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Determinación de coliformes

Determinación de coliformes

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Método del número más probable para la determinación de bacterias coliformes totales en agua según la Norma Oficial Mexicana.
Método del número más probable para la determinación de bacterias coliformes totales en agua según la Norma Oficial Mexicana.

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Determinación de coliformes: Método del NMP.

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994.
M.C. Luis Ramiro Caso Vargas.

Coliformes
• Estan constituidos por un grupo heterogéneo de bacterias (varios géneros y especies) • Algunas especies constituyen un problema de salud bastante grave. • Son organismos “indicadores de contaminación fecal” en el agua.

¿Por qué usar coliformes?
• Buscar por microorganismo específicos lleva mucho tiempo y recursos. • Los coliformes regularmente se encuentran asociados con fuentes de patógenos que contaminan el agua. • El análisis de coliformes en agua potable es relativamente sencillo, económico y eficiente.

¡La definición es importante!
• Bacilos Gram negativos. • No esporulados. • Aerobios o anaerobios facultativos. • fermentan la lactosa a 35 °C con la producción de ácido y gas. • ¡¡ Todo esto Bajo las condiciones de la norma !!

Prueba de coliformes totales
1. Prueba presuntiva • Caldo Lauril Triptosa (CLT). • Caldo Mc. Conkey. • Caldo lactosa. • Medio EC. 2. Prueba confirmativa:
• • Medio EC. Medio bilis lactosa (BLVB)

Día 1 (Prueba presuntiva)
• • Preparación del material. Realizar diluciones seridas de la muestra de agua hasta 10-3 en agua peptonada. Realiazar 5 pases de 1 ml. de cada una de las diluciones (10-1, 10-2, 10-3) a tubos con 9 ml. de caldo Lauril sulfato y campanas Durham. Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.

Día 2 (prueba confirmativa)
1. Realizar pases con alíquotas de 1ml. de cada los 5 tubos por dilución a tubos con medio EC y campanas Durham. 3. Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.

Procedimiento:
P so a 1
ml 1

Sembrar de cada dilución por quintuplicado.
1 2 3 4

Pas
5

o2
10-1

1 ml

10-1 1 ml 10-2 1 ml
1 ml
1 2 3 4 5

10-2

Muestra 10-3 Realizar diluciones hasta 10-3

1 ml

1

2

3

4

5

10-3

Transferir hacia tubos con 1 caldo EC.
Caldo Lauril Sulfato
10-1 10-1 10-1 10-1 10-1 1 2 3 4 5

Caldo EC.

1

2

3

4

5

Tubo Durham

Producción de Gas

Análisis de resultados MNP
Dilución 10-1 10-2  X   X X 3   X X 2 10-3 X X X X  1

1 2 3 4 5 Tubos

¿Qué tanto es tantito?
NOM-127-SSA1-1994 -SSA1-1994

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