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PROYECTO DE CIENCIAS

1. TTULO:

PROPAGACIN CLONAL IN VITRO DE

BEGONIAA PARTIR DE HOJAS. 2. RESPONSABLE: 3. GRADO Y SECION: 4. DURACIN DEL PROYECTO: ALVARO LEONARDO DIAZ HEREDIA 4 B 3 meses -Inicio: Agosto -Culminacin: Octubre

5. REALIDAD PROBLEMTICA Existen muchas especies ornamentales que se propagan frecuentemente de manera vegetativa. Entre ellas encontramos a las begonias, plantas herbceas que se caracterizan por sus hojas y racimos de flores llamativos; sin embargo son muy delicadas y no se pueden producir en grandes cantidades. Mediante la propagacin in vitro o micropropagacin, es posible la produccin de grandes volmenes de plantas que sustenten el establecimiento de plantaciones comerciales, partiendo de material seleccionados (Martnez et al. 2003); El desarrollo de tcnicas de la biotecnologa vegetal como el cultivo de tejidos vegetales in vitro, tcnica que consiste en cultivar en condiciones de asepsia cualquier tipo de tejido de cualquier parte de la planta ha permitido resolver muchos problemas, desde producir mucha plantas en poco tiempo, guardarlas por muchos aos y limpiarlas de enfermedades virales (Roca y Mroginski 1991, Delgado y Rojas 2001).

6. PROBLEMA Cmo propagar clonalmente plantas de begonia in vitro

7. HIPTESIS Responden las begonias a la propagacin clonal in vitro 8. JUSTIFICACIN E IMPORTANCIA Existen muchas especies ornamentales que tienen un gran valor comercial, sin embargo, la manera lenta de obtener nuevas plantas las hace muy costosas. En el caso de las begonias, plantas muy preferidas por su hojas y racimos de flores de varios colores se puede aplicar la tcnica de micropropagacin in vitro, mediante la cual, en poco tiempo se puede conseguir numerosas plantasy lo ms importante es que todas las plantas que se obtengan, sern exactamente iguales a la planta madre de donde se obtuvo el material inicial. De esta manera, el costo de plantar resultara ms cmodo y accesible al pblico, permitiendo embellecer a los hogares con la presencia de hermosas plantas.

9. OBJETIVO Produccin de plantas de begonia mediante la propagacin clonal in vitro

10. ANTECEDENTES Desde tiempos muy remotos, es decir desde que el hombre empez a domesticar a las plantas, hace ms de 14 000 aos, se vienen propagando plantas, ya sea a partir de semillas sexuales o a partir de semillas vegetativa, es decir a partir de ramitas, tallos o races. Existen varios autores que han tratado sobre los estudios de propagacin de las plantas desde el punto de vista agronmico y ornamental (Hartmann y. Kester 1999). Hace 30 aos se inici el desarrollo de ciertas tcnicas por la biotecnologa vegetal y una de ellas lo constituye la micropropagacin o clonacin de plantas in vitro basadas en las caractersticas propias de los vegetales y su habilidad para multiplicarse. Esta tcnica se basa tambin en los principios de asepsia, es decir las plantas se desarrollan en un ambiente de vidrio en un medio artificial (Murashige y Skoog 1962), y en completa ausencia de microorganismos contaminantes

(Roca y Mroginski. 1991). Uno de los pasos crticos en el desarrollo de esta tcnica es el establecimiento inicial del material vegetal en el medio de cultivo y la transferencia a macetitas de las plantas desarrolladas en condiciones

aspticas, sin embargo depende mucho de la mano del responsable de esta fase.

11. MATERIAL Y METODOS. a. Material vegetal El material vegetal estar constituido por hojas de begonia, que sern obtenidas a partir de una planta adquirida en el mercad, la misma que se deber encontrar en condiciones fisiolgicas y fitosanitarias ptimas. b. Medio de cultivo El medio de cultivo para regenerar los brotes estar constituido por las sales minerales MS (Murashige y Skoog 1962), vitaminas Tiamina 1,0 mg/l HCl e Inositol 100 mg/l, adems 3% de sacarosa y gelificado con agar al 0.8 %, tambin se le agregar hormonas vegetales como la Benzilaminopurina (BAP) 0,5 mg/l y Acido Naftalenactico (ANA) 0,1 mg/l. El Medio de cultivo para el enraizamiento slo cambiar las hormonas, Acido Giberlico (AG3) 0,02 mg/l y ANA 0,01 mg/l. El pH de los medios de cultivo sern ajustados a 5,7-5,8. Debern ser esterilizados en autoclave a 15 lbs/pulg2 de presin y 121oC de temperatura, durante 25 minutos. Luego de 24 horas podrn ser utilizados. c. Sustrato de transferencia El sustrato estar construido por arena de ro y musgo en proporcin 2:1 d. Metodologa Cultivo asptico de hojas de begonia

Para establecer los cultivos in vitro, se aislar primero una hoja mediana de begonia, luego se colocar en un frasco de vidrio para su desinfestacin, utilizando, alcohol durante 1 minuto y leja pura durante 5 minutos, en ambos casos se enjuaga con agua destilada esterilizada por 3 veces consecutivas. Luego se cortar en fragmentos de 0,5 cm2 y

se colocar en los frascos que contienen el medio de cultivo para la induccin de brotes. Todos los frascos cultivados sern colocados bajo las condiciones de iluminacin artificial: 16/8 horas de luz con lmparas fluorescentes de 40 watts, con alto contenido de color azul, irradiancia de 5 8 W.m .
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con

Enraizamiento Todos los brotes que alcancen un tamao promedio de 1 cm, sern transferidos a los frascos que contienen el medio de cultivo de enraizamiento y all se quedarn hasta que las plantas tengan un tamao de 3 a 4 cm.

Transferencia a suelo Las plantitas que tengan 3 a 4 cm, sern transferidas al sustrato arena :musgo 2:1 para ser aclimatadas en invernadero y luego sern transferidas a maceras comunes. (Fig. 1).

12. BIBLIOGRAFA

HARTMANN, H.T. Y KESTER, D.E. 1999. Propagacin de Plantas. Principios y Prcticas. 7 reimpresin. Ed. CECSA. Mxico DF, Mxico. Pp. 219-363.

MURASHIGE, T Y SKOOG, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue culture. Physiol Plant 15:473497 ROCA, W. Y L. MROGINSKI, 1991. Cultivo de Tejidos en la Agricultura: Fundamentos y Aplicaciones. Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT), Cali, Colombia. 970 p

El trabajo se realiza en una cmara de asepsia

En los frascos con medio de cultivo se diferencian las plantitas

Cuando alcanzan un tamao adecuado son transferidas a suelo

Se aclimatan en condiciones de alta humedad

Figura 1.- Flujograma de la propagacin clonal in vitro de Begonia