1.

DESCRIPCION DELTRABAJO DE INVESTIGACION

Analizar este artculo cientfico es de gran importancia pues me permite conocer avances de la ciencia y como estos nos ayudan en nuestra vida diaria. Nos permite despertar nuestro inters por la lectura y a la vez aplicar nuestros conocimientos aprendidos para desarrollar nuestro razonamiento crtico, extraer el mensaje que nos quieren transmitir y emitir nuestras propias opiniones. Es muy interesante e importante dedicar una parte de nuestro tiempo a informarnos como el mundo va avanzando y con la lectura de estos temas fortaleceremos o descubriremos nuestras habilidades e intereses, ayudndonos a enriquecer nuestro conocimientos y lxico para desenvolvernos de una manera correcta en nuestra sociedad. En lo que se refiere al empleo de la biotecnologa en la ciencia forense, me ayudo a darme cuenta que la ciencia es un camino infinito de conocimientos, que no todo esta dicho y aunque pasen los aos, siempre hay algo nuevo que descubrir. La perseverancia y el inters nos pueden llevar a grandes avances que servirn para ponerlos a disposicin en nuestros problemas y as transformarnos en un mundo justo y mejor.

2. JUSTIFICACION
Es muy conocido por todos que el DNA es el que contiene toda nuestra informacin gentica, que es nica en cada ser humano. El DNA es utilizado para comprobar la paternidad, relaciones de parentesco y en muchos casos para identificar a delincuentes o personas relacionadas con crmenes. Muchos procesos son empleados para estos casos y se realizan en grandes laboratorios por personas especializadas, por lo que muchas personas desconocemos los mtodos a profundidad. Conocer mas detalladamente como funciona el DNA, cuales son los procesos que se siguen para realizar estos estudios y comprobaciones, adems profundizar sobre los avances de la ciencia que se han convertido en una herramienta indispensable para nuestro diario vivir.

3. DESARROLLO DEL ANLISIS

COMO SE EMPLEA LA BIOTECNOLOGIA EN LA CIENCIA FORENSE?
INTRODUCCIN:
Las aplicaciones de la biotecnologa son extensas y depende del objetivo de quienes las empleen, muchas son utilizadas en la agricultura y medicina. La biotecnologa del DNA ha sido aplicada por cientficos forenses para identificar a vctimas y criminales; muchas empresas lo utilizan para reconocer genes especficos que sern aplicados a bacterias, ganados o cultivos, as como para detectar alelos defectuosos y buscar formas de que funciones normalmente. La manipulacin del DNA se ha tomado en cuenta para la aplicacin en el anlisis forense, como es el caso de Earl Ruffin. En 2002 los investigadores obtuvieron muestras del semen de Earl Ruffin, con el que realizaron anlisis para determinar si las muestras obtenidas de victima violada en 1981 provenan de Earl Ruffin. El problema en este caso era que probablemente los nucletidos de DNA ya no estuviesen en buen estado aunque el DNA haya sido intacto, pues la muestra obtenida tena 20 aos de antigedad. Para determinar si las muestras de DNA coincidan los cientficos aplicaron dos tcnicas imprescindibles de los laboratorios que analizan DNA. Primero amplificaron una secuencia de DNA y despus comprobaron si el DNA proveniente coincida con las muestras obtenidas.

MTODOS Y MATERIALES: La reaccin en cadena de la Polimerasa amplifica una secuencia en cadena de DNA.
Esta tcnica fue desarrollada por Kary B. Mullis en 1986, por lo que recibi el Premio Nobel de Qumica en 1993. La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) produce cantidades ilimitadas de DNA, pues la polimerasa es una enzima capaz de transcribir o replicar cidos nucleicos ya sea completamente o por segmentos. Una de las cuestiones fundamentales para la PCR es que la DNA polimerasa no sabe donde empezar a copiar una cadena de DNA. Cuando se desarrolla una molcula de DNA se sintetiza un segmento de RNA iniciador en cadena, el cual es reconocido por la polimerasa como la regin de iniciacin para comenzar a duplicar las cadenas de DNA. La PCR debe conocer la secuencia de nucletidos de DNA que se va amplificar, por lo que se sintetiza dos conjuntos de fragmentos de DNA que dir a la DNA polimerasa donde empezar a copiar.

La PCR incluye los siguientes pasos: 1. Se calienta un tubo de ensayo de 90 a 95 C; las temperaturas altas rompen puentes de hidrogeno, separando cadenas individuales de DNA. 2. Se reduce la temperatura a 50C para permitir que el RNA primer forme pares de bases complementarias con las cadenas originales de DNA. 3. La temperatura se eleva de 70 a 72 C para que la DNA polimerasa utilice los nucletidos libres y haga copias del segmento de DNA. 4.- Este ciclo se repite tantas veces como sea necesario. Usando mezclas apropiadas de RNA primer, nucletidos libres y DNA polimerasa, una mquina de PCR inicia ciclos automticos de enfriamiento y calentamiento, dura solo unos minutos y produce miles de millones de copias de un gen o DNA. (FIGURA 1)

La eleccin de iniciadores determina cuales secuencias de DNA se amplifican.

Tras aos de investigacin se encontr que los pequeos segmentos repetidos de DNA, llamados repeticiones cortas en tndem (STR) pueden emplearse para identificar a la gente con una exactitud asombrosa. Cada STR es un gen corto, repetido y en serie. Las personas pueden tener alelos de STR diferentes al igual que otros genes. En 1999 las autoridades britnicas y estadounidenses acordaron el uso de un conjunto de 10 a 13 STR, cada uno de 4 nucletidos de largo. Una coincidencia perfecta de 10 STR en el DNA de un sospechoso y el encontrado en una escena del crimen da la posibilidad que provenga de la misma persona. Las muestras de DNA aunque sean viejas se encuentran intactas en su mayor parte gracias a las STR.

La electroforesis en gel separa los segmentos del DNA

Con la utilizacin de aparatos avanzados se determina el nmero de veces que la STR se repite, primero se separa el DNA por tamao y luego se etiquetan sus segmentos especficos correspondientes. Mediante la electroforesis por gel se separa el DNA, vertiendo fragmentos de DNA en una lamina de agarosa, que posee una red de fibras con agujeros de varios tamaos. El gel se coloca dentro de una cmara con electrodos positivos y negativos, cuando fluye por aqu la corriente los fragmentos de DNA con carga negativa (grupo fosfato) se desplazan hacia el electrodo positivo. Los fragmentos ms pequeos se desplazan con mayor rapidez por los agujeros del gel a diferencia de los ms grandes. As se separan segn su tamao, formando bandas caractersticas sobre el gel. (FIGURA 2)

Las sondas de DNA se emplean para etiquetar secuencias de nucletidos especficas

Las bandas de DNA son invisibles. Hay varias opciones para teir el DNA. Una forma es que los fragmentos del DNA sinttico, llamados sondas de DNA, formen pares de bases con fragmentos especficos de DNA de la muestra. Las sondas son fragmentos cortos de DNA de una sola cadena de DNA que son complementarios a la secuencia de nucletidos de una STR. Las sondas de DNA se etiquetan por radiactividad o tindolas. Por lo tanto, una sonda de DNA dada etiquetar ciertas secuencias de DNA. Despus se transfiere los segmentos de DNA de una cadena hacia fuera del gel y a un trozo de papel hecho de nailon, el papel se mete en una solucin que contiene una sonda de DNA especfica, que se aparea con las bases y, por lo tanto, se enlaza slo a una STR especfica, hacindola visible. En las aplicaciones forenses modernas, las STR se etiquetan directamente con molculas de colorante durante la reaccin de la PCR, por lo que son visibles inmediatamente y no es necesario teirlas con sondas.

Cada individuo tiene su propio perfil de DNA

Las muestras de DNA procesadas en geles de STR producen un patrn llamado perfil de DNA, que se codifica al registrar el nmero de repeticiones para todos los genes de STR. La cantidad y las posiciones de las bandas en el gel se determinan por la cantidad de repeticiones de cada STR. Debido a que una STR forma parte de un gen, cada persona tiene dos copias de cada STR: una en cada cromosoma homlogo de cada par. En muchas entidades de Estados Unidos cualquier convicto por ciertos delitos debe dar una muestra de sangre para que los tcnicos determinen el perfil de DNA del delincuente, el cual ser archivado en la base de datos (CODIS) del FBI. As se puede determinar si los DNA de alguna persona coincide con los de la escena del crimen. Aunque pasen aos, gracias a estos perfiles almacenados se puede resolver un caso cerrado.

CONCLUSIONES
Gracias a estos avances se puede determinar si una persona es culpable o inocente, asi fue el caso de Earl Ruffin donde su inocencia fue comprobada al comparar las muestras de semen dejado en la vctima de la violacin con su DNA. A principios de 1989 el Proyecto de Inocencia y Ruffin presentaron peticiones para reabrir el caso y por la evidencia conservada se demostr que l no era el violador. Tras 21 aos de haber estado en prisin, finalmente el12 de febrero de Earl Ruffin fue puesto en libertad. La mujer violada solicit a los legisladores de Virginia una compensacin monetaria para Ruffin por todo el tiempo que pas injustamente en prisin. Esta investigacin fue realizada por la cientfica forense, Mary Jane Burton quien trabajo en el caso de Ruffin. Este trabajo gran ayuda para la polica, el FBI y muchos gobiernos estatales emplearan la tecnologa del DNA como una herramienta de investigacin, formando as grandes bases de datos que han aportado a la resolucin de casos sin que se condene injustamente a una persona y haciendo justicia sobre todas las cosas.

ANEXOS.
FIGURA 1. REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA FIGURA 2. ELECTROFORESIS EN GEL

BIBLIOGRAFIA:
Audesirk, T., Audesirk, G. & Byers, B., (2008). Biologa: La vida en la Tierra (8a.ed), (pp 254-258). Mxico: Pearson Educacin.

REALIZADO POR: Emilys Mosquera