Diagnóstico de enfermedades en plantas

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Postgrado en Agricultura Tropical Universidad de Oriente Maturín, agosto 2011

¿Qué es diagnóstico?

Es la identificación de la causa de la enfermedad. Inicialmente es importante determinar si los síntomas son inducidos por un agente biótico o por un agente abiótico.

Agente biótico o abiótico?

Para una persona experimentada, es relativamente fácil determinar si los síntomas o signos observados en el campo son causados por un agente biótico o abiótico, a más de determinar exactamente cuál agente es el causante de la enfermedad.

En la mayoría de los casos.Agente biótico o abiótico? • • Con frecuencia es necesario comparar los síntomas observados en la plantas con los encontrados en la bibliografía especializada (fotos de alta calidad). se requiere revisar los síntomas con mayor cuidado e indagar muchos otros aspectos más allá de los síntomas para lograr un diagnóstico correcto. . sin embargo.

cultivar o variedad.Diagnóstico • Es importante obtener información para tener una “historia del problema”: – – – – – – – Descripción del estado de la planta Tipo de planta. Edad. tamaño Ubicación del sitio donde se encuentra la planta Otras plantas afectadas o cercanas Condiciones edafo-climáticas recientes Manejo dado a la planta .

Diagnóstico • • Los síntomas con las características físicas de la enfermedad que se manifiestan en una planta. Los signos son la evidencia física de la presencia del patógeno y están formados por estructuras del patógeno o …… .

Agentes causales de enfermedades en las plantas Factores bióticos: .

Causas de las enfermedades de las plantas Factores abióticos: .

Requisitos para que ocurra una enfermedad El triángulo de la enfermedad Hospedero susceptible Patógeno Ambiente favorable .

Manchas foliares .Principales manifestaciones patológicas en la plantas .Pudriciones .Marchitez .

Alternaria solani .

Alternaria solani .

Alternaria solani .

Alternaria solani .

Principales manifestaciones patológicas en la plantas Damping-off (sancocho) Candelilla Roya .

Principales manifestaciones patológicas en la plantas Agallas Enanismo Mosaicos Pudriciones .

Diagnóstico fitosanitario ¿Arte o Ciencia? Haga clic para modificar el estilo de subtítulo del patrón .

precipitación. fertilización. . control químico. -Registros del manejo de cultivos en ciclos o años anteriores y del cultivo en desarrollo (riego.Diagnóstico de plantas enfermas Historial del campo y del manejo del cultivo.) -Topografía del terreno y características del suelo -Espectro de especies sintomáticas -Características de morfología y fenología del cultivo. etc. mecanización) -Enfermedades reportadas en cultivos anteriores -Reportes agroclimáticos anuales (Tº.

Caracterización de la enfermedad en el campo a.Examinar el campo y alrededores b.Identificación de la especie o variedad enferma .

Patrones de anormalidad : Distribución de la enfermedad en el campo y comparación de plantas .

Examinación de plantas individuales. posición de síntomas y signos .

Colecta. preparación y envío de muestra : .

Consideraciones Generales - Apropiada cantidad y calidad de ejemplares No mezclar diferentes componentes de la muestra No colectar después de la aplicación de plaguicidas Evitar muestras húmedas Refrigerar las muestras hasta el análisis - - - - .

Diagnóstico en el laboratorio Observación directa de la muestra (síntomas y signos) Signos: Síntomas: .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas .

Observación de síntomas Meloidogyne en Guayaba Meloidogyne en Tabaco .

Observación de síntomas SN O A I T MS I II LS NC AE SN O A I T MS AA Z D S V NA O .

edu .louisiana .ucs.Observación de síntomas y signos www.

louisiana .edu www.gob.ucs.pe www.com .nacion.agrosanmartin.Observación de síntomas y signos www.

Diagnóstico en el laboratorio Observación directa de la muestra (síntomas y signos) .

Diagnóstico en el laboratorio .

Diagnóstico en el laboratorio .

Diagnóstico en el laboratorio

Observación estereoscópica de los signos

Diagnóstico en el laboratorio

Antracnosis en cacao

Observación de los signos .

Observación de los signos .

Observación de los signos .

Aislamiento en medios de cultivo .

Observación en microscopio electrónico .

Observación microscópica de los signos .

Alternaria solani .

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Lavado. desinfección y siembra Cámara húmeda y aislamiento del patógeno .

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¿Cómo determinamos si un microorganismo es patógeno? Realizando las pruebas de patogenicidad Postulados de Koch .

Informes fitosanitarios Haga clic para modificar el estilo de subtítulo del patrón .

. Esto es necesario para tener suficiente material patrón para el proceso de secuenciación.PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa • El propósito de la PCR es hacer un gran número de copias de un gen.

Las reacciones cíclicas.PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa La PCR tiene dos pasos esenciales: 1. 2. . Asegurarse de que el gen de interés se copió y si es del tamaño correcto.

Las reacciones cíclicas.PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa La PCR tiene dos pasos esenciales: 1. 2. . Asegurarse de que el gen de interés se copió y si es del tamaño correcto.

leyendo la cadena patrón en la dirección 3´a 5´. Esto se hace automáticamente en un termociclador. Unión (annealing) a 54ºC entre la cadena sencilla de ADN y el primer (cebador o iniciador). La polimerasa se une e inicia el copiado. Extensión a 72ºC. Las reacciones son las siguientes: Desnaturalización a 94ºC. Las bases son complementarias al patrón. Las bases (complementarias con la cadena patrón) son unidas al primer en el lado 3´(la polimerasa añade dNTP´s de 5´a 3´.PCR: Las reacciones cíclicas Las reacciones cíclicas se repiten unas 30 a 40 veces. Separación de la cadena doble en dos cadenas sencilla de ADN. que calienta y enfría los tubos con la mezcla en un tiempo muy corto. .

. después de un ciclo habrán dos copias. hay un incremento exponencial del número de copias de un gen. en tres ciclos habrán 8 copias y así sucesivamente.PCR: Amplificación exponencial Debido a que ambas cadenas son copiadas durante la PCR. Suponiendo que hay una sola copia del gen de interés antes del inicio del proceso. después de dos habrán cuatro.

es posible que uno de los primers encaja en otro lado del gen cercano al otro primer o que ambos encajan en otro gen totalmente diferente. 5: Múltiples bandas se formaron. the fragments are approximately 800 bases long. 3. El DNA puede ser de mala calidad. El estándard es una mezcla de fragmentos de tamaño conocido. Es posible que el primer encaje en la posición deseada y en otros sitios también.PCR: ¿Los resultados son los esperados? 1. 2 y 4: Los fragmentos tienen aprox. 2. El producto es del tamaño adecuado. debe verificarse que: Se haya formado un producto. Varias bandas se forman. Si se espera un producto de 1800 bases pero se obtiene uno de 500bp. . 3: No se formó producto. Antes de que el producto de la PCR sea usado. que uno de los primers no funcione o que hay demasiado patrón inicial. 800 bases. con una distancia logaritmica. 1 : Fragmento PCR fragment de 1850 bases.

No olvidar los aliados!!!! .

MUCHA S GRACIA S .

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