Proyecto de innovacin: Introduccin de las Tcnicas de Biologa Molecular en el CFGS de Laboratorio de Diagnstico Clnico

TERCERA PARTE:

PRCTICAS DE BIOLOGA MOLECULAR

IES La Granja

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Proyecto de innovacin: Introduccin de las Tcnicas de Biologa Molecular en el CFGS de Laboratorio de Diagnstico Clnico

1.1. Preparacin de reactivos 1.1.1. Preparacin de la solucin de dNTPs (10 mM) para PCR. 1.1.2. Preparacin de iniciadores a 10 M (=10 pmol/l) para PCR. 1.1.3. Preparacin de tampn TBE 5x y TBE 0.5x para electroforesis. 1.1.4. Preparacin de geles de agarosa 1.1.5. Preparacin de tampn de carga 5x para electroforesis 1.1.6. Preparacin de solucin de marcador de peso molecular (MK VIII) para electroforesis. 1.2. Tcnicas de amplificacin de material gentico: Reaccin en cadena de la polimerasa DETECCIN DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS (gen nuc) Y DEL GEN mecA QUE CONFIERE RESISTENCIA A METICILINA, A PARTIR DE LA AMPLIFICACIN POR PCR DEL EXTRACTO DE ADN OBTENIDO DE LA MUESTRA Y SU POSTERIOR ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA. 1.3. Tcnicas de hibridacin con sondas TCNICAS DE IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS POR DETECCIN DE GENES ESPECFICOS MEDIANTE HIBRIDACIN, IDENTIFICACIN DE ESPCIES NO PATGENAS DEL GNERO MYCOBACTERIUM POR HIBRIDACIN REVERSA INNO-LIPA. 1.4. Tcnicas de amplificacin y digestin con enzimas de restriccin DETECCIN Y CARACTERIZACIN DE GENES DE RESISTENCIA QUE CODIFICAN LA PRODUCCIN DE ENZIMAS BETALACTAMASA EN UNA CEPA DE ESCHERICHIA COLI AISLADA EN CULTIVO, MEDIANTE PCR Y POSTERIOR DIGESTIN DEL AMPLIFICADO CON EL ENZIMA DE RESTRICCIN NheI.

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