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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN DE AREQUIPA FACULTAD DE INGENIRIA DE PROCESOS ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA QUIMICA

TITULO DEL PROYECTO: CULTIVO MICRO-ALGA (ESPIRULINA PLATENSIS) AUTORES: PEREZ MENDEZ, RODOLFO ROQUE CARBAJAL ACHAMPURI, KAROL VIOLETA LLERENA VALENCIA, BRIAN DUBERTH HINOJOSA VALDIVIA, BLANCA MARIQUE GARCIA, SILENA MODALIDAD PRE-GRADO

AREQUIPA PERU FECHA DE ENVIO 2008-09-27

Contenido:

Capitulo I
1.- Aspectos generales. 1.1.- Datos nominales del proyecto. 1.1.1.- Titulo 1.1.2.- Localizacin del proceso. 1.1.2.1.- Macro localizacin. 1.1.2.2.- Micro localizacin. 1.2.- Objetivos. 1.2.1.- Objetivos generales. 1.2.2.- Objetivos especficos. 1.3.- Definicin del problema. 1.4.- Justificaciones.

Capitulo II
2.- Estudio del mercado. 2.1.- Generalidades. 2.2.- Encuestas.

Capitulo III
3.- Estudio de la Materia Prima. 3.1.- Materia prima principal del proyecto. 3.1.1.- Definicin Materia Prima. 3.1.2.- Descripcin de la materia. 3.1.2.1.- Nombre Comn. 3.1.2.2.- Nombre Cientfico. 3.1.2.3.- Caractersticas Biolgicas Nutricionales. 3.1.2.4.- Usos y Aplicaciones.

Capitulo IV
4.- Desarrollo Experimental. 4.1.- Tecnologa del proceso. 4.1.1.- Mtodo de produccin 4.1.1.1.- Construccin de la planta 4.1.1.2.- Construccin del bioreactor. 4.1.1.3.- Diseo de la posa. 4.1.1.4.- Construccin del rea elctrica. 4.2.- Condiciones de cultivo. 4.2.1.- Temperatura. 4.2.2.- Radiacin. 4.2.3.- Agitacin. 4.2.4.- Alcalinidad del medio. 4.2.5.- Salinidad. 4.3.- Descripcin del proceso. 4.3.1.- Inoculacin. 4.3.2.- Escalamiento. 4.3.3.- Cosecha 4.3.3.1.- Filtracin. 4.3.3.2.- Centrifugacin. 4.3.4.- Secado. 4.4.- Diagrama de flujo.

Capitulo V

5.- Costos de produccin. 6.- Anexos. 7.- Bibliografa.

INTRODUCCION

Para el desarrollo de nuestro proyecto en el curso de microbiologa industrial optamos por la investigacin de la micro-alga ARTHROSPIRA PLATENSIS mas conocida como espirulina, con el propsito de conocer su proceso de desarrollo para una produccin en pequea escala.

En este proyecto incluimos el diseo y construccin de una planta piloto considerando todos los variables que influyen y afectan la produccin de la espirulina (temperatura, pH, luz, turbidez), con el acondicionamiento de equipos construidos (agitador, centrifuga, disco secchy) en la misma planta con materiales asequibles, instalaciones crecimiento de la micro-alga. de suministro elctrico, etc., En el

Capitulo I
1.- Aspectos generales.

1.1.- Datos nominales del proyecto

1.1.1.- Titulo.

Produccin y aplicacin microbiana de la Arthrospira Platensis

1.1.2.- Localizacin del proceso.

1.1.2.1.- Macro localizacin: Ciudad de arequipa

1.1.2.2.- Micro localizacin: Quebrada de Coscollo, Socabaya

Vista Satelital 2008, Socabaya

1.2.- Objetivos.

1.2.1.- Objetivos generales.

El proyecto tiene el propsito la produccin de la Arthrospira Platensis.

1.2.2.- Objetivos especficos.

El proyecto tiene como finalidad instalar un prototipo de planta piloto para el cultivo tecnificado de la espirulina. Evaluar la cintica de produccin a pequea escala. Evaluar los factores que afectan la productividad de la espirulina a pequea escala. Evaluar la parte de rentabilidad del proyecto

1.3.- Definicin del problema.

En los pases en desarrollo debido al crecimiento poblacional la desnutricin representa un grave problema, adems del aumento de los costos de

alimentos de consumo diario por lo que la produccin de fuentes alternativas de alimento es de suma importancia y se busca obtener alimentos con alto contenido nutricional accesible a todo pblico.

1.4.- Justificaciones.

El proyecto pretende presentar una alternativa recomendable para la produccin de una nueva fuente alimenticia de bajo costo y alto contenido nutricional.

La Espirulina representa una de esas alternativas, pues adems de sus propiedades nutritivas, su cultivo tiene pocas dificultades ya que crece en aguas altamente a1calinas y por ello la probabilidad de contaminacin con otros microorganismos es limitada y no se requieren de grandes esfuerzos y, finalmente, estudios de toxicidad revelan que es inocua pudindose utilizar como suplemento alimenticio para animales y humanos

Capitulo II
2.- Estudio del mercado. 2.1.- Generalidades. Estudia el comportamiento de los consumidores para detectar sus necesidades de consumo y la forma de satisfacerlas, y averiguar sus hbitos de compra (lugares, momentos, preferencias), etc. Su objetivo final es aportar datos que permitan mejorar las tcnicas de mercado para la venta de un producto o de una serie de productos que cubran la demanda no satisfecha de los consumidores. Con el estudio de mercado pueden lograrse multiples de objetivos y que puede aplicarse en la prctica de los cuales mencionaremos algunos de los aspectos mas importantes a analizar, como son: El consumidor Sus motivaciones de consumo Sus hbitos de compra Su aceptacin de precio, preferencias, etc. El producto Estudios sobre los usos del producto. Tests sobre su aceptacin Estudios sobre sus formas, tamaos y envases. 2.2.- Encuestas. Se realizo la siguiente encuesta a un sector universitario, obteniendo los siguientes resultados:

Resultados Obtenidos: 1)

S abe que es un Alg a?


SI NO

12%

88%

2)

Alg una vez a es c uc hado s obre la es pirulina?

SI 23%

NO

77%

3)

Conoce sus propiedades nutricionales?

SI

NO 23%

77%

4)

D e s aber s us propiedades , la c ons umiria?


SI NO

13%

87%

PROPIEDADES SEALADAS Antioxidantes Proteicas suplemento nutricional energticos alto contenido de vitaminas

5)

C ons ume E s pirulina?

SI

NO

0%

100%

6)

C ons umiria es pirulina c omo s uplemento alimentic io?

No S abe 2% NO - 19% S I - 79%

7)

S abe el c os to de la es pirulina? C ual es s u valor?


No S abe 6%

S I - 6%

NO 88%

Datos Obtenidos Cual es su valor? S/ 60.00 Capsula de 120 tabletas S/ 50.00

Cuanto pagara? S/ 1.00 Dependiendo de la cantidad Lo mas econmico posible

S/ 20.00 S/ 30.00

8)

Al s aber mas de la E s pirulina c omo le g us taria c ons umir?


No S abe 2% O tros 4% P an 9% H elados 43% C aps ulas 42%

Otros: Bebida. Hamburguesa. Caramelo. Galletas.

Capitulo III
3.- Estudio de la Materia Prima. 3.1.- Materia prima principal del proyecto: ARTHROSPIRA PLATENSIS 3.1.1.- Definicin Materia Prima.
CLASIFICACION CIENTIFICA Reino: Divisin: Clase: Orden: Genero: Bacteria Cianobacteria Cyanophyceae Oscillatoriales Spirulina

Desde 1989 se ah reconocido que estos dos gneros son distintos y que estas especies pertenecen al genero ARTHROSPIRA( ( Tomaselli 1997)

ARTHROSPIRA PLATENSIS Es una de las algas mas primitivas, Es de color verde azulado No tiene ncleo y sus membranas celulares son suaves sin la dura celulosa que tienen otras algas Esta caracterstica asegura una fcil asimilacin de sus nutrientes. Tienen una estructura filamentosas, no diferenciadas multicelulares cuyas clulas cilndricas tienen un ancho de 3 a 12 m a veces llegan a 16 m sus triconas (filamentos) tienes un patrn de arreglo en forma de hlice abierta y llegan ah medir 100 a 200 hasta 500 m a inclinacin de una vuelta de la hlice generalmente varia de 10 a 70 m y el dimetro de la misma mide de 20 a100 m estas ultimas caractersticas dependen en gran medida de las condiciones ambientales y de crecimiento.

Poseen

una

membrana

plasmtica

rodeada

por

una

pared

celular

multiestratificada, gran negativa que se caracteriza por presentar una serie de poros alrededor del tricoma, encontrndose dividida por septos visibles al microscopio ptico. La pared est envuelta en una cpsula o vaina compuesta por polisacridos.

Otros componentes celulares son las inclusiones del citoplasma, como los grnulos de glucgeno depositados principalmente en el citoplasma que se encuentra entre la membrana tilacoidales que actan como fuente de carbono y

energa. Los grnulos de lpidos se localizan cerca de la superficie celular y se almacenan, siendo utilizados en la sntesis de la membrana. Los grnulos de cianoficina constituido por polipeptido compuestos de dos aminocidos

(arginina y acido aspartico) que funcionan en la conversin del nitrgeno ; los cuerpos de polifosfato y los carboxisomas que almacenan la ribulosa (rubisco) ,enzima que cataliza la unin de CO2 a la ribulosa 1,5 bifosfato en el ciclo de kelvin , con formacin de glucgeno como material de reserva. es capaz de realizar la fotosntesis oxignica y de fijar el nitrgeno del medio. Puede crecer en medios minerales que tengan CO2 como fuente de carbono y N2 como fuente de nitrgeno a partir de desechos, nitrgeno atmosfrico o de la respiracin bacteriana

Las vesculas de gas presentes se localizan en espacios intetilacoidales e les confieren su capacidad de flotacin. Mediante este mecanismo regulan sus migraciones diurnas dentro de la columna de agua, permitiendo que las algas se mantengan en las zonas donde el proceso de fotosntesis es ptimo y la cantidad de nutrientes necesarios

La reproduccin se lleva a cabo por fisin binaria transversal el alargamiento del tilacoide se debe a numerosas divisiones transversales de as clulas del mismo la multiplicacin ocurre solo por fragmentacin del ticoma es

intracelular, involucrando la destruccin de la clula intercalar.

CICLO DE CALVIN

3.1.2.- Descripcin de la materia. 3.1.2.1.- Nombre Comn: ESPIRULINA 3.1.2.2.- Nombre Cientfico: ARTHROSPIRA PLATENSIS. 3.1.2.3.- Caractersticas Biolgicas Nutricionales. El valor de espirulina (arthrospira) radica principalmente en la gran variedad de macro nutrientes y micronutrientes que contiene, algunos de los cuales ni pueden ser sintetizados por el organismo humano, as como algunas de sus propiedades Tales como incrementar los niveles de energa reducir el estrs premenstrual incrementar el rendimiento de atletas mejorar su apetito y ofrecer proteccin antioxidante.

Esta cianobacterias es fuente rica en protenas, aminocidos, vitaminas, minerales y otros nutrientes pre lo que uno de sus principales usos es como suplemento alimenticio. Ya sea en polvo encapsulado, en tabletas como sustituto de harina etc.

Componentes:

Proteina 20% 3% 5% 7% Humedad Carboh. Lipidos 65% Mineral.

Protena Cantidad: ms que pescado (15-25%) - soja (35%) - granos (8-14%) - leche (3%) Calidad: aminograma de: no esenciales y esenciales (limitantes: metionina, cisteina) - 100% de la ingesta diaria de AA esenciales de hombre adulto cubiertos por 36 g de Spirulina - Dietas de alta protena y baja calora (embarazadas, deportistas) Vitaminas B-caroteno 10 x + q zanahorias anticanceroso (cis-trans) B-12 + que carne B-1, B-2, E Minerales Fe 50 + q espinacas Mn, Mg, Ca 10x + que leche Se 100x+ que cualquier vegetal (antioxidante) Carbohidratos ramnosa y glucogeno = facilmente absorbidos sin mucho gasto de insulina Pigmentos - carotenoides: 0.37% del PS - clorofila: green blood 1.1% (Chl-a) / (Chlorella 2-3% Chl-b) - ficocianina llega hasta el 20% del PS (estimula defensas inmunitarias, anticancer) Enzimas SOD - reduce radicales libres = retarda

Lpidos: muy bajo y sin colesterol y alta proporcin de AG (20-40%) y EFA: PUFA de las tres familias que abundan en microalgas 18:2 6 linoleico 18:3 6 - linolnico (GLA) 20:3 6 homo- -linolenico 20:4 6 araquidnico 18:3 3 20:5 3 eicosapentaenoico 22:6 3 docosahexaenoico 20:3 9 ecosatrienoico -linolnico 5,8,11,14,17 7,10,13,16,19 5,8,11

linolenico (GLA) y araquidnico = precursor de prostaglandinas (PGE1) linolenico: 25% en Spirulina Araquidnico: 36% de AG en Porphyridium Reducen colesterol (arterioesclerosis / infarto & embolias) y sindrome pre-

menstrual 3.1.2.4.- Usos y Aplicaciones.

envejecimiento y cncer

Actualmente se le emplea cada vez ms como fuente de pigmentos naturales, vitaminas y cidos grasos, as como para la obtencin de aditivos utilizados en frmulas farmacuticas alimentos En acuacultura se utiliza como alimento para moluscos, micro crustceos y sobre todo para peces, ya que ayuda a mantener sana su piel e intensifica la coloracin de la misma, adems de incrementar las tasas de crecimiento, supervivencia y fertilidad. En algunos pases se utiliza como alimento para aves de ornato, para gatos y perros, Especialmente para las hembras con cras, y como tnico para caballos, Vacas y semental

Por otro lado, en los ltimos aos se han hecho diferentes estudios acerca de los efectos que Espirulina tiene sobre algunos roedores y en el humano. Algunos de estos efectos son la inmuno-regulacin, efectos antioxidantes, anti cancergenos, antivirales, antitxico s y contra la hiperlipidemia y la hiperglicemia Se ha comprobado a nivel experimental, in vivo e in vitro, su efectividad en el tratamiento de algunos tipos de alergias, anemia y leucemia en otros tipos de cncer, en reduccin de hepatotoxicidad, en enfermedades vitales y cardiovasculares, diabetes, obesidad, inmunodeficiencia y procesos

inflamatorios, entre otros Por lo anterior es considerada como un promotor de la salud o nutracutico como:

Hiperlipidemia: la espirulina reduce el colesterol total, mejora la proporcin de HDL y LDL, impide la elevacin de los niveles de triglicridos en la sangre y el hgado, y reduce el ndice Aterognico, una medida directa del riesgo de enfermedades cardiovasculares en seres humanos. Elimina la acumulacin de grasa en el hgado, y estimula la recuperacin desde este estado. Antitumorales: el beta-caroteno de la espirulina es eficaz contra las clulas tumorales.

Efectos inmunolgicos: elimina la hipersensibilidad retardada, mejora general de la respuesta inmunolgica, y refuerzo de la respuesta inmune primaria contra diversos antgenos. Toxicidad renal: la fitocianina, compuesto colorante de la espirulina, ejerce un efecto protector contra el fallo renal y el ocasionado por mercurio y frmacos txicos para el rin. Obesidad: la espirulina puede reducir significativamente el peso corporal de los pacientes obesos. La abundancia de protenas y de vitaminas del complejo B la convierten en un complemento muy importante para mejorar el valor nutritivo de la dieta. Por su elevada concentracin de betacaroteno ayuda a corregir las alteraciones de la vista provocadas por carencia de vitamina A. Es, junto con la leche materna, el principal alimento que contiene cantidades apreciables del cido graso esencial gammalinolnico (GLA), que interviene en la regulacin de toda la red hormonal. El consumo de espirulina multiplica la poblacin de lactobacilo, un microorganismo intestinal que mejora la digestin, la absorcin de nutrientes, protege de infecciones y estimula el sistema inmune. Una cucharada al da basta para resolver la anemia ferropnica, la deficiencia mineral ms comn del mundo. Esta extraordinaria productividad supone un rendimiento en protenas que supera en 20, 40 y 400 veces el que se obtendra dedicando la misma superficie a producir soja, maz o vacuno, respectivamente.

Capitulo IV
4.- Desarrollo Experimental.

4.1.- Tecnologa del proceso.

4.1.1.- Mtodo de produccin.

4.1.1.1.-CONSTRUCCION DE LA PLANTA PILOTO

La espirulina vive en agua a la vez salada y alcalina, contenida en un recipiente donde tendremos que considerar el control de las siguientes variables:

Adecuada Alimentacin. Temperatura. Radiacin Solar. Agitacin Aireacin. Control de pH.

Considerando los requerimientos ya descritos, utilizamos un tanque de agua con una capacidad de 20 litros, al cual se le perforaron 5 orificios en la parte superior de un dimetro de 6 cm., para la adecuada aireacin; en la parte inferior le incoporamos una tubera unida a una bomba la cual tiene la funcion de proporcionar la descarga a nuestro tanque para el segundo escalamiento, todo esto contenido en un trpode de fierro, uniones, niples, de plastico, y demas accesorios.

4.1.1.1.1.-CONSTRUCCION DEL BIOREACCTOR

La aireacin y la agitacin se proporciona por medio de una compresora unida al tanque por medio de una manguera

4.1.1.1.2.- DISEO DE LA POSA:

Teniendo como base un piso de ladrillos, comenzamos la construccin con el apilamiento de ellos, formando un cubo de las siguientes medidas:

Altura: 0.24 metros

Ancho: 1.9 metros. Largo: 2.8 metros. Volumen total : 1.0512 m3

Se separ la posa en 4 espacios proporcionados con ayuda de 3 filas de ladrillos como se muestra en la imagen.

El volumen total fue considerado descontando el volumen que ocupan las columnas divisorias.

Solo se utiliza la mitad de la posa, temporalmente, por la poca cantidad de espirulina producida. Por lo cual tenemos un volumen de produccin de espirulina de 0.5256 m3

A esta posa la cubrimos con con 6 metros de polietileno blanco, este color se eligio con el proposito de observar el aumento de la concentracin de la espirulina y controlar su limpieza.

Para la agitacin de la espirulina dentro de la posa, se le incorporo un motoreductor que tiene un eje con uniones soldadas para las paletas (construidas de fierro y maderas en los extremos ) ; este motoreductor nos

proporciona el movimiento de las paletas ubicadas en los espacios con el fin que transcurra el fluido en forma circular alrededor de las columnas.

Para la cubierta de la posa se utiliz una plstica transparente opaca, para que haya una invernacin y se mantenga la limpieza del agua, esta cubierta fue considerando el adecuado espacio para el agitado de las paletas, dejandole una abertura para su respiracin, el ingreso de alimentos y control de parmetros.

Otros metodos de realizar econmicamente estos estanques es utilizando

plsticos de 0,5 mm de espesor (PVC, EVA), de calidad alimentaria de preferencia; los laterales son soportados por un muro de ladrillos o una estructura de madera o tubos metlicos o PVC. Si hay termitas en la regin, se recomienda colocar bajo el plstico una delgada capa de ceniza y una capa de arena seca. El hormign es un buen material para los estanques, pero necesita albailes experimentados. La calidad del revoque es muy importante. Un invernadero sobre los estanques ofrece muchas ventajas a condicin de que pueda ser aireado y sombreado. La agitacin de los estanques se puede hacer a mano o con escoba, una vez cada hora o dos horas (mas frecuente si el sol es fuerte). Si se dispone de electricidad se puede utilizar pequeas bombas de acuario para agitar los estanques (una potencia media de 1 W/m es suficiente). Los estanques industriales son agitados con paletas, pero sta es una tcnica considerada como un poco difcil a emplear para los pequeos estanques artesanales que son los que aqu nos interesan. Los estanques construidos de apariencia semi-industrial son agitados por medio de un eje y paletas conectadas a un moto-reductor y a un motor. El agua utilizada para hacer el medio de cultivo debe ser limpia o filtrada para eliminar las algas contaminantes. El agua potable es conveniente. Si contiene demasiado cloro, se debe aerear. Si el agua es muy dura, provocar la formacin de depsitos desagradables pero no peligrosos. La utilizacin de agua salobre puede ser interesante pero es necesario analizarla antes de utilizarla. Algunas aguas contienen bastante o demasiado magnesio y/o hierro.
* El hormign: tambin denominado concreto en algunos pases de ibero Amrica (se trata de un calco semntico), resulta de la mezcla de uno o ms conglomerantes (generalmente cemento) con ridos (grava, gravilla y arena), agua y, eventualmente, aditivos y adiciones. El cemento se hidrata en contacto con el agua, inicindose complejas reacciones qumicas que derivan en el fraguado y endurecimiento de la mezcla, obtenindose al final del proceso un material con consistencia ptrea. La principal caracterstica estructural del hormign es que resiste muy bien los esfuerzos de compresin. * Revoque: Cubierta de cal, yeso u otro material que pone en los muros o paredes. * Moto-reductor: Consta de un sistema de engranajes la cual tienen por funcin de reducir la velocidad y aumentar la fuerza del motor. * Salobre: Que contiene sal o sabe a ella.

El agua de mar, muy rica en magnesio, puede ser utilizada pero con precauciones o tratamientos que no estn incluidos en este documento. En nuestra practica para la produccin de la espirulina en las pozas, se requierieron la construccion de bioreactores para un escalamiento progresivo, ya que solo se conto inicialmente con una cantidad mnima de 3lts de la Arthrospira Plantensis.

4.1.1.1.3.- CONSTRUCCION DE LA CENTRIFUGA: Para la velocidad utilizamos el motor que le daba el movimiento al tambor de una lavadora. Este tambor fue forrado con tela para la filtracin de la espirulina con un orifio en la parte inferior para la salida del agua (no desperdiciada).

A esta centrifugadora tambien se le hizo su respectiva base.

A nivel industrial de utilizan filtros prensa (para recoger la espirulina en forma de torta), filtros por centrifgacion , etc

4.1.1.1.4.- CONSTRUCCION DEL AREA ELECTRICA: Para este paso se tuvo mucho cuidado, se puso una palanca a un nivel alto para evitar riesgos. Todas los motores son controlados por un tablero de control.

4.2.- CONDICIONES DE CULTIVO Cuando se quiere cultivar es necesario controlar las siguientes variables

4.2.1.- Temperatura: El crecimiento de la espirulina se da entre 25-40C, siendo el rango de mayor produccin entre 35-40C. En nuestro caso, la temperatura es de 37C, debido al efecto invernadero que ocasiona el plstico transparente que recubre las pozas.

4.2.2.- Radiacin: La mayor produccin se da entre 30-50 klux. Se disea de forma tal que minimiza las prdidas de calor para mantener la temperatura constante, con un recubrimiento en poliestireno expandido.

4.2.3.- Agitacin: En la superficie del medio de cultivo se forma una capa compacta y densa de espirulina debido al crecimiento competitivo de las mismas, que limita el paso de la luz al fondo del recipiente, actuando como aislante trmico y formando una estratificacin* en el perfil de vertical de temperatura del medio de cultivo. Hasta 10C de diferencia entre la superficie y el fondo del estanque. Esto limita el crecimiento del alga a la superficie del lquido, desaprovechndose la mayor parte del volumen del estanque. Como respuesta a este problema, se utiliza la agitacin del medio de cultivo para:

Permitir que mayor nmero de individuos puedan exponerse a la luz solar o artificial.

Permitir mayor intercambio gaseoso entre el medio ambiente y el medio de cultivo, favoreciendo la liberacin del oxgeno generado por la respiracin. Disminuir la estratificacin y formacin de cogulos o grumos, que impiden el paso de la radiacin hacia el interior del medio de cultivo.

Disminuir la precipitacin de sales del medio de cultivo, manteniendo una mezcla de sales ms homognea. Estos efectos benefician el crecimiento y productividad del cultivo

Sin embargo, el verdadero rol de la agitacin en el aumento de la produccin alga todava debe ser evaluado.

Se han observado efectos positivos provocados por una intensa agitacin sobre la productividad solamente en cultivos algales que se desarrollan en estanques agitados por ruedas de paletas. En biorreactores cerrados, con utilizacin de bombas, el efecto positivo puede ser enmascarado debido al dao mecnico que sufren las paredes de las clulas. En biorreactores de columnas de burbujeo, la provisin de aire sirve para el doble propsito de proveer turbulencia y remocin del oxgeno. As, es ms difcil evaluar si la influencia sobre la productividad se debe al grado de turbulencia alcanzado o proviene del bajo contenido de oxgeno disuelto en el medio.

Se recomienda una velocidad de 30 cm/s La agitacin se realiza durante 15 minutos por hora y en el perodo de luz (de 8:00 horas a 20:00 horas). La velocidad de giro del eje de transmisin es de 8 revoluciones por minuto, siendo el descenso del extremo de la barra de contacto.

*Estratificacin: Disposicin de las capas o estratos de un terreno, por el depsito de sedimentos o materiales en capas horizontales.

4.2.4.- Alcalinidad del medio: Los mejores resultados se obtienen con valores de pH 10-11.

4.2.5.- Salinidad: Entre 1500 - 5250 g /m2, en un estanque de 15 cm de profundidad.

Se puede obtenerse disolviendo los productos qumicos siguientes en el agua:

g/litro Bicarbonato de sodio Sal Nitrato potsico (o salitre) Sulfato dipotsico Fosfato monoamnico Sulfato de magnesio (MgSO4,7H2O) Solucin de hierro (10 g de Fe/l) Cal (si el agua es muy poco dura) 8 5 2 1 0,1 0,2 0,1 0,02

Si se utiliza sal no refinada, no se necesita el sulfato de magnesio. La solucin de hierro se prepara disolviendo 50 g de sulfato de hierro (FeSO4, 7H2O) y 50 ml de cido clorhdrico concentrado en un litro de agua. Se puede tambin utilizar una solucin saturada de hierro (clavos) en vinagre con un poco de jugo de limn o carambola. Este medio de cultivo se utiliza para iniciar nuevos cultivos o para completar el nivel de los estanques luego de vaciarlos parcialmente. La composicin arriba mencionada puede variar en amplias proporciones. As, en lugar de los 8 g de bicarbonato, se puede utilizar una mezcla de 5 g de carbonato de sodio y 1 g de bicarbonato, obteniendo un pH de 10,4. Ciertos iones pueden ser introducidos en cualquier concentracin, aunque limitada por la salinidad total que no debe sobrepasar de 25 g/l. Se trata de los

iones: sulfato, cloruro, nitrato y sodio.

Los iones fosfato, magnesio y calcio no pueden ser utilizados en concentraciones muy elevada sin provocar la formacin de depsitos minerales y desequilibrios en la frmula.

La concentracin en potasio puede ser aumentada a voluntad, salvo que ella no supere 5 veces la concentracin de sodio (se trata de concentraciones en peso). Esto permite utilizar la potasa extraida de la ceniza de madera, con la leja como reemplazante del bicarbonato/carbonato de sodio (es necesario dejar la leja expuesta al aire suficiente tiempo para que ella se carbonate hasta que su pH baje debajo de 10,8 antes de utilizarla como base del medio de cultivo).

En caso de necesidad (o situacin de sobrevivencia) es posible reemplazar nitrato, fosfato y sulfato con la orina de personas o animales en buena salud y que no consuman medicamentos como antibiticos. La dosis es de 4 ml/l de medio.

El nivel normal de medio de cultivo en un estanque es alrededor de 20 cm, aunque es posible cultivar con 10 cm hasta 40 cm.

4.3.- Descripcin del proceso productivo.

4.3.1.- INOCULACION Escoger una simiente (cepa) de spirulina bien espiralada, con pocos o no filamentos rectos (al menos 50 % espiralada. Una simiente concentrada se obtiene fcilmente a partir de un cultivo en buena salud, tomndola de la nata o rediluyendo con medio de cultivo una masa de spirulina fresca cosechada pero no exprimida. A la concentracin mxima de 3 g de spirulina (contada en seco) por litro, la simiente se puede guardar y transportar durante una semana sin que ella se degrade, sto a condicin de que el recipiente sea medio lleno y ventilado al menos dos veces por da. Si la ventilacin se hace con burbujas contnuas de aire, la concentracin puede llegar a 10 g/l.

La inoculacin consiste simplemente en mezclar la simiente con el medio de cultivo. Es recomendable mantener un nuevo cultivo inicialmente y en curso de crecimiento (dilucin progresiva con medio de cultivo nuevo) con una concentracin de spirulina alrededor de 0,3 g/l (bien verde).

Se puede esperar una tasa de crecimiento de 30 % por da si:

La temperatura es correcta, El medio de cultivo es a base de bicarbonato, Se aumenta la superficie del estanque manteniendo la profun didad del cultivo a bajo nivel (no superando 10 cm) y la concentracin de spirulina alrededor de 0,3 g/l.

*Cepa : es una muetra de algo que vas a sembrar en un medio de cultivo propisio para que cresca y de ahi descubrir algun microorganismo.

Cuando la superficie final del estanque es la deseada, aumentar el nivel y la concentracin del cultivo hasta el nivel deseado y la concentracin optima de 0,4 g/l antes de iniciar la cosecha.

4.3.2.- ESCALAMIENTO :

El primer escalamiento se realizo inicialmente con una cantidad de espirulina en 3 litros, las proporciones fueron de 3 a 1 (3 de agua y 1 de espirulina).

El segundo escalamiento se realizo ya con 20 litros de espirulina (del bioreactor) , este se hizo con proporciones de 3 a 1 igualmente, alcanzando una cantidad de 80 litros, la cual se fue reproduciendo para la posa 1.

4.3.3.- COSECHA. El mejor momento para la cosecha es temprano en la maana, por muchas razones: la baja temperatura hace el trabajo ms agradable, habr ms horas de sol para secar el producto, el porcentaje de protenas est a su mximo en la maana, la filtracin est mas rpida.

La cosecha comprende esencialmente dos etapas:

4.3.3.1.- Filtracin para obtener una biomasa a 10 % de materia seca (1 litro = 100 g de seco), La filtracin se efectua simplemente por gravedad a travs de una malla sinttica (polyester o polyamide) de aproximadamente 40 (0,04 mm) de apertura. El filtro puede ser un saco colocado encima del estanque para reciclar directamente lo filtrado. Antes de ser filtrado el cultivo debe pasar por un colador o un tamiz de malla 0,3 mm para eliminar los cuerpos extraos como insectos, trozos de vegetales, etc. Se puede hacer uso de un recipiente de bordes rectos, evitando mover el fondo donde se encuentran los depsitos. La filtracin se puede acelerar moviendo o raspando suavemente la malla. Cuando la mayor parte del agua es colada, la spirulina (la biomasa) se junta formando como una "bola" gracias al movimiento de la malla. A veces, la bola no puede formarse bien o se pega.

4.3.3.2.- Centrifugado Este paso tiene el fin obtener la espirulina pura y fresca lista para ser consumida o secada conteniendo alrededor de 20 a 25 % de materia seca segn las cepas y la salinidad del medio.

Un paso importante es reciclar el medio de cultivo residual para no desperdiciar nutrientes.

El exprimido final se hace simplemente a presin: la biomasa se pone como una torta de unos centmetros de espesor en una malla (la misma que sirve para la filtracin es buena, preferablemente doblada por una tela fuerte de algodon) entre dos placas ranuradas con pesos encima (piedras, ladrillos, bloquetas, etc.) o en una prensa o un lagar. Una presin de 0,2 kg/cm durante un cuarto de hora es suficiente para eliminar el agua intersticial.

Este sistema es ms adecuado que el lavado con agua para eliminar los restos del medio de cultivo sin destruir la spirulina, salvo que el exprimido sea muy difcil o imposible debido a una biomasa de calidad inferior (100 % de filamentos rectos por ejemplo). En este ultimo caso el lavado debe hacerse de preferencia con agua potable ligeramente salada y acidificada.

4.3.4.- SECADO. En la industria la spirulina es casi siempre secada por atomizacin en aire a muy alta temperatura, durante un tiempo muy corto; este proceso da un producto de extrema fineza y poca densidad aparente. Este proceso es imposible de ser utilizado en pequea escala. La liofilizacin es un proceso ideal para la calidad, incluso en pequea escala, pero de costo tremendo. El secado solar es frecuentemente utilizado por los pequeos productores, pero requiere de algunas precauciones. Si la exposicin al sol directo es utilizada, que es la ms rpida, debe ser de muy corta duracin sino la clorofila ser destruida en la superficie y el producto aparecer grisceo o azulado. Sea cual fuere la fuente de calor, la biomasa a secar debe ser puesta bajo la forma suficientemente delgada para secar antes de comenzar a fermentar. Dos frmulas para ello: la pasta puede ser esparcida en capa delgada sobre un film plstico o puesto como tallarines en cilindros de pequeo dimetro ("spaghetti" de 2 mm de dimetro) sobre un plato perforado. En la primera frmula el aire caliente pasa horizontalmente sobre el film mientras en la segunda ste sube verticalmente a travs del plato perforado. La extrusin es tericamente y prcticamente mejor si el dimetro de los tallarines frescos no sobrepasa 2 mm,

pero al mismo tiempo hace falta que los cilindros tengan bastante resistencia mecnica para guardar su forma durante el secado y no "derretirse"; sto es lo que impide el uso de este proceso de secado cuando la biomasa prensada es de calidad inferior y no es bastante firme. De todas formas un buen flujo de aire es el factor mas importante para evitar accidentes de secado. Durante el secado y despus la spirulina debe ser protegida del polvo y de los insectos y no debe ser tocada por la mano. La temperatura de secado debe ser limitada a 65 y el tiempo de secado a 6 C horas (aunque una vez secada la spirulina puede quedar ms tiempo al calor en el secador sin problema). Si se seca a baja temperatura, es preferible terminar por 15 minutos a 65 para conseguir un b uen grado de esterilizacin C y tambin bajar la humedad del producto a 5 % de agua. Si la fermentacin ha comenzado durante el secado, la podemos detectar por su olor durante y despus del secado. Las escamas o tallarines secos son generalmente convertidos en polvo por molido para aumentar su densidad aparente y facilitar su almacenamiento.

Diagrama de flujo:

INOCULACION

pH: 10 11 T: 25 45C

BIOREACTOR Escalamiento

Agitacion - Aireacion

ESTANQUES DE CULTIVO

Control de factores influyentes

Espirulina Humeda FILTRACION Con filtro prensa o Centrifuga Secado Solar

SECADO

PRODUCTO

Productos en la industria alimenticios

Productos en la industria farmaceutica

Capitulo V
5.- Costos de produccin

Costo de materia Prima:

Materia
Arthrospira Platenses Arthrospira Platemsis Bicarbonato de Sodio Sal industrial Nitrato de postasio Otros

Descripcin
Primera Adquisicin de la Spirulina 3 litros Donacion de la spirulina 10 litros Nutriente importante (fuente de carbono) Nutriente del medio 50 Kg Nutriente importante (fuente de nitrogeno) Insumos para nutrientes

Costo S/. 6.00 0.00 30.00 10.00 15.00 20.00

Costo para la construccin de Equipos:

Equipos

Descripcion

Material
Vidon de San Luis 20 litros

Costo 10.00 5.00 7.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 20.00 15.00

Tuberas y accesorios
Bioreactor Modulo para el crecimiento de la spirulina

Bonba de descarga Compresora prestamo Estructura del tanque Ladrillos

Pozas de cultivo

Modulo industrial a pequea escala para el crecimiento de spirulina

Palas de agitacin Motoreductor Motor Plastico 4 metros Plastico transparente

Costo Total Materia Prima Material y Equipos Total 81.00 57.00 138.00

Para la construccin de los mdulos se nos presto material y herramientas para la construccin de los equipos por parte de las empresas: Unicron y Ladrilleras San Fernando.

Se obtuvo una donacion de Arthrospira Platensis por parte de la planta industrial de Cerro Colorado al cual se fue de visita tecnica.

ANEXO

COMPARACION DE MUESTRAS DE SPIRULINA

Los anlisis principales necesarios para juzgar la calidad de una muestra de spirulina (contenido en protenas, hierro, cido gamalinolnico, y anlisis microbiolgico) necesitan realizarse en un laboratorio, pero algunas pruebas muy simples pueden ser realizadas por el mismo productor, comparando muestras entre ellas. Una muestra de buena calidad puede servir como referencia.

El examen del color, olor y gusto es revelador de diferencias importantes. El color verde debe tender ms hacia el azul que hacia el amarillo. Para hacer el examen del pH de una spirulina seca, mezclar 4 gramos de polvo en 100 ml de agua y medir el pH al cabo de dos minutos y de 24 horas (agitar de tiempo en tiempo): el pH inicial debe normalmente estar prximo de 8 para descender luego a 6 o menos, pero ciertos productos comerciales estn largamente fuera de estas cifras (generalmente pH superiores).

Luego de la prueba precedente podemos muy fcilmente obtener una medida comparativa del contenido en ficocianina (pigmento azul que constituye un cuarto de las protenas totales). Es suficiente poner una gota de la solucin sobre un papel filtro (filtro a caf por ejemplo) y dejar secar la mancha: la intensidad del color azul es una medida del contenido en pigmento. Si el pigmento no "sale" bien, es posible que sea debido a un secado de la spirulina a baja temperatura; recomenzar la prueba luego de haber calentado la muestra seca a 70 por un minuto. C

El contenido en carotenoides (el betacaroteno constituye entre 40 a 50 % de los carotenoides totales) puede ser evaluado mezclando una muestra de spirulina seca en polvo con dos veces su peso de acetona o alcohol de 90 dentro de un frasco cerrado y agitado. Al cabo de un cuarto de hora, tomar una gota de la solucin decantada y ponerla sobre un papel filtro para examinar el color de la mancha formada. La intensidad del color marrn-amarillo es

proporcional al contenido en carotenoides. Notamos que el color de la mancha no se guarda ms que unas horas y que en las muestras de spirulinas antiguas almacenadas sin precaucin el contenido resulta prcticamente nulo.

MEDIDA DE LA CONCENTRACION EN SPIRULINA AL DISCO DE SECCHI

El "disco de Secchi" es un instrumento constituido de una barra de 30 cm de largo, graduada en centmetros (o concentracion despues de calibrar), teniendo en su extremidad inferior un disco blanco. Permite una medida aproximada de la concentracin en spirulina.

Antes de medir, agitar para homogeneizar, luego dejar decantar los depsitos algunos minutos y anotar la profundidad en centmetros, all justo donde es imposible distinguir el disco.

MEDIDA DE LA SALINIDAD DEL MEDIO DE CULTIVO

Ella se hace con la ayuda de un densmetro para densidades superiores a 1 (urinmetro por ejemplo) y se aplica la correccin de temperatura siguiente:

D20 = DT + 0,000325 x (T - 20) donde: D20 = Densidad a 20 C DT = Densidad a T C ambas expresadas en g/ml o kg/l.

A partir de la densidad a 20 calculamos la sali nidad total (SAL, en g/l) del C, medio de cultivo por las frmulas: Si D > 1,0076: Sino: SAL = 1250 x (D20 - 1,0076) + 10 SAL = 1041 x (D20 - 0,998)

MEDIDA DE LA ALCALINIDAD DEL MEDIO DE CULTIVO

La prueba se hace por neutralizacin con cido clorhdrico normal (cido concentrado del comercio diludo diez veces); el punto final se medir a pH 4.

La alcalinidad (= molculas de base fuerte por litro) es la relacin entre el volumen de cido utilizado y el volumen de una muestra del medio.

MEDIDA DEL pH DEL MEDIO DE CULTIVO

El pHmetro debe ser ajustado una vez por semana. Soluciones muestras pueden ser compradas, o preparadas como sigue (pH aproximativos a 20 C): pH = 9,7 a 9,9 (segn el contenido del aire en CO2): disolver 3,3 g de carbonato de sodio + 3,3 g de bicarbonato de sodio en un litro de agua; mantener la solucin en contacto con la atmsfera y agregar regularmente el agua para compensar la evaporacin. pH = 7,2: disolver 5,8 g de fosfato diamnico + 11 g de bicarbonato de sodio en un litro de agua y mantenerlo en una botella cerrada. pH = 2,8: vinagre ordinario a 6 (densidad 1,01)

Correcin de temperatura sobre el pH: pH a 20 = pH a T + 0,00625 x (T - 20) C C

MEDIDA DE LA HUMEDAD EN LA SPIRULINA SECA

Colocar en un recipiente transparente y hermtico (como un Tupperware) aproximadamente el mismo volumen de muestra de spirulina y de aire junto con un termo-higrmetro que se pueda leer de afuera sin abrir. Calentar o resfriar para que la temperatura sea alrededor de 25 Esperar el equilibrio de C. temperatura y de humedad.

Hay una correspondencia entre el % de humedad relativa (HR) en el aire y el % de agua en la spirulina, asi :

25 % HR = 5 % agua 32 % HR = 6 43 % HR = 8 49 % HR = 9

Para que se conserve bien la spirulina seca, su % de agua debe estar menos que 9 % (es la norma).

BIBLIOGRAFIA: http://controlve.blogspot.com/2006/01/spirulina.html http://www.cipav.org.co/lrrd/lrrd1/1/gloria.htm http://www.spactualmagazine.com/articulo_item.php?numero=73 http://www.monografias.com/trabajos13/mercado/mercado.shtml http://www.andexs.org/linked/spirulina.htm http://www.visionmx.com/holistica/noticias/noticias_anteriores/(02050 1)%20el%20alimento%20mas%20completo%20del%20mundo.htm http://www.limnotec.com.br/equip/img/014.jpg http://www.dcmsistemes.com/medidas.html http://www.fceia.unr.edu.ar/secyt/rt/2004/rtid04_015.pdf http://www.sagpya.mecon.gov.ar/new/00/pesca/acuicultura/SPIRULINA.PDF http://images.google.es/imgres?imgurl=http://www.educa.madrid.org/ web/ies.rayuela.mostoles/deptos/dbiogeo/recursos/Apuntes/Apuntes BioBach2/imagenes/metabolismo/CicloCalvin.png&imgrefurl=http://w ww.educa.madrid.org/web/ies.rayuela.mostoles/deptos/dbiogeo/recur sos/Apuntes/ApuntesBioBach2/4FisioCelular/Metabolismo.htm&h=692&w=794&sz=100&hl=es&start= 5&um=1&usg=__JFDhZJsYyEBPLcMH_K6drr5EUuA=&tbnid=94vYG 9aztz1PHM:&tbnh=125&tbnw=143&prev=/images%3Fq%3Dciclo%2 Bde%2Bcalvin%26um%3D1%26hl%3Des%26sa%3DN http://es.wikipedia.org/wiki/Concreto http://arte-y-arquitectura.glosario.net/construccion-yarquitectura/revoque-7556.html