Ci ––––
Ai
Aim
Concentración de la muestra g/l = Fr x –––– x f
Apm
M
Siendo :
Ci = Concentración del anetol en la solución
patrón, que será similar a la esperada en
la muestra problema.
Ap = Area del patrón interno en la solución
patrón.
Ai = Area del anetol en la solución patrón.
Aim = Area del anetol en la muestra problema.
Apm = Area del patrón interno en la muestra
problema.
F = Factor de dilución de la muestra.
Se debe realizar el cálculo de la concentración
en anetol de la muestra con un patrón de riqueza
aproximada a la esperada. En caso de no conocer-
se ésta, se debe efectuar una inyección previa para
fijar el nivel de anetol refiriéndola al patrón de 1g/l y
una vez evaluado se inyectará un patrón, si fuese
necesario, de concentración próxima a la de la
muestra, obteniendo el resultado final por referencia
a este segundo patrón.
6.6. Referencias.
1. José Ramón García Hierro y Gertrudis Marín
Esteban. Informe del Laboratorio Arbitral de la Sub-
dirección General de Laboratorios Agrarios.
7. METANOL
7.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del
metanol por cromatografía gaseosa.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
7.2.2. Columna cromatográfica.
Columna de 4 m de longitud, de 1/8 pulgadas
de diámetro interno, rellena de Carbowax 1500, al
15% sobre Chromosorb W, 80-100 mallas, lavada a
los ácidos.
7.2.3. Microjeringas de 1 µl.
7.3. Reactivos.
7.3.1. Metanol pureza cromatográfica
7.3.2. 352516 4-Metil-2-Pentanol CG
7.3.3. Etanol pureza cromatográfica
7.4. Procedimiento.
7.4.1. Obtención del destilado como en el méto-
do oficial número 1.
171
7.4.2. Condiciones cromatográficas:
Las condiciones cromatográficas orientativas
son: Gas portador; nitrógeno, 20 ml/min, tempera-
tura del horno, 85°C; temperatura del inyector y del
detector, 150°C.
 7.4.3. Calibrado:
7.4.3.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l de
4-Metil-2-Pentanol CG en etanol de 40°C.
7.4.3.2. Solución Patrón: preparar una solución
de metanol en etanol de 40°, de concentración
similar a la esperada en la muestra. A 10 ml de esta
solución añadir 1 ml de la solución de patrón interno
7.4.3.1. e inyectar 1 µl en el cromatógrafo.
7.4.4. Muestra problema: A 10 ml del destilado
de anís llevado a 40°, se le añade 1 ml de patrón
interno 7.4.4.1. e inyectar 1 µl en las mismas condi-
ciones en que se hizo para el calibrado.
7.5. Cálculos.
Calcular el factor de respuesta y la concentra-
ción de metanol aplicando las siguientes fórmulas:
Ap
Factor de respuesta (Fr) = Ci ––––
Ai
Aim
Concentración de la muestra (mg/l) = Fr ––––– f ,
Apm
siendo:
Ci = Concentración del metanol en la solución
patrón.
Ap = Area del patrón interno en la solución
patrón.
Ai = Area del metanol en la solución patrón.
Aim = Area del metanol en la muestra problema.
Apm = Area del patrón interno en la muestra
problema.
f = Factor de dilución de la muestra.
172
Figura 8.l
Destilador simple con dispositivo para adición
7.6. Referencias.
1. "Official Methods of Analysis of the A.O.A.C"
14ª edición, 1984 : 5.008-5.011.
8. BASES NITROGENADAS
8.1. Principio.
Fijación de las bases nitrogenadas y del amonía-
co mediante el ácido fosfórico en el destilado de la
muestra.
Liberación de éstos mediante solución de sodio
hidróxido y valoración con ácido clorhídrico.
El límite de detección de este método es de
1 mg/l.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Destilador simple con dispositivos para
adición (figura 8.1.).
8.2.2. Probeta de 100 ml de capacidad.
8.2.3. Tubos de ensayo de boca esmerilada de
30 ml de capacidad.
8.2.4. Bureta de 25 ml de capacidad.
8.2.5. Pipetas de 50 ml de capacidad.
8.2.6. Matraz de 50 ml.
8.3. Reactivos.
182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV
121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

8.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA (d= 1,34
g/ml).
8.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%, pre-
parada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-
ACS-ISO y Agua PA-ACS.
8.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 0,01N,
preparada a partir de Acido Clorhídrico 0,05 mol/l
(0,05N) SV y Agua PA-ACS.
8.3.4. Disolución de Rojo de Metilo: Pesar 0,1 g de
Rojo de Metilo RE-ACS y disolver en 50 ml de Eta-
nol 90% v/v, preparado por dilución previa de Eta-
nol 96% v/v PA.
8.3.5. Agua Destilada PA (pH 6,5-7,5).
8.4. Procedimiento.
Obtener el destilado de 100 ml de muestra, ope-
rando según método de análisis número 1.
En un matraz de fondo redondo de 250 ml intro-
ducir 60 ml del destilado, 40 ml de Agua PA-ACS y
2 gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar,
recogiendo los primeros 80 ml del destilado en
8.2.2. y desecharlos.
Enfriar el matraz y al residuo frío añadir 20 ml de
disolución de Sodio Hidróxido al 1%. Destilar de
nuevo, recogiendo alrededor de 10 ml de destilado
en un tubo de ensayo, en el que previamente se
han introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gota
de disolución de Rojo de Metilo, procurándose que
el destilado caiga en el fondo del tubo con la ayuda
de una alargadera.
Valorar a continuación con disolución de Acido
Clorhídrico 0,01N hasta viraje del indicador.
Efectuar el mismo procedimiento sobre un blan-
co de etanol al 40%.
8.5. Cálculos.
Concentración de bases nitrogenadas expresa-
das como hidróxido de amonio (mg/l) = 2,8 (v - v').
Siendo:
v = Volumen, en mililitros, de disolución de Aci-
do Clorhídrico 0,01N gastados en la valora-
ción.
v' = Volumen, en mililitros, de disolución de Aci-
do Clorhídrico 0,01 N gastados en el blanco.
8.6. Referencias.
1. "Codex Oenologique International, O.I.V.",
1978, página 17
9. ACEITES ESENCIALES
9.1. Principio.
Extracción de los aceites esenciales y cuantifica-
ción.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Embudos de decantación de 500 ml.
9.2.2. Desecador con dispositivos para hacer
vacío o rotavapor.
M
9.2.3. Matraces de 100 ml de forma corazón
con boca adecuada para adaptar al rotavapor.
9.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
Anetol Patrón
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
122006 n-Pentano PA
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
121716 Sodio Sulfato anhidro PA
9.3.1. n-Pentano PA.
9.3.2. Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
9.3.3. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO.
9.3.4. Anetol Patrón.
9.4. Procedimiento.
Tomar 40 ml de anís e introducir en un embudo
de decantación añadiendo 160 ml de Agua PA-
ACS, 40 g de ClNa y 60 ml de n-Pentano PA. Agitar
y dejar decantar durante unos diez minutos.
Una vez separadas las fases, tomar la corres-
pondiente al Pentano. Añadir Sodio Sulfato anhidro
PA. Filtrar. Llevar al rotavapor para evaporar el Pen-
tano, sin que la temperatura del baño alcance los
30° C.
Disolver el residuo obtenido en 5 ml de Eter
Dietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-
ACS-ISO e inyectar en el cromatógrafo en las mis-
mas condiciones del método número 6. Normali-
zar esta inyección obteniendo el porcentaje de
Anetol.
9.5 Cálculos.
El contenido en aceites esenciales totales expre-
sado en gramos por litro vendrá dado por la
siguiente fórmula:
100
Aceites esenciales (g/l) = A –––––
B
Siendo :
A = Contenido de anetol, expresado en g/l,
obtenido en el método 6.
B = Contenido en porcentaje de anetol obtenido
en la normalización.
9.6. Referencias.
1. "Dosaje des huilles essentielles totales dans
les liqueurs anissés". A. Maurel. Annales des Falsifi-
173
cations et L'Expertise Chimique et Toxicologuique,
1941
2. Informe interno del Grupo de Trabajo de
Métodos Oficiales de análisis del Ministerio de Agri-
cultura, Pesca y Alimentación.
 10. HIDROXIMETILFURFURAL Y
FURFURAL
10.1. Principio.
Separación y cuantificación por cromatografía
líquido-líquido de hidroximetilfurfural y furfural.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Cromatógrafo líquido-líquido con detec-
tor U.V.
10.2.2. Columna Sherisorb ODS 5 µ de 20 x
0,46 cm o columna similar de fase reserva.
10.2.3. Microjeringa de 25 o 50 µl o cualquier
sistema de inyección adecuado según loop e in-
yector.
10.2.4. Equipo de filtración de disolventes para
cromatografía líquido-líquido con filtro de 0,45 µm o
similar.
10.2.5. Equipo de filtración de muestras con fil-
tros de 0,5 µm o similar.
10.3. Reactivos.
261091 Metanol HPLC
141334 Furfuraldehído PRS
Hidroximetilfurfural
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato
PA
10.3.1. Metanol HPLC.
10.3.2. Solución tampón de Potasio di-Hidróge-
no Fosfato PA-ACS-ISO y di-Potasio Hidrógeno
Fosfato 3-hidrato PA. Disolver 1,25 g de KH2PO4 y
1,25 g de K2HPO4 en agua hasta un litro.
10.3.3. Hidroximetilfurfural patrón y Furfuraldehi-
do recientemente destilado.
10.4. Procedimiento.
10.4.1. Condiciones cromatográficas orientati-
vas:
Fase móvil. Solución de metanol al 10% (v/v) en
disolución tampón (10.3.2.).
Flujo: 0,8 ml/mn.
Longitud de onda. 285 nm.
Tiempo de retención aproximado: Siete minutos
para Hidroximetilfurfural y diez minutos para el Fur-
fural.
10.4.2. Soluciones patrón:
Prepara soluciones de Hidroximetilfurfural y Fur-
fural en Metanol de concentraciones aproximadas a
174 5 mg/l.
10.4.3. Diluir 5 ml de la muestra en Metanol a
25 ml.
Filtrar e inyectar directamente.
10.5. Cálculos.
Calcular la concentración de Hidroximetilfurfural
y Furfural expresada en mg/l, mediante las siguien-
tes fórmulas.
Am
Hidroximetilfurfural o Furfural (mg/l) = ––––– x C
Ap
Siendo:
Am = Area de la muestra.
Ap = Area del patrón externo.
C = Concentración en mg/l del patrón.
10.6. Observaciones.
10.6.1. Observación. - La preparación del patrón
de Hidroximetilfurfural debe efectuarse cada día.
Para evitar esta preparación se puede utilizar el mis-
mo patrón, pero controlando su riqueza actual,
midiendo la absorbancia en U.V. a 284 nm, em-
pleando la siguiente fórmula:
A
c = –––– x 100
Exl
Siendo:
c = Concentración en moles/l de Hidroximetil-
furfural.
E = Coeficiente de absorción Molar, 1,82 x 104.
l = Longitud de paso de la cubeta en cm.
A = Absorbancia del patrón a 284 nm.
11. ARSENICO
11.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con
generador de hidruros.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de
0,1 g
11.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de
capacidad.
11.2.3. Pipetas de doble aforo.
11.2.4. Matraces "Kjeldahl" de 250 ml.
11.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
11.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.
11.2.7. Fuente de descarga sin electrodos.
11.2.8. Registrador gráfico.
11.3. Reactivos.
Se utilizan solamente reactivos de grado de
pureza para análisis y Agua Destilada.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
11.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
(d=1,19 g/ml).
11.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta
un volumen de 1.000 ml.
11.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-
ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta
un volumen de 1.000 ml.
11.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO (d=1,40 g/ml).
11.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84
g/ml).
11.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-
men de 100 ml.
11.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disol-
verlo hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%, pre-
parada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-
ACS-ISO y Agua PA-ACS.
11.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiami-
no-tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
(EDTANa2). Pesar 1 g de EDTANa2 y disolverlo has-
ta 100 ml con Agua PA-ACS.
11.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas
PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
11.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v).
Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
11.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).
Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
11.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arséni-
co Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido
al 20% (11.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
20% (11.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-
rico 1% (11.3.11.).
11.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 10 mg/l.
Pipetear 1 ml de la solución patrón de Arsénico
(11.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
hasta el enrase con Agua PA-ACS.
M
11.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-
centración 0,1 mg/l.
Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico
(11.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
hasta el enrase con Agua PA-ACS.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra.
En un matraz "Kjeldahl", de 250 ml introducir 4 g
de muestra con 20 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO
(11.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(11.3.5.).
Llevar la ebullición hasta reducir el volumen a
5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en
un matraz de 50 ml la solución resultante.
11.4.2. Preparación del blanco y patrones de
trabajo. En un matraz "Kjeldahl", introducir 5 ml de
la solución de Arsénico (11.3.14.) y someterlo al
mismo tratamiento que la muestra.
1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de
arsénico.
Preparar un blanco con todos los reactivos utili-
zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
11.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.
Encender la fuente de alimentación de las lám-
paras de descarga sin electrodos con el tiempo
suficiente para que se estabilice la energía de la
lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-
tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de
acuerdo con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcance dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de
hidruros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las
características del aparato.
Encender el registrador.
11.4.4. Determinación.
Las determinaciones de la concentración de
Arsénico se realizan por el método de adición de
patrones, por medio de medidas duplicadas en el
espectrofotómetro en las condiciones especificadas
en (11.4.3.), añadiendo al matraz de reacción 3 ml
de la solución (11.4.1.), más 3 ml de la solución
(11.3.2.), y 10 ml de la solución (11.3.8.). Como
patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
Lavar los matraces antes y después de cada
uso, con Acido Clorhídrico (11.3.3.).
Al construir la gráfica de adición hay que des-
contar el valor de absorbancia del blanco obtenido
en las mismas condiciones anteriores, pero aña- 175
diendo 3 ml de la solución blanco.
 12. PLOMO
12.1. Principio
Determinación del plomo por absorción atómica.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-
ca.
12.2.2. Lámpara de plomo.
12.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar (de
150 ml de capacidad, aproximadamente)
12.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150°C.
12.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de
vitrina de extracción de humos.
12.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de
capacidad.
12.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
Acido Nítrico al 1%
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d= 1,835
g/ml).
12.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (d=
1,413 g/ml).
12.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.
12.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra.- Pesar 20 g
de la muestra en la cápsula (12.2.3.); llevarla a eva-
poración hasta consistencia siruposa en baño de
arena (12.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar lentamente el
residuo en el baño de arena o placa. Seguidamente
introducir la cápsula en la mufla y mantenerla duran-
te dos horas a 450°C; transcurrido dicho tiempo,
sacarla y dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-
tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-
cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere
176 un tratamiento posterior.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-
ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas del
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
alícuotas apropiadas de la solución patrón (12.3.4.)
con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curva
de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
12.4.3. Determinación. Operar según las especi-
ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-
no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-
nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
12.5. Cálculos.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de con-
centración o dilución.
12.6. Referencia.
1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos. Minis-
terio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
13. ZINC
13.1. Principio.
Determinación del zinc por absorción atómica
previa mineralización de la muestra.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-
ca.
13.2.2. Lámpara de zinc.
13.2.3. Los utilizados para el Pb en (12.2.3.),
(12.2.4.) (12.2.5.) y (12.2.6.)
13.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
Acido Nítrico al 1%
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
13.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),
(12.3.2.) y (12.3.3.)
13.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782
Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumen
necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y
diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 % (v/v).
13.4. Procedimiento.
13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(12.4.1.).
13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;
1; 1,5 y 2 mg/l.
13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,8 nm.
 M
13.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obteni-
dos, hallar las concentraciones de Zinc para la
muestra, teniendo en cuenta el factor concentra-
ción o dilución.

13.6. Referencia.
1. H.E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter”
(1963), 13.

14. COBRE

14.1 Principio
Determinación del cobre por absorción atómica
previa mineralización de la muestra.

14.2. Material y aparatos.

14.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-
ca.
14.2.2. Lámpara de Cobre.
14.2.3. Los utilizados para el plomo, en (12.2.3.),
(12.2.4.), (12.2.5.) y (12.2.6.).

14.3. Reactivos
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
Acido Nítrico al 1%
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

14.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),

(12.3.2.) y (12.3.3.)
14.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-
do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico del 1 % (v/v).

14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(12.4.1.).
14.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (14.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cobre/litro.
14.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.

14.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obteni-
dos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de Cobre de la muestra. 177
14.6 Referencias.
1. H.E. Parker: "Atomic Absorption Newsletter"
(1963).13.
2 F. Rousselet: "Spectrophotometrie par absorp-
tion atomique Boudin". Ed Paris (1968), pág. 59-144.
 Sidras:
Sidras y otras bebidas
derivadas de la
Manzana

178

METODOS DE ANALISIS
1. ELIMINACION DEL ANHIDRIDO
CARBONICO
1.1. Principio.
Desgasificación de la sidra mediante agitación y
filtración.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz Erlenmeyer.
1.2.2. Papel de filtro.
1.2.3. Embudo.
1.3. Procedimiento.
El volumen de sidra que vaya a utilizar, previa-
mente llevada a 17-20°C, verterlo en un matraz
Erlenmeyer de capacidad doble del volumen utiliza-
do. Agitar durante diez minutos y filtrar a continua-
ción a través de un embudo cubierto de papel de fil-
tro seco.
2. GRADO ALCOHOLICO ADQUIRIDO
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método 1 y proceder como se indica en los
métodos oficiales de vinos número 5(a) ("Boletín Ofi-
cial del Estado" de 22 de julio de 1977) y 5(b)
("Boletín Oficial del Estado" del 23 de julio de 1977).
3. AZUCARES REDUCTORES
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método número 1 y proceder como se indica
en los métodos oficiales de vinos números 7(a) y
7(b) ("Boletín Oficial del Estado" de 23 de julio de
1977) y 7(c) ("Boletín Oficial del Estado" de 30 de
agosto de 1979).
4. ANHIDRIDO SULFUROSO
Proceder como se indica en el método oficial de
vinos números 28(a) y 28(b) ("Boletín Oficial del
Estado" de 26 de julio de 1977).
5. METANOL
(Alcohol Metílico)
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método número 1 y proceder como se indica
en el método oficial de vinos número 37 ("Boletín
Oficial del Estado" de 27 de julio de 1977).
M
6. ACIDEZ VOLATIL
Proceder como se indica en el método oficial de
vinos número 21 ("Boletín Oficial del Estado" de 23
de julio de 1977).
7. EXTRACTO SECO TOTAL
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método número 1 y proceder como se indica
en el método oficial de vinos número 6 ("Boletín Ofi-
cial del Estado" de 23 de julio de 1977).
8. CENIZAS
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método número 1 y proceder como se indica
en el método oficial de vinos número 11 ("Boletín
Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977).
9. HIERRO
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método número 1 y proceder como se indica
en el método oficial de vinos número 16 ("Boletín
Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977).
10. ETANAL
10.1. Principio.
El etanal se determina en la sidra, previamente
decolorada con carbón, midiendo a 570 nm, la
coloración verde o violeta que da con el sodio nitro-
prusiato y la piperidina.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar
lecturas a 570 nm.
10.3. Reactivos.
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
121064 Acido Sulfuroso solución 6% PA
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
121237 Carbón Activo polvo PA
Etanal
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
162377 Piperidina PS
182415 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV 179
121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA
181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV
10.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).
Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml
de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
 10.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%
(p/v).
En un matraz aforado de 250 ml, disolver 1 g de
Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.
Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.
10.3.3. Carbón activo polvo PA.
10.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)
(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemen-
te Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-
ACS.
10.3.5. Solución alcalina.
Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en
400 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV con Agua
PA-ACS.
10.4. Procedimiento.
10.4.1. Determinación de etanal.
Colocar 25 ml de líquido a analizar en un erlen-
meyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbón
Activo polvo PA. Agitar enérgicamente durante
algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos
y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para
obtener un filtrado claro.
Dos ml de filtrado incoloro se colocan en un
Erlenmeyer de 100 ml y se adiciona, agitando, 5 ml
de solución de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solu-
ción de Piperidina; mezclar y colocar inmediata-
mente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mm
de espesor. La coloración obtenida que varía del
verde al violeta, se mide a 570 nm con relación al
aire. Esta coloración aumenta para disminuir segui-
damente con rapidez. Elegir como valor definitivo la
máxima absorbancia que se obtiene al cabo de
unos 50 segundos.
La cantidad de etanal contenido en el líquido
analizado se deduce de una curva patrón.
10.4.2. Construcción de la curva patrón.
Solución patrón de Etanal combinado con el Anhí-
drido Sulfuroso.
Tomar Acido Sulfuroso 6% PA, valorar en SO2 y
determinar su cantidad exacta midiéndola con Yodo
0,05 mol/l (0,1N) SV.
En un matraz aforado de 1 litro colocar el volu-
men de esta solución que corresponda a 1.500 mg
de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un
embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado
recientemente y recogido sobre una mezcla refrige-
rante. Enrasar a un litro con Agua PA-ACS, mezclar
y dejar durante la noche.
La cantidad exacta de esta solución patrón de
Etanal combinada con el SO2 debe determinarse
como sigue:
180 En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de
solución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del Acido
Clorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxi-
dar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV en
presencia de Almidón soluble RE hasta coloración
azul débil.
Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%
RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapa-
rición de la coloración azul y aparición de color rosa.
Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo
0,05 mol/l (0,1N) SV hasta coloración azul débil.
Siendo n el volumen gastado, la solución patrón de
Etanal combinado con el SO2 contiene : 44,05 n mg
de Etanal por litro.
Preparación de la curva patrón:
En matraces aforados de 100 ml colocar sucesi-
vamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.
Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corres-
ponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80-
120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilu-
ciones debe calcularse a partir del contenido en
Etanal de la solución patrón determinada anterior-
mente.
Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de
cada una de estas soluciones como se indica ante-
riormente. La representación gráfica de las absor-
bancias de estas soluciones en función de la canti-
dad de Etanal es una recta que no pasa por el
origen.
10.5. Cálculo.
Calcular el contenido en etanal mediante com-
paración con la correspondiente curva patrón.
10.6. Observaciones.
Si, de forma excepcional, el líquido a analizar
contiene etanal libre, no combinado con el SO2 será
necesario, antes de empezar a determinar el etanal
total, pasarlo previamente al estado de combina-
ción con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una
parte del líquido a analizar un pequeño exceso de
SO2 libre y esperar algunas horas antes de proce-
der a la determinación.
10.7. Referencias.
10.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.
Rdsch 1970. 66, 5-6.
10.7.2. Recueil des Méthodes Internationales
d'Analyses des Vins. O. I. V. A-37, 1978.
11. ANHIDRIDO CARBONICO
11.1. Principio.
Después de la oxidación en frío del anhídrido
sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presencia
del ion de cobre II, el anhídrido carbónico despla-
zado de la sidra por una solución tampón de fos-
fato y ácido fosfórico es arrastrado en frío en cir-
cuito cerrado por una corriente de aire mediante
una pequeña bomba de circulación hacia una
solución valorada de bario hidróxido. El exceso de
esta base se determina inmediatamente con una
solución valorada de ácido clorhídrico en presen-
cia de un indicador mixto de timolftaleína-fenolfta-
leína.
Aplicables a contenidos inferiores a 6 g/l.

11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Aparato de vidrio para extracción del
CO2 en circuito cerrado (fig. 1) compuesto de:
- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola
antiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5);
- dos barboteadores (2) y (3);
- una bomba (4) que garantice la circulación del
aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).
11.3. Reactivos.
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
131325 Fenolftaleína PA-ACS
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato
PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO
182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV
171739 Timolftaleína RE
11.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N : En
un matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio
Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.
11.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g de
BaCl2.2H2O por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidra-
to PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
11.3.3. Solución de Bario Hidróxido.
Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario Cloru-
ro de 90 g/l con 1 volumen de solución de Sodio
Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite la
carbonatación.
11.3.4. Solución tampón:
Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida
400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y
50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20° C = 1,63) :
Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que
corresponde a, aproximadamente, 79,4% y com-
pletar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente
hervida.
11.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).
Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g de
Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO en 100 g de
solución.
Utilizarla 15 días después de su preparación
para lograr la decantación del eventual CO3Na2.
Esta solución debe ser transparente.
11.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10
volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2
por litro y libera 10 veces su volumen de oxígeno
por descomposición catalítica con MnO2 en medio
alcalino.
11.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,
pulverizado.
M
11.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y
0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA
neutro, y completar hasta 100 ml.
11.3.9. Acido Clorhídrico 0,2 N. En un matraz
aforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1mol/l (1N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-
ción 0,2N obtenida.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Sidras que contienen menos de 4 g de
CO2, por litro.
La botella de sidra se debe mantener en posi-
ción horizontal durante una noche a 0°C.
Colocar en el barboteador (2) 150 ml exacta-
mente medidos de solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) algunos cristales de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, con
cuidado, en un matraz previamente enjuagado y
enfriado a 0°C, 50 ml de sidra. Colocar el matraz (1)
en el circuito y esperar 10 minutos.
Conectar la bomba, e introducir mediante la
bureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en fun-
cionamiento 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2),
50 ml de la solución de Bario Hidróxido; valorarla
con Acido Clorhídrico 0,2N con indicador mixto.
Sea V2 el número de ml gastados.
Es indispensable valorar diariamente el Bario
Hidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de ml
de Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.
11.4.2. Sidras que contienen más de 4 g de CO2
por litro.
La botella debe mantenerse en posición horizon-
tal a 0°C durante una noche. Abrir la botella con
precaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml
de sidra por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%
haciendo resbalar suavemente la solución por el
cuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente y
homogeneizar su contenido agitándola; colocarla
seguidamente en un baño de agua a 20° C.
Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de
solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) unos cristales de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Introducir lentamente la pipeta en la botella para
evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml de la
sidra y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y
dejarlo reposar 10 minutos.
El volumen de la sidra tomado se deberá reducir
a 25 ml, si ésta contiene más de 8 g/l de anhídrido
carbónico. 181
Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)
con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.
Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2)
50 ml de la solución de Bario Hidróxido. Valorarla
con Acido Clorhídrico 0,2N en presencia de indica-
 dor mixto. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1
el número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consu-
midos para valorar 150 ml de solución de Bario
Hidróxido.

11.5. Cálculo.
11.5.1. Para sidras que contienen menos de 4 g
de CO2 por litro.
Cantidades de CO2 en gramos por l en la sidra.
CO2 (g/l) = 0,088 (V1 - 3V2).
11.5.2. Para sidras que contienen más de 4 g de
CO2 por litro.
Medir el volumen de líquido que queda en la
botella y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada
para la determinación. Sea V el volumen total así
determinado. Calcular seguidamente el factor de
corrección f, necesario para tener en cuenta los
50 ml de Sodio Hidróxido al 50% introducidos en la
botella:

V
f = ––––––
V - 50

Si la muestra para la determinación es de 50 ml,

la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es
(2V1 - 6V2) x 0,088 x f.
Este resultado debe multiplicarse por 2 si la
toma de muestra es de 25 ml.

11.6. Referencias.
11.6.1. Jaulmes (P.), Metch. An. 1972, n° 422;
Ann. Fals. Exp. Chim. 1973, n°708, 96-109.
11.6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d'Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.

182

Figura l
M

183
 Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos.
Productos derivados de
la Uva, Aguardientes
y Sidras.

184 NOTA: Algunos de los reactivos recomendados en

los métodos analíticos previamente descritos han
modificado su código y mejorado su calidad.
Además se han producido nuevas incorporaciones.
Por favor, consulte este anexo antes de efectuar
su pedido. Es la versión actualizada de la oferta de
productos suministrables en Mayo de 1999.
 M
REACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CÓDIGO O DE CALIDAD

ANTERIOR ACTUAL
263093 Acetonitrilo gradiente HPLC 221881 Acetonitrilo (HLPC-gradiente) PAI
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato RE 121024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato PA
124559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Disódica 144559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Cálcica
Cálcica PA Disódica
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX
171096 Almidón soluble RE 121096 Almidón de Patata soluble PA
121118 Amonio Bromuro PA 131118 Amonio Bromuro PA-ACS
171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE 281432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RV
171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE 281168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RV
351082 1-Butanol CG 361082 1-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI
354330 iso-Butanol CG 361089 iso-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI
353851 2-Butanol CG 123851 2-Butanol PA
351086 Etanol absoluto CG 361086 Etanol absoluto (UV-IR-HPLC) PAI
351085 Etanol 96% CG 361085 Etanol 96% (UV-IR-HPLC) PAI
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS 131897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PA-ACS
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 131321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato PA-ACS
171327 Fenolftaleína solución 1% RE 281327 Fenolftaleína solución 1% RV
141334 Furfuraldehído PRS 131334 Furfural estabilizado con ~0,1% de BHT
PA-ACS
261091 Metanol HPLC 361091 Metanol (UV-IR-HPLC prep.) PAI
351091 Metanol CG 321091 Metanol (PAR) PAI
351079 3-Metil-1-Butanol CG 131079 3-Metil-1-Butanol PA-ACS
352516 4-Metil-2-Pentanol CG 162516 4-Metil-2-Pentanol PS
164542 4-Nitroanilina PS A10369 4-Nitroanilina, 98%
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 131439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) PA-ACS
251450 Parafina P.F. 55-60°C en pastilla DC 253211 Parafina P.F. 56-58°C en lentejas DC
121884 1-Pentanol PA 131884 1-Pentanol PA-ACS
171495 Potasio Cloruro solución saturada RE 281495 Potasio Cloruro solución saturada RV
351885 1-Propanol CG 361885 1-Propanol (UV-IR-HPLC) PAI
354457 2-Propanol CG 321090 2-Propanol (PAR) PAI
171615 Rojo de Fenol RE-ACS 131615 Rojo de Fenol PA-ACS
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS
171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE 281634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RV
171730 Tampón solución pH 10 RE 281730 Solución Tampón pH 10 RV
171739 Timolftaleína RE 121739 Timolftaleína PA
171748 Tornasol tintura RE 281748 Tornasol tintura RV
171759 Verde de Bromocresol RE-ACS 131759 Verde de Bromocresol PA-ACS
121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA 131787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA-ACS

185
 ACETALDEHIDO 131064 ACIDO SULFUROSO
A13752 3-HIDROXI-2-BUTANONA dímero,98% solución 6% PA-ACS
(ACETOINA dímero) 131066 ACIDO L(+)- TARTARICO PA-ACS-ISO
131007 ACETONA PA-ACS-ISO ACIDO TIOBARBITURICO
221881 ACETONITRILO (HPLC-gradiente) PAI A13401 ACIDO TIOSALICILICO,98%
131008 ACIDO ACETICO glacial PA-ACS-ISO 141792 AGAR (USP) PRS-CODEX
ACIDO ACETICO 2 mol/l (2N) 131074 AGUA PA-ACS
131013 ACIDO L(+)- ASCORBICO PA-ACS-ISO 171071 AGUA DE BARITA solución saturada RE
A10934 ACIDO BARBITURICO, 98+% 171073 AGUA DE CAL solución saturada RE
121014 ACIDO BENZOICO PA 212236 AGUA DESIONIZADA QP
131015 ACIDO BORICO PA-ACS-ISO ALILO iso-TIOCIANATO
131808 ACIDO CITRICO anhidro PA-ACS 121096 ALMIDON DE PATATA soluble PA
131018 ACIDO CITRICO 1-hidrato PA-ACS-ISO 141101 ALUMINIO SULFATO 18-hidrato
131020 ACIDO CLORHIDRICO 37% PA-ACS-ISO (RFE, BP,Ph. Eur.) PRS-CODEX
131019 ACIDO CLORHIDRICO 35% PA-ISO AMONIACO GAS
182107 ACIDO CLORHIDRICO 0,05 mol/l 121129 AMONIACO 25% (en NH3) PA
(0,05N) SV 141128 AMONIACO 20% (en NH3) PRS
182318 ACIDO CLORHIDRICO 0,25 mol/l 131118 AMONIO BROMURO PA-ACS
(0,25N) SV 131121 AMONIO CLORURO PA-ACS-ISO
181022 ACIDO CLORHIDRICO 0,5 mol/l 131120 di-AMONIO HIDROGENO
(0,5N) SV CITRATO PA-ACS
181021 ACIDO CLORHIDRICO 1 mol/l (1N) SV 131368 AMONIO HIERRO (II) SULFATO
182108 ACIDO CLORHIDRICO 2 mol/l (2N) SV 6-hidrato PA-ISO
A15135 ACIDO 4-CLOROBENZOICO, 98+%
131365 AMONIO HIERRO (III) SULFATO
121024 ACIDO CROMOTROPICO SAL
12-hidrato PA-ACS-ISO
DISODICA 2-hidrato PA
131134 AMONIO MOLIBDATO 4-hidrato
144559 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO
PA-ACS-ISO
SAL CALCICA DISODICA
131135 AMONIO NITRATO PA-ACS-ISO
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX
121146 di-AMONIO TARTRATO PA
131669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO
132352 AMONIO meta-VANADATO PA-ACS
SAL DISODICA 2-hidrato PA-ACS-ISO
281432 ANARANJADO DE METILO
182120 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO
solución 0,1% RV
SAL DISODICA 0,05 mol/l (0,05N) SV
A13482 trans-ANETOL,98%+
131030 ACIDO FORMICO 98% PA-ACS
131032 ACIDO orto-FOSFORICO 85% 141156 ANILINA PRS
PA-ACS-ISO 211160 ARENA DE MAR lavada, grano fino QP
121660 ACIDO orto-FOSFORICO 50% PA A16992 ARSENICO POLVO -100 mesh, 99,99%
A13700 ACIDO 4-HIDROXIBENZOICO, 99% 313171 ARSENICO solución patrón
131034 ACIDO L(+)- LACTICO PA-ACS As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131037 ACIDO NITRICO 69% PA-ACS-ISO 281168 AZUL DE BROMOTIMOL solución
131036 ACIDO NITRICO 60% PA-ISO 0,04% RV
121737 ACIDO NITRICO 53% PA 251170 AZUL DE METILENO (C.I. 52015) DC
ACIDO NITRICO AL 1% 131182 BARIO CLORURO 2-hidrato
ACIDO PERYODICO 0,05 M PA-ACS-ISO
121050 ACIDO PIROGALICO PA 131188 BARIO HIDROXIDO
141045 ACIDO SALICILICO (RFE, USP, BP, 8-hidrato PA-ACS-ISO
Ph. Eur) PRS-CODEX 2,3-BUTANODIOL
141055 ACIDO SORBICO (RFE, USP, BP, 361082 1-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI
Ph. Eur.) PRS-CODEX 131082 1-BUTANOL PA-ACS-ISO
131057 ACIDO SULFANILICO PA-ACS 361089 iso-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI
471058 ACIDO SULFURICO 95-98% 123851 2-BUTANOL PA
186 (máx 0,0000005% Hg)
131058 ACIDO SULFURICO 96%
PA-ACS-ISO
PA-ISO
A13159 BUTIL-PBD (2-(4-Bifenil)-5-
(4-tert-butilfenil)-1,3,4-oxadiazol
182102 ACIDO SULFURICO 121211 CALCIO ACETATO x-hidrato PA
0,01 mol/l (0,02N) SV 121212 CALCIO CARBONATO precipitado PA
181061 ACIDO SULFURICO 0,05 mol/l (0,1N) SV 121221 CALCIO CLORURO
181059 ACIDO SULFURICO 0,5 mol/l (1N) SV anhidro, polvo PA
182105 ACIDO SULFURICO 1 mol/l (2N) SV CALCIO CLORURO 0,5 mol/l (0,05M)
 M
142400 CALCIO HIDROXIDO polvo, 121341 D (+) - GLUCOSA PA
(RFE,USP, BP. Ph. Eur.) PRS-CODEX 132063 n-HEXANO PA-ACS
211229 CALCIO HIDROXIDO natural, polvo QP 141076 HIDROGENO PEROXIDO
211234 CALCIO OXIDO natural, trozos QP 30% p/v (100 vol.) estabilizado PRS
124537 CALCON (C.I. 15705) PA 131914 HIDROXILAMONIO CLORURO
121237 CARBON ACTIVO polvo PA PA-ACS-ISO
131245 CARBONO TETRACLORURO 121925 HIDROXILAMONIO SULFATO PA
PA-ACS-ISO A12475 5-(HIDROXIMETIL)-2-
251246 CARMIN DE INDIGO (C.I. 73015) DC FURALDEHIDO, 97%
121248 CERIO (IV) SULFATO 4-hidrato PA 313182 HIERRO solución patrón
142323 CLORAMINA T 3-hidrato Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 211934 HIERRO metal, granulado fino QP
313178 COBRE solución patrón 141358 HIERRO (III) CLORURO 6-hidrato trozos
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA PRS
141266 COBRE METAL, polvo PRS 121793 HIERRO (II) SULFATO ~2-hidrato PA
122726 COBRE (II) SULFATO anhidro PA 131362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato
131270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato PA-ACS-ISO
PA-ACS-ISO 121360 HIERRO (III) SULFATO x-hidrato PA
141270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato 211376 LANA DE VIDRIO, lavada QP
(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 141392 LITIO CLORURO PRS
471153 CROMO (VI) OXIDO 131394 MAGNESIO ACETATO 4-hidrato PA-ACS
(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS 211794 MAGNESIO CLORURO
502612 DERQUIM MC MEZCLA CROMICA ~50% MgCl2 polvo QP
121828 DIFENILAMINA PA MAGNESIO CLORURO 0,1 mol/l (0,1M)
313180 ESTAÑO solución patrón 211276 MAGNESIO OXIDO QP
Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA 142367 MANGANESO (IV) OXIDO
141304 ESTAÑO metal granalla PRS precipitado PRS
471303 ESTAÑO (II) CLORURO 131413 MANGANESO (II) SULFATO 1-hidrato
(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS PA-ACS
131303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato 142961 L(-)-MENTOL (RFE, USP, BP, Ph. Eur.)
PA-ACS PRS-CODEX
ETANAL (ACETALDEHIDO) 131426 MERCURIO (II) OXIDO amarillo
121086 ETANOL ABSOLUTO PA PA-ACS
361086 ETANOL ABSOLUTO (UV-IR-HPLC) PAI 121428 MERCURIO (II) YODURO rojo PA
361085 ETANOL 96% v/v (UV-IR-HPLC) PAI 313186 MERCURIO solución patrón
121085 ETANOL 96% v/v PA Hg = 1,000 ±0,002 g/l AA
132770 ETER DIETILICO estabilizado con 361091 METANOL (UV-IR-HPLC prep.) PAI
~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 321091 METANOL (PAR) PAI
131314 ETER DI-iso-PROPILICO estabilizado 131091 METANOL PA-ACS-ISO
con ~50 ppm de BHT PA-ACS 2-METIL-1-BUTANOL
131897 ETER mono-METILICO DEL 131079 3-METIL-1-BUTANOL PA-ACS
ETILENGLICOL PA-ACS 162516 4-METIL-2-PENTANOL PS
131318 ETILO ACETATO PA-ACS-ISO 131439 NEGRO DE ERIOCROMO T (C.I. 14645)
403687 EXTRACTO DE LEVADURA PA-ACS
Ingrediente CULTIMED 132362 NINHIDRINA PA-ACS
131321 1,10-FENANTROLINA 1-hidrato PA-ACS A10369 4-NITROANILINA, 98%
131325 FENOLFTALEINA PA-ACS PAPEL DE FILTRO
281327 FENOLFTALEINA solución 1% RV (Ver Tarifa Panreac, Filtración MN)
A13034 FLUOROGLUCINOL DIHIDRATO, 98% 91187 PAPEL DE TORNASOL neutro (rollo)
(FLUOROGLUCINA) 253211 PARAFINA P.F. 56-58°C en lentejas DC
131328 FORMALDEHIDO 37-38% p/p 122006 n-PENTANO PA
estabilizado con metanol
142728 D (-)-FRUCTOSA
PA-ACS 131884 1-PENTANOL
211835 PIEDRA POMEZ gránulos
PA-ACS
QP
187
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX PINACIANOL O AZUL DE QUINALDINA
131334 FURFURAL estabilizado con (YODURO DE 1,1’-DIETIL
~ 0,1% de BHT PA-ACS CARBOCIANINA)
141339 GLICERINA (RFE,USP, BP, Ph. Eur.) 162377 PIPERIDINA PS
PRS-CODEX 131457 PIRIDINA PA-ACS
 132382 PLATA DIETILDITIOCARBAMATO 816710 INDICADOR FLUORESCENTE UV254
PA-ACS 131615 ROJO DE FENOL PA-ACS
131459 PLATA NITRATO PA-ACS-ISO 131617 ROJO DE METILO (C.I.13020) PA-ACS
PLATA NITRATO solución 0,1% p/v 131621 SACAROSA PA-ACS
141801 PLATA SULFATO PRS 141625 SELENIO METAL polvo PRS
313189 PLOMO solución patrón 313192 SODIO solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131466 PLOMO (II) ACETATO 3-hidrato 141669 SODIO METAL, barras
PA-ACS-ISO en atmósfera de argón PRS
131473 PLOMO (II) NITRATO PA-ACS 131633 SODIO ACETATO anhidro PA-ACS
816610.1 POLIAMIDA PARA CROMATOGRAFIA 281634 SODIO ACETATO 1 mol/l (1M) RV
313190 POTASIO solución patrón 131644 di-SODIO tetra-BORATO 10-hidrato
K = 1,000 ± 0,002 g/l AA PA-ACS-ISO
121489 POTASIO BROMURO PA 123314 SODIO BOROHIDRURO PA
POTASIO CLORURO 131648 SODIO CARBONATO anhidro
(máx 0,005% de Br) PA-ACS-ISO
131494 POTASIO CLORURO PA-ACS-ISO 122032 SODIO CARBONATO 1-hidrato PA
281495 POTASIO CLORURO 131647 SODIO CARBONATO
solución saturada RV 10-hidrato PA-ISO
131500 POTASIO DICROMATO PA-ISO 131659 SODIO CLORURO PA-ACS-ISO
131505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II) 131668 SODIO DIETILDITIOCARBAMATO
3-hidrato PA-ACS 3-hidrato PA-ACS
131503 POTASIO HEXACIANOFERRATO (III) 131698 SODIO DISULFITO PA-ACS
PA-ACS 131675 SODIO FLUORURO PA-ACS-ISO
121638 SODIO HIDROGENO CARBONATO PA
122333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
131965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato PA
1-hidrato PA-ACS
131509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO
121677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
PA-ACS-ISO
2-hidrato PA
131481 POTASIO HIDROGENO FTALATO
131687 SODIO HIDROXIDO lentejas
PA-ISO
PA-ACS-ISO
121486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO PA
171688 SODIO HIDROXIDO solución 10% p/v
121515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas PA
RE
131524 POTASIO NITRATO PA-ISO
182153 SODIO HIDROXIDO
121526 di-POTASIO OXALATO 1-hidrato PA
0,05 mol/l (0,05N) SV
131527 POTASIO PERMANGANATO 171694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) RE
PA-ACS-ISO 181693 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV
182114 POTASIO PERMANGANATO 181694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV
0,01 mol/l (0,05N) SV 182155 SODIO HIDROXIDO
181529 POTASIO PERMANGANATO 0,25 mol/l (0,25N) SV
0,02 mol/l (0,1N) SV SODIO HIDROXIDO 0,4 mol/l (0,4N)
181528 POTASIO PERMANGANATO 181692 SODIO HIDROXIDO 0,5 mol/l (0,5N) SV
0,2 mol/l (1N) SV 181691 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)
121523 POTASIO meta-PERYODATO PA Indicador: Azul de Bromofenol SV
131729 POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidrato 182415 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)
PA-ACS-ISO Indicador: Fenolftaleína SV
121531 POTASIO SORBATO PA 182158 SODIO HIDROXIDO 2 mol/l (2N) SV
131532 POTASIO SULFATO PA-ACS-ISO 182159 SODIO HIDROXIDO 5 mol/l (5N) SV
121534 POTASIO TIOCIANATO PA 131703 SODIO NITRITO PA-ACS
131540 POTASIO YODATO PA-ACS-ISO 121705 SODIO NITROPRUSIATO 2-hidrato PA
131542 POTASIO YODURO PA-ACS-ISO 131706 di-SODIO OXALATO PA-ACS
188 361885 1-PROPANOL (UV-IR-HPLC)
131090 2-PROPANOL
PAI
PA-ACS-ISO
131700
141859
SODIO meta-PERYODATO
SODIO SALICILATO
PA-ACS

321090 2-PROPANOL (PAR) PAI (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX
172174 REACTIVO DE LUFF-SCHOORL RE 131716 SODIO SULFATO anhidro PA-ACS-ISO
A12130 RESINA DOWEX 1X2-100(Cl) 141717 SODIO SULFITO anhidro PRS
RESINA LEWATIT‚ MP 600 131721 SODIO TIOSULFATO 5-hidrato
(aniónica fuerte I) PA-ACS
 M
182160 SODIO TIOSULFATO
0,05 mol/l (0,05N) SV
181723 SODIO TIOSULFATO 0,1mol/l (0,1N) SV
181722 SODIO TIOSULFATO 1 mol/l (1N) SV
281730 SOLUCION TAMPON pH 10 RV
272168 TAMPON SOLUCION
pH 4,00 ± 0,02 (20°C) ST
272170 TAMPON SOLUCION
pH 7,00 ± 0,02 (20°C) ST
272172 TAMPON SOLUCION
pH 9,00 ± 0,02 (20°C) ST
TETRACLOROETANO
121739 TIMOLFTALEINA PA
TOLUENO MARCADO CON C14
162378 p-TOLUIDINA PS
TORIO NITRATO 4-hidrato
281748 TORNASOL TINTURA RV
131252 TRICLOROMETANO estabilizado
con etanol PA-ACS-ISO
131759 VERDE DE BROMOCRESOL PA-ACS
181969 YODO 0,01 mol/l (0,02N) SV
182161 YODO 0,025 mol/l (0,05N) SV
181772 YODO 0,05 mol/l (0,1N) SV
141782 ZINC METAL, granalla PRS
313193 ZINC solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
A17368 ZINC, ALAMBRE, Ø 0,25 mm, 99,99+%
141783 ZINC METAL, polvo PRS
131787 ZINC SULFATO 7-hidrato PA-ACS

189
 Aditio

Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial
PANREAC QUIMICA, S.A., fabrica además de
los reactivos para análisis PANREAC, una línea de
aditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso ali-
mentario industrial, que cumplen las especifica-
ciones de pureza prescritas por The Food Chemi-
cals Codex 4ª ed., complementadas con las exi-
gencias específicas fijadas por la legislación espa-
ñola y comunitaria de la CEE.
En la relación que sigue se indica denomina-
ción del producto, fórmula y número de identifica-
ción. Para mayor información, solicite nuestro
catálogo ADITIO 1995.

190
 M
N.º de
Código Producto Sinónimos Fórmula
identificación

201003 ACEITE DE VASELINA

204333 ACETOFENONA C 8H 8O
201007 ACETONA CH3COCH3
201008 ACIDO ACETICO GLACIAL CH3COOH E-260
202342 ACIDO ADIPICO (CH2CH2COOH)2 E-355
201013 ACIDO L(+)-ASCORBICO C6H8O6 E-300
202422 ACIDO DL-ASPARTICO C4H7NO4
202034 ACIDO L-ASPARTICO C4H7NO4
201014 ACIDO BENZOICO C6H5COOH E-210
201808 ACIDO CITRICO anhidro C6H8O7 E-330
201018 ACIDO CITRICO 1-hidrato C6H8O7.H2O E-330
201020 ACIDO CLORHIDRICO 37% HCl E-507
202019 ACIDO CLORHIDRICO 35% HCI E-507
202785 ACIDO DECANOICO C10H20O2
202512 ACIDO ESTEARICO C18H36O2
(Mezcla de ácidos grasos)
201669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRA-
ACETICO SAL di-SODICA 2-hidrato Na2H2C10H12N2O8.2H2O
201030 ACIDO FORMICO 98% HCOOH E-236
201029 ACIDO FORMICO 85% HCOOH E-236
201032 ACIDO orto-FOSFORICO 85% H3PO4 E-338
202344 ACIDO FUMARICO HOOCCHCHCOOH E-297
202042 ACIDO L-GLUTAMICO C5H9NO4 E-620
201034 ACIDO L(+)-LACTICO CH3CHOHCOOH E-270
202368 ACIDO LAURICO C12H24O2
202051 ACIDO DL-MALICO C4H6O5 E-296
202591 ACIDO MIRISTICO CH3(CH2)12COOH
203389 ACIDO NlCOTINlCO E-375
202786 ACIDO OCTANOICO C8H16O2
202345 ACIDO PALMITICO
201810 ACIDO PROPIONICO CH3CH2COOH E-280
201055 ACIDO SORBICO C6H8O2 E-200
201883 ACIDO SUCCINICO HOOCCH2CH2COOH E-363
201058 ACIDO SULFURICO 95-98% H2SO4 E-513
201065 ACIDO TANICO
201066 ACIDO L(+)-TARTARICO (CHOH)2(COOH)2 E-334
201792 AGAR E-406
202035 DL-ALANINA C3H7NO2
202043 L-ALANINA C3H7NO2
201081 ALCOHOL BENCILICO C6H5CH2OH
201103 ALUMINIO POTASIO SULFATO
12-hidrato AIK(SO4)2.12H2O E-522
201130 AMONIACO 30% (en NH3) NH4OH E-527
201129 AMONIACO 25% (en NH3) NH4OH E-527
201119 AMONIO CARBONATO ~(NH4)3(CO3)2H+NH2COONH4 E-503i
201121 AMONIO CLORURO NH4Cl E-510
201116 AMONIO HIDROGENO CARBONATO (Amonio Bicarbonato) NH4HCO3 E-503ii
201127 di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO (NH4)2HPO4 E-342ii
201126
201140
AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO
AMONIO SULFATO
NH4H2PO4
(NH4)2SO4
E-342i
E-517
191
203464 L-ARGININA C6H4N4O2
204109 L-ASPARAGINA anhidra C4H8N2O3
202357 BENZOILO PEROXIDO humectado
con aprox. 25% de agua C14H10O4
203977 D (+)-BIOTINA
 N.º de
Código Producto Sinónimos Fórmula
identificación

201089 iso-BUTANOL C4H10O

201082 1-BUTANOL
201429 BUTANONA (Metiletilcetona) C 4H 8O
204233 2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL (BHA, Butildroxianisol) C11H16O2 E-320
201211 CALCIO ACETATO x-hidrato Ca(CH3COO)2.xH2O E-263
201212 CALCIO CARBONATO precipitado CaCO3 E-170i
201213 tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato Ca3(C6H5O7)2.4H2O E-333iii
201219 CALCIO CLORURO anhidro
escoriforme CaCl2 E-509
201221 CALCIO CLORURO anhidro polvo CaCl2 E-509
201215 CALCIO CLORURO 2-hidrato
escoriforme CaCl2.2H2O E-509
201232 CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo CaCl2.H2O E-509
201214 CALCIO CLORURO 6-hidrato CaCl2.6H2O E-509
202824 CALCIO CLORURO solución 45%
(en CaCl2.2H2O) E-509
201818 CALCIO ESTEARATO ~Ca(C18H35O2)2 E-470a
201224 CALCIO FORMIATO C2H2CaO4 E-238
201228 tri-CALCIO FOSFATO ~Ca3(PO4)2 E-341iii
201227 CALCIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro CaHPO4 E-341ii
201226 CALCIO HIDROGENO FOSFATO
2-hidrato CaHPO4.2H2O E-341ii
201225 CALCIO bis (di-HIDROGENO
FOSFATO) 1-hidrato (Calcio Difosfato) CaH4(PO4)2.H2O E-341i
202400 CALCIO HIDROXIDO polvo Ca(OH)2 E-526
201230 CALCIO LACTATO 5-hidrato Ca(CH3CHOHCOO)2.5H2O E-327
203238 CALCIO PROPIONATO E-282
201235 CALCIO SULFATO 2-hidrato CaSO4.2H2O E-516
201237 CARBON ACTIVO polvo
202416 CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (baja viscosidad) E-466
204441 CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (media viscosidad) E-466
203922 CARBOXIMETLCELULOSA SAL
SODICA (alta viscosidad) E-466
203645 L-CISTINA C6H12N2O4S2 E-921
202825 2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL (BHT, Butilhidroxitoluol) C15H24O E-321
201286 1,2 DICLOROETANO ClCH2ClCH2
201254 DICLOROMETANO
estabilizado con amileno CI2CH2
201877 1-DODECANOL C12H26O
201303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato SnCl2.2H2O E-512
201086 ETANOL absoluto CH3CH2OH
201085 ETANOL 96% v/v CH3CH2OH
202695 ETANOL 70% v/v CH3CH2OH
201318 ETILO ACETATO CH3COOC2H5
201319 ETILO S-(-)-LACTATO C5H10O3
192 202047
202728
L-FENILALANINA
D(-)-FRUCTOSA
C9H11NO2
C6H12O6
202060 GELATINA 80-100 Blooms
201339 GLICERINA (Glicerol) C3H8O3 E-422
202329 GLICERINA 87% (Glicerol) C3H8O3 E-422
201922 GLICERINA tri-ACETATO C9H14O6 E-1518
201340 GLICINA H2NCH2COOH E-640
 M
N.º de
Código Producto Sinónimos Fórmula
identificación

201341 D(+)-GLUCOSA C6H12O6

203140 D(+)-GLUCOSA 1-hidrato C6H12O6.H2O
202061 GOMA ARABIGA polvo E-414
201076 HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v
(100 vol.) estabilizado H2O2
201362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato FeSO4.7H2O
202045 L-HISTIDINA C6H9N3O2
202198 L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato C6H10ClN3O2.H2O
201375 LACTOSA 1-hidrato C12H22O11.H2O
202046 L-LEUCINA C6H13NO2
203385 D-(+)-LIMONENO C10H16
201396 MAGNESIO CLORURO 6-hidrato MgCl2.6H2O E-511
202029 MAGNESIO ESTEARATO ~Mg(C18H35O2)2 E-470b
201399 tri-MAGNESIO di-FOSFATO (Magnesio Mg3(PO4)2.5H2O
5-hidrato orto-fosfato)
201927 MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato MgHPO4.3H2O E-343ii
201395 MAGNESIO HIDROXI CARBONATO
5-hidrato (Magnesio Carbonato) E-504ii
201404 MAGNESIO SULFATO 7-hidrato MgSO4.7H2O E-518
201410 MANGANESO (ll) CLORURO 4-hidrato MnCl2.4H2O
201413 MANGANESO (ll) SULFATO 1-hidrato MnSO4.H2O
202067 D(-)-MANITA (Manitol) C6H14O6 E-421
201091 METANOL CH3OH
203332 METILO 4-HIDROXIBENZOATO C8H8O3 E-218
203209 PARAFINA 51- 53°C lentejas
201479 POTASIO ACETATO CH3COOK E-261
201487 POTASIO BROMATO KBrO3 E-924
201490 POTASIO CARBONATO K2CO3 E-501i
201492 tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato K3C6H5O7.H2O E-332ii
201494 POTASIO CLORURO KCl E-508
201522 POTASIO DISULFITO K2S2O5 E-224
201513 tri-POTASIO FOSFATO 1-hidrato K3PO4.H2O E-340iii
201505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)
3-hidrato (Potasio Ferrocianuro) K4Fe(CN)6.3H2O E-536
201480 POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato) KHCO3 E-501ii
201512 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro (di-Potasio orto-
Fosfato) K2HPO4 E-340ii
202333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato K2HPO4.3H2O E-340ii
201509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Potasio
orto-Fosfato) KH2PO4 E-340i
201486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO (COO)2KH(CHOH)2 E-336i
201515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas KOH E-525
201524 POTASIO NITRATO KNO3 E-252
201855 POTASIO NITRITO KNO2 E-249
201729 POTASIO SODIO TARTRATO

201531
4-hidrato
POTASIO SORBATO
NaK(COO)2(CHOH)2.4H2O
CH3(CHCH)2COOK
E-337
E-202
193
201532 POTASIO SULFATO K2SO4 E-515i
201533 POTASIO SULFITO
201537 POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato K2(COO)2(CHOH)2.1/2H2O E-336ii
201540 POTASIO YODATO KIO3
201542 POTASIO YODURO KI
 N.º de
Código Producto Sinónimos Fórmula
identificación

203646 L-PROLINA C5H9NO2

201545 1,2-PROPANODIOL CH2OHCHOHCH3
201090 2-PROPANOL CH3CH2CH2OH
201633 SODIO ACETATO anhidro CH3COONa E-262i
201632 SODIO ACETATO 3-hidrato CH3COONa.3H2O E-262i
203865 SODIO L(+)-ASCORBATO C6H7NaO6 E-301
201637 SODIO BENZOATO C6H5COONa E-211
201648 SODIO CARBONATO anhidro Na2CO3 E-500i
202032 SODIO CARBONATO 1-hidrato Na2CO3.H2O E-500i
201647 SODIO CARBONATO 10-hidrato Na2CO3.10H2O E-500i
201655 tri-SODIO CITRATO 2-hidrato Na3C6H5O7.2H2O E-331iii
201656 tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato Na3C6H5O7.51/2H2O E-331iii
201659 SODIO CLORURO NaCl
201698 SODIO DISULFITO Na2S2O5 E-223
202363 SODIO DODECILO SULFATO (Lauril Sulfato
Sódico) C12H25NaO4S
201681 tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato Na3PO4.H2O E-339iii
201680 tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato Na3PO4.12H2O E-339iii
201665 SODIO HIDROGENO di-ACETATO (Sodio Diacetato) CH3COONaCH3COOH E-262ii
201638 SODIO HIDROGENO CARBONATO (Sodio Bicarbonato) NaHCO3 E-500ii
201654 di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2 Hidrato C6H6Na2O7.11/2H2O E-331ii
201679 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO (di-Sodio
anhidro orto-Fosfato) Na2HPO4 E-339ii
201678 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO
12-hidrato Na2HPO4.12H2O E-339ii
201965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Sodio
1-hidrato orto-Fosfato) NaH2PO4.H2O E-339i
201677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
2-hidrato NaH2PO4.2H2O E-339i
201709 di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO H2Na2O7P2 E-450i
201687 SODIO HIDROXIDO lentejas NaOH E-524
201686 SODIO HIDROXIDO escamas NaOH E-524
203307 SODIO LACTATO sol. 50% p/p C3H5NaO3 E-325
201702 SODIO NITRATO NaNO3 E-251
201703 SODIO NITRITO NaNO2 E-250
201711 tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro (tetra-Sodio
Difosfato) Na4P2O7 E-450iii
201710 tetra-SODIO PIROFOSFATO (tetra-Sodio
10-hidrato Difosfato) Na4P2O7.10H2O E-450iii
201684 SODIO POLIFOSFATO (NaPO3)6 E-452i
201716 SODIO SULFATO anhidro Na2SO4 E-514i
201715 SODIO SULFATO 10-hidrato Na2SO4.10H2O E-514i
201717 SODIO SULFITO anhidro Na2SO3 E-221
201720 SODIO TARTRATO anhidro Na2(COO)2(CHOH)2 E-335ii
201719 SODIO TARTRATO 2-hidrato Na(COO)2(CHOH)2.2H2O E-335ii
201721 SODIO TIOSULFATO 5-hidrato Na2S2O3.5H2O
203064 D(-)-SORBITA (Sorbitol) C6H14O6 E-420i
201733 TALCO lavado E-553b
202475 TIERRA SILICEA purificada y calcinada
194 202101
202049
TITANIO (IV) OXIDO
L-TRIPTOFANO
TiO2
C11H12N2O2
E-171

202048 VAINILLINA C8H8O3

201786 ZINC OXIDO ZnO
201788 ZINC SULFATO 1-hidrato ZnSO4.H2O
201787 ZINC SULFATO 7-hidrato ZnSO4.7H2O
M

195
 Editado por:
PANREAC QUIMICA, S.A.
045 -16 - 500 - 9/99

Diseño:
Pere Duran

Inpresión:
Centre Telemàtic Editorial, SRL

Dep. Legal:
B.43107-83

196