CENTRO DE BIOCIENCIAS CAMPUS IV

VARIABILIDAD FLORAL DE Jatropha curcas L. DEL SUR DE MÉXICO TESIS
QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE

INGENIERO BIOTECNÓLOGO
PRESENTA

EDILMA PÉREZ CASTILLO
DIRECTOR DE TESIS

DR. ISIDRO OVANDO MEDINA

ASESOR

DR. MIGUEL SALVADOR FIGUEROA

TAPACHULA; CHIAPAS, JUNIO 2012.
   

   

   

DEDICATORIA Gracias primeramente a ti Dios padre; por la vida, la inteligencia que en mi has puesto, por darme más de lo que necesito, por los momentos buenos y malos ya que de ellos aprendemos más de lo que esperamos. Por la oportunidad de concluir una fase más en mi vida. A mis padres; Ignacio Pérez Muñoz y Vidalicia Castillo Yoc, quienes me dieron la vida, gracias por el apoyo incondicional, por la confianza que depositaron mí, que sin esperar nada a cambio me dieron todo, porque siempre me guiaron por un camino de rectitud y me enseñaron también que es lo mejor, por el gran esfuerzo y sacrificio que hicieron para concluir una fase más en mi vida este logro también es de ustedes. Gracias porque a ustedes les debo todo lo que soy y sé que nunca podre recompensárselos….Los amo papitos. A mis hermanos; Marlin, Neydali y José Ignacio, por su inmenso cariño, por los bellos momentos que han compartido conmigo desde la infancia, por apoyarme siempre con muestras de afecto y darme ánimos para alcanzar esta meta tan importante en mi carrera profesional. Gracias hermanitos los quiero mucho!!! A mi hermosa sobrina Renata por llenarme de felicidad con su llegada. A mis abuelitos Juan Antonio y Mercedes por sus consejos y quienes me han heredado el tesoro más valioso que puede dársele a un hijo "sus padres". A Mayrover Santiago, porque eres la persona más importante en mi vida, gracias mi amor por lo bellos momentos que has compartido conmigo por llegar a mi vida y estar conmigo en esta fase tan importante, por darme siempre lo mejor de ti sin esperar nada a cambio, por dedicarme tiempo e impulsarme alcanzar mis metas. A mis amigos y compañeros de grupo Laura, Crisely, Karina, Tirzo, Gaby, Tort, Ricardo, Fernando y Jorge, por esos momentos inolvidables porque siempre estuvimos juntos en las

   

buenas y en las malas. De manera muy especial gracias Lau, Cris y Kary por su amistad incondicional. A mis amigos de laboratorio, Laura, Crisely, Tirzo, Calderon, Alex, Melesio, Giezy, Frank, Santos, Leny, Leydi, Gerardo, Sandy, Pablo y Magaña, Obed, porque de una u otra forma compartieron conmigo esta experiencia.

Y a todas aquellas personas que comparten conmigo este triunfo. Gracias.

   

AGRADECIMIENTOS A la Universidad Autónoma de Chiapas y al Centro de Biociencias por permitirme formar parte de su comunidad estudiantil, al laboratorio de Investigación por dejarme ser parte de grupo de trabajo. Quiero agradecer sinceramente aquellas personas que compartieron sus conocimientos conmigo para hacer posible la conclusión de esta tesis, en especial al Dr. Isidro Ovando Medina, por haber tenido paciencia y confianza en mí, por el esfuerzo, tiempo y dedicación para culminar este trabajo, gracias por sus conocimientos adquiridos. A los doctores Miguel Salvador Figueroa y Ma. De Lourdes Adriano Anaya, por las asesorías y aportaciones que me brindaron conocimientos. A M.B Manuel Rabanales, porque siempre estuvo al pendiente de los avances obtenidos y ofreciéndome su ayuda para tener este logro. Al M. C. Alfredo Vázquez Ovando por su colaboración y comentarios positivos para la elaboración de esta tesis. A la I.B.T Gemelli, M.B Rito, M. B. Gamaliel, por la amistad brindada y por el apoyo recibido durante esta estancia. A mis profesores y profesoras…. Sus forma de enseñar, todas diferentes y características, me incentivaron en muchos sentidos a seguir adelante y sin ustedes esto no hubiese sido posible. A mis padres por el cariño y apoyo moral que siempre he recibido de ustedes y con el cual he logrado culminar mi esfuerzo, terminando así mi carrera profesional, que es para mí la mejor de las herencias…los quiero mucho.
   

para culminar este trabajo y por el apoyo

académico gracias, pero lo más importantes por ofrecerme lo mejor de ustedes. Sus

PRESENTACIÓN Como todas los géneros de la familia Euphorbiaceae, Jatropha tiene distribución natural en todos los continentes, de manera que existen especies nativas del Viejo y el Nuevo Mundo, por lo que se considera que su especiación ocurrió por vicarianza, es decir, el género se originó en el antiguo continente de Gondwana y con su separación en África y Sudamérica tuvieron historias evolutivas diferenciadas. Especialmente J. curcas, considerada en muchos estudios como la especie más plesiomórfica o primitiva, es americana y posiblemente Mesoamericana. Algunas teorías recientes postulan que un taxón primitivo migró a través del Istmo de Panamá hasta México, donde dio origen a las especies mexicanas que tienen características plesiomórficas, incluyendo J. curcas. Bajo la anterior hipótesis se planteó el trabajo de tesis de Edilma Pérez Castillo, quien estudió la diversidad genética de J. curcas colectada en el Sur de México utilizando marcadores morfológicos florales. La idea se centró en el hecho que la diversidad es mayor en el centro de origen de la especie que en los sitios donde ha sido introducida, como en la zona tropical de Asia. Sus resultados mostraron no solo la variación en caracteres florales, sino evidenció que esta especie tiene genotipos con características sexuales diversas. Hasta la fecha se sabía que J. curcas es una especie monoica, con ejemplares ocasionalmente hermafroditas y algunos genotipos femeninos, mientras que el presente estudio se reportan además plantas masculinas y distintos tipos de hermafroditas. Es interesante que los resultados de este estudio morfológico estén en concordancia con los de estudios genéticos usando marcadores moleculares reportados previamente, lo cual indica que los caracteres florales son conservados y heredables, lo que los convierte en confiables indicadores de diversidad.

   

Contenido Resumen 1.- Introducción 2.- Materiales y métodos 2.1 Sitio de estudio 2.2 Material biológico 2.3 Contabilización de inflorescencias 2.4 Clasificación de las flores 2.5 Caracteres determinados 2.6 Manejo de datos y análisis estadístico 3.- Resultados y discusión 3.1 Dinámica de florecimiento 3.2 Sexo de las flores producidas por las accesiones de J. curcas 3.3 Variación de J. curcas en caracteres florales 3.4 Análisis discriminantes de los caracteres morfológicos de las flores 3.5 Análisis de conglomerados de los caracteres morfológicos de las flores 4.- Conclusiones 5.- Referencias

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Variabilidad Floral de Jatropha curcas del Sur de México. Pérez-Castillo Edilma, Ovando-Medina Isidro, Salvador- Figueroa Miguel Centro de Biociencias, Universidad Autónoma de Chiapas; carretera a puerto Madero Km 2.0, Tapachula Chiapas. C.P 30700. Tapachula Chiapas México. *Autor a quien debe dirigirse la correspondencia; E-mail:piscis_edicaz@hotmail.com; Tel. + 52-962-6427972; Fax. 019626427972. Resumen El estudio de la variación morfológica floral es prioridad de investigación en Jatropha curcas L. Aunque se han realizado algunos estudios sobre morfología floral, solo se han estudiado accesiones asiáticas, por lo que hacen falta estudios en la región mesoamericana, la cual es el centro de diversificación de esta planta. Por lo anterior, se estudió la variabilidad morfológica floral de J. curcas del sur de México, mediante el uso de caracteres florales como: sépalos, pétalos, nectarios, tricomas, filamento, anteras, polen, pistilo, ovario y óvulos. Se realizaron mediciones de largo y/o ancho y/o diámetro y/o grosor; excepto de tricomas, los cuales se evaluaron como: flores glabras, medianamente pubescentes y abundantemente pubescentes. La mayoría de las accesiones de J. curcas, presenta inflorescencias típicas (monoicas), pero también se encontraron accesiones con inflorescencias atípicas (ginoicas, androicas, andromonoicas, subandroicas). También se encontró dos tipos de variación en caracteres florales: ocasional y recurrente. Las variables más importantes de acuerdo a un análisis de discriminante fueron: diámetro de la flor masculina, largo del pétalo femenino, largo de nectario masculino. Guerrero fue la población más diversa del Sur de México y Centro la población más diversa del Estado de Chiapas. Un análisis de conglomerados mostró que las accesiones de J. curcas del Sur de México se agrupan sin mostrar correlación con el origen geográfico, mientras que las accesiones con sexualidad no típica se agrupan juntas. Una prueba de Mantel encontró correlación significativa entre las matrices de distancia generadas en este estudio y las matrices de distancias genéticas (AFLP) previamente reportadas para las mismas accesiones (p=0.001). Palabras clave: Morfología, Floración, Chiapas, Análisis de discriminante, Análisis de conglomerados.

   

1.- Introducción Por el contenido de aceite de sus semillas Jatropha curcas es una planta que recientemente ha despertado interés como modelo científico y como cultivo agroindustrial. Desde la perspectiva agrícola el conocimiento acumulado sobre la biología y ecología de esta planta es limitado, así mismo reproducción y propagación. El conocimiento de la estructura floral es un indicador de taxonomía y diversidad además para lograr el mejoramiento de plantas. Se ha estudiado el desarrollo y la anatomía floral de muchas plantas; en Solanaceae, se caracterizó la morfología floral en dos cultivares de berenjenas (Solanum melongena L. y Solanum sp.) (Araméndiz, 2009). Así también, se han realizado estudios sobre la morfología floral comparativa de cinco genotipos de aceroleira (Malpighia emarginata) (Gomes et al. 2001). Con el fin de conocer variaciones intraespecíficas, Visintin y Bernardello (2005) realizaron estudios sobre la fenología, morfología y anatomía de los verticilos florales de Tagetes minuta L. (Asteraceae) colectada en la localidad de Villa del Totoral, en Córdova, Argentina. La morfología floral se ha utilizado para explorar las relaciones fenéticas, como en el trabajo de Guevara y Benítez (2004), quienes realizaron una caracterización morfológica en 19 especies pertenecientes a ocho familias dentro del Orden de las Liliáceas y adicionalmente estudiaron dos especies pertenecientes a la familia Poaceae colectadas en los estados de Aragua y Yaracuy, en Venezuela. Muchas son las especies de la familia Euphorbiaceae a las cuales se les ha descrito la morfología y anatomía floral (Steinmann, 2002), sin embargo, para el género Jatropha dicha descripción es limitada. Jiménez y Martínez (1994) describieron las flores de dos poblaciones de J. andrieuxii, una con 61 flores pistiladas y 44 estaminadas y otra con 4 flores pistiladas y 7 estaminadas; encontraron que las flores pistiladas además de ser gamopétalas, son más grandes que las estaminadas. Por su parte Jiménez (1992) reporto que los sepalos de las flores de J. websteri son enteros. Estudios realizados en J. curcas orientan a que el centro de diversificación de esta planta es la región Mesoamericana (Heller, 1996; Ovando et al. 2009, 2011; Carels, 2009). En México, J. curcas, conocida como piñón, es un arbusto pequeño que suele no sobrepasar los 5 m de
   

altura; su principal utilidad es como cerca viva de parcelas agrícolas o ganaderas y como alimento en algunas regiones rurales (las variedades no tóxicas). Esta especie actualmente ha ganado importancia económica y ambiental, por sus usos medicinales, farmacológicos y principalmente para la extracción de aceite a partir de sus semillas para convertirlo a biodiesel (Marroquín et al. 1997). J. curcas posee características que favorecen su desarrollo óptimo, particularmente su rápido crecimiento y desarrollo, su adaptación a suelos marginales semiáridas, es altamente resistente a la sequía, sirve como controlador de la erosión, etc. (Sujatha et al. 2005). Se han hecho muchos estudios sobre variación genética de J. curcas; sin embargo la mayor parte de estos estudios se han realizado con accesiones asiáticas y africanas, donde se ha encontrado baja diversidad (Sánchez-Gutiérrez, 2010). Gohil y Pandya (2008) evaluaron la diversidad genética de 9 genotipos de J. curcas en la región semiárida de la India (siete genotipos tóxicos y dos no tóxicos); un análisis de varianza molecular mostró diferencias significativas entre genotipos e indica alta variabilidad genética. Por otra parte, en la región mesoamericana, y en particular en el Estado de Chiapas, son pocos los estudios realizados sobre variación genética en J. curcas. Sánchez-Gutiérrez (2010) estudiaron la variación genética de 147 accesiones, las cuales pertenecen a cinco poblaciones (Istmo, Fronteriza, Frailesca, Centro y Soconusco), usando marcadores AFLP, encontrando que la mayor variación está dentro de las poblaciones (94.2%), seguida por la variación entre poblaciones (3.9%); siendo Istmo la población más diversa. Otro trabajo es el realizado por Pecina-Quintero et al. (2011) evaluaron la diversidad genética de J. curcas en 88 accesiones de siete regiones del estado, mediante el uso de marcadores AFLP. Una de las accesiones (Tuxtla Chico) presentó 100% flores pistiladas (femeninas) y fue la que tuvo el mayor número de fragmentos raros. Las poblaciones de J. curcas presentan gran variabilidad morfológica con respecto a sus estructuras (Toral et al. 2008); se ha encontrado que generalmente plantas de la misma zona climática muestran diferencias morfológicas, en la forma y tamaño de las semillas, así como en su contenido de proteínas y lípidos (Martínez et al. 2010; Ovando et al. 2011).

   

Se han descrito ciertas características morfológicas de J. curcas, por ejemplo, Heller (1996) describió algunas estructuras de esta planta como son: el porte, copa, tallo, raíz, corteza y hojas. De igual manera, se realizaron estudios sobre la variación de las semillas de J. curcas en la India Central, observando la morfología de las semillas (color, tamaño y peso), la germinación (viabilidad, porcentaje de germinación) y crecimiento de las plántulas, así como la sobrevivencia (Ginwal et al. 2005), encontrando variación principalmente en cuanto a tamaño de las semillas. También se ha estudiado la variación morfo-fisiológica y parámetros de crecimiento en 34 cultivares de J. curcas en la India, los parámetros tomados en cuenta fueron: altura de la planta, circunferencia del tallo, ramas por planta y peso de 100 semillas (Saikia et al. 2009); estos parámetros fisiológicos revelaron un alto grado de variación. Otro estudio realizado fue el de Gohil y Pandya (2009), quienes determinaron el grado de variabilidad y heredabilidad de 14 caracteres morfológicos en nueve genotipos (incluyendo dos variedades no tóxicas) en la India encontrando variaciones fenotípicas como la altura y follaje de la planta, diámetro del cuello, peso promedio y rendimiento de la semilla, excepto para la variable de número de ramas primarias, además se encontró diferencias significativas entre los genotipos. Sin embargo, de las inflorescencias y principalmente de las flores se tiene poca información. Dichos caracteres, por ser altamente conservados, podrían usarse como estimadores de la diversidad genética de J. curcas mesoamericana. Un trabajo reciente sobre anatomía floral de J. curcas es el realizado por Wu et al. (2011), en China, quienes estudiaron el proceso de desarrollo de los órganos florales, dividieron el desarrollo floral temprano en XII fases, además observaron los tipos de inflorescencias, encontrando que la diferenciación sexual de las flores masculinas y femeninas se produce en la fase VII. Además encontraron plantas con flores mayoritariamente masculinas y femeninas. El estudio de la variación morfológica floral es prioridad de investigación en J. curcas. Aunque se han realizado pocos estudios sobre morfología floral, principalmente son de accesiones asiáticas (Wu et al. 2011), por lo tanto hacen falta estudios en la región mesoamericana, ya que esta región es el centro de diversificación de esta planta; por lo tanto se espera que exista alta variabilidad morfológica floral. Por lo que el objetivo de este trabajo fue describir la variabilidad morfológica floral de Jatropha curcas L. del sur de México.
   

2.- Materiales y métodos

2.1 Sitio de estudio El trabajo se desarrolló en el Laboratorio de Investigación en Biotecnología y en el Banco de Germoplasma de Jatropha del Centro de Biociencias (CenBio) de la Universidad Autónoma de Chiapas. Este último ubicado en el Municipio de Tapachula, Chiapas. 14.4976 N, 92.4774 O y 58 msnm; temperatura promedio anual 30.7°C, humedad media anual 80%, lluvia media de 2632.9 mm. (Estación meteorológica: 769043 MMTP) y suelo tipo andosol. El estudio se realizó de enero a diciembre del 2011.

2.2 Material biológico Se estudiaron 103 accesiones (Cuadro 1) de J. curcas, colectadas en 33 sitios del Sur de México, reportadas originalmente por Ovando et al. (2009). De cada accesión se colectaron 40 flores masculinas y 20 flores femeninas. Las flores fueron trasladadas al laboratorio en bolsas de polipapel y se conservaron a 4 °C por un máximo de 72 h.

2.3 Contabilización de inflorescencias. La cantidad de inflorescencias presente en cada una de las 103 accesiones se determinó cada 28 días por periodo de un año.

   

Cuadro 1. Accesiones de Jatropha curcas L. del Banco de Germoplasma del Centro de Biociencias de la Universidad Autónoma de Chiapas, estudiadas en sus caracteres florales. Datos del sitio original de colecta Latitud Longitud Población (Norte) (Oeste) 15°10.300' 92°35.100' Soconusco 14°59.022' 14°59.433' Soconusco 15°05.115' 15°25.505' 14°43.742’ 14°40.057’ 14°54.29’ 16°11.231' 15°55.561' 16°03.430' 16°06.663’ 15°40.473’ 15°44.623’ 15°39.030’ 15°50.335’ 17° 57.981’ 16°47.562’ 16°47.220’ 16°40.012’ 16°46.243’ 16°16.430’ 16°10,171’ 16°19,475’ 16°19.243’ 15°43.366' 16°11.238' 16°19.306' 15°50.564' 19°04.2472' 16°37.433' 20º 15' 11'' 18°53’ 14°36.2752' 92°29.146' 92°53.854' 92°25.935' 92°10.071' 92°15.38' 93°64.816' 92°59.842' 93°50.782' 92°41.035' 92°00.129' 92°16.722' 92°08.170' 91°54.238' 92°28.824' 93°16.191' 92°54.618' 93°39.242' 93°23.641' 92°17,850' 93°16,059' 93°20,976' 92°20,578' 96°33.971' 97°44.825' 97°53.564' 96°00.154' 102°22.0983' 99°00.749' -97º 15' 30'' 99°04’ 90°29.0830' Soconusco Soconusco Soconusco Soconusco Soconusco Istmo Istmo Istmo Frontera Frontera Frontera Frontera Frontera Frontera Centro Centro Centro Centro Frailesca Frailesca Frailesca Frailesca Oaxaca Oaxaca Oaxaca Oaxaca Michoacán Guerrero Veracruz Morelos Guatemala

Municipio (Accesión) Acapetahua (ACA) Cacahoatán (CAC) Huixtla (HUX) Mapastepec (MAP) Puerto Chiapas (PC) Suchiate (SCH) Tapachula (TAP) Arriaga (ARR) Pijijiapan (PIJ) Tonalá (TON) La Concordia (CCR) Cd. Cuauhtémoc (CDCU) Chicomuselo (CHIC) Comalapa (COM) Lagos de Colón (LACO) Rizo de Oro (RIZ) Berriozábal (BERR) Ixtapa (IXT) Jiquipilas (JIQ) Ocozocuatla (OCZ) Pujiltic (PUJ) Villa Corzo (VCO) Villa Flores (VIF) Villa de las Rosas (VLR) El coco (ECO) Piedra Ancha (PA) Pinotepa Nacional (PIN) Zimatán (ZIM) Apatzingán (APA) Copala (COP) Pueblillo (PUEB) Yautepec (YAU) Guatemala (GUA)

Número de accesiones 2 5 8 7 11 4 1 11 4 2 4 5 1 5 1 3 1 1 2 1 6 3 2 1 2 1 1 1 1 2 1 1 3

   

2.4. - Clasificación de las flores Las flores fueron clasificadas en femeninas, masculinas y hermafroditas. Para ello primeramente se retiró el pedicelo a cada una de las flores y posteriormente se tomó microfotografias utilizando un microscopio compuesto (Zeiss Axiolab®) y/o estereoscopio (Zeiss Stemi 2000 C®) equipado con cámara de video (AxioCam MRc®) acoplada al programa Axio Vision©. 2.5. - Caracteres florales determinados A todas las flores se les determinó la cantidad de sépalos, pétalos y nectarios. A las flores masculinas y hermafroditas se les determinó el número de filamentos, anteras y la cantidad de polen. A las flores femeninas y hermafroditas se les determinó la cantidad de óvulos y las dimensiones del pistilo y ovario. También se midió el largo y/o ancho y/o diámetro y/o grosor de los caracteres florales. La presencia de, tricomas se evaluó de acuerdo a la siguiente escala: flores glabras, medianamente pubescentes y abundantemente pubescentes. 2.6. – Manejo de datos y análisis estadístico Por presentar diferencias en más de un orden de magnitud, los datos de las determinaciones de los caracteres se codificaron como se muestra en el Cuadro 1. Los datos codificados fueron procesados mediante análisis multivariado discriminante, con el cual se identificaron los caracteres más informativos y se agruparon las poblaciones. Para visualizar las relaciones entre las poblaciones se realizó un análisis de conglomerados empleando, las distancias euclidianas y el método de aglomeración de Ward. En ambos análisis se siguieron dos vías, en la primera se utilizaron todas las poblaciones y en la segunda solo las de Chiapas, por ser las más numerosas. Para estos análisis se utilizó el programa XLStat© versión 2012. Además, se realizó la prueba de correlación de Mantel entre las distancias genéticas obtenidas mediante AFLP, reportadas para las mismas accesiones por Sánchez-Gutiérrez (2010), y las distancias morfológicas de Fisher generadas en el análisis de discriminante empleando el programa InfoStat© versión 2011.

   

Cuadro 2. Codificación de caracteres florales de accesiones de Jatropha curcas L. del Banco de Germoplasma del Centro de Biociencias de la Universidad Autónoma de Chiapas.
Diámetro de flor masculina Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <6000 1 <7000 2 <8000 3 <9000 4 <10000 5 <11000 6 Largo de pétalo masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 ˂ 5000 1 ˂ 6000 2 ˂ 7000 3 ˂ 8000 4 Ancho de nectario masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <1000 1 <2000 2 Largo de sépalo masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 < 3000 1 < 4000 2 < 5000 3 < 6000 4 < 7000 5 Ancho de pétalo masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <2000 1 <3000 2 < 4000 3 < 5000 4 < 6000 5 Largo de filamento Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <3000 1 <4000 2 <5000 3 <6000 4 <7000 5 <8000 6 Ancho de antera Valor real (µm) Valor codificado 0 0 < 800 1 < 1000 2 3 Largo se sépalo femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <5000 1 <7000 2 <9000 3 <11000 4 Ancho de pétalo femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <3000 1 <4000 2 Ancho de sépalo masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 < 2000 1 < 3000 2 < 4000 3 < 5000 4 < 6000 5 Largo del nectario masculino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <1000 1 <2000 2

Grosor de filamento Valor real (µm) Valor codificado 0 0 < 200 1 < 300 2 < 400 3

Largo de antera Valor real (µm) Valor codificado 0 0 < 1000 1 < 2000 2 Diámetro de flor femenina Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <7000 1 <9000 2 <11000 3 <13000 4 <15000 5 Largo de pétalo femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <6000 1 <7000 2 <8000 3 <9000 4 <10000 5 Ancho de nectario femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <1000 1 <2000 2 Largo de ovario Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <2000 1 <3000 2 < 4000 3 Ancho de óvulo Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <400 1 <500 2 <600 3

Diámetro de polen Valor real (µm) Valor codificado 0 0 10-30 1 30-40 2 >40 3 Ancho de sépalo femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <3000 1 <4000 2 <5000 3 <6000 4 <7000 5 Largo de nectario femenino Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <1000 1 <2000 2

Largo de pistilo Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <2000 1 <3000 2 < 4000 3 Ancho de ovario Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <2000 1 <3000 2 < 4000 3

Grosor de pistilo Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <500 1 <1000 2 Largo de óvulo Valor real (µm) Valor codificado 0 0 <400 1 <500 2 <600 3 <700 4 <800 5

   

3.- Resultados y discusión 3.1 Dinámica de florecimiento En la Figura 1 se muestra la dinámica de la presencia de flores en las accesiones de J. curcas del jardín común del Centro de Biociencias de la UNACH. En dicho conglomerado se observaron flores durante todo el año en las accesiones ARR-7, CDCU-3, MAP-8, PC-15 el resto, floreció de una a tres veces en el año. El 85.2% de las accesiones florecieron durante los meses de marzo a abril, en agosto y noviembre se observó florecimiento en 59% y en 40.1% de las accesiones. Como en todas las plantas que producen flores, el florecimiento de J. curcas debe responder a los circuitos de control genéticos los cuales, a su vez responden a la concentración de nutrientes y fitohormonas clave y a las condiciones ambientales. En este último sentido, la relación entre precipitación pluvial y el florecimiento de las accesiones de J. curcas (Figura 2) mostro que prácticamente todas ellas florecieron al inicio de la temporada de lluvia, lo que pudiera interpretarse como la necesidad de una cantidad mínima crítica de agua disponible en el suelo para iniciar el proceso de florecimiento. Por lo anterior el control de la humedad del suelo pudiera pudiera repercutir en que la planta floreciera todo el tiempo sugestión propuesta por Sukarin et al. (1987) y Joker y Jepsen (2003). En concordancia con lo anterior, en la época y frecuencias de florecimiento de J. curcas dependerá del periodo, intensidad y frecuencia de lluvia lo que a su vez, depende fuertemente de la ubicación geográfica. Así, en Nicaragua la floración máxima se encontró durante los meses de abril, mayo, junio y agosto (Aker, 2012) mientras que para India se ha reportado dicho estadio para los meses de julio a septiembre (Bhattacharya et al. 2005), mayo y noviembre (Sukarin et al. 1987). Aunque las fluctuaciones observadas en el proceso de florecimiento de las distintas accesiones pudieran estar ligadas a los eventos que ocurren durante la época de lluvia, la sincronía y la dinámica de maduración de los tejidos, dependientes ambos de la plasticidad genética de la accesión, pueden ser factores que impactan en los ciclos de florecimiento. En este sentido, el crecimiento vegetativo de J. curcas es simpodial y la inflorescencia terminal (Halle et al. 1978), por lo que la cantidad de inflorescencias en la planta dependerá del
   

número de ramas (yemas terminales) maduras presentes al momento del muestreo. En concordancia con dicho modelo de desarrollo, las inflorescencias presentes en cualquier momento en una planta de J. curcas deberá ser un número par, a menos que el desarrollo de las ramas sea asincrónico. Por los resultados mostrados en la Figura 1 el determinante genético del florecimiento en las accesiones de J. curcas utilizadas en el presente estudio parece un factor de alta influencia ya que, la cantidad de inflorescencias fue particular de la accesión.
ACA-­‐5   ARR-­‐7   CDCU-­‐1   COP-­‐3   HUX-­‐7   OCZ-­‐7   PC-­‐8   ACA-­‐6   ARR-­‐9   CDCU-­‐3   ECO-­‐6   HUX-­‐8   PA-­‐3   PIJ-­‐2   APA-­‐1   BERR-­‐1   CDCU-­‐4   ECO-­‐7   IXT-­‐1   PC-­‐11   PIJ-­‐4   ARR-­‐11   CAC-­‐1   CDCU-­‐5   GUA-­‐1   JIQ-­‐1   PC-­‐12   PIJ-­‐5   ARR-­‐11.1   CAC-­‐3   CDCU-­‐6   GUA-­‐2   JIQ-­‐6   PC-­‐13   PIJ-­‐6   ARR-­‐13   CAC-­‐5   CHIC-­‐1   GUA-­‐3   MAP-­‐2   PC-­‐14   PIN-­‐1   ARR-­‐15   CAC-­‐6   COM-­‐12   HUX-­‐1     MAP-­‐3   PC-­‐15   PUEB-­‐2   ARR.16   CAC-­‐8   COM-­‐13   HUX-­‐11   MAP-­‐4   PC-­‐2   PUJ-­‐2   ARR-­‐17   CCR-­‐1   COM-­‐2   HUX-­‐3   MAP-­‐5   PC-­‐3   PUJ-­‐3   ARR-­‐2   CCR-­‐2   COM-­‐3   HUX-­‐4   MAP-­‐6   PC-­‐4   PUJ-­‐4   ARR-­‐4   CCR-­‐3   COM-­‐4   HUX-­‐5   MAP-­‐7   PC-­‐6   PUJ-­‐5   ARR-­‐6   CCR-­‐5   COP-­‐2   HUX-­‐6   MAP-­‐8   PC-­‐7   PUJ-­‐7  

50   Inflorescenias  por  accseión   40   30   20   10   0  

Meses    
Figura 1. Dinámica de floración de 103 accesiones de Jatropha curcas L. del Banco de Germoplasma del Centro de Biociencias de la Universidad Autónoma de Chiapas.

   

700  

0.8   0.7   0.6   0.5   0.4   0.3   0.2   0.1   0   E   F   M   A   M   J   J   A   S   O   N   D  

Precipitación  (mm)  

600   500   400   300   200   100   0  

Meses  (2011)    
Figura 2. Relación entre la proporción de accesiones en florecimiento de Jatropha curcas L. del Banco de Germoplasma del Centro de Biociencias de la Universidad Autónoma de Chiapas y la precipitación pluvial del año 2011 en Tapachula; Chiapas, México.

3.2 Sexo de las flores producidas por las accesiones de J. curcas Las flores producidas por las diferentes accesiones de fueron femeninas, masculinas y hermafroditas (Figura 2). De acuerdo al tipo y proporción de flor producida, las accesiones se clasificaron en monoicas, androicas, ginoicas, andromonoicas y subandromonoicas (Cuadro 3). Dehgan y Webster, 1979 reportaron que J. curcas se caracteriza por ser una planta monoica con flores masculinas y femeninas en la misma inflorescencia (Dehgan y Webster, 1979) reportando, además, la presencia de flores hermafroditas sin especificar si se trata de una característica de una accesión o si estas se encontraron mezcladas con flores masculinas o femeninas en la misma accesión. También se ha reportado la existencia de plantas con inflorescencias exclusivamente femeninas (Pecina-Quintero et al. 2011) o mayoritariamente masculinas (Wu et al. 2011). La presencia de dioicismo y arreglos complejos, además de que la mayoría de los individuos de este estudio fueron monoicos, orientan a pensar que en esta planta el sexo está ligado a un
   

Proporción  de  plantas  con  inflorescencia    

800  

Precipitación  (mm)  

Plantas  florecidas    

0.9  

determinante complejo (posiblemente Y1 Y2) y/o que J. curcas se encuentra en proceso de evolución. En este último sentido, se ha establecido que el dioicismo, en las plantas, esta relacionado con los diversos factores ecológicos (Vamosi et al. 2009) y se ha detectado en varios grupos de plantas no emparentadas. La aparición del dioicismo se ha reportado en el género Ribers (Senters y Solis, 2003) y ha aparecido al menos dos veces en el género Silene a partir de un ancestro ginodioico (Desfeux et al. 1996). En la familia Siparunaceae el dioicismo se originó a partir de un ancestro monoico (Renner y Won 2001). En Monocotiledóneas el estado dioico parece haber evolucionado a partir de un estado transitorio ginodioico más que del estado monoico (Weibien et al. 2001). Por otro lado, el mecanismo que gobierna la aparición de sexos separados en plantas ha traído como consecuencia la descripción de cromosomas sexuales diferenciados aunque, en un número reducido de especies (Ruiz, 2004). Los cromosomas sexuales heteromórficos está ampliamente distribuido en animales superiores y las teorías de su origen y evolución son resultado del análisis de los cromosomas X e Y de humanos (Skalestky et al. 2003). Se estima que los cromosomas sexuales de los animales aparecieron hace 240 a 320 G-años (Charlesworth, 2002). Por lo anterior, los sistemas más jóvenes como el de las plantas (Ruiz, 2004) son interesantes para comparar dicha hipótesis. Dado que el determinismo sexual en plantas y animales es fundamentalmente diferente, es posible que la arquitectura de los cromosmas sexuales sean potencialmente comparables (Charlesworth, 2002). En este sentido se ha hipotetizado que los cromosomas sexuales evolucionaron a partir de autosomas y que se ha requerido de al menos dos eventos evolutivos para la transición desde el hermafroditismo hasta la dioicismo (Charlesworth, 1991). Por lo anterior, una mutación de esterilidad masculina en los hermafroditas daría lugar a las hembras y los machos aparecieron a partir de la supresión de los genes femeninos. Los resultados de este trabajo orientan a pensar que la mutación en los genes femeninos parece el mecanismo de aparición de la dioecia (androdioecia) en J. curcas, situación contraria a lo propuesto por Charlesworth y Charlesworth (1985) quienes proponen la aparición de la ginodioecia. Por lo anterior en los individuos androginodioicos y androdioicos encontrados pudieran encontrarse reminiciencias de cromosomas sexuales en J. curcas.

   

Cuadro 3. Clasificación de 103 accesiones de Jatropha curcas L. del Banco de Germoplasma del Centro de Biociencias de la Universidad Autónoma de Chiapas, con base en sus características sexuales.

Tipo de planta Monoica Dioicas Ginoicas Androicas Hermafroditas Andromonoicas Subandroicas

Accesiones (No.) 95

Características Plantas con flores masculinas y femeninas en la misma inflorescencia.

3 2

Plantas con flores exclusivamente femeninas Plantas con flores exclusivamente masculinas

1 2

Plantas con flores masculinas y hermafroditas Planta que mayoritariamente posee flores masculinas, con unas pocas flores femeninas o hermafroditas

3.3 Variación de J. curcas en caracteres florales. Se detectó dos tipos de variación en los caracteres florales de J. curcas: ocasional y recurrente. El primer tipo se refiere a la variabilidad entre inflorescencias de la misma planta, la cual puede tener su origen en la interacción genotipo-ambiente (Heller, 1996) o en factores epigenéticos (Yi et al. 2010). Ejemplos de variación ocasional en flores masculinas son: número de pétalos (cuatro o cinco), sépalos (cuatro, cinco o seis), nectarios (cuatro o cinco) y estambres (siete o diez). En flores femeninas se encontró variación ocasional en el número de óvulos (dos, tres o cuatro). El segundo tipo de variación se refiere a características que siempre estuvieron presentes en una misma la planta, como la cantidad de tricomas y el tamaño de los caracteres. Es posible que los caracteres que presentaron variación recurrente, sean fijos o altamente heredables (Ovando-Medina et al. 2011). Solo la variación recurrente se utilizó para los estudios de diversidad de poblaciones de J. curcas del Sur de México. Los resultados de este estudio mostraron que los verticilios de las flores masculinas típicas (Figura 2a) están compuestos por cinco pétalos, cinco sépalos, cinco nectarios, diez
   

estambres, diez anteras y granos de polen que varían entre 27-44 µm de diámetro. En el caso de las flores femeninas típicas (Figura 2b) se presentan cinco pétalos, cinco sépalos, cinco nectarios, un ovario, tres óvulos, un pistilo. En flores hermafroditas (Figura 2c) se presentan cinco pétalos, cinco sépalos, cinco nectarios, diez estambres, granos de polen que varían entre 37-40 µm de diámetro, un ovario, tres óvulos, un pistilo. Estos datos coinciden con lo reportado previamente por otros autores (Heller, 1996, Toral et al. 2008, Wu et al. 2010). Respecto al tamaño de las flores, se encontró que las masculinas son más pequeñas (5-10 mm) que las femeninas (7-15 mm) y hermafroditas (11-14 mm), presentan un color verde claroamarillas y la mayor cantidad de plantas poseen flores medianamente pubescentes. Sin embargo, Toral et al. (2008), mencionan que ambas flores, masculinas y femeninas, son pequeñas (6-8 mm), presentan un color verdoso-amarillas en ocasiones pubescentes; con anteras versátiles y órganos sexuales sobresalientes. Además se encontraron dos tipos de flores hermafroditas, la primera con diez estambres alrededor del ovario más largos que el pistilo y la segunda con cuatro-seis estambres alrededor del ovario más cortos que el pistilo. Podría existir mayor probabilidad que una planta que produce flores hermafroditas con estambres más largos que el pistilo sea autofecundado, ya que al momento de abrir el saco polínico este polen sea aprovechado por el estigma, siempre y cuando este receptivo, sin necesidad de un agente dispersor (OcampoVelázquez et al. 2009). Sin embargo, Pinilla et al. (2011) observaron que las flores hermafroditas de J. curcas presentan protrandia, ya que en el desarrollo de las fases masculina y femenina primero se libera el polen a medida que se manifiesta el crecimiento del gineceo en los estilos y los estigmas, una vez producido la senescencia en las anteras, los estilos alcanzan su tamaño ideal y con las papilas ya desarrolladas.

   

a  

b  

c  

Figura 2. Diferenciación de flores de Jatropha curcas de acuerdo al sexo; flor masculina(a), flor femenina (b), flor hermafrodita (c).

3.4 Análisis discriminante de los caracteres morfológicos de las flores Para el primer análisis se utilizaron todas las poblaciones del Sur de México, mediante el cual se identificaron los caracteres más importantes para formar los cinco componentes principales y agrupar las accesiones por poblaciones. El componente principal 1 (F1) que es el más importante explicó un 46.02% de la variación total (Cuadro 4) y las variables más importantes por su contribución al F1 fueron: diámetro de la flor masculina (DFM), largo del sépalo femenino (LSF), largo del pétalo femenino (LPF), diámetro de flor femenina (DFF), grosor del pistilo (GP). El componente principal 2 (F2) explicó un 20.90% de la varianza (Cuadro 4) y las variables que aportaron más para este factor fueron: grosor del pistilo (GP), largo del ovario (LO), largo de nectario masculino y femenino (LNM) (LNF). Las variables correlacionadas para el componente principal 3 (F3) fueron largo del óvulo (LO), cantidad de tricomas en flores femeninas (TF), con un 13.64% de la varianza, mientras que el componente principal 4 y 5 únicamente explicaron un 5-8% de la variación total como se muestra en el Cuadro 4. Muchos autores han realizado estudios acerca de variación morfológica de la planta de J. curcas mediante análisis de componentes principales; por ejemplo, Zapico et al. (2011) en Filipinas; evaluaron 21 variables morfológicas cuantitativas de 13 accesiones de J. curcas, los cinco componentes principales explicaron un 88.12% de la variación total, las variables más importantes para el componente principal 1 (F1) fueron: altura de la planta, número de hojas, porcentaje de germinación y supervivencia. Por otra parte, Vijayanand et al. (2009), en la
   

India, estudiaron 12 accesiones de J. curcas para evaluar la diversidad genética, utilizando 19 caracteres morfológicos, encontrando que los tres primeros factores contribuyeron un 89.2% de la varianza total observada, las variables que aportaron más para el F1 fueron: diámetro del tallo, longitud y ancho de la hoja, crecimiento de las plantas, las cuales contribuyeron con un 35.7% para el F1. Machado (2011) realizó un estudio para caracterizar la variabilidad morfológica y productiva de una colección de J. curcas, en Cuba, tomando en cuenta 13 caracteres morfológicos, encontrando que la altura de la planta fue el indicador más variable, seguido por el grosor del tallo y ramas primarias, el número de ramas primarias y secundarias, explicando un 74.63% entre el componente principal 1 (F1) y componente principal 2 (F2). Sin embargo, no se han encontrado investigaciones previas sobre variación floral en J. curcas para su posible comparación.

Cuadro 4. Valor propio de los cinco componentes principales, en base a caracteres florales de 103 accesiones de Jatropha curcas L. del sur de México.

Componente 1 2 3 4 5

Total 2.430 1.104 0.720 0.445 0.264

% de variación 46.018 20.898 13.642 8.424 5.001

% acumulado 46.018 66.916 80.558 88.982 93.983

En la Figura 3 se muestra el patrón de agrupación de las accesiones por población, de acuerdo al componente principal 1 y componente principal 2 (F1 y F2), los cuales explican en conjunto el 66.92% de la varianza; se observa como las accesiones que pertenecen a las poblaciones de Frontera y Oaxaca se agrupan hacia el F1, mientras que las accesiones que pertenecen a las poblaciones de Istmo y Centro se agrupan en el F2. La posición de Guerrero en la parte extrema inferior izquierda del cuadrante es debido al alto porcentaje de varianza que mostraron estas accesiones en los caracteres evaluados y su contribución a los F1 y F2. Estos resultados probablemente se deben a que en esta población existen plantas con flores hermafroditas.
   

4  

Observaciones  (ejes  F1  y  F2:  66.92  %)  

2  

F2  (20.90  %)  

0  

-­‐2  

-­‐4  

-­‐6   -­‐6   -­‐4   -­‐2   F1  (46.02  %)   0   2   4  

Centro   Guerrero  

Frailesca   Istmo  

Frontera   Oaxaca  

Guatemala   Soconusco  

Figura 3. Agrupación por poblaciones de 103 accesiones de Jatropha curcasL. del Sur de México, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

Para visualizar mejor la relación entre poblaciones, se graficaron los centroides, los cuales se muestran en la Figura 4; se observa como las poblaciones de Centro e Istmo están estrechamente relacionadas ya que Istmo se encuentra dentro del centroide de Centro. Además, está población tiene cierta relación con las poblaciones de Oaxaca y Frailesca, lo cual puede deberse a la cercanía geográfica entre ellas. Por su parte, las poblaciones de Guatemala, Frontera, Soconusco y Guerrero están separadas del resto y entre ellas. Es destacable la diferenciación que existe entre las poblaciones Frontera y Soconusco, a pesar que son cercanas geográficamente, lo cual puede deberse a la barrera física que representa la Sierra Madre de Chiapas. Por otra parte, Guerrero fue la población más diversa, esto debido a que en esta población existen plantas con flores hermafroditas.

   

Ovando et al. (2011), utilizando las mismas accesiones, estudiaron la diversidad genética estimada con los ácidos grasos de la semilla de J. curcas encontrando que la variación con respecto al contenido de aceite fue de 8.020%-54.28%. En ese estudio el componente principal 1 (F1) y componente principal 2 (F2), en conjunto explicaron un 89.25% de la variación total. Mediante un gráfico de centroides se mostró la relación entre las seis poblaciones; los resultados son similares a la agrupación observada de acuerdo a la variación en caracteres florales, ya que Guatemala fue una de las poblaciones más diversas en ambos estudios, además de la estrecha relación en la que se agruparon las poblaciones del centro y costa de Chiapas.
Centroides  (ejes  F1  y  F2:  66.92  %)   3   2  

Guatemala  

Frailesca  
1  

Istmo  
-­‐7   -­‐6   -­‐5   -­‐4   -­‐3   -­‐2   -­‐1  

Oaxaca  
1  

Centro   0  
-­‐1   -­‐2   -­‐3   -­‐4  

0  

F2  (20.90  %)  

Frontera  

Soconusco  

2  

3  

Guerrero  

-­‐5   -­‐6   -­‐7  

F1  (46.02  %)  

Figura 4. Gráfico de centroides de las ocho poblaciones de Jatropha curcas L. del Sur de México, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

   

El segundo análisis discriminante estudió exclusivamente las accesiones del Estado de Chiapas, debido a que en este estado existe mayor extensión de cultivo tradicional de J. curcas. Mediante este análisis se identificaron los caracteres más importantes para formar los cinco componentes principales y agrupar las accesiones por poblaciones. El componente principal 1 (F1) que es el más importante explicó un 58.40% de la variación total (Cuadro 5) y las variables más importantes por su contribución al F1 fueron: diámetro de flor masculina (DFM), largo de sépalo masculino (LSM), ancho del pétalo masculino (APM) y largo del pétalo femenino (LPF). El componente principal 2 (F2) explicó un 20.92% de la varianza (cuadro 5) y las variables más importantes fueron: largo del nectario masculino (LNM)), ancho de la antera masculina (AAM), largo del ovulo (LOvu.) y la cantidad de tricomas en flores femeninas (TF). Para el componente principal 3 (F3) las variables más importantes fueron: la cantidad de tricomas en flores masculinas (TM) y largo del ovario (LO) explicando un 16.81% de varianza, mientras que el componente principal 4 (F4) fue el que aporto menor variación con menos de 4% de la varianza total, como se muestra en el Cuadro 5. Se encontró que las variables más importantes, con respecto al F1 y F2, tanto en el análisis de discriminante de todas las poblaciones, como el de las de Chiapas son diámetro de la flor masculina (DFM), largo del pétalo femenino (LPF), largo de nectario masculino, diámetro de flor masculina (DFM), largo del pétalo femenino (LPF) y largo del nectario masculino (LNM). Un estudio relacionado con lo anteriormente mencionado es el de Pinilla et al. (2010), quienes estudiaron 246 accesiones de J. curcas de Colombia mediante el estudio de 24 caracteres morfológicos cualitativos y cuantitativos encontrando que altura de la planta, diámetro del tallo, proyección de la copa, longitud y ancho de la octava hoja, días de floración, peso y longitud del fruto, longitud y ancho de la semilla, explicaron un 93.62% de la varianza para el componente principal 1 (F1).

   

Cuadro 5. Valor propio de los cuatro componentes principales, en base a caracteres florales de 90 accesiones
de Jatropha curcas L. del Estado de Chiapas.

Componente 1 2 3 4

Total 1.984 0.711 0.571 0.131

% de variación 58.40 20.92 16.81 3.87

% acumulado 58.40 79.320 96.14 100

En la Figura 5 se muestra el patrón de agrupación de las accesiones por población, de acuerdo al componente principal 1 (F1) y componente principal 2 (F2), los cuales explican en conjunto el 79.31% de la varianza, se observa como las accesiones que pertenecen a la población Soconusco es la única que se agrupa para el F1, mientras que las poblaciones de Istmo y Centro se agrupan al F2. Para visualizar mejor las relaciones entre las cinco poblaciones, se graficaron los centroides (Figura 6), con lo cual se pudo diferenciar claramente cómo se forma un grupo que contiene a las poblaciones Istmo, Frailesca y Centro, cuya similitud puede deberse a que geográficamente son cercanas; por su parte, las poblaciones Frontera y Soconusco presentan una marcada diferenciación entre ellas y con respecto a las demás poblaciones. Esto evidencia que la Sierra Madre de Chiapas es una fuerte barrera física entre estas poblaciones y que podría ser la principal causa de diversificación encontrada entre poblaciones. Centro fue la población más diversa.

   

5   4   3   2   F2  (20.92  %)   1   0  

Observaciones  (ejes  F1  y  F2:  79.32  %)  

-­‐1   -­‐2   -­‐3   -­‐4   -­‐5   -­‐4   -­‐3   -­‐2   -­‐1   0   1   2   3   4   F1  (58.40  %)  

Centro  

Frailesca  

Frontera  

Istmo  

Soconusco  

Figura 5. Agrupación por poblaciones de 90accesiones de Jatropha curcas L. del Estado de Chiapas, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

   

Centroides  (ejes  F1  y  F2:  79.32  %)  
3  

2  

Istmo  
F2  (20.92  %)  
1  

Frailesca  
0   -­‐2   -­‐1   0  

Centro  
1   2  

-­‐3  

Soconusco   Frontera  
-­‐1  

F1  (58.40  %)  -­‐2  
Figura 6. Gráfico de centroides de cinco poblaciones de Jatropha curcas L. del Estado de Chiapas, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

3.5 Análisis de conglomerados de los caracteres morfológicos de las flores Se realizaron dos análisis de clasificación ascendente jerárquica (dendrograma o análisis de conglomerados); uno de ellos analizó 103 accesiones del Sur de México, encontrando un dendrograma con cinco grupos como se observa en la Figura 7. El primer grupo fue el más grande y contuvo 54 accesiones de la mayoría de las poblaciones, no mostrando correlación con el origen geográfico. El segundo grupo únicamente agrupó ocho accesiones, siendo la mayoría de la población Istmo. El tercer grupo está formado por 35 accesiones, las cuales pertenecen a las poblaciones de Centro, Frontera, Soconusco, Guatemala y Veracruz. El cuarto grupo está formado por plantas ginoicas es decir que únicamente producen flores femeninas. El último grupo lo formaron dos accesiones (plantas) androicas, es decir que
   

únicamente producen flores masculinas y una planta andromonoica, es decir que produce flores hermafroditas y masculinas. Ningún grupo se formó de acuerdo al origen geográfico. El porcentaje de variación dentro de los grupos fue de 59.43%, mientras que entre grupos fue de 40.57%; es decir que la mayor varianza está dentro de los grupos.

MAP-­‐7   0CZ-­‐7   HUX-­‐11   PUJ-­‐8   CAC-­‐5   PA-­‐3   MAP-­‐5   PIJ-­‐2   PC-­‐6   PUJ-­‐7   CDCU-­‐1   ARR-­‐15   SCH-­‐1   PC-­‐14   ARR-­‐16   CCR-­‐3   PC-­‐4   COM-­‐4   HUX-­‐6   APA-­‐1   PC-­‐15   HUX-­‐5   PC-­‐8   MAP-­‐8   MAP-­‐6   CAC-­‐8   ECO-­‐6   ARR-­‐9   PC-­‐12   RIZ-­‐4   ECO-­‐7   PC-­‐7   PC-­‐3   VIF-­‐2   ARR-­‐2   ARR-­‐4   COM-­‐3   SCH-­‐10   PIJ-­‐6   SCH-­‐2   PC-­‐2   HUX-­‐7   PIJ-­‐4   MAP-­‐4   PC-­‐13   PIJ-­‐5   CDCU-­‐3   ARR-­‐6   JIQ-­‐6   COM-­‐2   PUJ-­‐5   CCR-­‐5   COP-­‐3   PIN-­‐1   ARR-­‐17   ARR-­‐11.1   ARR-­‐7   COM-­‐13   MAP-­‐3   HUX-­‐3   VCO-­‐3   TON-­‐6   CDCU-­‐5   VCO-­‐2   ARR-­‐13   CDCU-­‐6   YAU-­‐6   PUEB-­‐2   ZIM-­‐1   HUX-­‐4   GUA-­‐1   ACA-­‐6   MAP-­‐2   PUJ-­‐2   CCR-­‐2   CCR-­‐1   COM-­‐12   PC-­‐11   GUA-­‐3   SCH-­‐6   HUX-­‐8   GUA-­‐2   VCO-­‐1   BERR-­‐1   TON-­‐7   CDCU-­‐4   VLR-­‐1   PUJ-­‐4   PUJ-­‐3   ACA-­‐5   VIF-­‐3   RIZ-­‐2   IXT   CAC-­‐3   CAC-­‐1   HUX-­‐1   CAC-­‐6   TAP-­‐2   JIQ-­‐1   CHIC-­‐1   ARR-­‐11*   COP-­‐2   RIZ-­‐3  

Dendrograma  
C1   C2   C3   C4   C5  

 
54  

104  

154  

204  

Disimilitud  

 

0  

20  

40  

60  

80  

100   Disimilitud  

120  

140  

160  

180  

200  

Figura 7. Dendrograma de disimilitud de 103 accesiones de Jatropha curcas L. del sur de México, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

En el segundo análisis de clasificación ascendente jerárquica (dendrograma o análisis de conglomerados); analizó 90 accesiones, estas pertenecientes al estado de Chiapas; encontrando un dendrograma con cinco grupos como se observa en la Figura 8. El primer grupo fue el segundo más grande formado por 38 accesiones, también provenientes de todas las poblaciones (Soconusco, Frontera, Istmo, fronteriza y Centro), aunque la mayoría fueron de la población Soconusco. Mientras que en el segundo grupo se incluyeron ocho accesiones, la mayoría de la población Istmo. El tercer grupo fue el más grande y estuvo formado por 39
   

accesiones de todas las poblaciones. El cuarto grupo lo formaron dos accesiones, estas fueron plantas androicas, es decir, exclusivamente producen flores masculinas. Finalmente el último grupo está formado por tres plantas ginoinas, es decir accesiones con flores exclusivamente femeninas. Al igual que en el primer dendrograma formado por la accesiones del Sur de México, ningún grupo mostro correlación de acuerdo al origen geográfico. El porcentaje de variación dentro de los grupos fue de 57.55%, mientras que entre grupos fue de 42.45%, es decir que ya la mayor varianza existente está dentro de los grupos. Los resultados coinciden con lo encontrado por Sánchez-Gutiérrez (2010), quien utilizando las mismas accesiones estudió la variación genética de J. curcas del estado de Chiapas, encontrando, mediante análisis de conglomerados, que las accesiones están agrupadas sin un patrón geográfico.

PC-­‐4   COM-­‐4   VCO-­‐1   HUX-­‐6   PC-­‐15   HUX-­‐5   PC-­‐8   MAP-­‐7   0CZ-­‐7   HUX-­‐11   PUJ-­‐8   MAP-­‐5   CAC-­‐5   PIJ-­‐2   PC-­‐6   PUJ-­‐7   CDCU-­‐1   ARR-­‐15   SCH-­‐1   PC-­‐14   ARR-­‐16   CCR-­‐3   PC-­‐12   RIZ-­‐4   PC-­‐7   SCH-­‐2   PC-­‐2   HUX-­‐7   PIJ-­‐4   MAP-­‐4   PC-­‐13   PIJ-­‐5   CDCU-­‐3   ARR-­‐6   JIQ-­‐6   COM-­‐2   PUJ-­‐5   CCR-­‐5   ARR-­‐17   ARR-­‐11.1   ARR-­‐7   COM-­‐13   MAP-­‐3   HUX-­‐3   VCO-­‐3   TON-­‐6   MAP-­‐2   PUJ-­‐2   ACA-­‐6   CDCU-­‐5   VCO-­‐2   ARR-­‐13   CDCU-­‐6   MAP-­‐8   MAP-­‐6   CAC-­‐8   ARR-­‐9   CCR-­‐2   CCR-­‐1   COM-­‐12   PC-­‐3   VIF-­‐2   ARR-­‐2   ARR-­‐4   COM-­‐3   SCH-­‐10   PIJ-­‐6   SCH-­‐6   PC-­‐11   HUX-­‐8   HUX-­‐4   BERR-­‐1   TON-­‐7   CDCU-­‐4   VLR-­‐1   PUJ-­‐4   PUJ-­‐3   ACA-­‐5   VIF-­‐3   RIZ-­‐2   IXT   CAC-­‐3   CAC-­‐1   HUX-­‐1   CAC-­‐6   ARR-­‐11*   RIZ-­‐3   TAP-­‐2   JIQ-­‐1   CHIC-­‐1  

Dendrograma  
C1   C2   C3   C4   C5  

 
49  

99  

149  

199  

Disimilitud  

 
0  

20  

40  

60  

80  

100  

120  

140  

160  

180  

Disimilitud  

Figura 8. Dendrograma de disimilitud de 90 accesiones de Jatropha curcas L. del Estado de Chiapas, del Banco de Jatropha del CenBio de la Universidad Autónoma de Chiapas.

   

Se realizó una prueba de correlación de Mantel entre la matriz de distancias generada de datos genéticos reportados por Sánchez-Gutiérrez (2010) usando el programa GenAlEx© versión 6.3 y la matríz de distancias a partir de datos morfológicos, esta obtenida del análisis de discriminante. Esta prueba de correlación se realizó por poblaciones (5) y por accesiones (87); los resultados muestran que las matrices generadas por poblaciones no tienen correlación (p = 0.448), mientras que las matrices generadas por accesiones sí mostraron correlación (p = 0.001). Lo anterior significa que el estudio de la diversidad de J. curcas utilizando marcadores morfológicos florales revela patrones de agrupación de accesiones similares a los que se obtienen con marcadores moleculares AFLP. Aunque existen muchos estudios de diversidad de J. curcas colectada en distintas partes del mundo (para una revisión ver Ovando-Medina et al., 2011), no hay reportes que utilicen marcadores florales como estimadores de variación, por lo que no se pudieron contrastar los hallazgos del presente estudio. Un estudio de caracterización del desarrollo floral en J. curcas fue reportado por Wu et al. (2011), donde abordan detalladamente la anatomía de flores e inflorescencias, aunque no presentaron datos de variación entre accesiones. Los resultados de la presente investigación son una contribución al conocimiento de la diversidad biológica contenida en los cercos vivos de J. curcas del Sur de México, los cuales señalan, junto con los datos de otras investigaciones que utilizaron marcadores fenotípicos y moleculares, que la región mesoamericana es un centro de diversificación de esta especie.

   

4.- Conclusiones Los caracteres florales de J. curcas de la región mesoamericana son altamente variables entre accesiones, pero a la vez son informativos, ya que permiten la agrupación a nivel de poblaciones. La floración de J. curcas se presenta en tres eventos (marzo-abril, agosto y noviembre), siendo el pico de marzo-abril, correspondiente al inicio de lluvias, donde se despliega la mayor abundancia de inflorescencias, con 85.2% de las accesiones en floración. No obstante, algunas accesiones florecen todo el año (ARR-7, CDCU-3, MAP-8, PC-15).   J. curcas requiere un periodo de reposo que coincide con la época de secas, posteriormente la floración se dispara con el inicio de las lluvias, pero se inhibe con un exceso de humedad en el suelo. El 93.2% de las accesiones son monoicas, 1.9% androicas, 2.9% ginoicas, 0.9% andromonoicas y 1.9% sub-androicas. El análisis de discriminante reveló que las variables más importantes por su contribución a la varianza son: diámetro de la flor masculina, largo del pétalo femenino, largo de nectario masculino. Se encontró que las poblaciones Centro e Istmo están estrechamente relacionadas y que Centro comparte características florales con las poblaciones Oaxaca y Frailesca. Por su parte, las poblaciones Guatemala, Frontera, Soconusco y Guerrero tienen menos relación con resto de poblaciones y entre ellas. A pesar de su cercanía geográfica, las poblaciones Frontera y Soconusco están diferenciadas en sus caracteres florales. El análisis de clasificación ascendente jerárquica muestra que las accesiones de J. curcas del Sur de México se agrupan sin un patrón geográfico, mientras que las accesiones con sexualidad no típica se agrupan juntas; de esta manera, un grupo estuvo formado por plantas ginoicas y otro por accesiones androicas y andromonoicas.

   

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