UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U.A.

CAREN

M.Sc. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS

INGENIERIA GENETICA
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La Ingeniería Genética es la ciencia biológica que trata de la manipulación de los genes. La aplicación de los conocimientos de la Ingeniería Genética constituye la Biotecnología. El ADN puede cortarse en fragmentos por medio de las enzimas de restricción. Estos fragmentos quedan con unos extremos o bordes cohesivos, también llamados bordes pegajosos, que hacen que se puedan unir fragmentos de distinto origen, formando un ADN llamado recombinante. En Ingeniería Genética es necesario la obtención de muchas copias de fragmentos de ADN para su estudio y manipulación. Se consigue mediante la clonación, que puede ser "en vivo" utilizando células que actúan como agentes replicativos, o "in vitro", mediante la PCR, (Reacción en Cadena de la Polimerasa). Para introducir ADN recombinante en células hospedadoras, se recurre a elementos génicos llamados vectores génicos. Estos son los plásmidos, los bacteriófagos y los cósmidos. La localización de determinados segmentos de ADN se lleva a cabo mediante diversas técnicas, entre las que destacan las sondas de hibridación. La determinación de la secuencia de nucleótidos de un ADN se puede realizar por diversos métodos, como el de Sanger o de los didesoxinucleótidos. La Biotecnología es importante en medicina, agricultura y ganadería y reporta una serie de provechos, entre ellos está la síntesis de productos necesarios para la vida, diagnosis y remedio de muchas enfermedades, la prevención de enfermedades hereditarias y la consecución de plantas y animales transgénicos. El estudio del genoma humano, gracias a la tecnología de la ingeniería genética, completado en junio de 2000 abre un campo imposible de predecir y cuya finalidad es producir mejoras en la humanidad. Todas estas investigaciones y aplicaciones, deben ser realizadas teniendo en cuenta las normas universales de la ética, la dignidad humana y la conservación de la naturaleza, constituyendo un patrimonio común a todos los pueblos. Ingeniería genética en bacterias Son los seres vivos más utilizados en Ingeniería Genética. La más utilizada es la Escherichia coli. Se usa prácticamente en todos los procesos de I.G. Ingeniería genética en levaduras y hongos Son junto con las bacterias los sistemas más utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los hongos destaca por su labor médica el Penicillium.

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Ratones knockout. Ingeniería Genética en animales

se obtienen actualmente por ingeniería genética.A. gracias a la tecnología del ADN recombinante. También se han conseguido otro tipo de mejoras. Un ejemplo típico es la producción de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae. como la producción de distintas sustancias en los alimentos que aumentan su calidad nutricional. Muchas vacunas. como la hormona del crecimiento. olor. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS                  La manipulación genética de los animales persigue múltiples objetivos: aumentar el rendimiento del ganado. como anticuerpos. es posible recoger tomates maduros de la tomatera y que lleguen al consumidor conservando intactos su sabor. CAREN M. la obtención de estas proteínas se realizaba mediante su extracción directa a partir de tejidos o fluidos corporales. se puede diagnosticar si este gen anómalo está presente en un determinado individuo. una de las revistas científicas más prestigiosas del mundo. toxinas y otras sustancias que atacan a los microorganismos. Logros El 7 de marzo de 2010 fue publicado en línea y rectificado el 25 de marzo del mismo año en la revista Nature. Ingeniería Genética en plantas Actualmente se han desarrollado plantas transgénicas de más de cuarenta especies. Las técnicas de ingeniería genética también permiten el desarrollo de plantas que den frutos de maduración muy lenta. puede comportar un riesgo potencial. se clonan los genes de ciertas proteínas humanas en microorganismos adecuados para su fabricación comercial. En la actualidad. etc. como la de la hepatitis B. Antes. Como la mayoría de los factores antigénicos son proteínas lo que se hace es clonar el gen de la proteína correspondiente. tienen un interés médico y comercial muy grande. La mejora de la calidad de las semillas es también un objetivo. etc. Diagnóstico de enfermedades de origen genético Artículo principal: Diagnóstico genético preimplantacional.Sc. ciertas proteínas y hormonas. Obtención de anticuerpos monoclonales Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cáncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros síntomas. la hormona del crecimiento. Mediante ingeniería genética se han conseguido plantas resistentes a enfermedades producidas por virus. La biotecnología permite desarrollar plantas transgénicas que producen sustancias de interés farmacológico.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. una investigación del cinvestav Irapuato en colaboración con científicos de Estados Unidos y Francia en la cual hallaron una proteína llamada argonauta 9 con la que se podría llegar a . Obtención de vacunas recombinantes El sistema tradicional de obtención de vacunas a partir de microorganismos patógenos inactivos.. Aplicaciones de la Ingeniería Genética en medicina e industria farmacéutica Obtención de proteínas de mamíferos Una serie de hormonas como la insulina. Estas plantas son capaces de producir antibióticos. producir animales con enfermedades humanas para la investigación. Las aplicaciones farmacéuticas son otro gran punto de interés. elaborar fármacos. Conociendo la secuencia de nucleótidos de un gen responsable de una cierta anomalía. en la cual se clona el gen de la insulina en los humanos. Así. factores de coagulación. mejorar las cualidades organolépticas de un producto o que ciertas plantas sean más resistentes a determinados factores ambientales. color y textura. como el frío. bacterias o insectos.

Plantas resistentes a enfermedades y herbicidas. comenzaron a buscar la forma de aislarlos. como las que se usan en los detergentes en polvo Enzimas para la industria alimenticia. por ejemplo: · · · · en · Vacunas.A. modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva característica. analizarlos. El plásmido recombinante puede aislarse de estas colonias y transferirse a otras células. Las enzimas de restricción reconocen secuencias determinadas en el ADN.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. 6 o más bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos. un gen marcador de selección (por. El desarrollo de la ingeniería genética (también llamada metodología del ADN recombinante) fue posible gracias al descubrimiento de las enzimas de restricción y de los plásmidos. a través del proceso de transformación. denominada recombinante. Hay muchas enzimas de restricción obtenidas a partir de bacterias y que sirven como herramientas para la ingeniería genética. Los plásmidos son moléculas de ADN circulares. Alcances de la ingeniería genética Cuando los científicos comprendieron la estructura de los genes y cómo la información que portaban se traducía en funciones o características. Estas bacterias se denominan recombinantes o genéticamente modificadas. de resistencia a un antibiótico). De esta manera. CAREN M. éste lleva. un conjunto de metodologías que permite transferir genes de un organismo a otro.Sc. Los plásmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados como “vectores”. Las enzimas de restricción reconocen secuencias de 4. Justamente. y algunos dicen que podría revolucionar la producción agrícola internacional. Como consecuencia. ej. generados en diferentes moléculas de ADN. Hasta el momento se ha utilizado la ingeniería genética para producir. el gen de interés puede insertarse en el plásmido-vector e incorporarse a una nueva célula.. es posible no sólo obtener las proteínas recombinantes de interés sino también mejorar cultivos y animales. como la de la hepatitis B Fármacos. Estos extremos. originalmente aisladas de bacterias y que pueden extraerse de las mismas e incorporarse a otras. que le otorga a la célula que lo lleva la capacidad de sobrevivir en un medio de cultivo selectivo (medio con antibiótico. además del gen de interés (por ej. de eso se trata la ingeniería genética. como las empleadas en la elaboración del queso y la obtención de jugos de fruta. pueden sellarse con la enzima ADN ligasa y generar así una molécula de ADN nueva. formadas por bacterias idénticas. .. Las células que sobreviven se dividen y generan colonias. en este ejemplo). el gen de la insulina humana). como la insulina y la hormona del crecimiento humano Enzimas para disolver manchas. Para seleccionar las células (bacterias o células animales o vegetales) que recibieron el plásmido. Así. esto tendría un fuerte impacto en la industria de semillas. Así. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS inducir la clonación natural de las plantas. conociendo la secuencia de un fragmento de ADN es posible aislarlo del genoma original para insertarlo en otra molécula de ADN. la ingeniería genética sirve para clonar fragmentos de ADN y para expresar genes (producir las proteínas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen.

Crecer y reproducir el organismo receptor. una planta adulta. al organismo receptor. 5. En consecuencia. Identificar las células de maíz que recibieron el gen (células transformadas) y regenerar. Justamente. que se podría definir como un conjunto de metodologías que permite transferir genes de un organismo a otro y expresarlos (producir las proteínas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. Combinar dicho gen con otros elementos necesarios (vector) para que éste sea funcional en el organismo receptor. analizarlos. Combinar este gen con otros elementos genéticos para que sea funcional ahora en una planta (ligarlo a un vector). PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Por esta metodología es posible introducir genes de interés en todo tipo de células. Identificar la característica “resistencia a insectos” en el organismo de origen. Los organismos que reciben un gen que les aporta una nueva característica se denominan organismos genéticamente modificados (OGM) o transgénicos. 2. A su vez. Encontrar el gen responsable del carácter deseado (gen de interés). empleando los vectores y las técnicas propias de cada sistema. la ingeniería genética es lo que caracteriza a la biotecnología moderna que implementa estas técnicas en la producción de bienes y servicios útiles para el ser humano. las técnicas que emplea la ingeniería genética se denominan técnicas de ADN recombinante. modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva característica. Por ejemplo. previamente introducido en el vector adecuado. 3. De los genes a la ingeniería genética Cuando los científicos comprendieron la estructura de los genes y cómo la información que portaban se traducía en funciones o características. ahora modificado genéticamente.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U.Sc. Así. y se ejemplifica con un caso concreto: . 3. 4. 4. CAREN M. es posible no sólo obtener proteínas recombinantes de interés sino también mejorar cultivos y animales. comenzaron a buscar la forma de aislarlos. 5. para el caso de la transferencia de un gen insecticida de una bacteria al maíz: 1. la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis. Encontrar al gen que lleva las instrucciones para esta característica. Transferir el gen de interés. Identificar un carácter deseable en el organismo de origen. el ambiente y la industria Etapas para la obtención de un organismo transgénico La siguiente tabla resume los pasos básicos de la ingeniería genética empleados para transformar un organismo. El ADN que combina fragmentos de organismos diferentes se denomina ADN recombinante. de eso se trata la ingeniería genética.A. a partir de estas células. Podemos entonces generalizar los pasos de la ingeniería genética de la siguiente manera: 1. Transferir este gen a células de maíz (organismo receptor). 2.

Metodología Técnicas de Ingeniería Genética o del ADN Recombinante La obtención de un organismo transgénico mediante técnicas de ingeniería genética implica la . una planta adulta resistente a insectos. Identificar el carácter carácter deseable en el “resistencia a insectos” organismo de origen en el organismo de origen. CAREN M. 3. 5. de interés).Encontrar el gen 2. al organismo receptor. previamente células de maíz introducido en el (organismo receptor). Crecer y reproducir 5. de maíz que recibieron ahora modificado el gen (células genéticamente.Sc.Identificar un 1.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. caracterizarlo. Encontrar al gen que responsable del lleva las instrucciones carácter deseado (gen para esta característica.A.Combinar dicho gen 3. Identificar las células el organismo receptor. Transferir este gen a interés. vector adecuado. aislarlo y aislarlo y caracterizarlo.Transferir el gen de 4. transformadas) y regenerar. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Caso: obtención de maíz Bt que produce una proteína recombinante que le confiere resistencia a determinados insectos 1. la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis (Bt) 2. a partir de estas células. Combinar este gen con otros elementos con otros elementos necesarios (vector) genéticos para que sea para que éste sea funcional en una planta: funcional en el especialmente una organismo receptor secuencia promotora (y ligarlo a un vector adecuado para transformar plantas) 4.

Sc. CAREN M.Clonar el gen de interés. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS participación de un organismo que dona el gen de interés y un organismo receptor del gen que expresará la nueva característica deseada. Las etapas y técnicas involucradas en este proceso serían: 1. y se verifican las proporciones mendelianas (ver Cuadernos 40 y 41). ii) Búsqueda de un gen entre la mezcla de genes del ADN. que es producto directo de un gen.A. Los más usados son los plásmidos de origen bacteriano. Si la característica se atribuye a una proteína. 2.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. iv) Construcción del vector recombinante. iii) Secuenciación. El ADN de interés se inserta en plásmidos-vectores que son moléculas de ADN lineales o circulares en las cuales se puede “guardar” (clonar) un fragmento de ADN. será más sencillo transferir esa característica a un organismo que no la tiene. o mejor aún. Se identifica el gen de interés por medio de cruzamientos a partir de una característica que se expresa. y el organismo receptor del gen es la planta de maíz.Corroborar que existe un gen que codifica para la característica de interés. a través del proceso de transformación. Cuando se encuentra una característica en un organismo que resulta interesante para transferir a otro organismo debe verificarse que es producto de un gen. Los plásmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados . dentro de un vector (una molécula mayor de ADN que permite guardar fragmentos de ADN en forma estable y práctica por más tiempo). Los plásmidos pueden extraerse de las bacterias e incorporarse a otras. Por ejemplo. Clonar un gen significa tenerlo puro en el tubo de ensayos. el organismo dador es la bacteria del suelo denominada Bacillus thuringiensis (Bt) de la cual se extrae el gen que determina la síntesis de la proteína insecticida. para el caso particular de la producción de una variedad de maíz que resista el ataque de insectos. La tarea de clonar un gen involucra varias técnicas i) Extracción de ADN.

la bacteria se utiliza como “multiplicadora” del vector. Las enzimas de restricción reconocen secuencias determinadas en el ADN. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS como vectores (vehículos). Estos extremos. conociendo la secuencia de un fragmento de ADN. el gen de interés puede insertarse en el plásmido-vector e incorporarse a una nueva célula. pueden sellarse con la enzima ADN ligasa y generar así una molécula de ADN nueva. CAREN M. coli).A. es posible aislarlo del genoma original para insertarlo en otra molécula de ADN. Para tener gran cantidad y fácil disponibilidad del ADN de interés. generados en diferentes moléculas de ADN. Así. y por ende del inserto de interés. De esta manera. O sea. y luego poder hacer con él ADN recombinante. El desarrollo de estas técnicas fue posible en gran medida por el descubrimiento de las enzimas de restricción. Las enzimas de restricción reconocen secuencias de 4.Sc. caracterizarlo. Hay muchas enzimas de restricción obtenidas a partir de bacterias y que sirven como herramientas para la ingeniería genética. el vector se inserta dentro de bacterias (E.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. denominada recombinante. 6 o más bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos. Esta es una etapa de “amplificación” del ADN para poder tener gran cantidad para secuenciarlo. las cuales crecen fácil y rápidamente. .

se seleccionan por medio de antibióticos y por reacciones con indicadores de color. se debe agregar un promotor que funcione bien en plantas. CAREN M. intrones) para que se pueda expresar en el sistema de interés. y agregar secuencias (promotor. Si así se desea se puede agregar.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. o sea corroborar que en un sistema biológico funciona acorde a lo que se prevé.Caracterizar el gen de interés. que incorporaron el plásmido y el gen de interés. y se le asigna una posible función. Una vez predicha la función del gen clonado por medio de análisis informático. comparar esta secuencia con las de genes ya conocidos para determinar a qué gen se parece. deletar o mutar secuencias dentro de la región codificante. terminador. mediante bioinformática. A partir de conocer la secuencia del gen se puede. en el cual se pueda expresar el gen y medir su función. . que permita que las células vegetales expresen la proteína Bt.Sc. es decir. se debe proceder a confirmar la función real in vivo.Modificar el gen de interés. Por ejemplo: si se clona un gen Bt de una bacteria para luego ponerlo en maíz. En el ejemplo del maíz. 3. el gen Bt se puede transferir primero a las especies modelo Arabidopsis thaliana y Nicotiana tabacum 4. Para ello se suele transferir el gen a un organismo modelo. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS En placas de Petri se cultivan las bacterias. Se originan colonias de bacterias iguales (clones). Las bacterias transformadas. El promotor es una región fundamental del gen ya que determina cuándo y dónde se expresará el gen.A.

CAREN M. se elige el método de transformación más indicado para el organismo que se desea hacer transgénico. el OGM se analiza desde el punto de vista del objetivo (en este ejemplo.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. momento y cantidad se expresa el gen se analiza la presencia del ARN mensajero y de la proteína recombinante codificados por el transgén. Para analizar en qué tejido. tanto en células transformadas y crecidas in vitro como en bacterias recombinantes y animales transgénicos • Enzimas para disolver manchas. Una vez hecha la construcción genética con el gen y promotor deseado. Caracterización del OGM. entre otras características.Sc. Repetir el filtrado y conservar nuevamente la pulpa. entonces se deberá hacer el análisis de riesgo alimentario y ambiental. 4. . si tiene una (o más) copias del transgén. como las que se usan en los detergentes en polvo. mayormente por medio de microorganismos recombinantes (transgénicos) que crecen en biorreactores. como la insulina y la hormona del crecimiento humano. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS 5. como las empleadas en la elaboración del queso y en la obtención de jugos de fruta. Para la caracterización biológica. • Enzimas para la industria alimenticia. • Plantas resistentes a enfermedades. entre otras aplicaciones: • Vacunas. Mezclar media taza de levadura con 150 ml de agua fría. por ejemplo contra la hepatitis B • Fármacos. Para el análisis molecular se debe demostrar. 3.A. si el maíz resulta efectivamente resistente a los insectos) y desde el punto de vista que sea necesario acorde al OGM en cuestión. Pasar la mezcla por un colador de té y conservar la pulpa. se lo analiza desde el punto de vista molecular y biológico. entre otras. 2. 6. Transformación de un organismo con el gen de interés. TRABAJOS PRACTICOS Extracción de ADN de levaduras Materiales · ½ taza de levadura (de la que se usa para hacer pan) · 300 ml de agua fría · 4 cucharaditas de sal fina · dos chorros de jugo de limón · colador de té · tres cucharaditas de alcohol · dos gotas de detergente Procedimiento 1. Hasta el momento se ha utilizado la ingeniería genética para producir. Agitar suavemente (para que se abran las paredes de las células). Si será utilizado como alimento y se lo cultivará a campo. entre otras cosas. _ de cucharadita de sal y dos chorros de jugo de limón. Una vez obtenido el OGM. y cómo y en qué tejidos se expresa el gen.

permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtración. Extracción de ADN vegetal Los estudiantes extraerán ADN de bananas licuadas con agua. poroto de soja. etc). En este caso se hará extracción de ADN de banana. Preparar 150 ml de agua fría con _ cucharadita de sal. ají morrón) para que no opaque la visión del ADN ni muy duro (zanahoria cruda. rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. Una parte de esta mezcla de banana. con o sin Iodo . Revolver suavemente durante 20 minutos. Sugerencia para el práctico: Si algún grupo quiere traer algún otro producto de la verdulería para extraer su ADN.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. 9. porque se dificultara 2. Nota: se recomienda que el material vegetal utilizado sea con poca coloración para facilitar la observación de los resultados. CAREN M. Al final de la guía práctica se sugiere una serie de preguntas para analizar con los alumnos los resultados de la experiencia. La sal permite que el ADN precipite en una solución fría de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten. granos de trigo. De esta forma se libera el contenido celular. tres cucharaditas de alcohol y dos gotas de detergente. repollo colorado. luego es tratada con shampoo y sal. 8. 7. Agregar 3 cucharaditas de sal y agitar 10 minutos más. se sugiere que no sea muy colorido (por ejemplo. El detergente disuelve los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la membrana celular. Dejar reposar hasta que se forma un precipitado sólido (se tira). Luego. 11. Materiales: • 1 tazas o vaso de plástico • Licuadora • Una cuchara plástica para medir y mezclar • 2 filtros de papel de café Nº 2 (conos) • 20 ml de agua destilada • Shampoo de color claro • 1 banana • Sal de mesa. mezclada durante 5-10 minutos. Conservar el líquido. y luego escurrida a través de un filtro de café. como ser. bananas o cebollas.Sc. Diluir el líquido con tres veces su volumen de alcohol. el detergente forma complejos con los lípidos y las proteínas. El ADN precipita en el fondo del vaso en forma de finas hebras blancas. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS 5. Agregar la pulpa y mezclar (el detergente disuelve el ADN). Así se libera el ADN.A. 10. 6. A lo filtrado se le agrega alcohol frío y es éste el momento cuando el ADN de la solución de banana se precipita y se hace visible.

O usando una pipeta de Pasteur que haya sido calentada en la punta para formar un gancho. agua destilada y shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos: 1. otro miembro pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otra taza de plástico. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso.Sc. Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear. habrá suficiente ADN para levantar con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). excepto el ADN. Para mejores resultados el alcohol debe estar tan frío como sea posible. El ADN no es soluble en alcohol. 4. . preparar una solución consistente en una cucharadita de té de shampoo y dos pizcas de sal. 7. agregar tres cucharaditas de té de la mezcla de banana del paso 1. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico evitando formar espuma.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada 5. Clonación de plantas en la escuela En esta actividad se propone realizar con los alumnos algunos ensayos de propagación de plantas. Doblar el borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la taza. Es importante no batir el tubo de ensayo. mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml). 9. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. Material de trabajo · Plantas: Begonia. los componentes. cebollas. Cuando se obtienen buenos resultados. 10. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS • 1 pipeta de transferencia plástica o un gotero médico • 1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol isopropílico • 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol • 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur Procedimiento para la extracción del ADN Preparar una solución de banana procesada con sal. 11. Hiedra. 2. En una licuadora. Llenar la pipeta plástica con la solución de banana y agregarla al alcohol. En una taza. 3. A la solución preparada en el paso 3. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana. 8. 12. hasta que la solución se mezcle. Bulbos y Tubérculos (tulipanes.A. Licuar por 15-20 segundos. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla. Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. 3. CAREN M. 13. 6. permanecen en la solución mientras el ADN precipita en la capa de alcohol. se puede recuperar (tomar) algo de ADN. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío.

Siempre es recomendable realizar varias réplicas del experimento para prever posibles dificultades que surjan. batatas).cl/ Multiplicación de la Hiedra: Para la propagación de esta planta 1. 1. . ·· Sustrato (turba. 4. Requiere abundante luz. Las papas y cebollas también echan raíces y tallos al colocarlas semisumergidas en un recipiente con agua. 3. Cortar el segmento terminal de una rama (de entre 7 y 15 cm. 3. pero no la insolación directa.) por debajo de un nudo. para luego poder transplantarlas a tierra. y enraízan a 25 ºC en unas semanas.A. 2. Después de haber hecho un hoyo con una palita se pueden plantar los bulbos a la profundidad debida (que la base del bulbo quede a una profundidad que sea el doble del tamaño del bulbo) con el punto de crecimiento hacia arriba. papas y batatas (tubérculos) pueden reproducirse a partir de estas estructuras de reserva.Sc. Colocar encima de un sustrato compuesto por turba y perlita. Colocar en un recipiente con agua. 2. Fuente: http://www. A continuación se echa tierra encima y se presiona ligeramente. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS papas. Un esqueje puede dar de 1 a 4 brotes adventicios. Para el enraizamiento la temperatura debe ser de 25-28 ºC. cebollas (bulbos). perlita) o tierra con nutrientes · Recipientes (vasos. Multiplicación de Begonia: se puede realizar fácilmente por esquejes de hoja. luz o temperatura). 2. Cortar trozos de hojas (cada trozo debe llevar como mínimo un nervio principal) o emplear hojas enteras a las cuales se les da unos pequeños cortes en los nervios principales. Retirar las hojas de la rama excepto una o dos en el ápice.terra. 1.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Antes de plantar los bulbos lo mejor es colocarlos en el sitio deseado según la separación de plantación que se quiera. Cuando aparecen raíces pasar la planta a maceta o a tierra directamente. 4. Multiplicación de Bulbos y Tubérculos: Los tulipanes. 3. macetas) · Hormona enraizante (se consigue en viveros) · Agua · Horquilla de alambre o estaca de madera · Herramientas de jardinería · Termómetro Procedimiento: Se recomienda dividir al curso en pequeños grupos y que cada unos de ellos realice la multiplicación de algún vegetal a elección (pueden ser los aquí sugeridos u otros). CAREN M. y para comparar resultados o probar diferentes variables (por ejemplo.

PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Resultados Se propone realizar un cuadro como el que sigue para el registro ordenado de los resultados: Tipo de planta Características de la planta Mecanismo de reproducción asexual Órgano vegetativo de origen Condiciones (medio de cultivo. los resultados y las conclusiones a las que llegaron. luz. ¿cómo se explica la respuesta a la pregunta anterior? Se sugiere que cada grupo presente un Informe de Laboratorio para explicar la experiencia realizada.Sc.Día 6 Conclusiones Realizar una puesta en común de los diferentes grupos y analizar: a. cuáles fueron las dificultades en la realización de la experiencia d. plantas sobrevivientes.A.) Observaciones (Fecha. cuántas plantas sobrevivieron b. cómo fue el proceso de desarrollo de la nueva planta (estructuras que se desarrollaron) c. CAREN M. etc.Día 3 – Día 4 . temperatura. mostrar los registros de datos.) Día 1 – Día 2 .UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. etc. qué características presenta la nueva planta respecto de la planta original f. cambios observados. . en qué casos se logró la multiplicación de la planta. cuáles son las condiciones más adecuadas para el crecimiento de cada tipo de planta (comparar entre los diferentes tipos de plantas) e.Día 5 .

Clonación b.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. ADN recombinante d.Sc. Realizar un ensayo de 3 hojas de cada tema propuesto.A. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS TRABAJO 1. NOTA: EL TRABAJO SE ENTREGARA EL SABADO 07 DE JULIO DEL 2012 CON SU CORRESPONDIENTE EVALUACION ESCRITA. CAREN M. . Realizar las practicas en el laboratorio de las tres practicas propuestas y entregar un informe con sus resultados. para ello utilizar la información que se le envía como base: a. Enzimas de restricción c. Aplicaciones prácticas de la ingeniería genética 2.

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