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6542413 Manual de Baciloscopia

6542413 Manual de Baciloscopia

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Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis

Microscopía - Normas Técnicas

ARGENTINA 2000

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AUTORIDADES

PRESIDENTE DE LA NACION Dr. Fernando DE LA RÚA MINISTRO DE SALUD Dr. Héctor José LOMBARDO SECRETARIO DE ATENCIÓN SANITARIA Dr. Arnoldo Víctor CASTILLO SUBSECRETARIO DE PROGRAMAS DE PREVENCIÓN Y PROMOCIÓN Dr. Javier Oscar VILOSIO DIRECCIÓN NACIONAL DE MEDICINA SANITARIA A/C Dr. Francisco MARTINI DIRECCIÓN DE EPIDEMIOLOGÍA A/C Dr. Anibal REINALDO SUBSECRETARIO DE INVESTIGACIÓN Y TECNOLOGÍA Dr. Ernesto PODESTÁ ADMINISTRACIÓN NACIONAL DE LABORATORIOS E INSTITUTOS DE SALUD “DR. CARLOS G. MALBRAN” A/C Dr. Andrés RUÍZ INSTITUTO NACIONAL DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Dra. María Inès DEMITRI INSTITUTO NACIONAL DE ENFERMEDADES RESPIRATORIAS “DR. EMILIO CONI” A/C Dr. Alberto MARCHESE

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MICROSCOPÍA: NORMAS TÉCNICAS Documento elaborado sobre la base de un borrador preparado por: OMAR LATINI Comité de redacción: LUCÍA BARRERA OMAR LATINI MARÍA DELFINA SEQUEIRA ELSA ZERBINI Santa Fe. Argentina. 3 . 2000.

Preparación ___________________________________________________ 2.5. CONSERVACION Y ELIMINACION DE LAS LÁMINAS _______________ NORMAS MINIMAS DE BIOSEGURIDAD PARA LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPÍAS ___________________________________________________ 3.3. PRECAUCIONES PARA LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPÍAS SISTEMA DE REGISTRO E INFORMACIÓN_____________________________ BIBLIOGRAFÍA _____________________________________________________ 22 22 22 23 23 25 27 4 . EL ENVASE_____________________________________________________ 1.2.4.2.5. CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS DE ESPUTO ___ 1.2.1.3.6.4.7.1. CALIDAD DE LA MUESTRA _____________________________________ 1.1. Lavado gástrico ________________________________________________ 1.3.2. Inducción de esputo_____________________________________________ 1.4. REACTIVOS ____________________________________________________ 2. PRECAUCIONES GENERALES DE TRABAJO _______________________ 3. Lavado bronquial_______________________________________________ 1. LUGAR DE TRABAJO ___________________________________________ 2.2. RECEPCION DE LA MUESTRA __________________________________ LA BACILOSCOPIA________________________________________________ 5 6 6 6 7 7 8 8 9 9 10 11 12 13 13 13 13 14 14 16 18 21 2. Hisopado laríngeo ______________________________________________ 1. PRECAUCIONES EN LA TOMA Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS ___ 3. OBTENCION ESPONTANEA DEL ESPUTO __________________________ 1. PREPARACION DEL EXTENDIDO ________________________________ 2.3.3.3.3.6.1.INDICE INTRODUCCIÓN ____________________________________________________ LA MUESTRA ______________________________________________________ 1. NUMERO DE MUESTRAS Y MOMENTO DE LA RECOLECCION DE ESPUTO 1.4.3. METODOS ESPECIALES PARA OBTENER MUESTRAS DE ESPUTO _ 1. COLORACIÓN DE ZIEHL-NEELSEN _______________________________ 2. PERSONAL _____________________________________________________ 3.2.1. Precauciones con los colorantes ___________________________________ 2.2. OBSERVACION MICROSCOPICA__________________________________ 2.

En Argentina se notifican aproximadamente 13. convocado por el Centro Panamericano de Zoonosis (CEPANZO). están infectadas con él. que hacen que se crea conveniente actualizar las normas. aún cuando se cuenta con técnicas de diagnóstico sencillas y tratamientos eficaces. Esa adaptación fue utilizada durante más de una década en todos los laboratorios del país. seguro y accesible.(Notas Técnicas CEPANZO N 26. que deben asegurar que cualquier habitante del país pueda acceder al diagnóstico de la enfermedad. a los que se agregan laboratorios privados y de obras sociales. aproximadamente 8 millones de ellos enferman anualmente. de los cuales cerca de un millón mueren por la enfermedad. Sin embargo algunos cambios se han producido. provinciales y municipales. es económica y puede ser fácilmente estandarizada para garantizar la calidad en todo el territorio nacional. como paso previo a su curación. La baciloscopía es la técnica que mejor se adapta a las necesidades del Programa de Control ya que detecta los casos más infectantes. reunido en México en 1983. en sus cuatro capítulos. 27. El Programa Nacional de Control de la Tuberculosis y los Programas Provinciales tienen como objetivo principal diagnosticar tempranamente los casos infectantes y tratarlos con esquemas eficaces y modalidades que aseguren una curación cercana al 100%. sino también que las técnicas que utilicen sus integrantes sean las más adecuadas a las necesidades de la población y que se realicen con la mejor calidad. aunque si se toman en cuenta los mayores de 15 años en quienes se aplica sistemáticamente la baciloscopía la oferta de servicio es mucho mayor. de los cuales 6. es sencilla. puede realizarse en cualquier laboratorio que cuente con un microscopio. La estandarización de la baciloscopía se basa en normas que garantizan que las técnicas propuestas han sido el producto de amplios ensayos mundiales realizados por organizaciones internacionales como la OPS/OMS y la Unión Internacional Contra la Tuberculosis y Enfermedades Respiratorias (UICTER).INTRODUCCIÓN Mycobacterium tuberculosis. estas nuevas normas fueron adoptadas por la Comisión Argentina de Bacteriología de la Tuberculosis y han sido utilizadas. la baciloscopía aun sigue siendo la técnica de elección para el objetivo principal de cortar la cadena de transmisión mediante el diagnóstico de los casos bacilíferos. para ello desde hace varias décadas se ha ido conformando la Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis de la que participan más de 600 laboratorios de dependencia oficial: nacionales. dos mil millones de personas. Si bien después de quince años los avances en la tecnología han introducido variantes en la bacteriología. su tratamiento efectivo y su curación y continúa siendo el método más rápido de diagnóstico. bacteriólogo chileno. se transmite de persona a persona por medio de la tos de los enfermos con lesiones pulmonares abiertas que expectoran bacilos. actualizó las normas a las nuevas necesidades de los países de América Latina.000 son enfermos con formas pulmonares que eliminan bacilos con la expectoración y mantienen la transmisión del bacilo mientras no son diagnosticados y tratados adecuadamente. hasta que un Comité Asesor de la OPS/OMS. El primer paso para cumplir estos objetivos es contar con laboratorios que le aseguren a los enfermos un diagnóstico rápido. Se estima que alrededor de un tercio de la población mundial.000 casos anuales. especialmente en lo que respecta a la toma y conservación de algunas muestras y a la aplicación de normas básicas de bioseguridad que garanticen el trabajo confiado y seguro. a solicitud de la Organización Panamericana de la Salud en 1973. Esta Red no sólo tiene por objetivo garantizar el acceso fácil al diagnóstico. 28 y ° 29/1988). especialmente con la asociación de TBC-SIDA. hasta el presente. bacilo productor de la tuberculosis.000 habitantes. Luis Herrera Malmsten. El primer Manual de Laboratorio utilizado en nuestro país fue una adaptación del Manual de Bacteriología de la Tuberculosis escrito por el Dr. 5 . Se estima que hay en promedio un laboratorio con microscopio cada 40.

gargajo.LA MUESTRA Para que el laboratorio pueda obtener resultados confiables no sólo es necesario que ejecute las técnicas en forma correcta. aunque no deben desecharse pues siempre existe la posibilidad de que los bacilos hayan quedado en la boca. líquido ascítico. obtenida en cantidad suficiente. etc. 1. El Programa de Control de la Tuberculosis se centra prioritariamente en la detección temprana de estos enfermos. Cerca del 85% de las tuberculosis tienen localización pulmonar y estos enfermos. sino que cuente con una buena muestra. Este capítulo se dedic ará a la toma de muestras de origen pulmonar.1. - 6 . la muestra de catarro mucopurulento proveniente de pulmón es la que más garantiza que si hay bacilos se puedan observar o aislar. CALIDAD DE LA MUESTRA Para el éxito de cualquier análisis de laboratorio se debe contar con una buena muestra.). La palabra que define la buena muestra es diferente en cada región y en general el SR la identifica perfectamente (gallo.2. entendiéndose por tal la que proviene del sitio de la lesión que se investiga. Elija un lugar adecuado para que el SR produzca la expectoración: por ejemplo una pequeña habitación bien ventilada y con mucho sol si se dispone de ella o algún lugar abierto que permita intimidad. Las secreciones nasales. No utilizar lugares cerrados o muy concurridos tales como consultorios médicos o baños. con rótulos que no se despeguen o con lápiz indeleble. pus de cavidades abiertas. Mycobacterium tuberculosis se disemina por todo el organismo por lo que la enfermedad puede manifestarse en cualquier órgano. colocada en un envase adecuado. en este caso. bien identificada y conservada y transportada correctamente. razón por la cual la muestra de mayor rendimiento y la que se procesa con mayor frecuencia en el laboratorio es el esputo. de allí que las muestras que puedan procesarse para diagnóstico o control son muy variadas: esputo. 1. nariz o faringe. La localización pulmonar es la más frecuente debido a que el bacilo necesita una buena presión de oxígeno para desarrollar y lo consigue principalmente en ese órgano que. sangre. Para ello. dejando la obtención de otras muestras para cuando se trate el cultivo. por otra parte. biopsias y otros. Estos datos deben ser escritos en la pared del frasco y no en la tapa para evitar errores. (Ver Bioseguridad). son a su vez los que mantienen la infección pues diseminan los bacilos con la tos. pollo. Entregue al SR el envase de recolección rotulado con su nombre o número de identificación y el servicio que lo solicita. orina. tal como un espacio no concurrido del patio del Servicio de Salud. OBTENCION ESPONTANEA DEL ESPUTO El hecho más importante es el de comunicar al Sintomático Respiratorio (SR) con mucha claridad qué debe obtener y cómo y dónde hacerlo . del fondo del pecho. líquido cefalorraquídeo. faríngeas o la saliva no son buenas muestras. la persona que da las instrucciones debe usar el lenguaje que el paciente entienda. además de padecer casi siempre enfermedad severa. líquido pleural. estornudos o al hablar. es el primer lugar en el que se instala al infectar al hombre.

Inducción de esputo . enfermos siquiátricos o ancianos.3. En caso de que esto último sucediera. Si es saliva o secreción nasal no la descarte porque aún así puede contener bacilos.- Instruya al SR indicándole que debe inspirar profundamente llenando sus pulmones de aire tanto como sea posible. 1. tratando de arrastrar las secreciones del pulmón.Se debe nebulizar con soluciones normotónicas (solución fisiológica) o ligeramente hipertónicas. METODOS ESPECIALES PARA OBTENER MUESTRAS DE ESPUTO Siempre se debe intentar conseguir expectoración espontánea. Este procedimiento debe repetirlo otras dos veces.1. Esta última no es tan buena como el esputo por lo que se aplica sólo a niños. a temperatura apenas superior a la corporal. 1. 7 . Debe recoger en el envase el esputo producido tratando de que entre en su totalidad sin mancharse las manos o las paredes externas del frasco. retenerlo un momento y luego expulsarlo violentamente desde el abdomen. insista en las instrucciones e indique que recoja otra muestra. observe por fuera del frasco si la misma es de buena calidad: mucopurulenta o mucosa. en los casos poco frecuentes en que no pueda lograrse pueden utilizarse otras formas tales como la inducción de esputo o la recuperación de secreciones por otros medios. Registre esta característica en el Registro de Laboratorio. colocando todas las secreciones en el mismo frasco. a fin de fluidificar las secreciones y ayudar a su eliminación. aconsejar que limpie el frasco con un papel y las manos con agua y jabón. - - Cuando reciba la muestra.3.

3.Procesamiento: Para realizar la baciloscopía es necesario centrifugar previamente la muestra durante 20 minutos a 2. de tal forma de facilitar el descenso de la expectoración. . por lo menos. (Ver Bioseguridad). baciloscopías de al menos dos muestras espontáneas de esputo para intentar detectar la enfermedad sin procedimientos invasivos y evitar la contaminación innecesaria del broncofibroscopio con bacilos. con el paciente en ayunas dado que la ingesta de alimentos hace que la expectoración ingerida pase al intestino.Conservación: coloque el material en el frasco adecuado y envíelo inmediatamente al laboratorio.Número de muestras: al menos tres. Siempre que sea factible debe ser cultivada. . por otra parte.Se recoge la primera expectoración producida después de la nebulización y se entrega un segundo frasco para que la persona recoja las secreciones producidas en las 24 horas siguientes. razón por la que debe entregarse un frasco al enfermo para que las recoja y entregue en el laboratorio. Normalmente es posible evitar demoras porque la toma de muestra se realiza en forma programada. .Momento de la recolección: por la mañana al despertar. . se debe cultivar este tipo de muestras . Las maniobras utilizadas suelen producir expectoración en las 24 horas posteriores. Lavado bronquial La obtención de esta muestra está reservada a médicos especialistas. debe neutralizar el material con una solución de bicarbonato de sodio al 10% o fosfato trisódico anhidro al 10% y conservarlo en heladera por no más de 24 horas hasta el momento del envío. Antes de tomar la muestra deben realizarse.500g.c. . de agua destilada o solución fisiológica estéril y recoja inmediatamente.Se hace kinesioterapia o. . ventiladas y soleadas que impidan la transmisión de bacilos por los aerosoles formados. Si es un lactante es conveniente que no esté presente la madre en el momento de la toma de muestra porque su presencia puede incentivar los movimientos peristálticos. Una vez que la sonda llega al estómago.2. ya que debe ser procesado en las 6 horas siguientes a la obtención para ser cultivado. es frecuente que contenga micobacterias ambientales que pueden estar alojadas en el estómago. Por razones de bioseguridad no es aconsejable utilizar este método a menos que se cuente con sistemas de esterilización adecuados o máscaras descartables y salas de nebulizaciones aisladas. . de ser posible.Técnica: sondeo gástrico realizado por médico o enfermera con experiencia. La baciloscopía de lavado gástrico tiene valor relativo ya que habitualmente contiene pocos bacilos y. de longitud adecuada y de diámetro adecuado a la edad del niño.. siempre que tenga el volumen adecuado. 1.3.Envase: el aconsejado para esputo. aspire con jeringa sin que la succión provoque daño. 8 .3. En caso de no obtenerse material inocule 10 a 15 c. 1. Si por alguna causa inevitable no es posible. Lavado gástrico Se utiliza para detectar bacilos en el esputo ingerido y alojado en el estómago. drenaje postural acostando al paciente con la almohada debajo del tórax y la cabeza por fuera de la camilla y más baja. Siempre que sea posible. con sonda nasal.

1. al tomarla asegura que al menos se pueda analizar una muestra del SR. Introduzca el hisopo levemente humedecido con agua destilada o solución fisiológica estéril hasta la laringe. La segunda muestra la debe conseguir el p aciente en su casa o en la internación por la mañana al despertar (muestra matinal). . 9 .Número de muestras: tres hisopados en días consecutivos. vivos o muertos. . . deben hacerse los mayores esfuerzos para que la persona regrese con la segunda muestra. Se deben aplicar rigurosos procedimientos de esterilización y lavado del broncoscopio para evitar la transmisión de tuberculosis con dispositivos contaminados y la generación de falsos resultados positivos por la presencia de bacilos remanentes. de ser posible. ésta puede ser recogida en el momento en que el SR entrega la segunda o bien se debe solicitar una nueva muestra matinal. se debe pedir una tercera muestra y también. La primera muestra debe ser tomada siempre en el momento de la consulta (muestra inmediata) cuando el médico u otro personal del equipo de salud identifican al SR.4. Si bien la primera suele tener menor rendimiento que la segunda. 1. En las condiciones habituales del Programa de Control se considera suficiente obtener dos muestras por SR . se aconseja utilizar esta técnica cuando no es posible obtener otro tipo de muestra. NUMERO DE MUESTRAS Y MOMENTO DE LA RECOLECCION DE ESPUTO Como la eliminación de los bacilos por el esputo no es regular y permanente. abra la boca y saque la lengua y tómesela con dos dedos de la mano izquierda cubierta con guantes o bien con un trozo de gasa. es conveniente analizar más de una muestra de cada SR para el diagnóstico de la tuberculosis. Si se decide tomar una tercera muestra. en caso de que ambas fueran negativas y el médico tenga otros elementos para sospechar que puede tratarse de tuberculosis.Envase: tubo de ensayo con tapón de algodón conteniendo un hisopo de algodón montado en alambre de acero o varilla de madera flexibles de aproximadamente 30cm de longitud.Técnica: una vez sentado el paciente solicítele que levante la cabeza. . un cultivo. Es conveniente procesar esta muestra por cultivo siempre que sea posible para poder detectar el bajo número de bacilos y debido a que las fibras de algodón pueden producir resultados falsos positivos en la baciloscopia. barbijo o máscara rígida y en lo posible anteojos. las molestias que ocasiona al paciente y los riesgos potenciales para la persona que toma la muestra.3. Hisopado laríngeo A causa del escaso número de bacilos que suele contener esta muestra. El operador debe utilizar guardapolvo largo con mangas.4.Momento de la recolección: por la mañana. pida al paciente que tosa e imprima al hisopo un movimiento circular suave tratando de recoger las secreciones de esa zona.Las salas de fibroscopía y el personal que la realiza deben contar con todos los requisitos de bioseguridad. preferentemente en ayunas ya que suele provocar náuseas en el momento de la recolección. Debe ser enviado lo antes posible al laboratorio para su procesamiento. De todas formas. guantes. Retire el hisopo tratando de no tocar las partes blandas de la boca e introdúzcalo en el tubo de ensayo. es decir a cualquier consultante que ha estado tosiendo por más de 15 días.

prolongar el período durante el cual el paciente permanece infeccioso o determinar que pierda un enfermo. a las descriptas. . poniendo énfasis en las muestras del segundo y cuarto mes y en la del final del tratamiento. para evitar posibles errores y minimizar la manipulación de material potencialmente infeccioso. para evitar derrames y facilitar la selección de la partícula útil. Los envases se deben solicitar a lo s Responsables Provinciales de la Red de Laboratorio de Tuberculosis o al Responsable Provincial del Programa.5. debe considerarse que la demora en la entrega de un resultado positivo puede demorar el inicio del tratamiento. Lo ideal es entregar el informe dentro de 24 horas de recibida la muestra.c.Boca ancha: de no menos de 50 mm de diámetro. con características similares. El Programa Nacional de Control de la Tuberculosis facilita generalmente frascos de recolección en cantidad suficiente. PARA FACILITAR LA LOCALIZACION DE CASOS DE TUBERCULOSIS LAS MUESTRAS PRODUCIDAS POR LOS SR DEBEN PODER SER TOMADAS O ENTREGADAS A CUALQUIER HORA DEL DIA EN QUE EL SERVICIO ESTE ABIERTO. para evitar derrames durante el transporte y la producción de aerosoles cuando se abre en el laboratorio. Es recomendable que el laboratorio no dé turnos de recepción de muestras. sin ensuciar sus manos o las paredes del frasco y para que en el laboratorio se pueda seleccionar y tomar la partícula más adecuada para realizar el extendido. . Aún así. Por lo tanto.. que han demostrado ser en general adecuados. 1. aunque no siempre iguales. para que el paciente pueda depositar la expectoración con facilidad dentro del envase. Luego puede regular el momento en que las procesa ya que el esputo puede conservarse varios días. EL ENVASE El envase más adecuado debe tener las siguientes características: . . para facilitar su eliminación.Cierre hermético: en lo posible con tapa a rosca.Transparente: para poder observar la calidad de la muestra cuando la entrega el SR. .Para control de tratamiento se aconseja examinar con baciloscopía una muestra por mes. el examen debe ser realizado con la mayor premura posible. sobre todo si sólo va a ser examinado por baciloscopía. No se recomienda limpiar frascos de vidrio ya usados y volverlos a usar. 10 . dentro de una rutina lógica de trabajo. EN EL MOMENTO MAS ADECUADO PARA EL PACIENTE.Capacidad adecuada: entre 30 y 50 c.Descartable: preferentemente de plástico.

protección de la luz solar. incluyendo a las ste micobacterias. en cuyo interior se adapta una base de telgopor agujereada con círculos de diámetro ligeramente superior al de los envases. aclaración sobre si es muestra para diagnóstico (1ª o 2ª) o para control de tratamiento indicando el mes. pero aun así éstas se colorean por la técnica de Ziehl-Neelsen. El responsable Provincial de la Red de Laboratorios de Tuberculosis lo ayudará a resolver estos problemas. En lo posible se debe elegir el medio de transporte que garantice mayor rapidez y confianza en la entrega.6. Cada envío debe ser acompañado por las hojas de solicitud de examen correspondiente o al menos por una lista de datos de los pacientes: nombre y apellido. en esa circunstancia se debe tomar a l precaución de tratar previamente el esputo con 10 gotas de fenol al 10% y después de una hora realizar el extendido siguiendo las indicaciones que se verán en el Capítulo de Baciloscopía. luego de lo cual se deben envolver en dos bolsas de polietileno. haciendo un nudo seguro con cada bolsa. Si las muestras van a ser procesadas sólo por baciloscopía y conservadas por varios días. . de altura ligeramente superior a la de los envases utilizados. Acondicionar los frascos así envueltos en la caja con relleno de papel de diario para mantenerlos firmes. La muestra debe ser conservada de preferencia en heladera o. . del tipo de los que se utilizan para conservar alimentos. se debe comprobar que los envases estén cerrados herméticamente (en algunos casos conviene sellarlos con tela adhesiva o cinta de enmascarar). el medio de transporte y el horario de llegada. puede agregar unas 10 gotas de fenol al 5 % en el momento de recibirlas. En el transporte de las muestras deben considerarse tres condiciones importantes: . de no ser posible. encima de la tapa. CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS DE ESPUTO Es necesario que la muestra llegue lo antes posible al laboratorio que va a realizar la baciloscopía o el cultivo.protección del calor excesivo. con qué frecuencia y por cuál medio de transporte . En ese tiempo los 11 . agitarlas levemente y dejarlas al menos 30 minutos. para conservar allí las muestras. De ser posible. de alrededor de 15 por 40 cm. tanto para baciloscopía como para cultivo se recomienda no dejar transcurrir más de siete días entre el momento de la recolección de la muestra y el del procesamiento en el laboratorio. Si no se dispone de cajas de plástico con divisiones interiores para el transporte. las muestras pueden ser acondicionadas en cajas de cartón grueso. En general. Es conveniente que se le anticipe al laboratorio que va a recibir las muestras el correspondiente envío.1. En un Servicio de Salud que no tiene laboratorio . Es útil contar con un envase de plástico con tapa. el personal debe conocer a qué laboratorio debe enviar las muestras. servicio. Extendidos fijados En casos excepcionales puede ser necesario realizar extendidos de esputo sobre el portaobjetos para enviarlos al laboratorio para su coloración y lectura. de manera que sujete firmemente cada frasco. e desinfectante mata a todos los gérmenes del esputo. en un lugar fresco.acondicionamiento de tal forma que no haya riesgo de derrames. se debe establecer días de la semana en que se efectuarán regularmente los envíos. Estos envases son útiles para conservar muestras en heladera o bien para su transporte.

12 . los inconvenientes que se observan. . Si el derrame ha sido masivo esterilizar toda la caja en autoclave o incinerarla.Desinfectar el exterior de los envases con algodón con fenol al 5% si se han producido pequeños derrames durante el transporte.Comprobar que estén bien identificadas. RECEPCION DE LA MUESTRA Cada vez que en el laboratorio se reciben las muestras se debe: .bacilos habrán muerto pero mantienen su capacidad de teñirse con la fucsina. Después de 24 horas de contacto con fenol el material puede descartarse quemando el frasco en el pozo de incineración del servicio. especialmente en la calidad y cantidad de los esputos y en la forma de envío. .7. en caso de ser necesario.Notificar al servicio que derivó las muestras. Es conveniente hacer dos extendidos de cada muestra. 1.

. El área de trabajo puede no ser exclusiva. mechero preferentemente de gas aunque puede utilizarse uno de alcohol.. 3 g 100 ml 55 ml 1.Fucsina básica fenicada. Esta propiedad se debe al alto contenido en lípidos.50m.p. Sólo debe contarse con un mínimo de condiciones edilicias y de recursos y seguirse normas básicas sencillas que aseguren un trabajo de calidad y con riesgos mínimos.1.2. La técnica se basa en la capacidad que poseen casi exclusivamente las micobacterias de incorporar la fucsina fenicada y retenerla frente a la acción de decolorantes como la mezcla de ácido y alcohol: ácido-alcohol resistencia.. pinza. Preparación a.Pileta o recipiente y un soporte para colorear los extendidos. que posean un microscopio con lente de inmersión en buenas condiciones. principalmente ácidos micólicos.s. aplicadores de madera (o en su defecto ansas). que poseen las micobacterias en la pared celular.Microscopio con objetivo de inmersión en buenas condiciones.Envases para muestras. en esos casos se recomienda disponer de un horario especial para realizar los extendidos y coloraciones.1. d. habitualmente el momento de menor movimiento. en lo posible cubierta con material que pueda desinfectarse fácilmente con soluciones germicidas (cerámica o azulejos sin junturas evidentes.LA BACILOSCOPIA El examen microscópico directo o baciloscopía es la técnica fundamental para el diagnóstico y el control del tratamiento de la tuberculosis pulmonar del adulto. b. c. 2.. en caso de no contar con ellos se puede utilizar una bandeja de metal o vidrio de dimensiones aproximadas o bien cubrir el área de trabajo con papel de diario impregnado en fenol al 5%. cuando se pueda restringir el paso de personas y cerrar la puerta.000 ml 13 . receptáculo para descartar los envases con muestras y frascos para fraccionar reactivos. 2. (Colorante básico). acero o materiales similares). Fucsina básica Alcohol 95° GL Fenol acuoso* Agua destilada c. fórmica.2. El equipo mínimo necesario para realizar los extendidos y la coloración es: a. medio litro). frascos para soluciones colorantes.. LUGAR DE TRABAJO La baciloscopía puede realizarse en laboratorios de cualquier complejidad. Puede no ser necesario si el Laboratorio de Referencia envía los colorantes y reactivos fraccionados para preparar un volumen determinado (un litro. lápiz marcador de vidrio (graso. portaobjetos. REACTIVOS 2.Material de vidrio aforado para preparar las soluciones. Se debe contar con una mesa o mesada para realizar los extendidos de aproximadamente 1 x 0. tinta indeleble o de diamante). donde existe un solo ambiente éste sirve para todas las actividades.

Los colorantes deben conservarse en frascos color caramelo o bien en envases comunes pero bien resguardados de la luz. especialmente la fucsina básica.Agua destilada 1 g 1. . Tenga en cuenta las medidas de bioseguridad recomendadas más adelante. . turbio. b.2.Se disuelve la fucsina básica en el alcohol.Antes de comenzar a trabajar. 2.. * El fenol acuoso se prepara fundiendo con cuidado. se agita suavemente y se agrega agua destilada para completar un litro. de esta manera se mantiene líquido y debe conservarse al abrigo de la luz para evitar su oxidación.. Obsérvese que la pureza del colorante sea del 100%. Precauciones con los colorantes . suavemente. téngalo en cuenta: . en baño maría. portaobjetos marcados con la numeración de las muestras a procesar.Alcohol 95° GL 970 ml Agregar siempre el ácido al alcohol. . 2. Todo reactivo con características anormales (llamativamente precipitado. se deja reposar hasta el día siguiente. disponga en la mesada todo lo necesario para realizar el extendido en el espacio despejado de la misma o en la bandeja: mechero.Azul de metileno .Los colorantes.Azul de metileno (Colorante de contraste). se lo deja reposar 24 horas. De ser posible es conveniente que se realice una compra unificada para garantizar la misma calidad en todos los servicios de una provincia. Lavar estos envases con frecuencia semanal. . previamente filtrados. o conservado por más de 6 meses. c. aplicadores o ansas. . soporte para los extendidos. etc). agitando suavemente y se agrega el fenol acuoso*.Solución decolorante. 30 ml . que se han de usar en la semana. se agita y filtra.Fraccionar pequeños volúmenes. PREPARACION DEL EXTENDIDO Antes de comenzar a trabajar debe lavarse las manos y colocarse el guardapolvo.a. debe ser descartado.Si se usan colorantes comerciales consultar a los Responsables Provinciales de la Red de Laboratorios sobre su calidad ya que es muy variable. y no al revés porque es peligroso. .3. deben ser de buena calidad. La mejor medida para evitar riesgos y errores es la sistematización de las actividades que se han de realizar.Acido clorhídrico p. para disolver los cristales que pudieran haberse formado. lápiz para marcar los portaobjetos. de no ser así ajústense las cantidades teniendo en cuenta el grado de pureza. 14 .2. el fenol en cristales con 100 ml de agua destilada por cada Kg de fenol (preferentemente calentado con calentador eléctrico o con llama a baja intensidad y con la tapa del frasco ligeramente abierta). Se filtra. frasco con arena y fenol o alcohol.Es conveniente preparar volúmenes que se han de consumir en no más de dos meses.000 ml Se disuelve el azul de metileno en el agua agitando suavemente. en lo posible enjuagándolos con alcohol.

Es conveniente extender una hoja de papel absorbente en el área de trabajo donde realizará los extendidos. Esta posición lo protegerá de posibles formaciones de aerosoles al abrir el frasco. . tome el frasco con material y llévelo detrás de la llama de manera que ésta quede entre usted y el frasco y ábralo con cuidado. Se recomienda no procesar más de doce muestras por vez para evitar accidentes y errores por cambio de muestra.Tome la primera muestra y el portaobjetos correspondiente y colóquelo entre usted y el mechero. enrollándola en la punta de una de las mitades del palillo.Si usa palillo para realizar el extendido. Si la muestra contiene varias porciones mucopurulentas trate de mezclarlas con movimientos suaves del palillo y luego tome una porción de la mezcla. . El portaobjetos se divide virtualmente en tres tercios.. al finalizar el trabajo. quémela primero desde el mango hacia el aro.Disponga a su izquierda o derecha (siempre en la misma posición) las muestras de acuerdo a numeración creciente y los portaobjetos marcados delante de cada una de ellas. 15 . parta el palillo en dos tratando de que las puntas queden ásperas y con las puntas de ambas mitades trate de levantar la partícula más purulenta de la muestra y enróllela en una de ellas. La selección de la partícula más purulenta de la muestra es uno de los pasos más importantes de la baciloscopía. uno de ellos se utiliza para marcar el número correlativo de identificación y los dos restantes se dejan para realizar el extendido. . Si usa ansa no descartable. déjela enfriar y luego seleccione la partícula más purulenta. la que descartará con el material a esterilizar. .Si marca los portaobjetos con lápiz graso hágalo en la parte posterior de los mismos para evitar que se pierda la identificación durante la coloración.

El grosor adecuado es el que permite leer un texto impreso a través del preparado. no deben quedar sin colorear hasta el día siguiente .Cierre el envase y déjelo en el lado opuesto a los que aún no ha procesado. si usó ansa introdúzcala en el frasco que contiene arena y fenol. si es muy grueso. Continúe de la misma manera con cada una de las muestras siguientes. . es posible producir un resultado falso negativo. Conserve las muestras hasta que haya realizado las coloraciones y lecturas y esté seguro de que no necesitará realizar nuevos extendidos o enviarlas para cultivo. pásela con movimientos circulares por la arena y luego quémela con cuidado comenzando desde el mango avanzando lentamente hacia el aro. Puede utilizar un incinerador especial muy fácil de fabricar con elementos sencillos. momento en que puede eliminarlas con los desechos habituales del laboratorio. Limpie la superficie de trabajo descartando los papeles con que pudiera haberla cubierto y pase fenol al 5% o hipoclorito de sodio al 10% sobre la superficie para desinfectarla.Si utilizó palillos deséchelos en un frasco que contenga fenol al 5% o una solución de hipoclorito de sodio concentrado comercial al 10%.Coloque la partícula seleccionada sobre el portaobjetos cerca de la línea divisoria y extiéndala con el palillo o el ansa con movimientos circulares. sin llegar a los bordes. Este procedimiento debe realizarse teniendo el mechero entre usted y el portaobjetos. FIJACIÓN DEL EXTENDIDO . en forma homogénea. cubriendo la mayor parte de los dos tercios del portaobjetos.. el extendido no debe calentarse a la llama mientras éste permanezca húmedo pues el calor fuerte deteriora los bacilos y no se colorean y puede generar aerosoles. Descarte el barbijo o los guantes. COLORACIÓN DE ZIEHL-NEELSEN Esta es la técnica más empleada en el mundo y ha sido recomendada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Unión Internacional Contra la Tuberculosis y Enfermedades Respiratorias (UICTER) por ser la que asegura resultados reproducibles con un entrenamiento sencillo. si los ha usado. junto con los palillos. en un recipiente para incineración o autoclavado o bien colocándoles fenol al 5% o hipoclorito de sodio al 10% y dejándolas hasta el día siguiente. - - 2. puede descartar las muestras colocándolas. 16 .Deje el extendido en un soporte para que se seque a temperatura ambiente. del mismo modo que las muestras. el material puede desprenderse durante la coloración. Si es demasiado fino.Espere a que las láminas se hayan secado al aire y luego páselas rápidamente sobre la llama dos o tres veces para fijar el extendido. para evitar confusiones. Cuando haya terminado. . no lo queme ni lo sobrecaliente. Los extendidos deben ser coloreados lo antes posible.4. tratando de dispersarla por toda la superficie central. ya que los bacilos permanecen vivos cuando son fijados sólo con calor suave. Coloque sólo un extendido en cada portaobjetos El extendido debe quedar de grosor homogéneo. .

En el término de aproximadamente cinco minutos debe calentar tres veces hasta emisión de vapores. si por cualquier causa no desea colorear en la pileta puede utilizar alguna bandeja metálica o de vidrio. .Coloración. Incline el portaobjetos tomándolo con una pinza para eliminar el exceso de agua y evitar diluir los reactivos que se utilizarán a continuación. .Vierta los reactivos y el agua suavemente evitando salpicaduras que pueden transferir material de un portaobjetos a otro y pueden generar aerosoles. . Consta de tres tiempos: a. .Cubra la superficie del extendido con fucsina básica fenicada recientemente filtrada.Levante cuidadosamente el portaobjetos desde el extremo más cercano a usted y con el frasco de agua o un chorro fino proveniente de una mangueraconectada a la canilla.Es también la más económica y alcanza la misma sensibilidad que la técnica de fluorescencia si se le dedica tiempo suficiente a la lectura de cada frotis. Girando el extendido lave con cuidado también la parte posterior. 17 . El calentamiento nunca debe ser tal que hierva la fucsina ya que a esta temperatura la pared de los bacilos se destruye y no se colorean. . También se puede cubrir previamente el extendido con un trozo de papel de filtro que no sobresalga del portaobjeto y luego cubrir con la fucsina. Este papel evita que los posibles cristales de fucsina se asienten sobre el extendido. lave cuidadosamente la superficie eliminando totalmente la solución de fucsina.Disponga dos varillas de vidrio sobre la pileta de lavado a una distancia de aproximadamente 5 cm entre una y otra.Con la llama de un hisopo embebido en alcohol caliente suavemente por debajo de los extendidos con movimientos de vaivén hasta que observe que se desprenden los primeros vapores.Coloque las láminas fijadas conservando el orden numérico con el extendido hacia arriba y sin que se toquen entre ellas.. . este tiempo y estas temperaturas son suficientes para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo y se fije a sus lípidos. .

cuantificar aproximadamente. la riqueza en bacilos. libre de polvo. b. en caso positivo. . Mantenga el microscopio limpio. c..Cubra la totalidad del extendido con solución decolorante de alcohol-ácido y deje aproximadamente 3 minutos para que el decolorante actúe.b. . restos de aceite y humedad. OBSERVACION MICROSCOPICA La observación microscópica cumple principalmente dos objetivos: a. .determinar si en el extendido hay bacilos ácido-alcohol resistentes..Elimine el exceso de agua inclinando el portaobjetos..Después de la última decoloración mantenga el extendido cubierto al menos un minuto con agua para rehidratar las células.Coloración de fondo.A medida que las saque del soporte de coloración observe si la numeración está aun visible y en caso contrario vuelva a numerarlas.. Vuelva a cubrir con solución decolorante. 2. Pasado ese tiempo enjuague con abundante agua a baja presión.Decoloración. déjelo actuar un minuto y enjuague nuevamente. Enjuague las láminas en ambas caras con agua a baja presión y limpie la parte inferior con un algodón si ha quedado coloreada.5. Se considera decolorado cuando sus partes más gruesas conservan sólo un leve tinte rosado. . Cubra todo el extendido con solución de azul de metileno dejándolo entre 45 segundos y un minuto. apoyándolas en forma vertical sobre un papel absorbente o en un soporte.Déjelas secar a temperatura ambiente. lo que da idea del grado de severidad e infecciosidad del paciente. Si aún observa coloración rosada intensa. . repita el procedimiento. 18 .

Método de lectura. (No es conveniente usar aceites naturales de mayor densidad y secantes. papel suave. leyendo de izquierda a derecha del extendido al menos 100 campos microscópicos útiles. absorbiendo el aceite sin frotar en exceso la lente. generalmente con gránulos más coloreados en su interior. una caja para guardar portaobjetos.Siga una pauta uniforme de observación.Si se encuentran entre uno y 10 BAAR por campo bastará con leer 50 campos.Debe utilizarse un microscopio con condiciones adecuadas de óptica. .Si se encuentran más de 10 BAAR por campo bastará con leer 20 campos. En ese momento observe a través de los oculares y continúe bajando muy lentamente hasta ver el material coloreado del extendido. ligeramente curvos. Esto contribuirá al cuidado de la lente y a evitar la transferencia de material al siguiente frotis que se va a leer. .Terminada la observación limpie el aceite de inmersión del objetivo con una gasa o papel suave.Apoyando el portaobjetos sobre la mesa deposite una gota de aceite de inmersión sobre la parte del extendido coloreado cercana al número. . continúe ajustando el tornillo micrométrico hasta ver una imagen nítida.De haber bacilos los observará como pequeños bastoncillos delgados. a. No se debe tocar el extendido con la punta del gotero o varilla para evitar pasar partículas de un extendido a otro y generar falsos resultados positivos. destacándose sobre un fondo azul.Coloque el portaobjetos sobre la platina dejando la superficie cubierta por el aceite justo debajo de la lente de inmersión y baje ésta lentamente con el tornillo macrométrico hasta que toque ligeramente el aceite.Si no se encuentran bacilos ácido-alcohol resistentes (BAAR) o se observa menos de un bacilo por campo en promedio deben examinarse como mínimo 100 campos útiles. por ejemplo aceite de cedro). el Registro del Laboratorio y una lapicera. . Tenga en cuenta que este extendido positivo se va decolorando con los sucesivos lavados con xileno. Es conveniente tener un extendido positivo coloreado para evaluar periódicamente las buenas condiciones del microscopio.Ubique cerca del microscopio todos los elementos que va a necesitar para la lectura: aceite de inmersión. teñidos de rojo fucsia. . aislados o en grupo. .Enfoque en el microscopio . para evitar repetir la lectura de algunos campos. equipado con un objetivo de inmersión (100 x) y un ocular 8 ó 10 x. 19 . utilizando permanentemente el micrométrico. . b.. . . Cada campo microscópico debe ser observado en superficie y profundidad..

Si en una lámina se observan de uno a cuatro BAAR en 100 campos se recomienda: . Positivo (++) : de 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos observados Positivo (+++) : más de 10 BAAR por campo en 20 campos observados Registre inmediatamente el resultado de la lectura en el Registro del laboratorio. agregue toda observación que indique que la calidad de la muestra no fue adecuada..Si la lectura del segundo extendido no modifica el resultado del anterior la muestra debe informarse como negativa. consignando en el Libro de Registro el hallazgo y en lo posible solicitar una tercera muestra. tratando de elegir partículas purulentas.Informe de los resultados .No es conveniente usar xilol u otro disolvente en forma permanente para limpiar los objetivos pues deterioran rápidamente los objetivos y oculares. Los aceites sintétic os no secantes utilizados actualmente no requieren de limpieza frecuente con solventes. el decolorante es defectuoso o la decoloración ha sido realizada en forma incompleta. Si no puede decolorar bien el preparado. Envíe el resultado lo más pronto posible al centro de salud o médico que solicitó el examen. . d. c.Si con esa lectura no se encuentran más bacilos. La siguiente escala semicuantitativa ha sido adoptada por el país y es la utilizada en la mayoría de los países del mundo: Negativ o (-) : no se encuentran BAAR en los 100 campos observados. hacer otro extendido de la misma muestra. 20 . enviar estas muestras para cultivo. Escriba el resultado en el formulario correspondiente. Si no detecta bacilos ácido-alcohol resistentes. De ser posible. Es conveniente marcar los resultados positivos en rojo. . si corresponde. preparados con muestras a las que se les ha agregado fenol..Ampliar la lectura a 200 campos. los reactivos son defectuosos o la coloración ha sido realizada en forma incorrecta. para identificarlos más rápidamente. para controlar la calidad de cada nuevo lote de colorantes que se prepare. Positivo (+) : se observa en promedio menos de un bacilo por campo en 100 campos observados.Control de calidad interno del laboratorio Es conveniente guardar extendidos fuertemente positivos.

de no serles solicitadas puede limpiar las láminas dejando las negativas en las que no se observen rayaduras para preparar nuevos extendidos y enviando las positivas a otra sección del laboratorio. 4.Lave con abundante agua de la canilla.6.Separe las láminas positivas de las negativas y lávelas por separado 2. 3. CONSERVACION Y ELIMINACION DE LAS LÁMINAS El sistema nacional de garantía de calidad de las baciloscopías requiere que las láminas se conserven al menos un mes hasta que puedan ser solicitadas para su relectura.2. Las láminas leídas se limpian con un algodón embebido en alcohol pasándolo por la superficie con leve presión.Coloque las láminas en un recipiente con una solución de hipoclorito de sodio concentrado comercial al 30% durante 48 horas. 21 . se comprueba que se mantenga visible la numeración y se las guarda con sus resultados. La limpieza se realiza de la siguiente manera: 1.Seque al calor seco o a temperatura ambiente y limpie con un paño antes de volverlas a usar. Luego del mes.

PERSONAL 1. 4. 2. Aquéllos con enfermedades pulmonares crónicas deben consultar previamente con su médico. 3. Es menor el riesgo del personal del laboratorio que puede protegerse con medidas de precaución simples y no muy costosas. 5. Restringir el acceso al laboratorio de personal ajeno al área de trabajo para evitar movimientos. cuando tengan síntomas respiratorios. Cada laboratorio debe contar con instrucciones escritas y difundidas sobre el manejo de pacientes con tuberculosis y de las muestras biológicas obtenidas de los mismos. Los trabajadores de salud infectados con HIV.NORMAS MINIMAS DE BIOSEGURIDAD PARA LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPÍAS La información disponible en nuestro país indica que el personal de salud más expuesto a contraer tuberculosis es el que asiste directamente al paciente: médicos y enfermeras. distracciones y exposición de personas no involucradas. PRECAUCIONES GENERALES DE TRABAJO En todas las circunstancias tener presente que es necesario aplicar todas las medidas lógicas para evitar la generación y movimiento de aerosoles. Trabajar en áreas con pisos y paredes lavables.1. 3. con otra enfermedad inmunosupresora. 6. con tratamientos prolongados con medicamentos inmunosupresores o diabéticos no deben trabajar en áreas de riesgo. Los trabajadores de salud no reactores a la tuberculina (PPD menor de 10 mm) deben vacunarse con BCG al ingresar a trabajar. Deben tener una evaluación médica clínica anual sistemática con placa de tórax y. Es conveniente dictar a los ingresantes un curso con contenidos de historia natural de la tuberculosis y medidas de bioseguridad y reafirmar periódicamente los conocimientos. Atender al personal del centro de salud y pacientes fuera de este área. 3. Toda manipulación de material potencialmente infeccioso debe ser realizada en áreas alejadas de la circulación general. 1. No utilizar ventiladores ni acondicionadores que generen flujos de aire mientras se está trabajando con material infeccioso. 2. baciloscopía y cultivo de ser posible. NO USAR PLUMEROS PARA LA LIMPIEZA. 4. 3. NO BARRER EN SECO NI ENCERAR. El Comité de Infecciones Hospitalarias es el responsable de reglamentar las normas de bioseguridad para todo el personal y de hacerlas cumplir. 22 .2. limpiarlos diariamente con una solución de hipoclorito de sodio concentrado comercial al 10%. En cada sección deben estar expuestas las normas básicas de bioseguridad específicas del área. corrientes de aire.

impermeables. 8. Pueden utilizarse los de trabajadores que trabajan con asbestos o silicio. Para el transporte de muestras que serán procesadas sólo por baciloscopía se les puede agregar 10 gotas de fenol al 5%. (Ver Baciloscopía) 2. Utilizar siempre guardapolvo de mangas largas y cerrado. no sacarlo del centro de salud donde debe ser desinfectado y lavado (agua caliente y enjuague con agregado de hipoclorito). Las siguientes recomendaciones son generales para todos los operadores del laboratorio en cualquier procedimiento que se haga con una muestra de SR.4. que no son costosas. 11. comer ni fumar en el área de trabajo donde se procesa material potencialmente infeccioso. de ser necesarias. Ubicar ésta en otra caja sin divisiones de tamaño ligeramente mayor. el fenol mata el bacilo pero conserva su propiedad de tinción con fucsina. 6. 2. cubrir con vendaje y guantes. Lavarse las manos con frecuencia. se harán en la sala de toma de muestras o en otra cuyas condiciones de ventilación sean similares. 3. En enfermos sospechosos de tuberculosis deben evitarse en lo posible las nebulizaciones. En circunstancias normales no es indispensable el uso de guantes para el trabajo con muestras de esputo en tuberculosis aunque. 3. Las máscaras u otro material utilizado deben lavarse con detergente y abundante agua y el ambiente debe ser ventilado luego de cada paciente. 3. No beber. sin antes lavarse las manos. si las hubiera. Controlar que no haya heridas o escoriaciones en las manos. No tocar. es conveniente mantenerla sin hacer excepciones. El filtro del barbijo o máscara debe ser de alta eficiencia (HEPA) que retenga partículas del orden de los 0. manipulación y procesamiento de las muestras. PRECAUCIONES EN LA TOMA Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS 1. Si el derrame hubiera sido masivo autoclavar o incinerar el frasco y el contenedor en el que fue trasladado al laboratorio. 7. 9. Sistematizar el procesamiento de las muestras. instalaciones o equipamiento del laboratorio. PRECAUCIONES PARA LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPÍAS Todo laboratorio que cuente con un microscopio puede realizar una baciloscopía adoptando medidas de bioseguridad de sentido común. Al recibir la muestra comprobar que no haya derrames. No es recomendable trabajar con más de 12 muestras simultáneamente. rellenando los espacios vacíos para evitar movimientos. No ubicar en el área de trabajo elementos innecesarios ni sacar de la misma libros de registro o elementos allí utilizados. si existieran.3. por ejemplo con papel. utilizar barbijos con buen ajuste alrededor de la boca y nariz para la toma. 4. 10. desinfectar el exterior del envase con algodón embebido en fenol al 5% o hipoclorito de sodio al 10%. 23 . aun cuando se usan guantes. Si se procesan un promedio diario de más de 5 muestras.5. Los barbijos de cirugía no protegen contra los bacilos de la tuberculosis. 3. Las muestras deben ser recolectadas al aire libre o en un lugar bien ventilado hacia el exterior y con puertas cerradas a áreas de circulación de público.3 micrones que aseguren al menos 95% de protección. Para el transporte acomodar los envases en cajas rígidas. si existe una norma general de laboratorio de utilizarlos para protección. resistentes. con cierre hermético y divisiones interiores. 1. Disponer siempre de un frasco con fenol al 5% y trabajar en el área delimitada cubierta con un papel embebido en fenol.

De igual manera proceder para seleccionar la partícula a ser extendida y al realizar el extendido. Abrir los envases con muestras teniendo un mechero entre la misma y el operador. conservar los bordes limpios. La cámara puede ubicarse sobre la mesada del laboratorio. 33 cm en la parte superior y 20 cm de alto en la entrada de manos. Al realizar los extendidos. Al regresar recoger el material con pinzas y depositarlo en un recipiente donde pueda ser incinerado o autoclavado.4. Colorearlos tan pronto estén secos para disminuir al mínimo el tiempo en que las micobacterias permanecen viables. Si la cámara no dispone de esta ventilación forzada. La ventana puede ser de vidrio doble o triple. Aunque no es imprescindible pueden utilizarse campanas de bioseguridad. 7. A continuación se sugiere un diagrama de una campana sencilla y económica. 85 cm de altura. 24 . De preferencia utilizar palillos para realizar los extendidos. Ante cualquier rotura del envase o tubo con material potencialmente contaminado cubrir inmediatamente la zona con papel y embeberlo con fenol al 5% o con hipoclorito al 10% y abandonar el área de trabajo por 30 minutos. teniendo en cuenta que la superficie interior no debe presentar rugosidades para permitir una buena desinfección. 60 cm de ancho en la base. 8. Si se usa pipeta cuidar que la punta superior esté protegida con algodón. primero debe ser limpiada en un frasco con arena y fenol o alcohol y luego quemada en el mechero. el riesgo de concentración de contaminantes es superior al de fuera de la cámara. El aire contaminado dentro de la cámara debe ser expulsado forzadamente por un extractor adecuado. 6. sin muestra. Si se usa ansa. comenzando desde el mango hacia el aro. etc…). colocando antes del mismo filtros adecuados. no pipetear nunca con la boca. 5. no es necesario que sean complejas. melamina. que puede ser utilizada para técnicas básicas de bacteriología e incluso como campana de gases: - - - Puede construirse en madera u otro material (acero. Las dimensiones aproximadas son: 100 cm de largo.

Éste debe permitir el conocimiento actualizado de la magnitud y tendencia de la situación epidemiológica y al mismo tiempo el grado de desarrollo y efic iencia de la Red de Laboratorios.SISTEMA DE REGISTRO E INFORMACIÓN El sistema de información epidemiológica y operacional debe ayudar a administrar mejor la Red de Laboratorios de Tuberculosis a todos los niveles. Los instrumentos de registro y formularios con los que debe contar la Red son: Formulario de Solicitud de baciloscopía - Registro de Muestras para Investigación Bacteriológica de la Tuberculosis 25 .

26 .

International Union Against Tuberculosis and Lung Disease. 2nd ed. Centers for Disease Control and Prevention. La muestra. editor. Washington: U. The Public Health Service National Tuberculosis Reference Laboratory and the National Laboratory Network. Organization and Practice. Technical guide for sputum examination for tuberculosis by direct microscopy . 1988. 5. Bacteriología de la tuberculosis. Primary Containment for biohazards: selection. 1998. Tuberculosis bacteriology. Laboratory Manual for Acid-fast Microscopy. Center for Disease Control. Smithwick. Nota Técnica Nº26/Rev1. USA. Argentina. 1-51. 6. installation and use of biological safety cabinets. Bull Int Union Tuberc 1978:4-16. 3. Normas técnicas del Programa Nacional de Control de la Tuberculosis. 27 . Emilio Coni”. Grange JM. Argentina. Education and Welfare. Collins CH. Department of Health and Human Services. Role and Operation in a Low-Income Country. Yates MD. Goverment Printing Office 1995.ed. 4. 2000. 7. 1997. 2nd .BIBLIOGRAFÍA 1. El exámen microscópico. 1979. ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD/ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD. National Institutes of Health.S. Oxford: Butterworth-Heinemann. U. Francia. 2. International Union Against Tuberculosis and L ung Disease. Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias “Dr.S. Minimum Requirements. US Department of Health .

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