Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro

Pgina 1 de 5 POPBIO xxx/xx

URIA UV LIQUIFORM

URIA UV LIQUIFORM
INDICAO MDICA DO EXAME A determinao da uria em amostras de sangue e urina til na avaliao da funo renal. PRINCPIO A uria hidrolisada pela urease, gerando amnia e dixido de carbono. Urease Uria + H2O 2 NH3 + CO2 A amnia reage com o 2 cetoglutarato e NADH em uma reao catalisada pela glutamato desidrogenase (GLDH), ocorrendo oxidao da NADH a NAD. A consequente reduo da absorbncia, medida em 340 ou 365 nm, proporcional concentrao de uria na amostra. GLDH 2 cetoglutarato + NH3 + NADH L-Glutamato + NAD AMOSTRA Preparo do paciente Recomenda-se jejum mnimo de 8 horas. Tipos de amostra Usar soro ou plasma (fluoreto, heparina, EDTA) e urina. No usar anticoagulantes contendo amnia. A concentrao de fluoreto na amostra no deve ser maior que 3 mg/mL, pois o fluoreto em altas doses inibidor da urease. O uso do anticoagulante Glistab (Labtest Cat. 29) permite a colheita de uma s amostra para as dosagens de uria, glicose e creatinina. A urina de 24 horas deve ser colhida em frasco contendo 2,0 mL de HCl a 50% (V/V) e centrifugada antes de usar. Armazenamento e estabilidade da amostra O analito estvel no soro ou plasma por 12 horas entre 15 25 C, por 3 dias entre 2 8 C e por 3 meses a 20 C negativos. Volume mnimo (Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise) Volume ideal (Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise) Critrios para rejeio da amostra Presena de hemlise ou sinais de contaminao bacteriana. Fazer referncia ao manual ou POP de colheita, separao e distribuio de material. PRODUTO UTILIZADO Uria UV Liquiform, Catlogo 104-4/50 Labtest Diagnstica Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 Lagoa Santa, MG, 33400-000 ANVISA - 10009010020

Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 C. Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 C. Padro - 70 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 C bem vedado para evitar evaporao. Contm azida sdica 7,7 mmol/L. Disponvel somente no produto catlogo 88-4/50. Reagente de Trabalho: o conjunto de um frasco de um frasco de Reagente 1 e de um frasco de Reagente 2 permite preparar o Reagente de Trabalho. Indicar o modo de preparao a ser utilizado no laboratrio e o modo de identificao do reagente de trabalho. Opcionalmente pode-se preparar volumes menores do Reagente de Trabalho, utilizando a proporo de 4 volumes do Reagente 1 e 1 volume do Reagente 2. Estvel 10 dias entre 15 e 25 C e 28 dias entre 2 8 C; Contm tampo 76 mmol/L, pH 8,0, ADP 800 mol/L, NADH 240 mol/L, Urease 3540 U/L, Glutamato desidrogenase 400 U/L, cido alfacetoglutrico 12,8 mmol/L e azida sdica 15 mmol/L.

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro

Pgina 2 de 5 POPBIO xxx/xx

URIA UV LIQUIFORM

Precaues e cuidados especiais 1. Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na manipulao do reagente. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana. 2. No utilizar o Reagente de Trabalho quando sua absorbncia, medida contra a gua em 340 nm, for igual ou menor que 1,0 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminao. 3. Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na manipulao do reagente. 4. Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies indicadas so estveis at a data de expirao impressa no rtulo. Durante o manuseio, os reagentes esto sujeitos contaminao de natureza qumica e microbiana que podem provocar reduo da estabilidade. O laboratrio deve estabelecer a estabilidade em suas condies operacionais. 5. Os reagentes contm azida sdica, que txica. Deve-se tomar cuidado para evitar a ingesto e, no caso de contato com os olhos, lav-los imediatamente com grande quantidade de gua e procurar auxlio mdico. A azida pode formar compostos altamente explosivos com tubulaes de chumbo e cobre. Utilizar grandes volumes de gua para descartar o reagente. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana. EQUIPAMENTOS Procedimento manual 1. Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 340 nm. 2. Banho-maria mantido temperatura constante (37 C). 3. Pipetas para medir amostras e reagentes. 4. Cronmetro Procedimento automatizado Indicar o nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento analtico; fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do mesmo. Procedimento alternativo Indicar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Enumerar as diferenas esperadas quando procedimentos manuais substituem procedimentos automatizados. CONTROLE DA QUALIDADE Materiais Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, nmero de catlogo), instrues de preparo e frequncia da utilizao dos mesmos. Limites de tolerncia Descrever o procedimento para definio dos limites de tolerncia, o sistema adotado para utilizao do mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providncias a serem tomadas diante de valores que ultrapassem tais limites. Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao dos materiais de controle. Verificao de novo lote de controles e/ou reagentes Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e de reagentes. Gerenciamento dos dados Definir como os dados relativos ao controle da qualidade so arquivados e gerenciados. Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade. PROCEDIMENTO Para a dosagem de uria na urina, diluir a amostra 1:50 (0,1 mL de urina + 4,9 mL de gua destilada ou deionizada). Multiplicar o resultado obtido por 50. Procedimento manual/Mtodo Cintico A temperatura da mistura de reao deve ser mantida estritamente a 30 ou 37 C. 1. Em um tubo rotulado Teste ou Padro, colocar 1,0 mL do Reagente de Trabalho e incubar na temperatura de trabalho durante 1 minuto. 2. Adicionar 0,01 mL de Amostra ou Padro, misturar rapidamente e transferir para uma cubeta termostatizada na temperatura de trabalho. 3. Disparar um cronmetro e medir a absorbncia aos 30 e 90 segundos em 340 nm. 4. Usar a diferena de absorbncia (A) entre os dois tempos (A30 - A90) para calcular os resultados. Procedimento automatizado Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de aplicao dos reagentes para o sistema automtico.

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro

Pgina 3 de 5 POPBIO xxx/xx

URIA UV LIQUIFORM

Precaues e cuidados especiais 1. Para manusear e descartar reagentes e material biolgico, aplicar as normas estabelecidas de segurana. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana. A limpeza e secagem adequadas do material so fatores fundamentais para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. Fazer referncia ao manual ou POP de limpeza e verificao da qualidade da limpeza dos materiais. 2. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para preparar reagentes e usar nas medies, deve ter resistividade 1 megaohm ou condutividade 1 microsiemens e concentrao de silicatos < 0,1 mg/l (gua tipo II). Para o enxge da vidraria a gua pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou condutividade 10 microsiemens. No enxge final utilizar gua tipo II. Quando a coluna deionizadora est com sua capacidade saturada ocorre a produo de gua alcalina com liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande poder de oxidao ou reduo que deterioram os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade da gua. Fazer referncia ao manual ou POP de gua reagente. 3. Como ocorre com toda reao enzimtica, a rigorosa observao do tempo e da temperatura de incubao de grande importncia para a qualidade dos resultados obtidos. CLCULOS Ver linearidade. Uria (mg/dL) = Absorbncia do teste x 70 Absorbncia do padro

Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo do fator pode ser empregado. 70 Fator de calibrao = Absorbncia do padro Uria (mg/dL) = Absorbncia do teste x Fator RESULTADOS Unidade de medida mg/dL Converso para Unidade SI: mmol/L = mg/dL x 0,166 Valores de referncia Soro ou Plasma: 15 a 40 mg/dL. Urina: 26 a 43 g/24 horas. Valores crticos >100 mg/dL Incluir o procedimento a ser adotado diante de um resultado crtico. LIMITAES DO PROCEDIMENTO Linearidade O resultado da medio linear at 300 mg/dL. Para valores maiores, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medio e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio. Diluir a amostra de modo a obter um valor em torno de 50 mg/dL. Indicar o procedimento de diluio utilizado no laboratrio. Interferncias 1- Valores de Bilirrubina at 20 mg/dL, Hemoglobina at 300 mg/dL e triglicrides at 1800 mg/dL no produzem interferncias significativas. 2- Contaminao da gua, vidraria e ambiente com amnia, podem produzir resultados falsamente elevados. Deve-se evitar fumar prximo ao local das dosagens. 3- Certas drogas e outras substncias podem produzir interferncias in vivo e in vitro. Sugerimos consultar Clin Chem 1975; 21:1D-432D.

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro

Pgina 4 de 5 POPBIO xxx/xx

URIA UV LIQUIFORM

SIGNIFICADO CLNICO A uria se eleva fisiologicamente devido a dieta hiperprotica ou com a idade, particularmente aps 40 anos. Sua diminuio ocorre na gravidez normal e nos indivduos em dietas com baixo valor protico e alto contedo glucdico. Elevaes da uria por defeitos de excreo se devem a causas pr-renais (insuficincia cardaca congestiva), causas renais (nefrites, pielonefrites, e insuficincia renal aguda ou crnica) e ps-renais (obstrues do trato urinrio por clculos, carcinomas ou plipos). Elevaes da uria ocorrem tambm por catabolismo elevado (febre, septicemia, uso de corticosteroides) e hemorragia internam, principalmente do trato grastointestinal. A diminuio da uria, que no tem expresso clnica, pode ocorrer em consequncia infuso endovenosa de solues com carbohidratos, reduo do catabolismo protico e aumento da diurese. A dosagem srica de creatinina considerada mais especfica para a avaliao da funo glomerular, mas pode ser menos sensvel em algumas doenas renais precoces. A disfuno renal melhor avaliada atravs das dosagens de uria e creatinina associadas. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Bergmeyer HU. Methodos of Enzymatic Analisis, 3 ed, vol 8, Deerfield Beach: 1985; 444-49. 2. Hallet CJ, Cook JGM. Clin Chim Acta 1971; 35:37. 3. Inmetro Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao para Avaliao, Qualitymark eds, Rio de Janeiro, 1997. 4. Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Warner-Chilcott, Laboratories, Diagnostics Reagents Division, Scarborough, Canada, 1972. 5. Westgard J O, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981; 27:493-501. 6. Uria UV Liquiform: Instrues de Uso, Labtest Diagnstica.

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro

Pgina 5 de 5 POPBIO xxx/xx

URIA UV LIQUIFORM

Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desativado por: Razo: Nmero Cpias Destino

___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___