Manual1 Virologia

Manuales Departamentales
Programa acadmico de la asignatura de Microbiologa y Parasitologa
Virologa
Fascculo I
Segundo ao 2005-2006
Departamento de Microbiologa y Parasitologa

Facultad de Medicina Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Ciudad Universitaria, D.F., agosto de 2005.
FACULTAD DE MEDICINA MANUALES DEPARTAMENTALES
Obra general ISBN: 968-36-2767-6 Este volumen ISBN: 970-32-0999-8 2003 2005. Segunda reimpresin. Derechos reservados conforme a la ley Facultad de Medicina, UNAM Folio CAPES: 013/2005.
El contenido de este Manual est protegido por la Ley de Derecho de Autor y no puede ser reproducido, total o parcialmente, por ningn medio mecnico, electrnico o cualquier otro, sin el permiso escrito del Comit Asesor de Publicaciones de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico. El cuidado editorial estuvo a cargo del Comit Asesor de Publicaciones de la Facultad de Medicina, UNAM. El contenido de este Manual es responsabilidad de sus autores ya que constituye un auxiliar de la enseanza.
FACULTAD DE MEDICINA
Dr. Jos Narro Robles Dr. Joaqun J. Lpez Brcena Dr. Enrique Graue Wiechers Dra. Sara Morales Lpez Dra. Ma. Eugenia Ponce de Len Castaeda Dr. Jos Mazn Ramrez Dr. Isidro vila Martnez Dr. Luis Felipe Abreu Hernndez Dr. Gregorio Prez Palacios Dra. Gloria Bertha Vega Robledo Dra. Rosalinda Guevara Guzmn Dr. Arturo Ruiz Ruisnchez Lic. Guadalupe Len Villanueva Lic. Alejandro Fernndez Varela
Director Secretario General Jefe de la Divisin de Estudios de Posgrado e Investigacin Secretaria de Enseanza Clnica, Internado y Servicio Social Secretaria Tcnica del H. Consejo Tcnico Secretario de Educacin Mdica Secretario de Servicios Escolares Secretario de Planeacin y Desarrollo Institucional Coordinador de Investigacin Coordinadora de Educacin Mdica Continua Coordinadora de Ciencias Bsicas Coordinador de Servicios a la Comunidad Secretaria Administrativa Secretario Jurdico y de Control Administrativo
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

Dra. Kaethe Willms Manning Q.F.B. Yolanda Garca Yez Bil. Ma. Teresa Ruenes Meza Jefa del Departamento Coordinadora de Enseanza Coordinadora de Prcticas
AUTORES DE LOS GUIONES

Dra. Beatriz Gmez Garca Dra. Patricia Tato Zaldvar Dr. Rodolfo Acua Soto [3] Jefa del Laboratorio de Virologa y profesora titular. Profesora titular. Profesor titular.
I. VIROLOGA - SEGUNDO AO, 2005-2006
PRESENTACIN
del curso de virologa para los estudiantes de segundo ao de la carrera de Mdico Cirujano de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico es el de proveer al estudiante la informacin fundamental sobre los procesos biolgicos de los virus y las enfermedades que causan. Dos propsitos secundarios son el de familiarizar al estudiante con el lxico utilizado en la virologa mdica y el de promover la prctica de autoestudio por medio de la lectura crtica de la bibliografa mdica.
L PROPSITO FUNDAMENTAL
nal. Con el propsito de iniciar al estudiante en el anlisis de la literatura mdica, el presente Manual incluye artculos de divulgacin para su discusin en clase. Asimismo, para extender el contenido del mismo, ahora se incluyen las referencias especficas de cada tema y una lista de direcciones de Internet que contienen informacin sobre virologa mdica. Para facilitar la adquisicin de los trminos utilizados en los textos de virologa mdica se ha anexado un Glosario. La presente edicin del Manual presenta una nueva organizacin temtica. Existe un total de 14 guiones; los cuatro primeros analizan diferentes aspectos de la biologa bsica de los virus y los siguientes diez temas abordan los virus representativos de diversas familias virales.
Es un curso introductorio, de ninguna forma debe considerarse un curso terminal. Para mantenerse al corriente, el mdico debe analizar regularmente el contenido de la literatura mdica por el resto de su vida profesio-
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CLASIFICACIN DE LOS VIRUS COMIT INTERNACIONAL SOBRE TAXONOMA DE VIRUS
Virus DNA (Desoxivirus)

Filamento Simetra 1 Icosadrica Envoltura Tamao Sin 18-24 Familia Parvoviridae Agente y enfermedad Virus B-19: anemia aplstica. Virus adenoasociado. Eritema infeccioso. 5a. enfermedad. Papiloma: verrugas, condilomas, papiloma larngeo, cncer cervical, peneal y vulvar. Polioma: virus JC. Infecciones renales, leucoencefalopata multifocal progresiva. Virus BK, infecciones renales en transplante renal e inmunosuprimidos. Vacuolizante: SV40 simios. Adenovirus: enfermedades agudas respiratorias, cervicitis, encefalitis, queratoconjuntivitis, gastroenteritis, fiebre faringoconjuntival, neumona. Subfamilia alfa: Herpes simplex 1: vesculas bucales y en la piel, queratoconjuntivitis, gingivoestomatitis. Herpes simplex 2: enfermedades venreas, herpes congnito. Varicela zoster 3: herpes zoster, varicela. Subfamilia beta: Citomegalovirus 5, inclusiones citomeglicas, malformaciones congnitas, mononucleosis benigna, retinitis. Subfamilia gamma: Virus Epstein-Barr 4: linfoma de Burkitt, carcinoma nasofarngeo, mononucleosis infecciosa. Herpes virus 6: linfadenopata, 6a. enfermedad (roseola). Herpes virus 7: linfotrpico T, virus B, enfermedades neurolgicas. Virus de la viruela (variola). Virus vaccinia: complicaciones de la vacuna. Molusco contagioso: ndulos cutneos benignos. ORF: ndulos de los ordeadores. Hepatitis B: cirrosis, carcinoma hepatocelular primario.
Icosadrica
Sin
46-55
Papovaviridae
Icosadrico
Sin
70-90
Adenoviridae
Icosadrico
Con
110
Herpesviridae
Compleja (tabique)
Con
230-300
Poxviridae
Compleja
Con
40
Hepadnaviridae
Virus RNA (Ribovirus)

Filamento Simetra 2 Icosadrica Envoltura Tamao Sin 60-80 Familia Reoviridae (+/-) Agente y enfermedad Rotavirus: diarrea infantil. Coltivirus: fiebre por garrapatas Colorado. Orthoreovirus: brotes febriles respiratorios, gastroenteritis. Orbivirus: meningoencefalitis. Enterovirus: poliovirus 1 a 3, poliomielitis. Coxsackievirus: a) herpangina, conjuntivitis hemorrgica, meningitis asptica; b) cardiopata viral, meningoencefalitis, meningitis asptica, pleurodinia, resfriado comn. Echovirus: meningitis asptica, conjuntivitis hemorrgica, resfriado comn, hepatitis neonatal. Rhinovirus: resfriado comn. Hepatovirus: hepatitis A. Alfavirus: encefalitis equina del Este y del Oeste, encefalitis venezolana chicungunys, sindbis, mayaro. Flavivirus: encefalitis de San Luis, encefalitis japonesa, fiebre del Nilo, dengue, fiebre amarilla, hepatitis C. Rubivirus: rubola, sndrome de rubola congnita. Astrovirus: gastroenteritis infantil moderada. Calicivirus: agente Norwalk, gastroenteritis epidmica, virus de la hepatitis E. Bunyamwera: encefalitis de California, de La Crosse, de Rift Valle, fiebre hemorrgica de Corea. Oncovirus: tipo C, linfomas de clulas T (HTLV-I y II). Lentivirus: virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2).
Icosadrica
Sin
20-30
Picornaviridae (+)
Icosadrica
Con
50-70
Togaviridae (+)
1 1 1 1
Icosadrica Icosadrica Icosadrica Icosadrica
Sin Sin Con Con
20-30 35-39 90-100 90-120
Astroviridae (+) Caliciviridae (+) Bunyaviridae (-) Retroviridae (-)
Helicoidal
Con
150-300
Paramyxoviridae (-) Morbillivirus: sarampin. Paramyxovirus: parainfluenza. Rubulavirus: parotiditis, orquitis, encefalitis. Pneumovirus: virus sincicial respiratorio. Orthomixoviridae(-) Rhabdoviridae(-) Arenaviridae Coronaviridae (-) Filoviridae (-) Virus de la influenza A, B y C. Lyssavirus: virus de la rabia. Vesiculovirus: estomatitis vesicular. Virus de la coriomeningitis linfoctica, meningitis asptica, encefalitis, fiebre hemorrgica (Lassa). Infecciones respiratorias y entricas, resfriado comn, gastroenteritis de infantes. Virus bola y Marburg: fiebre hemorrgica grave.
1 1 1 1 1
Helicoidal Bala Helicoidal Helicoidal
Con Con Con Con
80-120 75-150 50-300 80-130 80-800
Filamentoso Con
Tomado de:
Fraenkel-Conrat H, et al. Virology. 2a. ed. EUA: Prentice Hall; 1988. Kucera LS, Myrvick ON. Fundamentals of Medical Virology. EUA: Lea & Febiger, 1985. Jawetz E, et al. Microbiologa Mdica. 15a. ed. Mxico: Editorial El Manual Moderno; 1995. Walker TS. Microbiology. EUA: W.B. Saunders Co; 1998.
GUIONES TERICOS
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1. ESTRUCTURA VIRAL
Patricia Tato Zaldvar
1. Antecedentes de la virologa. 2. Antecedentes histricos. 3. Naturaleza viral: 3.1 Caractersticas de los virus. 3.2 Dependencia de la clula. 3.3 Informacin gentica en un slo tipo de cido nucleico (ADN o ARN). 3.4 Multiplicacin por sntesis de los componentes y por ensamblaje. 3.5 Integracin al genoma celular. 4. Cultivo de los virus. 5. Organizacin molecular del virin: 5.1 Composicin qumica: cidos nucleicos, protenas, glicoprotenas, lpidos. 5.2 Estructura, localizacin y funcin de los componentes en el virin: cpside, nucleocpside, envoltura y peplmeros. 5.3 Tipos de simetra: icosadrica y helicoidal. Estructuras complejas. 5.4 Organizacin de los genomas virales. 6. Clasificacin de los virus: 6.1 Clasificacin segn el Comit Internacional de Taxonoma Viral. 6.2 Criterios para agrupar los virus en familias, gneros y especies. 6.3 Clasificacin por criterios clnicos.
Los virus son las entidades biolgicas ms pequeas y simples estructuralmente que son capaces de multiplicarse. Las partculas virales presentan tamaos y formas diversas y varan en el nmero y naturaleza de las molculas que las forman. Son parsitos intracelulares obligados porque son metablicamente inertes y dependen de las estructuras y los componentes metablicos de la clula husped para su multiplicacin. La informacin gentica de los virus est contenida en los cidos nucleicos como en otros organismos, pero solo tienen un tipo de cido nucleico ADN o ARN de cadena sencilla o doble. Estos microorganismos son los nicos en los que el ARN porta informacin gentica. Algunos virus pueden integrarse al genoma celular y transferir material gentico entre huspedes de diferentes especies, por lo que, se les denomina genes mviles o piratas de la clula. A los virus que se encuentran fuera de la clula se les denomina "viriones" y estn compuestos por la nucleocpside que consta del material gentico y una cubierta denominada "cpside" compuesta de unidades protecas (capsmeros). La mayora de los virus presentan cpsides con simetra icosadrica o helicoidal. Tambin podemos encontrar virus con estructura compleja como los poxvirus. Muchos virus de vertebrados poseen tambin una envoltura formada por una membrana derivada de la clula husped que contiene glucoprotenas virales.
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Debido a que los virus son incapaces de reproducirse de forma independiente de las clulas. Se cultivan por inoculacin en animales, huevos embrionados o en cultivos celulares. Los bacterifagos, virus que infectan bacterias, se cultivan en cultivos bacterianos. A partir de los aos 60 los virus se han ordenado taxonmicamente de acuerdo a su naturaleza bioqumica y por el Comit Internacional de Taxonoma. Anteriormente, los virus se clasificaban por el husped que infectaban principalmente o por criterios clnicos.
Los parmetros fundamentales que utiliza el Comit Internacional de Taxonoma Viral para clasificarlos en familias, grupos, especies y tipos son: la naturaleza del genoma y la estructura del virin. Actualmente, se tienen 22 diferentes familias. En una misma familia se tienen virus con genomas y morfologa similares, aunque pueden diferir respecto al husped que infectan, la patologa que producen y la forma de transmisin.
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2. VIRUS EN LA CLULA
1. Multiplicacin viral: 1.1 Rango de husped, susceptibiilidad y permisibilidad. 1.2 Pasos de la replicacin viral: Adsorcin: receptores en las clulas (CD4, ICAM-1, CD21, etctera) que determinan la especificidad y la susceptibilidad de las clulas a la infeccin viral. Penetracin: viropexis, fusin de membranas y endocitosis. Sntesis de macromolculas: ARNm y protenas virales (polimerasas, protenas reguladoras del genoma viral y de la clula husped). Replicacin del genoma viral: virus ARN y ADN mono y bicatenarios. Ensamblaje y maduracin de las partculas virales: nucleocpsides y virus con envoltura. Virus defectuosos y cpsides vacas. Liberacin: lisis clula, exocitosis y gemacin. 2. Gentica viral: 2.1 Mutaciones espontneas e inducidas. 2.2 Interacciones genticas entre los virus o entre virus y clulas: Recombinacin y rearreglo (retrovirus, virus de la influenza y reovirus). Reactivacin gentica: rescate de marcador y reactivacin mltiple. Complementacin. 2.3 Mezcla de fenotipos: transcapsidacin. 2.4 Interferencia. 2.5 Genomas virales como vectores de replicacin y expresin de genes celulares o virales (ADN recombinante). Su utilidad para sntesis de molculas como hormonas o vacunas. Tratamiento gnico.
Aunque los genomas virales son muy diversos, su multiplicacin se lleva a cabo en forma similar. En primera instancia, se requiere que el virus se una a la clula despus de reconocer receptores en su superficie, se introduzca en ella, exprese y replique su material gentico utilizando la maquinaria de transcripcin y de traduccin de la clula. Los genes que primero se expresan son los tempranos y las protenas que codifican condicionan a la clula para que permita la multiplicacin viral. En segundo trmino, se expresan los genes responsables de la multiplicacin de su genoma y finalmente, los involucrados en el ensamblaje y maduracin del virin. Durante la replicacin viral se producen virus defectuosos que son aquellos que carecen de uno o ms genes funcionales necesarios para su replicacin. El conocimiento de las estrategias que utilizan los virus para su multiplicacin es til para disear mtodos efectivos para la prevencin y tratamiento de las enfermedades virales. Los virus al igual que los dems microorganismos son susceptibles a mutaciones espontneas e inducidas. El virus de la inmunodeficiciencia humana (VIH) presenta un alto ndice de mutacin, el cual se debe principalmente a la baja fidelidad que tiene la ARN polimerasa en multiplicar el material gentico. Los virus de ARN tienen mayor tasa de mutacin con respecto a los de
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ADN, debido a que la ARN polimerasa durante la sntesis del cido nucleico no retira las bases que no son complementarias al ARN patrn, en cambio, las ADN polimerasas tienen un mecanismo de reparacin. Cuando dos o ms partculas virales infectan a una clula pueden interactuar de diferentes maneras, las interacciones genticas pueden producir progenies que difieren de
los genomas de sus progenitores. Los virus con genomas segmentados, como el de la influenza, pueden formar cepas hbridas por el rearreglo de sus genomas despus de la infeccin de una clula por ms de una cepa vrica. Esto le confiere caractersticas como cambios antignicos importantes que les permitan infectar individuos que ya haban tenido infecciones previas con otros genotipos o bien que hayan sido vacunados.
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3. PATOGNESIS VIRAL
Patricia Tato Zaldivar
1. Patognesis viral: 1.1 Fases de la infeccin vrica: entrada, replicacin primaria, diseminacin, viremia y replicacin secundaria en los rganos blancos. 1.2 Vas de entrada de los virus: piel, tracto respiratorio, tracto gastrointestinal, tracto genitourinario y conjuntiva. 1.3 Factores que determinan una infeccin localizada o diseminada. 1.4 Rangos de husped y susceptibilidad. 1.5 Tipos de infeccin: subclnica, aguda, persistente, latente, por virus lentos y otros patrones de infeccin viral (infecciones abortivas y transformantes). 1.6 Mecanismos involucrados en la patogenicidad. 2. Cambios de la clula por la infeccin viral: 2.1 Alteraciones en la sntesis de macromolculas. 2.2 Cambios en la permeabilidad de la membrana celular. 2.3 Efecto citoptico: formacin de sincicios, cuerpos de inclusin, hiperplasia celular. 2.4 Presencia de antgenos virales. 2.5 Transformacin. 2.6 Aberraciones cromosmicas.
Los virus pueden causar enfermedad en sus huspedes despus de traspasar las barreras protectoras del organismo. El resultado de la infeccin vrica y sus sntomas estn determinados por los rganos afectados, por los virus y la respuesta del husped a la infeccin. La gravedad de la infeccin depende por un lado de la cepa del virus, tamao del inculo y el estado de salud del individuo y por el otro de la efectividad de la respuesta inmune para resolver la infeccin. Para que los virus puedan infectar a un organismo necesitan adherirse a las clulas en el sitio de entrada, infectarlas, replicarse, diseminarse por diferentes vas y alcanzar sus rganos blancos donde de nuevo se replicarn. La replicacin viral interfiere con las funciones de la clula mediante alterar la sntesis de las protenas celulares produciendo dao y eventualmente la muerte de la clula infectada. Un virus en particular puede causar varias enfermedades diferentes o bien no producir sntomas apreciables (infeccin subclnica). Por ejemplo, el virus del herpes simple tipo 1 puede causar gingivoestomatitis, faringitis, herpes labial o queratoconjuntivitis dependiendo del tipo de clulas afectadas o no producir ninguna enfermedad. Los virus tienen factores de virulencia que son necesarios para que puedan producir enfermedad y so-
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brevivir en el husped. La prdida de estos factores conduce a la atenuacin del virus. En general, las infecciones naturales pueden ser rpidas y autolimitadas (infecciones agudas) o de larga duracin (persistentes). La infeccin viral altera la clula husped pudiendo matarla rpidamente mientras produce gran cantidad de partculas virales o bien producir partculas virales infecciosas sin causar la muerte inmediata de la clula. Con frecuencia los signos y sntomas de las enfermedades virales son resultado de las alteraciones en la clula. A los cambios morfolgicos observables en la clula por efecto de la infeccin viral se les denomina efecto citoptico. Las alteraciones ms frecuentes son lisis, necrosis celular, formacin de sincicios (clulas fusiona-
das), de clulas citomeglicas (clulas grandes con citoplasma reducido y ncleo grande con inclusiones en el citoplasma y en el ncleo), de vacuolas en el citoplasma e inclusiones en el ncleo o en el citoplasma. El efecto citoptico es especfico del virus y de la clula husped pero no todos los virus lo originan. Sin embargo, algunos grupos virales producen un efecto citoptico caracterstico que se utiliza para identificarlos tentativamente. Por otro lado, algunas de las protenas virales son expresadas en la superficie de las clulas, lo cual permite que las clulas infectadas sean reconocidas por las clulas de la respuesta inmune tanto innata como adquirida.
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4. DEFENSAS DEL HUSPED CONTRA LA INFECCIN VIRAL

1. Respuesta inmune innata: 1.1 Defensas primarias: barreras fsicas (piel, superficies cubiertas por moco), acidez, accin mecnica de fluidos (lgrimas), epitelios mucociliares, etctera. 1.2 Interferones: mecanismos de accin e importancia. 1.3 Complemento: importancia en virus con envoltura y su participacin en la inflamacin. 1.4 Clulas NK: mecanismos de citotoxicidad. 2. Respuesta inmune adquirida: 2.1 Presentacin de antgenos y activacin de las clulas de la respuesta inmune (linfocitos TCD4+ y CD8+). 2.2 Linfocitos T citotxicos: reconocimiento de clulas infectadas por antgenos presentados en contexto de molculas MHC clase I y mecanismos de citotoxicidad. 2.3 Respuesta de anticuerpos: neutralizacin. 3. Mecanismos de evasin de la respuesta inmune: 3.1 Variacin antignica (virus de influenza, virus de inmunodeficiencia humana (VIH). 3.2 Inhibicin de la presentacin de antgenos en contexto de molculas del MHC clase I (herpes, citomegalovirus). 3.3 Infeccin de clulas inmunocompetentes (VIH). 3.4 Produccin de citocinas inmunosupresoras (Epstein-Barr).
Como ya se ha mencionado, el xito de una infeccin viral depende de poder superar el efecto de la respuesta inmune innata en primer trmino y, posteriormente, la inmunidad adquirida. Los principales mecanismos de la inmunidad innata comprenden en primer lugar las barreras fsicas y qumicas del organismo y despus la accin de molculas solubles como son los interferones tipo I que son producidos por las clulas infectadas y que protegen a otras clulas de la infeccin. Por otro lado, existe un grupo de clulas llamadas asesinas naturales (NK) que pueden identificar a las clulas infectadas, en los que los virus inhiben la expresin de molculas clase I, por la ausencia de molculas de histocompatibilidad en su superficie y destruirlas por citotoxicidad. El procesamiento de los antgenos virales por clulas presentadoras de antgenos como resultado de los mecanismos de inmunidad innata permiten que se activen una serie de clulas, principalmente linfocitos CD4+ y CD8+, que pueden participar produciendo citocinas que a su vez intervienen en la diferenciacin de clulas citotxicas (CTL), en la sntesis de anticuerpos y en la activacin de otras clulas efectoras. Tambin al activarse el complemento, que son una serie de protenas sricas, en combinacin con los anticuerpos puede producir poros en las membranas de los virus con envoltura, opsonizar a las partculas
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virales y producir anafilatoxinas que favorecen la inflamacin. En general, las infecciones virales son controladas por la respuesta inmune permitiendo que el husped se recupere de la enfermedad. Es importante mencionar que los virus han desarrollado una serie de mecanismos para evadir la respuesta inmune del husped y poder infectarlo y permanecer durante periodos largos en l. Dentro de estos mecanismos tenemos por ejemplo: la produccin de citocinas que regulan negativamnte la respuesta inmune, la variacin antignica y la infeccin de clulas inmunocompetentes.
Las respuestas inmunes a las infecciones virales pueden estar involucradas en la patogenia. Una consecuencia de las infecciones persistentes con algunos virus como hepatitis B es la formacin de complejos inmunes que se pueden depositar en los vasos sanguneos produciendo vasculitis sistmica. Algunos virus (VIH) pueden infectar clulas del sistema inmune como linfocitos y macrfagos y la infeccin de estas clulas conduce a un estado de inmunosupresin que contribuye a la patogenia. Finalmente, se ha propuesto que los virus pueden provocar enfermedad autoinmune, ya que hay protenas virales que son homlogas a protenas propias y que al ser reconocidas conducen a un rompimiento de la tolerancia a esos antgenos propios con el consecuente ataque del sistema inmune a los tejidos del husped.
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5. INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO

Beatriz Gmez Garca
1. Diferentes sndromes: 1.1 Catarro comn (rinovirus y coronavirus). 1.2 Laringotraqueobronquitis, bronquiolitis y neumona en nios (virus de parainfluenza y sincitial respiratorio). 1.3 Sndrome de influenza y neumona atpica en adultos (virus de influenza, adenovirus y coronavirus). 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Estructura viral: 3.1 Rinovirus, coronavirus, virus de influenza, parainfluenza, sincitial respiratorio y adenovirus. 4. Patogenia: 4.1 4.2 4.3 4.4 Vas de entrada. Periodo de incubacin. Manifestaciones clnicas. Vas de diseminacin.
Las enfermedades de las vas respiratorias presentan anualmente a nivel mundial una alta incidencia. Los agentes etiolgicos principales son virus de diferentes familias: Paramixoviridae (virus sincitial respiratorio y parainfluenza); Ortomixoviridae (virus de influenza A y B); Adenoviridae (adenovirus); Picornaviridae (rinovirus); Coronaviridae (coronavirus) y Herpeviridae (Epstein Barr y citomegalovirus). En Mxico, las enfermedades de las vas respiratorias y gastrointestinales presentan la incidencia ms alta entre las enfermedades infecciosas. Los virus de las seis diferentes familias mencionadas producen infecciones frecuentes con cuadros clnicos que pueden ser muy graves. Clnicamente, las infecciones respiratorias pueden agruparse en ocho sndromes de acuerdo al sitio anatmico afectado: catarro comn, rinitis, faringitis, laringitis, laringo-trqueo-bronquitis (crup), bronquitis y neumona (fig. 5.1, pg. 31). Frecuentemente, una misma infeccin involucra ms de un sitio anatmico, a grandes rasgos, se puede asignar un sndrome especfico a un virus determinado, aunque un mismo virus puede originar todos los sndromes clnicos mencionados. La figura 5.2 (pg. 32) muestra la frecuencia con la que los distintos virus originan los diferentes sndromes respiratorios. La transmisin de las infecciones respiratorias virales es alta, las fuentes de contagio son personas que pre-
5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 6. Tratamiento: 6.1 Drogas antivirales. Mecanismos de accin. 7. Prevencin y control: 7.1 Factores de riesgo. 7.2 Fuentes de contagio. 7.3 Vacunas. Estrategias en el diseo y resultados obtenidos.
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sentan la infeccin y el virus se transmite por gotitas de saliva. Los virus despus de entrar a travs de las vas respiratorias, colonizan y se multiplican en el epitelio, algunos como el del resfriado comn y los de influenza se limitan a propagarse en estas clulas. Tienen periodos de incubacin cortos (das) y la defensa principal del husped es la inmunidad de las mucosas, principalmente la IgA. Otros virus, principalmente los de la familia de herpes, adems de colonizar, y propagarse en el epitelio atraviesan la membrana basal y se diseminan y propagan en otras partes del cuerpo. Estos virus tienen un periodo de incubacin mas largo (aproximadamente dos semanas) y presentan viremia. Debido a que tienen una fase de viremia sistmica, la respuesta inmune del husped incluye tambin clulas T citotxicas. Por lo general, las infecciones de las vas respiratorias son autolimitadas. Sin embargo, pueden ocasionar cuadros graves con alta tasa de mortalidad principalmente en recin nacidos, nios y adultos mayores. Recientemente se han presentado en varios pases cuadros de neumona atpica denominados "Sndrome respiratorio agudo severo" (en ingls SARS). El agente etiolgico probable es un coronavirus proveniente de gatos silvestres que abundan en una provincia del sur de China, sitio en el que se inici la epidemia.
El diagnstico se hace por inmunoflorescencia indirecta y en los ltimos aos ha adquirido importancia el uso de tcnicas de biologa molecular como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). Los antivirales son tiles, en casos graves de infecciones con virus sincitial respiratorio, el tratamiento con ribavirina se ha utilizado a pesar de los efectos secundarios que produce. Tambin se han utilizado anticuerpos antivirales con relativo xito. Actualmente, se dispone de antivirales y vacunas contra el virus de la influenza que han mostrado ser tiles sobre todo en los casos de epidemias.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Graeme Laver W, Bischofberger N, Webster RG. Disarming flu viruses. Scientific American. 1999 January; 5765. 2. Johnston SL. Problems and perspects of developing effective therapy for common cold viruses. Trends in Microbiology. 1997; 5: 58-63. 3. Ksiased TG, Erdman D, Goldsmith C, Kaki SR, Peret T, Emery S, et al. A novel coronavirus associated with severe acute respiratory sindrome. N Engl J Med. 2003; 10: 1056-62.
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Catarro comn, rinitis. Virus: rino, corona, adeno, myxo, Eco y Coxsackie A y B
Estomatitis: virus: herpes simple
Crup. Virus: parainfluenza y sincitial respiratorio
Faringitis. Virus: adeno, herpes simple y Coxsackie Bronquitis. Virus: parainfluenza, sincitial respiratorio e Influenza Bronquiolitis. Virus: sincitial respiratorio
Neumona. Virus: adeno, parainfluenza, coxsackie, Influenza y sincitial respiratorio, coronavirus
Fig. 5.1. Enfermedades del tracto respiratorio ocasionadas por virus.
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Virus sincitial respiratorio
Influenza A, B
Parainfluenza
Virus Coxsackie
Adenovirus
EBV citomegalovirus
Rhinovirus
Coronavirus
Bronconeumona
Fig. 5.2. Frecuencia con la que los virus originan enfermedad en los diferentes niveles del tracto respiratorio. Modificado de: White DO y Fenner JD. Medical Microbiology. 3 ed. Nueva York: Academic Press; 1986.
Catarro comn
Bronquiolitis
Bronquitis
Influenza
Faringitis
Fiebre
Croup
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6. INFECCIONES GASTROENTRICAS
Beatriz Gmez Garca
1. Gastroenteritis viral: 1.1 Manifestaciones clnicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Principales agentes etiolgicos: 3.1 Rotavirus. 3.2 Virus Norwalk y parecidos al Norwalk. 3.3 Coxsackievirus A y B. 4. Patogenia: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de incubacin. 4.3 Vas de diseminacin. 5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: aislamiento e identificacin del agente viral y deteccin de antgenos y genoma viral. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales: IgM, IgG e IgA. 7. Tratamiento. 8. Prevencin y control. 8.1 Factores de riesgo. 8.2 Fuentes de contagio.
A la inflamacin del estmago y de los intestinos delgado y grueso, ocasionada por diferentes agentes virales se le denomina gastroenteritis viral o catarro estomacal. Diferentes virus pueden causar gastroenteritis: rota, coxsackie, adeno, calici, astro, virus Norwalk y similares a Norwalk. La principal sintomatologa consiste en diarrea y vmito y en ocasiones se presentan dolores de cabeza y clicos estomacales. Por lo general, los sntomas se presentan uno o dos das despus de la infeccin y pueden durar de uno a diez das dependiendo del virus que la origina. La gastroenteritis afecta a personas de cualquier edad y se presenta en todo el mundo. Sin embargo, algunos virus producen enfermedad diarreica con ms frecuencia en determinados grupos de edad. Por ejemplo, rotavirus es la causa ms frecuente de diarreas en infantes y nios menores de cinco aos y se presentan durante los meses de octubre a abril, mientras que las diarreas en nios mayores por lo general son ocasionadas por adeno y astrovirus y en adultos por virus Norwalk y similares a Norwalk, presentndose durante todo el ao. La infeccin es contagiosa se transmite por va orofecal y por la ingestin de alimentos y bebidas contaminadas. El diagnstico se hace principalmente por las manifestaciones clnicas, ya que algunos virus presentan sintomatologa especfica que ayuda al diagnstico.
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Aunque rutinariamente no se identifican los virus que ocasionan gastroenteritis, los rotavirus se pueden identificar en heces fecales por microscopia electrnica y rotaforesis. El tratamiento consiste en rehidratacin, por lo que, se recomienda a las madres de nios pequeos tener en casa soluciones de rehidratacin oral (suero oral). En cuadros gastroentricos agudos no debe administrarse agua sola, sino que debe contener azcar o minerales, ya que en la diarrea se pierden los minerales y, por lo tanto, al administrar agua sola se favorece esta prdida.
Los coxsackievirus tipo A pueden tambin causar parlisis flcida y muerte y, los del tipo B parlisis espstica. Estos virus tambin se asocian con enfermedades respiratorias, de la piel (herpangina), conjuntivitis, miocardiopatas, pericardiopatas y enfermedades cardiovasculares crnicas, entre otras.
REFERENCIA COMPLEMENTARIA 1. Blacklow NR, Greenberg HB. Viral gastroenteritis. N Engl J Med. 1991; 325: 252-261.
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7. INFECCIONES VIRALES DE LA INFANCIA

Beatriz Gmez Garca
Los nios frecuentemente padecen infecciones virales y las enfermedades ms comunes son: gastroentricas, respiratorias y exantemticas, entre las ltimas, tenemos el sarampin, la rubola, la rosola y la varicela. Es importante sealar que las vesculas que presentan las diferentes infecciones difieren en su morfologa, lo que sirve de gua para el diagnstico. Rubola, rosola y varicela se revisarn posteriormente en el programa y en esta sesin trataremos sarampin y parotiditis.
6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: examen citolgico y aislamiento e identificacin del agente viral o de sus antgenos o genoma. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales: IgM e IgG. 7. Complicaciones: otitis media, encefalitis, neumona de clulas gigantes sin exantema, sarampin atpico y panencefalitis esclerosante subaguda. 8. Tratamiento: inmunoglobulinas.
SARAMPIN 1. Manifestaciones clnicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: 3.1 Estructura viral. 4. Patogenia: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de Incubacin. 4.3 Vas de diseminacin. 5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular.
9. Prevencin y control: 9.1 Factores de riesgo. 9.2 Fuentes de contagio. 9.3 Vacunas: de virus atenuados y triple viral (SPR).
El sarampin se caracteriza por presentar exantema maculopapular, en general, muy extenso y eritema polimorfo. Las lesiones son ligeramente elevadas. Es una de las infecciones ms importantes de la infancia con alta morbilidad y en los pases en desarrollo con altas tasas de mortalidad que se asocian con deficiencias de vitamina A y desnutricin en general. La fase aguda cursa con: fiebre, dolor de cabeza, exantema y conjuntivitis. Pueden presentarse diversas complicaciones como otitis, neumona y la encefalitis postinfeccin que se considera la complicacin ms grave y
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frecuente en pases en desarrollo. La panencefalitis esclerosante subaguda (PEES) se presenta con baja incidencia siendo una complicacin muy grave. No se dispone de antivirales especficos para el sarampin, aunque en individuos inmunocomprometidos susceptibles expuestos a la infeccin se han aplicado inmunoglobulinas con xito. Sin embargo, se cuenta con vacunas atenuadas muy eficaces, que a travs de las campaas de vacunacin han logrado disminuir considerablemente la incidencia de esta enfermedad. Actualmente, la vacuna se administra junto con la de parotiditis y rubola (SPR, triple viral).
8. Tratamiento. 9. Prevencin y control: 9.1 Factores de riesgo. 9.2 Fuentes de contagio. 9.3 Vacunas: de virus atenuados y triple viral (SPR).
PAROTIDITIS (PAPERAS) 1. Manifestaciones clnicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: 3.1 Estructura viral. 4. Patogenia: 4.1 4.2 4.3 4.4 Vas de entrada. Periodo de Incubacin. Manifestaciones clnicas. Vas de diseminacin.
La parotiditis se manifiesta por el crecimiento de las glndulas partidas, aunque este virus tambin puede afectar el pncreas, los testculos y los ovarios. La mayor parte de las infecciones son asintomticas por lo que se dificulta determinar su incidencia. En nios pequeos se presenta frecuentemente como infeccin de las vas respiratorias sin parotiditis. Es muy contagiosa y se transmite por gotitas de saliva. Su periodo de incubacin vara de siete a 25 das, por lo general, es una enfermedad benigna en la niez, aunque puede originar complicaciones como meningitis asptica que generalmente no deja secuelas, espordicamente origina pancreatitis, nefritis, tiroiditis y sordera nerviosa. Una complicacin frecuente en varones adolescentes y adultos es la orquitis que es muy dolorosa y puede originar esterilidad. La inmunidad es permanente y se dispone de una vacuna efectiva que, a travs de las campaas de vacunacin ha disminuido su incidencia. El diagnstico se basa en las manifestaciones clnicas, aunque el virus se puede recuperar de orina, saliva, exudado farngeo y lquido cefalorraqudeo.
5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: aislamiento e identificacin del agente viral o sus antgenos. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales (IgM). 7. Complicaciones: orquitis, pancreatitis y meningitis.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Sawyer LA. Antibodies for the prevention and treatment of viral diseases. Antiviral Research. 2000; 47: 57-77. 2. Afzal MA, Minor PD, Schild GC. Clinical safety issues of measles, mumps and rubella vaccines. Bulletin World Health Organization. 2000; 78: 199-204.
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8. INFECCIONES POR VIRUS DE HERPES

Beatriz Gmez Garca
La familia Herpetoviridae comprende varios patgenos humanos que se caracterizan por producir infecciones persistentes con reactivaciones frecuentes, presentan la misma estructura viral y se diseminan intercelularmente en presencia de anticuerpos antivirales. En este guin se describen HSV-1, HSV-2, varicela-zoster, citomegalovirus, HSV-6, HSV-7 y HSV-8 y el virus de Epstein Barr es diferente en el guin de virus oncognicos.
6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: examen citolgico, tincin de Tzank; aislamiento e identificacin del agente viral; deteccin de antgenos y genoma viral. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales. 7. Tratamiento. 8. Prevencin y control: 8.1 Factores de riesgo. 8.2 Fuentes de contagio. 8.3 Vacunas. Estrategias en el diseo y resultados obtenidos.
ESTRUCTURA DE LOS VIRUS DE LA FAMILIA DE HERPES
VIRUS DE HERPES SIMPLE TIPO I Y II (HSV-1, HSV-2) 1. Manifestaciones clnicas: estomatitis, herpes genital. 2. Morbilidad y mortalidad. 3. Patogenia: 3.1 Vas de entrada. 3.2 Periodo de incubacin. 3.3 Vas de diseminacin. 4. Complicaciones: infeccin perinatal, conjuntivitis, encefalitis, meningitis, panadizo, esofagitis, etctera 5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular.
HSV-1 produce infecciones que generalmente son asintomticas aunque puede causar estomatitis. Infecta por lo general la cavidad oral y se considera que ms de 80% de los adultos estn infectados. El HSV-2 infecta principalmente la mucosa genital y se considera que entre 20 y 30% de los adultos padecen la infeccin. Ambos tipos de virus producen vesculas claras que generalmente se ulceran con rapidez y pueden causar lesiones muy dolorosas pero benignas. HSV-1 se transmite por va respiratoria (gotitas) y/o por saliva, mientras que HSV-2 por secreciones vaginales. Es importante mencionar que el lquido de las lesiones contiene virus infecciosos. Los mecanismos de patogenicidad de HSV-1 y 2 son muy similares, ambos infec-
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tan y se replican en clulas mucoepiteliales y persisten en las neuronas. La reactivacin se presenta frecuentemente y por diferentes estmulos como la exposicin a: rayos infrarrojos, fatiga, estrs, cambios hormonales (menstruacin, embarazo, menopausia), inmunosupresin, etctera. La respuesta inmune aunque permanente no es protectora. Las complicaciones que puede producir la infeccin con HSV-1 y HSV-2 son muchas, entre ellas, podemos mencionar: conjuntivitis, encefalitis, meningitis, queratoconjuntivitis, panadizo, traqueobronquitis, amigdalitis, faringitis y esofagitis. Una complicacin grave de HSV-2 es la infeccin del recin nacido que puede evitarse cuando es aparente por cesrea. El diagnstico se realiza a travs del examen citolgico por la observacin de sincitios que pueden teirse con Giemsa (prueba de Tzank). Sin embargo, esta prueba no es concluyente, por lo que, es necesario detectar el antgeno viral por inmunoflorescencia indirecta o el genoma por hibridacin in situ. La deteccin de anticuerpos slo es de utilidad para detectar la infeccin primaria y para estudios epidemiolgicos. Los frmacos antivirales que se utilizan para tratar las infecciones por herpes son inhibidores de la ADN polimerasa codificada por el virus o anlogos de nucletidos.
3. Patogenia: 3.1 Vas de entrada. 3.2 Periodo de incubacin. 3.3 Vas de diseminacin. 4. Complicaciones: encefalitis y neumona (husped inmunocomprometido). 5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: examen citolgico, tincin de Tzank; aislamiento e identificacin del agente viral; deteccin de antgenos y genoma viral. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales (IgM e IgG). 7. Tratamiento. 8. Prevencin y control: 8.1 Factores de riesgo. 8.2 Fuentes de contagio. 8.3 Vacunas.
REFERENCIA COMPLEMENTARIA 1. Whitley RJ, Roizman B. Herpes simplex virus infections. Lancet. 2001; 357: 1513-1518.
VARICELA 1. Manifestaciones clnicas: infeccin localizada y sistmica. Herpes zoster en huspedes inmunocomprometidos. 2. Morbilidad y mortalidad.
El virus de la varicela origina la enfermedad exantemtica del mismo nombre y a su reactivacin se le denomina herpes zoster. La varicela se presenta con exantema vesicular caracterstico, fiebre y malestar general. Probablemente sea el exantema de mayor importancia clnica en nios, el virus se transmite por contacto directo a travs de gotitas de aerosol. El periodo de incubacin es de 14 a 18 das y se presentan dos fases de viremia con sintomatologa similar a influenza con fiebre y rash. Despus de la infeccin primaria, el virus permanece latente en los ganglios nerviosos craneales o de las races dorsales y se presentan recurrencias principalmente en adultos o en pacientes inmunosuprimidos. Al reactivarse el virus, emigra de los ganglios a la piel donde produce un exantema vesicular conocido como herpes zoster que es muy doloroso. La infeccin en nios, por
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lo general, es leve, por lo que se recomienda la exposicin al virus durante la infancia. En individuos inmunodeprimidos se puede presentar encefalitis postinfeccin y neumona como complicaciones de la infeccin. La inmunidad es permanente y la respuesta celular participa principalmente en controlar la multiplicacin viral. Recientemente, se han empezado a utilizar tcnicas de biologa molecular para la identificacin de los virus a partir de las lesiones o de lquido cefalorraqudeo. El tratamiento de estas infecciones usando inhibidores de la polimerasa viral (aciclovir) han producido resultados satisfactorios, pero se requieren dosis ms altas que las recomendadas para infecciones por HSV-1 y 2. Se dispone de una vacuna atenuada eficaz.
5. Diagnstico de laboratorio: 5.1 Tcnicas directas: observacin de cuerpos de inclusin en tejidos o clulas descamadas; aislamiento e identificacin del agente viral en lavado de garganta y orina; deteccin de antgenos y genoma viral. 5.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales (IgM e IgG). 6. Tratamiento: ganciclovir. 7. Prevencin y control: 7.1 Factores de riesgo. 7.2 Fuentes de contagio.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Liesingang TJ. Varicela zoster viral disease. Mayo Clinical Proceedings. 1999; 74: 983-998. 2. Gershon AA. The current status of live attenuated varicella vaccine. Arch Virol. (Suppl.) 2001; 17: 1-6.
La infeccin por citomegalovirus es muy comn, los virus se encuentran distribuidos en todo el mundo y se presentan 50% en los adultos y 0.5 a 5% en los recin nacidos. Su sintomatologa no es especfica, el virus permanece en el individuo toda la vida, se presenta en forma recurrente y durante la recurrencia es fuente de contagio. La patogenia es similar a la de otros virus de la familia, permanece en forma latente en los leucocitos mononucleares y en rganos como el rin y el corazn, se reactiva principalmente en condiciones de inmunosupresin por lo que es muy frecuente en enfermos con SIDA. La inmunidad celular es esencial para resolver y controlar la infeccin. El diagnstico se hace por la presencia de clulas citomeglicas, que son de gran tamao y presentan una inclusin intranuclear basfila densa (ojo de lechuza). Las clulas citomeglicas se encuentran en cualquier tejido del cuerpo y en la orina, las inclusiones se observan fcilmente con tincin de Papanicolau, hematoxilina y eosina. Se transmite por transfusiones de sangre y por transplantes de rganos cuando hay manifestaciones clni-
CITOMEGALOVIRUS 1. Manifestaciones clnicas: enfermedad citomeglica, mononucleosis infecciosa y enfermedad congnita y del recin nacido. Infecciones en huspedes inmunocomprometidos. 2. Morbilidad y mortalidad. 3. Patogenia: 3.1 Vas de entrada. 3.2 Periodo de incubacin. 3.3 Vas de diseminacin. 4. Respuesta inmune: 4.1 Inmunidad innata. 4.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular.
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cas los sntomas son similares a los de la mononucleosis infecciosa. Frecuentemente, el virus se encuentra en el rin, donde se replica y se elimina por orina. Tambin se transmite en forma congnita y perinatal; se considera que es importante en la produccin de efectos congnitos; no se dispone de vacuna efectiva.
ganismo en forma latente. Los sntomas son generalmente subclnicos en nios pequeos, pero en mayores, adolescentes y adultos, probablemente debido a la reactivacin del virus, origina sndromes similares a la mononucleosis con malestar general, faringitis, linfocitosis y frecuentemente hepatosplenomegalia. Los pacientes se quejan frecuentemente de cansancio. Se considera que permanece en clulas T y establece infeccin crnica. No se conocen sus formas de transmisin, pero se piensa que todos los adultos estn infectados con el HHV-6B. La inmunidad celular es importante en el control de la infeccin al igual que en otros virus de la familia. El HHV-7 se asocia con cuadros de rosola en edades ms avanzadas, similares a los producidos por HHV-6. Tiene tropismo por clulas T y como el HHV-6 se manifiesta con ms frecuencia en enfermos con SIDA. Permanece latente toda la vida. Se ha descrito, ms recientemente, un virus de herpes humano tipo 8 (HHV-8) que tambin se asocia a enfermos con SIDA.
REFERENCIA COMPLEMENTARIA 1. Drago F, Aragone MG, Lgani C, Rebora A. Cytomegalovirus infection in normal and immunocompromised humans. Dermatology. 2000; 2000: 189-195.
VIRUS DE HERPES HUMANO 6 Y 7 (HHV-6 y HHV-7) El HHV-6 se aisl en 1986 de pacientes con SIDA, se le considera el agente causal de rosola (exantema sbito) y se le asocia con la fatiga crnica, as como, con diferentes problemas neurolgicos. Se han descrito dos variantes del virus HHV-6 denominadas A y B. Inicialmente se presenta en nios de dos a tres aos de edad con exantema posterior y fiebre que dura de dos a tres das y el virus probablemente permanece en el or-
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9. INFECCIONES VIRALES DEL FETO Y EL NEONATO

Beatriz Gmez Garca
Muchos virus pueden atravesar la placenta y causar infecciones congnitas as como infectar al producto perinatalmente cuando atraviesa el canal de parto. Estas infecciones pueden ocasionar secuelas graves. Los virus que se ha demostrado que atraviesan la placenta son: rubola, citomegalo y parvo.
6. Diagnstico de laboratorio: 6.1 Tcnicas directas: aislamiento e identificacin del agente viral o deteccin de sus antgenos o genoma. 6.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales: IgM e IgG. 7. Complicaciones: panencefalitis progresiva.
RUBOLA 8. 1. Manifestaciones clnicas: de la rubola posnatal y del sndrome de rubola congnito. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: virus de la familia Togaviridae. 3.1 Estructura viral. 4. Patogenia: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de incubacin. 4.3 Infeccin sistmica e intrauterina. 4.4 Vas de diseminacin. 5. Respuesta inmune: 5.1 Inmunidad innata. 5.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 9. Prevencin y control: 9.1 Factores de riesgo. 9.2 Fuentes de contagio. 9.3 Vacunas: virus atenuados y triple viral (SPR). Efecto de las campaas de vacunacin en la proteccin de los individuos y en la interrupcin de la transmisin del virus. Tratamiento: inmunoglobulinas.
La infeccin por el virus de rubola en nios, ocasiona una enfermedad exantemtica leve y aproximadamente 50% de los casos es asintomtica. Sin embargo, en mujeres adultas la infeccin primaria es sintomtica y presenta vesculas maculopapulares, fiebre y frecuentemente dolores musculares. En mujeres embarazadas, que sufren la infeccin, el virus puede causar alteraciones graves en el feto (cardiopata congnita, ceguera, sordera, retraso mental, etctera). La panencefalitis pro-
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gresiva es una complicacin rara del sndrome congnito de rubola, que aparece en la segunda dcada de la vida y que se manifiesta como un deterioro neurolgico grave que progresa hacia la muerte. La incidencia en Mxico de la infeccin infantil es difcil de evaluar debido a los casos asintomticos. Respecto a la rubola congnita, al nacimiento solo los casos muy graves se reportan, la mayora se diagnostican, posteriormente, por lo que se dificulta tener datos confiables. El virus infecta inicialmente el tracto respiratorio alto y despus se disemina a los ganglios linfticos locales ocasionando adenopatas, luego viremia y posteriormente diseminacin del virus por todo el cuerpo. El virus se transmite por gotitas respiratorias y se pueden eliminar hasta dos semanas despus de la aparicin del exantema. La inmunidad que induce el virus es permanente y protectora cuando el nivel de anticuerpos antivirales es alto (superior a las 15 unidades inhibitorias de la hemaglutinacin). Es importante sealar que estos anticuerpos sricos de las mujeres inducidos por vacunacin o por infeccin anterior al embarazo, impiden la diseminacin del virus al feto. La infeccin del feto por rubola puede alterar la mitosis y la estructura cromosomal, lo que ocasiona, un desarrollo anormal. El virus puede persistir en varios tejidos del feto permitiendo que se disemine y altere la respuesta inmune induciendo tolerancia. La infeccin de la madre en los primeros tres meses de embarazo ocasiona grandes consecuencias al producto, en estos casos se deben realizar estudios de laboratorio, por lo general, la presencia de anticuerpos antivirales IgM e IgG. Aunque los virus pueden aislarse tres o cuatro das despus de iniciado el cuadro clnico a partir de frotis nasofarngeo o farngeos y crecerse en cultivos de lneas celulares e identificarse por el efecto citoptico que producen; lo ms usado para el diagnstico es la deteccin
de anticuerpos antivirales por inhibicin de la hemaglutinacin o ELISA. En la actualidad, se dispone de vacunas contra el virus de rubola eficaces, la de virus atenuados sola o en combinacin con la vacuna de sarampin y parotiditis. La vacunacin persigue dos objetivos principales: la proteccin del individuo vacunado y la interrupcin de la transmisin del virus.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Macuso P. Dermatologic manifestations of infectious diseases in pregnancy. J Perinat Neonatal Nurs. 2000; 14: 17-38. 2. Lee JY, Bowden DS. Rubella virus replication and links to teratogenicity. Clin Microb Rev. 2000; 13: 571-578. 3. Muoz FM, Euglund JA. A stepahead infant protection through maternal immunization. Peditr Clin North Am. 2000; 47: 449-463.
CITOMEGALOVIRUS Las caractersticas de la infeccin por citomegalovirus se discutieron en el captulo de Herpeviridae, sin embargo, es pertinente mencionar aspectos importantes de este virus como agente teratognico. En los pases donde la imnunizacin por rubola se ha llevado a cabo durante varios aos y de manera exitosa; citomegalovirus es actualmente el agente viral principal que ocasiona trastornos congnitos. La infeccin por citomegalovirus puede reactivarse varias veces durante el embarazo y debe tenerse en cuenta que la infeccin y el efecto teratognico son asintomticos, por lo que, es recomendable frecuentemente durante el embarazo tomar muestras de orina para cultivar el virus. El porcentaje de nios nacidos con secuelas serias debidas a citomegalovirus es muy bajo, un dato confiable no se
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tiene, pero si se sabe que 5-10 % de nios nacidos con inclusiones por citomegalovirus presentan secuelas congnitas serias y que otro alto porcentaje de estos nios (5-10 %) tienen problemas de audicin. Nios nacidos de madres que presentan primoinfeccin, tienen probabilidad ms baja de padecer secuelas que nios nacidos de madre con reinfeccin. La manera ms fcil de identificar una primoinfeccin es midiendo el ttulo de inmunoglobulinas IgM anticitomegalovirus.
Los virus de herpes simple, enterovirus, varicela zoster, hepatitis B y VIH pueden transmitirse durante el trabajo de parto y ocasionar infecciones perinatales. El virus de hepatitis B se transmite verticalmente con alta incidencia (80 %) y aunque no es teratognico, la mayora de los nios nacen como portadores del virus y tendrn alta probabilidad de desarrollar cirrosis y carcinoma hepatocelular durante el transcurso de su vida. El virus de inmunodeficiencia humana (VIH), tambin se transmite verticalmente, por lo que se recomienda a las madres seropositivas la administracin de AZT que ha mostrado prevenir la transmisin del virus al producto.
PARVOVIRUS El tipo B19 es el que origina enfermedad en el hombre y es el responsable de la quinta enfermedad eritematosa de los nios, una enfermedad febril, con malestar general y exantema que tiene su mayor incidencia entre los cuatro a 11 aos. Esta enfermedad se caracteriza por presentar la sintomatologa en dos etapas, los sntomas iniciales son parecidos a los de un resfriado, el periodo de incubacin es de siete a ocho das. La infeccin por parvovirus es en los primeros meses del embarazo, puede originar complicaciones, prdida del feto e hidroplasia fetal.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Macuso P. Dermatologic manifestations of infectious diseases in pregnancy. J Perinat Neonatal Nurs. 2000; 14: 17-38. 2. Lee JY, Bowden DS. Rubella virus replication and links to teratogenicity. Clin Microb Rev. 2000; 13: 571-578. 3. Muoz FM, Englund JA. A step ahead infant protection through maternal immunization. Pediatr Clin North Am. 2000; 47: 449-463.
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10. HEPATITIS VIRAL

Rodolfo Acua Soto
1. Agentes etiolgicos de la hepatitis viral: 1.1 Hepatitis A (picornavirus). 1.2 Hepatitis B (hepadnavirus). 1.3 Hepatitis C (flavivirus). 1.4 Hepatitis D (semejantes a viroides). 1.5 Hepatitis E (calicivirus). 2. Sndromes clnicos agudos y crnicos. 3. Patogenia: 3.1 Vas de entrada. 3.2 Vas de transmisin. 3.3 Eliminacin de formas infectantes. 4. Respuesta inmunolgica. 5. Diagnstico: 5.1 Mtodo directo: deteccin del antgeno viral. 5.2 Mtodo indirecto: deteccin de los anticuerpos antivirales. 6. Prevencin y control: 6.1 Factores de riesgo. 6.2 Vacunas.
En la actualidad, se han identificado seis tipos de virus capaces de producir hepatitis denominados: A, B, C, D, E y G. Estos virus se pueden clasificar en dos grupos de acuerdo al mecanismo de transmisin; el primer grupo lo constituyen los virus de la hepatitis B, C y D, los cuales son transmitidos por va parenteral, es decir, por medio de transfusiones de sangre, uso de agujas contaminadas, tatuajes, etctera; en el segundo grupo se encuentran los virus de la hepatitis A, E y G que son transmitidos por medio de la va fecal-oral. Algunos individuos tienen la capacidad de mantener el ciclo de replicacin de los virus B, C o D por largos periodos de tiempo sin presentar manifestaciones clnicas, por lo que se denominan portadores asintomticos. Estos virus pueden producir enfermedad heptica crnica que puede llevar a la muerte. En cambio, los virus de la hepatitis A, E y G no producen estado de portador asintomtico ni hepatitis crnica. Las manifestaciones clnicas y lesiones histolgicas son bsicamente las mismas para todos los tipos de virus de hepatitis. Los sntomas, pueden variar desde cuadros asintomticos hasta hepatitis fulminante. Afortunadamente, la mayor parte de los casos cursan como una enfermedad relativamente benigna que se resuelve completamente. Las manifestaciones clnicas se inician tpicamente de forma sbita. En la primera fase de la enfermedad, llamada fase preictrica, los pacientes se
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quejan de malestar general, nusea, vmito y debilidad. En esta fase y como resultado de la destruccin de numerosos hepatocitos, las enzimas residentes del tejido heptico (transaminasa glutmico-pirvica y transaminasa glutmico-oxalactica) son liberadas al plasma, en donde pueden ser detectadas con fines diagnsticos. La segunda etapa corresponde a la fase ictrica. La ictericia se presenta aproximadamente en 20-50% de los casos de hepatitis viral, cuando la ictericia no se observa se le denomina hepatitis anictrica. Despus de la invasin viral, los hepatocitos aparecen redondeados con el citoplasma claro, numerosas clulas hepticas se necrosan. En respuesta a este proceso, las clulas de Kupffer proliferan y se observa infiltracin de monocitos y linfocitos inicindose as, un proceso de regeneracin de hepatocitos. Se denomina: hepatitis crnica, al proceso inflamatorio que persiste por ms de seis meses. Existen diversas formas de hepatitis crnica: la persistente y la activa. La hepatitis crnica persistente es un proceso relativamente benigno mientras que en la crnica activa, hay dao heptico progresivo con cirrosis, insuficiencia heptica y muerte. El virus de la hepatitis A est constituido por una molcula de ARN de una cadena con polaridad positiva que codifica una sola cadena proteica que, posteriormente, es fragmentada por una proteasa viral para formar las diferentes subunidades de la cpside. Este virus produce una infeccin aguda, generalmente autolimitada que puede ser asintomtica, leve o grave y muy raramente fulminante. Los virus de la hepatitis A se eliminan por heces fecales, durante la fase de incubacin y la primera parte de la fase preictrica. La infeccin se transmite por medio de agua y alimentos contaminados por lo que, puede aparecer en forma de brotes epidmicos. El diagnstico definitivo de hepatitis A se realiza por medio de la identificacin de IgM anti-hepatitis A para infeccion reciente e IgG anti-hepatitis A para infeccin previa. Se
dispone de una vacuna altamente efectiva por lo que se recomienda que todos los nios entre uno y doce aos se vacunen. El virus de la hepatitis B contiene una doble cadena de ADN con un segmento de ADN de cadena simple. Este virus produce grandes cantidades de partculas virales incompletas no infecciosas en forma de esferas y filamentos de longitud variable compuestas casi exclusivamente del antgeno viral superficial. La infeccin es asintomtica en 75% de los casos y de 10 a 15% de ellos evolucionan a formas crnicas, de las cuales 20% desarrollan cirrosis y 20% cncer de hgado (hepatocarcinoma). El virus se transmite primariamente por va parenteral y sexualmente, pero se ha identificado en la saliva, las lgrimas, el lquido seminal, la leche materna y la orina. Los individuos positivos al antgeno de superficie del virus de la hepatitis B (HbsAg) son potencialmente contagiosos, por lo que, se les debe excluir como donadores de sangre. Actualmente, se dispone de una vacuna recombinante altamente efectiva. La hepatitis por virus C se denominaba hepatitis no A no B. El virin contiene una cadena de ARN linear de polaridad positiva que produce una cadena polipeptdica que incluye las protenas de la cpside, la proteasa, una helicasa y una ARN polimerasa. Este virus tiene una enorme frecuencia de mutacin, lo que dificulta la respuesta inmune. Se han identificado por lo menos doce diferentes subtipos de virus de la hepatitits C con una distribucin geogrfica particular. Los diferentes tipos de virus tienen respuestas diferentes al tratamiento con interfern alfa y beta. El diagnstico de la hepatitis C se basa en la identificacin de anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (anti HCV) por medio de ensayos inmunoenzimticos (ELISA). La hepatitis D se llamaba tambin hepatitis delta. La partcula viral contiene ARN circular de una cadena y
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tiene una envoltura lipdica con antgeno de superficie de la hepatitis B (HBSAg). El aspecto ms sobresaliente de la hepatitis D, es que la infeccin por el virus de la hepatitis D solamente ocurre en individuos infectados con virus de la hepatitis B. De acuerdo a la secuencia de infeccin de los dos virus existen dos posibilidades, la primera es que ambos virus ( B y D) infecten simultneamente a un individuo, en este caso, la enfermedad crnica se desarrolla en aproximadamente 2% de los casos. El segundo caso es cuando el virus de la hepatitis D, infecta un individuo previamente infectado por el virus de la hepatitis B. En este caso se produce una sobreinfeccin por el virus de la hepatitis D, aumentando la frecuencia de hepatitis crnica. En general, la hepatitis D tiende a ser una enfermedad aguda relativamente seria con una mortalidad de entre 2-20%. La fase crnica tiene un riesgo de entre 60 y 70% para desarrollar cirrosis. La mayor parte de los pacientes con hepatitis crnica producida por virus de la hepatitis D mueren de enfermedad heptica 10 15 aos despus de la infeccion original. La transmisin del virus es por va parenteral. La hepatitis E es producida por un virus pequeo, esfrico y desnudo que contiene una cadena de ARN linear de polaridad positiva. Es una enfermedad aguda y autolimitada, no produce hepatitis crnica ni estado de acarreador asintomtico. Es de transmisin fecal-oral, por lo tanto, puede aparecer en forma de brotes epidmi-
cos, es ms leve que la hepatitis A, sin embargo, en mujeres gestantes se desarrolla una hepatitis grave con una elevada mortalidad (10-50%). Los mtodos serolgicos para otros tipos de hepatitis no dan reaccin cruzada con hepatitis E. En Mxico se han reportado brotes epidmicos en Huitzililla, Estado de Mxico y en Telixtac, estado de Morelos. La hepatitis G es causada por un flavivirus y se piensa que estos virus son responsables de algunos casos de hepatitis crnica.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Linnen J, et al. Molecular clonIng and disease association of hepatitis G virus: A transfusion-transmissible agent. Science. 1996; 271: 505-508. 2. Velzquez O, et al. Epidemic transmission of enterically transmitted non-A, non-B hepatitis in Mexico. 19861987. JAMA. 1990; 263: 3281. 3. Conry-Cantinela C, et al. Routes of infection, viremia, and liver disease in blood donors found to have hepatitis C virus infection. N Engl J Med. 1996; 334: 1691. 4. Farci P, et al. Lack of protective immunity against reinfection with hepatitis C virus. Science. 1992; 258:135. 5. Hooflangle JH. Type D (delta) hepatitis. JAMA. 1989; 261: 1321. 6. Purcell RH. Hepatitis viruses. Changing patterns of human disease. Proc Natl Acad Sci USA. 1994; 91: 2401.
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11. INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO

Rodolfo Acua Soto y Beatriz Gmez Garca
Virus de varias familias ocasionan infecciones del sistema nervioso central, entre ellos, estn coxsackievirus, HIV, HSV-1, rabia y poliomielitis. En este guin revisaremos las infecciones del sistema nervioso producidas por rabia y virus de la poliomielitis y las enfermedades priones.
RABIA 1. Manifestaciones clnicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: 3.1 Estructura viral. 4. Patogenia: 4.1 Reservorios. 4.2 Vas de entrada. 4.3 Periodo de incubacin. 4.4 Vas de diseminacin. 5. Diagnstico de laboratorio 5.1 Tcnicas directas: deteccin de sus antgenos por inmunofluorescencia o identificacin de cuerpos de inclusin en las neuronas.
6. Prevencin y control: 6.1 Factores de riesgo. 6.2 Vacunas.
El virus de la rabia pertenece a la familia de los Rabdovirus y es neurotrpico, es decir, tiene afinidad por el sistema nervioso. Se han identificado diferentes variantes del virus por ejemplo, el virus que circula en los murcilagos en Baja California es diferente al que se encuentra en los zorrillos del Altiplano mexicano. La rabia es una infeccin viral del sistema nervioso central de animales que ocasionalmente es transmitida al hombre. La introduccin del virus de la rabia en los tejidos es generalmente debida a la inoculacin por mordedura de un animal rabioso en cuya saliva se encuentra el virus. La transmisin ocurre tambin por medio de aerosoles (particularmente de murcilagos) o heridas. Una vez iniciados los sntomas, la rabia es mortal en prcticamente 100% de los casos. La infeccin temprana afecta primariamente al sistema lmbico del cerebro, lo que explica la extrema agitacin y excitabilidad de la enfermedad (rabia furiosa). Una variante ocurre cuando la infeccin temprana se distribuye ampliamente en todo el cerebro y se manifiesta como un sndrome de encefalitis (rabia silenciosa). La rabia
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paraltica, una segunda variante de la enfermedad, ocurre en aproximadamente 20% de los casos, especialmente en individuos que fueron mordidos o inhalaron aerosoles producidos por murcilagos o vampiros rabiosos. En los tres diferentes tipos de rabia, el virus se disemina rpidamente por todo el cerebro afectando casi todas las clulas nerviosas en pocos das. El periodo de incubacin es muy variable, sin embargo, en la mayora de los casos es de 20 a 90 das y depende del sitio de mordedura, mientras ms cerca de la cabeza ms corto el periodo de incubacin. El curso de la enfermedad es rpido, desde el inicio de los sntomas hasta la muerte transcurren dos o tres semanas. Las manifestaciones clnicas inespecficas en la fase prodrmica son: ansiedad o depresin, faringitis, fiebre, irritabilidad, anorexia y nusea. El sntoma ms caracterstico de esta etapa es el dolor, sensacin de hormigueo y parestesia del sitio de inoculacin. Esta etapa dura entre dos y diez das. La segunda fase de la enfermedad (fase aguda) ocurre en forma de rabia furiosa o rabia paraltica. En la rabia furiosa, los sntomas ms importantes son agitacin, hiperactividad, comportamiento extrao, confusin, alucinaciones y ronquera. La hidrofobia se presenta cuando al deglutir lquidos se producen espasmos de los msculos larngeos y farngeos que producen aspiracin al interior de la trquea con sensacin de ahogamiento. En casos extremos, los espasmos se provocan simplemente con acercar agua al enfermo. La rabia silenciosa se manifiesta como un proceso encefaltico deprimido con letargia y parlisis de los msculos farngeos. En ambas formas, antes del deterioro final, el paciente tiene periodos alternantes de lucidez y agitacin incontrolada y en algunos casos, los enfermos mantienen el estado de conciencia por mucho tiempo. Se ha reportado que solo tres pacientes han sobrevivido a la rabia y que todos sufrieron dao neurolgico grave.
Un dato muy importante para el diagnstico de la rabia es el antecedente de exposicin al virus. El diagnstico antemortem se realiza por inmunofluorescencia en epitelio coreal y el postmortem se confirma por la presencia de inclusiones citoplsmicas patognomnicas (cuerpos de Negri) en el interior de las neuronas o por identificacin del antgeno viral en el tejido cerebral usando anticuerpos fluorescentes. La prevencin es la principal forma de evitar la rabia, la primera lnea de defensa incluye la vacunacin de perros y gatos, as como, evitar la mordedura de animales silvestres como zorrillos y mapaches. Y la segunda la constituye el tratamiento postexposicin que incluye el lavado con agua y jabn y, posteriormente con alcohol de la herida inmediatamente despus de la mordida y la aplicacin de la vacuna. La vacunacin postexposicin es la nica y mejor forma de detener el establecimiento del virus en los tejidos. Adicionalmente, se puede utilizar la administracin de suero antirrbico humano.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Case records of the Massachusetts General Hospital 21-1998. A 32 year old woman with pahringel spasms and paresthesis after a dog bite. N Eng J Med. 1998; 339: 105. 2. Fishbein DB, Robinson LE. Current concepts: Rabies. N Engl J Med. 1993; 329:1632. 3. Pape WS, et al. Risk of rabies transmission from encounters with bats. Colorado 1977-1996. Emerg Infect Dis. 1999; 5: 433.
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POLIOMIELITIS 1. Manifestaciones clnicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: 3.1 Estructura viral. 4. Patogenia: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de incubacin. 4.3 Vas de diseminacin. 5. Complicacin: atrofia muscular progresiva pospoliomieltica. 6. Respuesta inmune: 6.1 Inmunidad innata. 6.2 Inmunidad adquirida: anticuerpos neutralizantes y proteccin al producto por anticuerpos maternos. 7. Diagnstico de laboratorio: 7.1 Tcnicas directas: aislamiento e identificacin del agente viral. 7.2 Tcnicas indirectas: deteccin de los anticuerpos antivirales. 8. Prevencin y control: 8.1 Factores de riesgo. 8.2 Fuentes de contagio. 8.3 Vacunas: polivalente de virus atenuados (Sabin) y de virus muertos (Salk).
do. La infeccin por el virus de poliomielitis ocurre en el tubo digestivo, de donde el virus se distribuye a los ndulos linfticos regionales y en una minora de casos al sistema nervioso central, solamente 1 % de los casos desarrolla poliomielitis paraltica. Es ms en 90 % de los casos la infeccin es inaparente y en los individuos que progresa a una forma grave se observa dolor muscular con o sin parlisis flcida. El grado y localizacin de la parlisis depende del sitio de destruccin de la mdula espinal o del tallo cerebral. Los poliovirus invaden ciertos tipos de clulas nerviosas y al multiplicarse las daan o destruyen. Las astas anteriores de la mdula espinal son las ms afectadas y en el cerebro se afectan con ms frecuencia la formacin reticular, los ncleos vestibulares y los ncleos cerebelosos profundos. La parlisis en la poliomielitis es caractersticamente asimtrica. El tipo ms frecuente de poliomielitis es la abortiva que es una enfermedad leve que cursa con fiebre, malestar, cefalea, nusea, vmito, estreimiento y dolor farngeo. La poliomielitis no paraltica o meningitis asptica adems cursa con rigidez y dolor en espalda y cuello y la recuperacin, como en el caso anterior, es absoluta. La atrofia muscular progresiva postpoliomieltica es una recrudecencia de la parlisis y desgaste muscular que ocurre en algunas personas que sufrieron poliomielitis paraltica dcadas antes. Se reconocen tres tipos de poliovirus (1, 2 y 3). Existe una vacuna de virus atenuados que es trivalente y que forma parte del programa de vacunacin para eliminar el virus.
REFERENCIA COMPLEMENTARIA
La poliomielitis es una enfermedad viral asociada a parlisis flcida producida por un enterovirus de transmisin oral-fecal. El hombre es el nico reservorio conoci-
1. Hull HF, et al. Paralytic poliomyelitis: Seasoned strategies disappearing disease. Lancet. 1994; 343: 1331.
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PRIONES 1. Definicin de priones. 2. Caractersticas de la protena. 3. Manifestaciones clnicas de las enfermedades causadas por priones. 4. Diagnstico.
El trmino prin lo acu Stanley B. Prusnier en 1982 y es acrnimo de protena infecciosa. Los priones son pequeas partculas infecciosas de naturaleza proteica que se asocian con desrdenes degenerativos del sistema nervioso central y se caracterizan por producir cuadros patolgicos crnicos y progresivos. Los priones constan de una protena nica con peso molecular de 30-35 Kda que se denomina PRPsc, el nombre proviene de scrapie, la enfermedad en la que inicialmente se identific. La PRPsc es la isoforma de la protena celular PRPc de idntica secuencia de aminocidos y que se encuentra en todos los tejidos del organismo. El gen de PRP existe en una sola copia, en el hombre se encuentra en el cromosoma 20 y se expresa constitutivamente en todos los tejidos del organismo adulto aunque su mxima expresin es en tejidos neuronales, principalmente en el cerebro, cerebelo, mdula e hipotlamo. El cambio estructural que transforma a la PRPc en PRPsc estriba en su plegamiento, el prin no es otra cosa que una forma alterada de una protena celular normal que ha perdido su funcin y que ha adquirido la capacidad de transformar la forma normal en patgena. La patologa probablemente se manifiesta por la acumulacin de protena anormal.
La estructura secundaria de la protena celular madura (PRPc) purificada en su forma nativa consta de aproximadamente 43 % de -hlice y de 3 % de -plegada, en cambio la estructura secundaria de la PRPsc tiene aproximadamente 43 % de -plegada, lo que le permite formar complejos supramoleculares acumulables denominados amiloides. La transformacin de PRPc a PRPsc se postula que se debe a la transicin de las -hlices a -plegadas. La protena PRPsc se detecta con anticuerpos monoclonales que pueden diferenciarse entre las dos isoformas. Las enfermedades por priones se conocen como encefalopatas espongiformes. En exmenes postmortem del cerebro se encuentran vacuolas en la corteza y en el cerebelo. Los signos clnicos y la patologa que producen varan entre las especies afectadas, pero en todos los casos, el desarrollo de la enfermedad es muy lento y los tiempos de incubacin, con ausencia total de sntomas son extremadamente largos (dos a diez aos). En el hombre, los primeros sntomas son de origen neurolgico afectando la personalidad y el comportamiento con trastornos de memoria mientras que, en la fase final, el sntoma principal es la demencia. La muerte sobreviene despus de seis a doce meses de la aparicin de los primeros sntomas. Las enfermedades de humanos asociadas a priones son: Cruetzfeldt-Jakob, sndrome de Gerstmann-Strdussler-Scheinker, Kuru, insomnio fatal familiar y el sndrome de los Alpes que en la actualidad son enfermedades incurables.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Bessen AR. Neurodegenerative prion diseases. Science and Medicine. 1996; 3: 12-21. 2. Cohen EF. Prions, peptides and protein misfolding. Molecular Medicine Today. 2000; 6: 292-293.
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12. FIEBRES HEMORRGICAS

Rodolfo Acua Soto
1. Manifestaciones clnicas del dengue y de las fiebres hemorrgicas. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agentes etiolgicos: virus del dengue, hantavirus, arenavirus y virus del bola y Marburg. 3.1 Estructura del virus del dengue. 4. Patogenia del virus del dengue: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de incubacin. 4.3 Vas de diseminacin. 5. Respuesta inmune contra el virus del dengue: 5.1 Importancia de la inmunidad humoral en la patologa. 6. Diagnstico de laboratorio de dengue: 6.1 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales: IgM e IgG. 7. Prevencin y control: 7.1 Factores de riesgo. 7.2 Fuentes de contagio. 7.3 Control de mosquitos.
Se denominan fiebres hemorrgicas a las fiebres de origen infeccioso que cursan con hemorragias. La mayor parte de los agentes etiolgicos de las fiebres hemorrgicas tienen reservorios animales en la naturaleza y son transmitidos por insectos o aerosoles y causan enfermedades con mortalidades elevadas. Tres grupos de virus son los principales agentes etiolgicos de fiebres hemorrgicas: los flavivirus (dengue y fiebre amarilla), los arenavirus y los hantavirus. La fiebre hemorrgica ms frecuente en Mxico la produce el virus del dengue en su forma de dengue hemorrgico y la segunda causa de fiebre hemorrgica, recientemente descrita en nuestro pas son los hantavirus. Desde el punto de vista histrico, dos tipos de fiebres hemorrgicas afectaron enormemente a la poblacin mexicana. La primera fue la fiebre amarilla, enfermedad transmitida por la picadura de un mosquito (Aedes) y causada por el virus de fiebre amarilla (flavivirus) que afect principalmente, poblaciones costeras con clima clido hasta la primera mitad del siglo XX. La segunda correspondi a un grupo de fiebres hemorrgicas de origen desconocido que causaron grandes epidemias durante los siglos xvi al xix. La mortalidad de algunas de estas epidemias fue particularmente devastadora. Se estima que la epidemia de 1545 caus la muerte de 80 % de la poblacin indgena. En su tiempo a estas enfermedades se les denomin cocoliztli, matlazahuatil y las fiebres misteriosas del ao 1813.
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El dengue y el dengue hemorrgico son enfermedades causadas por la infeccin del virus del dengue. Estos virus de ARN de cadena linear y polaridad positiva tienen una distribucin mundial. En Mxico, una gran proporcin de la poblacin se encuentra expuesta a la infeccin en las zonas costeras, tanto del Golfo de Mxico como del Ocano Pacfico. El virus tambin se encuentra en la pennsula de Yucatn, el altiplano mexicano y la pennsula de Baja California. Existen cuatro serotipos del virus de dengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4). La infeccin se adquiere por picadura de la hembra del mosquito Aedes aeqypti, principal vector urbano. El virus se replica en los ndulos linfticos locales, dos o tres das despus se disemina a diversos tejidos por va hematgena (viremia). La enfermedad normalmente es autolimitada y las manifestaciones clnicas incluyen fiebre, cefalea, dolor de espalda y de extremidades y dolor retroocular que es tpico. El dengue hemorrgico ocurre en individuos que previamente fueron infectados por el virus (ms frecuentemente por el DEN-2) y que desarrollaron una respuesta inmune contra las protenas virales. Se piensa que el dengue hemorrgico es resultado de un proceso autoinmune, ya que algunas glicoprotenas de la envoltura viral tienen homologa con segmentos de factores de coagulacin. Algunos enfermos progresan a sndrome de choque por dengue, causado por un proceso conocido como sndrome de escurrimiento capilar en el que grandes volmenes de lquido salen del lecho vascular. Las medidas para el control del dengue incluyen el eliminar todos los lugares en donde los mosquitos pueden depositar los huevecillos en poca de lluvias (recipientes con agua almacenada, llantas, etctera). Se recomienda el uso de mosquiteros en puertas y ventanas, as como el evitar deambular durante las ltimas horas de la tarde y las primeras de la noche. El hantavirus fue aislado en 1993 a partir de casos de neumona en una comunidad de indios americanos en la frontera de los estados de Colorado, Utah, Arizona y
Nuevo Mxico. Estos virus del grupo Hantaan, tienen tres cadenas de ARN de polaridad negativa y sus reservorios son los roedores. Se han producido casos de sndrome pulmonar en: Mxico, Panam y Chile. Los hantavirus tienen ciclos anuales ya que son altamente dependientes de los roedores que a su vez dependen de los ciclos de lluvia y sequa. Las medidas preventivas incluyen el evitar los aerosoles de orina y heces fecales de ratones. Algunos arenavirus pueden causar fiebres hemorrgicas en el ser humano como: la fiebre de Lassa, endmica de frica; fiebre hemorrgica argentina causada por el virus Junn; la boliviana por el virus Machupo; la venezolana por el Guanarito y la brasilea por el Sabi. Cada virus tiene una especie particular de roedores que le sirve como reservorio. El virus de bola y Marburg producen enfermedad aguda con una mortalidad de aproximadamente 80%. Se han identificado cuatro subtipos del virus de bola (Zaire, Costa de Marfil, Sudn y Reston). La transmisin es de persona a persona por contacto directo o aerosoles de sangre infectada.
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Kilks S, et al. Evidence that maternal dengue antibodies are important in the development of dengue hemorrhagic fever in infants. Am J Trop Med Hyg. 1988; 38: 411. 2. Gubler DJ. Impact of dengue/dengue hemorrhagic fever on the devoloping world. Adv Virus Res. 1999; 35: 53. 3. Rigau-Perez JG, et al. Dengue and dengue hemorrhagic fever. Lancet. 1998; 352: 971. 4. Duchin JS, et al. Hantavirus pulmonary syndrome: Clinical description of disease caused by a newly recognized hemorrhagic fever virus in the southwestern United States. N Engl H Ned. 1994; 330: 949. 5. Georges A, et al. Recent Ebola outbreaks in Gabon from 1994 to 1997. Epidemiological and health control issues. J Infect Dis. 1999; 179 (Suppl. 1): S65.
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13. VIRUS ONCOGNICOS

I. Tipos de virus oncognicos: 1.1 Virus oncognicos del DNA: papovavirus, adenovirus, herpesvirus, hepadnavirus (hepatitis C), flavivirus y poxvirus. 1.2 Virus oncognicos de RNA: retrovirus. 2. Caractersticas de las clulas transformadas (inmortalidad, prdida de la inhibicin por contacto, alteraciones morfolgicas, etctera). 3. Oncogenes. 4. Papilomavirus: 4.1 Caractersticas generales. 4.2 Epidemiologa. 4.3 Patogenia e inmunidad. 4.4 Manifestaciones clnicas: verrugas cutneas, tumores benignos de cabeza y cuello y verruga anogenital (condiloma acuminado y cncer cervicouterino). 4.5 Diagnstico. 4.6 Tratamiento y prevencin. 5. Virus Epstein-Barr: 5.1 Caractersticas generales. 5.2 Epidemiologa. 5.3 Patogenia e inmunidad.
5.4 Manifestaciones clnicas: mononucleosis infecciosa, linfoma de clulas B (linfoma de Burkitt), carcinoma nasofarngeo. 5.5 Complicaciones: trastornos neurolgicos como meningoencefalitis y sndrome de Guillain-Barr. 5.6 Diagnstico. 5.7 Prevencin. 6. Virus linfotrpico de clulas T humanas, VLTH-1, VLTH2 y VLTH-5: 6.1 Caractersticas generales (protooncogenes). 6.2 Epidemiologa. 6.3 Patogenia e inmunidad. 6.4 Manifestaciones clnicas: leucemias, linfomas y sarcomas. 6.5 Diagnstico. 6.6 Prevencin. 6.7 Tratamiento y prevencin.
El cncer es causa lder de muerte en pases desarrollados. La oncognesis comprende los procesos que resultan en el crecimiento de una poblacin de clulas en las cuales se han acumulado mutaciones. Estas mutaciones afectan varios pasos en las vas reguladoras de la comunicacin, crecimiento y divisin celular y conducen a un crecimiento sin control, a un incremento en la desorganizacin celular y finalmente al cncer. La multiplicacin de las clulas en el cuerpo es un proceso
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finamente regulado. En un animal joven, la multiplicacin celular total excede la muerte celular conforme al animal crece hacia la madurez. En el adulto, los procesos de multiplicacin y de muerte celular estn balanceados. Ocasionalmente, esta regulacin se rompe y un tipo celular particular empieza a crecer y dividirse comportndose como si las clulas fueran inmortales. La adquisicin de esta propiedad en las clulas se reconoce como el primer paso en la oncognesis. Una clula inmortalizada puede adquirir uno o ms cambios genticos adicionales, para dar lugar a una clona de clulas que es capaz de expandirse y formar un tumor. Algunos tumores son benignos, es decir, cesan de crecer en el cuerpo despus de adquirir cierto tamao y generalmente no producen gran dao. Otras clulas tumorales crecen y se dividen indefinidamente para formar tumores malignos que daan y desacoplan la funcin normal de los rganos y tejidos que invaden. Se estima que los virus contribuyen aproximadamente a 20% de todos los cnceres humanos y son la causa principal en los cnceres del hgado y cervicouterino. Los cambios que sufren las clulas normales al ser infectadas por los virus, reciben el nombre de transformacin celular. La caracterstica que define a una clula transformada es la falta de respuesta a las seales o condiciones que normalmente controlan el crecimiento, la replicacin del ADN y la divisin. Las clulas transformadas tpicamente crecen en concentraciones de suero mucho menores que las requeridas para el crecimiento de las clulas normales, debido a que su requerimiento de factores de crecimiento est muy reducido, de hecho algunas clulas transformadas, producen sus propios factores de crecimiento y sus receptores, es decir que pueden estimularse autocrinamente para crecer.
Los virus oncognicos pertenecen a diferentes familias, de acuerdo al cido nucleico de sus genomas y a las caractersticas de sus viriones. Los virus oncognicos de ADN pertenecen a las familias del virus de papova-, adeno-, herpes-, hepdna-, pox- y togaviridae, mientras que, los virus oncognicos de ARN solo a la familia Retroviridae. Cada grupo de virus oncognico produce tumores por un mecanismo diferente. Por ejemplo, los retrovirus transductores, como su nombre lo implica, contienen genes celulares transductores que se convierten en oncogenes (genes cuyos productos causan transformacin o formacin de tumores cuando se expresan en el contexto viral). En el caso de los retrovirus no transductores, la transcripcin de protooncogenes es inapropiadamente activada como una consecuencia de la integracin cercana a un provirus en el genoma de la clula husped. El primer virus oncognico que se descubri fue el papilomavirus que causa verrugas, verrugas cutneas, tumores benignos de cabeza y cuello y, verruga anogenital (condiloma acuminado y cncer cervicouterino). A partir de entonces se describieron virus de diferentes familias asociados con el cncer (tabla 13.1). El virus de hepatitis C se asocia con el desarrollo de cncer hepatocelular en 60-70% de los individuos infectados persistentemente. El descubrimiento ms reciente de virus oncognico (1994) es un miembro de la familia Herpesviridae, herpesvirus humano 8 que se ha asociado a clulas tumorales del sarcoma de Kaposi, un cncer comn en pacientes con SIDA.
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Tabla 13.1 Virus de diferentes familias asociados a cncer Familias Virus de ARN Togaviridae Hepatitis C Retroviridae Cnceres asociados
REFERENCIAS COMPLEMENTARIAS 1. Kieff E. Epstein-Barr. Increasing evidence of a link to carcinoma. N Engl J Med. 1995; 333: 724. 2. Ring CJA. The B cell-immortalizing functions of EpsteinBarr virus. J Gen Virol. 1994; 75: 1.
Carcinoma hepatocelular Cnceres hematopoyticos, sarcomas y carcinomas
3. Tindle RW. Human papilomavirus vaccines for cervical carcer. Curr Opin Immunol. 1996; 8: 643. 4. Zur Hausen H. Papillomavirus infections: A major cause of human cancers. Biochem Biophys Acta. 1996; 1288: F55.
Virus de ADN Hepadnaviridae Hepatitis B Papovaviridae Papillomavirus Polyomavirus Adenoviridae Adenovirus Herpesviridae Epstein-Barr Poxviridae Poxvirus
Carcinoma hepatocelular Papilomas y carcinomas Varios tumores slidos Varios tumores slidos Linfomas, carcinomas y sarcomas Mixomas y fibromas
Tomada de: Flint SJ, et al. Principles of Virology. Molecular Biology, Pathogenesis and Control. Washington DC: ASM Press; 2000.
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14. SNDROME DE INMUNODEFICIENCIA ADQUIRIDA (SIDA)

Rodolfo Acua Soto
1. Antecedentes histricos. 2. Morbilidad y mortalidad en Mxico. 3. Agente etiolgico: VIH tipos 1 y 2. 4. Patogenia: 4.1 Vas de entrada. 4.2 Periodo de incubacin. 4.3 Vas de diseminacin. 5. Complicaciones: infecciones por microorganismos de la flora normal o poco virulentos y el desarrollo de neoplasias poco comunes. 6. Respuesta inmune: 6.1 Inmunidad innata. 6.2 Inmunidad adquirida: inmunidad humoral y celular. 7. Diagnstico de laboratorio: 7.1 Tcnicas directas: cuenta viral. 7.2 Tcnicas indirectas: deteccin de anticuerpos antivirales por ELISA e inmunoelectrotransferencia. 8. Tratamiento.
9. Prevencin y control: 9.1 Factores de riesgo. 9.2 Fuentes de contagio. 9.3 Vacunas. Estrategias en el diseo y resultados obtenidos.
El sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) fue identificado por primera vez en 1981, cuando se report que 26 homosexuales de Los ngeles y Nueva York murieron a consecuencia de neumona por Pneumocystis carinni (microorganismo oportunista) o de una neoplasia poco comn: sarcoma de Kaposi. En 1998, se estim que existan aproximadamente 33 millones de individuos infectados y solo ese ao se infectaron 5.8 millones de personas, es decir, aproximadamente, once nuevos casos por minuto. El agente etiolgico del SIDA es un retrovirus de la subfamilia de los lentivirus. Se han identificado dos tipos de virus de la inmunodeficiencia humana VIH-1 y VIH-2. El VIH-1, que proviene del chimpanc africano, es el ms frecuentemente asociado con la enfermedad en todo el mundo mientras que el VIH-2 se mantiene restringido a algunas partes de frica Occidental. Las partculas virales completas contienen dos copias de ARN monocatenario.
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La caracterstica central de la infeccin por VIH es la inmunodeficiencia que resulta de la infeccin de un subgrupo de linfocitos T, llamados clulas cooperadoras (Th o CD4+). La protena de superficie CD4 es el receptor de una glicoprotena viral (gp120). El SIDA es una infeccin primariamente transmitida por contacto sexual, tanto homosexual como heterosexual, se considera que la frecuencia de transmisin heterosexual es ocho veces ms frecuente de hombre a mujer que de mujer a hombre. La infeccin tambin puede ser transmitida por transfusiones de sangre o por accidentes de laboratorio con agujas contaminadas. Un grupo de alto riesgo son los drogadictos que reutilizan agujas usadas. Finalmente, la madre puede transmitir el VIH al producto durante la gestacin, el parto, o por medio de la leche materna. El VIH no se contrae por contacto casual, fomites, o por picadura de insectos. El primer caso de SIDA en Mxico fue diagnosticado en 1983, pero retrospectivamente, se considera que la transmisin del virus se inici en la dcada de los 70s. Se considera que se han producido entre 116 000 y 174 000 casos con un total de 25 000 defunciones. Las entidades ms afectadas son el Distrito Federal, Baja California, Jalisco y Morelos y se ha observado que las reas urbanas tienen prevalencias ms altas que las rurales. A nivel nacional, se estima que la frecuencia de infeccin es 0.05 % en la poblacin general adulta, aunque la prevalencia en las poblaciones de alto riesgo es mucho ms alta (0.75-28.6 %). Se considera que en Mxico, actualmente hay 150 000 personas infectadas de manera asintomtica.
El diagnstico de SIDA se hace por ELISA que tiene una sensibilidad de 99.9%, los casos positivos deben ser confimados por inmunoelectrotransferencia. La disminucin de la cantidad de linfocitos CD4+, es el mejor indicador del progreso de la infeccin, las complicaciones de origen infeccioso aparecen cuando el nmero de CD4+ llega a 200/ml o menos. En realidad, el SIDA es el estado final de la infeccin por VIH. La historia natural de la enfermedad se puede dividir en tres fases: la infeccin primaria, inmediatamente posterior a la infeccin; la fase latente que corresponde al periodo de tiempo (aos) en que el individuo no presenta ninguna manifestacin clnica, aunque el virus se est replicando en los ganglios linfticos y la enfermedad clnica, en que se observa una notable disminucin de los linfocitos CD4+ (menos de 200/ml), aumento de la viremia y la aparicin de enfermedades infecciosas que llevan a los pacientes a la muerte. La mejor manera de evitar esta infeccin es la prevencin.
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PRCTICAS DE LABORATORIO DE VIROLOGA*
*La seccin de las Prcticas de Virologa fue modificada y revisada por los doctores Rafael Coria Cano y Luis Xochihua Daz, profesores titulares de la asignatura de Microbiologa y Parasitologa.
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PRCTICA 1 (dos sesiones)
TITULACIN DEL BACTERIFAGO T7
I. OBJETIVOS Demostrar que: 1. Los virus requieren de una clula metablicamente activa para multiplicarse. 2. La multiplicacin del virus origina lisis celular. 3. La multiplicacin viral puede utilizarse para cuantificar las partculas infecciosas.
morboso. La cuantificacin de las partculas virales es muy importante en la elaboracin de vacunas antivirales que han constituido un arma profilctica muy eficaz en la prevencin de muchas enfermedades causadas por virus, vacunas que deben estar constituidas por partculas virales en nmero suficiente para provocar una respuesta inmune eficaz y duradera. Para ilustrar uno de los procedimientos que se han empleado para cuantificar las partculas virales, se utilizar en la prctica un modelo virus-clula empleando bacterifago y bacteria susceptible y por tanto evitando el riesgo que pudiera representar el manejar virus patgenos humanos. Se denomina bacterifago a aquel virus que utiliza como husped a las bacterias. De los bacterifagos los ms ampliamente estudiados son los aislados de Escherichia coli y se encuentran generalmente en aguas negras. Los bacterifagos pueden ser de dos tipos: lticos y lisognicos; en este ejercicio se trabajar con un bacterifago ltico; dichos bacterifagos al infectar y replicarse en las bacterias permisivas originan muerte y lisis bacteriana en 100% de las clulas infectadas, liberndose durante este proceso la progenie viral. El tiempo que tarda la bacteria en lisarse (periodo de latencia) as como el nmero de virus producido por clula infectada,
II. INTRODUCCIN Los virus son agentes etiolgicos de enfermedades en una gran variedad de seres vivos, tales como el humano, los animales, los vegetales y los microorganismos; pero es un requisito indispensable para que se establezcan en ellos que el nmero de partculas virales sea el adecuado (dosis infectante), que los virus encuentren en las clulas de tejidos u rganos blanco, receptores especficos. En la Historia Natural de la Enfermedad, el nmero de partculas infectantes es muy importante como requisito primario, aunque tambin hay que tomar en cuenta la interaccin del virus con las condiciones del husped, tanto fisiolgicas como inmunolgicas, que pueden influir en la mayor o menor susceptibilidad a la infeccin viral y, por lo tanto, al desarrollo de un proceso
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depende entre otros factores, del bacterifago infectante, del metabolismo celular, la temperatura de incubacin, composicin del medio, etctera. Algunos bacterifagos lticos de Escherichia coli son: T1, T2, T3, T4, T5, T6 y T7 (se les denomina T por tipo); se les diferenca por su morfologa y con pruebas serolgicas. En estos colifagos el periodo de latencia a 37C y en clulas metablicamente activas, vara de 25 a 40 minutos y por clula infectada se producen (tamao de estallamiento) de 100 a 200 virus. La propiedad de los bacterifagos de lisar las clulas donde se multiplican, se utiliza para cuantificar las partculas infecciosas.
Cada placa proviene de un slo virus de la solucin original, por lo tanto el conteo de las placas nos permite calcular el ttulo de los bacterifagos infecciosos. Por placa se encuentran + 1X104 partculas virales.
IV. MATERIAL 1. Un tubo de suspensin de bacterifago T7 con ttulo 2xl04 bacterifagos/ml (tubo No.1). 2. Un tubo de ensaye con 5.0 ml de un cultivo de toda la noche de E. coli B y con densidad aproximada de 3-5Xl08 bacterias/ml (tubo No. 2). 3. Una caja de Petri con agar nutritivo. 4. Tres pipetas estriles de 0.1 ml.
III. DISEO EXPERIMENTAL V. MTODO 1. Comparar la multiplicacin en la caja de agar de la bacteria con la del bacterifago y la de la bacteria infectada. 2. Infectar con el bacterifago T7 bacterias permisivas al colifago. La tcnica consiste en distribuir en una seccin de una caja de agar la suspensin bacteriana, en una segunda seccin los bacterifagos y en una tercera seccin las bacterias infectadas. Las bacterias se infectan mezclando unas pocas partculas virales (2X103) con una gran cantidad de bacterias permisivas (1.5X109); esta mezcla se esparce en una caja con agar nutritivo. Al incubar dichas cajas las bacterias no infectadas se multiplican, y dan aspecto opaco sobre el agar. Las que estn infectadas producen bacterifagos los cuales a su vez infectan a las bacterias adyacentes lisndolas, produciendo halos de lisis (crculos claros) en el cultivo bacteriano, denominados placas. 1. Marcar en el reverso de la caja con agar tres secciones como se muestra en el esquema. 2. Con la pipeta tomar una muestra del tubo No. 1 y distribuir homogneamente en la zona A de la caja, procurando no tocar las otras zonas marcadas. Despus dejar secar. 3. Con otra pipeta tomar 0.1 ml del tubo No. 2 y distribuir homogneamente en la zona B. 4. Tomar 0.1 ml con pipeta o asa calibrada del tubo N 1, depositar en el tubo No. 2 y homogeneizar la suspensin con agitacin manual. La concentracin de bacterifagos en el tubo N 2 es de 4X102 bacterifagos/ml. Esto significa que se ha hecho una dilucin 1:50 de los fagos del tubo 1. Es decir se diluye la concentracin de fagos del tubo No. 1, 50 veces.
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5. Tomar 0.1 ml del tubo N 2 con una pipeta y con sta sembrar homogneamente en la zona C de la caja de Petri. 6. Incubar las cajas a 37C. 7. Observar y contar el nmero de placas de lisis al da siguiente. 8. Calcular la concentracin de bacterifagos por mililitro de la suspensin original, sobre la base de sus resultados y multiplicar por 500.
VII. DISCUSIN DE LOS RESULTADOS 1. Explicar por qu se multiplica por 500: ______________________________________________ ______________________________________________ _____________________________________________ _______________________________________________
2. Explicar el objetivo de sembrar en las zonas A y B: VI. ESQUEMA ______________________________________________ ______________________________________________ _____________________________________________ _______________________________________________
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PRCTICA 3 (2 sesiones)
CAMBIOS EN LA CLULA POR LA INFECCIN VIRAL: EFECTO CITOPTICO
I. OBJETIVO Demostrar que: 1. La infeccin viral puede alterar la morfologa de la clula. 2. Las alteraciones en la morfologa de la clula permiten identificar tentativamente al virus infectante.
Los sistemas utilizados para propagar, aislar e identificar virus en los laboratorios de diagnstico as como en los de investigacin son: huevos embrionados, ratones neonatos y cultivo de tejidos, stos ltimos son los que se utilizan ms frecuentemente. Existen tres tipos de cultivos de tejidos: cultivos primarios, clulas diploides y lneas celulares. El sistema que se utiliza generalmente es el de lneas celulares, por su facilidad de manejo, as como por disponerse de gran diversidad de clulas de diferente estirpe que posibilitan trabajar con la mayora de los virus aislados que ocasionan infecciones en humanos. Las lneas celulares son cultivos perennes, es decir, que se pueden propagar indefinidamente y provienen de cultivos primarios de rganos humanos, de animales o de clulas transformadas. La procedencia, as como las caractersticas de las lneas celulares comnmente utilizadas se describen en el catlogo de la American Type Culture Collection. El RV y el RSV son virus que ocasionan infecciones en humanos. El RV origina infeccin exantemtica que sera intrascendente si no fuese por su efecto teratognico. El RSV produce infecciones del tracto respiratorio y se le considera como el agente principal de las infecciones respiratorias graves, que requieren hospitalizacin
II. INTRODUCCIN La infeccin viral altera a la clula husped, a los cambios morfolgicos, observables con el microscopio ptico se les denomina efecto citoptico. Las alteraciones ms frecuentes son: lisis, necrosis celular, formacin de: sincicios (clulas fusionadas), de clulas citomeglicas (clulas grandes con citoplasma reducido y ncleo grande, con inclusiones en el citoplasma y en el ncleo), de vacuolas en el citoplasma e inclusiones en el ncleo o en el citoplasma. El efecto citoptico depende del virus infectante y de la clula husped. No todos los virus lo originan. Sin embargo, algunos grupos virales producen efecto citoptico caracterstico que se utiliza para identificarlos tentativamente.
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en nios menores de un ao. Las cepas virales con las que se trabajar son:Therein de RV y Long de RSV. Las clulas RK-l3 son epiteliales y provienen de rin de conejo. Las Vero son fibroblastos y provienen de rin de mono verde.
7. Un frasco con metanol en PBS AL 1:1 en volumen. 8. Un gotero con cristal violeta. 9. Un gotero con Giemsa.
V. MTODO III. DISEO EXPERIMENTAL El ejercicio comprende dos partes: En la primera se observar el efecto que ocasiona el RV al multiplicarse en clulas RK13 (aglomeracin de clulas) y el RSV en clulas Vero (formacin de sincicios, fusin de varias clulas). En la segunda se fijar la monocapa de clulas Vero, se teir y se observar al microscopio. La tincin se har con dos colorantes: con cristal violeta para distinguir el sincicio del resto de las clulas y con Giemsa para observar los ncleos celulares aglomerados en las clulas fusionadas que forman el sincicio. 1. Caja No. 1. Observar con el microscopio invertido las clulas infectadas y las clulas control. 2. Caja No. 2 (Costar No. 3590). En 16 pozos habr clulas, es decir, las hileras 1 y 2 con las letras de la A a la H. Los pozos de la hilera 1 tendrn clulas Vero (control), los pozos de la hilera 2 tendrn clulas infectadas con el RSV. La distribucin de los pozos se muestra en el esquema. Las cajas se prepararon de la siguiente manera: en cada pozo se pusieron 100 000 clulas ya sea infectadas o sin infectar. El pozo A de la lnea 2, infectadas con 5xl04 virus, es decir, con multiplicidad de infeccin (moi; relacin virus/clula) de 0.5. En los otros pozos de la B a la H se sigui el mismo diseo slo que se utilizaron moi descendentes en un logaritmo base 10. Es decir en el pozo B la infeccin se hizo con 5x103 virus, los del pozo C con 5xl02, los del pozo D con 5xl01 y los del E con 0.5xl01 y as sucesivamente. 3. Despus de observar el efecto citoptico del RSV en las clulas, se lavan aadiendo a cada pozo 0.5 ml de PBS, se retira el lquido, la operacin anterior se hace por tres veces. 4. Las clulas se fijan a la caja, para esto se le agrega a cada pozo 0.5 ml de metanol con H2O2 se les deja a temperatura ambiente 20 min. Despus se lavan con 0.5 ml de PBS tres veces en la forma descrita. Los pozos con el nmero 1 se tien con cristal violeta y con Giemsa los del nmero 2.
IV. MATERIAL 1. Una caja multipozos con clulas RK-13 infectadas con RV y clulas sin infectar (caja No. 1). 2. Una caja multipozos con clulas Vero infectadas con RSV y clulas sin infectar (clulas control) (caja No. 2). 3. Un frasco de amortiguador de fosfato salino (PBS). 4. Dos pipetas de 5 ml. 5. Un frasco con metanol y H2O2 a 3% en PBS. 6. Un frasco con metanol absoluto.
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5. Tincin con cristal violeta, se retira el PBS y se aade 5 gotas del colorante a cada pozo, se deja a temperatura ambiente 10 min y se retira, se lava con PBS en la forma descrita. Se observan al microscopio. 6. Tincin con Giemsa, se retira el PBS y se aade 5 gotas de PBS/metanol, se retira el PBS/metanol y se agrega metanol, se deja 10 min a temperatura ambiente. 7. Se retira el metanol, se enjuaga nuevamente con metanol absoluto y se le aade 5 gotas del colorante de Giemsa. 8. Despus de l-3 min se aade 0.2 ml de agua y se deja por 2-3 min. 9. Se lava con agua de la llave y se observa con el microscopio invertido.
VI. DISCUSIN DE LOS RESULTADOS 1. Describir los cambios observados en las lneas celulares producidos por la infeccin viral. ______________________________________________ _______________________________________________ ________________________________________________ _______________________________________________ ______________________________________________ ______________________________________________ _______________________________________________ ________________________________________________ _______________________________________________
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GLOSARIO
Adyuvante Agente delta
Sustancia que se aade a un antgeno para potenciar la respuesta inmune. Virus incompleto del RNA que no puede causar enfermedad cuando infecta, solo cuando el virus de la hepatitis B est presente en un individuo el agente delta produce la hepatitis D.
Anticuerpo monoclonal Anticuerpo de un slo tipo producido por una poblacin de clulas clonadas. Los anticuerpos monoclonales son producidos por hibridomas, es decir, una clula que resulta de la fusin de una clula tumoral y una clula productora de anticuerpos. Apoptosis Bacterifago Suicidio celular o muerte celular programada. Un virus que infecta bacterias. En forma abreviada se les conoce como fagos. Capa proteica que envuelve al material gentico de los virus. Unidades proteicas que forman la cpside. El primer caso de una epidemia en una poblacin. Es una analoga del isomerismo qumico. Se refiere a la localizacin o interaccin de dos genes en los cromosomas. Si estn en fragmentos diferentes se denomina trans. Grupo de clulas u organismos genticamente idnticos que derivan de una clula madre. Inclusiones citoplasmticas en neuronas, patognomnicos de la rabia. Las inclusiones son eosinoflicas, esfricas u ovaladas, miden entre 2 a 10 A y estn constituidas por masas de virus de la rabia completos en desarrollo. Organismo con dos copias de cada gen.
Cpside Capsmero Caso ndice Cis/trans
Clona
Corpsculo de Negri
Diploide
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DNA polimerasa
Enzima que sintetiza el ADN de dos cadenas a partir del ADN de una cadena. Para iniciar la sntesis requiere de un pequeo segmento del ARN (un arrancador) unido a la cadena del ADN que sirve de base. (Enzyme-linked immunosorbent assay). Tcnica inmunolgica muy sensible en la que se puede detectar tanto antgeno como anticuerpos. Por ejemplo, en el ELISA para la deteccin del VIH un extracto de protenas virales se adhiere a una placa de plstico. Cuando el suero de un individuo se coloca en la placa existen dos posibilidades. Si el individuo tiene anticuerpos anti-VIH las inmunoglobulinas se pegarn al antgeno adherido al plstico. Despus de lavar para remover todas las protenas no pegadas, las inmunoglobulinas se revelan agregando un segundo anticuerpo que tiene unido una enzima (peroxidasa o fostasa alcalina). Si el individuo no tiene anticuerpos contra VIH no se pegarn las inmunoglobulinas a las protenas virales y la prueba ser negativa. Cuando una enfermedad est presente en todo tiempo en una poblacin humana. Membrana lipdica que constituye la capa ms externa de algunos virus. Su origen es celular pero est organizada por el virus, en ella, se encuentran integradas diferentes protenas y glicoprotenas virales. La presencia constante, pero con relativa baja frecuencia de una enfermedad determinada en animales; el equivalente en humanos en endemia. Enfermedad generalmente de alta morbilidad que se disemina rpidamente en poblaciones animales; el equivalente en humanos es epidemia. Gene que codifica para una protena que regula a otros genes. Organismo con solo una copia de cada gen. Cuando una enfermedad ocurre en una comunidad con una alta frecuencia todo el tiempo. Cuando un organismo responde con una reaccin inmune exagerada a un antgeno, en ocasiones daa al propio individuo. El organismo que aloja al parsito. Nmeros de casos nuevos de una enfermedad en una poblacin definida en un cierto periodo de tiempo. Inmunidad mediada por clulas. Inmunidad que resulta de la produccin de anticuerpos.
ELISA
Endemia
Envoltura
Enzotica
Epizootia
Gene regulador Haploide Hiperendmico
Hipersensibilidad
Husped Incidencia
Inmunidad celular Inmunidad humoral
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Lentivirus Leucemia
Una subfamilia de los retrovirus. Enfermedad proliferativa maligna de las clulas formadoras de leucocitos. Algunos tipos de leucemias son causadas por virus (HTLV-1, HTLV-2). La cpside (envoltura proteica) con el cido nucleico en su interior. Segmento de ADN al cual se une una protena represora para controlar la expresin de genes adyacentes. En procariontes se denomina a un grupo de genes en asociados estructural o funcionalmente que se regula en conjunto. Una epidemia que se distribuye en todo el mundo. La capacidad de un microorganismo para producir una enfermedad. (Polymerase chain reaction). Mtodo extremadamente sensible que amplifica una secuencia del ADN. Tiene aplicaciones en la investigacin y en el diagnstico. Si una secuencia del ADN, por ejemplo de un virus, est presente en una muestra de un tejido, la tcnica de PCR identificar la presencia de dicha secuencia amplificndola selectivamente. Utiliza una polimerasa termorresistente y pares de pequeos fragmentos de ADN (arrancadores) que se unen a la secuencia blanco. La perforina es producida por los linfocitos T y NK (Natural killer, clulas asesinas naturales), participa en el mecanismo de citotoxicidad mediada por clulas. Los precursores de la perforina se almacenan en grnulos y se liberan cuando la clula citotxica se pone en contacto con la clula blanco, la perforina mata a la clula blanco cuando forma perforaciones en su membrana. Periodo de tiempo que transcurre entre el adquirir una infeccin y la aparicin de los primeros sntomas.
Nucleocpside Operador
Opern
Pandemia Patogenicidad PCR
Perforina
Periodo de incubacin
Periodo de infectividad Se refiere al tiempo en el curso de una enfermedad transmisible en que el agente infeccioso es liberado para infectar a otro husped. Plsmido Segmento circular del ADN de doble cadena que se replica autnomamente en bacterias. En ocasiones, se puede integrar al cromosoma bacteriano. Los plsmidos transmiten informacin gentica entre las bacterias. En algunos casos la residencia a antibiticos es mediada por plsmidos. ARN de una cadena que puede ser traducido directamente a protenas en los ribosomas. ARN de una cadena que tiene que ser transcrito a otra cadena de ARN con polaridad positiva para poder ser traducido.
Polaridad positiva
Polaridad negativa
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Poliadelinacin
Se refiere a una secuencia de adeninas que se agregan a la cola (extremo 3) del ARN mensajero como parte del proceso del ARN para su traduccin. Individuo infectado que tiene la capacidad de infectar a otros individuos.
Portador
Portador sano Individuo sin manifestaciones de enfermedad que alberga un agente in(portador asintomtico) feccioso, el cual puede ser transmitido a otra persona. Prevalencia La frecuencia de una enfermedad en una poblacin en un momento determinado. Segmento del ADN que se localiza al principio de un gen al cual se une la ARN polimerasa para iniciar la transcripcin. Protena que rompe los enlaces peptdicos de las protenas. Algunos virus codifican la produccin de proteasas que cortan en sitios especficos a una protena viral grande, los fragmentos corresponden a diversas unidades funcionales y estructurales del virus. Es el genoma de un virus integrados en el cromosoma de la clula husped. Se puede transmitir a las clulas hijas. ARN de una cadena con una secuencia de bases que es complementaria a otra molcula del ARN. Cuando ambas cadenas se unen, la cadena funcional, por ejemplo un mARN, pierde su actividad. Se utiliza en investigacin para bloquear la produccin de una protena en particular, en el futuro probablemente se utilice en teraputica. Se refiere a la caracterizacin de un microorganismo de acuerdo a los tipos y combinaciones de antgenos presentes en dicho organismo. Un organismo con serotipo 1 tiene un patrn de reactividad diferente a un organismo de la misma especie con serotipo 2, etctera. Fragmento del ADN o ARN marcado con una sustancia radioactiva fluorescente o enzimtica. Cuando este fragmento marcado se une especficamente a un cido nucleico con una secuencia complementaria permite determinar el lugar en donde lo encuentra. Uno de los numerosos usos de las sondas es en la identificacin de cidos nucleicos de virus en tejidos. Este proceso es el rescate de un virus defectuoso por un virus activo. Duplicacin o multiplicacin de los virus. Cualquier persona, animal, artrpodo, planta, suelo o sustancia en el que un agente infeccioso vive y se multiplica normalmente de tal forma que puede ser transmitido a un vector o a un husped susceptible.
Promotor
Proteasa
Provirus
RNA antisentido
Serotipo
Sonda
Reactivacin gentica Replicacin Reservorio
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Retrovirus
Familia de virus que contienen ARN, se llama as porque contienen la enzima transcriptasa reversa. En procariontes, el ARN mensajero que codifica para ms de un polipptido.
ARN policistrnico
ARN mensajero (mRNA) Cadena del ARN de una hebra que se sintetiza en el ncleo a partir de una cadena del ADN, posteriormente es transferido al citoplasma en donde dirige la sntesis de protenas en los ribosomas. ARN polimerasa Enzima que sintetiza el ARN. En la clula existen tres tipos del RNA polimerasas dependientes del ADN. Tipo I que transcribe el ARN ribosomal. Tipo II que transcribe la mayora de los ARN mensajeros y la de tipo III que transcribe preferentemente el ARN de transferencia. Linfocito del timo. Proceso que se lleva a cabo en el ribosoma en el cual la secuencia de un ARN mensajero resulta en la produccin de un polipptido. Cuando el genoma de un virus se empaca en la cpside de otro virus, normalmente de la misma familia. El mecanismo por el cual la informacin contenida en el ADN es transferida a un ARN mensajero. Complejo enzimtico que se encuentra en un virus que contienen ARN y que sintetiza al ADN a partir del ARN. Transferencia de informacin gentica entre bacterias por medio de bacterifagos. Segmento mvil del ADN con capacidad para cambiar de lugar en el genoma. Contiene las secuencias necesarias para desplazarse y frecuentemente contiene otros genes. Unidades proteicas normalmente construidas por varios polipptidos que conforman las unidades estructurales de la cpside. Virus que se utiliz como vacuna para la erradicacin de la viruela. En la actualidad se usa como vector para un nmero de posibles vacunas recombinantes. Originalmente es el agente de la viruela de las vacas. En transmisin de enfermedades infecciosas: insecto u otro organismo que lleva un agente infeccioso de un individuo a otro. En biologa molecular: plsmido, bacterifago u otro fragmento del DNA en el que se insertan fragmentos del DNA para ser expresados, replicados o transferidos. Son de gran utilidad en la biologa molecular.
Timocito Traduccin
Transcapsidacin
Transcripcin
Trancriptasa reversa
Transduccin
Transposn
Unidades estructurales o capsmeros Vaccinia
Vector
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Viremia Virin Viroide
Presencia de virus en la sangre. Partcula viral completa fuera de una clula. Un agente infeccioso que causa enfermedades en plantas. Est constituido por un ARN circular de cadena simple de aproximadamente 360 nuclotidos. No tienen protenas asociadas. Por medio de apareamiento de bases se conforman en una forma de rodillo con asas en los polos. El ADN de los viroides no codifica para protenas. Sin embargo, tienen la capacidad de infectar y replicarse en clulas vegetales. Los viroides producen graves enfermedades a las plantas. Capacidad de un microorganismo de producir enfermedad o muerte. Puede estar indicado por la tasa de mortalidad, capacidad de invadir tejidos o producir enfermedad. Una partcula viral deficiente en alguna funcin para su replicacin.
Virulencia
Virus defectuosos
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plares. Se emple papel Bond de 36 kg para el texto y cartulina Bristol de 110 kg para los forros; la primera de forros se dise e imprimi en el Departamento de Diseo Grfico. Encuadernacin rstica con espiral de metal. Cuidado de la edicin: Marina del Roco Heredia Abarca; apoyo tcnico: Rosa Ribern Negrete y Angelina Lomel Ramrez.
ste Manual se termin de imprimir en junio de 2005 en los talleres grficos del Departamento de Impresos de la Facultad de Medicina, UNAM. El tiraje fue de 900 ejem-

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I. VIROLOGA - SEGUNDO AO, 2005-2006

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CLASIFICACIN DE LOS VIRUS COMIT INTERNACIONAL SOBRE TAXONOMA DE VIRUS

Virus DNA (Desoxivirus)

Virus RNA (Ribovirus)

Icosadrica Icosadrica Icosadrica Icosadrica

Sin Sin Con Con

20-30 35-39 90-100 90-120

Astroviridae (+) Caliciviridae (+) Bunyaviridae (-) Retroviridae (-)

Helicoidal Bala Helicoidal Helicoidal

Con Con Con Con

80-120 75-150 50-300 80-130 80-800

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4. DEFENSAS DEL HUSPED CONTRA LA INFECCIN VIRAL

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5. INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO

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Estomatitis: virus: herpes simple

Crup. Virus: parainfluenza y sincitial respiratorio

Neumona. Virus: adeno, parainfluenza, coxsackie, Influenza y sincitial respiratorio, coronavirus

Fig. 5.1. Enfermedades del tracto respiratorio ocasionadas por virus.

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Virus sincitial respiratorio

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7. INFECCIONES VIRALES DE LA INFANCIA

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8. INFECCIONES POR VIRUS DE HERPES

ESTRUCTURA DE LOS VIRUS DE LA FAMILIA DE HERPES

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9. INFECCIONES VIRALES DEL FETO Y EL NEONATO

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11. INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO

6. Prevencin y control: 6.1 Factores de riesgo. 6.2 Vacunas.

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