TENDENCIAS ACTUALES ASERCA DE LA MICROPROPAGACION IN VITRO EN ORQUIDEAS. Chrystian Jareth Saavedra Santos. Biotecnología Vegetal.

Licenciatura de Ingeniero Biotecnologo. Universidad Autónoma de Chiapas. Campus IV. c.j.s.s_8@hotmail.com Palabras clave: Medio MS, micropropagación, se llaman epífitas (SCO, 1965). Por otro lado, aquellas orquídeas que se desarrollan a nivel de suelo, en este caso el pseudobulbo se ha modificado y las raíces cumplen la función de almacenamiento, estas orquídeas se llaman terrestres. Existen otras que se llaman litófitas las cuales crecen sobre rocas (SCO, 1965). A partir del tipo de crecimiento que presente una orquídea se clasifican en monopodial y simpodial; las primeras crecen de manera erguida cuyo tallo no se ramifica, al cual se insertan las hojas y no presentan pseudobulbos; las segundas presentan un rizoma que crece de forma horizontal, del cual surgen pseudobulbos con crecimiento vertical y a medida que crece el rizoma surgen nuevos pseudobulbos que dan origen a otra planta y por último, las orquídeas que crecen a lo largo y hacia arriba sosteniéndose de un tutor, tal crecimiento es trepador, probablemente se puede considerar un cuarto caso y es el rastrero tal crecimiento se da a nivel del suelo (SCO, 1965). Descripción morfológica de las orquídeas Las orquídeas se consideran como la familia más evolucionada dentro del reino vegetal, ya que presentan una gran complejidad y especialización en su morfología floral y en sus tipos de polinización. Asimismo existen dentro de la familia muy diversas formas de vida y desde el punto de vista ecológico muchos de sus integrantes son componentes importantes en diversos tipos de vegetación (Espejo, 2002). La característica principal de las raíces de orquídeas es que presentan alrededor de la raíz auténtica una capa de tejido esponjoso llamado velamen, que se desarrolla en las especies terrestres, epífitas o litófilas (Gil, 2007).

Introducción. México cuenta con una gran variedad de orquídeas. Las especies de esta familia, en extremo hermosas, extrañas y frágiles, se caracterizan por una difícil domesticación, resultado del fuerte arraigo hacia sus entornos. Las Orquidáceas son indicadoras del equilibrio entre el desarrollo de la civilización y el respeto a la naturaleza, pues la alteración de un nicho ecológico suele significar, desde la pérdida de una gran cantidad de estas plantas, hasta la desaparición de especies endémicas (Sarmiento, 2000). Las orquídeas constituyen un punto importante dentro de la realeza en el mundo de las plantas ornamentales. Se trata de una de las especies más mimadas y ocupan las primeras posiciones entre todas las plantas con flores por su valor en la producción de flor de corte, alcanzando un precio muy alto en el mercado internacional (Winkelmann et al., 2006). Cuando la utilidad de un recurso biótico es regida por sus características biológicas y por el entorno cultural, es importante emprender estrategias para su conservación; en particular, si son endémicos de nuestro país, ello requiere cuidado especial al ser estos organismos sometidos a colectas intensivas de individuos silvestres y a la perturbación del hábitat (Santos et al., 2006). Hábitat de desarrollo y tipo de crecimiento De acuerdo al lugar de desarrollo de una orquídea se determina su hábitat. Por tanto, aquellas orquídeas que se desarrollan únicamente sobre ramas y troncos de los árboles sin penetrarlos (sólo cumpliendo la función de soporte) y cuyo alimento lo obtienen del aire, agua de lluvia y desechos de la corteza del árbol,

2007) Las orquídeas presentan dos tipos de tallo: monopodial y simpodial. Por su colocación pueden ser alterna helicoidal. 2007). ya que es el encargado de atraer a los agentes polinizadores (Gil. lo cual cumple con la función de realizar parte de la fotosíntesis de la planta. mientras que Laelia tiene ocho (Larson. 2007) La orquídea tiene como regla general un aspecto herbáceo. es decir. Las hojas pueden ser terminales. éste es un pétalo modificado. se detiene abruptamente el crecimiento. todas tienen su diagrama floral idéntico consistente en: un labelo. 1993). 2007). Las flores de orquídea producen copiosas cantidades de semillas. verticales o pseudobulbos. Las flores de las orquídeas tienen una alta variabilidad puesto que han evolucionado en función de facilitar la fecundación. aunque las hay en una variadísima gama de formas. Se puede cortar solamente en un plano y se dividirá en dos mitades iguales. opuestas y en algunos casos sólo presentan una hoja verdadera. no pueden germinar en estado silvestre sin ayuda de algún hongo. paralelinerves. carnosas sin rizoma. raíces aéreas (Gil. oblongo. Los tallos verticales de las orquídeas simpodiales tienen crecimiento determinado. tuberosas. en el interior se encuentran las estructuras reproductivas de la orquídea (antera y pistilo) que se han unido en una estructura cerosa llamada columna o ginandrio (Gil. una yema vegetativa comienza a crecer en la base del pseudobulbo formando nuevamente un rizoma postrado. con hojas y flores terminales. 1965). hojas y flores (Soto. por ejemplo. ovoide. Cattleya tiene cuatro. o termina con la producción de inflorescencias. . La flor de orquídea es un tipo especial de flor irregular que tiene simetría bilateral (zigomorfa). en las axilas de las hojas. 1965). órganos sexuales fusionados formando una columna y ovario ínfero (SCO. tres sépalos. esto es tres pétalos y dos pétalos laterales. cilíndrico y segmentado. 2004). Las modificaciones y tipos de raíces que pueden presentarse en las orquídeas son: fibrosas. Como no contienen endospermo.Las raíces son de color gris a blanco. después de la producción de cierto número de 4 hojas. sésiles o pediceladas. Varían mucho en tamaño y consistencia. Una sola vaina puede contener entre 500 000 y un millón de semillas diminutas. se distinguen dos tipos de ejes: un rizoma rastrero u horizontal que a intervalos tiene callos carnosos. Los pseudobulbos pueden tener formas muy variables de acuerdo a su género y/o especie siendo las más comunes: globoso. insertadas a lo largo del pseudobulbo. por tanto el número de éstos y su disposición dentro de la flor pueden ser utilizados para la identificación de la misma. se desarrollan en forma periódica las flores (Soto. pudiendo ser simples. Las orquídeas monopoidales poseen un tallo con un eje que continua ininterrumpidamente su crecimiento terminal y produce hojas a medida que crece. 2004). dichas semillas carecen de endospermo y con frecuencia se les llama semillas desnudas. mientras que en condiciones de laboratorio tienen que ser germinadas asépticamente con abastecimiento de todas las sustancias químicas para su nutrición contenidas en un medio de germinación (Larson. Dentro de la flor los granos de polen se aglutinan en pequeños paquetes llamados polinias. El labelo. 2004). Cortando la flor en cualquier otro plano resultaría en dos trozos irregulares (Larson. 1965). En las orquídeas simpodiales. con pseudobulbo. Después de la floración. carnosas con rizoma. 2007). Este ápice tiene una coloración verde. alargadas y generalmente persistentes. Pese a la gran variedad de flores en la familia. Como todas las monocotiledóneas las nervaduras en la hoja se distribuyen paralelas entre sí a lo largo de ella (SCO. el cual presenta modificaciones en color y forma. presentando un ápice meristemático que absorbe la humedad y las pequeñas cantidades de nutrimentos que la planta necesita. de mayor tamaño y vistosidad. en forma de roseta y solitarias variando en número (Gil. 1993). Las hojas de las orquídeas son las que más carácter herbáceo presenta de todas las plantas. claviforme y fusiforme (Gil. Estas son hermafroditas. el número de polinias depende de la especie . ello se debe principalmente a su clima y hábitos característicos en su medio natural (SCO. tipo bulbo.

Las diferentes especies de orquídeas tienen requerimientos climáticos distintos y lo mejor para lograr éxito en su cultivo es el estudio perseverante de las necesidades en particular (FUNPROVER. 2007). siendo importante considerar la etapa de crecimiento de la planta (Murguía. se favorece el desarrollo de enfermedades fungosas en las flores. Por regla general. sin lesionar la planta. Demasiada luz decolora el verde de las hojas tornándolas amarillentas y dificultando su crecimiento. se pueden dividir en tres categorías: de clima frío. se debe regular adecuadamente humedad. 2004). dependiendo. como consecuencia de la falta de humedad en el ambiente o por las altas temperaturas. puede ocurrir mayor concentración de sales en las partes donde se realiza la fotosíntesis y quedar disminuida esta función (Salisbury y Ross. Comúnmente las cápsulas son de formas ovoides.5 hasta casi 15 cm de largo dependiendo del género y la especie (Sheehan. 2004). Requerimientos climáticos El cultivo de las orquídeas se desarrolla en gran variedad de climas y condiciones ambientales. sin lesionarse. intermedio y cálido. como antes se dijo. que se logra mediante ventiladores . Cuando la transpiración es intensa. 2004). una manera de saber cuánta luz darle a nuestras plantas. de necesidades particulares de cultivo. De acuerdo con los conocedores. si tiene hojas duras y carnosas necesita más luz y si sus hojas son blandas. según donde crecen en su estado natural (Murguía.). 1994). cilíndricas o piriformes.El fruto de las orquídeas es una cápsula cuadro 1 dehiscente aunque en algunos casos puede ser una vaina. es observando sus características. del mismo tipo de la vainilla (Vanilla spp. varía grandemente. La cantidad de luz que los diferentes géneros de orquídeas pueden tolerar.5 a 5 cm de diámetro y de 0. Las orquídeas. la humedad ambiental para el cultivo de orquídeas debe aumentarse en la estación estival y disminuirse en la invernal. La humedad relativa debe ser de 70%. luminosidad y temperatura. En ambos casos se retrasa el crecimiento y se reduce o evita la floración. Diversos son los factores a considerar en la conservación de las orquídeas y sin duda la determinación de parámetros de intensidad luminosa es un elemento considerar dependiendo el género. Una orquídea requiere la máxima cantidad de luz. ya que estas variaciones se presentan en la naturaleza (Gil. En el Cuadro 2 se dan algunos ejemplos por géneros de intervalos de intensidad luminosa. 2007). El cultivo de las orquídeas en invernadero. en los brotes nuevos y la planta florece regularmente (Gil. pueden medir de 0. . por lo que es muy importante el constante movimiento del aire dentro del invernadero. Las orquídeas requieren temperaturas diurnas de 13 a 32 °C y temperaturas nocturnas de 10 a 21 °C. cuando ésta sube demasiado. en términos generales. por lo contrario la poca luz da a las hojas un tono verde obscuro. elípticas. 1994). impidiendo el desarrollo y anulando la floración. anchas y finas necesita más sombra. La cantidad correcta de luz produce una coloración verde lechuga generando una superficie brillosa. En el Cuadro 1 se presentan las temperaturas óptimas para algunos tipos de orquídeas. la cual es necesaria para que ésta crezca y se desarrolle bien.

1986). subtendida por una bráctea espatácea. cubiertos por brácteas papiráceas basales caducas. Las cattleyas son originarias de las alturas medias de América Central y Sur América. trianaei. obtusas. tiene flores pequeñas (en racimos de veinte o más flores) pero frecuentemente de más intenso y variado color que las unifoliadas. además las orquídeas tienen la dificultad para captar agua y nutrientes . maxima (Horich. resupinadas.Las orquídeas son de lento crecimiento y con periodos largos de descanso. Dentro de este grupo se puede encontrar entre otros a C. (Rodríguez et al. Son plantas perennes con rizoma corto cubierto por brácteas apergaminadas y caducas. Las especies más representativas de este tipo son C. C. generalmente con pocas flores. lueddmanniana. cilíndricos o fusiformes. grandes y llamativas. sésiles y con venación conduplicada. Encyclia. 1993). En el mundo se encuentran cerca de 65 especies diferentes (Kuan y González. El otro grupo es el de las bifoliadas. C. Rhyncholaelia.. C. sus flores son grandes y de pétalos anchos y vistosos.mossaie. Laelia. estas plantas tienen bajos requerimientos nutrimentales y su fertilización es relativamente sencilla (Gil. C. Las raíces son cilíndricas. En el caso de cattleyas con inflorescencia. porque tienen dos y algunas veces tres hojas. muy diferentes al tipo labiata(Horich. C luteola. los cuales constituyen una defensa contra la sequía periódica. patentes o ligeramente reflexos. C. que tienen una sola hoja que sale del ápice del seudobulbo. verdes al inicio formando un velamen de varias capas. libres. Las flores poseen un ovario pedicelado y cilíndrico. warnerii. que se mantienen por 1 a 4 semanas. 1980). además de tener mejor textura. Schomburgkia. skinneri. racemosa. Dentro de Epidendroideae existen varias tribus y subtribus. Sophronitis. 1993). El señor Cattley cultivó las hojas hasta obtener floración. gaskelliana. que incluye el género Cattleya y a sus parientes (Brassavola. dowiana. El requerimiento de luz de éstas cattleyas es mayor que el de la bifoliadas (Kuan y González. grisáceo o blanco verdoso en la madurez Los seudobulbos son redondeados. 1995) El nombre del género Cattleya se dio en honor al botánico y horticultor inglés William Cattley. warscewiczii. ocurriendo un máximo de dos floraciones al año. lawranceana. 1980). schroederae. 1993). Epidendrum. por ello. El género Cattleya La Familia Orchidaceae se divide en seis Subfamilias. Las hojas pueden ser lanceoladas o elípticas. . donde reciben luz fuerte pero indirecta (Kuan y González. coriáceas o carnosas. una de las cuales es la Subtribu Laeliinae. etc) (García. Las cattleyas bifoliadas (Centroamérica). el cual en 1818 recibió unos musgos y líquenes provenientes de Brasil que venían envueltos en unas hojas de lo que hoy se conoce como Cattleya labiata. sobre todo aquellas que viven sobre los árboles. mendellii. Los híbridos entre estos dos grupos han producido flores donde se combinan las mejores características de ambas (Kuan y González. C. C. 2007). Los sépalos son iguales. C. C. y una de las más importantes es la Epidendroideae ya que es la más evolucionada (derivada) y además comprende al 90% de las especies de las orquídeas americanas. 1993) Las especies de este género se han dividido en dos grupos: las cattleyas labiatas o unifoliadas (generalmente de Sur América). Los pétalos son semejantes a los sépalos aunque generalmente más anchos. 1980). esta es terminal. C. Normalmente producen dos o tres flores. siendo la primera cattleya en descubrirse (Horich. percivaliana. Ecología y descripción La mayoría de este grupo crecen como epífitas en el lindero de los bosques o en la copa de los árboles. C. bicolor y C. lisas.

es decir una porción de planta (tejido. cilíndrica o subclaviforme. Las técnicas de cultivo in vitro tienen que ser exitosamente adaptada para la propagación masiva de plantas de orquídeas. estudios sobre polaridad de las plantas (Vochting. el cultivo de tejido (in vitro) tuvo un papel importante y significativo en el cultivo. Los lóbulos laterales envuelven la columna. La luz acelera el proceso de crecimiento de la planta para que esta luego florezca bien (Horich. dando origen al desarrollo del primer caldo o medio nutritivo (González. 1980). crecimiento y conservación de especies de orquídeas y de híbridos (Yoneo. Reproducción in vitro El cultivo de tejidos. propiciaron que muchos fisiólogos vegetales iniciaran estudios de lo que se llamaría posteriormente “totipotencialidad”. Para florecer bien. La columna es fuerte. 1986). 1893). cada una de ellas divididas por unsepto longitudinal. La solución Knudson C todavía se utiliza para la germinación de semillas de orquídeas y en la micropropagación de algunas orquídeas. 2001). Profesor de Fisiología de Plantas de la Universidad de Cornell (Arditti. con un nuevo (cultivo de tejidos o in vitro) simple y práctico método de propagación vegetativa (clonal) de Phalaenopsis (orquídea) que fue desarrollado en la Universidad de Cornell (Arditti. La antera es terminal. esto es deseable para el establecimiento de métodos in vitro para la rápida y larga escala de propagación (Pedroza y Mican. REPRODUCCIÓN in vitro Antecedentes de la reproducción in vitro de orquídeas La micropropagación de orquídeas. céreos. formulado para la germinación asimbiótica de semillas de orquídeas por Lewis Knudson. El estigma es entero (Rodríguez et al. incumbente. El medio nutritivo utilizado para este cultivo fue el Knudson C (KC). operculada de dos celdas. Los pioneros en el trabajo de micropropagación fueron F. 2006). con caudículas prominentes. En algunas especies los lóbulos laterales y el medio son totalmente diferentes. propagación. en otras son continuos. Más tarde. bajo condiciones controladas. libre o ligeramente adnato a la base de la columna. 2008).células o parte de una masa callosa) tomada para el cultivo in vitro. la mayoría focalizado en una nutrición inorgánica y con el uso de reguladores de crecimiento. 1996). de forma moderna comienza en 1949. micropropagación o cultivo in vitro es una técnica de cultivo artificial que permite producir organismos similares a partir de un explante . . entonces cada especie y género requiere una diferente composición de medio y condiciones de cultivo para su crecimiento (Hahn y Paek. en 1902 el fisiólogo y botánico alemán Haberland propone por primera vez el cultivo de células vegetales in vitro desarrollando más adelante la teoría de “totipotencialida” razón por la cual se le considera el padre del cultivo de tejidos (González. las cattleyas necesitan luz abundante pero no directa entre 2000 y 3000 pies bujía. Skoog y T. 1991). órgano. Desde que Knudson desarrolló un método de cultivo in vitro asimbiótico para la germinación de semillas de orquídeas. 2008). simple o trilobulado. 1898) y la primera obtención de callo (tejido vegetal que se divide activamente en el cultivo de tejidos) (Rechinger. paralelos y ligeramente comprimidos. En cuanto a requerimientos comerciales y conservación de especies en peligro de extinción. ligeramente arqueada. este último es considerado actualmente una autoridad en procedimientos y componentes del medio estéril para un gran número de cultivos hortícolas. En los siguientes años. Los resultados han sido logrados con una gran variedad de orquídeas. Esta técnica nació hace cerca de 150 años cuando Saks y Knop (en 1860 y 1861) observaron que los principales nutrientes de las plantas superiores eran sustancias inorgánicas y no orgánicas como se creía desde la época de los griegos. Los polinios son 4. terminada en tres dientes. Murashige. elíptico-ovados.El labelo es sésil. 1996).

Las plantas que vienen de un mismo meristemo. La introducción de un método de germinación de semillas por Knudson (1946) y el cultivo de un fragmento de vástago por Morel (1960) ha ayudado en el desarrollo de métodos para la propagación de orquídeas (Sheelavantmath. 1991). 2007). Además de las anteriores. Corresponde al enraizamiento o etapa de pretransplante. Murashige (1974. d. Reducción del tiempo de multiplicación c. En este caso los brotes o meristemos se forman in vitro (brotes adventicios o de novo)  a partir de un embrión somático formado a partir de tejido somático (embriogénesis somática) (Abdelnour y Vincent. posee un núcleo que es capaz de reproducir las características de la planta de la cual proviene. La obtención de una planta entera puede ocurrir a través de 3 vías diferentes:  a partir de brotes. a bajos costos y en un tiempo económicamente costeable. es posible sustituir la acción del hongo por un medio nutritivo. 1994). meristemo y embriones pre-existentes en el “explante” utilizado. 1991b). 1977) encontró que era útil destacar la secuencia de eventos asociados con la multiplicación de plantas mediante las técnicas de cultivo aséptico. Debido a que la micropropagación se refiere a un fenómeno de reproducción asexual. ápice. de la siguiente manera: Etapa I. f. Incremento acelerado del número de plantas derivadas por genotipo b. Mayor control sobre la sanidad del material que se propaga . el riesgo de tener “variantes” fenotípícas o genéticas es bajo. sin embargo. pueden considerarse otras dos etapas como parte integral del procedimiento: Etapa IV: Transferencia final a la etapa de medio ambiente Etapa 0. a partir de un brote o meristemo iniciado dentro de un callo o directamente sobre el explante inicial. 1991b). Etapa inicial. primordio. la germinación y el subsiguiente desarrollo de la planta. o estaca son llamadas “clones” (Krikorian. Iniciación o establecimiento (se establece el cultivo inicial o primario) Etapa II.Toda célula vegetal viva. el cultivo in vitro debe toda su Extensión. Sin embargo eso puede suceder cuando no se domina el proceso in vitro.e. cualquiera que sea su especialización. 1991b). Facilidad para transportar el material in vitro de un país a otro. 2000). dependen en la naturaleza. A esta notable capacidad de la célula vegetal. Etapa III. . entre ellas se puede citar: a. multiplicación de brotes o multiplicación de plantas. con menos restricciones aduaneras. Posibilidad de multiplicar grandes cantidades de plantas en una superficie reducida. La micropropagación presenta importantes ventajas sobre los métodos tradicionales de propagación. Posibilidad de multiplicar rápidamente una variedad de la cual sólo existan pocos individuos (Villalobos y Thorpe. Ha esta germinación se denomina asimbiótica (Gil. tiene como objetivo producir una planta autotrófica que pueda sobrevivir en las condiciones del transplante al suelo (Krikorian. Micropropagación de orquídeas Reproducción a partir de semillas  Debido a que las semillas de orquídeas son muy pequeñas y contienen poca o nula reserva alimenticia. de la relación simbiótica con un hongo. que comprende la selección de la planta madre y la selección de una modalidad de pretratamiento para volver funcional la estrategia que se adopte (Krikorian.

se realiza tomando una parte de la planta a reproducir mediante un instrumento de cortar y sembrando en un medio adecuado. 2007). Sobre la preferencia del origen del explante es terminal o axilar de las yemas de la acción vegetativa de los brotes de las plantas superiores. De hecho. produce una masa indiferenciada. 1991). como es el caso de un hongo específico. Reproducción asexual Se pueden reproducir las orquídeas por vía vegetativa. ya que el proceso de división puede repetirse a medida que crecen los fragmentos. llamada protocormo. 1991. Brotes axilares como explantes. meses o incluso años. tal técnica presenta varias ventajas: permite multiplicar a voluntad los ejemplares de una orquídea. El explante de yemas apicales incluye el meristemo apical con 3 a 4 nudos con la presencia de hojas jóvenes. el protocormo continuará su crecimiento por semanas. En todos estos casos estamos obteniendo clones idénticos a la planta madre. sin que altere las células interiores y permite la germinación. Las semillas requieren establecer relaciones simbióticas con microorganismos. . La germinación de la semilla en el medio de cultivo. esta tecnología fue exitosamente aplicada a la producción comercial de plantas de orquídeas seleccionadas. demostraron la aplicación del cultivo de tejidos como una rápida propagación clonal de orquídeas. La germinación in vitro de semillas permite un gran número de plántulas para se producidas en un pequeño lapso de tiempo. Son diversos los medios nutritivos usados para la germinación de semillas y desarrollo de varios géneros y especies de orquídeas. En la reproducción a partir de meristemos se extraen células meristemáticas de la yema de crecimiento de la planta bajo condiciones ambientales estériles. Los explantes por raíces consisten de 3 a 5 mm de extensión de raíz (Yoneo. Este método es utilizado para clonar variedades destacadas por su interés botánico y calidad y floración. Zettler et al. Desde Morel y Wimber. inflorescencias jóvenes. 2007). (2006) la propagación de orquídeas se puede realizar por la germinación de semillas de forma asimbiótica o bien por la multiplicación convencional vegetativa. 2007). o sea. por partición esquejes o meristemos (que es como se producen la mayoría de las plantas que están en el mercado). hojas y raíces. establecimiento de nuevos híbridos y la multiplicación y preservación del germoplasma son algunos beneficios que derivan de la aplicación de esta tecnología (Yoneo. diversos métodos han sido reportados para la micropropagación de orquídeas (Pedroza y Mican. donde el cultivo de semillas es una razonable estrategia de propagación masiva de un muestreo no destructivo de explante (Krikorian. Grandes cantidades de plantas. ya que la capa de la cápsula es gruesa. También las micorrizas proveen a las plantas jóvenes de azúcares y nutrimentos que necesitan en su desarrollo hasta ser autosuficientes (McKendrick. De acuerdo a Wagner et al. Estos meristemos clonados se desarrollan en un medio nutritivo y dichos individuos presentan características idénticas a la de sus progenitores (Gil. 2006). mientras las epífitas necesitan un medio más rico en sales (Gil.. bajo condiciones óptimas. conocido como Rhizoctonia. su posterior multiplicación y transferencia final de las nuevas plantas.En el caso de orquídeas raras o las que están en peligro de extinción. hasta alcanzar el desarrollo de raíces y hojas. 2000). metodologías in vitro de propagación pueden ser necesarios. dependiendo de la especie (Gil. La reproducción asexual o vegetativa se efectúa sin transferencia de material genético. 2001). 1991) Los explantes son exitosos a partir de fragmentos vegetativos. Las orquídeas terrestres requieren un medio pobre en sales. la acción del hongo consiste en la degradación de dicha capa. consiste del cubo del brote adherido al nudo.

en el caso del mioinositol se encuentra presente en concentraciones de 10 a 100 mg L-1. La En lo que respecta a los micronutrimentos. pero no parece ser esencial.y NH4+ son los que ejercen influencia zeatina. agregan al medio de cultivo como medida de El pH del medio también se considera como un precaución en concentraciones bajas. somáticos (Vidalie. citocininas: 2. durante el vitaminas y aminoácidos dentro del cultivo de proceso el pH frecuentemente disminuye. caso de la cinetina resulta ser menos eficiente si se le compara con las otras tres citocininas. éstos se agregan en forma de una mezcla compleja a la que se le Los componentes del medio de cultivo se conoce como caseína hidrolizada. 1976). 1976). y la N6 importante en el crecimiento de los tejidos benciladenina (BA o BAP) y la cinetina (6 (Vidalie. se ha demostrado 4. 1976). En el caso de otros ácido giberélico 3 (AG3). glutamina. influyen de manera sensible en el crecimiento de los tejidos vegetales. que es esencial. . su función es mejorar el crecimiento. tisular. Los tejidos cultivados tienen necesidades específicas con respecto a los siguientes iones: En los medios de cultivo se utilizan cuatro K+. la decisión influencia del Cu. Se deben usar los isómeros L.5 y 5. pero sólo el 40 mg L -1. Sustancias orgánicas Los tejidos muestran necesidades específicas en 3. se adiciona en el medio de cultivo al ácido bórico (H3BO3). presente en concentraciones de 0. arginina. Con respecto a los requerimientos de aminoácidos. sin tejidos es importante.00003 a 0. al manganeso y al para estimular el crecimiento de los meristemos. Co. I y Na sobre el acerca de qué tipo de medio elegir. Sales minerales mezclados. solos o 1.isopenteniladenina (2iP) y la NO3. con respecto a los embargo. zinc. se ser una decisión arbitraria (Vidalie. que son naturales. estos elementos se introducen al medio de inducir el alargamiento de los tallos o incluso cultivo en concentraciones del orden de 0. del orden factor crítico. dependiendo de que se encuentren desconoce o se sabe muy poco acerca de la en un medio sólido o en uno líquido.8 El uso de sustancias orgánicas como azúcares. sin embargo. El metabolismo de los tejidos se puede modificar Siguiendo en la línea de micronutrimentos.03 mM L -1. 1976).1 a 10 Medios de cultivo El medio de cultivo es el que le confiere al material vegetal los nutrimentos necesarios para su desarrollo. los iones K+. que son sintéticas.10 mM L-1. pero se puede clasifican en cuatro categorías: adicionar asparagina. algunos tejidos son sensibles frecuente. ácido aspártico. se sabe muy poco sobre los efectos de azúcares. concentraciones de 2 a 3%. ácido glutámico y tirosina. que generalmente se agrega en forma de quelato (Fe–EDTA) a una concentración de 20 a El uso de giberelinas es recurrente. NO3-. Mo. se por completo.01 a 10 mg L -1.02 a para activar el crecimiento de los embriones 0.01 mg L-1). Ca2+ y Mg2+. 1976).con frecuencia se añade fósforo furfuril. Reguladores de crecimiento lo que se refiere a los reguladores del crecimiento o fitohormonas. los isómeros D son ineficaces. las necesidades de vitaminas se cubren con el uso de vitaminas del grupo B. no tiene que crecimiento de los tejidos. se define por sus propiedades químicas y física (Vidalie. 2. durante la preparación del medio.mg L -1. En la práctica el pH inicial se de 0. NH4+. es el caso de la vitamina B1. las necesidades suelen cubrirse con esta variación. se concentraciones más usadas de los reguladores sabe que el hierro es esencial para el crecimiento de crecimiento descritos es de 0.aminopurina). Productos naturales complejos que a concentraciones bajas (0. se utiliza en forma micronutrimentos. ajusta a valores comprendidos entre 5. El en bajas concentraciones (Vidalie.

42. T. y geográfica de nuestro país. opciones en el acto de conservar las especies endémicas de nuestro país. pp: 4-13. Reproducción y orografía e historia biogeográfica y presencia de manejo de orquídeas mexicanas.Aunque en muchos casos la composición mineral de Murashige y Skoog (1962) da Bibliografia: resultados satisfactorios. . J. Horich.Contacto Nuclear. multiplicación conocimiento de la fisiología de la especie con y conservación in vitro de germoplasma respecto a la nutrición mineral. Society for In vitro Biology pp: 37:678–682.. Flores G. J. seleccionar una composición en función del Rescate. A. endémicas. 1982. (Ed. Vicerrectoría Las técnicas biotecnológicas. September–October. establecimiento. Orchid biology: Reviews y/o en peligro de extinción. Las Cattleyas en Costa Rica.. L. F. se Universidad Autónoma Chapingo. es evidente a partir de la literatura air exchanges promote growth and citada. Orchid seed germination satisfacen las diversas demandas de estos and seedling culture: A manual. González. evidente que los resultados obtenidos dependen Developmental Biology Plant. diversos climas. High La propagación in vitro de material vegetal photosynthetic flux and high CO2 aporta resultados en la conservación de especies.. lo conveniente es 1. concentration under increased number of No obstante. E. En el caso de las orquídeas. 5. Tecnológico de Costa Rica. calcula que existen 400 especies o subespecies México. Diversas son las especies de flora y fauna que convergen en México. S. implica una actividad de fitomejoramiento.. en gran medida de la especie con que se trabaja. 6. García. y Sánchez S. Espejo. 2001. J. 3. Abdelnour. El medio MS es de orquídeas en vías de extinción. López. en la actualidad de Investigación y Extensión. México. al igual que existen especies endémicas Arditti. muy rico en sales totales y a menudo se le puede Cartago. Costa Rica.A. que como vía and perspectives. y Muñoz. Gil I.. Y. C. Pp 9-11. 2008.. and Paek. Impresora Delta. A. los sistemas de propagación tradicional no 2. Cultivo de tejidos: Relacionar la conservación de las especies con la una herramienta para el acción del ser humano.). Ithaca: Comstock alternativa para su rescate y conservación no publishing associates 2:244-370. 2002. logran satisfacer las demandas de conservación y propagación (Rosales et al. San José. V. J. diversas pueden ser las ININ. Costa Rica. 7. Orquídeas de Estado de Morelos. En: Orquídeas: su cultivo en Costa Rica. se debe considerar que no siempre es la mejor opción. Arditti. Ed. In: cultivos. 2003). Pp 4-10. han tomado mayor auge. C. Hahn E. R. sin embargo hasta el momento para muchas especies vegetales. conciencia y actuar. K. Pp: 31. J. por la Asociación Costarricense de Orquideología.49: 37-40. así como su compleja Navarro E. las cuales corresponden al 40% del total registrado en nuestro país. S. que diversos son los factores que photosynthesis of four kinds of orchid intervienen en el éxito en la propagación y es plantlets in vitro. In vitro Cellular and. 2007. Herbario AMOConclusión: UAM Iztapalapa. Bastida A. A. 1980. 1997. Instituto diluir a la mitad. L. producto de la ubicación 4.

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