Transporte a travs de membranas

Javier Corzo. Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular. Universidad de La Laguna

1 DEFINICIN DE TRANSPORTE
Consideraremos transporte al movimiento de molculas a travs de una membrana que separa dos compartimentos diferentes. En este tema se estudiarn exclusivamente el transporte a travs de membranas de molculas pequeas o de iones inorgnicos. Por consiguiente, no se estudiar el transporte a travs de membranas de macromolculas tales como protenas o polisacridos, o de lpidos complejos, aunque en algunos de estos casos se emplean sistemas de transporte anlogos a algunos empleados por solutos de bajo peso molecular. Tampoco se estudiarn los procesos de traslocacin de grupo, que suponen la modificacin covalente de una molcula acoplada a su transporte a travs de una membrana. Por ltimo, tampoco se estudiarn los procesos que supongan alteracin en la continuidad fsica de la membrana, como es el caso de la endocitosis o de la exocitosis.

2. Teora Bsica
2.1 VARIACIN DE ENERGA LIBRE EN EL TRANSPORTE La magnitud termodinmica de inters en los procesos de transporte de un soluto a travs de una membrana es el denominado Potencial Electroqumico del soluto. Se define como la variacin de energa libre que ocurre cuando se transporta un mol del soluto a travs de una membrana manteniendo constantes tanto las concentraciones del soluto en los compartimentos de llegada y de salida como el potencial de membrana. Es pues una magnitud que tiene sentido asumiendo condiciones de estado estacionario durante el proceso de transporte. El potencial electroqumico viene dado por la expresin:

Siendo: R la constante de los gases (8,314 J/.mol); T, la temperatura absoluta y F, la constante de Faraday (96.480 J/mol.V). C1 y C2 son las concentraciones de soluto libre en los compartimentos de salida y llegada, respectivamente. Z es la carga del soluto, con el signo adecuado. : diferencia de potencial en voltios entre ambos compartimentos (Potencial del de llegada menos potencial de salida

Si G es negativo, el transporte es exergnico, y no requiere aporte de energa externa para llevarse a cabo; si G es positivo, el transporte es endergnico, y requiere un aporte externo de energa. Es decir, se requiere un proceso exergnico que suministre la energa necesaria y un mecanismo de acoplamiento que transfiera la energa desde el proceso exergnico al transporte endergnico. Es importante tener en cuenta lo siguiente: 1 C1 y C2 son concentraciones de soluto libre (ms correctamente habra que hablar de actividades del soluto). Y no tienen que coincidir necesariamente con las concentraciones de soluto totales, ya que puede ocurrir que el soluto est unido a otras molculas en uno o en ambos compartimentos; en ese caso la concentracin del soluto TOTAL puede ser mucho mayor que la del soluto libre. Por ejemplo, el oxgeno en el eritrocito no se encuentra libre, sino unido en su mayor parte a la hemoglobina; la concentracin de oxgeno libre es muy pequea, pero la cantidad de oxgeno total es elevada. 2 Obviamente, en el caso de que el soluto no est cargado, el segundo trmino de la ecuacin se anula. 3 Es importante tener en cuenta que los dos trminos de la expresin son independientes, y es perfectamente posible que el primer trmino, correspondiente a las concentraciones, sea positivo, y el segundo negativo, o viceversa. Lo importante, lo que va a definir si el transporte es exergnico o endergnico, es la suma de ambos. 4 El potencial electroqumico, tal como se ha definido, presupone que tanto las concentraciones como el potencial de membrana son constantes durante el proceso de transporte. Esta condicin es, evidentemente, una simplificacin. De hecho, cuando se trata de solutos cargados, el potencial de membrana cambia rpidamente con el movimiento de los iones de uno a otro lado de la membrana, de tal forma que en muy poco tiempo las condiciones pueden ser radicalmente diferentes de las que existan al principio del proceso. Segn la expresin #1, el potencial electroqumico se expresa en Julios.mol-1. Si se dividen ambos trminos de la expresin por la constante de Faraday, se puede expresar el potencial electroqumico en voltios:

En el caso de que el soluto transportado sea el H+ , la ecuacin anterior se puede expresar de la siguiente forma:

pH es el pH del compartimento de llegada menos el pH del compartimento de salida (note el signo menos en el trmino de concentracin). H+ es el potencial electroqumico del protn o fuerza protonmotriz (pmf, protonmotive force), por analoga a la fuerza electromotriz. Con este nombre, Peter Mitchell (Premio Nobel en 1978) quiso resaltar la capacidad de producir trabajo de estos gradientes de hidrogeniones (o menos correctamente, protones).

2.2 CLASIFICACIN DE LOS PROCESOS DE TRANSPORTE

El primer criterio que se aplica a la hora de clasificar los procesos de transporte es el termodinmico: El transporte es exergnico o endergnico?. En el caso de que el transporte sea exergnico, es decir, el soluto se mueva A FAVOR de su potencial electroqumico, se trata de TRANSPORTE PASIVO. Si, por el contrario, el soluto se transporta EN CONTRA de su potencial electroqumico (transporte endergnico), se trata de TRANSPORTE ACTIVO.

El segundo criterio se refiere al mecanismo concreto que permite al soluto atravesar la bicapa lipdica. Hay que recordar que en la inmensa mayora de los casos los solutos son molculas polares o inicas, y para ellas la zona hidrofbica de la bicapa lipdica supone una barrera insalvable: la permeabilidad de las bicapas lipdicas para las molculas polares del tamao de la glucosa o mayores, y para los iones, es muy baja. Por consiguiente, tiene que haber un mecanismo que permita a estas molculas e iones atravesar la bicapa lipdica. Como es de esperar, son diferentes tipos de protenas las que llevan a cabo esta tarea. Tenemos los siguientes casos:

2.2.1 Transporte independiente de protenas

0 Difusin simple o libre. El soluto es suficientemente soluble en la membrana como para atravesarla sin problemas. Es importante exclusivamente en el caso del oxgeno, o del

nitrgeno para los organismos diazotrofos. De hecho, ambos gases son ms solubles en medio hidrofbico que en medio acuoso.

Se pensaba que el agua era una molcula suficientemente pequea para poder atravesar la bicapa lipdica, infiltrndose entre las cadenas desordenadas de los cidos grasos. Sin embargo, el descubrimiento de que prcticamente todos los organismos presentan unas protenas que permiten el paso del agua a travs de las membranas, las denominadas acuaporinas, hace pensar que la difusin simple del agua carece de importancia real.

2.2.2 Transporte dependiente de protenas.

Difusin facilitada. El soluto se mueve a favor de su potencial electroqumico, es decir, difunde a travs de la membrana, pero la atraviesa gracias a la existencia de una protena que facilita dicha difusin. Hay dos posibilidades:

1 La protena se limita a crear un conducto hidroflico por el que el soluto se mueve libremente. Son los Poros y Canales.

2 La protena une al soluto, y lo mueve a travs de la membrana gracias a un cambio

conformacional. La protena es un transportador (carrier) en sentido estricto. Dado que en este caso slo se transporta un tipo de soluto, recibe la denominacin especial de Uniporte

Tanto la difusin simple como la difusin facilitada son procesos de Transporte Pasivo, ya que en ambos casos el transporte es exergnico. El Transporte Activo requiere siempre de la existencia de una protena. Hay varias posibilidades: 2 Transporte activo secundario. (Cotransporte) El transporte de un soluto en contra de su potencial electroqumico puede ser acoplado por un transportador adecuado al transporte exergnico de otro soluto. El primero se transporta activamente, aprovechando la energa liberada por el transporte pasivo del segundo a favor de su potencial electroqumico. El mecanismo es anlogo al del uniporte.

3 Transporte Activo Primario. (Bombas) El transporte se acopla a una reaccin qumica exergnica (por ejemplo, hidrlisis de ATP) o a la luz, que suministran la energa necesaria para transportar al soluto en contra de su potencial electroqumico. A este tipo especial de transportadores se les denomina Bombas.

4 Traslocacin de grupo. El soluto es transportado y modificado covalentemente de un modo simultneo. Por ejemplo, el sistema de la fosfotransferasa para el transporte de glucosa por E. coli. 2.3.3 Clasificacin de las protenas transportadoras El nmero de protenas implicadas en procesos de transporte es muy elevado, as como los mecanismos que emplean. Por otra parte, la nomenclatura empleada en este campo ha sido en ocasiones confusa y no se ha empleado consistentemente, lo que ha aumentado la complicacin de un tema ya de por s bastante complejo. Por ello se ha hecho necesario desarrollar un sistema de clasificacin de carcter general, que permita determinar inequvocamente el tipo de transporte que realiza la protena en cuestin, as como su estructura y el mecanismo concreto de actuacin. De hecho, este tema est basado en la clasificacin de las molculas de transporte propuesta en el ao 2002 por el comit de nomenclatura de la Unin Internacional de Bioqumica y Biologa Molecular. Esta clasificacin se encuentra en: http://www.chem.qmul.ac.uk./iubmb/mtp/ .

Para un estudio exhaustivo de todos los tipos de transportadores y descripcin pormenorizada de los mismos, vea http://tcdb.ucsd.edu/tcdb/tcclass.php. A cada transportador (usado aqu en sentido amplio, como molcula responsable de un proceso de transporte, sin presuponer su mecanismo de actuacin) se le asigna un nmero TC, anlogo al conocido EC asignado a las enzimas. Este nmero TC est compuesto por cinco dgitos, en realidad es de la forma dgito-letra-dgito-dgito-dgito y corresponde a su lugar en la clasificacin jerrquica de las molculas transportadoras. Esta jerarqua comprende los siguientes niveles: 1. Clase. Corresponde al mecanismo del proceso de transporte 2. Subclase. Por el tipo de estructura del transportador, o la fuente de energa utilizada 3. Familia. Por la estructura primaria del transportador 4. Tipo. Por la estructura primaria, dentro de una familia 5. Transportador. Por ejemplo, la sntesis de ATP en mitocodrias, cloroplastos y eubacterias la realiza la ATPasa F, cuyo nmero TC es 3.A.2.1.1, que significa: 3: Transportador activo primario A: La energa la suministra la hidrlisis de un enlace pirofosfato 2: ATPasas traslocadoras de H+ (o Na+) del tipo F, V, o A, formadas por un tallo hidrofbico insertado en la membrana y una cabeza hexmrica de tipo 33. 1.1: ATPasas F mitocondriales, de cloroplastos o de eubacterias, sintetizadoras de ATP. Las principales Clases de transportadores son las siguientes (que coinciden con los nmeros correspondientes en el esquema general): 1. Poros y Canales 2. Transportadores dependientes del potencial electroqumico de los solutos 3. Transporte activo primario (bombas) 4. Translocadores de grupo Adems se han definido otras 3 clases ms, que no sern tratadas aqu.