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Caracterizacin fitoqumica de la especie Ilex guayusa Loes. y elaboracin de un prototipo de fitofrmaco de inters comercial

Matteo Radice Giovanni Vidari


Universit degli Studi di Pavia Italia

Introduccin
De los 17 pases megadiversos del mundo cuatro de ellos se ubican en la zona andina y concentran el 75% de la diversidad en especies de animales y plantas, estos son: Colombia, Per, Venezuela y Ecuador (Estrella et al. 2005). La Amazona ecuatoriana representa una de las reas con mayor biodiversidad del planeta y por su enorme variedad de plantas se convierte en una fuente de investigacin de inters permanente, especialmente para el desarrollo de nuevas materias primas del mercado farmacutico, cosmtico y alimentario. Al inters comercial se unen tambin el cientfico y el antropolgico, sobre todo cuando se trata de recuperar una de las plantas sagradas de las nacionalidades indgenas que habitan en la regin amaznica ecuatoriana conocida con el nombre vernculo de guayusa (Ilex guayusa

Loes.) y que es usada tradicionalmente por los Achuar y mestizos en forma de infusin. Dentro de este contexto, es fundamental aclarar que el conocimiento fitoqumico de la guayusa es limitado y la literatura cientfica es escasa, razn por la cual es necesaria una profunda investigacin cientfica con el fin de evaluar su actividad biolgica o farmacutica y los posibles usos comerciales. Actualmente, los pocos datos fitoqumicos de esta planta solo revelan datos de su contenido en cafena, as como la presencia de triterpenos y cidos clorognicos (Rosero Gordn 2006-2007); por lo tanto, an no se pueden explicar todas las propiedades curativas que la tradicin popular le atribuye. As, los objetivos de esta investigacin fueron: 1. Desarrollar un fitofrmaco con base en Ilex guayusa Loes. que acte como un coadyuvante en el tratamiento de manifestaciones sintomticas como gri-

pe, jaqueca y fiebre. 2. Identificar las familias qumicas presentes en Ilex guayusa Loes. 3. Desarrollar la preparacin de un extracto adecuado a la formulacin final. 4. Desarrollar un mtodo de cromatografa lquida de alta resolucin (CLAR) para la dosificacin de la cafena en el producto final. 5. Establecer los parmetros de calidad del producto transformado. 6. Realizar un proceso productivo apto a las condiciones tecnolgicas locales. El enfoque de la investigacin se puede resumir en nueve etapas principales (Figura 1), las cuales deben ser completadas con el desarrollo de un prototipo sometido a estudios preclnicos y clnicos, pruebas industriales y finalmente, el producto desarrollado debe tener un plan de comercializacin.

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Figura 1. Etapas de la investigacin farmacognstica de Ilex guayusa Loes. para obtener un fitofrmaco.

Datos ecolgicos de Ilex guayusa Loes.


El gnero Ilex est presente en las regiones tropicales y subtropicales del continente americano e incluso en Oceana, se calcula que posee ms de 500 especies. El subgnero Euilex es el ms extenso, puesto que incluye varias especies en el neotrpico distribuidas en Colombia, Ecuador, Brasil, Uruguay, Paraguay y el norte de Argentina (Brcher 1989). En el Ecuador, de acuerdo a los registros del Herbario de Loja (LOJA), la guayusa est presente en las provincias de Sucumbos, Napo, Pastaza, Morona Santiago y Zamora Chinchipe; sin embargo Jrgensen y Len-Ynez (1999) tambin registran individuos en las provincias de Pichincha y Tungurahua. La distribucin de la especie es desde el nivel del mar hasta los 1.500 msnm (Jrgensen y LenYnez 1999).

Datos taxonmicos de Ilex guayusa Loes.


Ilex guayusa Loes. pertenece a la familia Aquifoliaceae y es reconocida con el nombre castellano de guayusa en la mayora de localidades de Ecuador. Es un rbol perenne nativo de la regin amaznica, donde es silvestre, pero tambin est presente en ciertos lugares subtropicales de la regin andina en estado cultivado (Jrgensen y Len-Ynez 1999). En general, los individuos de esta especie alcanzan un tamao promedio de hasta 10 m de altura, poseen un dimetro a la altura del pecho (DAP) de 50-80 cm, tienen una copa irregular y presentan un follaje denso (Garca Barriga 1992). En la localidad de San Luis ubicada cerca de Sevilla Don Bosco (provincia de Morona Santiago), se ha reportado la existencia de un bosque natural de rboles de guayusa con individuos que alcanzan una altura de 20 m y tienen un DAP de 80 a 90 cm.

El tronco tiene un fuste a menudo bifurcado a la altura del pecho, corteza blanca y textura lisa. Las ramas son extendidas y flexibles. Las hojas son coriceas, verde-olivceas, enteras, oblongo-elpticas, simples, alternas, coriceas, dentadas, glabras o subglabras en el haz y envs, pice acuminado, base aguda, 15-21 cm de largo, 57,5 cm de ancho, pecolo corto de 1 cm de largo (Schultes 1972; Garca Barriga 1992). El fruto es una baya globosa de casi 1 cm de ancho y verde. La flor posee una corola blanco verdosa con ptalos obtusos, estambres en igual nmero que los ptalos, anteras oblongas, ovario ssil subgloboso y usualmente con 4-6 cavidades (Garca Barriga 1992).

Propiedades y usos de la guayusa


De los cuatro gneros de la familia Aquifoliceae, el gnero Ilex es el de mayor importancia econmica, ya que un gran nmero de especies se em-

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plean como plantas ornamentales y medicinales. Las especies que se destacan como fuente de varias preparaciones ricas en cafena y teobromina son: Ilex vomitoria Aiton (yaupon), Ilex paraguayensis A. St.-Hil. (yerba mate) e Ilex guayusa Loes. (guayusa). El investigador colombiano Patio (1968 citado en Correa y Bernal 1989) relata que en una carta del jesuta granadino Juan Lorenzo Lucero con fecha 23 de agosto de 1683, dirigida al Virrey del Per, Melchor Navarra y Rocafull, describe una excursin realizada en 1682 por la cuenca del ro Santiago o Parosa, un afluente del margen izquierdo del ro Maran, regin habitada por los indios Jbaros. En este documento, Lucero describe que los indgenas durante sus actos mdicomgicos usaban plantas, y relata lo siguiente: Ellos colocan juntas estas hierbas demonacas (Datura, Banisteriopsis y

otras plantas narcticas) con guausa y tabaco, y las dejan hervir hasta que la poca cantidad sobrante del zumo llega a ser la quinta esencia con la creencia de que aquellos que la beben son premiados por el diablo con el fruto de la maldicin y para la desgracia de muchos. En la cosmovisin indgena el ritual tiene un significado de purificacin, induccin de pequeos sueos para adivinar si la expedicin de caza ser exitosa y tambin se consume como bebida de buen presagio. Es as, que en los rituales es consumida en concentraciones altas para soar y poder ver el futuro, destacndose que el empleo tradicional de la guayusa entre las nacionalidades indgenas de la amazona ecuatoriana es muy antiguo (Acosta-Sols 1972; Schultes 1972; Spruce 1996); por ejemplo, los Achuar del sur de Ecuador se han acostumbrado y an lo practican, a tomar infusin de guayusa antes de salir a sus expediciones de cacera o de pesca. Estos hechos de uso

ancestral de la guayusa demuestran que se deben intensificar los estudios farmacuticos, porque indican diferentes empleos de esta planta en la etnomedicina y que requieren ser ms profundizados con pruebas fitoqumicas.

Usos comerciales de la guayusa


El uso del gnero Ilex es muy difundido en Sudamrica y algunas especies estn presentes por tradicin como parte de las bebidas locales. La infusin de Ilex guayusa Loes. se puede considerar como el mate ecuatoriano, porque es muy consumida en la regin oriental amaznica, donde se la sirve caliente en copas con el desayuno y, sorprendentemente, a pesar de su alto contenido de cafena tambin se acostumbra a tomarla en la noche. En algunas cafeteras de la ciudad de Macas (Amazona ecuatoriana) se sirve la guayusa con hueso, esto es una mezcla de infusin de guayusa y un macerado alcohlico localmente conocido como chuchuhuaso que se obtiene de la especie Maytenus krukovii A.C. Sm.

Figura 2. Estructura de una molcula de cafena.

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La cafena y sus propiedades te- por aumento de elementos contrcti- Mtodos de investigacin les del msculo. raputicas 1. Preparacin de la droga: Una 5. Antagonizar los receptores de adeLa cafena es la sustancia psicoactiva ms popular del mundo y, sin duda, una de las ms aceptadas y toleradas a nivel social. Este alcaloide es aceptado legalmente, y es culturalmente admitido en todas las sociedades del mundo, siendo la fuente de consumo ms comn el caf y diferentes productos hechos con base en ste que son muy populares. Adems, a lo antes citado se debe agregar la existencia de un sinnmero de bebidas gaseosas con cafena con lo cual queda claro el porqu esta sustancia psicoactiva es la ms consumida del mundo. nosina. El conjunto de los efectos causados por los alcaloides xantnicos se reflejan en diferentes acciones a nivel del msculo liso del sistema nervioso central, aparato cardiovascular y msculo estriado, puesto que la cafena acta como excitante cortical estimulando el estado de vela y disminuyendo la sensacin de cansancio al favorecer la diuresis y acelerar el ritmo cardiaco. La cafena est presente en muchas formulaciones farmacuticas asociada a otras substancias como: cido acetilsaliclico, cido ascrbico, codena y paracetamol. Dos ejemplos de medicinas del mercado ecuatoriano que contienen cafena, en asociacin con otros frmacos, son Tonopan (Novartis) y Tempra Plus (Bristol-Myers Squibb) que sirven para el tratamiento sintomtico de manifestaciones dolorosas y febriles debidas a diferentes causas como infecciones, estados inflamatorios o malestares como jaqueca, gripe y dolores menstruales, entre otros. La cafena es un txico en dosis excesivas, pues ms de 1 g en el cuerpo produce en el ser humano nervios, irritabilidad, insomnio, arritmia cardaca y palpitaciones. Advirtindose, que una dosis superior a 10 g puede ser mortal. La absorcin de la cafena y de las xantinas en general es rpida en caso de administracin oral, rectal o parenteral. La cafena posee una vida media plasmtica entre tres y siete horas, la cual aumenta en mujeres en las ltimas etapas del embarazo o con el empleo continuado de anticonceptivos orales. La cafena se metaboliza en el hgado por desmetilacin y por oxidacin en la posicin 8, causando en los seres humanos la formacin de paraxantina que produce metabolitos que pueden ser eliminados en la orina.

muestra de Ilex guayusa Loes. compuesta de una rama con flores y secada al ambiente fue enviada al Herbario Nacional del Museo Ecuatoriano de Ciencias Naturales (QCNE) para la identificacin botnica. La droga se obtuvo secando hojas frescas, sanas y lavadas, usando un secador industrial ventilado a una temperatura de 40C, la prdida de peso del material fresco fue del 80%. Las hojas secas fueron molidas con un triturador manual de acero.

La cafena favorece la diuresis y acelera el ritmo cardaco. La cafena est presente en muchas formulaciones farmacuticas asociada a otras substancias como: cido acetilsaliclico, cido ascrbico, codena y paracetamol.
Desde el punto de vista qumico, la cafena es un alcaloide xantnico (1, 3, 7 trimetilxantina) y su accin farmacolgica se expresa principalmente a nivel de los sistemas nervioso central, cardiovascular y respiratorio, as como de la funcin renal por actuar como diurtico. Los principales efectos de los alcaloides xantnicos son: 1. Inhibir las fosfodiesterasas y con ello incrementar el campo intracelular. 2. Afectar la concentracin del calcio intracelular. 3. Actuar de modo indirecto en la cifra del calcio intracelular por hiperpolarizar la membrana celular. 4. Desacoplar el calcio intracelular

2. Identificacin de los componentes qumicos de la planta: La identificacin de las familias de los componentes qumicos de la guayusa se realiz por el mtodo de tamizaje fitoqumico. Es as, que a partir del mismo lote de planta seca se pesaron tres porciones de 50 g cada una para realizar tres experimentos diferentes con el mismo extracto. Las tres muestras se pusieron a macerar dos das con ter de petrleo, agua y etanol; luego, se filtraron y cada extracto se someti a un ensayo qumico que permiti identificar diferentes grupos qumicos de acuerdo a la variacin de coloracin o formacin de precipitados. 3. Preparacin del extracto de guayusa: Las tcnicas de extraccin de metabolitos de una planta son varias y se aplican de acuerdo a las caractersticas de cada especie. En el caso de la guayusa, no existe informacin bibliogrfica y se opt por usar un solvente hidroalcohlico al 70% con relacin droga/extracto 1,2 p/v, porque es el ms comn para especies que contienen alcaloides. La tcnica de la percolacin se eligi por ser efectiva y de fcil aplicacin, se us un percolador en acero Inox AISI 304, apto para uso alimentario y fitofarmacutico. La percolacin se desarroll en tres fases de acuerdo al procedimiento sugerido por Pelle:

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a. Humectacin: La droga seca y molida obtenida exclusivamente de las hojas fue embebida en una cantidad al 70% p/v de solucin hidroalcohlica y mezclada suavemente para obtener una masa vegetal homognea que se dej descansar durante una hora. b. Maceracin: La muestra humectada fue percolada, prensada suavemente para obtener una masa homognea y se le agreg una cantidad de solvente suficiente para cubrirla hasta superar un nivel de 3-4 cm, luego permaneci en maceracin durante 24 horas. c. Percolacin: La muestra sometida a percolacin pasa por un proceso lento, este consiste en un constante flujo de solvente a travs de la droga que baja goteando y se enriquece siempre ms de principio activo, porque remplaza desde arriba al solvente fresco que se vuelve a extraer y optimiza el proceso cada vez que lo hace. Las diferentes farmacopeas indican varias modalidades de percolacin, el presente estudio se ha desarrollado siguiendo la FUI que propone 20 gotas por minuto por kg de droga. En general, se separan los primeros 850 ml de solvente por cada kg de droga y esta cantidad se denomina primera fraccin, la percolacin sigue y separa otra cantidad de lquido denominado segunda fraccin que se concentra a un volumn igual o inferior a 150 ml, se agrega a la primera fraccin para llegar al volumen de 1.000 ml por kg de solvente (relacin peso D/volumen E = 1/1). Si es necesario, se utiliza esta ltima fraccin para extraer solvente por repercolacin y se concentra al rotavapor. El extracto que se obtiene se deja descansar 3-4 das a 4C, se filtra y se agrega al producto terminado extracto de cascarilla (Cinchona officinalis L.) por sus cualidades antifebrfugas. 4. Cuantificacin de la cafena por cromatografa lquida de alta reso-

lucin (CLAR): La CLAR es una tcnica de separacin verstil para anlisis de extractos. Se separa una muestra estndar de 1.000 ppm de cafena disuelta en agua y se inyecta cuatro veces una primera muestra del estndar en concentracin de 200 ppm. Posteriormente, se analiza la composicin del extracto total y de dos muestras. La muestra se somete a una dilucin del 1 al 50 de extracto de guayusa en una solucin de etanol al 70%, se agregan 2 ml de una solucin al 35% de hidrxido de amonio y se extrae dos veces con 4 ml de cloruro de metileno. La fase orgnica se lleva a volumen con cloruro de metileno en un matraz de 25 ml. Las medidas han sido desarrolladas con una variante de CLAR acoplada con un PC Dell Optiplex Gx 110 compatible. El equipo consiste de un mdulo LC Prostat con un lup de 20 L y un detector UV-VIS Prestar/Dynamax, la longitud de onda utilizada fue de 273 nm y la columna C18 tuvo una variante de 250 x 4,6 mm. La composicin de la fase mvil utilizada fue metanol, agua y cido actico glacial (69/28/3), estabilizada a un ph 3,0. Los anlisis se hicieron a temperatura ambiente y con un flujo de 0,6 ml/min. El agua utilizada para todos los estudios se destil con un aparato Millipore y es ultrapura 18 S/cm y en todas las soluciones fue desgasificada por medio de ultrasonido. El estndar de cafena es de Sigma (Quito).

taciones dolorosas y febriles debidas a diferentes causas como infecciones, estados inflamatorios o malestares comunes como jaqueca, gripe y dolores menstruales. La dosificacin del preparado tendr que ser profundizada con el respaldo de ulteriores pruebas de actividad; sin embargo, se ha decidido poner una cantidad de cafena de 40 1 mg de cafena por 100 g de producto. En algunas tabletas presentes en el mercado local cada dosis contiene entre 30 y 40 mg de cafena como es el caso de Tonopan (Novartis) y Tempra Plus (Bristol-Myers Squibb). La primera formulacin del producto planea una dosificacin baja hasta obtener datos de la actividad biolgica. La solucin azucarada se prepar siguiendo la Farmacopea Ufficiale Italiana y los textos de tcnicas fitofarmacuticas. La preparacin disuelve a caldo 665g de sacarosa en 335g de agua desmineralizada. La presencia de esta solucin azucarada permite conseguir la consistencia densa tpica del jarabe y un aroma dulce, pero la funcin principal es la de proteger la frmula de la contaminacin microbiana actuando sobre la actividad del agua. La solvatacin de las molculas de sacarosa produce una condicin osmtica desfavorable para el desarrollo de colonias de microorganismos (Muestra A, Tabla 1). La presencia

La cafena es un txico en dosis excesivas, pues ms de 1 g en el cuerpo produce en el ser humano nerDesarrollo del producto fitofar- vios, irritabilidad, insomnio, arritmia cardaca y palmacutico La forma farmacutica propuesta se pitaciones.
considera jarabe o elixir y es muy tradicional en la experiencia de las formulaciones galnicas. La frmula propuesta es un prototipo natural de varias especialidades farmacuticas aptas al tratamiento sintomtico de manifesde glicerina se justifica por su capacidad de detener la cristalizacin del azcar, problema que se puede presentar en la fase de desarrollo de estas frmulas farmacuticas (Muestra B, Tabla 2).

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Tabla 1. Frmula preliminar del jarabe con base en Ilex guayusa Loes. de la Muestra A.

Cdigo A C D E

Ingredientes Jarabe FUI Extracto hidroalcohlico de Cinchona officinalis L. 1:1 Extracto hidroalcohlico de Ilex guayusa Loes. 1:2 Aceite esencial de Citrus x limon (L.) Burm. f. TOTAL

Actividad Excipiente Febrfugo/antimalrico Estimulante Aroma

% 69,50 25,00 5,00 0,50 100,00

Tabla 2. Frmulas preliminares del jarabe con base en Ilex guayusa Loes. de la Muestra B.

Cdigo A C D E F

Ingredientes Jarabe FUI Extracto hidroalcohlico de Chinchona officinalis 1:1 Glicerina USP Extracto hidroalcohlico de Ilex guayusa 1:2 Aceite esencial de Citrus x limon TOTAL

Actividad Excipiente Febrfugo/antimalrico Excipiente Estimulante Aroma

% 59,50 25,00 10,00 5,00 0,50 100,00

Parmetros de calidad y estudios de los parmetros de calidad dentro mula determinando una previsin del de los rangos requeridos para su co- tiempo de caducidad y la fecha de de estabilidad del producto
El desarrollo de un producto fitofarmacutico planea la determinacin mercializacin. Los estudios de estabilidad permiten convalidar la frvencimiento (Tabla 3).

Tabla 3. Ensayo de estabilidad preliminar aplicado al jarabe con base en Ilex guayusa Loes. Tipo de estudio Condiciones 40C para 2 meses Tipo de resultados Estabilidad de la frmula y compatibilidad con el envase.

Estabilidad preliminar (acelerada)

Los datos del tamizaje fitoqumico permiten evidenciar que el extracto etreo es obviamente rico en alcaloides y presenta cantidades importantes de esteroides, terpenos y compuestos lactnicos o cumarinas. Los otros dos extractos, el acuoso y el etanlico, son an ms interesantes e importantes porque son muy similares al extracto hidroalcohlico que se usa como ingrediente del fitofrmaco. En el primer caso, se destaca la presencia de saponinas, fenoles, taninos, azcares reductores y por supuesto alcaloides. En el segundo caso, se evidencia otra vez la presencia de alcaloides, fenoles, taninos, azcares reductores, esteroides, terpenos, compuestos lactnicos a los

cuales se suman flavonoides y quinonas. La comparacin de los datos evidencia la solubilidad neta de las saponinas en el extracto acuoso y su ausencia en el etanlico, en el caso de que estudios posteriores evidencien una actividad biolgica de las saponinas se debera tomar en cuenta la concentracin en el extracto hidroalcohlico. Los tres extractos evidencian la ausencia de grasas y catequizas, as como la presencia de muclagos y compuestos cardenlicos en bajas concentraciones. Los resultados demuestran que Ilex guayusa Loes. es una especie con un fitocomplejo muy rico y que se debe profundizar la investigacin en

sus grupos qumicos encontrados, porque se podran explicar mejor las propiedades conocidas en la medicina tradicional y que no se pueden atribuir solo a la cafena. Se puede admitir por hiptesis que la presencia de flavonoides permite una accin antioxidante y que la presencia de antocianidinas podra agregar a las actividades de los alcaloides el efecto vasoprotector, extremadamente til si el producto final es indicado para fiebres paldicas. Al mismo tiempo, el producto fitofarmacutico que contiene una gran cantidad de compuestos producto de los extractos de guayusa y cascarilla necesita ms estudios

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de su actividad, especialmente para averiguar si existen sinergias negativas o efectos adversos. sin de utilizar la primera fraccin del extracto de guayusa se debe a los resultados analticos, porque con los mtodos de extraccin utilizados se obtuvo un extracto que contiene 8,13 mg de cafena por ml, el cual se utiliz como ingrediente del producto final porque la concentracin de activo es suficiente para el desarrollo del fitofrmaco. Es posible que con mtodos de extraccin diferentes se pueda optimizar el rendimiento de extraccin. En el caso del extracto de Cinchona officinalis L. se siguieron los mismos mtodos anteriores, pero el producto fue un extracto con relacin a la droga de D/E = 1/1 que no dio problemas de precipitacin. Sin embargo, no fue posible cuantificar los alcaloides de Cinchona officinalis L. y el desarrollo del extracto fue experimentado con base en datos de la literatura. Por lo tanto, se sugiere realizar ms experimentos que contribuyan a la optimizacin de los mtodos de extraccin. ms significativo de los dems al tiempo de retencin 10.264, pero el pico no est bien resuelto por la presencia de otros compuestos con tiempo de retencin similar; por lo tanto, se desarroll un mtodo de extraccin de la cafena. Las dos muestras evidenciaron un solo pico que sale en tiempos de retencin de 10.225 y 10.085, pero este resultado no confirma que el pico mayor del cromatograma del extracto es la cafena. Adems, los resultados permiten proponer un mtodo de extraccin de la cafena por el extracto y cuantificarla; sin embargo, an se necesitan ms pruebas para validarlo. El anlisis de una muestra estndar de teofilina y cafena demuestra que el tiempo de retencin es respectivamente de 6.852 y 9.254. Estos datos permiten admitir como hiptesis que se podra excluir la presencia de teofilina, porque no constituye una posible interferencia en el anlisis de CLAR. Adems, se debe decir que no fue posible ejecutar la misma prueba con un estndar de teobromina, pero s se puede pensar en un resultado similar cuando la diferencia de basicidad de las xantinas influye sobre el tiempo de eluicin en columna.

Desarrollar la preparacin de un extracto adecuado a la formulacin final


La presente investigacin postula todos los pasos de transformacin de la guayusa, desde la recoleccin hasta la estabilidad preliminar del fitofrmaco, proponiendo la implementacin de un proceso para la preparacin de un jarabe. Las operaciones de preparacin (seleccin, lavado y secado) de las hojas y la produccin de la droga molida no evidenciaron dificultades. Aclarndose, que en las primeras pruebas el proceso de percolacin mostr dificultad en la fase de humectacin al evidenciar una elevada absorcin de solvente por parte de la droga y problemas de precipitacin en la fase de concentracin al rotavapor. Por esta razn, se opt por seguir una variacin del mtodo para producir un extracto diluido una a dos a partir de 500 g de droga, es as que se decidi ocupar solo la primera fraccin recogiendo 850 ml y completando con solvente fresco el volumen de un litro. Este mtodo produce un extracto diluido, pero reduce el riesgo de problemas de precipitacin que podran perjudicar la estabilidad del fitofrmaco. El extracto obtenido fue hidroalcohlico al 70% con relacin droga D/E = 1/2 y de ste se utiliz solo la primera fraccin que no mostraba problemas de precipitacin. La deci-

Desarrollar un mtodo de CLAR para la dosificacin de cafena en extracto de guayusa


El extracto de guayusa dio un resultado de 8,13 mg por ml de cafena. As, la aplicacin del mtodo analtico permiti confrontar los siguientes cromatogramas: 1. Extracto total de Ilex guayusa Loes. 2. Muestras de extracto de cafena del extracto de Ilex guayusa Loes. 3. Mezcla de estndar de cafena y teofilina. El extracto total muestra un pico

Establecer los parmetros de calidad del jarabe de guayusa


Los anlisis sobre el prototipo de jarabe con base en Ilex guayusa Loes. permiten establecer los parmetros de calidad del producto terminado (Tabla 4). Las muestras A y B han sido estudiadas al tiempo 0 y despus, a una estabilidad acelerada de 40C.

Tabla 4. Parmetros de calidad del jarabe con base en Ilex guayusa Loes. Parmetros Olor Aspecto Color Sabor Porcentaje de azucares pH Rotacin especfica Densidad relativa ndice de refraccin Contenido alcohlico Valor Caracterstico, agradable Uniforme, opaco, no translcido, sin precipitacin Caf-rojizo oscuro Inicialmente dulce, amargo y desagradable al final 57,3% 4,8 No determinable, el jarabe no permite el paso a la luz 1,2091 1,4349 19,5

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Los datos encontrados en la literatura indican que un porcentaje de azcares superior al 50-55% permite una buena estabilidad microbiolgica, situacin que fue confirmada con los resultados del control microbiolgico del jarabe con base en Ilex guayusa Loes. (Tabla 5).

bargo, antes de resolver el problema del sabor se requiere profundizar en los estudios de actividad para poder establecer cul es la concentracin ptima de fitocomplejos.

Tabla 5. Calidad microbiolgica del jarabe con base en Ilex guayusa Loes. Anlisis Aerobios totales Mohos y levaduras Coliformes totales Escherichia coli fecal Valor < 10 ufc/g < 10 ufc/g < 2 ufc/g Ausencia Lmite permitido 1 x 105 1 x 103 1 x 103 Ausente

posible en ciertas pocas del ao, puesto que existen restricciones por la explotacin predatoria a la que fue sometida en el pasado esta especie. Los estudios de actividad y el afinamiento del desarrollo del producto pueden ser desarrollados con el apoyo de laboratorios locales, inclusive se puede afirmar que con una correcta inversin financiera el desarrollo local del producto fitofarmacutico y su produccin se podran realizar en la provincia de Morona-Santiago si se cuenta con el apoyo de la Fundacin Chankuap.

Desarrollar un prototipo fitofarmacutico de guayusa con potencial comercial


El presente estudio permiti el desarrollo de un prototipo de jarabe de Ilex guayusa Loes. que podra tener uso comercial; sin embargo, son necesarias pruebas analticas y de actividad que comprueben la estabilidad, seguridad y eficacia del producto. El paso siguiente despus de esta investigacin con el producto terminado, es la experimentacin que demuestre una actividad biolgica coadyuvante en el tratamiento sintomtico de manifestaciones dolorosas como gripe, jaqueca y estados febriles. Sin embargo, el conocimiento fitoqumico de la especie Ilex guayusa Loes. es todava muy limitado y otras investigaciones podran sugerir nuevos usos medicinales de la planta, los cuales pueden ser diferentes a los registrados en este estudio.

Las normativas ecuatorianas para los productos fitofarmacuticos no indican los lmites permitidos y por esto se ha utilizado los lmites de la normativa interna del Centro de Investigacin y Valoracin de la Biodiversidad (CIVABI) de la Universidad Politcnica Salesiana. Sin embargo, los resultados demuestran una buena calidad microbiolgica de la frmula. Por lo que se refiere al sabor del jarabe, es importante evidenciar que tiene una sensacin tannica similar a la de algunos vinos tintos pero que se siente ms intensa y amarga. De este modo, se recomienda el aumento de aceite esencial de limn porque podra solucionar el problema; sin em-

Desarrollar una tecnologa de produccin apta para las condiciones de Ecuador


La produccin de los extractos, los mtodos analticos y los experimentos fitoqumicos fueron desarrollados en los laboratorios del CIVABI. Las tecnologas y mtodos utilizados se pueden implementar en el departamento de produccin de fitofrmacos de la Fundacin Chankuap, la que ya posee una red de proveedores que reciben asistencia tcnica en el manejo de cultivo y recoleccin de Ilex guayusa Loes. El abastecimiento de material que proviene de Chinchona officinalis L. es

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Las futuras pruebas de actividad biolgica pueden confirmar las hiptesis de este estudio respecto a los procesos de produccin de los extractos y los mtodos de cuantificacin de los principios activos y del fitocomplejo. Adems, las investigaciones posteriores deben asegurar que el conjunto de

extractos naturales no provocan reacciones adversas, confirmar que el producto tiene estabilidad y garantizar un estricto control microbiolgico. En general, se puede colocar que este estudio se desarroll con tecnologa bsica que fue acorde a la realidad

local, pero se debe enfatizar que la produccin y comercializacin de un producto fitofarmacutico necesita la implementacin de las buenas prcticas de manejo (BPM) en la infraestructura y personal de la Fundacin Chankuap.

Literatura citada
Acosta-Sols, M. 1972. Guayusa, planta medicinal del Oriente ecuatoriano. Publicacin Miscelnea (Quito) 302: 1-8. Brcher, H. 1989. Useful Plants of Neotropical Origen and their Wild Relatives. Springer-Verlag. Berlin, Alemania. 296 pp. Correa Q., J.E. y H.Y. Bernal. 1989. Especies Vegetales Promisorias de los Pases del Convenio Andrs Bello, Tomo I A. Ministerio de Educacin y Ciencia de Espaa, Junta del Acuerdo de Cartagena (JUNAC) y Secretara Ejecutiva del Convenio Andrs Bello (SECAB). Editora Guadalupe Ltda. Bogot, Colombia. 547 pp. Estrella, J.; R. Manosalvas; J. Mariaca y M. Ribadeneira. 2005. Biodiversidad y recursos genticos: una gua para su uso y acceso en el Ecuador. Fundacin Ecuatoriana de Estudios Ecolgicos (EcoCiencia), INIAP, MAE y Ediciones Abya-Yala. Quito, Ecuador. 116 pp. Fundacin Chankuap. 2006. Plan de manejo de Ilex guayusa Loes. Fundacin Chankuap. Macas, Ecuador. Garca Barriga, H. 1992. 2 ed. Flora Medicinal de Colombia. Editores Tercer Mundo. Bogot, Colombia. Tomo 2: 1-537. Gupta, M. (Ed.). 1995. 270 plantas medicinales Iberoamericanas. CYTED-SECAB. Bogot, Colombia. 617 pp. Istituto Poligrafico e Zecca dello Stato. 1996. 6 ed. Farmacopea Ufficiale della Repubblica Italiana. Libreria dello Stato, Ministero della Salute. Roma, Italia. Jrgensen, P.M. y S. Len-Ynez (Eds.) 1999. Catalogue of the Vascular Plants of Ecuador. Monographs in Systematic Botany from The Missouri Botanical Garden 75: 1-1181. Pelle, B. 1998. Mdulo de Erboristeria domani: Teoria e pratica del laboratorio erborstico. Manual del fitopreparatore. Studio Edizioni. Milano, Italia. Rosero Gordn, A.L. 2006-2007. Desarrollo y validacin de un mtodo analtico por cromatografa lquida de alta resolucin para la cuantificacin de cafena de un extracto hidro-alcohlico de Ilex guayusa. Plan de tesis. Laboratorio CIVABI, Universidad Politcnica Salesiana. Quito, Ecuador. Schultes, R.E. 1972. Ilex guayusa from 500 A.D. to the present. Etnologiska Studier 32: 115-138. Spruce, R. 1996. Notas de un botnico en el Amazonas y los Andes. Ediciones Abya-Yala. Quito, Ecuador. Coleccin Tierra Incgnita 21: 1-749