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Enfermedades por Clostridios.

Jorge L. Trtora P.1 1.- Introduccin general: 1.1. Etiologa: Las clostridiosis son enfermedades bacterianas, infecciosas, no contagiosas, de distribucin mundial, con la nica excepcin de C. perfringens B, que solo se ha diagnosticado en Sudfrica, Europa y el Cercano Oriente (Casas, 1969; Gkiourtzidis et al., 2001). Las enfermedades por clostridios renen una serie de cualidades comunes, que derivan de caractersticas propias del gnero Clostridium, presentes en diferente grado en todas sus especies patgenas. La nica que es necesario excluir de estas generalidades es el botulismo, que debe manejarse como una intoxicacin y no como una enfermedad infecciosa. Las clostridiasis se comunican fundamentalmente como enfermedades graves en los rumiantes y en particular en los ovinos, sin embargo la mayora de las especies del gnero pueden afectar a las distintas especies domsticas y el hombre, con la nica excepcin claramente establecida de C. chauvoei, que no produce enfermedad ni en los quidos, ni en los humanos. Las enfermedades clostridiales son raras en el hombre, generalmente ocurren cuadros de gangrena por heridas laborales accidentales, de guerra, asociadas al puerperio e intoxicaciones alimentarias (Casas, 1969). Todos los clostridios son bacilos Gram positivos, anaerobios o microaeroflicos, formadores de esporas que resisten en el medio ambiente (instalaciones-potreros), por varios aos, ms de diez, an en condiciones extremas de temperatura y sequa. Uno de los factores de mayor importancia para que clostridios saprofitos y patgenos, se encuentren ampliamente distribuidos en el suelo (enfermedades telricas), en el intestino y otros rganos, de animales normales y sus cadveres, cualquiera que haya sido la causa de muerte (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). 1.2. Patogenia: Las especies patgenas tienen en comn la capacidad de producir potentes exotoxinas, que son las responsables de las lesiones y de la presentacin de la enfermedad. La capacidad de producir toxinas y los efectos letales de estas, ocurren en proporcin inversa a la capacidad invasiva de la especie de clostridio considerada, as, C. botulinum, que no infecta al animal o C. tetanii que se mantiene en la herida original en la que germin y prolifer, producen toxinas extremadamente potentes, que inducen efectos an a muy altas diluciones, mientras en el otro extremo C. chauvoei y C. septicum producen toxinas necrticas de menor potencia, pero son especies sumamente invasivas. Las toxinas de los clostridios se denominan segn las letras del alfabeto griego y aunque estas denominaciones pueden coincidir entre distintas especies de clostridios, las toxinas son diferentes para cada especie en sus cualidades biolgicas y antignicas (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). Los cuadros por clostridios son de curso agudo o sobreagudo, lo que impide el establecimiento de medidas de tratamiento, la mortalidad es en la mayor parte de los casos del 100%, la nica excepcin es el caso de ttanos. Estas bacterias, por otra parte, proliferan en
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Dept. Cs. Biolgicas, FES Cuautitln UNAM, tortora@unam.mx

lesiones isqumicas, anaerobias, por lo que el uso de antibiticos aplicados en forma sistmica, no tendr ningn efecto, en cualquiera de las enfermedades del gnero. La presentacin de la enfermedad por clostridios, pese a su amplia distribucin, depende de factores determinantes que induzcan condiciones de anaerobiosis, pH y presencia de sustratos fermentables, apropiados para que las esporas germinen, prolifere la bacteria y se produzcan importantes cantidades de toxinas. Estos factores, varan segn la especie involucrada y la forma de enfermedad: el tipo de herida: punzante, profunda, con dao vascular y tisular severo, es el elemento condicionante de los cuadros de gangrena, de ttanos, de carbn sintomtico, de edema maligno o de cabeza hinchada en carneros; los cambios en la funcin digestiva por cambios de dieta, indigestiones o parasitosis, que alteran el trnsito y la actividad digestiva, son condicionantes de las situaciones de enterotoxemia y del braxy; el dao heptico, inducido por parasitosis, larvas migrantes y adultos, las hepatitis, las hepatosis txicas o metablicas, son necesarios para la presentacin de la hepatitis necrtica y la hemoglobinuria bacilar. La amplia distribucin de los clostridios y la imprescindible presencia de estos factores determinantes para que se pueda presentar la enfermedad, permite entender a las clostridiosis como toxiinfecciones, enfermedades infecciosas no contagiosas (Casas, 1969, Sterne, 1979). Estas mismas condiciones explican su carcter enzotico, regional y su presentacin espordica, en ocasiones estacional, dependiente de condiciones climticas, de alimentacin o de manejo, propias de la regin o an del rancho en que se presentan (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976; Sterne, 1979). 2.- Enterotoxemia 2.1.- Introduccin: Esta enfermedad, determina cuadros entricos, necrtico-hemorrgicos, producidos por las toxinas de dos tipos de clostridios pertenecientes a la especie C. perfringens (C. welchii) los tipos C y D (Casas, 1969), el cuadro clnico-patolgico de la enfermedad vara ligeramente en cada caso. Un tercer tipo, C. perfringens tipo A, es muy discutido y la mayora de los autores considera que no es un agente causal de enterotoxemia (Casas, 1969; Trtora, 2005), aunque en algunos casos es el nico patgeno asociable al cuadro clnico y se han descrito situaciones de enteritis hemorrgica en becerros por este tipo, es considerado tambin un importante agente de cuadros de intoxicacin alimentaria (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976; Manteca et al., 2001; McClane, 2001). 2.2. Etiologa: Los dos tipos de C. perfringens C y D, se distinguen entre s por su diferente habilidad para producir las consideradas toxinas principales, por su importancia en la patogenia de la enfermedad, denominadas: , , y y distintas toxinas secundarias o menores (Oakley y Warrack, 1953; Brooks et al., 1957). El tipo B es extico en Amrica y se identifica asociado a casos de disentera de los corderos, principalmente en pases del Mediterrneo y Medio Oriente (Gibert et al., 1997; Gkiourtzidis et al., 2001). C. perfringens es habitante normal del intestino de los mamferos, es un bacilo Gram positivo, corto (4-6), que forma pequeas cadenas de hasta 4 bacterias, con esporas subterminales (Casas, 1969). Se considera a las toxinas y como las de mayor importancia en la patogenia de esta enfermedad; estas toxinas pueden diferenciarse por pruebas de serolgicas, o mediante 2

tratamiento con tripsina. La toxina se inactiva por la tripsina, mientras que la es secretada por la bacteria como protoxina y se activa al ser expuesta a la tripsina, potenciando varias veces su efecto en presencia de la enzima (Oakley y Warrack, 1953; Brooks et al., 1957; Gil Turnes, 1976). 2.3. Patogenia, lesiones y diagnstico: En estas enfermedades actan como factores desencadenantes todas aquellas situaciones que pueden determinar alguna forma de disfuncin digestiva, con reduccin del peristaltismo o incluso atona intestinal, presencia de contenido fermentable y cambios de pH y relacin O2/CO2 (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). Entre los factores ms frecuentes se deben considerar: cambios en la dieta, alimentacin suculenta con incremento en los niveles de protena y/o energa, situaciones de indigestin con acidosis, sobrecarga ruminal, alta produccin de leche por las madres y parasitosis. En corderos, en la primera semana de vida, la presencia del factor antitripsina del calostro, se considera de importancia en los cuadros por C. perfringens C, en los que la toxina es el principal factor de patogenicidad y esta se inactiva por efecto de la tripsina digestiva, sin embargo los cuadros ms frecuentes ocurren en animales de ms de un ao (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). El efecto de las toxinas vara segn sus concentraciones relativas, las toxinas mayores producen necrosis de la mucosa con aumento de permeabilidad, que explica la observacin de enteritis necrtico-hemorrgica (Moon, 1978). El efecto de estas toxinas altera la permeabilidad intestinal y vehiculiza las toxinas, mayores y menores, a todo el sistema, lo que explica la presencia de lesiones en rganos distintos del intestino delgado, la rpida putrefaccin del cadver y las manifestaciones nerviosas observables en algunos casos (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). En todos los casos la lesin caracterstica es una enteritis necrtico-hemorrgica, localizada en yeyuno-ileon, que presenta en consecuencia contenido ms o menos sanguinolento segn el tipo y la cepa de C. perfringens involucrada y las condiciones del hospedero que desencadenaron el cuadro: especie, edad, calostrado y caractersticas de la disfuncin digestiva, entre las ms importantes. El paso de las toxinas a todo el sistema, desde el intestino alterado, determina presencia de lquidos sanguinolentos en las cavidades torcica, abdominal y en el pericardio, el pulmn y el hgado se presentan congestionados, hemorrgicos y friables, igual que el rin (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). En el diagnstico diferencial deben considerarse otros patgenos que pueden inducir cuadros de enteritis necrtico-hemorrgicas, principalmente cepas de E. Coli verotoxignicas (Valdivia et al., 2000) y Salmonella spp. (Manteca et al., 2001), otras formas de enteritis hemorrgica que ocurran en intestino delgado, en particular las inducidas por Eimeria spp., deben considerarse en el diagnstico diferencial, aunque estas raramente son fatales y cursan con diarrea de tipo disentrico. Considerando que C. perfringens es habitante normal del tracto digestivo, su aislamiento no tiene valor diagnstico. La identificacin de las toxinas presentes en los filtrados intestinales, asociada al cuadro de lesiones, es en cambio, el elemento crtico de diagnstico, para establecer el tipo de clostridio involucrado, definir estrategias vacunales adecuadas y en su caso la efectividad o inefectividad de un producto vacunal, para tal fin el contenido intestinal debe ser enviado al laboratorio en frasco, de preferencia estril y refrigerado y nunca en asas ligadas (Casas, 1969; Jasmin, 1975; Gil Turnes, 1976; Sterne, 1979). En Mxico no existen laboratorios con herramientas para demostrar toxinas 3

clostridiales, por lo que es prudente realizar frotis de contenido intestinal y verificar la presencia de grande cantidades de bacterias en su morfologa tpica, muchas veces como nicos elementos presentes en el frotis. 2.3.1. Enterotoxemia de tipo D (Enfermedad del rin pulposo): Este cuadro producido por C. perfringens D, es una de las enfermedades infecciosas ms importantes de los rumiantes, pese a su presentacin espordica y ocurre con mayor frecuencia en ovinos (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). La enfermedad se asocia a mejoras en la alimentacin y a la tecnificacin del manejo nutricional de los rebaos, en particular en sistemas de engorda intensiva de corderos, con granos y concentrados y al uso de praderas irrigadas. La enfermedad puede presentarse en animales de cualquier edad, pero usualmente en los de mejor condicin y estado de carnes (Casas, 1969). Los factores predisponentes son diversos, entre los ms frecuentemente observados pueden mencionarse: -Cambio brusco de alimentacin, con aporte de alimentos suculentos, ingreso a sistemas de engorda con concentrados o alimentos con poca fibra. -Pastoreo en terrenos mejorados o praderas, con abundante disposicin de forrajes de calidad, especialmente luego de pocas de penuria alimenticia, inicio de lluvias y rebrote de la pastura. -Indigestin con acidosis o cualquier otra condicin que determine atona ruminal. -Cras de ovejas con elevada produccin lctea. -Parasitosis, cestodosis (Moniezia spp.), trichostrongilosis masivas, haemonchosis grave. La presencia de los parsitos puede obstruir el trnsito intestinal y modificar la motilidad, creando condiciones apropiadas para la germinacin de esporas y la produccin de toxinas (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). El enlentecimiento del trnsito intestinal y la presencia de un sustrato fermentable, favorecen la proliferacin del clostridio (siempre presente) y la produccin de la protoxina , la accin de la tripsina sobre la protoxina genera la toxina mucho ms txica. La toxina de efecto necrotizante daa gravemente la mucosa intestinal y ayudada por el resto de las toxinas que produce esta bacteria (colagenasa, hialuronidasa, proteasas, lecitinasas) pasan a la circulacin y producen necrosis y lesiones en otros rganos. Son especialmente significativas las lesiones que pueden presentarse en rin y encfalo (Gil Turnes, 1976). La necrosis severa y extensa de los tbulos renales determina que el rgano se presente a la necropsia de consistencia blanda (friable) y de color oscuro, al punto que se deshace con facilidad cuando se incide la cpsula, la lesin es ms aparente en animales con 2-4 horas de muerte, este cambio explica el nombre de rin pulposo con que se describe esta enfermedad, aunque esta lesin no siempre se observa, en particular es difcil de observar en las formas sobreagudas (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). El dao renal determina glucosuria (diabetes nefrgena), que se considera de gran valor diagnstico, al asociarse con los dems elementos clnico-patolgicos del cuadro y es de fcil determinacin utilizando tiras reactivas con la orina presente en la vejiga. La observacin de necrosis bilateral simtrica, principalmente a nivel de los ncleos de la base del encfalo (tlamo) y en el cuerpo medular del cerebelo, se considera muy caracterstica de esta forma de enterotoxemia, la necrosis se asocia con edema y hemorragias focales, pero esta lesin solo es observable en las formas agudas de la enfermedad, cuando los animales sobreviven hasta por tres das con cuadros comatosos (Gil Turnes, 1976). Ocasionalmente el cuadro nervioso domina la imagen clnica de la enfermedad y los animales sobreviven hasta por 15 das (Trtora, 2005). 4

Otras lesiones relativamente constantes son la presencia de hemorragias, petequias y sufusiones, en endocardio y miocardio, aumento de lquido pericrdico, congestin y hemorragias pulmonares, hemorragias en subcutneo y diafragma y la presencia de lquido sero-sanguinolento en cavidad torcica y abdominal. Ndulos linfticos edemticos y hemorrgicos; hgado congestivo, hemorrgico, friable y frecuentemente con cambio graso, asociado a las dietas altamente energticas a que se someten los animales (Casas, 1969). Ninguna lesin presente o ausente por s misma tiene valor diagnstico, pero su conjunto, asociado a alguna de las situaciones predisponentes es de suma importancia en el diagnstico clnico-patolgico de la enfermedad. Es conveniente tomar frotis del contenido intestinal, la demostracin de bacilos pequeos (6), con esporas subterminales, en cadenas de dos a cuatro elementos, en grandes cantidades y normalmente con ausencia de otras bacterias, es de valor en el diagnstico de C. perfringens (Casas, 1969). La confirmacin del diagnstico se realiza por la identificacin serolgica de la toxina en el filtrado del contenido intestinal, (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). 2.3.2. Enterotoxemia de tipo C: Este cuadro es mucho menos frecuente que el anterior, clsicamente se describen dos formas de la enfermedad: la presentacin en corderos lactantes en las primeras semanas de vida, presuntamente favorecido por la presencia del factor inhibidor de tripsina en el calostro y la forma conocida como "struck" (golpe), frecuente en animales entre 1-2 aos de edad y de predisposicin desconocida, que ocurre en forma espordica y sobreaguda, con muerte sbita. A la necropsia se observa enteritis hemorrgica con ulceraciones y frecuentemente peritonitis (Casas, 1969). Considerando que la toxina es inactivada por la tripsina, esta forma de enterotoxemia depende de factores que inhiban la secrecin o actividad enzimtica o bien de condiciones que favorezcan una muy activa produccin de toxina (Gil Turnes, 1976). El cuadro de lesiones es semejante al descrito para C. perfringens D, pero las lesiones son de menor intensidad y no se producen lesiones en encfalo, ni glucosuria (Casas, 1969). Estos elementos no son sin embargo concluyentes y se debe confirmar el diagnstico mediante la demostracin de las toxinas y , esta ltima propia del tipo C, a falta de sueros o toxinas de referencia, se puede emplear la tripsina para tratar los filtrados intestinales y evaluar su potencialidad txica; esto solo es posible en cadveres con muy poco tiempo de muertos, dado que la toxina es muy lbil y se produce en pequeas cantidades (Casas, 1969). Por lo dems, la patogenia, las lesiones y el diagnstico de la enfermedad, son semejantes a lo planteado para enterotoxemia D. 2.4. Prevencin y control: Un primer elemento de control es evitar fluctuaciones en la cantidad y calidad del alimento ofrecido a los animales. Sin embargo, sera ilgico pensar en reducir la alimentacin de las hembras gestantes, para promover su menor produccin de leche y reducir el riesgo de enterotoxemia en sus cras o mantener en sistemas de pastoreo a los corderos de abasto, cuando una dieta de concentrados acorta su engorda y es rentable en trminos de conversin, costos del concentrado y kilo de animal al mercado. En cualquier caso una correcta programacin del manejo nutricional de los animales a lo largo del ao y por etapas y el cuidado de realizar cambios graduales de dieta en el paso de una etapa a otra, ayudar significativamente a reducir los accidentes por C. perfringens. 5

Las bacterinas toxoides para C. perfringens C y D, fueron desarrolladas a mediados del siglo XX y cuando son correctamente elaboradas, en particular cuando tienen suficiente antgeno de toxina inactivado (toxoide), resultan extraordinariamente eficientes para prevenir estos cuadros (Ayala et al., 1987). 3.- Gastritis hemorrgica (Braxy) 3.1. Introduccin: La enfermedad se presenta en forma aguda o sobreaguda, con repentina postracin, fiebre y muerte, en corderos y borregos jvenes de menos de un ao, que ingieren pasturas congeladas o lquidos fros (Freitas, 1987; Casas, 1969). Es de las enfermedades por clostridios menos estudiada y menos reportada, quizs como consecuencia de que los factores desencadenantes ocurren en condiciones muy regionales o que estos encubren las lesiones inducidas por la bacteria (Casas, 1969). 3.2. Etiologa: La enfermedad es producida por C.septicum y sus toxinas necrticas. 3.3. Patogenia, lesiones y diagnstico: Se considera como factor predisponente cualquier situacin que induzca cambios hemodinmicos en la mucosa gstrica y que puedan determinar condiciones de baja perfusin, que creen las condiciones de anaerobiosis requeridas por la bacteria; es posible que la presencia de soluciones de continuidad sea tambin un factor necesario para vehiculizar esporas o a la bacteria hacia planos internos de la mucosa. La mayor parte de los casos descritos se han asociado a la ingestin de alimentos o agua de bebida excesivamente fros o congelados, pero es posible que la ingestin de cualquier alimento o sustancia con efectos irritantes sobre la mucosa, pueda actuar en forma semejante e inducir cambios vasculares en el abomaso. Se ha sealado adems como factor predisponente la presencia de lesiones en la mucosa producidas por parsitos (H. contortus) (Casas, 1969; Freitas, 1987). A la necropsia es caracterstica la abomasitis necrtico- hemorrgica, la pared del abomaso se observa gangrenada, frecuentemente asociada a peritonitis y pericarditis, con lquidos sanguinolentos en las cavidades y lesiones de aspecto hemorrgico en la serosa. La presencia de la bacteria, demostrable en grandes cantidades, mediante frotis o cultivos obtenidos a partir de las lesiones del estmago, en animales a los que se les practic la necropsia poco tiempo despus de muertos (menos de 6-10 horas), es un buen criterio de confirmacin diagnstica (Casas, 1969). Se insiste en la necesidad de realizar esta prctica diagnstica solo en cadveres con pocas horas de muertos, dada la gran capacidad invasiva de este microorganismo, situacin que puede inducir a errores diagnsticos de solo basarse en la demostracin de la bacteria (Casas, 1969). 3.4. Prevencin y control: En el control de la enfermedad se debe prestar atencin a la condicin en que se administran los alimentos a los animales y en cuidar su condicin parasitaria, en particular para nematodos gastroentricos. Las bacterinas toxoides para edema maligno protegen contra 6

gastritis hemorrgica, si los cuadros se presentaran en animales muy jvenes, de menos de tres meses de edad, es necesario vacunar a las madres anteparto. 4.- Hepatitis necrtica y hemoglobinuria bacilar. 4.1. Introduccin: Estas enfermedades son producidas por tipos de C. oedematiens (C. novy), cuando en el hgado se presentan condiciones de anaerobiosis apropiadas a la germinacin de las esporas, la proliferacin de la bacteria y la produccin de toxinas (Gil Turnes, 1976). Las lesiones hepticas y la especie de clostridio involucrada son el elemento de unin entre estas dos enfermedades de distribucin mundial. Aunque estas enfermedades han sido comunicadas fundamentalmente en rumiantes, se han descrito cuadros naturales y experimentales semejantes tambin en los cerdos. 4.2. Etiologa: Estos cuadros son producidos por C. oedematiens (C. novy), es el ms grande de los clostridios (8-16), presenta esporas centrales o subterminales que lo deforman. Es un anaerobio estricto, el ms difcil de cultivar y trabajar en el laboratorio, por lo que la demostracin de su presencia en frotis o improntas, a partir de las lesiones hepticas sospechosas es un importante soporte del diagnstico. La bacteria produce distintas toxinas segn el tipo considerado, pero en forma particular una lecitinasa, que explica las lesiones hemolticas y la presencia de abundante cantidad de lquido serosanguinolento en las cavidades de los animales muertos por estos agentes (Gil Turnes, 1976). De los cuatro tipos reconocidos de C. oedematiens, los de mayor inters en la veterinaria son el B y el D. 4.3. Patogenia, lesiones y diagnstico: El animal se infecta a partir de la ingestin de esporas, que en forma no aclarada atraviesan la mucosa digestiva y se van a localizar al hgado, donde pueden permanecer en forma latente por largos periodos, hasta que se produzca una lesin heptica que cree las condiciones de pH y anaerobiosis apropiadas para la germinacin, la multiplicacin bacteriana y la produccin de toxinas. Se ha sealado que un 65% de los ovinos, que llegan al rastro en condiciones adecuadas para la faena, presentan esporas de C. oedematiens, indicando que las condiciones del hgado normal, no permiten su germinacin (Gil Turnes, 1976). Diversos factores, txicos, metablicos e infecciosos, pueden daar al hgado y crear las condiciones de anaerobiosis apropiadas a la germinacin de las esporas. El dao heptico determina zonas de infarto caractersticas, la mayora de las veces ocurren infartos rojos y la zona se observa hinchada, sobresaliendo en la superficie del rgano y de color rojo prpura, pero ocasionalmente ocurren infartos blancos, plidos y que deprimen la superficie heptica (Jasmin, 1975). Las formas inmaduras, migratorias, de Fasciola heptica, son consideradas las principales responsables de inducir las lesiones que con mayor frecuencia generan estas condiciones de germinacin. Se deben sin embargo considerar otros posibles factores, tales como: desrdenes metablicos; sustancias txicas (vegetales, inorgnicos y medicamentos), 7

condiciones de hepatitis y otras parasitosis con formas larvarias de migracin transheptica. En Mxico, la intoxicacin por aflatoxinas merece especial atencin como factor de dao heptico crnico. El uso de dietas altamente energticas, que inducen condiciones de acidosis ruminal crnica, con lesiones en mucosa ruminal, que la hacen permeable a microorganismos que por va porta alcanzan el hgado, puede determinar focos necrticos en el rgano, susceptibles de favorecer la proliferacin del clostridio, en este sentido son particularmente importantes H. somnus y B. necrophorus. Debe sealarse la paradoja de que algunos de los productos empleados en el tratamiento de F. heptica tienen cierta toxicidad para el tejido heptico. La frecuente asociacin de F. heptica con esta clostridiosis, puede inducir a errores diagnsticos, al atribuir la muerte de los animales a la parasitosis, una necropsia completa y cuidadosa, evita caer en esta situacin. 4.3.1. Hepatitis necrtica (Enfermedad negra de los ovinos): Esta enfermedad es producida por C. oedematiens B, esta bacteria produce dos toxinas principales una con actividad letal-necrtica () y la otra de lecitinasa () con efectos necrtico-hemolticos, por su accin sobre las membranas celulares, que explica la hemlisis y el aumento de permeabilidad capilar. Los animales afectados mueren en forma sobreaguda, sin signologa previa (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). A la necropsia llama la atencin, la rpida putrefaccin del cadver, la presencia de exudados sanguinolentos en el subcutneo, que como consecuencia de los cambios posmortem adquiere color negro, particularmente del lado que cay el animal, de ah el nombre de enfermedad negra. Esta alteracin es consecuencia de la congestin hiposttica y la imbibicin por hemoglobina, favorecida por el efecto de la lecitinasa, que aumenta la permeabilidad capilar y produce hemlisis, el color negro es consecuencia de la formacin de sulfuro de hierro. El pericardio y las cavidades torcica y abdominal tambin presentan lquidos serosanguinolentos. An con estas caractersticas, las lesiones de mayor inters diagnstico se encuentran en el hgado y se caracterizan por la presencia de zonas de infarto; el rgano se presenta congestivo y al corte es notoria la salida abundante de lquido sanguinolento, sin embargo, ocasionalmente el hgado puede no presentar lesiones macroscpicas. La muerte sobreaguda y la rpida putrefaccin del cadver pueden determinar confusiones diagnsticas con ntrax (Gil Turnes, 1976); el diagnstico diferencial debe considerar adems, la confusin con Fasciola heptica, que puede coexistir con estos cuadros y dada la fcil observacin del parsito encubrir al clostridio (Casas, 1969). La confirmacin del diagnstico puede obtenerse por la demostracin del bacilo en frotis o improntas obtenidos a partir de las lesiones hepticas y en cortes histolgicos (Jasmin, 1975; Gil Turnes, 1976). En este caso la demostracin de toxinas en los lquidos extravasados (Gil Turnes, 1976) o el aislamiento bacteriano, son procedimientos difciles y por lo mismo pueden esperarse resultados falsos negativos. 4.4. Prevencin y control: El control de F. heptica puede redundar en una menor incidencia de esta enfermedad, pero debe insistirse que cualquier condicin de origen txico, infeccioso o incluso metablico-funcional, puede inducir trastornos hemodinmicos en el hgado, lesiones de infarto y favorecer la germinacin de las esporas bacterianas presentes (Gil Turnes, 1976). El uso adecuado de vacunas eficientes elimina la presentacin de casos en el rebao. 8

5.- - Gangrenas gaseosas, Carbn sintomtico, Edema maligno, Cabeza hinchada y Ttanos. 5.1. Introduccin: Estos cuadros resultan de la infeccin de heridas accidentales o de manejo, por diversos clostridios patgenos, frecuentemente en infecciones mixtas y asociados con pigenos, ocurren en todas las especies, aunque son raros en el perro (Casas, 1969). En veterinaria son sin embargo, importantes tres condiciones de gangrena monoespecficas: el carbn sintomtico (C. Chauvoei) y el edema maligno (C. septicum) que determinan cuadros severos de gangrena y el ttanos, que si bien no es propiamente una forma de gangrena, se incluye en esta parte, porque se desarrolla en el marco de una lesin de tipo gangrenosa, aunque de muy baja magnitud y no tendra mayor importancia, si en el lugar C. tetanii no produjera toxinas de graves consecuencias para la funcin muscular (Casas, 1969). 5.2. Etiologa: Entre los clostridios ms frecuentemente involucrados en los cuadros de gangrena se sealan: C. perfringens A, C. sordelii, C. oedematiens A, C. septicum y C. chauvoei. En los cuadros mixtos se pueden aislar varios de ellos y en asociacin con pigenos, el aspecto de las lesiones y la sobrevida de los animales afectados, depende de las especies presentes y de su capacidad de producir toxinas. C. septicum y C. chauvoei, pueden participar en cuadros mixtos, asociados con otras especies de clostridios o en forma particular determinar cuadros de gangrena monoespecficos: el edema maligno y el carbn sintomtico respectivamente (Casas, 1969). 5.3. Patogenia, lesiones y diagnstico: Las heridas profundas, cerradas (poco ventiladas) con hemorragias y necrosis extensa de los tejidos circundantes, son especialmente susceptibles a la complicacin gangrenosa, si determinan anaerobiosis local; la isquemia determina que el territorio sea poco accesible a los mecanismos de respuesta inmune celulares y humorales e inaccesible a los antibiticos (Casas, 1969). Todas las heridas se infectan fcilmente con esporas de clostridios siempre presentes en la superficie de la piel. Estas heridas predisponentes pueden ser accidentales, pero tambin pueden cumplir con estas caractersticas las heridas que sufren los animales como parte de su manejo rutinario, tal es el caso de las de castracin, castracin con anillo, aretado, parto, descole, trasquila, intervenciones quirrgicas diversas (Casas, 1969) y la aplicacin de inyectables, en este ltimo caso particularmente cuando la sustancia aplicada tiene efectos muy irritantes y necrticos sobre el tejido muscular o el subcutneo, como ocurre con las sustancias oleosas y los antiparasitarios, entre los de uso ms frecuente. El mal manejo de inyectables puede ser un importante factor predisponente a cuadros de tipo gangrenoso en clostridiosis mixtas o monoespecficas (Harwood, 1984; Brown et al., 1988). Los productos inyectables siempre determinan un cierto grado de miositis, mnimamente por el efecto traumtico de la distensin del tejido por la presin del lquido, a lo que se debe agregar el efecto irritante de la sustancia inoculada (Brown et al., 1988). Por otra parte, cada vez que la aguja atraviesa la piel de los animales inyectados se contamina con 9

esporas de clostridios, de origen fecal, que se encuentran en la superficie de la epidermis, esta contaminacin se incrementa animal tras animal. El mal hbito de utilizar la misma aguja para inyectar y tomar el producto desde el frasco mpula, asegura la contaminacin del contenido del frasco con esporas y otras bacterias, a lo que se agrega la conservacin a temperatura ambiente por meses, de unas cuantas dosis del producto contaminado. Estos malos manejos de los inyectables aseguran la necesaria relacin de la lesin del tejido muscular con la presencia de las esporas y explica la observacin de casos de gangrena despus de la aplicacin de algn inyectable al ganado, en especial vitaminas y antiparasitarios (Harwood, 1984). La especie o especies de clostridios presentes en la lesin gangrenosa y su diferente capacidad en la produccin de toxinas explican a su vez, las variaciones en el aspecto y magnitud de las mismas. Las variaciones en la capacidad fermentativa del clostridio involucrado y la posible contaminacin por otros pigenos, determinan la presencia o ausencia de gas, su olor y el aspecto del tejido necrosado. La produccin de lecitinasas y lipasas la magnitud de la condicin hemorrgica o sanguinolenta de los exudados. La capacidad de producir colagenasas, lipasas, hialuronidasas, proteasas, ADNasas, definen la invasividad del clostridio, su capacidad licuefactiva, la magnitud de la lesin y el aspecto y olor de los exudados y los tejidos necrosados (Casas, 1969; Sterne, 1979). Recientemente el empleo de PCR, se ha convertido en una interesante posibilidad de reconocimiento rpido de los diferentes clostridios que pueden involucrarse en un cuadro de gangrena (Sasaki et al., 2000; Kojima et al., 2001). 5.4. Prevencin y control: El control y el tratamiento de los cuadros de gangrena se dirige, a cuidar las condiciones generales de manejo que permitan reducir la incidencia de heridas potencialmente peligrosas, incluidas aquellas que derivan de las prcticas rutinarias del proceso productivo, tales como aplicacin de inyectables, castraciones, aretados, descorne, descole o trasquila, mejorando los cuidados de asepsia en cada caso. En el control del carbn sintomtico, se consideran las precauciones arriba sealadas en cuanto al tipo de lesiones predisponentes, en especial las derivadas del uso de inyectables y la aplicacin de medidas de manejo tendientes a reducir los traumatismos musculares consecuentes al hacinamiento y a instalaciones inadecuadas, puertas estrechas, poca superficie de comederos. El uso de bacterinas-toxoides mltiples puede cubrir algunas de las especies de clostridios involucradas en las gangrenas (Sterne et al., 1962). En ttanos, el carcter subagudo de la enfermedad que determina un cuadro clnico que puede durar hasta dos semanas, permite intentar el tratamiento de la enfermedad, aunque pocas veces da resultado. El tratamiento se basa en la debridacin de la(s) herida(s) sospechosa(s), con aplicacin local de antibiticos y antispticos y el uso de sueros hiperinmunes antitoxina y relajantes musculares. La debridacin de la herida debe realizarse de preferencia, despus que el animal ya recibi tratamiento con antitoxina tetnica (suero hiperinmune), pues estas maniobras pueden facilitar el paso de la toxina a la circulacin (Trtora, 2005). Tambin se recomienda la administracin sistmica de antibiticos en grandes dosis (Trtora, 2005), aunque esta medida no parece lgica considerando que la bacteria se est multiplicando y produciendo sus toxinas en un rea en anaerobiosis por la isquemia local. El uso de relajantes musculares y sedantes, como tratamiento sintomtico que puede evitar el paro respiratorio ha sido tambin indicado (Trtora, 2005). 10

6.- Botulismo 6.1. Introduccin: El botulismo debe considerarse como una intoxicacin y no como una enfermedad infecciosa, pues la enfermedad resulta de la ingestin, asociada a fenmenos de pica, de la neurotoxina producida por alguno de los tipos de C. botulinum, principalmente el C o el D, la bacteria puede ser ingerida junto con la toxina, pero es discutible que pueda continuar elaborando toxina en el aparto digestivo (Hariharan y Mitchell, 1977). 6.2. Etiologa: Los distintos tipos de C. botulinum son capaces de producir una protena con cualidades de neurotoxina, que en todos los casos tiene cualidades farmacolgicas semejantes y siempre es extraordinariamente potente (Hariharan y Mitchell, 1977; Johnson y Bradshaw, 2001). La toxina se produce integrada a complejos con una hemaglutinina y RNA; los genes que la codifican pueden estar presentes en el cromosoma bacteriano o asociados a plsmidos o bacterifagos, segn el tipo de C. botulinum estudiado y sus mecanismos de regulacin han sido intensamente estudiados (Johnson y Bradshaw, 2001). 6.3. Patogenia, lesiones y diagnstico: El clostridio prolifera y produce las toxinas en el medio ambiente, en materia orgnica (animal o vegetal) en descomposicin, en la que se dan condiciones de sustrato, pH y anaerobiosis adecuadas a su metabolismo. Por lo que las causas ms frecuentes de intoxicacin son la ingestin de alimentos contaminados, de cadveres en putrefaccin, por animales con pica (osteofagia), que se atribuye a carencias de fsforo en el terreno de pastoreo y la ingestin de vegetales en descomposicin en los bordes lodosos de charcos y lagunas. Los ensilados mal conservados y la gallinaza o pollinaza, tambin han sido sealados como fuente de intoxicacin (Blood et al., 1988). La neurotoxina que producen los tipos de C. botulinum, bloquea la transmisin sinptica al impedir la liberacin de acetilcolina (Johnson y Bradshaw, 2001), por lo que a diferencia del ttanos, la parlisis que se produce es una parlisis flcida. Los signos clnicos varan segn la cantidad de toxina ingerida y absorbida, paso espstico, marcha rgida, salivacin abundante, parlisis flcida y finalmente la muerte del animal (Sterne, 1979) el cuadro es semejante a la que se observa en animales, en especial rumiantes, con hipocalcemia, situacin que frecuentemente confunde el diagnstico, en particular cuando en ambos casos coincidentemente se seala la ocurrencia de osteofagia. Los casos de rabia paraltica pueden ser otra causa frecuente de error diagnstico (Trtora, 2005). La confirmacin del diagnstico, depende de la demostracin de la neurotoxina preferentemente en el suero del animal o secundariamente en los contenidos digestivos (Jasmin, 1975). 7.- Elementos generales en el diagnstico de las clostridiasis. La posibilidad de una clostridiasis debe ser considerada en cualquier caso de muerte sbita en los animales, con putrefaccin rpida, en particular cuando se trata de animales en 11

buena condicin fsica. El carcter agudo o sobreagudo de estas enfermedades explica lo anterior y el que los animales se observen timpanizados y eventualmente con salida de lquidos sanguinolentos por boca, nariz y ano, el animal se mantuvo comiendo hasta pocas horas antes de morir y la fermentacin posmortem de los contenidos digestivos explica la timpanizacin, mientras que los efectos de lecitinasas, lipasas y factores de edema son la causa de los escurrimientos por orificios naturales y la presencia, generalmente abundante, de lquidos sanguinolentos en las cavidades (Casas, 1969; Gil Turnes, 1976). En todos los casos es de fundamental importancia evaluar en la anamnesis la ocurrencia de los factores predisponentes propios de la clostridiasis de que se sospeche, cambios de dieta en las enterotoxemias, tratamientos inyectables o heridas en las gangrenas y el ttanos, presencia de fasciolasis o de condiciones hepatotxicas en los casos de C. oedematiens, en muchos casos el diagnstico de una clostridiosis puede establecerse a partir de la historia clnica (Casas, 1969; Jasmin, 1975). Son sin embargo los hallazgos a la necropsia, el primer elemento de fundamental importancia en el diagnstico de las clostridiasis. Es importante subrayar que en el casos de estas enfermedades y a diferencia de los casos sospechosos de antrax, realizar la necropsia es imprescindible al diagnstico y no facilitar condicones de contaminacin por esporas, dado que como se seal antes, las esporas de los clostridios estan ampliamente distribuidas en el ambiente y presentes en los animales normales. Las lesiones presentes a la necropsia pueden ser lo suficientemente caractersticas para definir con un alto margen de seguridad la sospecha de la clostridiasis. La realizacin de frotis e improntas, a partir de las lesiones sospechosas, que se colorean con Gram es siempre un elemento de gran ayuda, mxime considerando que no siempre se puede disponer de un laboratorio para el aislamiento de anaerobios y que la demostracin de gran cantidad de formas vegetativas de los clostridios en los mismos, es indicador de que existieron las condiciones que les permitieron germinar y proliferar en la lesin. El uso de anticuerpos marcados (fluorescentes) en los frotis, aporta elementos de mayor especificidad y confiabilidad al diagnostico (Batty y Walker, 1965; Casas, 1969; Jasmin, 1975). Esta herramienta es til siempre que no hayan transcurrido ms de 6-8 horas de la muerte del animal a la realizacin de la necropsia, de lo contrario y como parte de los cambios posmortem y las condiciones de anaerobiosis y pH del cadver, las especies ms invasivas de clostridios (C. septicum, C. chauvoei, C. perfringens) difunden a todos los rganos desde el aparato digestivo. El uso de frotis es especialmente til como se seal antes, en el caso del ttanos, dada la muy particular morfologa de la bacteria y el de ser un clostridio no invasivo (Casas, 1969). El aislamiento de las bacterias requiere de un laboratorio equipado para el manejo de anaerobios y es de poca utilidad en el caso de los clostridios, considerando que sus esporas se encuentran en el aparato digestivo, msculos e hgado, an en animales normales y que al realizar la necropsia y tomar las muestras estas fcilmente se contaminan con las esporas presentes en el ambiente y en la piel del cadver. La prueba definitiva de diagnstico en las clostridiosis, incluso para definir la especie y el tipo de clostridio involucrado, es la demostracin de las toxinas en suero o sangre, en los lquidos extravasados presentes en las cavidades del animal o en filtrados del contenido intestinal (Jasmin, 1975). Actualmente el uso de ELISA de captura es una de las tcnicas ms empleada para demostrar la presencia de las toxinas (Hale y Stiles, 1999; McLauchlin et al., 2000; Sasaki et al., 2000; Kojima et al., 2000; Crdoba et al., 2001). El uso de PCR aparece como una de las estrategias ms prometedoras en el futuro inmediato, para definir el tipo de bacteria involucrada en cada caso (Sasaki et al., 2000; 12

Kojima et al., 2001; Crdoba et al., 2001). De no contarse con estas herramientas diagnsticas, la demostracin de lesiones caractersticas y los frotis obtenidos a partir de las mismas son la base del diagnstico. 8.- Profilaxis vacunal de las clostridiosis. El Dr. Max Sterne, sin duda una de las figuras ms importantes en el estudio de las clostridiosis en el siglo XX, en particular en lo relativo a su profilaxis vacunal, ha afirmado: "Todas las vacunas contra clostridios, si son bien fabricadas, van a proteger slidamente. Si una vacuna contra clostridios es fabricada y utilizada correctamente y falla en detener un brote, entonces el diagnstico ha sido incorrecto... todas las enfermedades por clostridios pueden ser completamente controladas por vacunacin" (Sterne, 1979). Como ya se ha sealado, los clostridios presentan una amplia distribucin en el medio ambiente y en el organismo animal normal y en todos los casos su capacidad patgena y virulencia depende de la produccin de toxinas. En consecuencia, que el animal establezca una respuesta inmune contra el soma bacteriano ser de poca utilidad en el control de la enfermedad; lo importante por el contrario, es que la respuesta inmune sea capaz de bloquear rpidamente el efecto de las toxinas, lo que se puede lograr induciendo una buena respuesta de anticuerpos neutralizantes. Para lograr esta respuesta de anticuerpos neutralizantes, los animales deben ser inmunizados con las toxinas inactivadas, lo que se logra generalmente con un tratamiento de formalina produciendo un toxoide, de otra forma, la proteccin eficiente en las enfermedades por clostridios se logra con toxoides, no con bacterinas (Sterne et al., 1962; Gadalla et al., 1974; Trtora, 2005). En este punto estriba el principal problema en la calidad de las vacunas contra clostridios, pues no todas las cepas de clostridios crecidas en medios artificiales, aunque hayan sido seleccionadas de brotes severos de la enfermedad en el campo, producen niveles adecuados de toxina, por lo que frecuentemente al inactivar los cultivos, en realidad se producen bacterinas sin toxoide y son imprescindibles adecuados controles de calidad, en particular al establecer la cantidad de toxina presente en los sobrenadantes. Este aspecto se agraba, por el hecho de que frecuentemente cepas buenas productoras de toxina en los fermentadores industriales, pierden de pronto esta capacidad y el control debe realizarse lote por lote. Debe aclararse que el componente somtico de la bacteria (bacterina), presente en las vacunas comerciales, no tiene efectos negativos y en el caso muy particular de C.chauvoei y C.septicum, es necesario para lograr una proteccin completa y eficiente contra carbn sintomtico y edema maligno (Sterne et al., 1962; Gadalla et al., 1974). En el control de las clostridiosis los productos multivalentes que se han desarrollado y que incluyen hasta 7 y 9 toxoides, confieren proteccin de la misma calidad que los inmungenos monovalentes, con la evidente ventaja que resulta del realizar una sola aplicacin a los animales (Sterne et al., 1962; Gadalla et al., 1974; Trtora, 2005). Se debe considerar en este sentido, que los toxoides, por tratarse de un material inerte, inactivado, deben asociarse necesariamente a potentes adyuvantes para lograr una buena respuesta inmune (Sterne et al., 1962; Gadalla et al., 1971; Gadalla et al., 1974). Por lo anterior, son de esperar fuertes reacciones inflamatorias en el punto de inoculacin y en consecuencia dolor en el lugar de aplicacin y posibles cuadros febriles. Por lo que los toxoides de preferencia no se aplican a animales que sern faenados en el corto tiempo por la lesin muscular que inducen, ni en hembras lactantes por el efecto de la fiebre en la disminucin de la produccin 13

de leche y en el caso de animales en cebadero, se debe esperar una baja en el consumo de alimento en los das siguientes a la aplicacin del toxoide. El programa de vacunacin debe considerar una "primovacunacin" a los 60-90 das de edad, nunca antes de los 60 das por la posible interferencia calostral, seguida de una dosis de refuerzo a los 15- 20 das; en estas condiciones los animales se protegen por un ao y se realizarn refuerzos vacunales anuales, de una sola dosis (Sterne et al., 1962; Ayala et al., 1987). La presencia de anticuerpos neutralizantes calostrales, debe ser considerada en la toma de decisin de la primo vacunacin de los animales jvenes. En ningn caso se deben aplicar toxoides contra clostridios antes de los 60 das de edad, se ha demostrado el desarrollo de inmunidad natural, no vacunal, en los animales, posiblemente por pequeas exposiciones a la toxina , que tiene efectos permeabilizadores sobre la mucosa intestinal, exponindose al sistema inmune e induciendo la formacin de anticuerpos que podran pasar al calostro y en el caso de madres vacunadas anteparto esta fecha debe extenderse hasta los 90 das cuando se emplean productos de calidad reconocida (Casas, 1969). De lo contrario, la aplicacin de los toxoides dentro del periodo de proteccin calostral (60-90 das) inducir una respuesta de neutralizacin del toxoide vacunal con los anticuerpos maternos calostrales, impidiendo la induccin de la proteccin activa vacunal y eliminado al mismo tiempo, la proteccin pasiva calostral, con el resultado de que los animales quedan completamente desprotegidos contra la enfermedad (Sterne et al., 1962). Se ha demostrado la existencia de una eficiente proteccin calostral en las cras de hembras inmunes; los anticuerpos calostrales protectores se mantienen en buenos niveles hasta los 100-120 das, momento en el que se debe inducir la proteccin activa mediante la "primovacunacin" (Sterne et al., 1962; Gil Turnes, 1976). Estos trminos se deben sin embargo establecer de acuerdo a los dems factores de produccin predisponentes a las enfermedades clostridiales: castracin, descole, aretado, ingreso a engordaderos con grano, pastoreo en praderas mejoradas, factores climticos y otros ya sealados en cada enfermedad. Se puede incrementar considerablemente el nivel de los anticuerpos calostrales vacunando a las hembras antes del parto. En hembras ya inmunizadas, se recomienda calendarizar la revacunacin anual entre los 15 y 20 das previos a la fecha prevista de parto; en hembras sin antecedentes vacunales, en necesaria una primera dosis 45-60 das antes del parto y una dosis de refuerzo 15-20 das despus (Sterne et al., 1962). Como ya se ha sealado, los programas de vacunacin deben asociarse a medidas tendientes a reducir la incidencia de los factores predisponentes (determinantes) a las distintas clostridiosis, que debern examinarse en forma particular para cada unidad productiva, segn sus peculiaridades de manejo sanitario, productivo y nutricional. En regiones o ranchos con alta incidencia de una determinada enfermedad, el control de los factores predisponentes puede asociarse a vacunaciones con mayor periodicidad, cada seis meses. 9.- Referencias. Ayala S.I.; Prez M.A.; Bojorquez N,L.; Daz A,E.; Mancera, A.; Trtora, J. (1987). Respuesta inmune en cabras vacunadas con bacterina-toxoide contra C. perfringens tipo D (Enterotoxemia). En: Memorias de la 3era. Reunin Nacional sobre Caprinocultura. Del 29 al 31 de octubre de 1987. Cuautitln Izcalli, Edo. de Mxico, Mxico. 206-207 pp.

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