Citogentica Clnica

Vernica Cazayous 1; Emilia Scandizzo

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1 Bioqumica a cargo del rea de Citogentica del Laboratorio del Hospital El Cruce 1 Bioqumica del Centro Nacional de Gentica Mdica. C.A.B.A 2 Bioqumica, Jefa de Laboratorio del Hospital El Cruce

La citogentica clnica es la rama de la gentica mdica que tiene por objeto el estudio de la estructura y el comportamiento cromosmico y su relacin con la patologa gentica. Estos estudios se realizan a travs de cultivos celulares que permitan obtener clulas en divisin activa para su posterior anlisis y observacin al microscopio ptico. Los procedimientos para realizar estudios citogenticos y detectar anomalas cromosmicas requieren capacitacin profesional y tcnica especfica e infraestructura particular. Las siguientes son indicaciones para la solicitud de un estudio citogentico al laboratorio segn la edad del paciente

1. PERODO PRENATAL: - Edad mayor de 35 aos - Triple screening alterado - Retraso de crecimiento intrauterino (CIR) - Anomala ecogrfica - Antecedentes de cromosomopata balanceada en un progenitor 2. PERODO NEONATAL: - Malformaciones/ Defectos congnitos - Rasgos dismrficos - Genitales ambiguos - Muerte neonatal de causa inexplicada

3. PERODO LACTANCIA/ESCOLAR: - Dificultades para el aprendizaje - Rasgos dismrficos - Retraso psicomotor 4. PERODO DE ADOLESCENCIA: - Ginecomastia - Falta de desarrollo puberal - Amenorrea primaria o secundaria 5. PERODO DEL ADULTO: - Padres de nios con anomalas cromosmicas estructurales - Abortos de repeticin - Infertilidad inexplicable 6. EN TODAS LAS EDADES: - Procesos malignos (cariotipo constitucional y tumoral) - Control de trasplantes de mdula sea ANOMALAS CROMOSMICAS Se pueden dividir en dos tipos: numricas y estructurales. Las anomalas numricas implican la prdida y/o ganancia de uno o varios cromosomas completos y puede involucrar tanto a autosomas como a cromosomas sexuales. Generalmente, la prdida de cromosomas tiene mayor repercusin en un individuo que la ganancia, aunque sta tambin puede tener consecuencias importantes. Cuando se pierde un cromosoma decimos que es monosoma para ese cromosoma, mientras que cuando aparece un cromosoma extra trisoma para el cromosoma implicado. Casi todas las monosomas autosmicas llevan a la muerte poco despus de la concepcin y slo unas pocas trisomas permiten llegar al nacimiento. La anomala autosmica numrica ms comn es el Sndrome de Down o trisoma 21. Los individuos con trisoma en los cromosomas 13 y 18 pueden tambin sobrevivir hasta el nacimiento, pero estn ms seriamente afectados que aquellos con sndrome de Down. Los individuos triploides, en la cuales hay una copia extra de todos los cromosomas (69 en total), pueden ocasionalmente sobrevivir hasta el nacimiento, aunque normalmente mueren durante el periodo neonatal.

Generalmente la prdida o ganancia de un autosoma tiene consecuencias ms graves que las de un cromosoma sexual. La anomala de cromosomas sexuales ms comn es la monosoma del cromosoma X (45, X), o Sndrome de Turner. Otro ejemplo bastante comn es el Sndrome de Klinefelter (47, XXY). Las anomalas estructurales implican cambios en la estructura de uno o varios cromosomas. Dentro de las ms comunes podemos mencionar: Las deleciones implican la prdida de material de un solo cromosoma. Los efectos son tpicamente graves, puesto que hay prdida de material gentico. Las inversiones tienen lugar cuando se dan dos cortes dentro de un mismo cromosoma y el segmento intermedio gira 180 (se invierte) y se vuelve a unir, formando un cromosoma que estructuralmente tiene la secuencia cambiada. Las translocaciones implican el intercambio de material entre dos o ms cromosomas. Otras pueden ser isocromosomas. inserciones, duplicaciones, cromosomas marcadores, anillos,

Las anomalas numricas y estructurales se pueden dividir a su vez en dos categoras principales: constitutivas, aquellas con las que se nace, y adquiridas, las que surgen como cambios secundarios a otras enfermedades, tales como el cncer. Se encuentran anomalas cromosmicas en aproximadamente 30 de 10000 nacimientos, mientras que los desrdenes del sistema nervioso (como defectos del tubo neural) se expresan en 20 de 10.000 nacimientos. Para detectar estas anomalas cromosmicas se realiza el CARIOTIPO que se define como: IDENTIFICACION Y ORDENAMIENTO SISTEMTICO DE LOS CROMOSOMAS DE UNA CLULA DE ACUERDO A CONVENCIONES INTERNACIONALES.

Cariotipo masculino 46, XY

Cariotipo femenino 46, XX

La metodologa para la obtencin del cariotipo del paciente se realiza a partir del cultivo de linfocitos usando 1-5 ml de sangre perifrica heparinizada (heparina de sodio). En un ambiente estril, se siembran aproximadamente 0,5 ml de sangre en medio de cultivo RPMI-1640 suplementado con 20% de suero bovino fetal y 0,05 ml de fitohemaglutinina y luego se incuba por 72 horas a 37C. Una vez que el cultivo ha alcanzado el crecimiento adecuado, se detiene el ciclo celular en metafase al impedir la formacin del huso mittico con la adicin de colchicina. Posteriormente, las clulas son sometidas a un shock hipotnico con Cloruro de Potasio (0,075 M) y fijadas en metanol-cido actico (3:1). El pellet celular resultante de este proceso es goteado sobre cinco portaobjetos limpios por caso. Para el anlisis microscpico las muestras son teidas con mtodo de bandeo G de rutina. Se utiliza microscopio ptico para el conteo y el anlisis cromosmico de un mnimo de 25 clulas por caso. Las siguientes son las caractersticas ms generales de las patologas ms frecuentes: Sndrome de Down Es la anomala cromosmica ms frecuente en el momento del nacimiento. En el 95% de los casos se debe a un cromosoma 21 adicional y el otro 5% a translocacin. La incidencia es de 1/700 nacido vivo, y aumenta con la edad materna, a los 35 aos es 1/300. Las caractersticas fsicas no siempre se dan todas juntas ni en todos los casos. Algunas de ellas pueden ser: ojos oblicuos, con pliegues de la piel en los ngulos internos; poca tonicidad muscular; nariz pequea y de puente algo bajo; orejas pequeas y de baja implantacin; manos pequeas, con dedos cortos, donde en las palmas suele haber un solo surco en las partes superiores en lugar de dos; y baja talla, entre otras. Se puede decir que las personas con sndrome de Down experimentan algn grado de retardo intelectual y, aunque es muy variable, por lo general es leve. De hecho, ahora se sabe que el despliegue de la capacidad mental de estos individuos depende en buena parte de su entorno familiar y del modo en que sean educados. Los resultados mejoran notablemente en relacin directa a la atencin y amor que se les brinde. Hasta hoy, este sndrome es incurable, pues se carece de tratamientos que eliminen el cromosoma extra. Lo que s se sabe es que la longevidad es muy variable y va de la mano con el nivel de salud que se disfruta. El estudio gentico se hace para confirmar ese diagnstico presuntivo y para explicar el mecanismo por el cual se produjo la alteracin cromosmica que hizo que naciera un beb con sndrome de Down y realizar un buen asesoramiento gentico al paciente y la familia.

Sndrome de Klinefelter La incidencia es 1/1000 varones y se debe a la presencia de un cromosoma X extra 47, XXY, aunque tambin se pueden presentar casos de mosaisismo. El sndrome de Klinefelter es considerado la causa ms frecuente de hipogonadismo hipergonadotrpico. Algunas de las manifestaciones que se pueden dar en un individuo: Talla elevada Mayor acumulacin de grasa subcutnea Dismorfia facial discreta Alteraciones dentarias En ocasiones criptorquidia, micropene, escroto hipoplsico o malformaciones en los genitales. Esterilidad por azoospermia. Ginecomastia uni o bilateral Vello pubiano disminuido Gonadotrofinas elevadas en la pubertad Disminucin de la libido Retraso en el rea del lenguaje, lectura y comprensin Lentitud, apata. Trastornos emocionales, ansiedad, depresin, etc. Falta de autoestima. El cromosoma adicional en los pacientes con sndrome de Klinefelter a menudo es adquirido por un error de disyuncin durante la gametognesis de alguno de los padres, originando gametos con 24 cromosomas debido a un cromosoma X extra. Sndrome de Edwards Anomala cromosmica que se caracteriza usualmente por la presencia de un cromosoma adicional completo en el par 18 (96%). Tambin se puede presentar por la presencia parcial del cromosoma 18 o por mosaisismo.

La incidencia es de 1/6000-1/130000 nacido vivo, y el 95% muere antes del ao de vida. Usualmente estos pacientes sufren poli malformaciones severas del corazn, rin, sistema digestivo y msculo esquelticas (pie en mecedora, dedos sobrepuestos) faciales (microcefalia, paladar ojival), entre otras, con retardo mental severo. La incidencia de esta trisoma, al igual que la trisoma 21 aumenta con la edad materna. Hay que destacar que el diagnstico de estas patologas tiene como fin el ASESORAMIENTO GENTICO que es el proceso de comunicacin que se brinda al individuo y a su familia sobre toda la informacin disponibles acerca de: Diagnstico y pronstico de la patologa Tratamientos disponibles Riesgos de recurrencia y/o ocurrencia Opciones reproductivas

BIBLIOGRAFA
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