PRCTICA N 01 INSTRUMENTAL BSICO MICROBIOLOGA I. CUESTIONARIO: 1.- qu importancia tiene el uso de materiales de vidrio en el laboratorio de microbiologa?

Ciertos materiales son creados y graduados para poder medir volmenes con mayor precisin; en estos casos se habla de material volumtrico. La mayor parte de los instrumentos empleados son de vidrio, usar este transparente de fcil limpieza, resistente a altas temperaturas. 2.- Qu volumen cree usted que es ms exacto, el medido con una pipeta aforada o el medido con una pipeta graduada? Y Por qu? Segn lo que observ y escuche en la explicacin acerca de estos instrumentos me parece que el mejor es la "PIPETA AFORADA, ya que, fue preparada especficamente para una sola medida, entonces solo hay un pequeo margen de error. Tambin considero que un instrumento que es muy bueno para medir los volmenes es la "BURETA", es el mejor aparato para medir volmenes, ya que, permite controlar gota a gota y de manera ms precisa el lquido por medir. 3.- Qu implemento volumtrico e miden vaciando? Los aparatos usados en trabajos volumtricos son principalmente las buretas, pipetas y matraces aforados, aunque tambin veremos las probetas, todos ellos estn graduados o aforados en litros o en ml, siendo 1mL=1/1000L. Matraz Erlenmeyer Vaso de precipitados. 4.- Cul es el objetivo de la vaselina en la llave de la bureta de titulacin? Los reactivos titulantes generalmente son soluciones de sales inorgnicas, estas sales pueden "pegar" las llaves de las buretas. La vaselina acta solamente como un lubricante para evitar que esto suceda, adems de facilitar la apertura y cerrado de las mismas. 5.- Qu e bioseguridad? La bioseguridad es un conjunto de medidas preventivas encaminadas a reducir el riesgo de transmisin de enfermedades infecciosas, las plagas de cuarentena, las especies exticas invasoras, organismos vivos modificados. 6.- Por qu e importante el uo de lo guardapolvo en el laboratorio de microbiologa? El uso de guardapolvo ser imprescindible para la proteccin del operador. El mismo deber ser higienizado peridicamente y adems deber evitar el contacto con ropa de calle. El objetivo principal de eta norma, e para reducir el riego en cada una de la etapa del proceso, as como evitar la contaminacin de la prctica desarrollada. QUE SE UTILIZA EN UN LABORATORIO DE

II. BIBLIOGRAFA CONSULTADA: 1.- BRADSHAN, L. (1976). MICROBIOLOGIA DE LABORATORIO. Edit. El manual moderno S.A. 576.72/b81. 2.- TORTORA, G. (1993). Introduccin a la microbiologa. Edit. Acribia. Zaragoza. Espaa. 576/T73 3.- FENNER, F. (1981). Microbiologa. 2da. Edicin. La prensa mdica mexicana. Mxico. 576.64/F36. 4.- ACTON Y COL. (1977) Virologa. Edit. Interamericana. Mexico, 576.6/A18. 5.- AGRIOS, G. (1998). Fitopatologa. New York Academia Press. 803 p.

PRACTICA N 02 PREPARACIN DE MATERIALES DE VIDRIO PREVIA A LA ESTERILIZACIN Y MTODOS DE ESTERILIZACIN. I. CUESTIONARIO. 1.- Esplique cuales son la diferencias entre los procesos de esterilizacin, desinfeccin y asepsia. Cmo se relacionan estos procedimientos con la pasteurizacin? 1.1.- La esterilizacin: Es un proceso a travs del cual un objeto o sustancia queda libre de todo organismo viviente, en trminos de viabilidad, la capacidad que ese organismo posee para dividirse. Existen varios mtodos prcticos para esterilizar: la eleccin depende, fundamentalmente, de la naturaleza de los materiales a esterilizar y de la conveniencia. 1.2.- Desinfeccin: mediante agentes que slo disminuyen el riesgo de contaminacin sin garantizar la eliminacin de todo organismo viviente, fundamentalmente por la eliminacin de los microorganismos patgenos. Es decir, la desinfeccin elimina el potencial infectivo de un material. 1.3.- Asepsia:

2.- Explique cmo se eliminan los microorganismos durante la esterilizacin.

3.- Defina los siguientes trminos: microbios tasis, microbio sida, calor hmedo, calor seco y que caso se usan. 3.1 Calor Hmedo. Es proporcionado por autoclaves, aparatos especiales capaces de generar vapor bajo presin. El principio esterilizante del autoclave se basa en la acumulacin de vapor y no en la presin desarrollada en su interior. El vapor se condensa en los objetos ms fros y los calienta instantneamente cedindoles su calor latente. La esterilizacin en autoclave se lleva a cabo desde 15 a 30 min a 121 C, condiciones que corresponden a una presin aproximada de 1,1 Kg/cm2 . El tiempo es necesario para que el vapor penetre y caliente los materiales hasta la temperatura esterilizante que causa coagulacin y desnaturalizacin de las estructuras proteicas y enzimticas. An cuando dicha temperatura es alcanzada, las esporas y clulas vegetativas no mueren todas instantneamente; en general se requiere alrededor de 12 min a 121C para matar endosporas.

Para la esterilizacin de ciertos medios de cultivo lquidos que contienen hidratos de carbono, huevo o suero, o materiales semislidos que son destruidos con facilidad por el calor, se recurre a un mtodo de esterilizacin fraccionada. Este procedimiento denominado tindalizacin, consiste en el calentamiento del material a 80C o 100C durante 30 min, en 3 das consecutivos. El fundamento de esta metodologa es que las clulas vegetativas y algunas esporas resultan destruidas durante el primer calentamiento y las esporas ms resistentes germinan luego y son destruidas durante el segundo o tercer ciclo de calentamiento.

La mayor parte de las bacterias en sus formas vegetativas pueden ser destruidas por exposiciones breves de 60 a 65C. La aplicacin ms importante de este rango de temperatura se relaciona con la pasteurizacin de leche y preparacin de vacunas. La pasteurizacin de la leche consiste en el calentamiento a una temperatura de 72C durante 1 o 2 min, seguido de un enfriamiento rpido. Esto no esteriliza la leche, pero s destruye todas las bacterias productoras de enfermedades que son transmitidas por la leche. En autoclave se esterilizan soluciones salinas, ropa, guantes, materiales de ciruga, tapones, gomas. 3.2 Calor Seco Los generadores de calor seco son hornos, y la esterilizacin se produce cuando los objetos fros absorben el calor del aire caliente que los rodea. Esta absorcin es lenta, por lo que se requiere mayor tiempo para asegurar el proceso (30 min a 121C en autoclave corresponden a 2 horas a 160C en horno). El calor seco destruye los microorganismos por oxidacin de sus constituyentes esenciales. Travs de este mtodo se esteriliza la mayor parte del material de vidrio (frascos, pipetas, tubos) as como ceras de parafina, aceites y polvos de talco. 4.- Mencione otros mtodos de esterilizacin fuera de los ya mencionados. La esterilizacin o desinfeccin pueden llevarse a cabo segn dos mtodos: 4.1 Mtodos fsicos: Agentes Calor hmedo Calor seco Radiacin ultravioleta Radiaciones ionizantes (, x) Filtracin 4.2 Mtodos qumicos: Agentes Aplicacin Alquilantes Oxido de etileno Esterilizacin Formaldehdo Desinfeccin o Esterilizacin Alcoholes (alifticos y aromticos) Desinfeccin Oxidantes: halgenos, KMnO4, Desinfeccin o antisepsia H2O2 Tensioactivos catinicos y Desinfeccin aninicos Metales pesados Desinfeccin o antisepsia Soluciones de cidos o lcalis Desinfeccin Aplicacin Esterilizacin Esterilizacin Desinfeccin o Esterilizacin Esterilizacin Esterilizacin

5.- Qu son las cmaras de aire filtrado? Y mencione cuantos tipos existen.

II. BIBLIOGRAFA CONSULTADA: 1.- BRADSHAN, L. (1976). MICROBIOLOGIA DE LABORATORIO. Edit. El manual moderno S.A. 576.72/b81. 2.- TORTORA, G. (1993). Introduccin a la microbiologa. Edit. Acribia. Zaragoza. Espaa. 576/T73 3.- FENNER, F. (1981). Microbiologa. 2da. Edicin. La prensa mdica mexicana. Mxico. 576.64/F36. 4.- ACTON Y COL. (1977) Virologa. Edit. Interamericana. Mexico, 576.6/A18. 5.- AGRIOS, G. (1998). Fitopatologa. New York Academia Press. 803 p.