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DIAGNSTICO DE ENFERMEDADES EN PECES DE ACUARIO

Texto: ngel Garva y Joaqun Reyes Fotografas: F. Couso, A. Jimnez, E. Mira & . Garva. Dibujos: Victoria Gaitn

Se puede definir diagnstico como la identificacin de una enfermedad a travs de la observacin conjunta de sus signos y sntomas. El diagnstico es uno de los aspectos ms importantes en el tratamiento de una enfermedad. Es simple, pero no por ello menos cierto: para poder plantar cara a un problema, lo primero es identificar el problema. As, el primer paso para intentar curar un pez enfermo, es identificar el problema de salud concreto que padece. El tratamiento a aplicar debe ser elegido en base a un diagnstico previo. El mejor de los tratamientos no curar enfermedades para las que no se ha diseado. Un tratamiento es efectivo o no dependiendo de lo acertado que haya sido el diagnstico. Para fortuna para los aficionados a los peces de acuario, una gran parte de las patologas propias de peces ornamentales muestran indicios o sntomas, que permiten su diagnstico, hasta para los aficionados ms principiantes. Tambin es verdad que algunas enfermedades se desarrollan de modo agudo o virulento, ocasionando uma rpida mortandad, pero incluso del examen y diagnosis de esos ejemplares muertos, podemos sacar experiencias aprovechables para el tratamiento de futuros casos similares. SNTOMA O SIGNO Los trminos signo y sntoma no se diferencian de modo coloquial, pero son diferentes desde un punto de visto clnico. Un signo de enfermedad es la indicacin aparente y visible en un individuo de la existencia de una enfermedad, que evidentemente debe ser apreciada por el observador. La definicin que podemos encontrar en un diccionario de "sntoma de uma enfermedad" es la siguiente: "fenmeno que surge en cualquier zona del cuerpo como consecuencia de una enfermedad o traumatismo, y que nicamente puede ser percibido por el individuo enfermo". Si aplicamos esta definicin al pie de la letra, parece evidente que ningn animal, incluyendo los peces ornamentales, puede mostrar sntomas, pues no pueden describirnos como sienten dichos sntomas (Ford, 1996). S pueden, en cambio, mostrar signos de enfermedad, que son los que puede apreciar el observador, en este caso concreto el ictiopatlogo.

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Material necesario para examinar un pez. Foto Adolfo Jimnez . Sin embargo, y teniendo en cuenta que no era nuestra intencin situarnos en un plano demasiado tcnico o cientfico, sino ms bien al contrario, hemos considerado que sera de ms ayuda para el acuarofilo seguir con el concepto vulgar, tradicional y errneo de "sntoma", y no liarle con ms tecnicismos. Aunque no sea la opinin de acuarilogos tan relevantes como David Ford, que obviamente tienen la razn cientfica de su lado. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DEL AGENTE CAUSAL La identificacin del agente causal, entendiendo por agente causal aquel organismo que causa una enfermedad concreta es un proceso complicado, muy laborioso y no siempre tcnicamente es factible. Adems, hay que reconocer que la mayora de los aficionados al acuario no concede demasiada importancia a saber si es tal o cual bacteria la que est infectando a sus peces. Lo que realimente les importa es diagnosticar la enfermedad, para poder elegir el tratamiento adecuado. A otros niveles, como por ejemplo em investigacin bsica en ictiopatologa o teraputica en piscifactorias, s que puede resultar imprescindible un diagnstico exacto del o de los agentes causales de un brote infeccioso. Para asegurar que un microorganismo es el causante de uma determinada enfermedad en un pez, debe ser aislado a partir de muestras corporales del propio pez. Posteriormente se procede a su determinacin basndose en diversos criterios morfolgicos y metablicos. En los ltimos aos la biologa molecular h sufrido un impresionante desarrollo y tcnicas como la PCR (reaccin en cadena de la enzima polimerasa para amplificar un fragmento de ADN concreto) se estn aplicando para la identificacin especfica de virus y bacterias patgenos.

Cultivos bacterianos sobre medios de agar. Foto: ngel garva.

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El cultivo aislado es sometido a toda una serie de tinciones y pruebas bioqumicas, cuyo resultado vara segn el tipo de metabolismo que posea el organismo analizado. En el caso concreto de las bacterias algunas de estas pruebas son: la movilidad, la inmunofluorescencia, los antibiogramas (sensibilidad a un determinado antibitico), la aerobiosis o anaerobiosis (capacidad para vivir en presencia o ausencia de oxgeno, respectivamente), las reacciones a la catalasa, la oxidasa o al indol, la resistencia a alcoholes y/o cidos, etc. Pero sin duda la ms conocida es la tincin de Gram, que separa a las bacterias en dos grupos: Gram (+) y Gram (-). em las primeras, las positivas, la pared celular bacteriana se tie de color azul. En las segundas, las negativas, no se tie y queda de color rosceo. Las bacterias se cultivan, en el laboratorio, em unas placas especiales de plstico o vidrio, que se llaman placas Petri. En el interior de estas se desarrollan sobre un medio nutritivo elaborado a base de agar, al que podramos definir como uma especie de harina elaborada a base de algas. Tras un periodo de incubacin en una estufa, ms o menos a 20-25 C., las bacterias crecen agrupadas formando lo que se denominan colonias. Para hongos y protozoos ictioparsitos estas tcnicas estn menos desarrolladas, pero tambin existen sistemas de cultivo en laboratorio. En el aislamiento e identificacin de virus, el tema se dificulta mucho ms. En primer lugar, su menor tamao obliga a la utilizacin de tcnicas microscpicas ms sofisticadas, como la microscopa electrnica. En segundo, son parsitos obligados, por lo que no se pueden mantener en medios de cultivo en laboratorio, debindose cultivar en el interior de clulas vivas, que s se pueden mantener en el laboratorio. Las primeras lneas celulares vivas de peces para cultivo de virus no estuvieron a punto hasta los aos cincuenta. La identificacin de los parsitos externos o de mayor tamao, es bastante ms sencilla. Em ocasiones nicamente con la simple observacin visual, a simple vista o con una lupa; otras veces con la observacin microscpica de frotis y preparaciones de los tejidos del pez parasitado. Para complicar an ms la cosa, a estas tcnicas tan sofisticadas se aaden otras dificultades: * la ictiopatologa es una ciencia relativamente nueva y, como consecuencia, una buena parte de los agentes patgenos de peces estn an sin clasificar o determinar. Esto es particularmente cierto en el caso de los virus ictiopatgenos, de los que muchas veces no se conocen ms que los sntomas que produce su infeccin, sin ni siquiera estar seguro que son realmente virus. Tcnicamente algunos no llegan a clasificarse ms que "virus-like", agentes parecidos a virus. * algunas enfermedades infecto-contagiosas parecen tener un origen doble, vrico y bacteriano a la vez. Un ejemplo tpico de esto lo constituye la enfermedad conocida como viremia primaveral, en la que intervienen el virus Rabdovirus carpio y bacterias del gnero Aeromonas. * ciertos microorganismos patgenos, principalmente bacterias y virus, parecen estar implicados en ms una enfermedad tipificada, es decir parece que el mismo microorganismo produce en los peces una enfermedad u otra, segn las condiciones concretas en que se produzca la infeccin y la cepa que infecte. Es el caso, por ejemplo, de la bacteria Aeromas salmonicida, que origina la eritrodermatitis de la carpa y la forunculosis. * intentar aislar el agente causal de un pez que presenta una infeccin generalizada es prcticamente perder el tiempo. Es el caso tpico de las lesiones en la epidermis de las aletas, el sndrome conocido entre los aficionados como "aletas deshilachas", en el que intervienen diversos agentes causales como hongos, bacterias, virus y protozoos. En lesiones avanzadas es prcticamente imposible determinar cual de ellos fue el agente causal primario, es decir el que verdaderamente origin las lesiones, y cuales son simplemente oportunistas, que proliferaron al amparo de una lesin previa en un pez ya debilitado. En resumen, resulta evidente que estas tcnicas y conocimientos tan especializados em inmunologa, biologa molecular, bioqumica, etc., nicamente estn al alcance de personal cientfico y requiere medios tcnicos y fuerte desembolso econmico; nunca accesible para un acuarifilo aficionado, por muy experto que se considere uno. La otra nica posibilidad que se nos ocurre es tomar muestras de los peces enfermos y enviarlas a un centro especializado, donde s dispongan de personal y medios adecuados. Algunas clnicas veterinarias y comercios especializados en acuariofilia que ofertan la posibilidad de realizar antibiogramas y otros pruebas de diagnosis. Sus direcciones se pueden localizar en las web y pginas de publicidad de las revistas especializadas. En cualquier caso, la toma de muestras de los peces enfermos se ha de realizar en unas condiciones determinadas, para que no falseen los resultados de las pruebas. Este tema requiere tambin un trabajo arduo siguiendo unas premisas muy concretas. Por citar alguna, diremos que nunca se deben enviar como muestras ejemplares previamente muertos a su captura, ni siquiera tomar muestras de sus tejidos, aunque hayan sido congelados. Si alguien desea informarse le aconsejamos que consulte alguno de los textos que reseamos en la bibliografa, em particular los de Blanch (1988) y Bullock (1981).

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Muestra de tejido al microscopio. Foto cortesa de Emilia Mira . Pero el futuro es esperanzador, los estudios en la patologa de las especies pisccolas cultivadas para consumo humano estn logrando simplificar las tcnicas existentes, adems de poner a punto otras realmente sencillas y espectaculares. Citaremos algunos ejemplos: en 1979, McCarthy puso a punto un test serolgico para la identificacin de la bacteria Aeromonas salmonicida, directamente sobre los tejidos de los peces afectados. Tambin existen comercializados tests FAT (Test de Inmunofluorescencia del Anticuerpo) para detectar la presencia de Vibrio anguillarum, Yersinia ruckeri y otras varias bacterias ictiopatgenas. Slo es cuestin de tiempo que estos avances lleguen al cultivo de especies de peces para acuario y estanque, y por extensin se puedan comercializar a precios moderados. RECONOCER UN PEZ CON SOSPECHA DE ENFERMEDAD

Una vez que ya hemos decidido que, en la mayora de las ocasiones, lo que tiene importancia para el aficionado al acuario es el diagnstico o reconocimiento de la enfermedad, ms que el diagnstico tcnico del agente productor, vamos a describir someramente como podemos abordar el reconocimiento de un pez ornamental con sospecha de enfermedad. Hemos dividido el protocolo en tres partes. La primera, el examen externo, est al alcance de cualquier acuarifilo. Para la segunda, el examen de los rganos internos, ya se necesita cierta experiencia y algunas nociones de anatoma de peces. Y el tercero, el examen microscpico, es evidentemente el ms complicado y el que ms conocimientos previos requiere.

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1.- EXAMEN EXTERNO Un pez sano siempre intenta evitar su captura, hecho que se conoce como "reflejo de huida". Adems, ante cualquier cambio de posicin, siempre intenta mantener sus pupilas horizontales ("reflejo del ojo") y, si es sujetado por la parte anterior del cuerpo, no deja nunca la aleta caudal caediza ("reflejo caudal"). Si un pez no presenta alguno de estos reflejos, es muy probable que este sufriendo o incubando un proceso patolgico. Claro est que no es posible probar estos reflejos en muchas especies propias de acuario, en cambio es ms factible en peces de estanque. La superficie corporal de cualquier pez com sospecha de enfermedad debe ser examinada detenidamente, en particular las branquias, ojos, ano, boca, borde y base de las aletas y pliegues del cuerpo (Garva, 1992). La bsqueda se debe centrar en descubrir cualquier alteracin, como manchas, lceras, inflamaciones, irritaciones, bultos, deformaciones, cambios de coloracin, escamas erizadas, hemorragias, exceso de mucosidad, etc. No hay que olvidar que algunos parsitos son visibles a simple vista o con ayuda de una lupa. Otro tema que debe ser objeto de observacin, es la alteracin de lo que podramos llamara comportamiento normal o estndar del pez. As, son indicios de enfermedad comportamientos como respiracin acelerada, conductas de rascamiento, natacin descoordinada, bamboleos, movimientos nerviosos, cambios de coloracin (principalmente oscurecimiento), etc. Para estas tareas son de especial ayuda el empleo de una lupa simple y algn manual de patologa de peces, en particular si es especfico de peces de acuario y/o estanque. Adjuntamos un par de dibujos esquemticos con algunos de los signos de patologa ms frecuentes en peces ornamentales. 2.- EXAMEN INTERNO La diseccin del pez, y el estudio de las posibles lesiones internas, es imprescindible en cualquier tcnica de diagnstico en ictiopatologa. Las nociones bsicas para su realizacin se pueden encontrar en el PDF "ANATOMA BSICA INTERNA: DISECCIN DE UN PEZ", en la categora de ICTIOLOGA Y BIOLOGA GENERAL. Una vez abierto el pez y con los rganos internos a la vista, observaremos lo ms detalladamente posible, todos y cada uno de ellos. A simple vista o con la ayuda de una lupa simple, como los usadas para filatelia, se prestar especial atencin a la coloracin y textura de las branquias, bazo, riones, tracto digestivo, rgano sexuales y cavidad visceral. Se buscarn preferentemente cambios de color y volumen, hemorragias, zonas necrosadas, acumulacin de lquidos, inflamaciones, presencia de cuerpos extraos, etc. Resulta de gran ayuda en este tema, poder contar un buen atlas anatmico de peces, con el fin de compara el aspecto de estos rganos en un pez sano, com respecto al que presentan los del pez que estamos estudiando. Evidentemente el examen interno de especies de tamao minsculo es prcticamente inviable. Peces como los neones o los guppis crean un autntico dolor de cabeza a la hora de efectuar su diseccin, sin embargo si es necesario realizarla, ser imprescindible contar con uma lupa de gran aumento, a ser posible binocular. Compre este e outros peixes deste livro em www.amordepeixe.com.br. A melhor loja de peixes e produtos de aquariofilia do Brasil. Peixes de qualidade, diretamente com o criador, a preo de atacado. Confira. Participe do www.forumamordepeixe.com.br e receba inteiramente grtis livros de criao de Discus, Bettas, Guppys e muito mais, grtis, acesse j e receba ainda hoje. Pag.: 5

3.- EXAMEN MICROSCPICO La observacin al microscopio de preparaciones de peces, enfermos resulta de un ayuda inestimable a la hora de un diagnstico certero. Las muestra se obtienen por simple raspado, com un bistur, cuchilla o similar, de la epidermis del pez o de cuerpos extraos que presente en la misma. Tambin se pueden lograr, con la ayuda de unas pinzas o bistur, fragmentos pequeos de aletas o muestras de mucosidad. La toma de mucosidad branquial se puede hacer por absorcin, mediante la introduccin en la zona branquial de la punta de una pipeta, o cuentagotas, de punta fina.

Observando una muestra con lupa de gran aumento. Foto Francisco Couso . Algunas de las zonas anatmicas del pez ms apropiadas para obtener frotis epidrmicos son citadas a continuacin. Aunque obviamente se pueden obtener frotis de cualquier zona del cuerpo, en estas citadas es ms probable localizar parsitos.

Microcopio y material necesario para observacin a baja resolucin. Foto Adolfo Jimnez. Compre este e outros peixes deste livro em www.amordepeixe.com.br. A melhor loja de peixes e produtos de aquariofilia do Brasil. Peixes de qualidade, diretamente com o criador, a preo de atacado. Confira. Participe do www.forumamordepeixe.com.br e receba inteiramente grtis livros de criao de Discus, Bettas, Guppys e muito mais, grtis, acesse j e receba ainda hoje. Pag.: 6

1) Base de las aletas, en las que el sentido de raspado seguir la insercin de las mismas en el cuerpo. 2) Lnea lateral, aqu el bistur raspar de cabeza a cola. 3) Oprculo, raspando directamente sobre el oprculos se desplazar el bistur de la zona ocular a las hendiduras branquiales 4) Aleta caudal, el sentido de raspado ir de la base a una de las puntas de la aleta. De ejemplares de gran tamao, como por ejemplo cclidos tipo oscar o peces de agua fra como las carpas kois, se puede intentar obtener muestras directamente del pez vivo. Si esta operacin se realiza con cuidado, los daos ocasionados al pez pueden ser mnimos. Para esto es necesario minimizar al mximo el stress que se provoca en los captura en su captura. Es conveniente sujetar al animal con un pao hmedo y no directamente con las manos. Anestesiar al pez puede ser tambin muy interesante, pero por experiencia recomendamos el uso de anestsicos o tranquilizantes comerciales, como por ejemplo el MS 222, nicamente a persona que estn acostumbradas a manejarlos. Ligeras modificaciones de las dosis recomendadas, pueden ocasionar la muerte de los peces. Sin embargo en la mayora de las ocasiones los peces a muestrear son de pequeo tamao, com lo que la toma de muestras suele implicar la muerte previa del ejemplar, puesto que resulta ms cmodo observar de una sola vez todo el conjunto de rganos internos. La forma ms sencilla de matar un pez es dar un corte, a ser posible con tijeras, detrs de la cabeza o un golpe seco contra una superficie dura en la misma zona.

Microscopio de alta resolucin. Foto cortesa de Emilia Mira . Una vez tomada la muestra se procede del siguiente modo: se sita sobre un portaobjetos, se pone una gota de agua encima y se cubre com el cubreobjetos, presionando muy ligeramente. Una vez hecho esto se observa directamente al microscopio. Tambin se puede realizar frotis, que consisten em colocar sobre un portaobjetos una gota de mucosidad epitelial o branquial, contenido intestinal, sangre, heces lquidas o cualquier otro fluido corporal del pez. A continuacin se extiende, lo ms ampliamente posible, con la ayuda del canto de una superficie dura (lo ms prctico es utilizar el canto de otro portaobjetos). Si el fluido es excesivamente lquido, y se puede derramar del portaobjetos, interesa evaporar parte del agua y fijar la preparacin. Esto se logra flameando, es decir pasando el portaobjetos dos o tres veces por encima de una llama. Compre este e outros peixes deste livro em www.amordepeixe.com.br. A melhor loja de peixes e produtos de aquariofilia do Brasil. Peixes de qualidade, diretamente com o criador, a preo de atacado. Confira. Participe do www.forumamordepeixe.com.br e receba inteiramente grtis livros de criao de Discus, Bettas, Guppys e muito mais, grtis, acesse j e receba ainda hoje. Pag.: 7

En la observacin microscpica se debe buscar preferentemente movimiento. Realizando primero uma visualizacin rpida de todo el campo com un objetivo de pocos aumentos (x10). Una vez que se han localizado zona de inters por la presencia de posibles parsitos, se puede cambiar progresivamente a aumentos mayores. El empleo de objetivos de 100 o ms aumentos requiere colocar, encima del cubreobjetos, uma gota de un aceite especial, llamado de inmersin, e ir acercando cuidadosamente el objetivo del microscopio hasta contactar con el aceite.

Lupa binolcuar de gran aumento, Foto cortesa de Emilia Mira .. Afortunadamente, con un poco de experiencia y paciencia, es relativamente fcil aprender a reconocer los parsitos ms frecuentes en peces ornamentales. Los micelios de los hongos ictioparsitos, los gusanos como Gyrodactylus o los protozoos como Trichodina o Ichthyophthirius aparecen con frecuencia en los frotis y se reconocen perfectamente. Otra cosa, es intentar averiguar que especies concreta de Gyrodactylus es la que infesta en concreto al pez que estamos diagnosticando; pero de eso ya hemos hablado en el islamiento e identificacin de agentes causales. Recomendamos contar con el apoyo de algn buen libro de parasitologa, como por ejemplo "Parasitologa" de Cheng (editorial AC) o "Parasitologa animal" de Olsen (editorial Aedos). Esperamos que tambin sean de ayuda, aunque evidentemente en menor medida, los dibujos com los que hemos ilustrado los captulos de patologa infecto-contagiosa. El doctor Amlacher propone un pequeo truco para facilitar la visualizacin de protozoos de pequeo tamao en un frotis. Aadir una pizca de tinta china junto con la gota de agua en el frotis. Con esto se logra que el agua de coloree de negro y los protozoos, que no se tien, al menos tan rpidamente como el medio acutico, resaltan mucho sobre este fondo oscuro. El autor calcula la proporcin de agua y tinta china como de 10:1, es decir una parte de tinta por cada diez de agua. El examen microscpico tambin puede hacerse a partir de preparaciones de rganos internos del pez. Los frotis de raspados y/o contenidos de vejiga natatoria, intestino, rin o hgado, pueden ser muy interesantes a la hora del diagnstico. Es recomendable utilizar objetivos de 10 a 500 aumentos (Blanch, 1988).

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BIBLIOGRAFA: * Amlacher, E. 1964. "Manual de enfermedades de los peces". Acribia. Zaragoza. * Andrew; A.C. et al. 1990. "Commet soigner vos poissons daquarium". Bordas. Paris. * Blanch, A. 1988. "Tcnicas de diagnstico em enfermedades de peces". en Espinosa, J. Y Labarta, U. (Ed). "Patologa en Acuicultura". CAICYT. Mundi-Prensa. Madrid. * Bullock, A.M. 1981. "Mtodos de laboratorio". Em Roberts, R.J. (Ed). "Patologa de los peces". MundiPrensa. Madrid. * Collins, R. 1994. "Principles of Disease Diagnosis". en Brown, L. (Ed). "Aquacultures for veterinarians". Pergamon Press. * Ford, D. 1996. "Por qu fallan los remedios?". Aquamar, 67. * Garva, A. 1986. "Como reconocer si tu pez est enfermo". El Acuario Prctico, 4. * Garva, A. 1992. "Peces de Acuario. Gua Prctica de Enfermedades". Mundi-Prensa. Madrid. * Gaylord, J. & Bleifeld; M. 1980. Hunting with the Microscope. Arco Publishing. 3rd ed. * Grave, E. 1984. Using the Microscope A Guide for Naturalists. Dover Publications. * Post, G. 1987. "Textbook of Fish Health". T.F.H. Pbl. Neptune City. * Reichenbach-Klinke, H.H. 1982. "Enfermedades de los peces". Acribia. Zaragoza. * Reichenbach-Klinke, H.H. 1975. "Claves para el diagnstico de las enfermedades de los peces". Acribia. Zaragoza. * Schubert, G. 1983. "Diagnostic et traitement des maladies des poissons daquarium". T.F.H. Pbl. Inc.

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