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ACIDOS NUCLEICOS

1. BASES NITROGENADAS

PIRIMIDINAS PURINAS 1. BASES NITROGENADAS

PROPIEDADES Insolubles en agua. Absorben mayor luz ultra violeta a los 260 nm. Presenta ligero carcter bsico. Presenta dos formas tautomricas (cambio de posecin de los dobles enlaces. 2. AZUCARES (PENTOSAS) PROPIEDADES Muy solubles en agua. Capaces de reaccionar con sustancias bsicas formando enlaces glucosdicos. Capaces de reaccionar con sustancias cidas formando enlace 3. ACIDO FOSFORICO PROPIEDADES A pH 7,4 est fuertemente cargados negativamente. Es un cido fuerte. NUCLEOSIDO (GLUCOSIDO) -diester.

Se forma el enlace glucosdico entre el C1 de la pentosa y el N1 de la pirimidina o el N9 de la purina, con la liberacin de una molcula de agua.

Nomenclatura A- ADENOSINA T- TIMIDINA U- URIDINA C- CITIDINA G- GUANOSINA NUCLEOTIDOS

Se forma mediante la unin entre el C5 de la pentosa con el OH del fosfato mediante un enlace ester con la liberacin de agua.

Nomenclatura A- ADENOSINA-5P / ACIDO ADINILICO / AMP T- TIMIDINA-5P / ACIDO TIMIDILICO / TMP U- URIDINA-5P / ACIDO URIDINICO / UMP C- CITIDINA-5P / ACIDO CITIDILICO / CMP G- GUANOSINA-5P / ACIDO GUANILICO/ GMP

NUCLEOTIDOS NUCLEOTIDOS

PROPIEDADES CLASES 1. ESTRUCTURALES Forma parte de cidos nucleicos y de algunos cofactores enzimticos. 2. ENERGETICOS Son los difosfatos y trifosfatos con la presencia de enlaces anhidro de alta energa que cumplen la funcin de reserva energtica Ej. ATP, GTP, CTP, UTP, ADP y otros. 3. DE REGULACION Presente en la regulacin CADENA NUCLEOTIDICA hormonal Ej. AMPc, GMPc. Es una mezcla de acuerdo a sus componentes. Son solubles en agua. Absorben mayor cantidad de luz ultra violeta a 260 nm. cidos cargados negativamente. NUCLEOTIDOS

1. OLIGONUCLEOTIDOS Constituidos por 2 a 10 nucletidos.

2. POLINUCLEOTIDOS Constituidos por mas CLASES DE ACIDOS NUCLEICOS 1. ACIDOS RIBONUCLEICOS (RNAs) Estn constituidos de las bases nitrogenadas A, G, C, U mas -D-RIBOSA, PM bajo 500 000, presentan 1 cadena de polinucletidos. de 10 nucletidos.

CLASES a) mRNA b) rRNA c) tRNA d) nRNA a) mrNA (mensajero) PM muy heterogneo o variable, constituye el 2% de todo el RNA.

Funcin Presenta para una cadena polipeptdica la informacin de la secuenciacin de AAs.

a) mRna (mensajero)

En organismos eucariotes el mRNA tiene la siguiente caracterstica en el extremo 5 presenta un casquete llamado 7-METILGUANOSINA y en el extremo 3 presenta un sinfn de adenosinas en forma de una cola. Esta estructura permite proteger al mRNA de su degradacin por las nucleasas. b) rRNA (ribosomal) Constituye el 81-83% de todo el Rna y existe 4 tipos: -RNA 18s -RNA 28s -RNA 5,7s -RNA 5s Funcin Forma parte de los ribosomas constituyendo la maquina para la sntesis proteica. c) tRNA (transferencia)

Constituye el 14% , PM= 25 000, estructura espacial o tridimencional en forma de trebol con la complementacin de bases. Tiene 4 brazos: -Brazo Aceptor (Adenosina), el cual se une al AA. -Brazo D (Dihidrouridina) -Brazo C (Seudouridina) -Anticodn. Funcin Transporta los AAs durante la sntesis proteica. d) nRNA (nuclear)

RNA nuclear pequea constituye 1% del resto del RNA cataliza la informacin de los otros RNA Ej. Procesamiento de los diferentes RNAs de una clula eucariota RNAasas, P, D y otros. 2. ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA)

Est constituido por las bases nitrogenadas A, G, C, T. + -D-Desoxirribosa, formado por dos cadenas de polinucletidos, PM= 109 millones millones y en bacterias 3 x 106 millones. Watson y Crick en la dcada 50 del siglo pasado dieron a conocer la estructura espacial cadena enrollada en hlice. 2. ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA)

Caractersticas: Estructura secundaria formado por 2 cadenas de nucleotidos. 2 tipos de muescas (menor y mayor). 1 vuelta equivale 34 y presenta 10 pares de bases. Cadenas complementarias y antiparalelas. 1 par de bases mide 3,4 y el grosor del DNA es 20 . 2. ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA) 2. ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA) Funcin se puede reproducir para formar nueva informacin en una clula nueva. Presenta informacin gentica para la sntesis de protenas.

2. ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA)

Propiedades Fisico-qumicas:

Son solubles en agua. Presenta carcter cido. Estn cargados negativamente. Absorben mayor luz ultravioleta a 260 nm de longitud de onda. Puede ser desnaturalizado. Puede ser re-naturalizado (complementacin de bases). Cuando se desnaturaliza presenta efecto hipercrmico es decir absorben mayor cantidad de luz. Universidad nacional jorge basadre ghohmann BIOQUIMICA proteinas Parte Ii

Mgr. SOLEDAD BORNAS ACOSTA ENLACE PEPTIDICO

Es un enlace covalente fuerte Estructura de Proteinas Las protenas estn estructuradas por 1 o ms cadenas polipeptdicas de aminocidos. La estructura proteica depende de la cantidad y calidad de aminocidos; tambin depende del tipo de enlaces. Los niveles estructurales pueden ser: 1. Estructura primaria 2. Estructura secundaria 3. Estructura terciaria 4. Estructura cuaternaria 1. ESTRUCTURA PRIMARIA

CARACTERISTICAS: a) Cadena lineal de carbonos y nitrgenos. 1. ESTRUCTURA PRIMARIA COOH terminal

b) Dos extremos: NH3+ terminal c) Estabilidad o Resonancia Magntica d) Isomera Geomtrica Trans

1. ESTRUCTURA PRIMARIA

e) Planos de rigidez intercalados 2. Estructura segundaria

A) ALFA HLICE La mayora de protenas lo presenta.

Caractersticas: a) Se encuentra estabilizada por enlaces de H que se colocan en diferentes niveles.

2. Estructura segundaria

b) Cada vuelta Completa mide 5.4 y cave exactamente 3.6 AAs. c) La cadena R se encuentra orientada hacia afuera. 2. Estructura segundaria d) Se encuentra interrumpido por la presencia de prolina y cidos glutmicos consecutivos 2. Estructura segundaria

B) LAMINA PLEGADA Llamada tambin Conformacin , Hoja plegada. Estructura poco comn Caractersticas:

a) Formada por varias cadenas polipeptdicas que puede ser paralela o antiparalela. 2. Estructura segundaria

b) Tiene mayor resistencia c) Son sometidas a fuertes tensiones Ejemplo: -Queratina Fibroina de La seda, 3. Estructura terciaria Cuando la estructura alfa-hlice se pliega dndonos la forma de una estructura globular. La interaccin de la estructura alfa-hlice nos favorece los pliegues, mediante enlaces: - Inicos salinos - Hidrgeno - Disulfuro - Hdrofbico - Amidas - Van Der Walls - Otros. 4. Estructua cuaternaria

Es la asociacin o unin de varias cadenaspolipectdicas con estructura terciaria, establecindose los mismos enlaces, pero tambin se ejerce atraccion de fuerzas de masas. Cada estructura Terciaria se denomina: - MONOMERO, - PROTOMERO - SUBUNIDAD

4. Estructua cuaternaria La estructura cuaternaria puede ser: Homogenea : Fosforilasa (2) Heterogenea: Hemoglobina (4)

Estructura especial INMUNOGLOBULINAS

COLAGENO

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

I. Depende de su alto PM y tamao A pesar de su alto PM son capaces de constituir soluciones coloidales viscosas. 1. DIALISIS Las protenas pueden ser separadas de los fluidos corporales utilizando una membrana Semipermeable. Ej. Membrana celular Retiene protenas, provoca presin osmtica y retiene agua.

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SEDIMENTACION Las protenas pueden ser separadas por Ultracentrifugacin Incrementando las fuerzas de

gravedad PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS II. Depende de la cantidad y calidad de AAs. 1. POLARIDAD De acuerdo a la polaridad se puede generar fuerzas de atraccin molecular, pero las protenas no lo hacen, porque dependen de la calidad y cantidad de AAs. Ej. Si una protena presenta mayor cantidad de AAs polares, las molculas protecas se van a rodear de una capa de agua llamada AGUA DE SOLVATACION. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS Las protenas son mas solubles cuando presentan mayor cantidad de AAs polares, por lo tanto tendrn mayor cantidad de agua de solvatacin PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SOLUBILIDAD: Segn la presencia de carga, favorece la solubilidad de una protena. Existen dos tipos de protenas: a) Protenas HIDROFILICAS Enzimas, protenas de los lquidos corporales.

b) Protenas HIDROFBICAS Estructurales como colgeno, fibrosas, elastina. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

3. PROPIEDAD ELECTRICA Las protenas presenta e su estructura varios grupos ACIDO y BASE a nivel de los AAs. Acido (COO- ) cido Glu y Asp Base (NH3+ ) Lis, Arg, His PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS A pH = 0 todos los grupos Acido-Base estn sin disociar y si elevamos el pH los grupos COOempiezan a disociarse y luego el NH3+ Estado Bsico: cuando la protena tiene o predomina carga positiva. Estado Neutro: Cuando la protena tiene o predomina carga positiva y negativa Estado Acido: Cuando la protena tiene o predomina carga negativa

Est. Bsico

Est. Neutro

Est. Acido

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS PUNTO ISOELECTRICO Es el punto que coincide con el pH del medio, en donde las molculas protecas adquieren carga neutra, cargas iguales o carga cero y la mayora de las protenas se vuelven insolubles. Esta propiedad nos ayuda a separar a las protenas por electroforesis PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS La SOLUBILIDAD puede ser afectada por:

a) FUERZA IONICA del medio depende de la cantidad de NaCl Puede ser: -Pequea: La solubilidad se incrementa Ej. Las globulinas en plasma es soluble en cambio en agua es insoluble. - Mayor: La solubilidad disminuye logrando precipitar a la protena. Ej. Tcnica de seco salado de la carnes. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS b)SOLVENTES ORGANICOS Las protenas pueden ser precipitadas por solventes orgnicos, eliminando el agua de solvatacin (por deshidratacin) . Ej. El etanol (T amb.) esnaturalizada + protena Protena deshidratada y

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS c) ANIONES Y CATIONES ESPECIALES Metales pesados + Protena (Pb++ , Hg++ o Zn++ ) (con carga Sal insoluble (protenato de Pb++ , Hg++ o Zn++ )

negativa) Tungstato (WO4-2 ) + Protena Ac. Tricloroacetico Sal insoluble

(con carga (Tungstato de positivo) protena Tricloroacetato de protena

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS d) DESNATURALIZACIN

Es la alteracin de la estructura espacial de una protena con la prdida de su funcin y solubilidad. Agentes Desnaturaliz. calor, radiacin electromagntica, pH extremos, detergentes, solventes organicos, metales pesados, qumicos y otros. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS REACCIONES QUIMICAS 1. HIDRLISIS puede darse por accin de cidos, bases fuertes y enzimas. Ej. HCl 6N (al vacio) + 110C horas o das NaOH 4N + 100C Enzimas + 37C hidrlisis por

Hidrlisis por 6 a 8 hs Hidrlisis en segundos

El inconveniente del HCl y NaOH es que pueden ocasionar destruccin de los AAs. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. IODINACION Cuando son tratados con hipoyodito de Sodio en medio alcalino experimentan iodinacin a nivel de los residuos de tirosina. Es util para istopos radioactivos de iodo. 3. REACCION DE BIURET (reaccin de color)

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

Biuret +

Cu++

Complejo Azul Violeta

(Sol. Alcalina) + Cu++ (Sol. Alcalina) Complejo tetracoordinado de Cobre (Azul violeta)

Reacciones de color Acido Ntrico concentrado (REACCIN XANTOPROTEICA) reacciona con AAS aromticos. Nitratos de Hg (REACCION DE MILLON) identifica a la Tirosina. Acido Glioxlico en medio alcalino (R. de HOPKINS-COLE) identifica al Triptfano. Hipoclorito de sodio (R. SAKAGUCHI) identifica a la Arginina. Acetato de plomo identifica AAs asufrados REACCION DE FOLIN reconoce AAs en presencia de un alcal. Universidad nacional jorge basadre ghohmann BIOQUIMICA proteinas Parte Ii Mgr. SOLEDAD BORNAS ACOSTA ENLACE PEPTIDICO Es un enlace covalente fuerte Estructura de Proteinas Las protenas estn estructuradas por 1 o ms cadenas polipeptdicas de aminocidos.

La estructura proteica depende de la cantidad y calidad de aminocidos; tambin depende del tipo de enlaces. Los niveles estructurales pueden ser: 1. Estructura primaria 2. Estructura secundaria 3. Estructura terciaria 4. Estructura cuaternaria 1. ESTRUCTURA PRIMARIA CARACTERISTICAS: a) Cadena lineal de carbonos y nitrgenos. 1. ESTRUCTURA PRIMARIA b) Dos extremos: NH3+ terminal c) Estabilidad o Resonancia Magntica d) Isomera Geomtrica Trans 1. ESTRUCTURA PRIMARIA e) Planos de rigidez intercalados 2. Estructura segundaria A) ALFA HLICE La mayora de protenas lo presenta. COOH terminal

Caractersticas: a) Se encuentra estabilizada por enlaces de H que se colocan en diferentes

niveles.

2. Estructura segundaria b) Cada vuelta Completa mide 5.4 y cave exactamente 3.6 AAs. c) La cadena R se encuentra orientada hacia afuera. 2. Estructura segundaria d) Se encuentra interrumpido por la presencia de prolina y cidos glutmicos consecutivos 2. Estructura segundaria B) LAMINA PLEGADA Llamada tambin Conformacin , Hoja plegada. Estructura poco comn Caractersticas: a) Formada por varias cadenas polipeptdicas que puede ser paralela o antiparalela. 2. Estructura segundaria b) Tiene mayor resistencia c) Son sometidas a fuertes tensiones Ejemplo: -Queratina

Fibroina de La seda, 3. Estructura terciaria Cuando la estructura alfa-hlice se pliega dndonos la forma de una estructura globular. La interaccin de la estructura alfa-hlice nos favorece los pliegues, mediante enlaces: - Inicos salinos - Hidrgeno - Disulfuro - Hdrofbico - Amidas - Van Der Walls - Otros. 4. Estructua cuaternaria Es la asociacin o unin de varias cadenaspolipectdicas con estructura terciaria, establecindose los mismos enlaces, pero tambin se ejerce atraccion de fuerzas de masas. Cada estructura Terciaria se denomina: - MONOMERO, - PROTOMERO - SUBUNIDAD 4. Estructua cuaternaria La estructura cuaternaria puede ser: Homogenea : Fosforilasa (2) Estructura especial Heterogenea: Hemoglobina (4)

COLAGENO

INMUNOGLOBULINAS

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS I. Depende de su alto PM y tamao A pesar de su alto PM son capaces de constituir soluciones coloidales viscosas. 1. DIALISIS Las protenas pueden ser separadas de los fluidos corporales utilizando una membrana Semipermeable. Ej. Membrana celular Retiene protenas, provoca presin osmtica y retiene agua.

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SEDIMENTACION Las protenas pueden ser separadas por Ultracentrifugacin Incrementando las fuerzas de gravedad PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS II. Depende de la cantidad y calidad de AAs.

1. POLARIDAD De acuerdo a la polaridad se puede generar fuerzas de atraccin molecular, pero las protenas no lo hacen, porque dependen de la calidad y cantidad de AAs. Ej. Si una protena presenta mayor cantidad de AAs polares, las molculas protecas se van a rodear de una capa de agua llamada AGUA DE SOLVATACION. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS Las protenas son mas solubles cuando presentan mayor cantidad de AAs polares, por lo tanto tendrn mayor cantidad de agua de solvatacin PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SOLUBILIDAD: Segn la presencia de carga, favorece la solubilidad de una protena. Existen dos tipos de protenas: a) Protenas HIDROFILICAS Enzimas, protenas de los lquidos corporales.

b) Protenas HIDROFBICAS Estructurales como colgeno, fibrosas, elastina. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

3. PROPIEDAD ELECTRICA Las protenas presenta e su estructura varios grupos ACIDO y BASE a nivel de los AAs. Acido (COO- ) cido Glu y Asp

Base (NH3+ ) Lis, Arg, His PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS A pH = 0 todos los grupos Acido-Base estn sin disociar y si elevamos el pH los grupos COOempiezan a disociarse y luego el NH3+ Estado Bsico: cuando la protena tiene o predomina carga positiva. Estado Neutro: Cuando la protena tiene o predomina carga positiva y negativa Estado Acido: Cuando la protena tiene o predomina carga negativa

Est. Bsico

Est. Neutro

Est. Acido

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS PUNTO ISOELECTRICO Es el punto que coincide con el pH del medio, en donde las molculas protecas adquieren carga neutra, cargas iguales o carga cero y la mayora de las protenas se vuelven insolubles. Esta propiedad nos ayuda a separar a las protenas por electroforesis PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS La SOLUBILIDAD puede ser afectada por: a) FUERZA IONICA del medio depende de la cantidad de NaCl Puede ser:

-Pequea: La solubilidad se incrementa Ej. Las globulinas en plasma es soluble en cambio en agua es insoluble. - Mayor: La solubilidad disminuye logrando precipitar a la protena. Ej. Tcnica de seco salado de la carnes. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS b)SOLVENTES ORGANICOS Las protenas pueden ser precipitadas por solventes orgnicos, eliminando el agua de solvatacin (por deshidratacin) . Ej. El etanol (T amb.) esnaturalizada + protena Protena deshidratada y

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS c) ANIONES Y CATIONES ESPECIALES Metales pesados + Protena (Pb++ , Hg++ o Zn++ ) (con carga Sal insoluble (protenato de Pb++ , Hg++ o Zn++ )

negativa) Tungstato (WO4-2 ) + Protena Ac. Tricloroacetico Sal insoluble

(con carga (Tungstato de positivo) protena Tricloroacetato de protena

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS d) DESNATURALIZACIN Es la alteracin de la estructura espacial de una protena con la prdida de su funcin y solubilidad. Agentes Desnaturaliz.

calor, radiacin electromagntica, pH extremos, detergentes, solventes organicos, metales pesados, qumicos y otros. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS REACCIONES QUIMICAS 1. HIDRLISIS puede darse por accin de cidos, bases fuertes y enzimas. Ej. HCl 6N (al vacio) + 110C horas o das NaOH 4N + 100C Enzimas + 37C hidrlisis por

Hidrlisis por 6 a 8 hs Hidrlisis en segundos

El inconveniente del HCl y NaOH es que pueden ocasionar destruccin de los AAs. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. IODINACION Cuando son tratados con hipoyodito de Sodio en medio alcalino experimentan iodinacin a nivel de los residuos de tirosina. Es util para istopos radioactivos de iodo. 3. REACCION DE BIURET (reaccin de color)

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS Biuret + Cu++ Complejo Azul Violeta

(Sol. Alcalina)

BIOQUIMICA proteinas Parte Ii

Universidad nacional jorge basadre ghohmann

Mgr. SOLEDAD BORNAS ACOSTA ENLACE PEPTIDICO Es un enlace covalente fuerte Estructura de Proteinas Las protenas estn estructuradas por 1 o ms cadenas polipeptdicas de aminocidos. La estructura proteica depende de la cantidad y calidad de aminocidos; tambin depende del tipo de enlaces. Los niveles estructurales pueden ser: 1. Estructura primaria 2. Estructura secundaria 3. Estructura terciaria 4. Estructura cuaternaria 1. ESTRUCTURA PRIMARIA CARACTERISTICAS: a) Cadena lineal de carbonos y nitrgenos. 1. ESTRUCTURA PRIMARIA b) Dos extremos: NH3+ terminal c) Estabilidad o Resonancia Magntica d) Isomera Geomtrica Trans 1. ESTRUCTURA PRIMARIA e) Planos de rigidez intercalados 2. Estructura segundaria COOH terminal

A) ALFA HLICE La mayora de protenas lo presenta.

Caractersticas: a) Se encuentra estabilizada por enlaces de H que se colocan en diferentes niveles.

2. Estructura segundaria b) Cada vuelta Completa mide 5.4 y cave exactamente 3.6 AAs. c) La cadena R se encuentra orientada hacia afuera. 2. Estructura segundaria d) Se encuentra interrumpido por la presencia de prolina y cidos glutmicos consecutivos 2. Estructura segundaria B) LAMINA PLEGADA Llamada tambin Conformacin , Hoja plegada. Estructura poco comn Caractersticas:

a) Formada por varias cadenas polipeptdicas que puede ser paralela o antiparalela. 2. Estructura segundaria b) Tiene mayor resistencia c) Son sometidas a fuertes tensiones Ejemplo: -Queratina Fibroina de La seda, 3. Estructura terciaria Cuando la estructura alfa-hlice se pliega dndonos la forma de una estructura globular. La interaccin de la estructura alfa-hlice nos favorece los pliegues, mediante enlaces: - Inicos salinos - Hidrgeno - Disulfuro - Hdrofbico - Amidas - Van Der Walls - Otros. 4. Estructua cuaternaria Es la asociacin o unin de varias cadenaspolipectdicas con estructura terciaria, establecindose los mismos enlaces, pero tambin se ejerce atraccion de fuerzas de masas. Cada estructura Terciaria se

denomina: - MONOMERO, - PROTOMERO - SUBUNIDAD 4. Estructua cuaternaria La estructura cuaternaria puede ser: Homogenea : Fosforilasa (2) Estructura especial COLAGENO INMUNOGLOBULINAS Heterogenea: Hemoglobina (4)

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS I. Depende de su alto PM y tamao A pesar de su alto PM son capaces de constituir soluciones coloidales viscosas. 1. DIALISIS Las protenas pueden ser separadas de los fluidos corporales utilizando una membrana Semipermeable. Ej. Membrana celular Retiene protenas, provoca presin osmtica y retiene agua.

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SEDIMENTACION

Las protenas pueden ser separadas por Ultracentrifugacin Incrementando las fuerzas de gravedad PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS II. Depende de la cantidad y calidad de AAs. 1. POLARIDAD De acuerdo a la polaridad se puede generar fuerzas de atraccin molecular, pero las protenas no lo hacen, porque dependen de la calidad y cantidad de AAs. Ej. Si una protena presenta mayor cantidad de AAs polares, las molculas protecas se van a rodear de una capa de agua llamada AGUA DE SOLVATACION. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS Las protenas son mas solubles cuando presentan mayor cantidad de AAs polares, por lo tanto tendrn mayor cantidad de agua de solvatacin PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS 2. SOLUBILIDAD: Segn la presencia de carga, favorece la solubilidad de una protena.

Existen dos tipos de protenas: a) Protenas HIDROFILICAS Enzimas, protenas de los lquidos corporales.

b) Protenas HIDROFBICAS Estructurales como colgeno, fibrosas, elastina. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

3. PROPIEDAD ELECTRICA Las protenas presenta e su estructura varios grupos ACIDO y BASE a nivel de los AAs. Acido (COO- ) cido Glu y Asp Base (NH3+ ) Lis, Arg, His PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS A pH = 0 todos los grupos Acido-Base estn sin disociar y si elevamos el pH los grupos COOempiezan a disociarse y luego el NH3+ Estado Bsico: cuando la protena tiene o predomina carga positiva. Estado Neutro: Cuando la protena tiene o predomina carga positiva y negativa Estado Acido: Cuando la protena tiene o predomina carga negativa

Est. Bsico

Est. Neutro

Est. Acido

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS PUNTO ISOELECTRICO Es el punto que coincide con el pH del medio, en donde las molculas protecas adquieren carga neutra, cargas iguales o carga cero y la mayora de las protenas se vuelven insolubles.

Esta propiedad nos ayuda a separar a las protenas por electroforesis PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS La SOLUBILIDAD puede ser afectada por: a) FUERZA IONICA del medio depende de la cantidad de NaCl Puede ser: -Pequea: La solubilidad se incrementa Ej. Las globulinas en plasma es soluble en cambio en agua es insoluble. - Mayor: La solubilidad disminuye logrando precipitar a la protena. Ej. Tcnica de seco salado de la carnes. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS b)SOLVENTES ORGANICOS Las protenas pueden ser precipitadas por solventes orgnicos, eliminando el agua de solvatacin (por deshidratacin) . Ej. El etanol (T amb.) esnaturalizada + protena Protena deshidratada y

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS c) ANIONES Y CATIONES ESPECIALES Metales pesados + Protena (Pb++ , Hg++ o Zn++ ) (con carga Sal insoluble (protenato de Pb++ , Hg++ o Zn++ )

negativa) Tungstato (WO4-2 ) + Protena Sal insoluble

Ac. Tricloroacetico

(con carga (Tungstato de positivo) protena Tricloroacetato de protena

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS d) DESNATURALIZACIN Es la alteracin de la estructura espacial de una protena con la prdida de su funcin y solubilidad. Agentes Desnaturaliz. calor, radiacin electromagntica, pH extremos, detergentes, solventes organicos, metales pesados, qumicos y otros. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS REACCIONES QUIMICAS 1. HIDRLISIS puede darse por accin de cidos, bases fuertes y enzimas. Ej. HCl 6N (al vacio) + 110C horas o das NaOH 4N + 100C Enzimas + 37C hidrlisis por

Hidrlisis por 6 a 8 hs Hidrlisis en segundos

El inconveniente del HCl y NaOH es que pueden ocasionar destruccin de los AAs. PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS

2. IODINACION Cuando son tratados con hipoyodito de Sodio en medio alcalino experimentan iodinacin a nivel de los residuos de tirosina. Es util para istopos radioactivos de iodo. 3. REACCION DE BIURET (reaccin de color)

PROPIEDADES FISICO-QUIMICA DE PROTEINAS Biuret + Cu++ Complejo Azul Violeta

(Sol. Alcalina) + Cu++ (Sol. Alcalina) Complejo tetracoordinado de Cobre (Azul violeta)

Reacciones de color Acido Ntrico concentrado (REACCIN XANTOPROTEICA) reacciona con AAS aromticos. Nitratos de Hg (REACCION DE MILLON) identifica a la Tirosina. Acido Glioxlico en medio alcalino (R. de HOPKINS-COLE) identifica al Triptfano. Hipoclorito de sodio (R. SAKAGUCHI) identifica a la Arginina. Acetato de plomo identifica AAs asufrados REACCION DE FOLIN reconoce AAs en presencia de un alcal. + Cu++ (Sol. Alcalina) Complejo tetracoordinado de Cobre (Azul violeta)

Reacciones de color Acido Ntrico concentrado (REACCIN XANTOPROTEICA) reacciona con AAS aromticos. Nitratos de Hg (REACCION DE MILLON) identifica a la Tirosina. Acido Glioxlico en medio alcalino (R. de HOPKINS-COLE) identifica al Triptfano. Hipoclorito de sodio (R. SAKAGUCHI) identifica a la Arginina. Acetato de plomo identifica AAs asufrados REACCION DE FOLIN reconoce AAs en presencia de un alcal.