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FACULTAD DE CIENCIAS LABORATORIOS DE BIOQUIMICA

Laboratorio N 1 Carbohidratos

Integrantes: Camila Salinas Fuentes. Sergio Osorio Zelada. Carrera: Enfermera S-4 Fecha: 20 Abril 2012

Tabla de Resultados

Tabla 1. Reacciones de identificacin de carbohidratos.

Carbohidratos Glucosa Fructosa Lactosa Sacarosa Almidn

Fehling (+)(+)(+) (+)(+)(+) (+) (-) (-)

Seliwanoff (-) (+)(+)(+) (-) (+) (-)

TEST Hidrlisis cida (+) (+) (+) (+) (-)

Iodo (almidn) (-) (-) (-) (-) (+)(+)(+)

Barfoed (+) (+) (-) (-) (-)

Nota: marque (+) si la reaccin es positiva o () si la reaccin es negativa a las pruebas realizadas.

Tabla 2. Descripcin de las reacciones observadas en cada caso. Es decir, describir cambios de color, formacin de precipitado, entre otros.

Test Realizado Fehling Glucosa Fehling Fructosa Fehling Lactosa Fehling Sacarosa Fehling Almidn

Descripcin de la reaccin Se observa una coloracin Rojo Ladrillo, precipitando el Oxido Cuproso en el fondo, al estar en reposo. Se distinguen dos fases en la superficie color amarillento y hacia el fondo color rojo intenso. Se observa una coloracin Rojo Ladrillo, precipitando el Oxido Cuproso en el fondo, al estar en reposo. Se distinguen dos fases en la superficie color amarillento y hacia el fondo color rojo intenso. Se observa una coloracin Violeta, precipitando el Oxido Cuproso en el fondo No reacciona, quedando de un color Azul Intenso. Sin precipitado. No reacciona, quedando de un color Azul Intenso. Sin precipitado.

Test Realizado Seliwanoff Glucosa Seliwanoff Fructosa Seliwanoff Lactosa Seliwanoff Sacarosa Seliwanoff Almidn

Descripcin de la reaccin Se torna un color Translucido, indicando que estamos en presencia de un Grupo Aldehdo. Se vuelve un color Rosado muy intenso indicado la presencia de Cetona. Toma un color Translucido, indicando que estamos en presencia de un Grupo Aldehdo. Se vuelve un color Rosado que indica estar en contacto con Cetona. Se torna un color Translucido, indicando que estamos en presencia de un Grupo Aldehdo.

Test Realizado H. Acida Glucosa H. Acida Fructosa H. Acida Lactosa H. Acida Sacarosa H. Acida Almidn

Descripcin de la reaccin

No se realiz Test No se realiz Test No se realiz Test Al sacar de la exposicin a temperatura la solucin es trasparente pero al realizar el test de Fehling como resultado obtenemos un color rojo ladrillo con precipitacin de oxido cuproso. Al sacar de la exposicin a temperatura la solucin es trasparente pero al realizar el test de Fehling como resultado obtenemos un color azul intenso.

Test Realizado Iodo Glucosa Iodo Fructosa Iodo Lactosa Iodo Sacarosa Iodo Almidn

Descripcin de la reaccin La solucin en un comienzo con la muestra y reactivo es de color traslucida pero al agregarle Lugol toma la coloracin de este, es decir un amarillo caf No se realiz Test No se realiz Test No se realiz Test La solucin en un comienzo con la muestra y reactivo es de color traslucida pero al agregarle Lugol toma la coloracin de un azul oscuro casi negro.

Test Realizado Barfoed Glucosa Barfoed Fructosa Barfoed Lactosa Barfoed Sacarosa Barfoed Almidn

Descripcin de la reaccin Es de una coloracin calipso con un precipitado rojo ladrillo correspondiente al oxido cuproso. Es de una coloracin calipso con un concentrado mayor que la glucosa de precipitado rojo ladrillo correspondiente al oxido cuproso. Toma una coloracin calipso sin ningn precipitado de xido cuproso. Toma una coloracin calipso sin ningn precipitado de xido cuproso. Toma una coloracin calipso sin ningn precipitado de xido cuproso.

Tabla 3. Identificacin de carbohidratos.

Carbohidratos Muestra problema A

Fehling (+)

Seliwanoff (-)

TEST Hidrlisis cida (+)

Iodo (almidn) (-)

Barfoed (+)

Muestra problema B

(-)

(+)

(+)

(-)

(-)

Nota: marque (+) si la reaccin es positiva o () si la reaccin es negativa a las pruebas realizadas.

Discusin Nuestra discusin se basa en los distintos cambios observados con las 5 muestras de Hidratos de Carbono (Glucosa Fructosa Lactosa Sacarosa Almidn), que fueron sometidas a los diversos test para comprobar sus propiedades. Es as, como en el test de Fehling en donde utilizamos como reactivos ion cprico tartrato (Cu2+) forma oxido cuproso (Cu+) cuando est en presencia de un H. de Carbono con poder reductor, en este caso la glucosa, fructosa y lactosa dieron positivo a esta reaccin; en especial, notndose un rojo ladrillo intenso con precipitado Cu+ en la muestra de glucosa y fructosa, ya que al ser esto monosacrido del grupo de la Hexosa, pueden ser oxidados por agentes oxidantes tales como el ion cprico (Cu2+), donde el carbono carbonilico se oxida a grupo carboxlico. Cuando un monosacrido toma la muestra cclica (Grupo Carbonilo forma enlace covalente con el oxgeno de un grupo hidroxilo perteneciente a la misma cadena) por ejemplo la glucosa en donde el Carbono 1 no puede ser oxidada por el Cu2+, pero cuando est en forma cclica en equilibrio con forma de cadena abierta, la reaccin de oxidacin puede finalmente completarse. La lactosa tambin reacciono positivo pero su color no fue de un rojo ladrillo intenso, ms bien, fue de color violeta pero con un precipitado de Cu+ en el fondo. Esto es porque la lactosa no es un monosacrido, sino, un disacrido con poder reductor ya que el carbono anomerico de residuo de glucosa puede ser oxidado ya que esta libre, por lo tanto tiene poder reductor. A diferencia de la lactosa, la sacarosa que tambin es un disacrido, no tiene poder reductor porque no tiene ningn carbono anomerico libre ya que estos estn ocupados formando enlaces glucosidicos. Y por ltimo, el almidn dio negativo ya que es un polisacrido y sus grupos aldehdo libres se encuentran comprometido formando enlaces glucosidicos lo que significa no tener poder reductor. En el Test de Seliwanoff dio positivo en la fructosa y sacarosa debido a que tomaron una coloracin rosada por la presencia de grupo cetona (fructosa tiene grupo cetona y sacarosa es glucosa + fructosa por lo que toma el grupo cetona de la fructosa). Esto sucede porque se deshidrata cetohexosa para formar 5 Hidroximetilfurfural que reacciona con resorcinol y produce una coloracin rosada, cuando hay presencia de cetona. En cambio, la glucosa, la lactosa y almidn posee un grupo aldehdo (glucosa tiene grupo aldehdo, lactosa es galactosa + glucosa, y almidn es amilasa + amilopeptina, por ende al tener glucosa tienen grupo aldehdos) tomando una coloracin traslucida. El test de Barfoed es un test que sirve para diferenciar monosacrido de disacrido, ya que en un medio acido los monosacridos son capaces de reducir Cu2+ a Cu+. Se usa un reactivo de fosfomolibdato el cual se reduce a un color azul con precipitado Cu+ dndonos como positivo las muestras de Glucosa y Fructosa. En cambio lactosa y sacarosa son disacrido ya que estn compuestos por dos monmeros (lactosa = glucosa + galactosa; sacarosa = glucosa + fructosa) y el almidn tambin dio negativo por ser un polisacrido ya que contiene un polmero de glucosa.

El Test de Iodo para Almidn se utiliza para detectar la presencia de almidn que contiene dos tipos de polmero de glucosa que es amilosa + amilopectina, en donde la amilosa helicoidal forma un complejo de transferencia de carga de color azul con el Iodo molecular tindose de un color azul oscuro donde la nica muestra que dio como positivo fue el almidn ya que ninguna de las otras contena este polisacrido. Y por ltimo realizamos el Test de Hidrlisis Acida donde obtuvimos como muestras positivas a la glucosa, fructosa, sacarosa y lactosa las que se tornaron de un color rojo ladrillo al termino del test. Esto es debido a que se hidrolizan los enlaces glucosidicos que al someterse a un medio acido con temperatura. Se agrega NaOH para neutralizar el Ph de test para as poder realizar luego el test de Fehling ya que si esta en medio acido no se reduce el ion Cu2+ ya que necesita un medio neutro o bsico para formar Cu+ ya que los azucares reductores son capaces de reducir en este medio. El almidn reacciono de forma negativa adoptando un color azul debido a que posee muy poca cantidad de hidroxilo, solo la parte del principio de la gran cadena puede oxidarse en cambio el resto no, por tener ramificaciones por ende no se logran hidrolizar los enlaces glucosidicos. Con todos estos datos experimentales en los diferentes test podemos identificar la muestras problemas A y B que se nos presentaron. 1) Nos dimos cuenta de que ninguna era almidn debido a que el test de iodo realizado en ambas fue negativo descartando as la presencia de almidn. 2) la muestra A tiene poder reductor ya que el test de Fehling indico positivo colocndose de color rojo con precipitado de Cu+ por lo que descartaramos la sacarosa por ser un disacrido sin poder de reduccin; la muestra B no tiene poder de reduccin ya que se coloc de un azul intenso siendo una reaccin negativa por lo que descartamos fructosa, glucosa y lactosa que tienen poder reductor. 3) muestra A corresponde a un monosacrido por la formacin de Cu+ como precipitado en la coloracin azul en el test de Barfoed descartando la Lactosa por ser un disacrido; la muestra B nos indica que es un disacrido ya que el test sali negativo porque no se form Cu+. 4) muestra A en su estructura posee un grupo aldehdo debido a su coloracin traslucida en el test de Seliwanoff siendo una reaccin negativa descartando as a la fructosa; muestra B posee un grupo cetona por la coloracin rosada siendo un test positivo. 5) en ambas muestras se lograron hidrolizar los enlaces glucosidicos liberando monosacridos por esta hidrlisis siendo un test de hidrlisis acida positivo. Es decir, con la explicacin terica de los test realizados ms la experiencia practicas deducimos que posiblemente la muestra A correspondera a la Glucosa ya que es un monosacrido, con poder reductor, con un grupo aldehdo en su estructura. Y la muestra B correspondera a la Sacarosa ya que es un disacrido, sin poder de reduccin, con un grupo cetona en su estructura.

Bibliografa 1. Pgina Web: http://goforward.harpercollege.edu. Autores: Harper College 1200 W. Algonquin Road, Palatine. Informacin: Seliwanoff 's Test Link: www.harpercollege.edu/tmps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/seli/seli.htm 2. Libro: Lehninger Principios de Bioqumica. Autores: David L. Nelson, Michael M. Cox. Editorial Copyright 2009 ediciones omega S.A. Edicin Quinta Edicin. Informacin: Glcidos y Glucobiologia, Tema Monosacrido y Disacridos Pg. 235 243 y Polisacridos Pg. 244. 3. Pgina Web: http://www.unav.es. Autores: Departamento de Bioqumica, Practicas de Bioqumica 2006 - 2007. Informacin: Practica N 3: Identificacin de Azucares Pg. 20, Reaccin de Fehling Pg. 22, Prueba de Prueba de Barfoed Pg. 23, Prueba de Seliwanoff Pg. 24, Hidrlisis Acida de un Disacrido Pg. 25. Link: www.unav.es/bioquimica/bqfarmacia/Practicas0607.pdf.