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Mtodos de laboratorio en Biologa

Grado en Biologa (1er curso) GRUPO E Prof. Fadwa Jroundi Dpto. Microbiologa (2 planta) Tutora: Martes y Mircoles de 11h00 a 14h00 Email: fadwa@ugr.es

OBJETIVOS
EL ALUMNO SABR/COMPRENDER:

Los fundamentos de funcionamiento de los microscopios ptico y electrnico Los fundamentos bsicos de las tcnicas histolgicas para la observacin microscpica de muestras biolgicas y adquiera experiencia prctica en algunas de ellas. Las tcnicas de aislamiento, siembra y conservacin de microorganismos. Diferenciar diferentes tipos de microorganismos y aprenda a realizar recuentos de microorganismos. Manejar un microscopio ptico Manejar los cultivos bacterianos en condiciones de esterilidad. Interpretar protocolos y resultados de experimentos y obtener conclusiones Preparar reactivos y manejar instrumentos de precisin para pesar y medir pequeos volmenes. Reconocer y realizar alguna tcnica de espectrofotometra y su aplicacin en la determinacin de biomolculas. Aislar ADN del tejido de algn organismo superior. Reconocer y realizar una electroforesis de ADN en gel de agarosa y su aplicacin en la separacin de molculas de ADN.

EL ALUMNO SER CAPAZ DE:


TEMARIO TERICO (1)


TEMA 1. NORMAS DE SEGURIDAD EN LABORATORIOS DE BIOLOGA.

Etiquetado de productos. Almacenamiento de residuos peligrosos. Clasificacin de agentes biolgicos segn su grupo de riesgo. TEMA 2. TIPOS DE ORGANIZACIN CELULAR: EUCARIOTA Y PROCARIOTA. Tamao, formas, organizacin y estructuras celulares. TEMA 3. PRINCIPIOS GENERALES DE LOS DIFERENTES TIPOS DE MICROSCOPA PTICA. Fundamentos de funcionamiento del microscopio ptico. Diferentes tipos de microscopa ptica. TEMA 4. TCNICAS GENERALES DE PREPARACIN DE MUESTRAS BIOLGICAS PARA LA OBSERVACIN DE CLULAS Y TEJIDOS CON MICROSCOPA PTICA. Principios generales de las tcnicas de fijacin, inclusin, microtoma, tincin y montaje de muestras biolgicas para su estudio con microscopa ptica. TEMA 5. PRINCIPIOS GENERALES Y TIPOS DE MICROSCOPA ELECTRNICA. Fundamentos y aplicaciones de los microscopios electrnicos de transmisin y de barrido. TEMA 6. TCNICAS GENERALES DE PREPARACIN DE MUESTRAS BIOLGICAS PARA LA OBSERVACIN DE CLULAS Y TEJIDOS CON MICROSCOPA ELECTRNICA. Principios generales de las tcnicas de fijacin, inclusin, ultramicrotoma y contraste de muestras biolgicas para su estudio con microscopa electrnica de transmisin. Tcnicas de preparacin de muestras para su estudio con microscopa electrnica de barrido.

TEMARIO TERICO (2)


TEMA 7. TCNICAS ESPECIALES DE PREPARACIN DE MUESTRAS

BIOLGICAS: HISTOQUMICA, INMUNOCITOQUMICA, HIBRIDACIN IN SITU YAUTORRADIOGRAFA. Principios generales y aplicaciones de las tcnicas para la deteccin de molculas en clulas y tejidos. TEMA 8. MTODOS DE ESTERILIZACIN. Utilidad del calor hmedo y del calor seco para la esterilizacin de medios de cultivo, soluciones y materiales. El autoclave, el horno Pasteur, la incineracin y el flameado a la llama. Filtracin. TEMA 9. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLOGICOS Tipos de medios de cultivo segn su composicin, su finalidad y segn su estado fsico. TEMA 10. TCNICAS DE RECUENTO DE MICROORGANISMOS. Medidas directas e indirectas. Recuento de totales y recuento de viables. TEMA 11 CENTRIFUGACIN: Fundamentos tericos. Tipos de rotores. Centrifugacin preparativa. TEMA 12. ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN UV-VISIBLE. Fundamentos tericos. Espectofotmetros. TEMA 13. ELECTROFORESIS. Fundamentos tericos. Electroforesis de protenas y de cidos nucleicos. TEMA 14. CROMATOGRAFA Clasificacin y tipos. Cromatografa en capa fina.

BIBLIOGRAFA FUNDAMENTAL
MONTUENGA L, ESTEBAN FJ y CALVO A. 2009. Tcnicas en

Histologa y Biologa Celular. Elsevier Masson.


MADIGAN MT, MARTINKO JM, DUNLAP PV y CLARK D. 2009.

Brock Biology of Microorganisms, 12 Edicin. Benjamin Cummings / Prentice Hall. New Jersey. EEUU.
WILLEY J, SHERWOOD L y WOOLVERTON C. 2008. Prescott, Harley,

and Klein's: Microbiology, 7 edicin. McGraw Hill Companies. EEUU. Edicin. Ediciones Omega S.A. Barcelona.

NELSON DL y COX MM. 2009. Lehninger. Principios de Bioqumica, 5

VOET D, VOET JG y PRATT CW. 2007. Fundamentos de Bioqumica, 2

Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires.

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
BANCROFT JD y GAMBLE M. 2002. Theory and practice of histological

techniques, 5 edicin. Editorial Churchill Livingstone.


ALBERTS B, BRAY D, JOHNSON A, LEWIS J, RAFF, M, RIBERTS K,

WATSON JD. 2004. Biologa Molecular de la Clula, 4 edicin. Ediciones Omega.


ANDERSON RP. 2006. Outbreak: Cases in Real-World Microbiology.

ASM Press. EEUU.


WISTREICH GA. 2007. Microbiology Perspectives: A Photographic

Survey of the Microbial World, 2 Edicin. Prentice Hall. Upper Saddle River. New Jersey.
ROCA P, OLIVER J y RODRGUEZ AM. 2003. Bioqumica. Tcnicas y

Mtodos. Editorial Hlice. Madrid.


GARCA-SEGURA JM et al. Tcnicas Instrumentales de Anlisis en

Bioqumica. 1996. Editorial Sntesis. Madrid.

ENLACES RECOMENDADOS
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/index.html. Excelente pgina sobre

microscopa, con explicaciones sobre el funcionamiento de los diversos tipos de microscopios y tutoriales en java sobre el manejo de los mismos. http://bris.ac.uk/pathandmicro/cpl/lablinks.html. Manual de tcnicas de preparacin de muestras y tincin. http://www.unl.edu/CMRAcfem/em.htm. Descripcin y fundamento de los microscopios electrnicos de transmisin y barrido. http://microbiol.org/. Pgina sobre Microbiologa con noticias, imgenes y diferentes recursos. http://www.bacteriamuseum.org/ Museo virtual de bacterias. http://www.whfreeman.com/stryer. Explicaciones animadas de tcnicas experimentales utilizadas en investigacin de genes y protenas. http://www.sebbm.es/ES/divulgacion-ciencia-para-todos_10/recursos-web-105. Recursos web de la SEBBM (Sociedad Espaola de Bioqumica y Biologa Molecular).

EVALUACIN DE LA ASIGNATURA
SISTEMA DE EVALUACION B. CELULAR: 2 puntos (evaluacin teora) + 1 punto (prcticas) MICROBIOLOGIA: 2 puntos (evaluacin teora) + 1 punto (prcticas) BIOQUIMICA : 2 puntos (evaluacin teora) + 1 punto (prcticas) EXAMEN TEORICO para la evaluacin de los conocimientos adquiridos. 60% de la calificacin final. Se har un nico examen de 3 horas, que se valorar en 6 puntos: 2 puntos para las preguntas de cada Departamento. La puntuacin mnima para aprobar es 2,4 puntos (el 40%). VALORACION de las actividades en laboratorio: se evaluarn las competencias adquiridas mediante la realizacin de preguntas en las clases prcticas y/o exmenes. 30% de la calificacin final. Se valorar en 1 punto por cada Departamento. La suma de las tres tandas dar como mximo 3 puntos. La puntuacin mnima para aprobar ser de 1,2 puntos (el 40%).

10% de la calificacin final (1 punto) se asignar a la asistencia, comportamiento, participacin, etc.

CALIFICACION FINAL: ser la suma de las valoraciones numricas de los tres apartados. Para superar la asignatura el alumno deber obtener una calificacin final de 5 o ms puntos, siempre y cuando haya obtenido al menos el 40% de la puntuacin mxima en cada apartado.

TEMARIO PRCTICO
I TANDA-LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR
Prctica 1. Fundamentos y utilizacin del microscopio

ptico.
Prctica 2. Fijacin, inclusin y microtoma de

muestras biolgicas.
Prctica 3. Tincin de secciones histolgicas

I TANDA LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR


FECHAS Y GRUPOS
Semana del 12 de Marzo: todos los grupos

LUNES: A1, B1, C1, D1, E1 MARTES: A2, B2, C2, D2, E2 MIRCOLES: A3, B3, C3, D3, E3 JUEVES: A4, B4,C4, D4, E4 Semana del 19 de Marzo: todos los grupos.
Semana del 26 de Marzo: todos los grupos

TEMARIO PRCTICO
II TANDA-LABORATORIO DE MICROBIOLOGA Prctica 4. Observacin de microorganismos con microscopio ptico.
Prctica 5. Aislamiento y siembra de microorganismos en

diferentes tipos de medios de cultivo.

Prctica 6. Obtencin de cultivos puros. Prctica 7. Aislamiento de microorganismos de muestras

naturales. Observacin.

Prctica 8. Recuento de microorganismos.

II TANDA LABORATORIO DE MICROBIOLOGA


FECHAS, GRUPOS Semana 10 de Abril (Martes a Viernes) Grupos 1: A1, B1, C1 , D1, E1
Semana 16 de Abril

Grupos 2: A2 , B2, - Martes a Viernes C2 , D2 , E2 - Lunes a Jueves


Semana 23 de Abril

Grupos 3.: A3 , B3, - Martes a Viernes C3 , D3, E3 - Lunes a Jueves


Semana 7 Mayo (Lunes a Jueves)

Grupos 4: A4, B4, C4, D4, E4

TEMARIO PRCTICO
III TANDA- LABORATORIO DE BIOQUMICA
Prctica 9. Determinacin de espectros de absorcin. Prctica 10. Determinacin cuantitativa de biomolculas por

espectrofotometra.

Prctica 11. Separacin de biomolculas mediante

cromatografa.

Prctica 12. Electroforesis de protenas sricas.

III TANDA LABORATORIO DE BIOQUMICA


FECHAS y GRUPOS
Semana 7 de Mayo :

Grupos 1: A1, B1, C1, D1, E1 Lunes a Jueves


Semana 14 de Mayo:

Grupos 2: A2, B2, C2, D2, E2 Lunes a Jueves


Semana 21 de Mayo:

Grupos 3: A3, B3, C3, D3, E3 Lunes a Jueves


Semana 28 de Mayo:

Grupos 4: A4, B4, C4, D4, E4 Lunes a Jueves

GRUPO E EQUIPO DOCENTE


TEORA: Prof. Mara Del Rosario Seplveda Justo, Departamento de Biologa Celular. M y J: 12-14h, V: 11-13 h Prof. Fadwa Jroundi, Departamento de Microbiologa en la 2 planta (de momento), fadwa@ugr.es. M y Mi: 11-14h Prof. Fernando Reyes Zurita, Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular I, ferjes@ugr.es. J y V: 10-13h

TEMARIO ASIGNADO AL DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA


TEMA 1. NORMAS DE SEGURIDAD EN LABORATORIOS DE

BIOLOGA.

Etiquetado de productos. Almacenamiento de residuos peligrosos. Clasificacin de agentes biolgicos segn su grupo de riesgo.

TEMA 2. TIPOS DE ORGANIZACIN CELULAR: EUCARIOTA Y

PROCARIOTA.

Tamao, formas, organizacin y estructuras celulares. Utilidad del calor hmedo y del calor seco para la esterilizacin de medios de cultivo, soluciones y materiales. El autoclave, el horno Pasteur, la incineracin y el flameado a la llama. Filtracin. Tipos de medios de cultivo segn su composicin, su finalidad y segn su estado fsico. Medidas directas e indirectas. Recuento de totales y recuento de viables.

TEMA 8. MTODOS DE ESTERILIZACIN.

TEMA 9. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLOGICOS

TEMA 10. TCNICAS DE RECUENTO DE MICROORGANISMOS.

BIBLIOGRAFA BSICA RELATIVA A MICROBIOLOGA


MADIGAN MT, MARTINKO JM, DUNLAP PV y

CLARK D. 2009. Brock Biology of Microorganisms, 12 Edicin. Benjamin Cummings / Prentice Hall. New Jersey. EEUU.
WILLEY J, SHERWOOD L y WOOLVERTON C.

2008. Prescott, Harley, and Klein's: Microbiology, 7 edicin. McGraw Hill Companies. EEUU.

TEMA 1.
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOLOGA

NDICE
Introduccin- Bioseguridad Objetivos de la bioseguridad Riesgo fsico Riesgo qumico Clasificacin de productos qumicos Etiquetado de productos Riesgo biolgico Definicin y clasificacin de agentes biolgicos Niveles de bioseguridad Seleccin de una cmara de seguridad biolgica

Medidas higinicas Precauciones universales para laboratorios Tratamiento de residuos

BIBLIOGRFA COMPLEMENTARA PARA ESTE TEMA

MANUAL DE SEGURIDAD EN LOS LABORATORIOS QUMICOS. Universidad de Granada Autor: Pedro Espinosa

INTRODUCCIN

RESPONSABILIDAD

RESPETO

SENTIDO COMN

Seguir siempre las instrucciones y normas establecidas, y las indicaciones del profesor/a

MEDIDAS PREVENTIVAS BSICAS


FORMACIN E INFORMACIN ACERCA DE LOS RIESGOS QUE SUPONE LA MANIPULACIN DE SUSTANCIAS QUMICAS y/o BIOLGICAS DOTACIN DE EQUIPOS DE PROTECCIN INDIVIDUAL E INSTRUCCIN ADECUADA SOBRE SU MANEJO AISLAMIENTO CUANDO EL PROCESO NO PRECISE PRESENCIA PRXIMA Y SU CONTROL PUEDA REALIZARSE A DISTANCIA

RESPECTO A LOS LOCALES DEL LABORATORIO


VENTILACIN GENERAL ADECUADA SEALIZACIN DE RIESGOS INSTALACIN DE SISTEMAS DE ALARMA PLAN DE MUESTREOS AMBIENTALES PERIDICOS

RESPECTO A LAS INSTALACIONES, LOS EQUIPOS Y LOS PROCESOS


SELECCIN DE LOS EQUIPOS ADECUADOS SUSTITUCIN DE LOS PRODUCTOS CUANDO SUS CARACTERSTICAS TOXICOLGICAS JUSTIFIQUEN LA BSQUEDA DE OTRAS SUSTANCIAS QUMICAS MODIFICACIN DEL PROCESO CUANDO SEA TCNICAMENTE POSIBLE AISLAMIENTO DEL PROCESO CUANDO LOS RIESGOS LO JUSTIFIQUEN EXTRACCIN LOCALIZADA CUANDO SEA PRECISO MANTENIMIENTO PREVENTIVO DE LAS INSTALACIONES Y EQUIPOS DE TRABAJO

INTRODUCCIN
Seguridad biolgica (o bioseguridad) es el

trmino utilizado para referirse a los principios, tcnicas y prcticas aplicadas con el fin de evitar la exposicin no intencional a patgenos y toxinas, o su liberacin accidental. Proteccin biolgica (o bioproteccin) se refiere a las medidas de proteccin de la institucin y del personal destinadas a reducir el riesgo de prdida, robo, uso incorrecto, desviaciones o liberacin intencional de patgenos o toxinas.

OBJETIVOS DE LA SEGURIDAD Y/O BIOSEGURIDAD


Disminuir el riesgo asociado al trabajo en el laboratorio por

todos aquellos eventos accidentales, que puedan afectar a la salud o la integridad fsica de quienes trabajan en l.
Minimizar el riesgo de contaminacin o alteracin del

ambiente.
TIPOS DE RIESGOS Riesgo fsico Riesgo qumico Riesgo biolgico

RIESGO FSICO
Est relacionado con todos aquellos factores que dependen

de las caractersticas fsicas de los cuerpos (carga, ruido, iluminacin, radiacin, temperatura, vibracin, etc), que pueden actuar sobre el individuo produciendo un efecto nocivo, de acuerdo a la intensidad y tiempo de exposicin a los mismos, entre otros. Riesgo elctrico y de incendio; riesgo por utilizacin de material de vidrio y otros
Todo aquel asociado a la electricidad y el uso de aparatos elctricos y mecheros; el asociado al uso de material de vidrio y otros materiales punzantes o cortantes

RIESGO DE INCENDIO
1. Sobrecarga de los circuitos elctricos 2. Mal mantenimiento de la instalacin elctrica, como cables mal aislados o con el aislante en mal estado 3. Tuberas de gas y cables elctricos demasiado largos 4. Equipo que se deja conectado sin necesidad 5. Equipo que no est diseado para el laboratorio 6. Llamas desnudas 7. Tuberas de gas en mal estado 8. Manipulacin y almacenamiento indebidos de material inflamable o explosivo 9. Separacin indebida de sustancias qumicas incompatibles 10. Aparatos que producen chispas en las proximidades de sustancias y vapores inflamables 11. Ventilacin indebida o insuficiente.

CONTROL DE RIESGO POR UTILIZACIN DE PROPANO


ANTES DE ABRIR LAS CANALIZACIONES GENERALES DEL GAS, CERCIORARSE QUE TODAS LAS TOMAS ESTN CERRADAS MANTENER EL MECHERO ENCENDIDO SLO EL TIEMPO NECESARIO NO CALENTAR NUNCA LQUIDOS INFLAMABLES DIRECTAMENTE CON LA LLAMA PUEDEN ARDER O EXPLOTAR! NO COLOCAR FRASCOS O BOTELLAS DE LQUIDOS INFLAMABLES CERCA DE FOCOS CALORFICOS, CON LLAMA O SIN ELLA PUEDEN ORIGINARSE EXPLOSIONES ASEGURARSE DE QUE QUEDA CERRADO EL MECHERO UNA VEZ TERMINADA LA TAREA

RIESGOS ASOCIADOS A LA UTILIZACIN DE APARATOS ELCTRICOS


ELECTROCUCIN POR CONTACTO DIRECTO O INDIRECTO GENERADO POR TODO APARATO QUE TENGA CONEXIN ELCTRICA INFLAMACIN O EXPLOSIN DE VAPORES INFLAMABLES POR CHISPAZ, O CALENTAMIENTO DEL APARATO ELCTRICO

ACCIONES PREVENTIVAS DE RIESGOS ELCTRICOS


NUNCA UTILIZAR UNA TOMA DE CORRIENTE EN PRESENCIA DE HUMEDAD COMO NORMA GENERAL, NO CONECTAR UN APARATO DE ALTO CONSUMO AL CIRCUITO DE ALUMBRADO ASEGURARSE DE QUE EL EQUIPO/APARATO QUE SE DESEA CONECTAR TRABAJE A LA TENSIN QUE OFRECE LA TOMA QUE SE DESEA UTILIZAR NO UTILIZAR NUNCA LOS LLAMADOS LADRONES O TRIPLES , NI TAMPOCO REGLETAS PARA CONECTAR VARIOS APARATOS A UNA MISMA TOMA DE LA RED UTILIZAR LOS PROLONGADORES SLO PARA TAREAS ESPORDICAS, Y SIEMPRE QUE NO SEA POSIBLE UTILIZAR UNA INSTALACIN FIJA

RIESGOS ASOCIADOS A LA UTILIZACIN DE MATERIAL DE VIDRIO


CORTES O HERIDAS producidos por la rotura del

material debido a su fragilidad mecnica, trmica, etc apertura de ampollas selladas, frascos con tapn esmerilado, llaves de paso, conectores, etc., que se hayan obturado material en operaciones realizadas a presin o a vaco

CORTES O HERIDAS como consecuencia del proceso de

EXPLOSIN, IMPLOSIN E INCENDIO por rotura del

MATERIAL DE VIDRIO
CONTROL DE RIESGOS
EXAMINAR EL ESTADO DE LAS PIEZAS ANTES DE SU UTILIZACIN Y

DESECHAR LAS QUE PRESENTEN EL MS MNIMO DEFECTO

DESECHAR EL MATERIAL QUE HAYA SUFRIDO UN GOLPE DE CIERTA

CONSIDERACIN

EFECTUAR LOS MONTAJES CON ESPECIAL CUIDADO INTRODUCIR DE FORMA PROGRESIVA Y LENTAMENTE LOS BALONES

DE VIDRIO EN LOS BAOS CALIENTES

EVITAR QUE LAS PIEZAS QUEDEN ATASCADAS COLOCANDO UNA CAPA

FINA DE GRASA DE SILICONA ENTRE LAS SUPERFICIES DE VIDRIO

UTILIZAR SIEMPRE QUE SEA POSIBLE TAPONES DE PLSTICO PARA DESATASCAR LAS PIEZAS UTILIZAR GUANTES GRUESOS Y

PROTECCIN FACIAL O BIEN REALIZAR LA OPERACIN BAJO CAMPANA CON PANTALLA PROTECTORA

RIESGO QUMICO
Probabilidad de que un contaminante qumico entre en contacto con un

receptor, con consecuencias adversas para la salud de las personas o para el medio ambiente.
Para evitar el riesgo qumico hay que conocer las caractersticas de

peligrosidad asociadas a los compuestos qumicos para saber como trabajar con ellos, almacenarlos, transportarlos, descartarlos, etc.
El almacenamiento de los productos qumicos debe hacerse de acuerdo

con la normas establecidas: armarios adecuados, almacenamiento independiente segn que tipo de productos etc.
En los casos en que sea necesario deber trabajarse con campanas

extractoras de gases.

Vas de exposicin
1. Inhalacin de los vapores de ciertos disolventes puede tener efectos txicos 2. Contacto 3. Ingestin 4. Jeringuillas 5. Heridas en la piel.

CLASIFICACIN DE LOS PRODUCTOS QUMICOS SEGN LAS CARCTERSTICAS DE PELIGROSIDAD

Txicos: Citocalacina CATEGORA DE Corrosivos: Cloro Inflamables Explosivos: Azidas,

SUSTANCIAS

SUSTANCIAS INCOMPATIBLES Dixido de carbono, hidrocarburos clorados, agua Amoniaco, acetileno, hidrocarburos Agentes oxidantes, como los cidos crmico y ntrico, los perxidos o los permanganatos

Metales alcalinos, como el sodio, potasio, cesio y litio Halgenos

teres, cido perclrico, cido pcrico y los picratos Genotxicos Reactivos Radioactivos

cidos actico, sulfhdrico y sulfrico, anilina, hidrocarburos

ETIQUETADO DE PRODUCTOS
OBJETIVOS DE LA ETIQUETA
IDENTIFICACIN DEL PRODUCTO. IDENTIFICAR AL RESPONSABLE DE SU COMERCIALIZACIN. APORTAR INFORMACIN SOBRE LOS RIESGOS QUE PRESENTA, PRINCIPALMENTE DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA SEGURIDAD Y DE LAS VIAS DE ENTRADA EN EL ORGANISMO EN CASO DE EXPOSICIN

ETIQUETADO DE PRODUCTOS
La informacin que debe contener la etiqueta, redactada en el idioma oficial del Estado, es la siguiente: Nombre de la sustancia o del producto Nombre, direccin y telfono del fabricante o importador Smbolos e indicaciones de peligro, para destacar los riesgos principales Frases R, que permiten complementar e identificar determinados riesgos mediante su descripcin. Frases S, que, a travs de consejos de prudencia, establecen medidas preventivas para la manipulacin y utilizacin.
FICHA DE DATOS DE SEGURIDAD (FDS): debe facilitarse obligatoriamente la primera vez que se adquiere un producto qumico peligroso: Proporcionar datos que permitan identificar el producto Informar sobre los riesgos y peligros del producto Formar al usuario

ETIQUETA DE UN PRODUCTO QUMICO (un ejemplo)

inflamable

RADIACTIVO

ETIQUETADO DE PRODUCTOS

Manipulacin de productos qumicos


La manipulacin de productos qumicos implica conocer su peligrosidad.

Las operaciones que pueden conllevar peligrosidad son:


Trasvase y utilizacin de productos en general Almacenamiento de productos Operaciones de carga y descarga Transporte

Cualquiera de estas operaciones exige tener en cuenta la compatibilidad

de los productos; de la cual, depender su manejo, traslado y almacenamiento.

PREVENCIN DE RIESGO QUMICO

Utilizar siempre los Equipos de Proteccin Individual (EPI S) adecuados a la operacin que se est realizando y a los productos usados. Utilizar siempre vitrinas de gases para todas aquellas operaciones en las que se manipulan sustancias muy txicas, carcingenas, teratgenas, mutgenas y alergnicas, o para aquellas operaciones que generen vapores o que incluyan manipulacin de sustancias voltiles. Trabajar siempre con los sistemas de extraccin y renovacin mecnica de aire activados. El almacenamiento de productos debe realizarse en las zonas especialmente destinadas para ello. Las cantidades grandes podrn ser almacenadas en las zonas comunes destinadas a dicho uso.

RIESGOS BIOLGICOS
Probabilidad de que un material de origen biolgico (o sinttico, que imita entidades biolgicas) entre en contacto con un receptor (personas, animales y plantas), con consecuencias adversas para su salud o para el medio ambiente. AGENTES DE RIESGO BIOLOGICO Organismos vivos (virus, bacterias,hongos..) Organismos patgenos Material gentico de cualquier origen Tejidos y fluidos de organismos vivos que porten o puedan portar ese material.

DEFINICIN Y CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS

En la Directiva del Consejo sobre proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin de los trabajadores a agentes biolgicos durante el trabajo se definen stos como: Los microorganismos, los cultivos de clulas y los endoparsitos humanos susceptibles de originar cualquier tipo de infeccin, alergia o toxicidad

DEFINICIN Y CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS


1. Agentes biolgicos vivos 2. Productos derivados de los mismos Ambos pueden generar una enfermedad como consecuencia de la exposicin de los trabajadores a tales agentes. El concepto de agente biolgico incluye, pero no est limitado, a: bacterias, hongos, virus, endoparsitos humanos, productos de recombinacin, cultivos celulares humanos o de animales, y los agentes biolgicos potencialmente infecciosos que estas clulas puedan contener, priones y otros agentes infecciosos Entre los productos derivados de los agentes biolgicos y que, transmitidos fundamentalmente por va area, pueden generar trastornos de tipo txico, alrgico o irritativo se incluyen: Micotoxinas, endotoxinas, ergosterol, 1,3-glucanos

DEFINICIN Y CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS


Segn Real Decreto 664/1997 de 12 de mayo (BOE n 124, de 24 de mayo) sobre la proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos durante el trabajo se clasifican: a) Agente biolgico del grupo 1: aquel que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre b) Agente biolgico del grupo 2: aquel que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz c) Agente biolgico del grupo 3: aquel que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo generalmente una profilaxis o tratamiento eficaz d) Agente biolgico del grupo 4: aquel que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz

DEFINICIONES Y CONCEPTOS RELACIONADOS CON EPIDEMIOLOGA DE LAS ENFERMEDADES OCASIONADAS POR AB


Microorganismo: entidad microbiolgica capaz de

reproducirse o transferir material gentico???


Cultivo celular: resultado del crecimiento in vitro

de clulas obtenidas de organismos multicelulares


Agente etiolgico: ser vivo o producto derivado

que causa una enfermedad. Para una enfermedad, la etiologa es su causa principal identificada

REQUERIMIENTOS DE LOS LABORATORIOS SEGN EL NIVEL DE CONTENCIN:

SE CLASIFICAN EN CUATRO NIVELES DE

SEGURIDAD BIOLGICA, Y LOS DEL NIVEL DE CONTENCIN 1 NO ESTN RECOGIDOS EN EL REAL DECRETO 664/1997, YA QUE EL TRABAJO QUE SE LLEVA A CABO EN ELLOS NO SUPONE RIESGO SIGNIFICATIVO DE ENFERMEDAD PARA UN TRABAJADOR SANO

NIVELES DE BIOSEGURIDAD
Combinacin de prcticas y tcnicas de laboratorio, equipos de seguridad e instalaciones especficas, que constituyen las condiciones bajo las cuales puede trabajarse en forma segura con agentes de riesgo biolgicos. Estn en relacin con:
Caractersticas del material biolgico Tipo de trabajo que se realizar Vas de exposicin

NIVELES DE BIOSEGURIDAD 1
Laboratorios universitarios y laboratorios que trabajan con cepas de microorganismos viables, que no sean generadores de enfermedades en humanos adultos sanos. Mesas abiertas. No requiere equipamiento de contencin ni diseo especial de infraestructura.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD 2
INSTALACIONES que trabajen con agentes de riesgo potencial

moderado para el personal y el medio ambiente; puede causar enfermedades graves, pero solo se transmite por va sangunea, no inhalatoria.
Procedimientos que pueden generar aerosoles o gotitas infecciosas

se llevan a cabo en cabinas de seguridad biolgica o en otros equipos de contencin fsica.

Acceso limitado al personal autorizado. Precauciones extremas con elementos cortantes contaminados.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD 3
Instalaciones que trabajen con agentes que pueden producir una enfermedad grave o potencialmente letal como resultado de la exposicin por va de inhalacin.
Acceso limitado al personal autorizado. Precauciones extremas con procedimientos que pueden

generar aerosoles. Todo procedimiento con estos materiales infecciosos se realiza en cabinas de bioseguridad u otros dispositivos de contencin fsica Caractersticas de diseo e ingeniera especiales para la contencin.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD 4
Agentes peligrosos y exticos que poseen un riesgo individual alto de producir infecciones letales, transmitidas por aerosoles y para las que actualmente no se cuenta con vacunas ni tratamiento.
El acceso al laboratorio es controlado estrictamente. El laboratorio est aislado de otras reas. Todas las actividades se restringen a los gabinetes de

seguridad biolgica.

Gabinete de Seguridad Biolgica de Clase I

A. Apertura frontal B. Ventana C. Filtro de Escape HEPA D. Pleno de Escape.

HEPA: filtracin de partculas areas de gran eficiencia (del ingls High-Efficiency Particulate Air).

Gabinete de Seguridad Biolgica Clase II, Tipo A


A. Apertura Frontal B. Ventana C. Filtro de escape HEPA D. Pleno posterior E. Filtro HEPA de Suministro F. Ventilador 1- Un ventilador interno (F) succiona aire de la sala (aire de entrada) hacia la cmara a travs de la abertura frontal y lo dirige hacia la rejilla frontal de entrada. 2- Ese aire pasa a continuacin por un filtro HEPA, 3- Desciende verticalmente hacia la superficie de trabajo. Las CSB de clase II pueden utilizarse para trabajar con agentes infecciosos de los grupos de riesgo 2 y 3, y tambin con agentes infecciosos del grupo de riesgo 4, siempre que se utilicen trajes presurizados

Gabinete de Seguridad Biolgica Clase II, Tipo B2

A.Apertura Frontal B.Ventana C.Filtro HEPA de Escape; D.Filtro HEPA de Suministro E. Pleno de Escape con Presin Negativa; F. Pantalla de Filtro. G. Filtro HEPA para el aire de entrada

Nota: El filtro de carbn en el sistema de escape no se muestra en el dibujo. El escape del gabinete debe estar conectado con el sistema de escape del lugar.

Modelo de Mesa de Clase II, Tipo B3 GSB.

A. B. C. D. E. F.

Apertura Frontal Ventana Filtro de Escape HEPA Filtro HEPA de Suministro Pleno de Presin Positiva Pleno de Presin Negativa

Nota: El escape del gabinete debe estar conectado con el sistema de escape del lugar.

Gabinete de Seguridad Biolgica Clase III.


Es el que proporciona mayor nivel de proteccin personal y se utiliza para trabajar con agentes del grupo de Riesgo 4. A. Inserciones para guantes con aros circulares para instalarles guantes del largo del brazo al gabinete B. Ventana C. Filtro de Escape HEPA D. Filtro HEPA de Suministro E. Caja para Autoclave de Doble Extremo

Seleccin de una cmara de seguridad biolgica (CSB) segn el tipo de proteccin necesaria
Tipo proteccin Proteccin personal, microorganismos de los grupos de riesgo 1 a 3 Proteccin personal, microorganismos del grupo de riesgo 4, laboratorio para trabajar con cmara de guantes Proteccin personal, microorganismos del grupo de riesgo 4, laboratorio para trabajar con trajes especiales Proteccin del producto Proteccin contra cantidades mnimas de sustancias qumicas/radionclidos voltiles Proteccin contra sustancias qumicas/ radionclidos voltiles Seleccin de la CSB Clase I, clase II, clase III Clase III

Clase I, clase II

Clase II, clase III slo si incluye flujo laminar Clase IIB1, clase IIA2 ventilada hacia el exterior Clase I, clase IIB2, clase III

MEDIDAS HIGINICAS
Prohibido comer, beber y fumar en los

laboratorios Usar bata blanca Evitar tocarse los ojos, la boca Lavarse las manos antes de abandonarlo

PRECAUCIONES UNIVERSALES PARA LABORATORIOS


Acceso limitado al laboratorio. Utilizar las barreras de proteccin primaria

adecuadas. Bata. Guantes. Proteccin facial o/y ocular: gafas o mscaras. No pipetear con la boca. No oler los reactivos y materiales. No beber, comer, manipular lentes de contacto El cabello debe estar recogido

RESIDUOS
La nocin que tenemos de un residuo es la de un material que su productor o

poseedor destina al abandono por carecer de valor para l en el contexto en que es producido.

La Ley de residuos 10/1998, de 21 de abril, da la siguiente definicin: cualquier

substancia u objeto que figure en el anejo de esta Ley, del cual su poseedor se desprenda o del que tenga la intencin u obligacin de desprenderse. En todo caso tendrn esta consideracin los que figuran en el Catlogo Europeo de Residuos (CER), aprobado por las instituciones Comunitarias .
Desechos no contaminados Clases de residuos generados en el laboratorio: asimilables a urbanos. Residuos asimilables a urbanos Material contaminado reutilizable Residuos peligrosos Material contaminado no reutilizable. Residuos radiactivos Objetos punzantes y cortantes: agujas hipodrmicas, bisturs, cuchillas, vidrio GESTIN DE RESIDUOS EN EL roto, pipetas Pasteur etc . LABORATORIO Desechos anatmicos: tejidos humanos y animales.

ELIMINACIN DE RESIDUOS
Cada laboratorio dispondr de informacin e instrucciones

para la eliminacin de los residuos en el laboratorio. As mismo, deben ser consideradas en todo momento las disposiciones legales existentes a nivel local para la eliminacin de residuos y desechos.

La eliminacin correcta de residuos es, adems de un

compromiso ecolgico ineludible, una obligacin que todos debemos cumplir.

RESIDUO
Ordinarios o comunes Residuos slidos de oficinas, pasillos, reas comunes, cafeteras y dems reas de uso general. Residuos de riesgo biolgico infecciosos Residuos que contienen microorganismos y recombinantes como sus toxinas, con el suficiente grado de virulencia y concentracin que pueden producir una enfermedad infecciosa en huspedes susceptibles; que no pueden ser sometidos a una desactivacin de alta eficiencia. Residuos de animales Animales de experimentacin, inoculados con microorganismos patgenos y/o provenientes de animales portadores de animales infectocontagiosos. Punzo Cortantes Agujas, cuchillas, resto de ampolletas, pipetas, lminas de bistur o vidrio y cualquier otro elemento que por sus caractersticas punzo cortantes pueda lesionar y ocasionar un riesgo infeccioso. Residuos cidos o bsicos Residuos lquidos provenientes de sustancias con carcter cido o alcalino.

DISPOSICIN Y/O DESACTIVACIN


Son recolectados por la dependencia correspondiente en el ramo de recoleccin de basura. Desactivacin previa en una autoclave. Se envan luego a incineracin.

Se mantienen congelados hasta que se envan luego a incineracin. Indicacin: es importante no mezclar otros desechos que no sean de residuos animales, tales como material de laboratorio, agujas, etc. Se almacenan en los recipientes para punzo cortantes, despus son recolectados por el personal autorizado y como disposicin final, estos residuos son incinerados.

Estos residuos se deben neutralizar con una base o cido dbil segn sea el caso, hasta obtener un pH cercano a la neutralidad y verter al alcantarillado si no contiene una sustancia txica.

RESIDUO
Solventes Residuos de solventes como hidrocarburos, alcoholes, steres, cetonas, organoclorados, entre otros.

DISPOSICIN Y/O DESACTIVACIN


Si es posible se puede destilar y reutilizar en el laboratorio; si no es posible se debe entregar a una empresa especializada para que los recupere o lo incinere. Si no es posible hacer un tratamiento o desactivacin de estos residuos, se deben entregar a una compaa para que los disponga. No se deben diluir estos residuos con el fin de cumplir la norma.

Residuos de compuestos inorgnicos. Corresponde a residuos de sustancias que contengan concentraciones de aniones como nitritos, nitratos, amonio, sulfatos, cloruros, entre otras, con concentraciones elevadas. Metales pesados Se hace referencia a cualquier residuo lquidos que contenga metales como mercurio, plomo, cadmio, nquel, cobalto, estao, bario, cromo, antimonio, vanadio, zinc, plata, selenio, arsnico, entre otros.

Segn la naturaleza de cada uno de estos elementos se puede hacer un tratamiento por precipitacin o floculacin de los metales. Si no se hace un tratamiento previo, se deben entregar a una empresa especializada para que los disponga. Los lodos resultantes de la precipitacin se deben desactivar mediante encapsulamiento con cal u otro tratamiento adecuado y enviarlos a confinamiento.