Electroforesis en gel de agarosa Pa so 0 1 Procedimiento Especificaciones

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Limpie el mesn, revise Cmara de electroforesis (EF) con su cama, que los materiales estn Cables, Fuente de poder, Pipeta P20 para disponibles sembrar. Cmara con pilas Revise que la cmara de Grande 1200 ml electroforesis tenga Mediana 500 ml Buffer TAE 0,5X Chica 120 ml Preparacin del gel Frote bien para asegurar pegado, doble la Sellar los bordes de la punta de la cinta para facilitar remocin cama con masking tape posterior Preparar gel Agarosa LE 1% Grande 3,0 g Grande 300 ml Mediana 1g Mediana 100 ml Chica 0,5g Chica 50 ml 2 minutos Max. Temp. Calentar en Erlenmeyer Tapado con papel humedecido Grande 24 l Agregar BrEt Mediana 8 l Chica 4 l Vaciar solucin caliente Verificar que las peinetas estn puestas y en cama de EF y dejar reguladas, cuajar a Temp. Amb. 20 a Verificar que la cama quede a nivel. 30 min Sacar la cinta y sumergir Los pocillos deben quedar cubiertos por el en la cmara de EF Buffer. Siembra Registrar orden de Incluir marcador de peso molecular en al muestras en el gel, menos un extremo. esquematizar 5 l de marcador de peso molecular + 5 l de producto de PCR o Sembrar el gel 5 l de DNA genmico mezclado con una gota de Buffer de carga Conectar electrodos El DNA migra hacia el polo positivo (rojo) Programar la fuente de 80V por 60 minutos poder y correr En todo el proceso emplear lentes con filtro UV. Poner cuidadosamente el gel en el Fotografiar y guardar la transiluminador, cubrir con el cono de la fotografa cmara, prender el transiluminador observar y tomar mltiples exposiciones. Guardar en carpeta rotulada con fecha: dd_mm_yyyy_NN (iniciales)