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REPORTE 9. Ácidos nucleicos

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Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán Campo 1

Carrera: Química Asignatura: Bioquímica estructural Grupo: 2601 Reporte de la práctica No. 9 “ácidos nucleicos” Equipo No. 2 Chávez Ramos Kenia León León Donaldo Gamaliel Fecha de realización de la práctica: 2 de Mayo de 2012 Fecha de entrega del reporte: 9 de Mayo de 2012 Asesoras: Q. Karla Hernández Pérez QFB Jessica Filisola Villaseñor

La cadena posee una dirección. Así la cadena tiene un extremo 5’ y 3’. Los ácidos nucleicos son. es un nucleósido. al igual que los péptidos. la información pasa del ADN hacia el ARN mediante un proceso llamado transcripción. estos son el ADN (ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácido ribonucleico). . de forma que un nucleótido puede considerarse como un nucleósido-fosfato. El esqueleto de los ácidos nucleicos está formado por moléculas de azúcares pentacarbonadas unidos entre sí formando ésteres con ácido fosfórico. timina. enseguida la secuencia de ARN se traduce a una secuencia de proteína en los ribosomas. el ácido nucleico es de hecho un polinucleótido. La mayor parte de la estructura y la bioquímica de las células se debe a sus proteínas. La estructura principal del ADN es una molécula formada por dos hebras de polinucleótidos de forma helicoidal que permite que cada base ligue con su complementaria en la otra hebra. Las bases nitrogenadas que pueden estar en un ácido nucleico son la adenina. La combinación base-azúcar sin el ácido fosfórico. ribosómico y mensajero.INTRODUCCIÓN. polímeros lineales con diferentes sustituyentes distribuidos a lo largo del esqueleto. El ARN es el principal material genético que conforma a los virus. estando también ligadas a las moléculas de azúcar. Existen 3 tipos de ARN llamados de transferencia. de un azúcar y ácido fosfórico. y como ya se mencionó es indispensable en la producción de proteínas. Los sustituyentes están formados por varios compuestos heterocíclicos nitrogenados denominados las bases de los ácidos nucleicos. Los ácidos nucleicos almacenan la información genética y son la principal causa de la capacidad de los organismos para reproducirse y transmitir su información genética. el tipo de proteínas es determinado por el ADN. guanina timina y uracilo (ARN). ya que cada grupo fosfato está unido a un azúcar en la posición 5’ (el quinto carbono en el anillo de azúcar) y al otro azúcar en la posición 3’ (el tercer carbono en el anillo del azúcar). Estructura del ADN Dona aquí puedes anexar los tipos de estructura que tiene el ADN que tienes en tu manual es que ya ves que yo no lo tengo xfis. La unidad repetitiva de un ácido nucleico es así la combinación de una base nitrogenada. Figura 1. denominando a este conjunto nucleótido. guanina. proceso que se conoce como traducción proteica. y citosina (para ADN) y adenina.

DIAGRAMA ECOLÓGICO: METODOLOGIA: La indicada en el manual de Bioquímica. 9. Se adicionaron los trozos de cebolla a la mezcla y con una varilla se agitó lentamente teniendo cuidado de no formar espuma. posteriormente se transfirió la mezcla a un vaso de precipitados de 500 mL y con ayuda de un procesador de comida se realizó un homogeneizado. Trozos de cebolla colocados en solución preparada. OBERVACIONES Y RESULTADOS: Extracción del ADN de la cebolla. correspondiente a la práctica No. . Se cortó la zona central de la cebolla en trozos pequeños. dicha mezcla adquirió una coloración verde debido a que éste era el color del detergente utilizado. páginas 74 y 75.Las diferencias entre el ARN y ADN son muy diversas pero las principales son: ADN 2 cadenas Azúcar: desoxirribosa Los tipos de bases: contiene timina (T) ARN 1 cadena Ribosa Contiene Uracilo (U) OBJETIVO:  Extraer el ADN de células de un tejido vegetal (cebolla y kiwi) por medio de la aplicación de un método sencillo con el fin de comprobar que todos los seres vivos contienen esta molécula en donde se almacena su código genético. Figura 2. posteriormente se preparó en un vaso de precipitados de 100 mL una mezcla de 3 cucharaditas de detergente lavavajillas líquido y una cucharadita de sal común (NaCl) agregando agua destilada hasta llenar el vaso.

se filtró con gasa lo cual se tardó algunos minutos. se procedió a añadir 2 cucharaditas más de jugo de papaya. por lo que para poder filtrar correctamente con ayuda de la cuchará se retiró la mayor cantidad de espuma posible.Figura 3. Figura 5. Mezcla sometida a triturador de comida Enseguida se observó la formación de gran cantidad de espuma. Formación de hebras de ADN . enseguida se adicionó lentamente por la pared del vaso etanol lo más frío posible y se apreció en la interfase la formación de pequeñas hebras que corresponderían al ADN. Filtrado de la mezcla preparada Una vez filtrado se añadieron 3 cucharaditas de jugo de piña. sin embargo al ver que no se apreciaba claramente. observando inmediatamente la formación de más hebras de color naranja. Figura 4.

Muestra de kiwi Se preparó una mezcla con 2 g de sal NaCl. 90 mL de agua y 10 mL de detergente líquido. Figura 7. Figura 6. posteriormente se pesaron 30g que se colocaron en un vaso de precipitados de 100 mL. la cual se agito muy suavemente sin formación de espuma. ADN extraído Extracción del ADN del Kiwi: Se peló el kiwi. nuevamente presento una coloración verde que correspondía al color del detergente utilizado.Al cabo de unos minutos dichas hebras subieron hasta la parte alta del vaso donde fue posible extraerlas con ayuda de un palillo donde se observó que tenían una estructura gelatinosa como una mucosa. . se cortó en trozos pequeños y con ayuda de un tenedor se hizo un puré lo más fino posible. Dicha mezcla se vertió al vaso con kiwi de tal manera que el volumen fuera el doble que el que se tenía inicialmente de puré fino.

Mezcla de kiwi con solución de extracción de ADN Dicho vaso se colocó en un baño de agua a aproximadamente 80°C dona no sé si el baño estaba a esta temperatura. en la interfase del tubo. sino es así corrígele xfas por 15 min. Se dejó enfriar y se procedió a filtrar con papel filtro. posteriormente de la misma manera se rompió la membrana nuclear dejando entonces libre al ADN. primero fue necesario romper la pared celular y la membrana plasmática de esta manera liberamos el núcleo de la célula.Figura 8. De tal manera que el detergente el cual contiene al tensoactivo iónico lauril sulfato de sodio ayuda a remover los lípidos y proteínas que constituyen las membranas que rodean la célula y el núcleo. Fibras de ADn formadas en la interfase DISCUSIÓN DE RESULTADOS: Para poder lograr la extracción del ADN de la cebolla. Esto se logró gracias a la solución realizada con la mezcla de detergente lavavajillas y NaCl y al utilizar el procesador de alimentos. Enseguida se apreció la aparición de hebras color verde claro. posteriormente se colocaron 5 mL del filtrado en cada uno de 3 tubos de ensayo y con mucho cuidado se agregaron 10 mL de etanol frío resbalando por las paredes. es decir al realizar el homogeneizado. Figura10. Estructura de la membrana celular y nuclear . Figura 9. puesto que la membrana de las células contiene dos capas de moléculas de lípidos con proteínas atravesándolas. que corresponden al ADN. al cabo de unos minutos dichas hebras comenzaron a ascender por el tubo.

El ADN entonces se encuentra en solución puesto que es soluble en agua junto con todo el contenido de la célula. Sin embargo no se adicionó ninguna enzima (bromelina o papaína) en su lugar se calentó durante 15 min a una temperatura aproximada a 80°C. así por tanto el ADN pudo ser separado de los demás componentes celulares los cuales permanecieron en solución acuosa. bromelina y papaína respectivamente las cuales contribuyeron a eliminar a las proteínas que pudieran contaminar el ADN. NaCl y agua se propició la lisis de las membranas celular y nuclear. De igual manera la . de esta manera cuando el detergente entró en contacto con los lípidos se organizaron formando una esfera con sus cabezas polares orientadas hacia el agua y sus colas hacia adentro pues éstas son hidrófobas. por tal motivo se adicionó el alcohol frío. donde el detergente actúo de la misma manera que se explicó para el caso de la cebolla. algo similar ocurre con las proteínas pues al haber una desorganización la proteína sale de la membrana y es atrapada por la parte no polar (hidrofóbica) ya sea de las proteínas o bien del lauril sulfato de sodio. igual si no es esta temperatura cámbiale xfas el efecto de la temperatura ayudó a suavizar a los lípidos que se encuentran en las membranas de esta manera ocasionando un desorden y por tanto contribuyó de igual manera al rompimiento de las membranas para liberar al ADN. para lograr aislarlo y apreciarlo fue necesario precipitarlo. En pocas palabras el uso del detergente capturó a los lípidos y proteínas que forman la membrana celular y nuclear ayudando a la liberación del ADN. Liberación del ADN por efecto del detergente Se utilizó jugo de piña y papaya ya que contienen una enzima. Para el caso de de la extracción del ADN del kiwi ocurrió un procedimiento muy parecido. De igual manera el empleo de sal NaCl ayuda a evitar la unión de las proteínas con el ADN. Figura 11. ya que cuando el ADN entró en contacto con el alcohol se desenrollo y por tanto precipitó en la interfase formada entre el agua y el alcohol. pues al hacer puré al kiwi y adicionarle la mezcla de detergente. No fue necesario el uso del procesador de alimentos puesto que el kiwi es un tejido más blando que la cebolla.Como se sabe la estructura de las moléculas del tensoactivo y los lípidos contienen una cabeza polar y una cola no polar.

De esta manera se obtuvo el homogeneizado donde el ADN de igual manera se encontraba disuelto en solución. puesto que no se realizó ninguna prueba de identificación como pudo ser someter al ADN a la reacción del difenilamina en medio ácido. la extracción hubiera podido lograrse empleando otras frutas como por ejemplo mango. Como se sabe el ADN se encuentra presente en el núcleo de todas las células de los seres vivos en forma de genes. De esta manera podemos suponer que efectivamente se extrajo al ADN de las dos muestras. Sin embargo no se confirmó que efectivamente lo obtenido correspondiera al ADN. es decir. específicamente en el núcleo de la célula en forma de gen. la cual como ya se explicó hubiera dado una coloración azul si efectivamente se hubiera extraído el ADN. . Asimismo comprendimos la importancia del ADN ya que éste se encuentra presente en todos los seres vivos. puesto que siguiendo el procedimiento habría de esperarse lograr la extracción del ADN. tanto de la cebolla como del kiwi. como lo es la 2-desoxirribosa presente en la estructura del ADN. CONCLUSIONES Se logró la extracción del ADN de tejidos vegetales. El fundamento de la reacción es el siguiente: en solución ácida la cadena lineal de una desoxipentosa se convierte a la forma β-hidroxilevulinoaldehído el cual es el que reacciona con difenilamina dando la coloración azul cuando la reacción es positiva. Por tanto sólo se puede suponer que de acuerdo a la técnica seguida efectivamente se extrajo al ADN. una de ellas hubiera podido ser la reacción con difenilamina. como ya se mencionó en el caso del ADN la que reacciona es la desoxirribosa.temperatura ayudó a desnaturalizar a las enzimas desoxirribonucleasas (ADNasas) las cuales si se encuentran presenten actúan sobre el ADN degradándolo en pedazos muy pequeños que sería imposible observarlos. incluyendo todos los vegetales almacenando información genética. Ésta es una reacciona general para las 2-desoxipentosas. incluyendo también a los vegetales como el kiwi y la cebolla empleados en la práctica. una vez más se adicionó alcohol frío con el propósito de aislarlo precipitándolo en la interfase etanol-agua. no obstante no podemos asegurarlo ya que no se realizaron pruebas de identificación. plátano o fresa. por medio de la aplicación de un método muy sencillo que nos ayudó a realizar una lisis de la membrana celular y nuclear para liberar al ADN del núcleo de la célula el cual se encontraba disuelto en solución acuosa. ya que cuando se trata al ADN en medio ácido con difenilamina se forma un compuesto de color azul. por lo tanto. para posteriormente separarlo en forma de precipitado con un poco de alcohol etílico. puesto que todo el tratamiento que se realizó indica que lo ocurrido fue efectivamente la extracción del ADN.

Recuperado el 5 de Mayo http://www.ar/archivos/duplicación. Págs.html de 2012. [en línea] Recuperado www.pdf el 5 de mayo de 2012. Consultadas 25-17.REFERENCIAS McGilvery.edu/es/units/activities/wheatgerm/background. “Conceptos bioquímicos. Dona a ver si puedes poner alguna otra biblio de algún libro que tengas.genetics.utah. (1997). Primera edición.korion. Recuperado el 5 de mayo http://learn. es que ahora si todo lo saqué de inter… Estructura del ADN.net/Laboratorio/Plummer/Chp08. Barcelona. de de 2012.bioquimica. Editorial Reverté. [en línea]. de Ácidos nucleicos.com.dogsleep. de . [en línea]. Robert W.pdf Extracción de ADN.

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