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Autor: Catalina Avendao V.

Tincin Simple: Son usadas para determinar tamao, forma y agrupacin de las clulas. Se realizan con un colorante simple bsico que enocasiones puede ir acompaado de un mordiente el cual ayuda a que la coloracin se fije a la muestra, logrando, en ocasiones que estructuras pequeas como los flagelos se puedan observar. Tincin Diferencial: se usan para diiferenciar estructuras. Suele emplearce ms de un colorante. Por ejemplo: coloracin de Gram diferencia las bacterias en Gram positivas que tiene una pared rica en pptidoglicanos y Gram negativas cuya pared tiene poca cantidad de paptidoglicanos y se caracteriza por la presencia de LPS. Tincin de Ziehl Neelsen para microorganismos cido alcohol resistentes. Tincin para esporaos con verde malaquita. Tincin especial: estos colorantes interactuan con estructuras especiales de los microorganismos, como por ejemplo flagelos o cpsula. Entre estas coloraciones se encuentran las tinciones negativas, que se caracterizan por ser repelidas por las cargas negativas de la superfice de la clula evitando su penetracin.

Autor: Catalina Avendao V.

Recuerde que por bioseguridad para la realizacin de las prcticas es necesario el uso de gorro, guantes, tapabocas y bata.

PROCEDIMIENTO

1. Marque la lmina con el nmero de grupo 2. Coloque una gota pequea de agua en el portaobjetos 3. Con el mechero prendido y abrazando el mechero, tome el asa redonda, esterilcela con el calor hasta el rojo vivo. 4. Sin colocar el asa sobre el mesn y mantenindolo cerca al mechero Tome la caja de Petri con una sola mano levante un poco un extremo de la tapa, enfre el asa y tome colonia del medio de cultivo (sin tomar agar). Deje la caja sobre el mesn. 5. En la lmina que contiene la gota de agua coloque la colonia tomada homogenizndola con el agua. Djela secar. 6. Cuando este seca psela rpidamente por el fuego un aproximado de tres veces esto con el fin de fijar el frotis. 7. Coloque la lmina en el soporte del lavaplatos y comience la coloracin. 8. Para la coloracin de Gram los pasos son: 9. Encima del frotis deposite Cristal violeta y djelo durante 1 minuto. 10. Juague con agua. 11. Adicione Lugol por otro minuto. 12. Juague con agua. 13. Adicione Alcohol Acetona por 15 segundos 14. Juague con agua 15. Por ltimo, adicione Safranina por 50 segundos y juague con abundante agua. 16. Deje secar y observe en el microscopio a un aumento de 100X.

Nota: Los tiempos de la corocain varian de acuerdo a la madurez del los colorantes. Entre mas maduro un colorante menos tiempo requiere para teir.

Autor: Catalina Avendao V.

Recuerde que por bioseguridad para la realizacin de las prcticas es necesario el uso de gorro, guantes, tapabocas y bata.

PROCEDIMIENTO

1. Marque la lmina con el nmero de grupo 2. Coloque una gota pequea de agua en el portaobjetos 3. Con el mechero prendido y abrazando el mechero, tome el asa redonda, esterilcela con el calor hasta el rojo vivo. 4. Sin colocar el asa sobre el mesn y mantenindolo cerca al mechero Tome la caja de Petri con una sola mano levante un poco un extremo de la tapa, enfre el asa y tome colonia del medio de cultivo (sin tomar agar). Deje la caja sobre el mesn. 5. En la lmina que contiene la gota de agua coloque la colonia tomada homogenizndola con el agua. Djela secar. 6. Cuando este seca psela rpidamente por el fuego un aproximado de tres veces esto con el fin de fijar el frotis. 7. Coloque la lmina en el soporte del lavaplatos y comience la coloracin. 8. Cubra la lmina con Fusina fenicada durante 15 20 minutos. 9. Lave la lmina 10. Deposite sobre la lmina cido sulfrico al 7% durante un minuto. 11. Lave la lmina 12. Cubra la lmina con Azul de Metileno para ZN durante uno a dos minutos. 13. Lave la l-amina. 14. Deje secar y observe bajo el microscpio a un aumento de 100x

Nota: Los tiempos de la corocain varian de acuerdo a la madurez del los colorantes. Entre mas maduro un colorante menos tiempo requiere para teir.

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