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RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS

NMX-F-356-1983. ALIMENTOS. LECHE FLUIDA. SACAROSA. SACAROCINTA. MTODO DE PRUEBA. FOODS FLUID MILK SUCROSE. RIBBON SUCROSE. METHOD OF TEST. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIN GENERAL DE NORMAS. PREFACIO En la elaboracin de la presente Norma, participaron los siguientes Organismos: Secretara de Agricultura y Recursos Hidrulicos Subsecretara de Ganadera. Instituto Nacional de la Leche. Instituto Politcnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas. Departamento de Graduados e Investigacin en Alimentos. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Instituto de Investigaciones Biomdicas. Bufete Qumico, S.A. 1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIN Esta Norma Mexicana establece el procedimiento para determinar la glucosa y sacarosa, en leche fluida por el mtodo de la sacarocinta. La leche en forma natural no contiene glucosa, ni sacarosa, sin embargo como se han utilizado como adulterantes, es necesario detectar su presencia. 2. FUNDAMENTO Se emplea una glucocinta que se basa en una reaccin enzimtica mediante la cual se oxida la glucosa para formar cido glucnico y agua oxigenada, sta a su vez oxida a la ortotolidina dando una coloracin azul. La intensidad del color azul depender de la cantidad de glucosa en la leche. Impregnando la glucocinta con una solucin de invertasa (sacarasa) se obtiene una glucocinta modificada, que sirve tanto para identificar glucosa y sacarosa, como para hacer una estimacin semicuantitativa de cualquiera de estos carbohidratos. En la glucocinta modificada (adicionada de sacarasa), la sacarosa se hidroliza produciendo alfa-glucosa y fructuosa. La alfa-glucosa requiere de agua para ponerse en equilibrio con la beta-glucosa y as ser atacada por la glucosa oxidasa. 3. REACTIVOS Y MATERIALES 3.1 Reactivos 3.1.1 Los reactivos que a continuacin se mencionan, deben ser grado analtico; cuando se indique agua, debe entenderse agua destilada:

Fosfato monosdico

Versene (sal disdica del cido etilendiaminotetraactico) Invertasa cristalina libre de melibiasa.

3.2 Materiales Pinzas Glucocinta Sacarocinta Glucocinta preparada de la siguiente manera para obtener la sacarocinta:

3.2.1

En 100 cm3 de solucin 0.2 M de fosfato monobsico, disolver 200 mg de Versene y 1.0 g de invertasa; con esta solucin y empleando las mximas precauciones, se impregna la glucocinta. Una vez seca a temperatura ambiente est lista para usarse 4. PROCEDIMIENTO Tomar un trozo de sacarocinta, preferiblemente con unas pinzas para evitar reacciones falsas positivas, humedecer la sacarocinta en la leche problema y dejar secar. 5. EXPRESIN DE RESULTADOS 5.1 Lectura de la cinta 5.1.1 La reaccin es positiva en los siguientes casos:

Si aparece un color verde en la cinta, que es de una intensidad ligeramente inferior que el marcado con una cruz, en la escala de la glucocinta, pero claramente distinguible del color amarillo de la cinta original. Este color puede variar en intensidad hasta llegar al color azul intenso dependiendo de la concentracin de glucosa o sacarosa. Si la leche tiene glucosa, la coloracin puede aparecer desde los 60 segundos. Si la leche tiene sacarosa, la coloracin usualmente empieza a aparecer a los 2 minutos y se debe observar en un tiempo mximo de 7 minutos. El color se da en las partes hmedas, por lo que si hay glucosa la coloracin puede presentarse en forma homognea en toda la superficie y si hay sacarosa, la reaccin que es posterior, se inicia en las orillas del papel que todava estn humedecidas. La reaccin es negativa en el siguiente caso:

5.1.2

No debe considerarse positiva una coloracin ligera o tenue que sea inferior en intensidad a la que se observa con una concentracin de 0.1% de sacarosa agregada a la leche y que es ligeramente inferior en intensidad al color que tiene una cruz en la escala de la sacarocinta. 5.1.3 Reacciones falsas positivas

Puede haber reacciones falsas positivas en los siguientes casos: 5.1.3.1 Si la coloracin apareciera despus de los 7 minutos, an cuando fuera intensa, de ningn modo debe considerarse positiva, ya que en estos casos la coloracin se habr producido por oxidacin inespecfica del indicador que compone la cinta. 5.1.3.2 Cuando la cinta ha sido impregnada con sudor de las manos, vapores oxidantes tales como el de cloro, cido ntrico, perxidos y xidos de nitrgeno. 5.1.3.3 Cuando la sacarocinta no se guarda en un recipiente hermticamente cerrado, fresco y seco. 6. BIBLIOGRAFA NMX-Z-13-1977. Gua para la Redaccin, Estructuracin y Presentacin de las Normas Mexicanas. M.I.F. Laboratory Manual. Methods of Analysis Milk and its Products. Milk Industry Foundation 1149 19 th st N, W. Washington D.C. 20036, 1964 Ramos, C.M. Manual de Mtodos de Anlisis de Leche y Lacticinios Publicado por el Autor. Mxico, D.F. 1976.