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En el tema anterior hemos sometido al semen en un corto perodo tiempo mediante distintas pruebas: concentracin espermtica, morfologa, recuento

vivos/muertos, motilidad, etc. En el menor tiempo posible los tcnicos miden la calidad seminal y se procede luego a descartar el semen de mala calidad o elaborar el semen que es el tema que veremos ahora, conservacin del semen: para elaborar las distintas dosis de semen hay que DILUIRLO para aumentar el volumen y poder realizar luego las distintas dosis inseminantes; el diluyente debe proveer las condiciones apropiadas para que pueda desarrollarse el metabolismo normal del semen y por ello debe tener: -Igual presin osmtica. -Igual PH. -Ser asptico (no debe tener sustancias contaminantes) -Aportar fosfolpidos y lipoprotenas. -Ser crioprotector ya que las clulas espermticas las vamos a someter al punto de congelamiento. -Poseer una sustancia energtica El diluyente comnmente empleado en pastillas es el que contiene: *Yema de huevo (no clara porque es espermaticida), (para pajuela leche en polvo descremada). (20%) *Un azcar que es generalmente la rafinosa (solucin de rafinosa al 18% en agua bidestilada) que aporta energa, y previene a la clula contra el shock trmico. (73%)) *Una sustancia crioprotectora que es la glicerino o glicerol. (7%) *A veces se adicionan antibiticos. Luego se procede a MEZCLAR: SEMEN-DILUYENTE. Normalmente se hace en una probeta, y luego de haberlos mezclado comienza el perodo de lo que llamamos

enfriamiento y estabilizacin, osea el descenso trmico con el objetivo de disminuir al mximo la actividad metablica hasta un punto tal en que los proceso posteriormente sean reversibles. Este proceso es gradual. El descenso trmico es primero en una heladera comn a 5C en un tiempo de 4-5 (pastillas pero 3 horas en pajuelas) horas, este tiempo es suficiente para crear una estabilizacin y que la glicerina acte protegiendo a las clulas espermticas, se introduce en el citoplasma celular y va a permitir cuando la clula espermtica se someta al punto de congelamiento, la formacin de una masa vtrea (vitrificacin) dentro de la clula espermtica evitando la formacin de macrocristales que podran romper la membrana, entonces envs de macrocristales se estaran formando microcristales (masa vitrea). Luego debo someter al semen al congelamiento, para esto se va a emplear una plancha de hielo seco (pastillas, en pajuelas se lleva a -120C con vapor de nitrgeno lquido) (-79C) y esta mezcla semen-diluyente pasado el perodo de estabilizacin la vamos a cargar en una pipeta y vamos a ir pipetiando (dejando caer 1-2 gotitas por concavidad) sobre esa plancha de hielo seco en las cual hemos practicado algunas concavidades. En el momento en que la gota de semen toca el hielo seco se va a solidificar y se va a formar la pldora o la pastilla. Estamos pasando entonces de 5C a -79C (y la clula espermtica no estalla porque est protegida por la glicerina). Una vez que hemos pipetiado todo el semen vamos a colocar en un recipiente de polietileno expandido (tergopor) nitrgeno lquido (-196C) y aqu se efecta el ultimo paso en el congelamiento del semen que es sumergir este semen en este recipiente con nitrgeno lquido. Antes de colocar estas dosis de semen en un termo de nitrgeno lquido, vamos a tomar 1-3 muestras de semen y vamos a realizar una prueba de motilidad individual para ver si esos procesos realmente eran reversibles. El grado de motilidad debera ser similar al que observ el tcnico en el semen fresco. Normalmente una dosis de semen, las que se elaboran en nuestro pas, antiguamente en pastillas tenan un poquito ms de cantidad, unos 30-40 millones de espermatozoides; actualmente en pajuelas entre 20-30 millones de espermatozoides. Una vez que hemos hecho el control de calidad se procede a almacenar en las canastillas de los termos que hay en los centros de inseminacin, hasta su comercializacin que es trasvasada a las canastillas del termo del productor. Todos los centros de inseminacin estn asociados a CARIA (cmara argentina de inseminacin artificial), que los que elaboran el semen en pastillas exige que se le aada un rtulo (donde va el toro dador (datos), etc). Ahora la forma de conservacin del semen es en pajuelas que ya vienen rotuladas en el plstico (es una de las ventajas de la pajuela). Conservadora de nitrgeno termo de nitrgeno: Es un recipiente que tiene una doble carcasa, la externa rgida y un baln interno que pende nicamente del cuello, entre ambos hay vaco. En el baln interno colocamos el nitrgeno lquido (-196C), y van a estar las canastillas (6 normalmente), que son unos recipientes metlicos donde se almacenan las pajuelas (por debajo perforado donde entran y se sumergen directamente en el nitrgeno lquido), cuando almacenamos pastillas lo hacemos a granel.

Las pajuelas son unos conductitos de plstico de unos cm, tienen algunas ventajas sobre las pastillas: -Siempre vamos a tener rotulado el nombre del toro, fecha de elaboracin, el n de registro, y datos del toro.

-El congelamiento y el descongelamiento del semen es ms homognea que en la pastilla porque hay mayor superficie de contacto con lo externo, en el caso de la pastilla es como una esfera y el congelamiento no es tan homogneo como en pastillas. (RELACIN: SUPERFICIE/VOLUMEN) -En el caso que la forma de presentacin sea en pastillas para emplearla nosotros tenemos que rediluirla, y eso normalmente se hace en un tubito colector o de cam con citrato de sodio 2,92% (1cm3), y luego cargarla en el instrumental adecuado. En el caso de la pajuela el semen NO se REDILUYEN (por lo que jams estara en contacto con el medio ambiente), tiene solamente que sacarla del termo la sumergimos en agua a 37C durante aproximadamente 50 segundos-1 minuto (en la pajuela hay una columna de semen, de un lado esta sellado trmicamente (o con una bolita de acero) y del otro lado hay 2 taponcitos de algondn que en el medio tienen alcohol poliqumico? Se utiliza luego de la descongelacin el cortapajuelas para luego introducir el semen Cuando la forma de presentacin es en pajuelas dentro de estas canastillas van a estar lo que se denomina gobelets (tubito de plstico) que son normalmente para 5 pajuelas van a estar soportados en una media caa de aluminio. Es decir que el semen en pajuelas no lo almacenamos a granel sino que va a estar almacenado en gobelets soportados por la media caa de aluminio. Estos gobelets no tienen agujeritos estos van a estar dentro de la canastilla y todo esto sumergido en nitrgeno lquido. Y hay una ventaja; cuando uno levanta la canastilla para sacar una dosis de semen esta levantando las canastillas, las mediacaas y los godelets, como los godelets no estn cribados (perforados) tambin levanta el nitrgeno lquido lo que quiere decir que hasta la boca del termo la pajuela est sumergida en nitrgeno lquido. En cambio las pastillas (a granel) al estar cribada la canastilla cuando la levanto no sube nitrgeno lquido por lo que por un tiempito las que vuelven a ser sumergidas no estuvieron protegidas en nitrgeno lquido. La parte ms frgil de la conservadora de nitrgeno es el cuello. No hay un perodo limitado para la conservacin del semen siempre y cuando estn conservadas en nitrgeno lquido. Las primeras pastillas se dieron hace 50 aos y an se usan. Hay distintas calidades de conservador y precios. Una buena calidad podra estar en unos 700-800 dlares con una autonoma esttica de 30 das (sin abrirla, ya que tiene

un saco poroso) y la autonoma dinmica (o de trabajo) va a ser un poco menos hasta la recarga. La calidad depende de las paredes del termo. La canastilla cuando saco las dosis de semen nunca debera sobrepasar la boca del termo. En el campo escuela hay un termo de 18 litros. En un tambo yo dira de comprar un termo de muy buena calidad y de gran capacidad de nitrgeno lquido porque no lo vamos a mover mucho (buena autonoma esttica y de trabajo) Para comprar un termo en un campo de cra donde hay muchas ha y distintos lotes de hacienda, deberamos inseminar en distintos lugares transportando el termo, por lo cual un termo grande sera engorroso transportarlo, por lo que deberamos adquirir un termo de buena calidad, con una buena autonoma (porque por ah es ms prctico que realizar recarga frecuente) de trabajo con poca cantidad de nitrgeno almacenado.

Hay tres formas de presentacin del semen congelado: pastillas, pajuelas y una tercera forma pero en desuso que son las ampollas de vidrio Para la inseminacin del semen en pajuelas se inventa un dispositivo para ensamblar y colocar el semen en las vas genitales de la hembra y este es el pistolete de cassou, este tiene un conducto de acero, un cilndrico que en su interior tiene un mbolo, la pajuela se va a instalar en el interior del tubo de acero, y este embolo va a empujar el

algodoncito que va a empujar a su vez el semen, que se deposita en las vas genitales de la hembra.

Ahora vamos a hablar un poco de deteccin del celo, cuales son los signos, la duracin del celo, el momento de la ovulacin; es decir vamos a ir recorriendo todos los temas hasta llegar a sincronizacin de celos.

Los signos del celo son: -fundamentalmente el signo primario de manifestacin del celo en la hembra es que la vaca se quede quieta cuando la vaca es montada o saltada y queda inmvil por 2-3 segundos -Hay otros signos, secundarios (no siempre se puede observar) que son importantes de tener en cuenta para individualizar la hembra en celo, por ejemplo: *cada de una mucosidad de tono claro (smil clara de huevo), transparente que pende de la vulva.

Si esa mucosidad tiene una coloracin rojiza (pequea hemorragia) podra estar denotando que la hembra ya estuvo en celo, caracterstico de las hembras que hace 1,5-2 das han estado en celo. Una mucosidad de una tonalidad verdosa-amarillenta estara denotando que en el tero de la hembra hay un proceso de infeccin (metritis, endometritis). Fundamentalmente esa mucosidad proviene de unas clulas (caliciformes) del cuello del tero que son capaces de producir este material viscoso semejante a la clara de huevo. Son 100-120 cm3 que van a quedar ubicados en el canal vaginal (horizontal), parte de esa mucosidad cae por la vulva, y queda prendida entre los pelos de la cola (queda enredado) y eso nos estara denostando la presencia de un celo. Su funcin es formar posterior a la fecundacin o inseminacin un tapn que va a cerrar despus el crvix y probablemente intervenga tambin en la lubricacin para la posible cpula *Peladuras en punta de isquiones e inclusive en la base de insercin de la cola. *Monta desorientada, por la cabeza a otros bovinos. *Hembra inquieta. *Hembra orina con frecuencia. *En produccin lechera es notable la disminucin de la ingesta como de la produccin de leche. *Mirada en accin de bsqueda. (s bien est en la bibliografa es muy difcil de detectar) Normalmente vamos hacer 2 detecciones de celo diaria, una a la maana 6-7hs y otra a la tarde 18-19 hs Estos signos no se dan en todas las razas, si manejamos un rodeo de razas indicas o cruzas con ndicas (bhraman, nelore), casi no presentan estos signos caractersticos de celo, y la deteccin de celo en estos rodeos se torna sumamente dificultoso. Hay 2 cosas importantes que determinan la preez: es la concepcin y la tasa de ciclicidad del rodeo (que se determina a travs del nmero de hembras que presentan celo), cuando el celo no aparece va a afectar la tasa de preez. Si el potrero es muy grande donde vamos a detectar celo convendra armar un alambrado provisorio (corral provisorio) colocando 2 postes cerca de la salida de la puerta (250-300 hembras) que podran estar siendo manejadas por dos peones: uno en la puerta y el otro dentro del corral provisorio moviendo la hacienda para que las hembras se vayan olfateando y se manifiesten los celos. Normalmente cuando uno identifica una hembra en celo no debe sacarla del corral sino identificarla (por ejemplo por el n de caravana o sealarla) y despus cuando termin la hora (40min-1hora, no ms) las sacamos a esas hembras.

En el campo escuela que est bien apotrerado que tenemos potreros de 20-25 ha y no hay tanta hacienda lo que hacemos normalmente, es encarar la inseminacin artificial por el mes de noviembre y traemos la hacienda a los corrales las dos veces del da en que detectamos celo, y las que estaban en celo las dejamos en el corral con agua y comida. Y ya que sincronizamos el celo aparecen varias hembras en celo por da. Normalmente el perodo de inseminacin artificial en la categora de vaquillonas lo hacemos en 2 ciclos, le damos 2 oportunidades de servicio. Lo cual en tiempo seran unos 40-45 das. Ahora que se han puesto a punto las tcnicas de sincronizacin de celos vamos a reducir a muy pocos das de trabajo. Normalmente en esta categora uno esperara llegar a por lo menos un 85% de preez. El porcentaje de preez est determinado por: % vacas ciclando x % concepcin (retencin del servicio) En grandes rodeos el % de Preez sera normal un valor de 60-70% (de 100 animales en servicio 60-70 quedaran preados). Supongamos que el total de animales est ciclando (estn en algn momento del ciclo estrual) en 20 das todas la vacas tendran 1 celo. En 1 da el mximo terico de vacas que podran estar ciclando es de 5% (5 vacas en un rodeo de 100 vacas). Si tuviramos el 80% de las vacas ciclando el % de celo diario sera: 80%/20 das= 4% de celo diario. Si tuviramos el 60% de vacas ciclando el % de celo diario sera: 60%/20 das= 3% de celo diario. Si tuviramos el 40% de vacas ciclando el % de celo diario sera: 40%/20 das= 2 % de celo diario. Si tuviramos el 20% de vacas ciclando el % de celo diario sera: 20%/20 das= 1 % de celo diario. La tasa de ciclicidad de la hembra depende de la nutricin, lo grave en nuestro pas son los largos anestros nutricionales. La tasa de retencin va a depender de la pericia del tcnico inseminador desde el descongelamiento de una dosis de semen hasta la calidad del semen, fallas por exactitud en la deteccin del celo vamos a tener una merma en el porcentaje de retencin, ya que estoy atribuyendo celos a vacas que no lo presentan. Las fallas en la deteccin de celos reconocen 2 errores: Exactitud: no distinguir claramente una hembra en celo, y por lo tanto cometer errores en la deteccin de celos de hembras que en realidad no lo estn. Intensidad: detecta correctamente vacas en celos pero no la cantidad total. No afecta a la tasa de retencin. En sntesis el % de preez va a estar siendo afectado por la tasa de ciclicidad (depende principalmente de la alimentacin) del rodeo y por la tasa de retencin

(afectado por la calidad seminal, idoneidad del tcnico, falla de deteccin del celo por exactitud). Si manejamos los factores correctamente de la retencin normalmente obtendremos valores de un 60-70%. Tasa de ciclicidad del 100% (5% celo diario) querra decir que el porcentaje de preez podra estar entre 60-70 % Tasa de ciclicidad de 80% (4% de celo diario) quiere decir que el porcentaje de preez podra estar entre (60x80/100)-(70x80/100) 48-56%. Tasa de ciclicidad de 60% (3% de celo diario) quiere decir que el porcentaje de preez podra estar entre (60x60/100)-(60-70/100) 36-42%. El impacto que tiene la tasa de ciclicidad del rodeo en el porcentaje de preez es altsima por lo que es muy importante el correcto manejo nutricional del rodeo. Y si le aadimos a esto errores en la deteccin quizs deberamos incluir una metodologa de trabajo que nos permita realizar el servicio sin detectar el celo o buscar mtodos alternativos en la deteccin de celos. Algunos dicen que las vacas entran ms en celo de noche, esto no es cierto, depende de la situacin, el tipo de rodeo. Por ejemplo en tambo se ha llegado a determinar que no es as, que la mayor cantidad de vacas entran en celo a la maana o a la tarde. Probablemente en vacas cebu en el norte en condiciones de calor, con perodos prolongados de altas temperaturas s se ve que la vaca entra ms en celo de noche, entonces existen ayudas para detectar la mayor cantidad de vacas en celo: *Toro retajo: -Toro retajo vasectomisado: al cual se le puede haber realizado vasectoma, seccional o estrangular o lesionar a nivel del conducto deferente por lo que los espermatozoides no pueden seguir este canal. El toro va a tener lbido ya que produce testosterona (clulas de leydig), pero no va a poder fecundar. Al toro retaco se le provee de un bozal marcador que en la papada lleva un recipiente que en su interior hay pintura y este tacho lleva un resorte y en la parte anterior una gran bola (como un gran bolgrafo), entonces la idea es que el toro salta a la hembra, presiona la bola contra el resorte y sale la pintura y marca la hembra en celo. -Toro retajo con desviacin de verga: orificio lateral que se le practica a nivel del prepucio y se cose la parte anterior del prepucio. Impide que el toro desenvaine por el orificio normal, es decir que el toro salta a la hembra pero la verga se desva por el orificio lateral practicado. Bozal marcador -Toro retajo con PO Lot?: se le cose la el orificio del prepucio un tubito que le permite orinar por ah, pero no desenvainar. Bozal marcador. Se observa que este retaco va perdiendo el deseo sexual con el tiempo. *Presocensores radiotelemtricos: censor de presin que se coloca en la zona de la grupa arriba, prcticamente en la insercin de la cola. Cuando el otro animal salta

presiona este dispositivo, este emite una seal que va a una antena y de ah a un ordenador que codifica la seal. Identifica el grado de presin y la cantidad de segundos. Es una eficiente metodologa. *Podmetros: mide la cantidad de pasos que da la hembra, ya que la hembra en celo al estar inquieta camina ms. Dispositivo a nivel de garrones. *Pintura en la base de la cola: y resulta en el mayor o menor grado de despintado o borrado de es pintura. *Parches autoadhesivos (estrus alert): se coloca tambin entre la punta de isquiones y base de insercin de la cola y por el grado de despintado de este parche identificamos la hembra en celo. (son muy buenos y los utilizan en el campo escuela en el tambo y en el rodeo de cra en las vaquillonas a inseminar) *Hay unas bolsitas de color (bovine beacon) que con la presin que ejerce el animal que monta cambia de color. Nosotros el da de maana como ingenieros agrnomos deberamos evaluar el protocolo de trabajo, poniendo nfasis en la relacin costo/beneficio, es decir que nos vamos a convertir en administradores de toda la explotacin agropecuaria en particular en este caso produccin animal y en este caso de uno de los factores que hace a la produccin animal que es la parte reproductiva Con los problemas de deteccin de celos los intervalos parto-concepcin se alargan por ejemplo en rodeo lechero se pierden litros de leche por da de vida de la vaca en el rodeo. Y en rodeo de cra se pierden kg de terneros (carne) por unidad de superficie. Deberamos tender a logra a tener respectivamente una lactancia por vaca por ao (tambo) y un ternero por vaca por ao (cra). Lo que nos conviene desde el punto de vista de la produccin es que los intervalos entre partos no sean excesivamente largos. A nivel del rodeo puede suceder que el este intervalo se vaya a 13-14-15 meses. Hay que intentar que el intervalo entre parto sea lo ms cercano a los 12 meses. El problema de deteccin de celos en Argentina es muy grande, se pierden muchos porcentajes de preez, terneros, litros de leche. Lo que hay que hacer es demostrar al productor es la importancia de este factor y la recomendacin de las distintas tecnologas que haciendo un anlisis costo/beneficio deberan ser muy provechosas. Los parches para detectar celo ya estn al alcance y son eficientes. Los presocensores es muy difcil su aplicacin hoy en Argentina. La utilizacin del toro retajo no es muy eficiente porque muchas veces no sabemos como vamos a manejar bien al toro que hay que alimentarlo, hay que tener en cuenta su sanidad. En definitiva cada uno deber decidir que le conviene, pero lo que es seguro que lo que aada como tecnologa volver en beneficios (siempre realizando relacin costo/beneficio, no solo del producto sino tambin mano de obra, etc.).

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