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Ao 4, Nm. 54, 2 de diciembre de 2009

Alternativas para la produccin de biocombustibles en Mxico


Alma Leticia Martnez A.1 Erik Ocaranza Snchez 2 V. Eric Lpez y Lpez 3

estos combustibles no es recomendable. Asimismo, la necesidad de reduccin de los niveles de contaminacin ha llevado a intentos regulatorios como el protocolo de Kyoto donde varios pases asumieron el compromiso de reducir las emisiones de CO2. Por lo tanto, de es necesaria de la diversificacin fuentes energa

renovables, teniendo particular inters en biocombustibles lquidos ya que otras

tecnologas como el hidrgeno y las pilas de combustible son contempladas a largo plazo. Los biocombustibles lquidos abarcan al subgrupo caracterizado por la posibilidad

Introduccin

de su aplicacin a los actuales motores de combustin interna. Estos biocombustibles

En

proceden de materias primas vegetales a la actualidad, del los petrleo carburantes abarcan travs de transformaciones biolgicas y fsico-qumicas. Existen dos tipos cuyas tecnologas se encuentran actualmente

procedentes

aproximadamente el

98% de la demanda

global de energa en el sector del transporte. Tomando en cuenta las limitadas reservas de crudo a nivel mundial, la total dependencia de
Doctora en Ciencias. Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados. Unidad Irapuato. Profesora-Investigadora. Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada. Nivel I del SNI. E-mail: alayala@ipn.mx. 2 Doctorante en Ingeniera, Facultad de Qumica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Profesor-Investigador, Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada. E-mail: erikocaranza@hotmail.com 3 Doctor en Ciencias, Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados del IPN., ProfesorInvestigador, Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada, Instituto Politcnico Nacional. E-mail: vloezyl@ipn.mx
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desarrolladas: el biodiesel, obtenido a partir de la transesterificacin de aceites vegetales y grasas animales con un alcohol ligero, como metanol o etanol; cuyo uso es directamente para la sustitucin o mezcla con el diesel derivado de petrleo. Y el bioetanol, obtenido fundamentalmente de semillas ricas en azcares mediante fermentacin. O en

cultivos lignocelulsicos donde la energa est almacenada en forma de carbohidratos ms complejos y requiere de un proceso de hidrolizado antes de su fermentacin a alcohol.

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El bioetanol tiene un gran potencial como energtico, su uso principal es como aditivo a gasolinas en sustitucin del etiltercbutil ter (ETBE). Actualmente, el etanol representa ms del 90 % del total de la produccin de biocombustibles, mientras que el biodiesel cuenta el resto.

bioetanol (Rutz, & Janssen, 2007). Sin embargo la produccin de biodiesel as como el desarrollo de tecnologa para su produccin constituyen una buena alternativa para la nivelacin de la economa ante la inminente escasez de hidrocarburos (Islas, Manzini, & Masera, 2007).

1.1. Fuentes de biodiesel

1. Produccin biodiesel

de
Las materias primas para la fabricacin de biodiesel deben contar con alto contenido de

El biodiesel esta qumicamente constituido por steres de alquilo, comnmente metilo y etilo, con cidos grasos de cadena larga. Estos steres pueden ser producidos a partir de distintas fuentes de aceite al fraccionar los triglicridos liberando oxigenadas, contenidos cadenas, otorgan en el mismo, al estar una

triglicridos como son los aceites vegetales, grasas animales y aceites usados que son comnmente tratamiento. Los aceites vegetales son obtenidos en su gran mayora a partir de semillas de platas oleaginosas empleadas convencionalmente para la produccin de aceite comestible como son el aceite de girasol, colza, soja, coco y palma. Sin embargo es necesario evitar el desplazamiento de cultivos destinados al consumo humano por lo que existen cultivos que presentan crecimiento en suelos gastados y condiciones climticas adversas por lo que generan alternativas de produccin en tierras no frtiles. Entre estos cultivos destacan la Jatropha curcas y la higuerilla as como semillas modificadas genticamente. Para el uso del biodiesel como combustible en motores diesel, se debe tomar desechados sin ningn

estas le

que al

motor

combustin mucho ms limpia. La mezcla de steres de alquilo presenta las mismas propiedades del diesel empleado como combustible para medios de transporte y puede ser mezclado en cualquier proporcin con el diesel obtenido de la refinacin del petrleo sin requerir

modificaciones en los motores existentes. En Mxico el uso de diesel como combustible de transporte no es tan comn por lo que se optara por los llamados combustibles de 2 generacin como el

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en cuenta ciertas caractersticas del mismo, Los principales factores para evaluar la calidad del biodiesel son: la operabilidad del diesel a bajas temperaturas, caracterizada por parmetros como el punto de turbidez (CP), Punto de fluidez (PP) y el punto de obstruccin del filtro en fro (CFPP). Estas caractersticas estn directamente

propiedades descritas. La norma estndar europea fija un nivel mximo de ndice de yodo de 120 (Tyson & McCormick, 2006)

1.2. Alternativas tecnolgicas para produccin de biodiesel


El

la

relacionadas por el tipo de aceite usado en la produccin del biodiesel. En regiones fras se buscan aceites con cidos grasos insaturados debido a que presentan puntos de fusin menores a los compuestos grasos saturados por lo tanto en una mezcla cristalizan a temperaturas menores. Los compuestos

Biodiesel se produce a partir de un

proceso de transesterificacin en el cual el aceite vegetal reacciona con un alcohol en presencia de un catalizador, mientras que como produce producto secundario Las son tambin se de en

glicerina.

reacciones

transesterificacin

caractersticas

saturados estn presentes principalmente en grasas animales. Otras propiedades tambin dependen del grado de saturacin del aceite son la viscosidad y el nmero de cetano, el cual es un indicador de la calidad de ignicin del combustible y es equivalente al nmero de octano en la gasolina. Por lo general el nmero de cetano aumenta con la longitud de cadena de carbono en loa cidos grasos y disminuye al incrementarse el grado de saturacin de los compuestos del aceite empleado. El indicador normalmente empleado para establecer el grado de saturacin en el ndice de yodo, el cual es relacionable con las

lpidos y consiste en el intercambio de grupos acilo entre las grasas o aceites con alcoholes (alcoholisis) para producir alquil-steres. El proceso convencional de

transesterificacin (Fukuda, Kondo & Noda, 2001), consiste en la mezcla del aceite (triglicridos) con metanol o etanol en presencia de un catalizador bsico como hidrxido de sodio (NaOH) o potasio (KOH) a temperaturas inferiores a 60C, llevndose a cabo la reaccin mostrada en la Figura 1.

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Figura 1. Reacciones de transesterificacin de triglicridos

El glicerol co-generado en el proceso, es separado posteriormente aprovechando su densidad superior desplazando el equilibrio qumico y alcanzando conversiones del 98%. Este alto rendimiento sumado a su reducido tiempo de reaccin hace de este proceso el ms popular y econmico ya que no es corrosivo y lleva a cabo la produccin de biodiesel sin pasos intermedios (Haas,

el aceite, estos jabones dificultan el proceso de purificacin ya que forman emulsiones estables con el biodiesel. Debido a esto surgen diversas propuestas para la

optimizacin del proceso convencional. En primer lugar se propone el desarrollo de procesos de secado para previos al de los pre-

transesterificacin resultados. Sin

optimizar estos

embargo,

Easterling, French, Hernndez & Licha, 2006). La mediante problemtica catlisis de este proceso es

tratamientos requieren la eliminacin del agua en el alcohol usado a porcentajes menores al 2% en peso. Este requerimiento hace eficiente el uso de metanol sobre el etanol en el proceso, pues la purificacin del segundo por arriba de su punto azeotrpico con el agua (96%) requiere de costosos procesos de deshidratacin. La alcoholisis

homognea

principalmente la contaminacin del glicerol con el catalizador bsico, disminuyendo su valor comercial y la formacin de jabones cuando existe presencia de agua y pH bajo en

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puede darse tambin empleando catalizadores cidos como el HCL, o en mezclas de ellos disminuyendo la formacin de jabones en el proceso. Las convencional alternativas involucran el al proceso empleo de

industrialmente debido a limitaciones como el agotamiento de su actividad enzimtica y el alto costo de las enzimas. Por lo actualmente se investiga a nivel mundial las opciones para la aplicacin de este proceso en un futuro cercano. La metanlisis enzimtica de aceites, permite que el sistema se simplifique, en especial cuando se utilizan lipasas (Shimada, Watanabe, Sugihara & Tominaga, 2002). Estas tienen la ventaja de utilizar como sustrato para la produccin de biodiesel, tanto los cidos grasos como los tri, di, y monoglicridos, los que abundan en la materia prima ms econmica que son los aceites usados. Adems, en el proceso enzimtico, el glicerol se obtiene libre de impurezas lo que facilita su comercializacin. La reaccin enzimtica presenta sin embargo dificultades por la baja solubilidad del metanol y la consiguiente formacin de una segunda fase que inactiva la enzima

catalizadores heterogneos bsicos y cidobsicos (Arzamendi, Campo, Arguinarena, Snchez, Montes & Gandia, 2007). En esta propuesta alternativa la eficiencia del proceso se ve mermada debido a las resistencias difusionales del biodiesel y principalmente del glicerol en el lecho cataltico, lo cual repercute en una disminucin en la velocidad aparente de reaccin y en una desactivacin parcial por acumulacin del glicerol en la superficie cataltica. Sin embargo, esta

alternativa suprime las etapas de separacin del catalizador eliminando la contaminacin del glicerol mejorando su comercializacin como producto secundario y simplificando la purificacin Matsubara del & biodiesel (Kawashima, La baja

Honda,

2009).

(Shimada, Watanabe, & Samukawa, 1999). Adems, al utilizar enzimas inmovilizadas, el glicerol formado recubre el biocatalizador provocando problemas difusivos. Para evitar

formacin de jabones con la formulacin ademada del catalizador es otra de las ventajas de este proceso. Una catalizadores biocatalizadores alternativa bsicos al es empleo el los uso de de

parte de estos problemas y mejorar el proceso enzimtico se han informado en trabajos en donde se usaron solventes orgnicos en especial hexano o iso-octano. Siendo el terbutanol (alcohol terciario) el mejor solvente, al no es sustrato para la enzima permiti

enzimticos

cuales

generan mayor pureza disminuyendo los requerimientos de purificacin del biodiesel, Este tecnologa an se encuentra en fase de investigacin y o se ha empleado

solubilizar totalmente el metanol y el glicerol

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producido, posibilitando el trabajo con mayores cantidades iniciales de reactivos y evitando el recubrimiento del catalizador con el glicerol. El uso de las lipasas (carboxil ster hidrolasas) enzimas que catalizan la

es la generacin de alcanos a partir de aceites vegetales por medio de de un proceso El

convencional

hidrotratamiento.

hidrotratamiento es usado en la industria de refinacin de hidrocarburos para diferentes fines como fraccionamiento (hydrocracking) y remocin de contaminantes como azufre, nitrgeno y metales pesados de los diferentes cortes de crudo. Este mismo proceso ha sido aplicado a aceites vegetales para producir cadenas parafinitas de 15 a 18 carbonos. Las reacciones que se llevan a cabo en este proceso para transformar triglicridos a alcanos son la hidrogenacin de los

hidrlisis de cidos grasos de cadena corta, es un tema de inters para su aplicacin en la produccin de biodiesel. Las lipasas, son enzimas verstiles que catalizan la hidrlisis de uniones de steres,

principalmente en lpidos neutros como los triglicridos. Especficamente en las

posiciones primarias o secundarias la cadenas de cidos grasos, algunos grupos microbianos que producen lipasas son: Candida

triglicridos provocando su rompimiento, seguida de reacciones de descarboxilacin, la descarbonilacin y la hidrodesoxigenacin de los cidos grasos. Los alcanos producidos en este proceso cuentan con alto nmero de cetano, excelentes propiedades de flujo en fro. y posee una estabilidad qumica muy superior a la mezcla de esteres de alquilo (Huber, OConnor & Corma, 2007). El biodiesel generado es mezclado con petrodiesel en diversos porcentajes. Las mezclas que van desde un 5% (B5) y 20% (B20) de biodiesel, hasta su uso directo en los motores (B100), ya son comercializadas.

antarctica, Geotrichum candidum, Vernonia anthelmintica, son pocas las lipasas que no muestran una actividad con referencia a la posicin de su corte en los cidos grasos (Lu, Nie, Wang & Tan, 2007). Las lipasas de plantas, tiene actividad hidrolizante sobre los triacilglicridos en ndices mucho menores comparadas con las lipasas microbianas y animales. El uso de ter-butanol como solvente presenta importantes ventajas en la produccin enzimtica de biodiesel, ya que, adems de permitir una alta velocidad de conversin, la cantidad de agua que se solubiliza en el sistema no llega a influir en el proceso. Una alternativa ms reciente al

biodiesel producido por transesterificacin

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2. Produccin bioetanol

de
de

El contenido de azcares en estos materiales se encuentra combinados en forma sacarosa, almidn, hemicelulosa y

El alcohol etlico o etanol es obtenido a partir de la fermentacin de los azucares que se encuentran Actualmente, en el productos bioetanol vegetales. es el

celulosa. Los cuales pueden ser convertidos a sus unidades monomricas, fructuosa y glucosa; mediante la conversin de estos sustratos a azcares fermentables en un proceso conocido como sacarificacin. Brasil es el primer productor de bioetanol el cual produce a partir de caa de azcar principalmente y lo introdujo como aditivo a la gasolina hasta en un 25% (Rutz & Janssen, 2007). A nivel mundial el bioetanol como combustible es usado en mezclas con gasolina en concentraciones del 5 o el 10%, E5 y E10 respectivamente, que no requieren modificaciones en los motores actuales (Islas, Manzini & Masera, 2007). Los cultivos de mayor uso en la produccin de bioetanol son la caa de azcar

biocombustible con mayor produccin a nivel mundial, con una produccin mayor de 40.000 millones de litros al ao. Las aplicaciones del bioetanol como combustible son sumamente diversas y van desde su uso como carburante directo en motores OTTO, como aditivo de gasolina en sustitucin al ETBE o como materia prima en el proceso de reformacin hmeda para la produccin de Hidrgeno usado en pilas de combustible.

2.1.

Fuentes de bioetanol

(Brasil) y remolacha que producen melazas, cereales como maz (EUA), sorgo, trigo,

Para su obtencin pueden emplearse una gran cantidad de materias primas como cereales, remolacha y caa de azcar. Otra alternativa es el uso de materiales lignocelulsicos y residuos de procesos agrcolas, forestales o industriales, con alto contenido en biomasa. Estos residuos tienen la ventaja de su bajo costo, ya que son la parte no necesaria de otros procesos agroindustriales (Kumar, ES Ch., Rudravaram, Lakshimi, Venkateswar, & Ravindra, 2007).

cebada los cuales generan almidones que son sacarificados. Finalmente los materiales

lignocelulsicos que abarcan maderas y diversos residuos de la agroindustria

(alimentos, papelera, maderera, etc) ricos en celulosa, la cual produce azcares mediante reacciones de hidrlisis.

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2.2. Alternativas tecnolgicas para produccin de bioetanol

en condiciones secas o hmedas, el proceso

la

trmico o escaldado y el proceso de explosin de vapor. Todos ellos facilitan la

El proceso para la produccin de bioetanol presenta diversas alternativas tecnolgicas. Sin embargo, es posible estudiarlo analizando el proceso desde 3 etapas principales las cuales pueden ser estudiadas de manera independiente. Las etapas son: 1. Pretratamiento de la materia prima. 2. Hidrlisis complejos de para los la compuestos formacin de

transformacin al exponer los materiales a la accin de los diferentes reactivos para la sacarificacin en el caso de cereales y materiales lignocelulsicos o directamente para la fermentacin en melazas y fuentes de azcares simples como la caa de azcar y la remolacha. Los pretratamientos qumicos consisten en la accin de algn qumico, regularmente alguna base o cido diluido, que permite la deslignificacin de los materiales para el tratamiento posterior a los compuestos

azucares reductores (sacarificacin). 3. Fermentacin de azcares para la obtencin de alcohol. La etapa de pretratamiento consiste en adecuar la materia prima para la extraccin de azcares y de esta manera alcanzar mejores resultados en las etapas siguientes (hidrlisis y fermentacin). Desde el punto de vista econmico, esta etapa es crtica, puesto que gran parte del costo de operacin total del proceso corresponde a esta etapa. La

hidrolizables. Finalmente el pretratamiento enzimtico busca la deslignificacin mediante la accin de enzimas especficas para esta accin cuyo desarrollo se encuentra

actualmente en investigacin. La hidrlisis es un proceso qumico que divide la molcula de celulosa por la accin de la molcula de agua. Las complejas estructuras de almidn o celulosa (celulosa, hemicelulosa y lignina) no pueden ser fermentadas directamente, por lo que es necesario liberar las unidades monomricas de azcares, los cuales posteriormente pueden ser posteriormente convertidos a etanol. La accin de qumicos o enzimas liberan hexosas y pentosas a partir de la hemicelulosa y alternativamente glucosa de la celulosa (Flickinger & Drew, 1999).

tecnologa empleada es sumamente variable ya que depender enteramente del tipo de material empleado para la produccin de bioetanol, sin embargo estos procesos pueden clasificarse enzimticos. Los pretratamientos mecnicos son sencillos y comnmente son empleados en conjunto con algn otro tratamiento. Los ms usados son el proceso de molienda, ya sean en mecnicos, qumicos y

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Los

procesos

de

hidrlisis

ms

liberada a partir de la celulosa, as como la de los azcares procedentes de la hemicelulosa que se han liberado anteriores. durante La los

empleados pueden clasificarse en hidrlisis qumica (cida y bsica) e hidrlisis

enzimtica. La hidrlisis qumica puede llevarse a cabo mediante la accin de una base fuerte o un cido. La hidrlisis bsica es menos usada debido a que sus rendimientos son menores en relacin a la accin cida requiriendo mayores temperaturas. La hidrlisis cida emplea cidos diluidos, H2SO4 y HCl principalmente, es uno de los procesos de hidrlisis ms antiguos, simples y eficientes para la produccin del alcohol. Consiste en mezclar una proporcin de cido para hidrolizar, a aproximadamente 200C, la hemicelulosa presente en la biomasa y optimizar el rendimiento de la reaccin con la parte de la celulosa ms resistente.

pretratamientos

levadura

contiene una enzima llamada invertasa, que acta como catalizador ayudando a convertir los azcares en glucosa y fructosa (ambos C6H12O6) posteriormente reaccionan con otra enzima llamada zimasa, que tambin est presente en la levadura para producir el etanol y dixido de carbono. Finalmente el alcohol producido debe ser purificado y eliminar la fraccin de agua contenida. Para ello se utiliza un proceso de destilacin. Un avance muy importante sobre este proceso fue la introduccin simultnea del tratamiento de sacarificacin y el de

fermentacin, patentado por la Gula Oil Company y la Universidad de Arkansas. Este proceso combina las enzimas celulasas y los microorganismos encargados de la

Finalmente los lquidos hidrolizados son neutralizados y recuperados, normalmente mediante percolacin. La hidrlisis enzimtica consiste en descomponer la celulosa y la hemicelulosa del material en azcares sencillos mediante la accin de celulasas. Esta tecnologa presenta ventajas frente a la hidrlisis qumica, como menores costos de equipamiento, debido a que se realiza a presin atmosfrica y bajas temperaturas, genera mayores rendimientos y no requiere agentes qumicos. La ltima etapa del proceso consiste en la fermentacin por levaduras de la glucosa

fermentacin en un solo fermentador. Esto permite un proceso de una sola etapa en la produccin de azcar y fermentacin de los mismos a etanol (Gomez, Steele-King & McQueen-Mason, 2008). Las celulasas comerciales utilizadas en la sacarificacin son de hecho un coctel de diferentes enzimas que en conjunto

convierten la celulosa y hemicelulosa en azcares simples (Figura 2), y las ms comunes son de Trichoderma reesei. Las dos

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actividades enzimticas usadas en este coctel son endoglucanasas y exoglucanasas, as como la adicin de -glucosidasasa.

Figura 2. Fuentes de azcares para la produccin de etanol. [15] 1.Las flechas representan hidrlisis (slo los monmeros generados de la hidrlisis, representados por las flechas en negro, pueden ser fermentados). G glucosa, F fructuosa, Man Manosa, X xilosa, Ara arabinosa, otros L-ramnosa, L-fucosa, acidos urnicos.

Este proceso es atractivo, ya que continuamente se consumen los azcares por lo microorganismos fermentativos reduciendo la inhibicin por producto de la

en el sistema simultneo es a menudo el paso limitante con respecto a la produccin de etanol. La temperatura de proceso tambin puede ser un factor que determina la economa del proceso. Para disear un sistema de sacarificacin simultnea, las temperaturas de fermentacin deben ser compatibles con las temperaturas de

sacarificacin. Las ventajas de este proceso sobre la sacarificacin por separado, es que se reduce el riego de contaminacin, se necesita una menor carga de enzimas, altos

rendimientos, menos costo de equip al realizar el proceso en un solo paso. La naturaleza del sustrato es muy importante ya que el grado de sacarificacin

operacin, las cuales son entre 45 y 55C. Al igual que la conversin de etanol a partir de maz, la utilizacin de lignocelulosa necesita una hidrlisis antes de la

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fermentacin.

Dependiendo

del

proceso

a la bacteria productora de etanol Zymomonas mobilis. Bacterias entricas y algunas levaduras son capaces de fermentar pentosas, pero con bajos rendimientos de etanol. Ms an, en el caso de levaduras que fermentan la xilosa (Pachysolen tannophilus, Candida shehatae and Pichia stipitis), la aplicacin a gran escala se ve limitada por: su sensibilidad a altas concentraciones de etanol (40 g/l), el requerimiento microaeroflicas, de lata condiciones sensibilidad a

hidroltico, se pueden generar compuestos indeseables que pueden ser inhibitorios para los microorganismos que producirn el etanol. A diferencia del maz, del proceso los de

conversin

sustratos

lignocelulsicos liberan tanto hexosas como pentosas (Figura 2). Es evidente que la utilizacin de lignocelulosa para el proceso de fermentacin impone muchas demandas para el

microorganismo encargado de la conversin. Por lo tanto, se ha puesto nfasis en construir organismos eficientes, por medio de ingeniera metablica- La ingeniera Metablica es definida como el

inhibidores, incapacidad de convertir la xilosa a bajos pH (Zaldvar, Nielsen & Olson, 2001). Estas propiedades en conjunto han servido para realizar diferentes estrategias y construir el organismo que pueda realizar una conversin eficiente, y se basan

mejoramiento de la formacin de producto o propiedades celulares especficas a travs de la modificacin de reacciones bioqumicas especficas o la introduccin de nuevas por medio de la tecnologa del ADN

principalmente en los microorganismos S. cerevisiae, Z. mobilis y Escherichia coli.

recombinante. El microorganismo preferido en la conversin de sustratos a partir de cultivos es Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo, este microorganismo es incapaz de fermentar pentosas y por consiguiente es limitada su aplicacin en la conversin de materiales lignocelulsicos pentosas, a con alto de contenido que a de A pesar de que los costos de produccin actuales de los biocombustibles no son competitivos con los de los carburantes tradicionales, la eventual aplicacin de normas ambientales, as como de impuestos especficos al uso de hidrocarburos de origen fsil, apoya al desarrollo de la tecnologa de

3. Perspectiva global en Mxico

menos

dicho

microorganismos se le inserten y se puedan expresar las vas metablicas necesarias para la conversin. La misma restriccin se aplica

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los biocombustibles y a su implantacin en un futuro cercano. Las ventajas del uso de

biocombustibles son notorias, en el aspecto ambiental, la principal ventaja consiste en la reduccin de entre un 40% y 80% menos de dixido de carbono con respecto a los combustibles fsiles y en la no emisin de dixido de azufre, metales pesados y otros contaminantes. Por otra parte, la

incorporacin de estos carburantes ecolgicos tambin puede La derivar ventajas de

socioeconmicas.

produccin

biocombustibles lquidos puede suponer una alternativa interesante para aquellas tierras agrcolas que, por su baja productividad o por polticas agrarias, han quedado as a la

abandonadas

contribuyendo

generacin de empleo en el rea rural. Por todo ello, el futuro a corto plazo de los biocombustibles es prometedor, siendo necesario el incremento de la produccin de los mismos mediante el desarrollo de tecnologas innovadoras y materias primas que sean competitivas y respetuosas con el medio ambiente.

2. Gomez, L. D., Steele-King, C. G. & McQueenMason, S. J. (2008). Sustainable liquid biofuels from biomass: the writings on the walls. New Phytologist, 178, 473-485. 3. Flickinger, M. C. & Drew, S. W. (1999). Encyclopedia of bioprocess technology: Fermentation, biocatalysis and bioseparation. John Wiley & Sons, Inc. 4. Fukuda, H., Kondo, A. & Noda, H. (2001). J. Biosci.Bioeng, 92, 405-416. 5. Haas, M. J., Easterling E. R., French W. T., Hernndez, R. & Licha, M. (2006). Bioresource Technology, 97, 671678. 6. Huber, G. W., OConnor, P. & Corma. A. (2007). Applied Catalysis A: General, 329, 12012. 7. Islas J., Manzini, F. & Masera, O. (2007). Energy, 32, 23062320. 8. Kawashima, A., Matsubara, K. & Honda, K. (2009). Bioresource Technology, 100(2), 696 700. 9. Kumar, A. K., ES Ch., Rudravaram, R., Lakshimi, M. N., Venkateswar, R. & Ravindra, P. (2007). Economics and environmental of bioethanol production technologies: an appraisal. Biotechnology and Molecular Biology Reviews, 2, 14-32. 10. Lu, J., Nie, K., Wang, F. & Tan, T. (2007), Process Biochemistry, 42, 13671370. 11. Rutz, D. & Janssen, R. (2007). Biofuel Technology handbook, WIP Renewable Energies. 12. Shimada, Y, Watanabe, Y. & Samukawa, T. (1999). J.Am.Oil.Chem.Soc,. 76, 789-793. 13. Shimada, Y., Watanabe, H., Sugihara, A. & Tominaga, Y. (2002). Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 17, 133-142. 14. Tyson, A. & McCormick, A. (2006) .S.Department of Energy Energy Efficiency and Renewable Energy. Biodiesel Handling and Use Guidelines. 15. Zaldvar, J., Nielsen, J. & Olson, L. (2001). Fuel ethanol production from lignocellulose: a challengue for metabolic engineering and process integration. Applied Microbiology and Biotechnology, 56, 17-34.

Bibliografa
1. Arzamendi, G., Campo, I., Arguinarena, E., Snchez, M., Montes, M. & Gandia, L. M. (2007). Chemical Engineering Journal, 134, 123130.

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