CATALASA, PEROXIDASA Y POLIFENOLOXIDASA EN PITAYA AMARILLA (Acanthocereus pitaja ya): MADURACIÓN Y SENESCENCIA LUCÍA ESTRELLA BAQUERO DUARTE, JHON ALEXANDER

CASTRO RIVERA, CARLOS EDUARDO NARVÁEZ CUENCA Materiales y Métodos Los frutos de pitaya amarilla se adquirieron en los principales mercados de Bogo tá, Colombia, en estado verde-pintón (verde 90%-amarillo 10%), visiblemente sanos. F ueron desinfectados con hipoclorito de sodio al 10%, y almacenados en condicione s normales de maduración. Se evaluó el CO2 producido por los frutos a través de la técni ca cromatográfica. La cuantificación se hizo por el método de estándar externo empleando CO2 adquirido en AGA-FANO®. La intensidad respiratoria se reportó como mg de CO2 kg-1 de fruta h-1. La técnica de extracción simultánea para las tres enzimas se basó en reportes previos, l os polvos de acetona permitieron que el extracto presentara una alta actividad c on una mayor estabilidad, además de evitar la inactivación enzimática durante la extra cción. Los polvos de acetona fueron resuspendidos en 25 mL buffer de fosfatos 200 mM, pH 6,8 bajo agitación continua por 24 h a 2 °C. Posteriormente, la suspensión fue centrifugada a 12.000 x g durante 20 min a 2 ºC; e l sólido se desechó, el sobrenadante fue mantenido a 2 ºC durante máximo 2 h, tiempo en el que se efectuó la cuantificación de proteína y de actividad enzimática. Para cuantifi car la proteína en los extractos enzimáticos se empleó el método de Bradford modificado por Zor y Sellinger (1996), en el que se mide la absorbancia a 450 y 590 nm y se interpola la relación entre las dos absorbancias en la curva de calibración. Para la medida de actividad CAT se empleó el método permanganométrico (Ulrich, 1974). La mezcla de reacción con volumen final de 1 mL, contenía 100 L de extracto enzimático (24 – 40 g de proteína), H2O2 500 mM preparado en buffer fosfatos 200 mM pH 7,0; esta mezcla se mantuvo a 40 °C. La actividad POD fue estimada por la medida del incremento de la absorbancia a 4 70 nm (Halpin et al., 1989) en un espectrofotómetro Genesys 5 UV-VIS cada 5 s dura nte 120 s. La celda de medida, para un volumen final de 2 mL, contenía 200 L de ext racto enzimático (48–80 g de proteína) y una mezcla de guaiacol/H2O2 40mM/20mM en buffe r de fosfatos pH 5,5; esta mezcla se mantuvo a 25 °C. Para medir la actividad de PFO se efectuó lectura de absorbancia a 475 nm (Sánchez F errer et al., 1995) en un espectrofotómetro Genesys 5 UV-VIS cada 5 s durante 120 s. Reactivos químicos empleados 1 – Acetona, polvos de acetona: Características: Fórmula: CH3COCH3 M.=58,08 Identificación de riesgos Fácilmente inflamable. Irrita los ojos. La exposición repetida puede provocar sequed ad o formación de grietas en la piel. La inhalación de vapores puede provocar somnol encia y vértigo. Mantener alejado de fuentes de ignición. Los vapores son más pesados que el aire, po r lo que pueden desplazarse a nivel del suelo. Puede formar mezclas explosivas c on aire. Riesgo de inflamación por acumulación de cargas electrostáticas. Precauciones individuales: No inhalar los vapores. Procurar una ventilación apropi ada. Precauciones para la protección del medio ambiente: Prevenir la contaminación d el suelo, aguas y desagües. Métodos de recogida/limpieza: Recoger con materiales abs orbentes o en su defecto arena o tierra secas y depositar en contenedores para r esiduos para su posterior eliminación de acuerdo con las normativas vigentes. Limp iar los restos con agua abundante. 2 – CO2 Características: Estado físico a 20°C y P atm. : Gas. Color : Incoloro Olor : In odoro Masa molecular : 44,01 g/mol Punto de fusión [°C] : -56,6 Punto de ebullic ión [°C] : -78,5 Identificación de riesgos: Gas licuado. EL contacto con el gas licuado puede prod ucir “quemaduras” por frío en la piel o daños en los ojos. La sobre exposición incrementa la frecuencia respiratoria y cardiaca y puede conducir a estado de coma y muerte . Gas asfixiante - Puede causar asfixia por desplazamiento de oxígeno. Primeras vía s de exposición: Altas concentraciones desplazan al oxígeno del ambiente y causa la

anticorrosivo. Órganos d e blanco: ojos. Advertencias y precauciones: No protege de infección por meningococo de serotipo diferente al . diarrea y Puede Causar calambres. Ingestión: de bajo peligro para manejo industrial. EFICACIA DE SEROCONVERSION Y DURACION DE LA INMUNIDAD DE LA VACUNA FRENTE AL MEN INGOCOCO SEROGRUPO C.05 no disponibles. Efectos crónicos/Cancerígenos: N inguno Material biológico empleado Frutos de pitaya amarilla: planta rústica xerofítica de la familia de las cactáceas. Durante el experimento: Manejar con cuidado la acetona. tres. Fosfato de Sodio Dibásico 0. en niños mayores de 5 años. o riginaria de América tropical. No presenta ninguna peligrosi dad para la salud significativa. Rutas de exposición: Exposición ocular: Contacto puede ocasionar irritación transitori a. La primera previa a la vacunación y las re stantes después de la misma. Contacto de la piel: Puede Causar Irritación leve. En niños menores de 5 años se obtendrán cuatro muestras d e sangre. desionizada Balance no disponible.Lactosa (excipiente de liofilización) Contraindicaciones: Hipersensibilidad. ESTUDIO INCLUIDO DENTRO DE LA EVALUACION DE LA VACUNACION MASIVA DE LA POBLACION DE LA COMUNIDAD DE MADRID COMPRENDIDA ENTRE 18 MESES Y 19 AÑOS DE EDAD.0 Identificación de peligros: No tóxico. guantes. ut ilizar EPI (bata. Inhalación: No es peligroso por inhalación. Inge stión: Náusea. el cual determina la concentración de anticuerpo s contra bacterias. conjugados con peroxidasa y revelados con TMB) para determinación de anticuerpos totales antipolisacárido C. ROSA RAMÍREZ FERNÁNDEZ Materiales y Métodos Muestras de sangre en pacientes con grupos de edades comprendidos en: 18 meses a 4 años. y la técnica de ELISA (anticuerpos monoclonales anti IgG. así como un cubre bocas para evitar inh alaciones peligrosas). Áreas de la colada del contacto con agua. Bajas concentraciones de CO2 pueden causar agitación respirat oria y dolor de cabeza 3 – Buffer de fosfatos Características: Agua. siempre y cuando ésta no se ubique por debajo de la temperatura crítica. IgM e IgE humana. Reacción febril grave y aguda. Se analizará con el Ensayo Bactericida (suero de conejo para obtener complemento). zapato cerrado. puede causar reacción alérgica. Material radiactivo: No se utilizó Medidas de bioseguridad para la realización de experimentos Antes del experimento: Realizar medidas de esterilización de instrumental y asegur arse de trabajar en condiciones de asepsia. Contacto visual: Puede Causar Irritación leve. Inhalación: bajo riesgo en el manejo industrial. esteril izar el material de laboratorio utilizado. Después del experimento: Desechar los residuos en contenedores apropiados.1. Las muestras de sangre se centrifugan para la obtención de suero y separación en alícuotas. Vómito. 10 a 19 años. piel. dependiendo de las condiciones agroclimáticas y del manejo q ue se dé al cultivo. Las plantaciones pueden llegar a tener una vida útil superior a los 10 años.muerte por asfixia. Albúmina sérica bovina Identificación de peligros: No han sido investigados. 5 a 9 años. Nivel de bioseguridad del laboratorio: II Conclusiones: En los resultados obtenidos se observa que la disminución en la temp eratura de almacenamiento retarda la maduración. ya que es inflamable. 50 μg Neisseria meningitidis grupo C …………………………………………………… 50 μg . Fosfato de Potasio Monobásico <1. reacción alérgica. Soluciones y Reactivos químicos empleados: No reportados Material biológico empleado 1 – Vacuna antimeningocócica Polisacárido purificado liofilizado de Neisseria meningitidis grupo A…………………………………………………….95 . que hayan aceptado previamente ser vacunados con la vacuna antimeningocócica A+C. Contacto con la piel: Puede causar sensibilización.

Storage Color Code: Green (General Storage) Identificación de riesgos: Ingestión e inhalación puede ocasionar irritación en las memb ranas mucosas. comprendido entre el 1 de marzo de 1996 y el 31 de abril de 2000 se procesaron 123 muestras de líquido cefalorraquídeo de 114 pacientes pediátricos con sospecha clínica de meningoencefalitis vírica o interés en descartar la etiología herpética. PROPER GLO VES. Flammability Rating: 0 – None. asegurar que los tubos de micro centrífuga estén correc tamente cerrados. consultar al médico en caso de mal estar. Incendio= 0. ARACELI GONZÁLEZ-CUEVAS.19 mmol/l de dTTP y 0.21 Health Rating: 1 – Slight. sodium form. Nunca administrar vía IV. Inhalación: puede ocasionar irr itación del tracto respiratorio.180 m wet bead size. Prever p osible reacción anafiláctica.5 mmol/l de MgCl2.55 g/mol Identificación de riesgos: No inflamable. AUREA MIRA Y CRISTINA LATORRE Materiales y Métodos Durante el período de estudio. Los ADN extraídos fueron amplifica dos seleccionando los primers marcados con digoxigenina que amplifican un produc to de 91 pares de bases de una región altamente conservada del gen ADN polimerasa común a herpes 1 y 2. Se añadieron 20 l del extracto de ADN a 80 l de mezcla maestra q ue contenía 10 mmol/l de Tris-HCL. 0. Peso molecular: 157. 4 – MgCl2: Cloruro de Magnesio Peso molecular: 95. HPR/TMB (ELISA) Material radiactivo: No se utilizó Medidas de bioseguridad para la realización del experimento: Antes: Utilizar EPI al tomar muestra de sangre de los pacientes. Reactividad= 0 Rutas de exposición: Inhalación: Tomar aire fresco. Contacto ocular: Lavar con agua abundante. Identificación de riesgos: a la salud= 0. Riesgo de respuesta ineficaz en pacientes con inmunodeficiencia. FRANCISCO JOSÉ CAMBRA.A o C. 0. Tra bajar en condiciones de asepsia. Utilizar guantes para evitar el contacto con las muestras. Soluciones y Reactivos Químicos empleados 1 – Resina Chelex 100: Composición 500 g. ojos y mucosas.01 m mol/l de DIG-dUTP. almacenarlas en refrigeración y debidamente rotuladas. cation exchange resin. TERESA JUNCOSA. LAB COAT. 3 – KCL: Cloruro de Potasio Peso molecular: 74. Lab Protective Equip: GOGGLES. Después: Esterilizar y desechar los residuos en contenedores especiales para muest ras biológicas. Ingesta: Inducir vómito y llamar al médico.2 mmol/l de dGTP. IgM e IgE humana. contribuirán a las medidas de vacunación masiva a la toma de medidas d e control en poblaciones que así lo requieran. 300–1. Prolongada exposición puede ser tóxica para la sangre y el sistema cardiovascular. 50 mmol/l de KCL. 2 – Muestras de sangre 3 – Suero de conejo (Ensayo Bactericida) 4 – Anticuerpos monoclonales anti-IgG.5 mol/l de cada primer y una unidad de Taq polimerasa. Puede causar irritación en caso de contact o con la piel. 0. Material biológico empleado: . ~3. así como la duración de la inmunidad. Las propiedades tóxicas de esta sustancia no han si do investigadas. Nivel de bioseguridad del laboratorio: III Conclusiones: El estudio de la eficacia de la seroconversión. Ingestión: puede oc asionar irritación gastrointestinal con náusea y vómito. 1% cro sslinkage. Las muestras de LCR se procesaron inmediatamente después de la e xtracción o se conservaron a 4 °C durante un máximo de 3 días. Reactivity Rating: 1 – Sligh t.2 mmol /l de dATP. 0. 50–100 dry mesh size. Piel: Generalmente el producto no causa irritación.HCl. 1. Contact Rating: 1 – Slight.2 mmol/l de dCTP. DIAGNÓSTICO RÁPIDO DE LA MENINGOENCEFALITIS HERPÉTICA MEDIANTE PCR CARMEN MUÑOZ-ALMAGRO. Durante: En la centrifugación.60 Identificación de riesgos: Puede causar irritación de pies y ojos. Se añadieron 50 l de LCR a 150 l de una solución de resina Chelex 100 al 20%. 0.500 MW limit. 2 – Tris-HCL: Tris (hydroxymethyl)aminomethane HCl Fórmula molecular:C4H11NO3.

Durante: Usar equipo de protección individual para evitar el contacto con las mues tras. Reactivos químicos empleados: No se especifica Material biológico empleado 1 – Muestras de sangre de los pacientes 2 – Muestras de heces de los pacientes 3 – Antígenos provenientes de Toxocara (ELISA) para detectar Ac Material radiactivo: No utilizado Medidas de bioseguridad para la realización del experimento Antes: Como se trabajará con material biológico. mediante el méto do estandarizado en el IMTDAC en estudio previo. dTTP 3 – Taq polimerasa Material radiactivo: No se utilizó Medidas de bioseguridad para la realización del experimento Antes: Como se trabajará con material biológico. Nivel de bioseguridad del laboratorio: III Conclusiones: La aplicación de esta técnica de PCR. cuidar cada uno de los reactivos y las cantidades tomadas. ALINA HUIZA. SUSANA JIMÉNEZ. utilizar sólo material estéril. incrementando la calidad de la asistencia a los p acientes. en su defecto. Durante: Trabajar en condiciones de esterilidad al hacer la PCR. Después: Esterilizar los residuos y desecharlos en contenedores apropiados . Después: Esterilizar y desechar residuos en contenedores apropiados. con un formato sencillo y rápido. TOXOCARIOSIS HUMANA: SEROPREVALENCIA EN POBLACIÓN DE LIMA MEDIANTE LA TÉCNICA DE ELI SA YRMA ESPINOZA. Las muestras de suero fueron procesadas mediante la técn ica de ELISA para detectar anticuerpos específicos contra Toxocara. También. dCTP. CARLOS SEVILLA. la exclusión de la etiología por herpes si mple de la meningoencefalitis. PEDRO HUAPAYA. adecuado a la rutina diaria de un laboratorio de microbiología. que fueron procesadas para buscar parásitos intestinale s que pudieran originar reacciones cruzadas en el examen serológico. usar EPI al tratar las muestras y r otularlas correctamente. que se dividió en 2 alícuotas: 5 mL para la o btención de suero y 3 mL con anticoagulante para realizar el recuento de leucocito s y la fórmula diferencial. refriger ar la Taq polimerasa antes y después de su uso.1 – Muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR) 2 – dATP. contribuye a reali zar un diagnóstico precoz o. se obtuvo una muestra de sangre de a proximadamente 8 mL de cada individuo. CÉSAR NÁQUI RA Materiales y Métodos Se examinó 553 individuos de diversas edades. usar EPI al tratar las muestras y r otularlas correctamente. dGTP. se solicitó dos muestras d e heces de cada individuo.

Nivel de bioseguridad del laboratorio: III Conclusiones Podemos concluir que la toxocariosis humana es frecuente en la población de Lima ( 23. .3%) y la mayoría de los participantes manifestó ser asintomáticos. Es necesario des arrollar programas de difusión para detectar precozmente la infección. así como para p revenirla.

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