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FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA

ASIGNATURA: PRÁCTICAS N º 1 : A CATALIZADORES ALUMNA: CICLO: DOCENTE:

BIOQUIMICA II ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE NO BIOLÓGICOS

ROJAS RÉVOLO ROSARIO DIANA VII TURNO MAÑANA Q.F. JAVIER JACK CALDERÓN GÓMEZ

LIMA – PERÚ 2012

UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica

). La Hidrólisis va a ser efectuada por los catalizadores Biológicos y No Biológicos. Determinar cuáles de los Catalizadores produce cada tipo de Hidrólisis.PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS OBJETIVO: Producir la Hidrólisis del Sustrato Problema (Solución salina de Almidón).. y el HCl 10 %. Realizar la comparación de catalizadores Biológicos (Amilasa) frente a otros Catalizadores de tipo no Biológicos (H20 dest. UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica .

Anaranjado ladrillo. Rojo ladrillo.PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS OBSERVACIONES: No enjuagar la boca con agua para luego botarlo y volverse a enjuagar nuevamente. - RESULTADOS: Tubos Nº 4 y 7: 1. se observará el color azul Marino Intenso. HIDRÓLISIS NEGATIVOS Ó NULOS. La muestra siempre debe estar bien cubierta por el agua para que el calor sea homogéneo.pp. En éste Tipo de Hidrólisis se pueden encontrar hasta tres Productos distintos: a) Glucosas (En baja proporción) b) Maltosas (Disacárido) c) Dextrinas (Trozos grandes de Carbohidratos) ( En mayor proporción) Tubos Nº 9: 3. Muestra. es por eso que el único producto que se forma en éste tipo de Hidrólisis son las Glucosas. aquí los enlaces glucosídicos tanto alfa 1. Rvo.6 y 8: 2.. - UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica .4 como alfa 1.El Sustrato está intacto. HIDRÓLISIS TOTALES Ó COMPLETAS. El Lugol reconoce el Almidón.6 han sido rotos por completo. Rojo. Benedict.. mediante la coloración característica: Azul Marino Intenso. HIDRÓLISIS PARCIALES Ó INCOMPLETOS. por eso se dice el Producto de Hidrólisis Negativa sigue siendo el mismo Almidón. Agitar por inversión con diferentes dedos los tubos para homogenizar.El Sustrato ha sido Hidrolizado de manera parcial. por partes ó desordenada de la estructura del Polisacárido (Almidón). La Glucosa (Azúcar reductor) obtenida se identificó con los siguientes reactivos: Benedict y Fehling A+B. Rvo. ya que de ésta manera se reduce la concentración de amilasa que es la Solución madre que queremos obtener para el ensayo. La Reacción sólo dura hasta observar cambio de coloración.Todo el Almidón ha sido destruido por completo. Muriático en 100 ml de H20 destilada. ya que si enjuagamos y desechamos va a tener menor actividad. Amilasa en condición de Ayuno. Trabajamos con Acido Muriático en vez de HCL 10%: 20 ml de Ac.Va a ser el catalizador Biológico.pp. Fehling A + B... Tubos Nº 5..

El color azul de Cu++ es negativo para sustancias reductoras. resulta al mezclar una solución de CuSO4 con una solución alcalina de tartrato de sodio y potasio. pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+.El Reactivo de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre).PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS CONCLUSIÓNES: . reduciéndose a Cu2O de color rojo ladrillo. En soluciones alcalinas. De Benedict y Fehling hay una oxidación del Cu+2 (color azúl) a Cu +1 (rojo) Fundamento: Reacción con Rvo. Tanto con Rvo. (Benedict ó Fehling) obtuvimos una hidrólisis Total. Fundamento: El Reactivo de Fehling. - HC=O R + 2 Cu ++ + 5 OH - UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica C=O O R + Cu2O + 3 H2O . De Benedict y Fehling se corrobora que la amilasa es el mejor catalizador que el agua y el ácido. Fundamento: . que oxida a los aldehidos. La reacción de Fehling está basada en la acción reductora que tienen los azucares sobre los iones cúpricos en medio alcalino. y celobiosa. formándose un complejo del ión Cu++ de color azul intenso.Se cumplió con el objetivo de la práctica sólo con la observación de la Revelación del producto final con la amilasa que aparentemente salía Hidrólisis Parcial con el sustrato. que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. la glucosa. la maltosa. Con Rvo. Benedict. - Reacción con Rvo. pero con el Producto + Rvo. Fehling. como la lactosa.

El Cloruro impide que el almidón se hidrolice con facilidad Diluída y PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS COMENTARIOS Por ser la primera práctica de laboratorio. hubo mucho alumnado presente. muy puro. lo que originó mucha aglomeración. CRÍTICAS: El Lugol proporcionado para la práctica fue muy concentrado. el cual no lo revisamos al encontrar los materiales en nuestra mesa. El tiempo de práctica es muy corto por lo que debemos ganar tiempo lavando nuestros materiales apenas ingresemos al laboratorio y tomar nota de los procedimientos a realizar. es almidón de trigo ya que cuando colocamos el tubo a contra luz nos es translucida como si lo es el Almidón Reactivo. - UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica . por eso lo diluimos agregándole agua destilada hasta obtener una coloración caramelo para poder observar la coloración Azul Marino Intenso. El asistente de Laboratorio nos entregó un Beacker de 100 ml rajado. El Almidón utilizado y proporcionado por el Laboratorio no es Almidón puro.- Sustrato Problema: Solución Salina de Almidón (Bien Transparente): Solución Conservadora de Almidón.

38ºC x 15 Azúl min Violáceo Aparentement e Hidrólisis Parcial Esperamos encontrar la Hidrólisis Total. de la Hidrólisis Negativa y de la Hidrólisis Total Observación con la Revelación del producto: TUBO Nº 7 0. Hervir x 15 Rojo Concho de min Vino Hidrólisis Parcial ó Incompleta (Hay Glucosa en baja proporción con Maltosas y Dextrinas en mayor proporción) + 5 ml TUBO Salina SoluciónNº 6 0. Benedict Azul Marino Intenso Hidrólisis Negativa No hay formación de pp porque no hay azúcar Reductor libre + 2 ml Rvo. 38ºC x 15 Azul Marino min.M.5 ml de 3 + 2 ml Rvo.5 ml de 1 TUBO Nº 8 0. + 5 ml TUBO Salina Solución Nº 5 0. libre 7 8 9 UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica .5 ml de 2 TUBO Nº 9 0.M.) + 2 ml Rvo.PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS DIGESTIÓN: TUBO Nº 1 1 ml H20 destilada TUBO Nº 2 1 ml HCl 10% TUBO Nº 3 1 ml Amilasa (Muestra) 1 2 3 + 5 ml TUBO Salina Solución Nº 4 0. Intenso Hidrólisis Negativa (Por que proviene del Digerido 1 el en cual hay H20. con una coloración pardoso amarillento translúcido.5Almidón de ml de 3 I gota Lugol B. Rojo ladrillo (en mayor cantidad) Hidrólisis Hidrólisis Parcial Total.5Almidón de ml de 1 I gota Lugol B.5Almidón de ml de 2 I gota Lugol B. Rojo ladrillo (muy poco pp. es Productos decir poco formados: azúcar reductor Glucosas. Benedict pp. Benedict pp. Poca glucosa. color caramelo DETERMINACIÓN DE SUSTRATO: + + + + + + 4 5 6 DETERMINACIÓN DE PRODUCTO: Con ésta prueba se corrobora la Hidrólisis Parcial.M.

Fehling A +B pp.5 ml de 1 TUBO Nº 8 0. UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica . Rojo ladrillo (en mayor cantidad) Hidrólisis Hidrólisis Parcial Total.5 ml de 3 + 2 ml Rvo.PRÁCTICA Nº 1 ACCIÓN COMPARATIVA DE LAS ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLÓGICOS DETERMINACIÓN DE PRODUCTO: TUBO Nº 7 0.5 ml de 2 TUBO Nº 9 0. Fehling A +B pp. Fehling A +B Azul Marino Intenso Hidrólisis Negativa No hay formación de pp porque no hay azúcar Reductor libre + 2 ml Rvo. Poca glucosa.) + 7 8 9 2 ml Rvo. libre Con éstas pruebas se corrobora que la amilasa es el mejor catalizador que el agua y el ácido. es Productos decir poco formados: azúcar reductor Glucosas. Rojo ladrillo (muy poco pp.