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Antologa de Fisiologa vegetal

BIN-0520 Xavier Rivera Hernndez

Una caledonia menor (Ranunculus ficaria) sigue la trayectoria del Sol.

Introduccin La presente antologa, se elaborada con el firme propsito de que pueda servir de apoyo a los alumnos que cursan la materia de fisiologa vegetal. Tiene una sntesis bsica de la materia, por lo que no debe ser considerada como material nico, sino de apoyo a la bibliografa ms avanzada. Se ha cuidado mucho que los temas sean apoyados con figuras, ilustraciones, tablas y mapas mentales para que el alumno sea vean interesados en el fascinante mundo de la fisiologa vegetal. Al principito se pretendi abarcar todo el temario, sin embargo el tiempo que no perdona nos impidi culminar con todas las unidades. Mientras tanto hemos incluido las unidades de historia de la fisiologa vegetal, el movimiento del agua, la fotosntesis, nutricin mineral, fijacin de nutrientes y crecimiento y desarrollo. Se espera que les sirva de aliciente para continuarlo o mejorarlo, en pro del conocimiento de est importante rama de la biologa.

Objetivos generales del curso Aprender y diferenciar los componentes de la raz, tallo y hoja, sus funciones y las diferentes partes de la clula, estructuras subcelulares y su relacin con el agua de los procesos bsicos del metabolismo y respiracin. Comprender los procesos de nutricin y transporte de iones Reconocer los patrones de crecimiento y desarrollo, el efecto de las hormonas vegetales en las plantas, as como su diferenciacin, su crecimiento diferencial y el efecto del medio ambiente contaminado en la fisiologa de la planta. Conocer las nuevas tcnicas de biologa molecular de las plantas.

ndice 1. Historia de la fisiologa vegetal ........................................................................................... 5 1.1 Introduccin ................................................................................................................... 5 1.2 Los primeros fisilogos y sus aportaciones ................................................................... 6 1.3 Investigadores relevantes en la Fisiologa Vegetal...................................................... 10 1.4 Hitos de la Fisiologa Vegetal ..................................................................................... 20 2. Movimiento del agua ......................................................................................................... 22 2.1 Introduccin ................................................................................................................. 22 2.2 Potenciales ................................................................................................................... 23 2.2.1 Potencial hdrico ................................................................................................... 23 2.2.2 Potencial de presin (p)..................................................................................... 25 2.2.3 Potencial osmtico (s) ........................................................................................ 25 2.2.4 Potencial de gravedad (g) ................................................................................... 26 2.2.5 Potencial mtrico (m) ......................................................................................... 26 2.3 Mecanismos propuestos sobre la absorcin del agua .................................................. 28 2.4 Movimiento radial del agua ......................................................................................... 31 2.5 Absorcin de sales minerales ...................................................................................... 36 2.5.1 Absorcin pasiva .................................................................................................. 36 2.5.2 Absorcin activa ................................................................................................... 37 2.6 Transporte del Floema ................................................................................................. 39 3. Fotosntesis ........................................................................................................................ 41 3.1 Introduccin ................................................................................................................. 41 3.2 Pigmentos fotosintticos .............................................................................................. 48 3.3 Fase luminosa .............................................................................................................. 55 3.3.1 Fotofosforilacin cclica y no cclica ................................................................... 65 3.4 Fase escura................................................................................................................... 67 3.5 Ciclo de Hatch Slack o metabolismo C4 .................................................................. 71 3.6 Metabolismo cido de las crasulceas ......................................................................... 75 3.7 Factores que influyen en la fotosntesis ....................................................................... 79 3.8 Fotorespiracin ............................................................................................................ 80 4. Nutricin mineral ............................................................................................................... 84 4.1 Macronutrientes ........................................................................................................... 85 4.2 Los micronutrientes ..................................................................................................... 85 4.3 Fuente de los minerales ............................................................................................... 91 4.4 Absorcin de sales minerales ...................................................................................... 95 4.5 Transporte de nutrientes inorgnicos ........................................................................... 97 4.6 Suministro de nutrientes y crecimiento ....................................................................... 97 4.7 Factores que influyen en la nutricin mineral. .......................................................... 103 4.8 Micorrizas .................................................................................................................. 105 4.8.1 Ventajas de la micorrizacin .............................................................................. 106 4.8.2 Tipos de micorrizas ............................................................................................ 107 5. Fijacin de nutrientes ...................................................................................................... 108 5.1 Fijacin de nitrgeno ................................................................................................. 108 5.1.1 El proceso de infeccin....................................................................................... 108 5.1.2 La biologa molecular de la fijacin de nitrgeno .............................................. 111 5.1.3 Bioqumica de la fijacin del nitrgeno ............................................................. 111 3

5.2 Ciclo del nitrgeno .................................................................................................... 112 5.2.1 Fijacin del nitrgeno ......................................................................................... 113 5.2.2 Amonificacin .................................................................................................... 114 5.2.3 Nitrificacin ........................................................................................................ 114 5.2.4 Desnitrificacin .................................................................................................. 115 6. Crecimiento y desarrollo ................................................................................................. 118 6.1 Crecimiento y desarrollo ........................................................................................... 120 6.2 Embriognesis ........................................................................................................... 123 6.3 Hormonas del crecimiento vegetal ............................................................................ 127 6.4 Auxinas ...................................................................................................................... 131 6.4.1 Efectos de las Auxinas ........................................................................................ 132 6.4.2 Sntesis de auxinas .............................................................................................. 139 6.4.3 Transporte de auxinas ......................................................................................... 140 6.4.4 Cmo actan las auxinas .................................................................................... 143 6.5 Giberelinas ................................................................................................................. 145 6.5.1 Funciones de la giberelinas................................................................................. 146 6.5.2 Sntesis ................................................................................................................ 151 6.5.3 Transporte ........................................................................................................... 152 6.5.4 Como actan las giberalinas ............................................................................... 152 6.6 Citocininas ................................................................................................................. 154 6.6.1 Efectos de las citocininas.................................................................................... 156 6.6.2 Sntesis de citoquinina ........................................................................................ 159 6.6.3 Transporte de citocinina ..................................................................................... 161 6.6.4 Como funcionan las citocininas.......................................................................... 161 6.7 Etileno........................................................................................................................ 162 6.7.1 Efectos del etileno .............................................................................................. 165 6.8 cido abscsico .......................................................................................................... 171 6.8.1 Efectos del cido abscsico ................................................................................. 172 6.8.2 Sntesis de acido abscsico.................................................................................. 175 6.8.3 Transporte del cido abscsico............................................................................ 176 6.9 Otras fitohormonas .................................................................................................... 177 6.10 La luz como seal para el desarrollo ....................................................................... 178 6.10.1 Fotomorfognesis ............................................................................................. 178 6.10.2 Fotoperiodismo ................................................................................................. 178 6.10.3 Fitocromo ......................................................................................................... 179 6.10.4 Floracin ........................................................................................................... 179 6.10.5 Germinacin ..................................................................................................... 184 Referencias .......................................................................................................................... 187

1. Historia de la fisiologa vegetal 1.1 Introduccin La Fisiologa Vegetal es la ciencia que estudia los procesos (a nivel comunidad, individuo, celular y subcelular/moleculares, biofsicos y bioqumicos), responsables del crecimiento y supervivencia (funcionamiento) de las plantas (Figura 1). Figura 1. Los factores ambientales naturales y antropognicos afectan y modifican el crecimiento de las plantas.

Las plantas, se pueden considerar como sistemas termodinmicamente abiertos (Figura 2) que intercambian materia y energa con el medio que les rodea en funcin del espacio y del tiempo. La morfognesis vegetal presenta carcter nico, ya que la organognesis es: ILIMITADA: mientras que no exista un factor que altere el proceso de crecimiento, los meristemos se van a mantener activos. REPETITIVA: mientras que se mantengan determinadas propiedades de correlacin se va a mantener las mismas pautas de diferenciacin. REVERSIBLE: salvo determinados tejidos, la mayora de los tejidos celulares son capaces de dar el rgano que nosotros queremos que d. Estos cambios no implican cambios en el genoma. La polipotencia celular junto con las caractersticas de la organognesis, constituyen los pilares bsicos de la Biotecnologa, y confieren a la Fisiologa Vegetal, como ciencia moderna, carcter aplicado. Figura 2. Las plantas como sistemas termodinmicamente abiertos, estn en relacin directa, con otros organismos (plantas, animales y microorganismos, as como con el hombre) y el medio, y regulan sus procesos basados en estas relaciones.

1.2 Los primeros fisilogos y sus aportaciones El desarrollo histrico de la Fisiologa Vegetal se puede dividir en tres grandes perodos: 1. Observacin: Perodo pre-cientfico, donde la Botnica descriptiva, (cuyos orgenes ya se remontan al Neoltico con la agricultura, continuando por la Grecia Clsica, el Imperio Romano y hasta el Renacimiento, siendo la Edad Media una poca que impidi el desarrollo de la ciencia) inclua estos aspectos de estudio. Teofrasto (300 a. C.): Etiologa de las plantas, trat la morfologa de las monocotiledneas y dicotiledneas. Clasificacin.

Aristteles (384-322 a.C.): teora del humus puesta en tela de juicio por Van Helmont y totalmente abandonada en el s.XIX gracias a los trabajos de Liebing. (En la fotografa Aristteles dando clases a Alejandro Magno).

Paracelso (s. XV): intenta explicar qumicamente y alquimstamente procesos fisiolgicos de las plantas.

Descartes (s. XVI): propone teora Mecanicista frente a las teoras Vitalistas de la poca: Vitalismo: el ser vivo posee una fuerza vital que no se deriva de la organizacin fisicoqumica. Mecanicismo: considera al ser vivo como un organismo que opera de acuerdo con las leyes de la fsica y qumica y toda la complejidad es consecuencia de la interaccin de fuerzas fisicoqumicas en el complejo sistema de organizacin del protoplasma.

Destacan autores como Cesalpinus y Jung por establecer los comienzos de la morfologa comparada de plantas, y ms tarde Linneo con su Species Plantarum. Hasta 1630 se saba que los animales crecan y se desarrollaban en dependencia de la cantidad de alimento que ingeran. Por lo que se crea que las plantas hacan lo mismo con lo que tomaban del suelo. La demostracin de lo errnea que estaba esta ultima teora la dio: Jan Baptista Van Helmont (1577-1644), medico belga realizo el siguiente experimento: Planto un sauce pequeo al cual tan solo le aadi agua durante 5 7

aos, al final de este tiempo cuantifico el incremento de peso de la planta y observo que este no corresponda con el peso que haba disminuido la maceta. Al observar esto concluyo que el sauce no creci de todo lo que tomo del suelo, que las sustancias de la planta originaron del agua. Esta conclusin era insuficiente dado a que dejo de un lado factores como la temperatura, aire, entre otros que hacen parte de la fotosntesis, de la cual hasta entonces no se saba.

Los descubrimientos de Hales, Priestley e Ingenhousz contribuyeron a definir la condicin foto auttrofa de las plantas entrados ya en el siglo XVIII. Joseph Priestley (1733-1771), qumico ingles, resolvi el problema de la combustin que hacia que si en un recipiente cerrado se dejaba arder una vela, esta se apagaba pronto y que si en ese ambiente colocaba un ratn, este mora porque la vela haba eliminado el oxigeno que este necesitaba. Priestley coloco en este mismo ambiente una planta y observo que al encender la vela esta segua ardiendo y que si se pona un ratn este viva durante un tiempo. Con esto concluyo que la planta haba reestablecido el aire que la combustin de la vela haba consumido.

Jan Ingenhousz (1730-1799), medico holands, continu los trabajos anteriores y


encontr qu: "...La "purificacin del aire" solamente ocurre en la luz solar. Las plantas durante la noche o en la sombra contaminan el aire que les rodea, arrojando aire daino para los animales..." "...Solamente las partes verdes de las plantas "purifican el aire"..." "...El sol de por s no tiene poder para enmendar el aire sin la concurrencia de las plantas..."

Como resultados de estos experimentos, los cientficos contaron con el primer concepto de fotosntesis: "Las partes verdes de las plantas, en presencia de la luz solar, toman dixido de carbono del aire, liberan oxgeno, se desarrollan y crecen

2. Cientfica: En el s. XIX se consolida el mtodo cientfico (ver seminario curso 2004-05) y se llevan a cabo numerosos descubrimientos que contribuirn al desarrollo de la Fisiologa Vegetal: la Teora Celular, respiracin y fermentacin, mitosis y meiosis, etc. Saussure demostr temas importantes relacionados con la nutricin vegetal y Von Sachs contribuye en el campo de las relaciones entre las distintas partes de la planta y el desarrollo de yemas y races demostrando la importancia de la turgencia en el crecimiento de los rganos; prev la existencia de fitohormonas y describe la importancia de la luz y de la gravedad para el desarrollo vegetal. Es considerado como el padre de la Fisiologa Vegetal En esta fase desarrollan las ciencias como tal y aparecen las distintas divisiones de las mismas y todas, tanto ciencias como divisiones basadas en el mtodo cientfico. La Fisiologa Vegetal se convierte en ciencia cuando a partir del mtodo cientfico puede crear un cuerpo doctrinal propio (integra conocimientos especficos de la esta misma) Mtodo cientfico Proceso mediante el cual una teora cientfica es validada o descartada, basndose en dos principios fundamentales como son: el primero es la reproducibilidad, es decir, que la validez del experimento realizado se pueda demostrar en repetidas ocasiones. El segundo de estos principios es la falsabilidad, es decir, el hecho de que, en caso de que un experimento niegue la hiptesis marcada acerca del fenmeno, sta pueda considerarse como falsa. Este mtodo Nace a finales del siglo XVI con los experimentos de Galileo Galilei. Destaca entre todos ellos el realizado en 1590, cuando, desde lo alto de la Torre de Pisa, demostr que un objeto pesado y uno ligero caen a la misma velocidad llegando al mismo tiempo al suelo. Con ello demostr, mediante el mtodo antes mencionado, su hiptesis, que en este caso era la idea de que las fuerzas que actan sobre un cuerpo son independientes de la masa del mismo. El estudio sistemtico, controlado y critico de proposiciones hipotticas acerca de presuntas relaciones entre varios fenmenos (F. S. Kerlingern) El mtodo cientfico consta de varios procesos, que, aunque de forma variable, suelen ser: 1.- Observacin de un fenmeno 2.- Planteamiento del problema 3.- Formulacin de hiptesis 9

4.- Diseo experimental (dispositivo que pueda probar la validez de nuestras hiptesis) 5.- Obtencin de conclusiones 3. Genmica y postgenmica El s. XX, el de la explosin cientfico-tecnolgica, supone: Comprensin de bases gentico-moleculares, el gran desarrollo de la bioqumica, descubrimiento del DNA y descifrar el cdigo gentico, etc. Estas disciplinas (biologa molecular y celular) son muy importantes para la Fisiologa Vegetal, pues aportan herramientas metodolgicas y conceptuales. El desarrollo de la Fisiologa Vegetal. Relacin de la fisiologa vegetal con otras ciencias: La fisiologa vegetal es una ciencia multidisciplinar que ana conocimientos de otras ciencias (Fsica, Qumica, Gentica, etc.), para explicar los procesos esenciales que intervienen en la funcionalidad de las plantas. La integracin de las disciplinas biolgicas supone un avance en la biotecnologa. Esto posee mucho ms valor que la suma de su importancia por separado. Y en la actualidad cada vez son ms comunes los estudios que engloban dos o ms reas. Situacin actual En un principio la fisiologa vegetal constituye una ciencia acadmica, con pocas repercusiones practicas. Actualmente tiene una gran aplicacin a nivel. 1. Sector Agrario: Produccin de plantas Cultivos hidropnicos Ingeniera Gentica Conservacin de germoplasma Desarrollo de agricultura biolgica Productos agroforestales Recuperacin de zonas deterioradas 2. Sector Industrial: Produccin de biomasa Tratamiento de residuos 3. Sector Servicios: Turismo ecolgico Agroturismo 1.3 Investigadores relevantes en la Fisiologa Vegetal Priestley: Descubri el oxgeno como producto de la fotosntesis. 10

Ingenhousz (1779): Concluye que las plantas vician el aire tanto en la luz como en la oscuridad. A su vez Senebier aade que la capacidad de las plantas para regenerar el aire depende de la presencia de aire fijado (anhdrido carbnico) Jan Baptista van Helmont (1577-1644): Primer experimento cuantitativo en nutricin mineral. Julius von Sachs (1860): Demuestra que las plantas pueden crecer en soluciones nutritivas sin falta de aadir la fase slida del suelo. Prepara soluciones nutritivas donde estn todos los elementos necesarios para el crecimiento de la planta. Lamport (1978): Su hiptesis dice que las glicoprotenas de la pared pueden formar un esqueleto independiente de los polisacridos de la misma. Fry (1982): Pone de manifiesto la existencia de dmeros de tiroxina en la protena estructural de la pared. Tambin ha descrito numerosos puentes de unin entre componentes de la pared (1986). Unin de xiloglucano a ms de una microfibrilla (1989) Entre los dos crean el modelo de estructuracin de la pared celular urdimbre-trama (warp & weft) Tupper-Carey y Priestley (1924): Fueron los primeros en aislar protenas a partir de paredes celulares de tejidos meristemticos en Vicia faba (experimento confirmado en el ao 1965 al identificar Lamport una protena estructural en paredes celulares). Lorences y Fry (1993): Sugieren que los oligosacridos derivados del xiloglucano xG9 y xG7 actuaran como aceptores de la endo-xiloglucantransferasa, dependiendo su actividad de su estructura al contrario de lo que pensaban Farkas y Maclachlan (1988) que decan que esos oligosacridos promovan la actividad endo-B (1-4)-D-glucanasa. Albersheim (Keegstra y cols.1973): Postul un modelo en que los polisacridos matriciales estaran unidos entre s mediante enlaces O- glicosdicos, y unidos a las microfibrillas de celulosa mediante puentes de hidrgeno a travs del xiloglucano. Engelmann (1894): Demostr que el proceso fotosinttico tiene lugar esencialmente en los cloroplastos. Demostrado con el cloroplasto nico de Spirogyra. Thornber: Los pigmentos de la antena vegetal son clorofilas y carotenoides aunque hay mayor variedad de especies qumicas entre los pigmentos de la antena que entre los del centro de reaccin. Blackman y colaboradores (1900): Llegaron a la conclusin de que la difusin del anhdrido carbnico al interior de las hojas estaba estrechamente relacionada con la presencia y nmero de estomas. Demostraron que si se suministraba CO2 al haz o al envs de una hoja, la intensidad de la fotosntesis era proporcional al nmero de estomas de la superficie que se aplicaba. Tambin vieron que dependa del grado de apertura de dichos estomas. 11

Emerson y Arnold (1932): Expusieron una solucin de algas Chlorella a destellos luminosos midiendo la produccin de oxgeno por destello aumentaba de forma proporcional al aumentar la energa de los mismos hasta que se alcanzaba un techo; el comportamiento era anlogo al que tena lugar en luz continua. Hill (1937): Observ que al iluminar preparaciones celulares, que contenan cloroplastos, en presencia de algunos aceptores artificiales de electrones, se produca desprendimiento de oxgeno y reduccin del aceptor de electrones segn la reaccin: 2 A+ H2O + luz 2AH2 + O2 Es la llamada ecuacin de Hill Arnon (1954): Descubri que cloroplastos iluminados podan formar ATP a partir de ADP y fosfato. Surge as la posibilidad de que el ATP tambin se utilizase en la fase oscura del proceso fotosinttico y se regenerase en la fase luminosa. Aislamiento de una protena insoluble en cloroplastos de espinaca, que cuando se aada a bajas concentraciones de granas, catalizaba la fotorreduccin del NADP+, siendo el NAD+ reducido con una intensidad mucho menor (1957). En 1957 Arnon y colaboradores suministran una evidencia experimental del acoplamiento entre fotofosforilacin y fotorreduccin del NADP+. W.A. Frenckel: Casi simultneamente a los trabajos de Arnon descubre que, mediante iluminacin de las vesculas membranosas de la bacteria fotosinttica Rodospirillum rubrum, se produca un proceso de fosforilacin muy semejante. Esto indica que la formacin de ATP a partir de ADP y fosfato es consecuencia del acoplamiento energtico de la fotofosforilacin al proceso de transporte de electrones fotoinducido, en gran parte del mismo modo que la fosforilacin oxidativa est acoplada al transporte electrnico en las mitocondrias. Kok: Identific en clulas con fotosntesis oxignica un componente de mximo de absorcin a 700 nm que se designa como P700. San Pietro y Lang (1956): Encuentran que, incubando durante largo tiempo (1 hora) concentraciones elevadas de granas, se acumulaban grandes cantidades de NADH; el NADP+ era reducido con menor intensidad que el NAD+. Slater (1953): Propone la Hiptesis del acoplamiento qumico, que postula que la reaccin de transferencia electrnica productora de energa se acopla a la reaccin consumidora de energa en la que se forma ATP a travs de un intermediario comn rico en energa, y originado por la formacin de enlaces qumicos entre los transportadores de electrones y los enzimas o incluso los sustratos de la reaccin de fosforilacin y posterior oxidacin de estos complejos. Boyer (1964): Propone la Hiptesis del acoplamiento conformacional, que postula que la energa producida en el transporte de electrones se conserva en forma de un cambio de conformacin provocado en una protena transportadora de electrones o la molcula del factor acoplante. 12

Peter Mitchell (1961): Formul la hiptesis Quimiosmtica, que es la que goza de ms aceptacin. Propone que el flujo de electrones a travs del sistema transportador conducir protones a travs de la membrana del cloroplasto, mitocondrias y clulas bacterianas generndose as un gradiente electroqumico de protones a travs de la membrana. Este gradiente sera el necesario para la sntesis de ATP. Adr Jagendorf (1966): Presenta una prueba concluyente en apoyo a la teora quimiosmtica de Mitchell. En su experimento demostraba que es posible la sntesis de ATP en cloroplastos sin luz y slo por la creacin de un gradiente de pH a travs de las membranas tilacoidales. Calvin, Benson y Bassham (1949): Realizaron varios experimentos que les llevaron al descubrimiento de los distintos pasos del proceso global de conversin de CO2 en carbohidratos. Este ciclo es mejor conocido con el nombre de Ciclo de Calvin. Para el descubrimiento del ciclo al completo fue necesaria la conjuncin de varios y distintos experimentos. Seemann y colaboradores (1990): Descubri la existencia de un inhibidor de la rubisco aunque su papel de regulacin sobre la misma an no est del todo claro. Buchanan (1980): Descubri que al oxidarse residuos de cistena se forma un puente ditiol y la unin entre diferentes residuos cistena puede alterar a la rubisco causando su activacin o inactivacin. Kortschah (1954): Encontr que los primeros productos de fijacin fotosinttica CO2 marcado con carbono 14 no son molculas de 3 tomos de carbono sino de 4, concretamente el cido asprtico y el cido mlico. Hatch y Slack: Demostraron la importancia de la nueva va de fijacin que comenz a ser ampliamente aceptada hacia mediados de la dcada de los 60. A las plantas que presentaban esta va de fijacin se las denomin plantas C-4. Warburg (1920): Encontr que la fotosntesis medida como CO2 asimilado es inhibida por altas concentraciones de oxgeno en la atmsfera. El efecto Warburg es la inhibicin de la fotosntesis por el oxgeno. Owen y Browes (1971): Sugirieron que el cido gliclico se formaba a partir de la ribulosa-1,5-difosfato con oxgeno. Lorimer y Andrews (1973): Explicaron el origen de la fotorrespiracin por una reaccin entre RuDP y oxgeno en el centro activo de la RuDP carboxilasa. Liebig (1843): Haba propuesto la ley del mnimo, segn la cual cuando un proceso es regulado por una serie de factores, la tasa total del proceso est limitada por el factor ms lento. A partir de esto Blackman formul su principio de los factores limitantes. Segn este principio, la tasa de fotosntesis est limitada por uno solo entre todos los factores que 13

puedan actuar al mismo tiempo, siendo proporcional a la cantidad de ese factor, pero cesa la proporcionalidad cuando otro factor se hace limitante (ver ms abajo). H.A. Krebs (1937): Propuso esta secuencia cclica de reacciones, hoy conocida como Ciclo de Krebs, para explicar la degradacin del piruvato. Tambin denominado ciclo del cido ctrico o de los cidos tricarboxlicos y se encuentra localizado en el interior de las mitocondrias. Chardakov: Cre el mtodo de tincin de Chardakov que es una de las variantes ms usadas dentro de los mtodos densitomtricos. Nobel (1991): Propiedades fsicas y qumicas exclusivas del agua. Tang y Wang (1941): El trmino potencial y en general, el tratamiento ms antiguo q se conoce sobre el uso de los conceptos termodinmicos en plantas corresponde a estos dos autores. Hfler: En su diagrama muestra las interrelaciones entre volumen celular, potencial osmtico, potencial hdrico y potencial de presin. Van der Honert (1948): Introdujo un modelo de analoga a la ley de Ohm, en el que la intensidad del flujo de agua depende directamente del gradiente de potencial hdrico y est en razn inversa a las resistencias. Josef Bhm (1892), H.H. Dixon y John Joly (1894) y Askenasy (1895): Gracias a sus trabajos y deducciones se origin la teora de la adhesin-cohesin, aunque en algunos aspectos puede haber objeciones esta teora est bien afianzada. Fick (1885): Estableci sobre las bases empricas lo que actualmente se conoce como la 1 ley de Fick o de la difusin. Tambin enunci la 2ley de Fick. John Woodward (1665-1728): Constata que el agua que penetra en las plantas por los poros y es exhalada a la atmsfera arrastra en disolucin una gran cantidad de sustancias minerales, que de esta forma penetran en la planta. Estos experimentos estn basados en el mayor crecimiento de la planta en agua con algunas sustancias disueltas que en agua destilada. Stephen Hales (1677-1761): Estudi los movimientos del agua en las plantas y se interes por los mecanismos de circulacin de la savia, fue de los primeros en comprobar que el aire contribua de alguna forma a la nutricin vegetal. Puede considerarse el precursor de los trabajos que aos mas tarde realizaron Priestley, Ingenhousz y Senebier. Theodore de Saussure (1787-1845): Trabajos realizados con Polygonum persicaria crecida en soluciones de una sal y algunos solutos orgnicos. Observa que no todos los solutos son absorbidos por la planta de igual modo.

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Carl Sprenger (1787-1859): Seala que el suelo puede ser a veces improductivo debido a la deficiencia en un solo elemento que es necesario para las plantas. Es una clara definicin de la ley del mnimo que fue errneamente atribuda a Justus von Liebig cuya aportacin principal a la nutricin mineral fue la anulacin de la teora del humus, segn la cual la materia orgnica del suelo era la fuente que suministraba el carbono que las plantas absorban. W. Knop (1865): Publica una solucin nutritiva para las plantas que ha sido usada durante largo tiempo. Todas las soluciones nutritivas actuales son modificaciones de las de Sachs y Knop. Mitscherlich (1909): Como resultado de sus reflexiones sobre la ley del mnimo dice que el rendimiento de una cosecha siempre depende del elemento nutritivo ms dbilmente representado. Esto es lo que se conoce como la Ley de Mitscherlich. Nerst, ussing-teorell y Goldman: Gran importancia de sus reacciones o ecuaciones no directamente en la fisiologa vegetal pero si indirectamente al estar muy relacionados con los procesos de difusin movimiento absorcin...y dems. Pfeffer (1900): Reconoci la absorcin contra gradiente por medio de transportadores sobre todo a partir de los estudios de Lundegard (1933) y de Epstein (1952). Postgate (1987): Estableci como caractersticas bsicas del enzima Nitrogenasa: Consta de dos sistemas proteicos Es destruida por el oxgeno Contiene tomos de metales de transicin como hierro(Fe) y molibdeno(Mo) Necesita Mg2+ como cofactor para su activacin Convierte ATP en ADP Es inhibida por el ADP Reduce N2 y otras molculas con triples enlaces Reduce iones hidrgeno a gas H2 hasta en presencia de N2 Schubert y Evans (1976): Definieron el trmino de eficiencia relativa como la proporcin del flujo total de electrones que atraviesa el enzima nitrogenasa y que no es perdido en la produccin de O2. Dixon (1972): Ha sugerido tres mecanismos para explicar que el reciclaje de H2 por la hidrogenasa puede aumentar la eficiencia de la fijacin de N2. Gibson (1966): Fue uno de los primeros en comparar el crecimiento de plantas noduladas y fertilizadas, concluyendo que donde exista una simbiosis bien adaptada al sistema simbitico era igual de eficiente en el crecimiento. Lea y Miflin (1974): Encontraron que las plantas, al igual que antes se haba demostrado en bacterias, asimilaban el NH4+ mediante dos reacciones consecutivas. Lass y Ulrich-eberius (1984): Propusieron que el sulfato es cotransportado al interior de la clula con un exceso de protones. 15

Datko y mudd (1984): Proponen que a altas concentraciones el sulfato tambin puede entrar a la clula mediante difusin libre. Grill y colaboradores (1990): Observaron que la sntesis de fitoquelatinas se estimula por la presencia en el medio de metales pesados, lo que apoya la hiptesis de que una de sus principales funciones es la detoxificacin de dichos metales. Theodor Hartig: descubre los tubos cribosos (1837), descubre la exudacin del xilema y del floema (1860). La tcnica utilizada pone de manifiesto el papel del floema fue la del descortezamiento anular procedimiento ideado por Stephen Hales en 1726. Mason y Maskel (1928): En plantas de algodn y usando tcnicas de descortezamiento anular y anlisis de azcares establecen claramente el papel del floema en el transporte de solutos. Tambin demostraron que la direccin normal de transporte de una sustancia podra invertirse cambiando la posicin de los rganos suministradores y de los consumidores de dichas sustancias. As se cre el concepto de fuentes y sumideros. Tambin encuentran que el transporte del floema presentaba muchas similitudes con el proceso de difusin aunque vio que el transporte de sacarosa era mucho ms rpido que por simple difusin. Curtis (1935): Demuestra en Philadelphus pubescens y en Rhus typhina tambin por descortezamiento anular, que el transporte de azcares hacia las yemas apicales, es decir, transporte ascendente de azcares hacia las yemas, tiene tambin lugar por el floema. Van den Honert (1932): Aporta la posibilidad de que el transporte de solutos puede tener lugar por medio de interfases originadas dentro de los elementos cribosos. Ernest Mnch (1930): Postula su hiptesis del flujo de presin (flujo en masa). Teora que hasta ahora consta de mayor xito y aceptacin. Spanner (1958): Propone la hiptesis electroosmtica que implica una circulacin de iones en las placas cribosas mantenidas por la actividad metablica. De Vries (1885): Fue el primero en sugerir que alguna clase de movimiento protoplsmico podra ser el responsable del movimiento de solutos por los tubos cribosos. Canny (1962): Desarrolla la hiptesis de las corrientes transcelulares. En su modelo una serie de filamentos transcelulares atraviesan los tubos cribosos a travs de los poros de las placas cribosas. Thaine (1964): Propone que los filamentos que atraviesan los elementos cribosos son tubos fibrilares rodeados por una membrana, con paredes contrctiles capaces de generar movimiento.

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Fensom (1972): Propone la existencia de una red de material microfibrilar en el interior de los tubos cribosos, formada por unos tbulos de dimetro muy pequeo que pueden presentar contracciones ondulares y que atravesarn las placas cribosas. Masuda (1978): Propone un modelo para explicar la extensin de la pared, basado en que la extensin celular es la expresin de una serie de pasos independientes de la extensin. Bonner (1934): Demostr que la incubacin segmentos de coleoptilos de avena en soluciones cidas produce un crecimiento similar al inducido por las auxinas. Boysen Jensen (1910): Corta el pice de un coleoptilo y observa que este no se curva y, sin embargo al reemplazar el pice, unindolo al coleoptilo mediante un bloque de agar o gelatina, hay curvatura del mismo. Paal (1929): Propuso que haba una sustancia estimulante del crecimiento excretada por el pice y que difunda de forma asimtrica, haciendo que creciera ms la zona oscura que la iluminada. Dolk: Demostr que, si un coleoptilo se coloca horizontalmente, la parte inferior contiene ms de sta sustancia de crecimiento, casi el doble, que la parte superior. Thimann: Sus trabajos pusieron de manifiesto que las auxinas se encuentran en la planta en tres formas: Una de fcil extraccin Otra que requiere para su extraccin el empleo de solventes orgnicos Otra que requiere mtodos enrgicos, como puede ser la hidrlisis con NaOH o el empleo de enzimas hidrolticos. Sawada: Su idea de que los sntomas que aparecan en las plantas podan ser debidas a sustancias excretadas por el hongo fue confirmada por Kurosawa en 1926. Haberlandt (1913): Encontr que de los tejidos floemticos difunda una o unas sustancias capaces de inducir la divisin celular de tejido parenquimtico de patata. Esto hizo que la idea de Wiesner (1892) de que tena que existir en las plantas un sistema que controlase la divisin celular. Posteriormente el mismo Haberlandt observ que cuando se colocaban clulas manchadas alrededor de una herida aumentaba la divisin celular en los bordes de la misma, efecto que desapareca al lavar la herida. Skoog: Observ que los segmentos de tallo de Nicotiana tabacum que incluan corteza, vasos y mdula, no crecan bien en un medio simple y necesitaba aadirle una auxina para que hubiera alargamiento y proliferacin de la mdula. Miller: Logr aislar de semillas de maz una citoquinina que era una adenina sustituda en el grupo amino 6, con una cadena lateral insaturada y que tras cristalizacin y estudio de sus propiedades por Lethman se denomin Zeatina.

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Cousins: Fue el primero que apunt la posibilidad de que hubiera frutos que maduraran por tener otros cerca y dijo que poda ser debido a la produccin de una sustancia voltil producida por los frutos maduros. Wiesner (1878): Estudia las curvaturas y mutaciones producidas en los tallos de algunas plntulas, observando que aquellas que crecan en oscuridad, en vez de hacerlo verticalmente mostraban geotropismo negativo, tomando una posicin horizontal. Palni y colaboradores (1988): Demostraron que las concentraciones de auxinas producen una acumulacin de metabolitos degradados de las citoquininas. Basndose en esto se ha propuesto que las auxinas incrementan la actividad de la citoquinina oxidasa. Taln y colaboradores (1990): Descubrieron que en Arabidopsis, una sola protena parece catalizar ambas reacciones en las tres vas biosintticas de sntesis de giberelinas. Molisshn (1884): Se refiere al efecto que el gas del alumbrado y el humo producen en la respuesta geotrpica de las races. Este hecho pasa desapercibido y en 1901 Neljubow demuestra que la orientacin horizontal observada por Wiesner era debida a la presencia del gas del alumbrado en el laboratorio, identificando etileno y acetileno como los componentes activos, siendo el etileno el ms potente y caracterstico en los sntomas producidos, es decir, reduccin de la elongacin, aumento de la expansin radial del tallo y orientacin horizontal. Adams y yang: Demostraron los pasos que van desde SAM hasta Etileno en tejido de manzana comparando el metabolismo de la metionina en aire y en atmsfera de nitrgeno. Seymour Cohen (1971): Hizo la primera referencia acerca del posible papel de las poliaminas en la fisiologa de las plantas. Addicot (1963): Logr el aislamiento de una sustancia agonista del AA y le dio el nombre de Abscisina II. Ohkuma y colaboradores (1965): Obtuvieron su estructura que fue ms tarde confirmada por el equipo de Cornforth en el mismo ao. Se vio que esta sustancia era el constituyente mayoritario del inhibidor . Mohr: Define la fotomorfognesis como el control por la luz del desarrollo (crecimiento diferenciacin y morfognesis) de las plantas por un proceso independiente de la fotosntesis. Garner y Allard (1920): Vieron que el control de la floracin en algunas plantas dependa de la duracin da noche (fotoperiodismo) Flint y McAlister (1935): Comprobaron que la luz roja induca la germinacin de semillas de lechuga, mientras que la luz roja lejano la inhiba. Para detener estas respuestas biolgicas bastaba luz de baja energa.

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Borthwick y Hendricks (1952): Comprobaron con semillas sensibles a la luz de Lactuca sativa estudiando su espectro de accin que tenan un mximo a 660 nm para el estmulo de la germinacin y a 730 nm para la inhibicin. Hartmann: Estudios del control del alargamiento del hipoctilo de Lactuca sativa . Skoog y Miller (1957): Descubren en cultivos de callos de tabaco, que una relacin citoquinina/auxina elevada induca la formacin de yemas, mientras que una relacin baja favoreca la formacin de races; niveles intermedios favorecan la proliferacin del callo. Bateson (1894): Fue el primero en utilizar el trmino homeosis utilizado para describir la identidad de los rganos, es decir, la formacin del rgano correcto en el lugar adecuado. Thimann (1937): Propone lo que se conoce como teora de la accin directa de la auxina, basada en la idea de que diferentes rganos responden de manera diferente a ella. Cholodny: Especul que la asimetra del crecimiento que provocaba la curvatura fototrpica era debida a una distribucin asimtrica por transporte lateral de la auxina desde la parte iluminada a la oscura. Extremo que fue demostrado por Went (1926). Entre ambos originaron la teora conocida con el nombre de Cholodny-Went. Boysen-Jensen (1928): Tienen una teora alternativa a la anterior que predeca un incremento en la tasa de elongacin celular en el lado oscuro del rgano sin cambio en la parte iluminada. Blaauw y Pal (1919): Tienen otra teora alternativa a las anteriores que estableca como base del mecanismo una accin directa de la luz con menor crecimiento de la parte iluminada sobre la parte oscura. Franck (1868): Introdujo el trmino geotropismo para los movimientos de los rganos de la planta inducidos y orientados por accin de la gravedad. Henfrey (1852): Indic que la distribucin natural de las plantas era debida, al menos en parte, a las variaciones con la latitud de los das de verano. J. Turnois(1912) y H. Klebs(1913) : Realizaron experimentos controlados de floracin de distintas especies. H. Klebs en sus experimentos con Sempervivum funkii logr inducir la floracin de plantas rosetas en invierno por suministro de iluminacin continua con lmparas incandescentes durante unos pocos das. W.W. Garner y H.A. Allard (1920): Establecieron el modelo actual de fotoperiodismo y el reconocimiento de su influencia en la regulacin de distintos procesos fisiolgicos. Chailakhyan (1936): Por experimentacin con injertos interespecficos entre los distintos tipos de plantas(da largo, corto o neutras) como se lleg a la evidencia fisiolgica de la floracin a la que este autor denomin florgeno. 19

Lang y colaboradores: Consiguieron la floracin de plantas de Nicotiana tabacum injertada sobre N. Sylvestris bajo condiciones de da largo pero ambas no florecan en da corto a pesar de que las plantas de control florecen en da corto. J. Gustav Gassner (1918): Compar la accin de diversas temperaturas sobre el desarrollo de la variedad Petkus de invierno del centeno y sobre la correspondiente variedad de primavera que se siembra en primavera y florece en el verano del mismo ao. Lysenko (1931): Public una tcnica de modificacin experimental del ciclo de desarrollo de los cereales de invierno por influjo de una refrigeracin adecuada. Melchers y Lang: Estudian el comportamiento frente a la vernalizacin y el fotoperiodismo de una especie bianual: Hyoscyamus niger. Demostraron que si en esta especie bianual se mantiene continuamente a temperaturas medias, desde su germinacin, no forma nunca tallo florecido, sino que crece vegetativamente, se desarrollan sin cesar hojas nuevas, pero se mantiene su porte en roseta. Wallensiek: Estudios con hojas de Lunaria annua demostraron que la percepcin de la vernalizacin no se limita a los meristemos. Cualquier tejido de la planta en divisin celular es un sitio de percepcin potencial de la termoinduccin vernalizadora. 1.4 Hitos de la Fisiologa Vegetal FOTOSINTESIS Aristteles: apunta que la luz del sol tena algo que ver con el desarrollo del color verde de la planta (pero pasa desapercibido). Stephen Hales: la toma del aire por las hojas sirve para alimentar a la planta. Priestley: descubri el oxgeno como producto de la fotosntesis. Senebier: aade que la capacidad d las plantas para regenerar el aire depende de la presencia de aire fijado (dixido de carbono). El anhdrido carbnico disuelto en agua es el alimento que las plantas extraen del aire que las rodea. Saussure: demostr que el peso de materia orgnica y oxgeno producido por la fotosntesis era mayor que el del aire fijado. FOTORRESPIRACIN Warburg: encontr que la fotosntesis medida como CO2 asimilado es inhibida por altas concentraciones de O2 en la atmsfera. El CO2 asimilado que se mide en fotosntesis es el balance neto entre la asimilacin fotosinttica de CO2 y su produccin respiratoria.

NUTRICIN MINERAL

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Aristteles: toda la materia estaba formada por cuatro elementos: tierra, aire, agua y fuego. Van Helmont: plant una rama de sauce de un peso conocido en un recipiente de tierra seca a la que aadi solo agua. Al cabo de cinco aos la rama se haba transformado en un rbol y la tierra solo haba perdido unos gramos. El aumento de peso del sauce se deba exclusivamente al agua con la que haba regado la planta. (Conclusin errnea ya que no tena en cuenta los elementos que la planta haba adquirido del suelo y el carbono procedente de la atmsfera). Woodward: el agua que penetra en las plantas por los poros y es exhalado a la atmsfera arrastra una gran cantidad de sustancias minerales que de sta manera penetran en la planta. Stephen Hales: estudi los movimientos del agua en la planta. Adems comprob que el aire contribua a la nutricin del vegetal. Saussure: puso a crecer una planta en una solucin de una sal y algunos solutos orgnicos observ que no todos los solutos eran absorbidos por la planta en iguales cantidades: Absorcin selectiva. Enuncia los principios de esenciabilidad de algunos nutrientes (macro y micronutrientes). Carl Sprenger: suelo improductivo debido a una deficiencia de un solo elemento que es necesario para la planta: Ley del mnimo. Julios Von Sachs: las plantas demuestran que las plantas pueden crecer en soluciones nutritivas (sin fase slida). HORMONAS AUXINAS Monceau: elimin el anillo de corteza en un tronco en la parte superior se producia un hinchamiento y se formaban races. Francis y Charles Darwin: el pice del coleptilo era el responsable de que las plntulas se curvaran hacia la luz. GIBERELINAS Descubiertas en la planta del arroz producida por el hongo Giberella fujikuroi: estas plntulas infectadas eran ms altas, delgadas y plidas que las sanas. Sawada: los sntomas de la planta eran debidos a sustancias excretadas por el hongo. CITOQUININAS Haberlandt: en los tejidos floemticos difundan sustancias capaces de estimular la divisin celular.

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2. Movimiento del agua 2.1 Introduccin En una planta es fcil deducir que en su interior hay una gran cantidad de sustancias en movimiento.1 - el agua entra por las races y se evapora de las hojas - los productos de la fotosntesis deben viajar desde las hojas a los tallos, races, flores y frutos La vida esta ntimamente asociada al agua, en especial en su estado lquido, esa importancia se debe a sus propiedades fsicas y qumicas.2 El agua es disolvente de sales inorgnicas, azucares y aniones orgnicos, y constituye el lugar donde ocurren las reacciones bioqumicas. En su forma liquida permite la difusin y el flujo masivo de solutos. Tambin es importante el agua en las vacuolas de clulas vegetales, ya que ejerce presin sobre el protoplasma y pared celular, manteniendo as la turgencia en hojas, races y otros rganos.2 Ms del 90% del agua que entra por las races de una planta se desprende al aire en forma de vapor de agua. Esta perdida recibe el nombre de transpiracin.2 A lo largo de la planta, el transporte de agua es pasivo, ya que su energa libre desciende a medida que se mueve. A pesar de esta naturaleza pasiva, el transporte de agua esta finamente regulado por la planta para minimizar la deshidratacin, principalmente a travs de la regulacin de la transpiracin a la atmosfera.1 Adems de agua y minerales, las clulas de una planta tambin necesitan esqueletos carbonados, los cuales constituyen su fuente de energa. El movimiento de los compuestos orgnicos desde las partes fotosintticas de las plantas es conocido como translocacin.3 Los elementos minerales que necesitan las plantas son absorbidos por las races de la solucin que las rodea y son transportados desde stas hacia el vstago en la corriente transpiratoria. Aunque la disponibilidad de minerales depende principalmente de la naturaleza del suelo circundante, las actividades de los hongos y bacterias simbiticos desempean tambin un papel fundamental.3 Para empezar a estudiar el transporte de agua, debemos empezar por el agua en el suelo. El contenido de agua en el suelo depende del tipo de suelo y de su estructura. La Tabla 1 muestra que las caractersticas diferentes de los suelos pueden variar mucho. En un extremo, la arena, presenta un rea superficial muy baja y grandes espacios entre las partculas en este tipo el agua tiende a drenar entre los espacios; y por el otro esta la arcilla con partculas de menos de 2 micrometros de dimetro tiene un rea superficiales mucho mayor y espacios ms pequeos entre ellos, en estos suelos el agua queda fuertemente retenida.1

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Tabla 1. Caracteristicas fisicas de diferentes suelos Suelo Diametro de la particula(mm) Area superficial por gramo (m^2) Arena gruesa 2000-200 <1-10 Arena Fina 200-20 <1-10 Limo 20-2 10-100 Arcilla <2 100-1000 La capacidad de los suelos de retener la humedad se llama capacidad de campo, es decir es el contenido de agua de un suelo despus de que ha sido saturado de agua y se ha dejado drenar el exceso. Los suelos arenosos tpicos retienen solo el 3 % del agua en volumen tras la saturacin; los suelos arcillosos tienen una gran capacidad de campo, unos das despus pueden retener un 40% del agua en volumen.1 El suelo, la planta y la atmosfera constituyen un sistema, en el cual la planta absorbe agua del suelo, circula por el xilema y se pierde a la atmosfera (Figura 1). Como resultado de esto el agua perdida por las clulas debe recuperarse, ocurriendo un transporte de agua desde una clula a otra y desde un rgano a otro. Este movimiento del agua esta gobernado por las leyes de la difusin.4 Difusin es el movimiento neto de una sustancia desde un punto a otro gracias a la energa cintica de sus partculas. La difusin se realiza solo cuando la concentracin de la sustancia difusible no es uniforme en todo el sistema, continuando el proceso en tanto se mantenga esa diferencia.4 Figura 1. Intercambio de sustancias con el medio: a) a nivel de planta, b) a nivel de clula.4

2.2 Potenciales 2.2.1 Potencial hdrico

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El agua en estado lquido es un fluido, cuyas molculas se hallan en constante movimiento. La movilidad de estas molculas depender de su energa libre, es decir de la fraccin de energa total que puede transformarse en trabajo. La magnitud ms empleada para expresar y medir su estado de energa libre es el potencial hdrico (). El se mide en atmsferas, bares, pascales y megapascales. A una masa de agua pura, libre, sin interacciones con otros cuerpos, y a presin normal, le corresponde un igual a 0 (Tabla 2).2 Tabla 2. Comparacin de unidades de presin.1 1 atmosfera = 14.7 libras por pulgada cuadrada = 760 mm Hg (a nivel del mar, 45 de latitud) = 1.013 bar = 0.1013 MPa = 1.013 x 10^5 Pa Una llanta de auto esta inflado a 0.2 MPa. La presin del agua a 15 pies (5m) de profundidad esta cerca de 0.05 MPa Los principales factores que contribuyen al potencial hdrico de la planta son: concentracin, presin y gravedad (Figura 2). El agua se mueve de forma espontnea desde una zona de potencial hdrico grande a una zona con el potencial menor, independientemente de ka causa que provoque esta diferencia. Un ejemplo sencillo es el agua que baja por una pendiente en respuesta a la gravedad. El agua arriba de la pendiente tiene ms energa potencial que debajo de la pendiente. La presin es otra forma de potencial hdrico. Si llenamos un cuentagotas con agua y apretamos el gotero, el agua saldr. En las disoluciones, el potencial hdrico est afectado por la concentracin de las partculas en disolucin (solutos). Si aumenta la concentracin de soluto, el potencial hdrico disminuye. Inversamente, cuando la disolucin disminuye de concentracin, el potencial hdrico aumenta.2 Figura 2. Los tres factores que normalmente determinan el potencial hdrico son (a) la gravedad, (b) la presin, y (c) la concentracin de solutos en una disolucin. El agua se mueve desde la regin con mayor potencial hdrico a la regin con menor potencial hdrico, sea cual sea la causa de esta diferencial.2

El potencial hdrico se simboliza w (letra griega psi), y para una solucin se puede descomponer en sus componentes individuales que se expresan normalmente como la siguiente suma: w=s+p+g1

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Los trminos s, p y g representan los efectos de los solutos, la presin y la gravedad, respectivamente, sobre la energa libre del agua. El estado de referencia para definir el potencial hdrico es el agua a temperatura y presin atmosfrica ambiente*. 2.2.2 Potencial de presin (p) Es la presin hidrosttica de una solucin. Las presiones positivas elevan el potencial del agua y las presiones negativas lo reducen. A veces es llamada potencial de presin. La presin positiva de la presin hidrosttica dentro de las clulas es la presin denominada presin de turgencia. El valor p puede ser negativo, como el caso del xilema y las paredes entre las clulas donde se puede desarrollar una presin hidrosttica negativa. p = 0 MPa para el agua en estado estndar. As el valor p del agua pura en un vaso abierto es de 0MPa, a pesar de la presin absoluta que es de aproximadamente 0.1 MPa (1 atmosfera) 2.2.3 Potencial osmtico (s) El termino s llamado potencial de soluto o potencial omtico representa el efecto de los solutos disueltos sobre el potencial hdrico. Los solutos disminuyen la energa libre del agua por dilucin de la misma. Se trata principalmente de un efecto de la entropa, es decir, la mezcla de solutos y agua aumenta el desorden del sistema o disminuye su energa libre. Esto significa que el potencial osmtico es independiente de la naturaleza especfica del soluto.

Cuanto mayor es la concentracin de solutos en una solucin, mayor es la presin osmtica de ella y menor es la presin de difusin del agua debido a una disminucin de su energa libre. Van't Hoff desarroll el concepto matemtico de presin osmtica:

De acuerdo a esta ecuacin, un mol de soluto en un litro de solvente a 0C tiene una presin osmtica de 22.4 atm. Es decir, que si una solucin tiene el doble de partculas que otra, su presin osmtica ser el doble al colocarla en agua pura. Cuando se trabaja con electrolitos
*

Se toma como Temperatura ambiente 25 C (o 298 K) y la presin como 1 atm. Algunos autores lo denominan

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hay que tener en cuenta que el numero de partculas aumenta por la disociacin de sufren. La presin osmtica es independiente del tamao, peso y clase de las partculas. Si la concentracin de solutos osmoticamente activos fuera de la clula es mayor que dentro de ella se produce, de acuerdo con las leyes de difusin, un movimiento neto de agua hacia afuera de la clula vegetal, disminuye la turgencia y el protoplasma se contrae; esta situacin se designa plasmlisis.4 2.2.4 Potencial de gravedad (g) La gravedad es la responsable del movimiento hacia abajo del agua, a menos que a la fuerza de gravedad se le oponga una fuerza igual y opuesta. El termino g depende de la altura (h) del agua por encima del nivel de referencia, de la densidad del agua (w) y de la aceleracin de la fuerza gravitacional (g). En forma de smbolos, la expresin es la siguiente: g=wgh donde wg tiene un valor de 0.01 MPa/m. De este modo, una distancia vertical de 10 m implica un cambio de 0.1 MPa en el potencial hdrico. Cuando consideramos el transporte de agua a nivel celular, el componente gravitacional (g) suele omitirse debido a que es despreciable en comparacin con el potencial omtico y con la presin hidrosttica. As, la ecuacin se puede simplificar como: w=s+p Cuando se trata de suelos secos, de semillas y de paredes celulares, es frecuente que se introduzca otro factor, el denominado potencial mtrico. 2.2.5 Potencial mtrico (m) Juega un papel importante en el movimiento del agua en el suelo. Este potencial es una propiedad dinmica ntimamente relacionado con las fuerzas de la absorcin y adsorcin de cada suelo, las cuales varan con la textura, la densidad aparente, materia orgnica, porosidad y cantidad de agua; as por ejemplo un suelo arcilloso retiene ms agua que uno arenoso al mismo potencial de energa, como se muestra en la Figura 3, Figura 4.5 Figura 3. Curvas caractersticas de retencin de agua para varios suelos, en funcin del potencial mtrico.

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Figura 4.Cinco ejemplos que ilustran el concepto de potencial hdrico y sus componentes. (A) Agua pura. (B) Solucin de sacarosa 0.1 M. (C) Se introduce una clula flcida en una solucin de sacarosa 0.1 M. Como el potencial hdrico inicial de la clula es menor que el potencial hdrico de la solucin, la clula incorpora agua. En el equilibrio, el potencial del agua y el de la solucin se igualan y, como consecuencia de ello, se obtiene una clula con una presin de turgencia positiva. (D) El aumento de la concentracin de sacarosa de la solucin hace que la clula pierda agua. El aumento de la concentracin de sacarosa reduce el potencial hdrico de la solucin lo que provoca tanto la salida del agua como la reduccin de la presin de turgencia de la clula. En este caso, el protoplasto es capaz de separarse de la pared celular (la clula se plasmoliza) porque las molculas de sacarosa son capaces de atravesar los poros relativamente grandes de la pared celular. Por el contrario, cuando una clula se seca al aire (por ejemplo, la clula flcida del panel C), la plasmolisis no ocurre porque el agua es retenida en la pared celular por fuerzas capilares, lo que evita que el aire se infiltre en cualquier hueco entre la membrana plasmtica y la pared celular. (E) Otra forma de hacer que la clula pierda agua es presionarla lentamente entre dos placas. En este caso, cuando se elimina la mitad del agua de la clula, el potencial osmtico aumenta en un factor de 2.

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2.3 Mecanismos propuestos sobre la absorcin del agua En el suelo el agua es transportada principalmente por flujo msico. Sin embargo, cuando el agua entra en contacto con las superficies radicales, la naturaleza del transporte se hace ms compleja. Desde la epidermis hasta la endodermis de la raz, existen tres rutas a travs de las que el agua puede fluir: apoplasto, transmembrana y simplasto (Figura 5). 1. En la ruta del apoplasto, el agua se mueve exclusivamente a travs de la pared celular sin atravesar ninguna membrana. El apoplasto es el sistema continuo de paredes celulares y de espacios areos intercelulares en los tejidos vegetales.

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2. La ruta transmembrana es la ruta seguida por el agua que entra en una clula por un lado, sale por el otro, entra en la clula siguiente por un lado y sale por el otro, y as sucesivamente. En esta ruta el agua atraviesa al menos dos membranas por cada clula en su camino (la membrana plasmtica de entrada y de salida) 3. En la ruta del simplasto, el agua viaja de clula a clula a travs de plasmodesmos. El simplasto est formado por una red continua de citoplasmas celulares interconectados por plasmodesmos. La ruta del apoplasto es particularmente importante en la absorcin de agua por parte de las races jvenes de maz. Figura 5. Rutas alternativas para la trayectoria del agua en la raz. a) Simplasto, ofrece ms resistencia al paso del agua y b) apoplasto, ofrece poca resistencia al paso del agua y es el camino que, en la raz, sigue habitualmente el agua.

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Figura 6. Va apoplasto sealada con lnea roja y va simplasto sealada con lnea azul 1)pelo radical 2)epidermis 3)endodermis 4)xilema

En la endodermis, el movimiento del agua a travs de la ruta del apoplasto est bloqueado por la banda de Caspary (Figura 6). La banda de Caspary es una franja en las paredes radicales de las clulas de la endodermis impregnada con suberina, sustancia hidrofbica similar a la cera. La suberina acta como una barrera que impide el movimiento del agua y de los solutos. La endodermis se suberisa en las partes de la raz que no estn en crecimiento, al mismo tiempo que maduran los primeros elementos del protoxilema. La banda de Caspary rompe la continuidad de la ruta apoplasto y fuerza al agua y a los solutos a cruzar la endodermis a travs de la membrana plasmtica. As, a pesar de la importancia de la ruta del apoplasto en el crtex y en el cilindro vascular de la raz, el movimiento del agua a travs de la endodermis se produce por el simplasto. Debido a la banda de Caspary la va apoplastica en la endodermis presenta resistencia muy alta, y el flujo de agua a travs de estas paredes es prcticamente nulo. La suberificacin de la endodermis bloquea la va apoplastica, y en este punto el agua es forzada a atravesar las membranas citoplasmticas y los protoplastos de las clulas endodrmicas, que representa una resistencia de cierta magnitud, pero mucho menor a la resistencia de las paredes. Una vez superada la endodermis, el agua vuelve a encontrar menor resistencia en la va apoplastica.2 Por lo tanto el flujo de agua hasta el cilindro ase vera influido por la resistencia del sistema del simplasto y, de las membranas que debe atravesar, resistencia que puede aumentar si la estructura, la fluidez y funcionalidad de las membranas no son las adecuadas. Debido a que el correcto funcionamiento de las membranas requiere ATP, cualquier factor que afecte negativamente a la respiracin (anaerobiosis, bajas temperaturas), afectara al flujo de agua.2 La absorcin de agua tambin disminuye cuando las races son tratadas con inhibidores de la respiracin (como el cianuro). Estos tratamientos inhiben la respiracin radical y las races transportan menos agua. La explicacin exacta de este efecto no est clara. Por otro 30

lado, el descenso en el transporte de agua en la raz proporciona una explicacin de la marchites de las plantas en suelos inundados: las races sumergidas consumen rpidamente el oxigeno, que ya no llega por difusin a travs de los espacios areos del suelo. Las races en anaerobiosis transportan menos agua a la parte area y, por ello, sufren una perdida neta de agua y comienzan a marchitarse.

A partir de la zona de diferenciacin de la raz los elementos xilemticos sern los conductores del agua incorporada por toda la planta. Estos elementos no estn aislados sino que tienen diferentes funciones complementarias entre s. As pues, podemos reconocer: Trqueas o elementos- se suponen evolutivamente ms recientes, tienen dimetro bastante grande, se disponen formando una especie de tuberas por las que circula en primera instancia el agua Traqueidas-se suponen evolutivamente ms antiguos, son elementos ms afilados, no forman un verdadero conducto continuo(fig1) Fibras- son elementos de soporte, que permiten al sistema soportar tanto la presin radical como el colapso que puede provocar la tensin por evapotranspiracin(fig1) Clulas parenquimticas permiten el transporte radial facilitando el intercambio de sustancias de los tejidos circundantes con el xilema. 2.4 Movimiento radial del agua Cmo consigue la savia del xilema llegar a la punta de los grandes rboles? Al parecer la respuesta no se encuentra en la capilaridad, la presin atmosfrica o la presin en la raz, actualmente se piensa que se trata de una combinacin especial de transpiracin, adhesin, tensin y cohesin. El rasgo bsico de este modelo es la cohesin que es la capacidad inherente de las molculas iguales de juntarse unas con otras. La atraccin mutua que se observa entre las molculas de agua es fuerte y su causa son los puentes de hidrogeno. La teora de la cohesin establece que se crean dficits de agua en las hojas, bsicamente debido a la transpiracin, pero tambin a causa del movimiento de agua hacia las clulas que se encuentran metabolizando o creciendo. La columna de agua en el xilema (la corriente de transpiracin) se eleva en respuesta a dichos dficits; las columnas de agua se mantienen juntas gracias a la cohesin (estiramientos), que se transmiten a travs del xilema hasta las races. Las partes superiores de la columna se encuentran sostenidas a las paredes celulares de las hojas por adhesin (Figura 8). En este caso la adhesin es la fuerza de hidratacin o inhibicin. Las molculas de agua pueden evaporarse de estas superficies creando dficits que provocan el movimiento de la corriente de agua hacia arriba, o pueden trasladarse de estas superficies, por smosis, hacia las clulas en crecimiento, lo cual crea, a su vez, un dficit en la corriente de transpiracin. A pesar de las fuerzas de cohesin de las molculas de agua, las columnas de agua se pueden romper (cavitar), esto es debido a que los gases disueltos en el agua, bajo tensiones extremas tienden a escapar formando burbujas. Las burbujas pueden interrumpir la columna liquida y bloquear la conduccin (embolia) (Figura 7). El agua del vaso bloqueado puede moverse entonces lateralmente hacia otro vaso contiguo y continuar as su camino. Los

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gases de la burbuja pueden redisolverse si aumenta la presin en el xilema, bien por disminucin de la tensin, bien por presin radical (durante la noche). Figura 7. La tensin severa puede superar la cohesin de las molculas de agua y causar una embolia que se forma y expande rpidamente. La embolia puede pasar a travs de orificios tales como perforaciones, pero es detenido por las aberturas en la membrana (pit membranes). Si se produce una embolia en una traqueida, no puede extenderse ms all de las traqueidas, pero si uno de los elementos vasculares cavita, la embolia se extiende a lo largo de todo el vaso entero.

Figura 8. La teora de la cohesin, se puede resumir diciendo que las hojas, al perder vapor de agua por transpiracin, tienden a disminuir el potencial hdrico de las clulas del mesfilo, lo que determina la entrada de agua a los elementos vasculares de la hoja, donde es sometida a tensin y se mueve mediante flujo de masas. El agua dentro de los conductos xilemticos, se extiende formando una columna continua desde la raz hasta las hojas, por lo que la tensin (hipopresin) en las partes altas del xilema, se transmite hacia abajo a travs de dicha columna. Si las fuerzas de cohesin entre las molculas de agua son lo suficientemente grandes, toda perdida de agua que se produce en la hoja por evapotranspiracin genera una tensin que se traduce en el ascenso de la columna lquida hacia la hoja, mientras que en la porcin inferior de la columna ocurre una succin del agua procedente de la raz. Como resultado de este proceso disminuye el potencial hdrico de las clulas de la raz, lo que se traduce en una nueva absorcin de agua por estas clulas.6

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Considerando por separado los distintos tramos dentro de la planta el gradiente de potencial hdrico ser: suelo > xilema raz > xilema tallo > hoja > atmsfera -0.5 MPa > -0.6 MPa > -0.8 MPa > -0.8 MPa > -95 MPa Cmo puede verse la mayor diferencia de corresponde al ltimo tramo, es decir, al paso del agua de la hoja a la atmsfera (Figura 9) (Figura 11) (Figura 10).2

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Figura 9. Representacin del potencial hdrico (w) en los diferentes puntos en el camino seguido por el agua desde el suelo a la atmosfera a travs de la planta.

Figura 10. Cuando el agua se mueve fuera de la hoja hacia el aire, el tejido se seca y el gradiente de potencial hdrico se establece. El agua fluye desde el xilema, donde el potencial hdrico es menos negativo, hacia el aire, donde el potencial hdrico es ms negativo.7

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El atmosfera estar determinado por: La humedad relativa del aire, que a su vez depende de la temperatura, de modo que si las situaciones de atmosfera calida y seca determinaran valores de atmosfera muy bajos y elevados flujos transpiratorios. La velocidad del viento. Las corrientes de aire se llevan el vapor de agua que rodea la superficie foliar, y hace ms acusado el gradiente de concentracin de vapor de agua entre el interior de la hoja y el aire circundante. Por lo tanto, el viento acelera la evaporacin de las molculas de agua del interior de la hoja. De todas formas, el factor que ms influye en la transpiracin (flujo transpiratorio) es la apertura de los estomas. Figura 11. Los diferentes potenciales en el xilema de una planta. Representacin general del potencial hdrico y sus diferentes componentes en varios puntos en la va de transporte suelo-planta-atmosfera. El potencial hdrico w se puede medir a travs de este continuo, pero los componentes varan. En la parte liquida de la va, el potencial de presin (p), el potencial omtico (s) y el potencial gravitacional (g) determinan el potencial hdrico. En el aire, solo la humedad relativa (RT/Vw ln [RH]) es importante. Note que aunque el potencial hdrico es el mismo en la en la vacuola de las clulas del mesfilo y en la pared celular circundante, los componentes de w puede diferir enormemente (por ejemplo, en el caso p es 0.2 MPa dentro de la clula del mesfilo y -0.7 MPa en el exterior).

Si el suelo se riega bien y luego se deja secar durante un perodo de das, el potencial hdrico de la solucin del suelo se hace progresiva y gradualmente ms negativo. Todos los das, la transpiracin de la hoja pierde agua ms rpidamente que la que se sustituye por el transporte en el xilema, por lo que se deja secar un poco y el potencial hdrico de la hoja se hace ms negativo. Por la noche, el cierre de los estomas y el transporte del xilema re-

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hidrata el tejido de la hoja, pero en cada ciclo, las hojas se secan ms que la noche anterior. Esto no es muy grave hasta que el potencial hdrico foliar durante el da se hace ms negativo que el punto de marchites (lnea discontinua). Cuando las hojas se marchitan, muchos procesos metablicos se ven afectados. El punto de marchites vara de una especie a otra y es mucho ms negativo para las plantas xerfitas que las hmedas. Una vez que el suelo se vuelve extremadamente seco, aunque la rehidratacin durante la noche no trae el potencial hdrico foliar por encima del punto de marchites, la planta est en su punto de marchites permanente y se pueden producir daos severos por el estrs hdrico. Todas las paradas de crecimiento y el desarrollo de hojas, capullos de flores o frutas pueden morir y entrar en abscisin (Figura 12).7 Figura 12. Fenmeno de marchitamiento de una planta.

2.5 Absorcin de sales minerales La permeabilidad controla la entrada de sales a la clula solamente s es causada por difusin. Las membranas celulares son diferencialmente permeables, por lo que permiten el paso selectivo de ciertas sustancias. Por ejemplo, los herbicidas si son solubles en lpidos al asperjarlos sobre las plantas entran a las clulas y producen el efecto deseado.6 2.5.1 Absorcin pasiva La absorcin pasiva es causada por simple difusin, siguiendo un gradiente electroqumico, hasta obtener la condicin de equilibrio. No requiere de energa metablica(Figura 14).6

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Figura 13. Transporte pasivo.

La difusin de un soluto a travs de una membrana, depende de los siguientes factores:6 1) De la agitacin trmica de las molculas a difundir, 2) del gradiente de concentracin a travs de la membrana, 3) de la permeabilidad de la membrana, que est determinada por la solubilidad en el ncleo hidrofbico de la doble capa lpidica de la membrana. La absorcin activa se realiza en contra de un gradiente electroqumico, de sitios de menor concentracin hacia sitios de mayor concentracin y requiere energa metablica. La fuente principal de la energa metablica es la hidrlisis del ATP aportado por la respiracin. Este transporte se realiza en presencia de protenas transportadoras o bombas que pueden transportar H+ , Na+, Ca+2 , K+. 6 2.5.2 Absorcin activa En el transporte activo participan tres tipos de protenas (Figura 14): Transportadores mono transportadores, mueven un solo soluto en una direccin. Por ejemplo, una protena que transporta el ion Ca+2 , que se encuentra en la membrana plasmtica, mueve este ion hacia zonas de mayor concentracin. Las protenas cotransportadoras mueven dos iones en la misma direccin. Las protenas de contratransporte mueven dos solutos en direcciones opuestas, muchas clulas tienen una bomba Na+ - K+, que mueven el potasio hacia el interior de la clula y el sodio hacia el exterior. Las caractersticas de la acumulacin metablica son muy complejas, sin embargo se pueden establecer las siguientes conclusiones: Las molculas pequeas y sin carga, pueden entrar las clulas rpidamente. Aqu podemos mencionar el H2O, CO2 y nitrgeno. Los otros nutrientes penetran las clulas ya sea como aniones (-) o cationes (+) (Tabla 3).6

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Tabla 3. Acumulacin de los iones en la planta. Iones que se acumulan Iones que se acumulan Rpidamente . lentamente. Aniones NO3- , Cl PO4-3 , SO4-2 + + + Cationes K , Na , NH4 Ca+2, Mg+2 La velocidad de entrada de Fe, Zn y Mn es lenta; sin embargo podemos decir que la entrada de muchos micronutrientes no ha sido bien estudiada. Figura 14. Transporte activo.

Durante la acumulacin de nutrientes, se debe mantener la neutralidad elctrica a ambos lados de la membrana, esto resulta en la interaccin inica que se observa comnmente. Por ejemplo, s el catin rpido K+ est presente junto al anin rpido NO3- , la velocidad de entrada de ambos iones es rpida, en consecuencia se expulsa un protn y un ion hidroxilo para mantener la electro neutralidad y el pH del medio no se altera. Sin embargo s el catin K+ , est presente en una solucin nutritiva con el anin SO4-2 , que es lento, se expulsan ms protones ( H+ ) que hidroxilos ( OH-) y el pH de la solucin baja, acidificndose el medio. Cuando la absorcin del anin excede la del catin, como en el caso del CaCl2 , que el anin Cl- , se absorbe ms rpido que el calcio (Ca+2 ), se expulsan de la raz iones hidroxilos (OH), haciendo el medio bsico. Cuando se cultivan plantas en soluciones hidropnicas, los cambios del pH son problemticos; sin embargo los especialistas en nutricin mineral han tratado de superar este escollo diseando soluciones nutritivas balanceadas, pero esto no ha sido fcil y todava se presentan cambios de pH indeseables, lo que ocasiona que se deban cambiar las soluciones nutritivas peridicamente, aumentando los costos de este cultivo.

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2.6 Transporte del Floema El floema o lber transporta productos de la fotosntesis (azucares y materiales orgnicas elaboradas) en mltiples direcciones a travs de la planta, desde su sitio de produccin (fuentes) hasta los lugares donde tales productos son consumidos o almacenados. El floema puede trasladar otros azucares (azucares alcohlicas y azucares fosfatos), protenas estructurales y enzimticas, aminocidos, cidos nucleicos, factores reguladores (fitohormonas), vitaminas, ATP, cidos orgnicos (piruvico, oxalacetico), fosfatos orgnicos e iones (K+, SO42-).8 Las fuentes de estos productos son las clulas fotosintticas de la hoja y los sumideros constituyen el resto de la planta, que debe nutrirse del lquido transportado por el floema. De alguna manera, el floema interviene en el control del desarrollo de la planta: en determinados momentos del ao, los nutrientes orgnicos son transportados predominantemente a los meristemos y primordios florales o a estructuras reproductivas (Figura 15). Figura 15. El alimento se mueve a travs del floema por un mecanismo de presin. El azcar se mueve (en una etapa que requiere energa) desde una fuente (generalmente las hojas) a un sumidero (generalmente races) por presin osmtica. La translocacin del azcar dentro del elemento criboso produce que el agua entre en la clula, incrementando la presin de la mezcla agua/azcar (savia del floema o elaborada). La presin causa que la savia fluya a zonas de menor presin, el sumidero. En este lugar el azcar es extrado del floema en otra etapa que requiere gasto energtico, y generalmente es convertido en almidn o metabolizado

Figura 16. Esquema de los tubos cribosos y las operaciones de carga y descarga a travs de las vas apoplstica y simplstica. Los plasmodesmos indicados por la lnea doble permiten la difusin sin obstculos de azucares y aminocidos. Las estructuras no se

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muestran a escala. Las clulas acompaantes que participan en la carga apoplstica tambin son llamadas clulas de transferencia. Las clulas intermedias son clulas acompaantes especializadas que participan en simplstica floema de carga.9

En las fuentes, la sacarosa y dems materiales producidos pasan -va simplasto- de clula a clula del mesfila de la hoja (a travs de los plasmodesmos que interconectan dichas clulas) hasta alcanzar el floema. All salen al apopasto, y est salida acta como filtro. La sacarosa y dems sustancias penetran ahora en las clulas acompaantes (clulas anexas, parenquimatosas y de transferencia) y de ah pasan al interior del tubo criboso. El intercambio tienen lugar mediante los numerosos plasmodesmos entre estas clulas y los tubos cribosos. La acumulacin de sacarosa y sustancias en el floema determinan que entre mas agua en los tubos cribosos y se origine la presin necesaria para el flujo del lquido por el interior de los tubos hacia los sumideros. All el azcar es descargado activamente e incorporado a las clulas consumidoras. El agua es eliminada rpidamente por osmosis hacia el xilema. Las clulas productoras que descargan productos a los tubos cribosos en las fuentes no pierden presin osmtica pues reemplazan las sustancias descargadas por otras nuevas que sintetizan. Del mismo modo, las clulas de los sumideros no incrementan su presin, pues consumen el material incorporado (Figura 16).8 Figura 17. Transporte apoplstico del floema. La transferencia de la fotoasimilados desde el paquete de clulas de la vaina hasta los tubos cribosos. Muchas observaciones indican que el transporte activo tiene lugar en la membrana plasmtica de las clulas de transferencia y que el posterior traslado a los elementos cribosos se produce por difusin a travs de plasmodesmos. Sin embargo, resultados recientes indican que parte de los asimilados tambin puede ser absorbido directamente del apoplasto en los elementos cribosos.9

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A veces, el transporte supone distancias, que son cubiertas a velocidades de 10 a 100 cm/h, muy por encima de la velocidad de difusin, lo que supone que por 1 cm^3 de tubo criboso pasan cada hora de 0.5 a 5 g de materia (en peso seco). Un tubo cribosos se vaca entre 3 y 1000 veces por segundo(Figura 17).8 3. Fotosntesis

3.1 Introduccin La fotosntesis es el proceso por el cual la biosfera capta la energa es el proceso por el cual la biosfera capta la energa radiante necesaria para toda la vida. La energa que irradia el sol es 3 x 10^31 kilojulios (kJ) por da, luego la cantidad que alcanzan la Tierra al da es 1.5 x 10^19 kJ (Figura 18). La biosfera capta, mediante la fotosntesis, solo una milsima parte de esa energa (0.01%), o sea unos 3.6 x 10 ^18 kJ por ao, con esa energa as plantas sintetizan unas 2 x 10^11 ton de biomasa al ao. La vida en la tierra depende fundamentalmente de la energa solar, la cual es atrapada mediante el proceso fotosinttico, que es responsable de la produccin de toda la materia orgnica que conocemos biomasa (Figura 18). En una planta ms del 90% de su peso est constituido por cuyas cadenas carbonadas las proporciona la fotosntesis.

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Figura 18. En lo profundo del ncleo del Sol, a 300,000 kilmetros de la superficie, los tomos de hidrgeno se fusionan para formar helio. La energa liberada en forma de rayos gamma se derrama hacia la superficie donde las colisiones con otros gases generan radiacin ultravioleta y visible, de acuerdo con esta reaccin: 1 4 1H --> 42He + 2+ + E , donde E es la radiacin electromagntica

La fotosntesis permite a ciertos organismos captar energa radiante y transformarla en energa qumica. En muchos organismos fotosintticos la energa que captan es utilizada para fijar anhdrido carbnico (CO2) y sintetizar sustancias orgnicas, en particular glcidos, tales como el almidn. Este proceso est acompaado por la produccin de oxigeno, segn la reaccin10: CO2 + H2O -------Luz/Plantas verdes------>(CH2O) + O2 La fotosntesis generalmente se asocia a las plantas verdes, ignorndose que tambin hay otros organismos capaces de utilizar energa solar como: las algas pardas, rojas y verdes, entre los organismos multicelulares, y los euglenoides, dinoflagelados, diatomeas, algas verdeazuladas y las bacterias entre los unicelulares. Las algas verdeazuladas y las diatomeas son procariontes; los dems organismos son eucariontes. Sin embargo, el metabolismo fotosinttico de las algas verdeazuladas difiere del de las bacterias fotosintticas y se asemeja al de las plantas superiores en que ambas fijan CO2 usando agua como agente reductor y generando O2. En cambio, las bacterias fotosintticas cuando crecen con luz no generan O2ni utilizan agua. En ves de sta requieren como dador de electrones compuestos azufrados, tales como H2S, S2O3-2 o H2 o sustancias orgnicas10.

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Los organismos no fotosintticos dependen para subsistir de los fotosintticos, que mediante sustancias orgnicas les sirven de alimento y, por ende, de fuente de energa. Las clulas obtienen la energa necesaria para sus procesos vitales al oxidar oxigeno esas sustancias orgnicas durante la respiracin celular (Figura 19). Este proceso se puede representar de manera muy simple con la ecuacin10: (CH2O) + O2 ----------------> CO2 + H2O + Energa Figura 19. La energa potencial contenida en el azcar (CH2O) es mayor que la del dixido de carbono (CO2). La diferencia se logra con el aporte de energa de la luz mediante la fotosntesis. La energa almacenada en carbohidratos se recupera por la respiracin, que descompone el azcar en dixido de carbono y agua. Parte de la energa se libera en forma de calor y el resto se almacena en molculas como el ATP, que llevan la energa a otras regiones de la clula para impulsar otras funciones celulares.

La energa para la fotosntesis se deriva de la luz solar, que se origina en las reacciones exotrmicas que tienen lugar en el sol. La luz tiene las propiedades tanto de una onda como una partcula en movimiento (fotones o cuantos). La cantidad de energa contenida en un fotn es inversamente proporcional a la longitud de onda, longitudes de onda cortas poseen mayor energa que las longitudes de onda larga (Figura 24). Con el fin de la fotosntesis, las plantas deben convertir la energa de la luz a una forma en la que se puede utilizar para sintetizar hidratos de carbono11. La ecuacin de la fotosntesis resume bien este proceso, sin embargo no revela casi nada sobre el mecanismo de reaccin o de los muchos transportadores y enzimas que participan. No podemos dibujar un diagrama de reaccin porque la fotosntesis no se produce por la

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interaccin directa de seis molculas de dixido de carbono con seis de agua, sin embargo, el potencial de energa relativo se puede mostrar, lo que indica que se trata de un proceso endergnico (Figura 20)7. Figura 20. Ecuacin de la fotosntesis.

El proceso global de la fotosntesis es una reaccin redox, en la que los electrones son cedidos por unas especies qumicas, que se oxidan, y son transferidos a otras especies, que se reducen. En la actualidad sabemos que durante el proceso fotosinttico, la luz reduce nicotinamida adenina dinucletido fosfato (NADP) que, a su vez, acta como agente reductor para la fijacin del carbono en el ciclo de Calvin (Figura 21). El flujo de electrones desde el agua al NADP tambin esta acoplado a la sntesis de ATP, empleado en la reduccin del carbono.

Figura 21. La estructura parcial de NAD + slo se muestra la porcin involucrada en el acarreo de los electrones. El estado oxidado (NAD + y NADP +) porta una carga parcial positiva sobre el nitrgeno y tres dobles enlaces en el anillo. Cuando se haya reducido por dos electrones, la carga positiva desaparece del nitrgeno, numerosos orbitales de unin dentro del anillo se cambian, y el carbono superior recoge un protn. No se forman orbitales de enlace entre NAD + y el dador de electrones, por lo que NADH es libre difundir alejndose despus de recoger los electrones. Del mismo modo, ya que dona electrones a algn sustrato, el anillo de los orbitales de enlace vuelven a la forma de NAD+, ninguno de los enlaces se une al sustrato, por lo que el NAD + difunde. Lo mismo es cierto para NADP +.

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Figura 22. En la reaccin de la parte superior, dos electrones pasan de AH2 al NADP +: AH2 se ha oxidado a A, y NADP + se ha reducido a NADPH + H +. El NADPH es libre de difundir a otro sitio, donde pasa los dos electrones a otra molcula, B, reducindolo a BH2 y oxidacin de nuevo a NADP +. La figura inferior muestra una analoga del NAD+ (otro transportador de electrones empleado en la respiracin celular) con el transporte de pasajeros en un taxi.

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Las reacciones qumicas por las que el agua se oxida a oxigeno, el NADP se reduce y se forma ATP, se conocen como las reacciones de los tilacoides, porque casi todas las reacciones que conducen a la reduccin del NADP tienen lugar en lo tilacoides (Figura 23). Las reacciones de fijacin y reduccin del carbono se denominan reacciones del estroma porque las reacciones de reduccin del carbono se producen en la regin acuosa del cloroplasto, el estroma. Aunque esta divisin es arbitraria, conceptualmente es util1.

Figura 23. Fase luminosa de la fotosntesis se producen por medio de las transportadores de membrana, pero la formacin real de los hidratos de carbono se produce en el lquido del cloroplasto (estroma). ATP-ADP y NADP +-NADPH difunden entre las dos regiones. Ninguna regin del cloroplasto est lejos de una membrana, por lo que las distancias recorridas son slo unos pocos cientos de veces el dimetro de una molcula.

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Figura 24. La luz visible constituye una parte muy pequea de un espectro continuo de radiacin, el espectro de radiacin electromagntica, todas las radiaciones de este espectro se comportan como ondas, La longitud de onda, es decir, la distancia entre la cresta de una onda y la cresta de la siguiente, va desde dcimas de nanometros (1 nm=10^-9 m) en los rayos gamma, hasta kilmetros (1km = 10^3 m) en las ondas de radio de baja frecuencia. Cada tipo de radiacin, con su longitud de onda particular, contiene una determinada energa asociada. Cuando ms larga es la longitud de onda, menor es la energa, y cuando ms corta es la longitud de onda, mayor es la energa que transporta. Dentro del espectro de luz visibles, la luz violeta tienen la longitud de onda ms corta y la roja, la ms larga. Los rayos violeta ms cortos contienen casi el doble de energa que los rayos ms largos de la luz roja2.

3.2 Pigmentos fotosintticos Para que la energa de la luz pueda ser utilizada por los seres vivos, primero ha de ser absorbida. Una sustancia que absorber la luz se denomina pigmento. Algunos pigmentos absorben la luz en todas las longitudes de onda y por lo tanto tienen un color negro. Otros slo absorben ciertas longitudes de onda y reflejan o transmiten las longitudes de onda que no absorben. En los eucariotas fotosintticos (plantas y algas), la clorofila a es el pigmento implicado directamente en la transformacin de la energa de la luz en energa qumica. La mayor parte de las clulas fotosintticas tienen tambin un segundo tipo de clorofila, que en las plantas y algas verdes es la clorofila b, y cantidades de otros grupos de pigmentos llamados carotenoides. Los carotenoides, hidrocarburos polmeros de isopreno, pueden ser d e dos tipos: los carotenos (naranjas) y las xantofilas (amarillos). Hay tambin un tercer tipo de pigmento, las ficobilinas, de las que tambin hay dos tipos principales: la ficocianina (azul) y la ficoeritrina (roja) que se presentan tambin en algunos organismos fotosintticos. En una hoja, estos colores quedan enmascarados por la clorofila, ms abundante. Sin embargo,

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en algunos tejidos, como el tomate maduro, los colores del carotenoides pueden dominar como tambin pasa en otoo con las hojas de caducifolios cuando dejan de fabricar clorofila (Figura 28, Figura 29,Figura 25). Figura 25. La estructura de la clorofila revela el mecanismo de la absorcin de la luz, la excitacin de sus electrones, y su capacidad de dar electrones a un sistema de transferencia de electrones. Como puede notar, el -caroteno y las dos xantofilas tambin tienen dobles enlaces conjugados y anillos en los extremos, esto da a las molculas de la capacidad de absorber la luz. Estos son pigmentos de color amarillo-naranja y que absorben la luz en las zonas azul y verde del espectro visible12.

La clorofila b, los carotenoides y las ficobilinas son capaces de absorber la luz a diferentes longitudes de onda que la clorofila a, con lo que se incrementa la cantidad de luz disponible para la fotosntesis. La relacin entre la fotosntesis y la presencia de estos pigmentos queda claramente de manifiesto cuando se separa al espectro de accin de la fotosntesis (eficiencia fotosinttica frente a la longitud de onda) con los espectros de absorcin de las clorofilas) (Figura 27, Figura 26).

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Figura 26. Los pigmentos fotosintticos absorben gran parte del espectro12.

Figura 27. Los espectros de absorcin de la clorofila a y la clorofila b, y el espectro de accin de la fotosntesis. En el eje de la base est la longitud de onda de la luz, con longitudes de onda cortas (azul) a la izquierda y los de larga (rojo) a la derecha. El eje vertical izquierdo muestra los espectros de absorcin que es la cantidad de luz absorbida por el pigmento; el espectro de accin, es la suma de la fotosntesis realizada. Las clorofilas absorben poco de longitud de onda muy corta de la luz a 400 nm, y la fotosntesis se produce poco. Pero la luz en longitudes de onda ligeramente ms larga, alrededor de 425 nm, es bien absorbida por la clorofila y la fotosntesis se desarrolla. Los Quanta con longitudes de onda intermedias pasan a travs de los pigmentos y la fotosntesis es baja, pero en el rango de 650 a 680 nm (rojo) se produce una absorcin considerable. Debido a que los espectros de absorcin de la clorofila a y b son diferentes, ms longitudes de onda pueden ser eficientemente recolectados. Si los dos se emparejaran perfectamente, clorofila b sera intil.

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Figura 28. Los carotenoides siempre estn presentes en las hojas, pero la abundancia de la clorofila enmascara su presencia. En otoo la clorofila se desintegra y entonces podemos ver los carotenoides.

Figura 29. Estas manzanas tienen una abundancia de pigmentos que absorben todos los colores excepto el rojo. Ms temprano, mientras estaban en desarrollo, tuvieron el pigmento clorofila que absorbe fuertemente el rojo y el azul, pero que refleja verde.

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El espectro de accin de la fotosntesis fue determinado por primera vez en 1882 por T. W. Engelmann utilizando el alga verde. El cientfico midi el ritmo de la fotosntesis como la cantidad de O2 liberado, que midi usando bacterias que fueron atrados por el O2 producido (Figura 30).

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Figura 30. Experimento de Engelmann. Un pequeo espectro de la luz se centr en un portaobjetos de microscopio con una hilera de clulas de algas en suspensin en el agua que contiene bacterias que se mueven hacia una fuente de oxgeno13. Las bacterias se reunieron principalmente en las zonas expuestas a las porciones de color rojo y azul del espectro.

Cuando un pigmento absorbe luz, los electrones de las molculas son lanzadas a niveles energticos superiores. En la mayora de los casos, los electrones vuelven a su estudio inicial casi de inmediato. La energa desprendida cuando regresan al nivel energtico puede (1) emitirse de nuevo en una longitud de onda superior, fenmeno que se conoce como fluorescencia, (2) disiparse en forma de calor (conversin interna), o (3) ser absorbida por una molcula vecina, que lanza sus electrones a niveles de energa superiores (transferencia de exitn por resonancia inductiva) (Figura 31).

Figura 31. Las interacciones de los quantos de luz y los pigmentos. (a) Si un quanto tiene la longitud de onda errnea para un pigmento, pasa a travs de los orbitales de enlace del pigmento sin ser absorbida. La clorofila parece verde porque la mayora de la luz verde pasa por ella. (b) Si el quanto tiene la longitud de onda correcta, la cantidad correcta de energa, es absorbido y el electrn debe pasar a una nueva rbita, cuyo nivel de energa corresponde a la nueva energa ganada por el electrn. (c) El estado excitado es inestable, el electrn puede estabilizarse al emitir la suficiente energa (fluorescencia) para caer de nuevo a su nivel de energa del estado basal original.

Es un electrn, ligado a un in positivo al cual le falta un electrn que con anterioridad sali.

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(d) El electrn tambin puede ser estabilizado al trasladarse a una rbita ms estable en un tomo totalmente diferente. Este es el proceso fundamental en la fotosntesis, sin este paso, la vida no existira.

El proceso de fotosntesis comprende: 1) una fase luminosa, en la que la Luz excita la liberacin de electrones de la clorofila y produce la fotolisis del H2O, con la consiguiente liberacin de =2 que se desprende, mientras que el H2 se utiliza para la reduccin del NADP+ a NADPH; y 2) una fase oscura, en la que el CO2 es reducido para sintetizar hidratos de carbono con la intervencin del NADPH y el ATP. La fase luminosa se realiza en el sistema de laminillas y la fase oscura en el estroma8.

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Figura 32. Los organismos productores de oxigeno tienen dos Fotosistemas que actan en serie. Colocar dos fotosistemas en serie es como usar dos pilas de 1,5 V para alimentar una linterna 3 V. Dos fotones aportar la energa necesaria para llenar el vaco de tensin entre el agua y NADP.

3.3 Fase luminosa En la fase luminosa intervienen cuatro componentes que redisponen repetitivamente en el sistema de laminillas y actan de una manera coordinada: dos fotosistemas (fotosistemas I y II) (Figura 32); una cadena transportadora de electrones que transfiere electrones del fotosistema II al fotosistema I; y un factor de acoplamiento de la fosforilacin fotosinttica (CF) que es semejante a la ATP sintetasa de las mitocondrias y acopla el transporte de electrones a travs de la cadena transportadora de electrones con la sntesis de ATP8. EL proceso comprende las siguientes etapas8: 1. fotlisis del agua. Se desprende oxgeno y, en los tomos de hidrogeno, se separan los protones (que quedan en el espacio intratilacoidal) de los electrones (que se dirigen al fotosistema II. La fotlisis esta a cargo de un complejo formador de oxigeno, constituido por una protena perifrica, asociada a la cara adluminal del fotosistema II, y varios iones, entre los que se encuentran cuatro iones Mn, cada uno de los cuales acepta uno de los cuatro electrones procedentes de la fotlisis de dos molculas de agua. 2. Paso de electrones por el fotosistema II. Este fotosistema es un complejo formado por: a. Varias unidades de un complejo antena captador de luz (LHC-II), que forman el lmite externo del complejo. Cada una est constituida por tres polipptidos, cada uno de los cuales mantiene enlaces con siete molculas de clorofila a, cinco de clorofila b y dos carotenoides. b. Un centro de reaccin (RC-II) que comprende:

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i. Un complejo protena-pigmento de gran tamao(CC-II), que contiene 40 molculas de clorofila a y dos polipptidos. ii. Un complejo protena-pigmento pequeo, que contiene dos molculas de variedad de clorofila a denominada pigmento P680 (antiguamente conocida como clorofila ), que tiene la mxima absorcin de luz a 680 nm y es esencial en la fotosntesis, asociado a diversos polipptidos. iii. Diversas molculas transportadoras de electrones: un complejo integrado por protenas denominadas D1 y D2; una molcula semejante a la clorofila y denominada feofitina; dos molculas semejantes a la ubiquinona y conocidas como plastoquinona A (QA) y plastoquinona B (QB) y el citocromo b559. La captacin de luz por el complejo antena es el punto de partida de la fotosntesis (Figura 33)(Figura 34). La energa producida por la luz se transmite al centro de reaccin. En ste, la excitacin por la luz del pigmento P680 hace que este emita un electrn, y el hueco dejado por este electrn es ocupado por un electrn procedente de la fotolisis del agua. En el complejo formador de oxigeno, los electrones procedentes de la fotolisis son recibidos por iones Mn, desde donde se transfieren a una tirosina Tyrz, que forma parte del complejo D1D2 y desde ah, estos electrones se transfieren al P680. Cada electrn emitido por el P680 es aceptado por una molcula de feofitina, que es el aceptor primario de electrones. La feofitina transfiere el electrn a la plastoquinona QA (PQ) y sta a la QB. Por cada dos electrones que llegan a la QB se unen dos protones procedentes de la matriz del cloroplasto para formar la plastoquinona reducida (PQH2). Inicialmente, estos protones procedentes se liberaron del H2= en el espacio intratilacoidal pero fueron bombeados a la matriz del cloroplasto por las partculas CF. La PQH2 se libera en el interior de la bicapa lipdica y no se considera parte del fotosistema II (Figura 35, Figura 36, Figura 37).

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Figura 33. El sistema colecto de luz de los fotosistemas funciona como un embudo, donde la energa de los fotones captados por los distintos pigmentos del complejo antena es enviada hasta el centro de reaccin2.

Figura 34. Slo molculas especiales de clorofila a registran el centro de reaccin que en realidad experimenta la reaccin fotoqumica inicial de la fotosntesis, pero ellos estn rodeados por otras molculas de clorofila, as como de pigmentos accesorios; independientemente de cual sea el pigmento que absorbe la luz, la energa se transfiere al centro de reaccin.

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Figura 35. Estructura del tilacoide y localizacin de las reacciones de la fase luminosa.

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Figura 36. Los dos fotosistemas trabajan juntos para transferir electrones desde el agua a NADPH. La escala de la izquierda indica el poder reductor, el potencial redox. Cuanto ms alto esta una molcula en el grfico, mayor ser su capacidad para obligar a los electrones a transferirse a otra molcula. Debido a su forma, este diagrama se denomina esquema Z7. En la figura inferior se muestra la graduacin del potencial redox correspondiente a cada acarreador14.

Figura 37. Esta vista muestra que el sistema de transferencia de electrones (ETS) es un grupo de interaccin entre protenas transportadoras de electrones de transferencia y grupos prostticos asociados. El ETS entre los dos fotosistemas consiste en feofitina, plastoquinona, citocromos b y f, y la plastocianina. El ETS despus del fotosistema I (PSI) consiste en quinonas especiales, protenas hierro-azufre, ferredoxina, y una flavoprotena que reduce el NADP +. Esa va se llama a menudo el flujo de electrones no cclico. Tambin se muestra aqu una lnea discontinua que indica que los electrones tambin pueden pasar del ETS del PSI a los citocromos en el ETS del PSII. Esta ruta se conoce como flujo de electrones cclico, y permite al PSI operar sin el PSII. Debido a que el STE del PSII dirige la fotofosforilacin, el flujo cclico puede producir un suministro casi

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ilimitado de ATP sin generar NADPH. Esto permite que una clula pueda producir una proporcin variable de ATP a NADPH que tiene ventajas obvias15.

Figura 38. Las reacciones dependientes de luz de la fotosntesis, que se producen en ms de una forma. En la fotofosforilacin no cclica, participan los fotosistemas I y II, que convierten la energa luminosa en energa bioqumica en forma de ATP y NADPH, las molculas de agua se separan, liberando electrones, protones y oxgeno gaseoso. Los electrones se utilizan posteriormente para producir NADPH, mientras que los protones se utilizan, en parte, para permitir la produccin de ATP. El oxgeno gaseoso es un subproducto de esta fotofosforilacin no cclica, sin embargo los organismos aerbicos dependen de este gas para la respiracin. El ATP y el NADPH se utilizan en las reacciones para la fijacin de carbono que convierten el CO2 en azcares. Slo el fotosistema I participa en la fotofosforilacin cclica. En este sistema relativamente simple, los electrones son impulsados del centro de reaccin del fotosistema I las molculas se derivan de nuevo hacia centro de reaccin a travs del sistema de transporte de electrones. El ATP es producido a partir de ADP, pero el NADPH o el oxgeno no se producen.

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Figura 39. Una analoga mecnica de las reacciones de la fase luminosa16.

3. Transporte de electrones hacia el fotosistema I. La PQH2 vuelve a la forma oxidada transfiriendo los dos electrones a un complejo multiprotenico denominado citocromo b6-f, en tanto que los dos protones se liberan en la luz del tilacoides. Tras recorrer el complejo de citocromos, los electrones son transportados a una protena con Cu denominada plastocianina (PC), de donde pasan al fotosistema I. 4. El fotositema I es semejante al fotosistema II y comprende: a. Mltiples unidades de un complejo antena captador de luz (LHC-I), cada una de ellas constituida por dos protenas unidas a clorofilas; aunque no se conoce con exactitud cul es el numero de stas, se sabe que hay cuatro veces ms molculas de clorofila a que de clorofila b. b. El centro de reaccin (RC-I) comprende: i. Un complejo protena-pigmento de gran tamao (CC-I), formado por unas 80 molculas de clorofila a, algunos carotenoides y cuatro polipptidos. ii. Un complejo pequeo constituido por dos molculas de una variedad de clorofila a denominada pigmento P700 (antiguamente conocido como clorofila ), que tiene la mxima absorcin de luz a 700 nm y varios polipptidos.

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iii. Molculas transportadoras de electrones: una molcula de clorofila a (denominada A0), una molcula de filoquinona (designada A1), tres complejos de Fe y S, denominados respectivamente FX, FA y FB. Cuando la luz excita el complejo antena, la energa pasa al centro de reaccin, donde excita el pigmento P700 que emite un electrn y el hueco que deja libre este electrn es ocupado por un electrn procedente de la PC. El electrn emitido por el P700 pasa a A0. De donde es transferido a A1, y despus pasa sucesivamente por FX, FA y FB, para abandonar el fotosistema I. 5. Unin de los electrones y de los protones al NADP+ para formar NADPH. Anexo al fotositema I se encuentra una protena pequea, tambin con Fe y S, llamada ferredoxina (FD) que acepta los electrones procedentes de FB. Junto a la FD se encuentra la enzima ferredoxina-NADP-reductasa (FAD), que transfiere los electrones de la FD al NADP+ en la matriz del cloroplasto, donde, por cada electrn transferido se une un protn, presente en dicha matriz, formndose NADPH. Al igual que en las mitocondrias , donde el transporte de electrones est acoplado a la fosforilacin del ADP, existe en los cloroplastos una fosforilacin inducida por la luz, acoplada a la cadena de transferencia de electrones del fotosistema II al fotositema I. El factor de acoplamiento(CF) es una ATPasa de la porcin (CF1), en forma de pen de ajedrez, sobresale en la superficie externa (la que mira hacia el estroma) de las laminillas, mientras que la otra porcin (CF0) es un segmento hidrfobo que queda atravesando la membrana de las laminillas (Figura 40). Como en las mitocondrias dicho factor se demuestra con contraste negativo. Igual que en la mitocondria esta ATPasa realiza la fosforilacin del ADP en ATP asociada al paso de los protones que tiene lugar, a favor de gradiente, desde la luz del tilacoides hacia el estroma del cloroplasto (Figura 41). La formacin de una molcula de ATP va ligada al paso de tres protones. Este gradiente de protones es del orden de tres unidades de pH (el pH en la luz del tilacoides es aproximadamente 5, mientras que en el estroma es prximo a 8) y se debe tanto a la asimetra de las reacciones de liberacin y consumo de protones (los protones producidos por la fotolisis del agua se acumulan en el espacio intratilacoidal, en tanto que la sntesis de NADPH consume protones del estroma), como el bombeo de protones hacia el tilacoides por los complejos fotosintticos durante el transporte de electrones.

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Figura 40. ATP asas presentes en las plantas y sus caractersticas.

Figura 41. El almacenamiento de energa como una fuerza motriz de protones (gradiente H+). Por lo menos tres etapas en las reacciones luminosas contribuyen al gradiente de protones: 1. El agua se divide por el fotosistema II en el lado de la membrana del lado del espacio tilacoidal, 2. como plastoquinona (PQ), un transportador mvil, transfiere electrones al complejo citocromo, cuatro protones son translocados a travs de la membrana hacia el espacio tilacoidal, y 3. Un ion de hidrgeno es eliminado del estroma, ya que es tomada por el NADP +. Observe cmo, los iones de hidrgeno se bombean desde el estroma al espacio tilacoidal. La difusin de H + del espacio tilacoidal de nuevo hacia el estroma (a lo largo del gradiente de concentracin de H +) da propulsin a la ATP sintasa. Estas reacciones qumicas dirigidas por la luz almacenan energa en NADPH y ATP, que llevan la energa para el ciclo de Calvin en la produccin de carbohidratos16. La figura de abajo muestra las regiones de alta y baja concentracin de protones (H+)7.

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3.3.1 Fotofosforilacin cclica y no cclica La fotofosforilacin indica la formacin de ATP a partir de ADP y fsforo inorgnico utilizando la energa luminosa de la fotosntesis. Hay dos vas, la fotofosforilacin cclica y la no cclica, que tiene lugar en la membrana tilacoide los cloroplastos17.

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En la fotofosforilacin no cclica los electrones procedentes de la fotlisis del agua son trasladados a los niveles de alta energa en los fotosistemas I y II, y pasan a travs de la cadena transportadora de electrones en molculas transportadoras hasta la NADPH reductasa. Esta enzima transfiere los electrones al NADP+ para formar NADPH, lo cual proporciona una capacidad reductora a la fotosntesis en oscuridad (Figura 42)17. Figura 42. Fotofosforilacin no cclica

En la fotolisis cclica, los electrones del fotosistema I se llevan a un nivel ms energtico, del que vuelven reciclados al fotositema I con los transportadores de electrones del sistema. Cualquiera de las dos vas de flujo electrnico permite que los iones de H+ pasen al grupo de citocromos , al complejo de citocromos b6-f a travs de la membrana tilacoide. Esto crea un gradiente protnico que conduce la fosforilacin de ADP a ATP, gracias a la enzima ATP sintetiza (Figura 43)17.

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Figura 43. Fotofosforilacin cclica

3.4 Fase escura Las enzimas de las reacciones independientes de la luz son solubles y se encuentran en el estroma del cloroplasto. Este proceso comprende un gran nmero de pasos, que comienzan con la captacin de CO2 por la ribulosa-1-5-bifosfato, producindose dos molculas de cido 3-fosfoglicerico, que ser reducido por el NADPH para formar diferentes hidratos de carbono en un ciclo conocido como ciclo de Calvin (Figura 44), en el que el ATP se utiliza como fuente de energa en varios pasos. Uno de estos hidratos de carbono es el gliceraldehido-3-P. Tres molculas de CO2 fijadas suponen la produccin de una molcula de gliceraldehido-3-P, con un coste neto de tres molculas de ATP y seis de NADPH.

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Figura 44. El ciclo de Calvin-Benson-Bassham.

Gran parte del gliceraldehido-3-P pasa al citoplasma donde se transforma en hexosa (fructosa-6-P y glucosa-1-P). La ecuacin global del proceso es (Figura 45, Figura 46): 6CO2 + 18ATP +12 NADPH +12H2O C6H12O6 + 18ADP +18 Pi + 12NADPH+ + 6H20 + 6O2

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Figura 45. El ciclo de Calvin. La carboxilacin de tres molculas de ribulosa-1,5-bisfosfato conduce a la sntesis neta de una molcula de gliceraldehdo-3-fosfato y la regeneracin de las tres molculas del material inicial. Este proceso comienza y termina con tres molculas de ribulosa-1,5-bisfosfato, lo que refleja la naturaleza cclica de la ruta1.

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Figura 46. Este diagrama sigue la pista de los tomos de carbono (las pelotas grises) a travs del ciclo. Las tres fases del ciclo corresponden a las fases en que se divide el ciclo. Por cada tres molculas de CO2 que entran en el ciclo, la produccin neta es una molcula de gliceraldehdo-3-fosfato G3P, un azcar de carbono tres. Las reacciones luminosas mantienen el ciclo de Calvin mediante la regeneracin de ATP y NADPH.

La fijacin del CO2 se lleva a cabo por una enzima gigante, la ribulosa bifosfato carboxilasa /oxidasa (rubisco) que es la enzima ms abundante en la tierra. Esta enzima es muy lenta, funciona mucho ms lento que la mayora de otras enzimas. (Es decir, ~ 3 molculas de sustrato por segundo en comparacin con ~ 1000/sec de las dems). Por lo tanto, hay muchas copias de esta enzima en el estroma ~ 50% de las protenas del cloroplasto.

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La primera reaccin de fijacin del ciclo utiliza un azcar de cinco carbonos ribulosa 1-5bifosfato y le aade una molcula de CO2 para formar 2 molculas de 3 fosfoglicerato (3 de carbono). Estos se reorganizan a travs de una serie de reacciones que requieren energa, consumiendo ATP y NADPH para generar 2 molculas de gliceraldehdo 3 - fosfato. (Si esto se hiciera seis (6) veces se tendran 12 molculas de gliceraldehdo -3- fosfato (G3P). Dos (2) de los G3Ps se quitan para hacer una molcula de glucosa, mientras que los restantes 10 G3Ps vuelven a entrar en el ciclo para regenerar seis (6) de los azucares de cinco carbonos (5) ribulosa 1-5 bifosfato.

La glucosa-1-P constituye un paso intermedio en la formacin de los distintos disacridos y polisacridos de la planta. El paso ms frecuente es la unin de la glucosa-1-P y fructosa-1P para dar lugar a sacarosa-P, la cual se convierte en el disacarido sacarosa, que es la forma principal de transporte de azcar en las plantas, como en los organismos animales es la glucosa. El gliceraldehido-3-P que queda en el cloroplasto regenera la ribulosa-1-5-difosfato y el exceso se transforma en almidn, el cual es un polmero de la glucosa que sirve de reserva de hidratos de carbono, como en los organismos animales es el glucogeno, otro polmero de la glucosa. 3.5 Ciclo de Hatch Slack o metabolismo C4 En los vegetales propios de las zonas con clima tropical, donde la fotorrespiracin podra revestir un problema de notable gravedad, se presenta un proceso diferente para captar el dixido de carbono (Tabla 4). En estas plantas se distinguen dos variedades de cloroplastos: existen unos que se hallan en la clulas internas, contiguos a los vasos conductores de las hojas, y otros que estn en las clulas del parnquima cloroflico perifrico, lo que se llama mesfilo. Es en este ltimo tipo de cloroplasto en el que se produce la fijacin del dixido de carbono. La molcula aceptora de este compuesto qumico es el cido fosfoenolpirvico (PEPA), y la enzima que acta es la fosfoenolpiruvato carboxilasa, que no se ve afectada por una alta concentracin de oxgeno18. Partiendo del cido fosfoenolpirvico y del dixido de carbono se genera el cido oxalactico, constituido por cuatro carbonos (es de aqu de donde proviene el nombre de plantas C4). El susodicho cido se transforma en mlico, y este a travs de los plasmodesmos, pasa a los cloroplastos propios de las clulas internas. En estos se libera el dixido de carbono, que ser apto para proseguir el ciclo de Calvin. A consecuencia de ello, en estas plantas no se produce ningn tipo de alteracin a consecuencia de la respiracin18. La fotosntesis C4 se encuentra principalmente en las zonas tropicales y subtropicales pero tambin se encuentra en algunas hierbas, arbustos y plantas herbceas eudicotiledneas. Hay algunas plantas C4 de importancia agrcola como el maz, la caa de azcar, el sorgo y el mijo16. La principal diferencia entre la fotosntesis C3 y las vas fotosintticas C4 y CAM est en el proceso de fijacin de dixido de carbono. Como se recordar en la fotosntesis C3, el 71

dixido de carbono es capturado por la enzima Rubisco, y aadido al RuBP en el interior del cloroplasto. Esto produce 3-PGA, un compuesto de tres carbonos que da al proceso C3 su nombre. En la fotosntesis C4 y CAM, el dixido de carbono se fija en el citoplasma de las clulas del mesfilo, no dentro de los cloroplastos. El dixido de carbono entra en las clulas por difusin desde el estoma. Las plantas C4 tienen una molcula aceptora de carbono especial, fosfoenolpiruvato (PEP). La PEP carboxilasa, una enzima muy eficiente, reacciona con el dixido de carbono y PEP para producir oxalacetato, un compuesto de cuatro carbonos que da a la fotosntesis C4 su nombre. El oxalacetato se convierte rpidamente en cido asprtico o mlico (de los cuales tambin ambos son molculas de 4-carbono). Como se puede hacer notar, la fotosntesis C4 utiliza una molcula de ATP para fijar el dixido de carbono. Este gasto de energa es compensada por la reduccin de la fotorrespiracin en condiciones que limitan la disponibilidad de dixido de carbono. Este uso de la ATP en el proceso hace que la va C4 sea ms eficiente en condiciones con poca fotorrespiracin. Las molculas de cuatro carbonos entran a los cloroplastos donde el dixido de carbono es liberado para ser utilizado en el ciclo de Calvin. Tanto las reacciones luminosas como el ciclo de Calvin son las mismas en todos los tipos de fotosntesis. La enzima Rubisco fija dixido de carbono dentro del cloroplasto. A diferencia de la fotosntesis C3,en la fotosntesis C4 y la fotosntesis CAM primero se fija el dixido de carbono en compuestos de cuatro carbonos en el citoplasma de las clulas del mesfilo. La reduccin de la concentracin de dixido de carbono dentro de la hoja por fijacin en molculas de cuatro carbonos crea un gradiente de concentracin ms pronunciado, lo que aumenta la difusin de dixido de carbono de la atmosfera hacia la planta. Esto permite que las plantas C4 mantengan pequeas aberturas en las clulas oclusivas, lo que reduce la prdida de agua. Figura 47. Anatoma de una hoja C4 y la va C4. La estructura y funciones bioqumicas de las hojas de las plantas C4 son una adaptacin evolutiva a los climas clidos y secos. Esta adaptacin mantiene una concentracin de CO2 en la vaina del haz que favorece la fotosntesis por encima de la fotorrespiracin.

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Mientras las plantas C4 y CAM fijan dixido de carbono en compuestos de cuatro carbonos, las plantas C4 tienen importantes adaptaciones anatmicas que no se encuentran en las plantas CAM. En las plantas C3 y las plantas CAM, los cloroplastos se encuentran dispersos en todo el mesfilo donde un gran nmero se encuentran en la parte superior de las clulas llamadas en empalizada (Figura 49).

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Figura 48. Arreglo de las clulas en un hoja con metabolismo C3 y C4

En las plantas C4, los cloroplastos se concentran en las clulas de la vaina de tejido vascular. Las molculas de cuatro carbonos producidos en las clulas del mesfilo son transportados a los cloroplastos de estas clulas, donde se descomponen para liberar dixido de carbono. El transporte activo de dixido de carbono en los cloroplastos eleva la concentracin de dixido de carbono dentro de los cloroplastos y elimina las prdidas por fotorrespiracin. Este proceso tambin acelera la entrada de dixido de carbono en la hoja, lo que permite abrir los estomas menos lo que reduce la prdida de agua. Tabla 4. Familias de plantas con especies C4 Familia Ejemplo de la familia Aizoaceae plantas de hielo Amaranthaceae amarantos Asteraceae Aster, margaritas 74

Chenopodiaceae Pigweeds, remolacha Cyperaceae juncias Euphorbiaceae tabaibales Poaceae Las gramneas Nyctanginaceae buganvillas Portulacaceae Purslanes Zygophyllaceae (no hay ejemplo familiar) 3.6 Metabolismo cido de las crasulceas La sigla CAM es empleada como abreviacin de la equvoca expresin inglesa Crassulacean Acidic Metabolism, que puede ser traducida al espaol como metabolismo cido de las Crasulceas. Esta denominacin se acu dado que en un principio este mecanismo nicamente fue atribuido a las plantas pertenecientes a esta familia, es decir, a las Crasulceas. No obstante, en la actualidad se conocen a varias especies de plantas CAM, que pertenecen a diferentes familias de plantas crasas o suculentas (Crassulaceae, Cactaceae, Euphorbiaceae, Aizoaceae son tan slo algunos ejemplos) (Tabla 5). Por norma general, las plantas CAM son vegetales originarios de zonas con unas condiciones climticas desrticas o subdesrticas, que se encuentran sometidas a una intensa iluminacin, a altas temperaturas y a un dficit hdrico permanente. Pueden ser enumeradas muchas peculiaridades de estas plantas, como que el tejido fotosinttico es homogneo, siendo apreciable adems la inexistencia de vaina diferenciada y de clornquima en empalizada18. Como ha sido mencionado, las plantas CAM se encuentra perfectamente adaptadas a las condiciones de aridez extremas, por lo que resulta lgico que sus estomas se abran durante la noche, para evitar en la medida de lo posible la prdida de agua por transpiracin, fijando dixido de carbono en oscuridad por una reaccin de carboxilacin de PEP catalizada por PEP carboxilasa en el citosol. Como resultado se produce la formacin de oxalacetato y malato que es almacenado en la vacuola, sobrevinindose una acidificacin nocturna de la hoja. El malato almacenado en la vacuola es liberado durante el da mientras los estomas permanecen cerrados, siendo llevado al cloroplasto. Una vez en el orgnulo mentado, el malato es descarboxilado por la enzima mlico NADP dependiente y el dixido de carbono que se desprende es fijado en el ciclo de Calvin. El cido pirvico se convierte nuevamente en azcares, para finalmente convertirse en almidn. La fijacin y reduccin del carbono en las plantas CAM presenta unos requerimientos energticos, en trminos de ATP, mayores que en las plantas C3 y C4; su rendimiento fotosinttico por unidad de tiempo es menor y su crecimiento es ms lento. Como consecuencia de la adaptacin de estas plantas a sus hbitats extremos, los mecanismos que regulan el equilibrio entre transpiracin y fotosntesis estn encaminados fuertemente hacia la minimizacin de las prdidas de agua, asegurando as la supervivencia en el medio desrtico, aunque a costa de una menor productividad18. Tambin se tiene constancia de la existencia de plantas que poseen la capacidad de adaptar su metabolismo a las condiciones ambientales de modo que pueden presentar un ciclo CAM de carcter adaptativo, es decir, aunque se comportan como C3 pueden inducir el ciclo

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CAM cuando estn sometidas a ciertas circunstancias. Son las denominadas CAM facultativas, siendo ejemplo representativo de ellas la Mesembryanthemum crystallinum, la cual realiza ciclo C3 en condiciones normales de no estrs, pero cambia a ciclo CAM en respuesta a situaciones de estrs18. Las plantas CAM no tienen las adaptaciones anatmicas de las plantas C4. De hecho, su anatoma es comparable a las plantas C3. La adaptacin CAM es para fijar el dixido de carbono en diferentes momentos y no en diferentes lugares. En las plantas CAM los estomas se cierran durante el da (Figura 49). Cmo le hacen las plantas CAM para obtener dixido de carbono si mantienen sus estomas cerrados? Ellos abren sus estomas por la noche para permitir que el dixido de carbono entre en la planta. Con slo abrir los estomas en la noche, cuando la evaporacin es la ms baja y la humedad relativa es el ms alta, el metabolismo CAM es el ms agua-eficiente de los diferentes tipos de fotosntesis. Una vez dentro de la planta, el dixido de carbono debe ser almacenada para su uso posterior. Las plantas CAM fijan el dixido de carbono en molculas de cuatro carbonos, al igual que las plantas C4. Estas molculas de cuatro carbonos, como el cido mlico, se almacenan en las vacuolas de las clulas, mientras que las clulas oclusivas se abren por la noche. Una vez que sale el sol, las clulas oclusivas cierran los estomas, y no hay ms dixido de carbono que pueda entrar o salir de la planta. Durante el da, las molculas de cuatro carbono almacenados sern liberados como dixido de carbono y distribuidos para ser utilizado en la fotosntesis. Tabla 5. Familias de plantas que tienen especies CAM7. Familia Ejemplo de la familia Agavaceae Agaves, yuccas Aizoaceae Plantas de hielo Asclepiadaceae asclepias Asteraceae Aster, margaritas Bromeliaceae Bromelias Cactaceae Cactus Crassulaceae Stone crops, sedums Cucurbitaceae Cucurbitaceas, squash Didiereaceae (no common, familiar example) Euphorbiaceae tabaibales Geraniaceae Geranios Labiatae Mints Liliaceae Lirios Orchidaceae Orquideas Oxalidaceae Oxalis Piperaceae Peppers, Peperomia Polypodiaceae (a helecho) Portulaceae Purslanes 76

Vitaceae Welwitschiaceae

uvas (una gimnosperma)

Tabla 6. Comparacin de los modelos fotosinteticos5 Caracterstica Plantas C-3 Plantas C-4 Diversidad Muy grande, desde Muy grande entre taxonmica algas hasta frutales plantas que florecen; algunas algas y no plantas vasculares ni confieras Hbitat tpico Patrn no definido Regiones abiertas, calidas y salinas en ciertos casos? Anatoma de la hoja clulas en empalizada + parnquima esponjoso No existe diferenciacin celular en el mesfila, pero tienen un gran manojo de clulas envolventes (anatoma Krans) 8,000-10,000 ft-c 30 a 45C, pero puede ser menor en diferentes hbitats 60

Plantas CAM Algunas especies de 10 familias que florecen

Regiones abiertas, calidas salinas (algunas veces fras) No existe diferenciacin celular en el mesofilo; pero tienen grandes clulas con grandes vacuolas. 6,000 ft-c 20 a 35 C

Punto de saturacin luminosa Temperatura ptima Mxima tasa fotosinttica (mg dm-2 hr-1) Mxima tasa de crecimiento (g dm-2 hr-1) Eficiencia en el uso del agua (g H2O g-1 CO2) Fotorespiracin Enzima fijadora del CO2

6,000 ft-c 20 a 30 C

30

Tres (mxima reportada: 13) 0.02

600

300

50

Alta RuBP carboxilasa, produciendo un

Baja PEP carboxilasa, produciendo un

Baja PEP carboxilasa, produciendo un 77

Comportamiento de los estomas Relaciones en tiempo y espacio

cido de tres carbonos (asprtico) Abiertos de das, cerrados de noche Ocurre el ciclo de Calvin en cualquier clula del mesfilo

cido de cuatro carbonos (mlico) Abiertos de da, cerrados de noche Fijacin de CO2 inicialmente en el mesofilo y despus es transferido en forma de cido al manojo de clulas envolventes para entrar al ciclo de Calvin Ninguno

cido de cuatro carbonos (mlico) Cerrados de da, abiertos de noche Fijacin de CO2 en la noche en cualquier clula del mesofilo; se almacenan en forma de cido en la vacuola y el ciclo de Calvin ocurre en el da Altas temperaturas en la noche, suelo hmedo y muchas horas de luz convierten las plantas CAM en plantas tipo C-3 2 PPM (noche)

Efecto del ambiente

Ninguno

Punto de compensacin

50 PPM

5 PPM

Figura 49. Comparacin de la fotosntesis C4 y CAM. Ambas adaptaciones se caracterizan por 1) incorporacin preliminar de CO2 en cidos orgnicos, seguido de 2) transferencia de CO2 para el ciclo de Calvin. Las vas C4 y CAM son dos soluciones evolutivas al problema de mantener la fotosntesis con los estomas parcial o totalmente cerrados en los das calurosos y secos. a) En las plantas C4 la fijacin de carbono y el ciclo de Calvin ocurren en diferentes tipos de clulas. b) En las plantas CAM, la fijacin de carbono y el ciclo de Calvin se producen en las mismas clulas pero en diferentes momentos.

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3.7 Factores que influyen en la fotosntesis La tasa de fotosntesis puede verse limitada por factores fsicos como la temperatura. La disminucin de la temperatura vuelve ms lento el proceso. (Dentro de la gama funcional de las enzimas fotosintticas). La disponibilidad de luz puede ser un factor importante para determinar la tasa de fotosntesis. Como la cantidad de luz disminuye tambin la tasa de la fotosntesis, hasta el punto en que eventualmente hay suficiente intensidad de luz que la fotosntesis se hace igual a la respiracin. Esto se conoce como el punto de compensacin (Figura 50), (tasa de respiracin = tasa de fotosntesis).

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Figura 50. Absorcin de la luz en un lago y el punto de compensacion19.

3.8 Fotorespiracin Este proceso, que implica el cierre de los estomas de las hojas como medida preventiva ante la posible prdida de agua, se sobreviene cuando el ambiente es clido y seco. Es entonces cuando el oxgeno generado en el proceso fotosinttico comienza a alcanzar altas concentraciones18. Cuando existe abundante dixido de carbono, la enzima RuBisCO (mediante su actividad como carboxilasa) introduce el compuesto qumico en el ciclo de Calvin con gran eficacia. Pero cuando la concentracin de dixido de carbono en la hoja es considerablemente inferior en comparacin a la de oxgeno, la misma enzima es la encargada de catalizar la reaccin de la RuBisCO con el oxgeno (mediante su actividad como oxigenasa), en lugar del dixido de carbono. Esta reaccin es considerada la primera fase del proceso fotorrespiratorio, en el que los glcidos se oxidan a dixido de carbono y agua en presencia de luz. Adems, este proceso supone una prdida energtica notable al no generarse ni NADH ni ATP (principal rasgo que lo diferencia de la respiracin mitocondrial)18. Cuando una molcula de RuBisCO reacciona con una de oxgeno, se origina una molcula de cido fosfogliceraldehido y otra de cido fosfogliclico, que prontamente se hidroliza a cido gliclico. Este ltimo sale de los cloroplastos para posteriormente introducirse en los peroxisomas (orgnulos que albergan enzimas oxidativos), lugar en el que vuelve a reaccionar con oxgeno para producir cido glioxlico y perxido de hidrgeno (la accin de la enzima catalasa catalizar la descomposicin de este compuesto qumico en oxgeno y agua). Sin embargo el cido glioxlico se transforma en glicina, aminocido que se traspasa a la mitocondrias para formarse una molcula de serina a partir de dos de cido glioxlico (este proceso conlleva la liberacin de una molcula de dixido de carbono) (Figura 51,Figura 52)18. La fotorrespiracin es un proceso que ocurre en el mesfilo de la hoja, en presencia de luz, y en donde la concentracin de O2 es alta. Se realiza en plantas C3 (especialmente en poca

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de verano en donde la planta aumenta la frecuencia con la que cierra sus estomas para evitar prdida de H2O). El cloroplasto absorbe O2, que es catalizado junto con la ribulosa-1,5-bisfosfato (RuBP) por la enzima RuBisCO; transformndola as en cido gliclico o glicolato. El glicolato es traspasado al peroxisoma (saco membranoso que contiene enzimas) y con la accin de O2, son catalizados por la enzima oxidasa, transformando por una parte en perxido de hidrgeno (agua oxigenada) y en glioxilato, el que incorpora nitrgeno por transaminacin y forma el aminocido glicina. Dos de estos aminocidos son llevados a la mitocondria donde finalmente se logran tres compuestos: serina, amonaco y CO2. Los gases CO2 y amoniaco se liberan. La serina regresa al peroxisoma en donde es transformada en glicerato, ste es llevado al cloroplasto en dnde, mediante el gasto de una molcula de ATP, se reintegra al ciclo de Calvin como 3-fosfoglicerato. En conclusin la fotorespiracin produce gasto de RuBP y CO2; es un proceso de gasto energtico pero permite recuperar 3 molculas de carbono en los 3-fosfoglicerato. Se pierde un tomo de carbono en el CO2 liberado (Figura 53). Necesita 3 orgnulos, el cloroplasto, el peroxisoma y la mitocondria.

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Figura 51. Visin general de la Fotorespiracin. Cloroplasto. Entrada de 2 molculas de oxgeno, que con la ribulosa-1,5-bisfosfato producen una molcula de fosfoglicerato y una molcula de fosfoglicolato. La molcula de fosfoglicerato sirve para el ciclo de Calvin, y permite recuperar la RuBP. La molcula de fosfoglicolato pierde su fosfato y da el glicolato. Este sale del cloroplasto. Peroxisoma. El glicolato, con la accin de O2 y mediante la enzima oxidasa, esta transformado a glioxilato y se produce H2O2 (agua oxigenada). El glioxilato incorpora nitrgeno por transaminacin y forma el aminocido glicina. Este sale del peroxisoma. Mitocondria. La glicina se oxida a serina, mediante NAD+ que se reduce a NADH y libera CO2 y amonio NH4+. Peroxisoma. La serina vuelve al peroxisoma, donde se transforma en hidroxipiruvato, el cual mediante NADH se transforma a su vez en glicerato. Cloroplasto. El glicerato vuelve al cloroplasto, donde mediante una molcula de ATP se transforma en 3-fosfoglicerato y se reintegra el ciclo de Calvin. El amino liberado en la mitocondria pasa al cloroplasto en forma de NH3, lo cual mediante glutamina sintetasa permite transformar alfa-cetoglutarato en glutamato. El glutamato permite transformar serina en hidroxipiruvato en el peroxisoma, mientras se transforma en alfa-ceto-glutarato.

Figura 52. Si RuBP carboxilasa pone oxgeno sobre RuBP, uno de los productos es fosfoglicolato, que es transportado a un peroxisoma y desglosados durante la fotorrespiracin. Toda la energa que estaba presente en el fosfoglicolato se desperdicia. Las mitocondrias tambin estn involucradas.

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Figura 53. Desperdicio de energa durante la Fotorespiracin. La resultante "deformacin" del producto de este ciclo metablico, respecto de la normal, es inestable. Que en lugar de dividirse en dos molculas de 3-fosfoglicerato, (los productos normales), se divide en una molcula de 3-fosfoglicerato y una molcula de un compuesto 2-carbono, el 2fosfoglicolato20.

4. Nutricin mineral Si se elimina toda el agua de una planta y se determina luego su peso, la cantidad resultante es el peso seco de la planta, y corresponde a las restantes sustancias, orgnicas e inorgnicas de la planta. Estas sustancias estn compuestas por distintos elementos en la siguiente tabla (Tabla 7). Tabla 7. Composicin en porcentaje del peso seco, de cada elemento en un tejido vegetal2. Elemento Simbolo Proporcin (% del peso seco) Carbono C 45.0 Oxigeno O 15.0

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Hidrogeno Nitrogeno Potasio Calcio Magnesio Fsforo Azufre Cloro Hierro Manganeso Cinc Boro Cobre Molibdeno

H N K Ca Mg P S Cl Fe Mn Zn B Cu Mo

6.0 1.5 1.0 0.5 0.2 0.2 0.1 0.01 0.01 0.005 0.002 0.002 0.0005 0.00001

4.1 Macronutrientes Los macronutrientes se caracterizan por sus concentraciones superiores al 0.1% de la materia seca. Entre ellos se encuentran los principales elementos nutritivos necesarios para la nutricin de las plantas, que son el carbono, el hidrgeno, el oxgeno y el nitrgeno. Estos cuatro elementos que constituyen la materia orgnica representan ms de un 90% por trmino medio de la materia seca del vegetal. Al cual se aaden los elementos utilizados como abono y enmiendas que son: el potasio, el calcio, el magnesio, el fsforo, as como el azufre. Los tres primeros macronutrientes se encuentran en el aire y en el agua. El nitrgeno, aunque representando un 78% del aire atmosfrico, no puede ser utilizado directamente por las plantas que no pueden, a excepcin de algunas bacterias y algas, asimilarlo ms que bajo forma mineral, principalmente bajo la forma de in nitrato (NO3). Eso explica la importancia de la "nutricin aadida de nitrgeno" en la nutricin vegetal y su adicin como abono por los productores. 4.2 Los micronutrientes Los micronutrientes llamados tambin oligoelementos no sobrepasan el 0.01% de la materia seca. Son el cloro, el hierro, el boro, el manganeso, el zinc, el cobre, el nquel, el molibdeno, etc. El dficit de alguno de estos elementos puede determinar enfermedades de carencia.

Tabla 8. Resumen de las funciones ms importantes de los nutrientes inorgnicos en las plantas. Elemento Forma principal en Concentracin Funciones la que el elemento usual en plantas principales es absorbido sanas (% peso seco) Macronutrientes:

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Carbono

CO2

~ 44%

Oxigeno

H2O u O2

~ 44%

Hidrogeno

H2O

~ 6%

Nitrgeno

NO3- o NH4+

1-4%

Potasio

K+

0.5-6%

Calcio

Ca2+

0.2-3.5%

Fsforo

H2PO2- o HPO42-

0.1-0.8%

Magnesio

Mg2+

0.1-0.8%

Azufre

SO42-

0.05-1%

Componente de compuestos orgnicos Componente de compuestos orgnicos Componente de compuestos orgnicos Aminocidos, protenas, nucletidos, cidos nucleicos, clorofila y coenzimas Enzimas, aminocidos y sntesis de protenas. Activador de muchas enzimas. Apertura y cierre de estomas. Calcio de las paredes celulares. Cofactor enzimtico. Permeabilidad celular. Componente de la calmodulina, un regulador de la membrana y de las actividades enzimticas Formacin de compuestos fosfatados de alta energa (ATP y ADP). cidos nucleicos. Fosforilacin de azucares. Varias coenzimas esenciales. Fosfolpidos Parte de la molcula de clorofila. Activador de muchas enzimas. Algunos aminocidos

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(cistena y metionina) y protenas. Coenzima A. Micronutrientes: Hierro Fe2+ o Fe3+ Cl25-300ppm Sntesis de clorofila, citocromos y nitrogenada Osmosis y equilibrio inico, probablemente esencial en reacciones fotosintticas que producen oxigeno. Activador de ciertas enzimas Activador de ciertas enzimas Activador de muchas enzimas Fijacin del nitrgeno. Reduccin del nitrato. Influye en la utilizacin del calcio Requerido por microorganismos que fijan el nitrgeno Equilibrio omtico y inico, probablemente no es esencial para muchas plantas. Requeridos por algunas especies del desierto y marismas. Puede ser necesario en todas las plantas que utilizan la fotosntesis C4.

Cloro

100-10,000 ppm

Cobre Manganeso Zinc Molibdeno

Cu2+ Mn2+ Zn2+ MoO42BO3- o B4O72-

4-30ppm 15-800 ppm 15-100 ppm 0.1-5.9 ppm

Boro

5-75 ppm

Elementos esenciales para algunas plantas u organismos Cobalto Co2+ Trazas Na+

Sodio

Trazas

Se han encontrado cuando menos 60 elementos en las plantas; aparentemente, la mayor parte de los elementos que pueden disolverse en agua pueden entrar en alguna forma a las plantas. Actualmente se considera que un elemento es esencial si:

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1. Una planta no puede crecer y reproducirse normalmente sin l. 2. No existe otro elemento que lo pueda reemplazar o corregir su deficiencia. 3. No se trata simplemente de un antdoto; es decir, no acta para sobreponer los efectos txicos de otro elemento. Figura 54. Los deficiencias minerales ms comunes, que se ven en hojas de maz. Los sntomas de deficiencia de minerales pueden variar en diferentes especies. En el maz, las plantas con deficiencia de fosfato tienen mrgenes color rojizo prpura, sobre todo en las hojas jvenes; las plantas de maz con deficiencia de potasio exhiben "quemado", o secado, a lo largo de puntas y mrgenes de las hojas ms viejas. La deficiencia de nitrgeno es evidente en un color amarillento que se inicia en la punta y se mueve a lo largo del centro (nervadura central) de las hojas viejas21.

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Figura 55. Gua de sntomas de dficit de nutrientes en la planta de Maz.

Tabla 9. Algunas funciones de los elementos minerales y los sntomas de su deficiencia. Mineral Funciones de los elementos Sntomas de deficiencia mineral minerales Nitrgeno Parte de aminocidos, No hay crecimiento es limitado y protenas, coenzimas, cidos presenta clorosis (amarillamiento) o nucleicos, clorofila, ATP. perdida de las hojas en casos graves. Coloracin purprea causada por acumulacin de pigmentos de antocianinas. Toda la planta se ve afectada, principalmente las hojas ms viejas. Fsforo Parte de azucares fosfatados, Plantas enanas color verde oscuro. nucletidos, cidos Acumulacin de pigmentos de nucleicos, fosfolpidos, antocianinas. Maduracin retardada. coenzimas (NADP, ATP y Toda la planta resulta afectada otras) especialmente las hojas ms viejas. Potasio Coenzima. Necesario para la Clorosis moteada, necrosis (manchas sntesis proteica. Esencial de tejido muerto, especialmente en para el funcionamiento de los las puntas y mrgenes entre las estomas y tiene diversas venas). Las hojas ms viejas son las funciones. ms afectadas. Tallos dbiles, races ms propensas a enfermedades. Azufre Parte de protenas, Clorosis de hojas jvenes, coenzimas A, tiamina y generalmente no hay necrosis. Las biotina. venas permanecen verdes, tejido verde claro.

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Magnesio

Parte de la clorofila. Activa numerosas enzimas Mantiene la estructura de los ribosomas Puede ser esencial para la sntesis y estabilidad de la lmina media. Mantiene la estructura y permeabilidad de las membranas. Parte de la a-amilasa. Necesario para el movimiento de los cromosomas en la mitosis y meiosis. Para esencial de los citocromos. Puede ser un activador de ciertas enzimas. Formacin de clorofila. Activa las enzimas fotosintticas Formacin de aminocidos. Activa muchas enzimas. Acarreador de electrones, catalizador Translocacin de carbohidratos. Su verdadera funcin es probablemente desconocida. Formacin de clorofila. Produccin de acido indolacetico, parte de ciertas enzimas Acarreador de electrones, parte de ciertas enzimas.

Calcio

Hojas moteadas o con clorosis; pueden ser rojizas Las puntas de hojas volteadas hacia arriba. Las hojas ms viejas resultan ms afectadas. Inhibicin del desarrollo de la raz y muerte de las puntas del tallo y races. Hojas jvenes y brotes principalmente afectados.

Fierro

Clorosis intervenosa de las hojas jvenes tallos cortos y delgados. Las yemas permanecen vivas. Hojas marchitas, clorosis, necrosis. Races enanas, engrosadas, o con puntas en forma de garrote. Clorosis de hojas jvenes, necrosis intervenosa; las venas ms pequeas permanecen verdes. Desorganizacin de la membrana lamelar Muerte de los meristemos apicales de races y tallos. Hojas retorcidas y plidas en la base. pices de la races hinchados y descoloridos. Los tejidos ms afectados son los jvenes. Reduccin del tamao de las hojas y de la distancia de los entrenudos. Mrgenes de las hojas deformados. Clorosis. Las hojas viejas son las ms afectadas. Hojas jvenes frecuentemente color verde oscuro, torcidas, marchitas y deformadas. Los pices permanecen vivos. Clorosis o torcedura y muerte de las hojas jvenes.

Cloro

Manganeso

Boro

Zinc

Cobre

Molibdeno

Acarreador de electrones. Esencial en la fijacin de nitrgeno.

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Figura 56. Las plantas requieren diferentes cantidades de N en diferentes etapas de crecimiento: las plntulas y plantas senescentes definitivamente requieren mucho menos N que las plantas de floracin y fructificacin.

4.3 Fuente de los minerales En la estructura del suelo aparecen, adems de las partculas de materiales inorgnicos procedentes de la degradacin de rocas y minerales, materiales de origen orgnico, agua y aire (Figura 57)

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Figura 57. Estructura del suelo.

Pueden llevar sobre su superficie una cierta cantidad de cargas fijas (negativas, normalmente), capaces de adsorber ciertos cationes, como K+ o Ca2+ (Figura 58). Los cationes adsorbidos no son arrastrados por el agua gravitacional y pueden pasar a la solucin del suelo o a la raz mediante su intercambio por otro catin o por protones procedentes del cido carbnico (Figura 59, Figura 60).

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Figura 58. A medida que las rocas se deshacen, los componentes cargados negativamente son ms resistentes, por lo que las rocas fragmentadas (micelas) tienen cargas negativas en su superficie. Debido a esto, los cationes que van siendo liberados no se pierden sino que se quedan cerca de las micelas atrados por las dbiles cargas elctricas.

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Figura 59. Papel de los pelos radicales en el incremento de la superficie de intercambio del agua y los nutrientes minerales en el suelo

Figura 60. (a) La reaccin del agua y del dixido de carbono dan como resultado cido carbnico (H2CO3), la mayora de los cuales se disocia en un protn y el anin bicarbonato. Algunas disociaciones posteriores del bicarbonato, liberan otro protn y el anin carbonato.

(b) Los protones del cido carbnico puede difundir lo suficientemente cerca de un catin para interrumpir su atraccin hacia una micela del suelo, liberndolo.

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(c). Como el catin se difunde a travs del suelo, se puede encontrar una raz (flecha a) o puede que no (flecha b).

4.4 Absorcin de sales minerales La absorcin de iones inorgnicos tiene lugar a travs de la epidermis de la raz. El camino principal que siguen los iones desde la epidermis de la raz a la endodermis es simplstica. El movimiento radial de los iones continua en el simplasto cortical, de protoplasto a protoplasto, va plasmodesmos a travs de la endodermis y se incorporan a las clulas del parnquima del cilindro vascular. Desde las clulas del parnquima cortical, los iones son secretados al xilema (vasos o traqueidas) por un mecanismo de transporte activo mediado por transportadores (Figura 61).

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Figura 61. Tasa de absorcin de fosfato en la planta de maz despus de 4 das continuos de oscuridad y posterior iluminacin. Estos datos indican que la absorcin de sales en las plantas es un proceso activo que requiere energa.

Absorcin activa de solutos Como se puede comprobar la composicin mineral de las clulas de la raz es muy diferente de la del medio en que crece una planta. En una experiencia realizada en guisante (Pisum sativum) se encontr que las clulas de la raz tenan una concentracin de iones potasio 75 veces mayor que la de la solucin nutritiva. En otro estudio se demostr que las vacuolas de las clulas del nabo (Brassica napus) contenan 10,000 veces ms potasio que la solucin nutritiva. Sabido que las sustancias no difunden en contra de gradiente de concentracin, queda claro que los minerales se absorben por transporte activo. Por otra parte la absorcin de minerales es un proceso activo que necesita energa; si las races son privadas de la presencia de oxgeno, o envenenadas de forma que la respiracin se minimiza, la absorcin de minerales disminuye de forma muy marcada. Igualmente, si se priva a una planta de luz, cesar la absorcin de sales una vez se hayan agotado las reservas de hidratos de carbono, y las liberar de nuevo a la solucin del suelo. As pues, el transporte de iones desde el suelo a los vasos del xilema requiere dos procesos de transporte activo a travs de membranas: uno en la membrana citoplasmtica de las clulas epidrmicas durante la absorcin y otro en la membrana citoplasmtica de las clulas del parnquima vascular durante la secrecin a los vasos.

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4.5 Transporte de nutrientes inorgnicos Cuando los iones inorgnicos son secretados en el interior de los vasos de xilema radical, son rpidamente conducidos hacia arriba y por toda la planta gracias a la corriente de transpiracin. Algunos iones se mueven lateralmente desde el xilema hacia los tejidos circundantes de las races y de los tallos, mientras que otros son transportados hacia las hojas. Una vez alcanzadas las hojas los iones pueden seguir tres caminos: (1) son transportados con el agua en el apoplasto de la hoja; (2) pueden permanecer en el agua de transpiracin y llegar a los lugares principales de prdida de agua, los estomas y clulas epidrmicas; y (3) La mayora de los iones entran en los protoplastos de las clulas de la hoja, probablemente por mecanismos en los que est implicado el transporte activo, y moverse va simpltica a otras partes de la hoja, incluyendo el floema. Los iones inorgnicos, en pequeas cantidades, tambin se pueden absorber a travs de las hojas, posibilidad que se utiliza en la fertilizacin foliar y que consiste en la aplicacin directa de micronutrientes al follaje (Fundamental en las plantas epifitas). Permite que las plantas absorban diversas sustancias que, aplicadas en las partes areas de las mismas, actuarn como fertilizantes, herbicidas, etc. Cantidades importantes de los iones inorgnicos que son importados por las hojas a travs del xilema, son posteriormente intercambiados con el floema en los nervios foliares, y exportados, junto con la sacarosa, en la corriente de fotoasimilados. Cuando los nutrientes se dirigen hacia las races va floema, pueden reciclarse; es decir pueden intercambiarse con el xilema. Pero slo aquellos iones que pueden moverse en el floema, a los que se llama floema-mviles, se pueden exportar en cantidades significativas desde las hojas. El N, el P, el K, y el Mg son tpicamente mviles y pueden ser transportados con relativa facilidad a otros rganos, mientras que el Ca, el S y el Fe son ms o menos inmviles y tienden a permanecer en el primer destino alcanzado hasta la muerte de ese rgano. 4.6 Suministro de nutrientes y crecimiento Debido a la esencialidad de los nutrientes para la formacin de nuevas molculas y nuevas clulas, existe una estrecha relacin entre suministro de nutrientes y crecimiento. Para estudiar esta relacin, por lo general se recurre a las tcnicas de cultivo hidropnico con soluciones nutritivas. La tcnica de cultivo hidropnico se basa en reemplazar el sustrato natural, el suelo, por agua o algn otro material inerte, de tal forma que no proporcione a la planta ningn nutriente. El aporte de nutrientes se realiza aadiendo al

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sustrato inerte una solucin nutritiva que contendr diversas sales inorgnicas cuyos aniones y cationes llevarn los elementos necesarios. Existen diferentes frmulas estandarizadas de soluciones completas, que permiten el normal crecimiento de las plantas. Sin embargo, tambin es posible modificar esta composicin para estudiar qu ocurre cuando un determinado nutriente falta, est en cantidades muy bajas, o se encuentra en exceso. Cuando se estudia la respuesta del crecimiento frente a cantidades variables de un nutriente, se obtiene una curva como la siguiente (Figura 62). Figura 62. Respuesta del crecimiento de las plantas ante concentraciones variables de un nutriente: (a) regin de deficiencia; (b) regin de concentracin ptima; (c) regin en que otros factores son limitantes del crecimiento; (d) regin de toxicidad.

La primera parte de la curva corresponde a concentraciones bajas del nutriente, es casi rectilnea y con cierta pendiente. Representa la zona de carencia o deficiencia, en la que la disponibilidad est por debajo de los requerimientos, y el elemento en estudio es limitante del crecimiento. En la zona de carencia habr un menor crecimiento que el que correspondera con un suministro ptimo del nutriente en cuestin, adems tambin aparecern en muchos casos manchas amarillentas (clorosis), coloraciones rojizas, necrosis, etc. En esta regin un aumento de la concentracin del nutriente corresponder un aumento proporcional del crecimiento. La localizacin de los sntomas estar en relacin con la movilidad del nutriente. En el caso de elementos mviles, sern transportados a las zonas en crecimiento, y los sntomas se

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apreciarn en las hojas ms viejas, generalmente las inferiores. En el caso de elementos inmviles los sntomas de deficiencia se manifestarn en las partes jvenes. En condiciones naturales las deficiencias pueden estar causadas por la escasez del nutriente en el suelo, por encontrarse el nutriente en formas qumicas inadecuadas, o bien por antagonismo con algn otro compuesto. La segunda parte de la curva es casi horizontal. Representa la zona de concentracin ptima, en la que se ha alcanzado el mximo crecimiento que los otros factores permiten. El nutriente en estudio ha dejado de ser limitante y un aumento en su concentracin no produce mayor crecimiento debido a que otro factores actan como limitantes. Si se sobrepasa con mucho la concentracin ptima, se llega a la zona de toxicidad en la que se produce una cada del crecimiento, debido a efectos txicos del nutriente. Figura 63. Principales sntomas carenciales producidos por macronutrientes.

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Figura 64. Principales sntomas carenciales producidos por micronutrientes.

Figura 65. Sntomas de carencia de Magnesio en tomate.

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Figura 66. Sntomas de carencia de Zinc

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Figura 67. Sntomas de carencia de Hierro en un rosal

Figura 68. Sntomas de carencia de Fsforo en vid.

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Figura 69. Sntomas de carencia de Manganeso en patata

4.7 Factores que influyen en la nutricin mineral. Factores endgenos. Crecimiento de la raz: permite explorar nuevos volmenes de suelo. Presencia de micorrizas: asociacin de tipo mutualista con diversas especies de hongos. La raz cede las sustancias orgnicas que el hongo necesita, mientras que la presencia de ste favorece notablemente la absorcin de agua y de algunos nutrientes, especialmente P (Figura 70).

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Figura 70. Efecto de las micorrizas. En la maceta de la izquierda el suelo ha sido tratado adecuadamente para destruir los hongos presentes. La planta sufre la carencia de fsforo y eso repercute en su desarrollo. En las macetas centrales y de la derecha los hongos estn presentes en forma de micorrizas asociados a las races de las mismas.

Aporte de fotoasimilados para la produccin de ATP (necesario para el transporte activo). Factores exgenos. Temperatura, pH y aireacin, principalmente. El pH: el pH Neutro o poco cido (5-7): favorece la disponibilidad de los nutrientes (Figura 71). Un pH muy bajo puede insolubilizar algunos nutrientes y movilizar el aluminio (Al3+), con frecuencia txico. Valores muy altos: reducen la disponibilidad. Fsforo: el PO43- se absorbe con ms dificultad que los fosfatos cidos (PO4H2-, PO4H2-). La baja solubilidad de algunos iones metlicos se contrarresta si se forman quelatos con molculas orgnicas solubles.

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Figura 71. Forma en que el pH afecta a la disponibilidad de los nutrientes minerales. La anchura de cada banda nos indica la disponibilidad de dicho elemento por parte de las races.

4.8 Micorrizas

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La palabra micorriza, de origen griego, define la simbiosis entre un hongo (mycos) y las races (rhizos) de una planta. Como en otras relaciones simbiticas, ambos participantes obtienen beneficios. En este caso la planta recibe del hongo principalmente nutrientes minerales y agua, y el hongo obtiene de la planta hidratos de carbono y vitaminas que l por s mismo es incapaz de sintetizar mientras que ella lo puede hacer gracias a la fotosntesis y otras reacciones internas. Muchas plantas presentan micorrizas para aumentar la absorcin de agua y sales minerales del suelo. Las micorrizas son la asociacin entre races de una planta y el micelio de un hongo, de forma que toda la extensin del micelio participa en la absorcin de nutrientes para la planta. En la Naturaleza esta simbiosis se produce espontneamente. Se estima que entre el 90 y el 95% de las plantas superiores presentan micorrizas de forma habitual. Es posible que un mismo hongo forme la micorriza con ms de una planta a la vez, establecindose de este modo una conexin entre plantas distintas; esto facilita la existencia de plantas parsitas (algunas de las cuales ni siquiera realizan la fotosntesis, como las del gnero Monotropa), que extraen todo lo que necesitan del hongo micobionte y las otras plantas con las que ste tambin establece simbiosis. As mismo, varios hongos (en ocasiones de especies diferentes) pueden micorrizar una misma planta al mismo tiempo. 4.8.1 Ventajas de la micorrizacin Las ventajas proporcionadas por la micorrizacin para las plantas son numerosas. Gracias a ella, la planta es capaz de explorar ms volumen de suelo del que alcanza con sus races, al sumrsele en esta labor las hifas del hongo; tambin capta con mayor facilidad ciertos elementos (fsforo, nitrgeno, calcio y potasio) y agua del suelo. La proteccin brindada por el hongo hace que, adems, la planta sea ms resistente a los cambios de temperatura y la acidificacin del suelo derivada de la presencia de azufre, magnesio y aluminio. Por si todo esto fuera poco, algunas reacciones fisiolgicas del hongo inducen a la raz a mantenerse activa durante ms tiempo que si no estuviese micorrizada (Figura 72).

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Figura 72. En la maceta de la izquierda, los hongos del suelo fueron eliminados, y la planta sufre de deficiencia de fsforo. En las dos macetas de la derecha, las micorrizas de los hongos estn presentes.

Todo esto redunda en una mayor longevidad de la planta: de hecho, se ha comprobado que algunos rboles, como los pinos, son incapaces de vivir ms de dos aos cuando estn sin micorrizar. En otras especies, esta unin es tan estrecha que sin ella la planta no puede subsistir, como es el caso de las orqudeas. Las plantas cuyas semillas carecen de endosperma (sustancias alimenticias de reserva) dependen completamente del hongo para alimentarse y germinar posteriormente. La infeccin de la raz por el hongo se produce a partir de propgulos presentes en el suelo. Pueden ser esporas y trozos de hifas del hongo y tambin races ya micorrizadas. Con el fin de asegurar el xito de la empresa, la siembra de la mayora de plantas comestibles o de decoracin y las repoblaciones forestales que se llevan a cabo en la actualidad acompaan las nuevas plantas y brotes con fragmentos del hongo ms adecuado para establecer asociaciones micorrcicas con cada especie que se vaya a cultivar. Segn su morfologa, las micorrizas se dividen en distintos grupos entre los que cabe destacar dos principales: las ectomicorrizas y las endomicorrizas (Figura 73). 4.8.2 Tipos de micorrizas Hongo ectomicorrizo, Nscalo, Lactarius deliciosus, (Basidiomycota). Las ectomicorrizas se caracterizan porque las hifas del hongo no penetran en el interior de las clulas de la raz, si no que se ubican sobre y entre las separaciones de stas. Se pueden observar a simple vista y presentan la llamada Red de Hartig. Este tipo de micorrizacin es el que predomina entre los rboles de zonas templadas, siendo especialmente caracterstico en hayas, robles, eucaliptus y pinos. Los hongos son tanto Basidiomycota como Ascomycota.

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En las endomicorrizas, en cambio, no hay manto externo que pueda verse a simple vista. Las hifas se introducen inicialmente entre las clulas de la raz, pero luego penetran en el interior de stas, formando vesculas alimenticias y arbsculos. Por ello se las conoce tambin como micorrizas VAM o micorrizas vesculoarbusculares. Los hongos pertenecen a la divisin Glomeromycota y se dan en todo tipo de plantas, aunque con predominio de hierbas y gramneas. Abundan en suelos pobres como los de las praderas y estepas, la alta montaa y las selvas tropicales. En el bosque atlntico aparecen junto a las ectomicorrizas. Figura 73.Tipos de micorrizas

5. Fijacin de nutrientes 5.1 Fijacin de nitrgeno El nitrgeno en estado gaseoso no puede ser utilizado directamente por las plantas, pero se fija a compuestos que contienen nitrgeno por las bacterias de vida libre o simbitica y cianobacterias. Las leguminosas fijadoras de nitrgeno forman una de las ms grandes familias del mundo, dominando muchas comunidades de plantas (Tabla 10, Tabla 11). 5.1.1 El proceso de infeccin Los pelos radicales de las leguminosas segregan un quimioatrayente que hace que las bacterias se acumulen. Causan una curvatura en el pelo radical y entran en la corteza de la raz por un hilo infeccin. La divisin celular es estimulado para formar un ndulo con conexiones vasculares de la planta.

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Tabla 10. Organismos que participan en la fijacin del nitrgeno Planta hospedera organismo fijador de nitrgeno La alfalfa (Medicago) Bradyrhizobium meliloti Trbol (Trifolium) Rhizobium leguminosarum Lentejas (Lens) Guisante (Pisum) Bean (Viciai) Loto de pie de pjaro (Lotus) Rhizobium loti De soja (Glycine) Bradyrhizobium japonicum Aliso (Alnus) Actinomicetos Mirto de pantano (Myrica gale) Actinomicetos Helecho acutico (Azolla) Anabaena

Tabla 11. Las plantas que forman asociaciones con procariotas fijadores de nitrgeno Procariota Planta Las cianobacterias Anabaena Helechos: Azolla Nostoc Las ccadas: todos los gneros examinados Actinomicetos Frankia Angiospermas Betulaceae (abedules y alisos de la familia) Casuarinaceae (familia beefwood) Eleagnaceae (la familia de la oliva rusa) Myricaceae (familia arrayn) Rhamnaceae (familia espino) Rosaceae (familia de las rosas) Eubacteria Rhizobium

Angiospermas Fabaceae (familia de las leguminosas) Ulmaceae (familiar almez)

Figura 74. El ndulo que forma rizobium otorga la capacidad de fijar nitrgeno slo despus de introducirse en la raz de una leguminosa. El diagrama muestra la secuencia de eventos en la formacin de un ndulo. La fotografa muestra bacteroides de Rhizobium japonicum en las vesculas dentro de una clula de raz de soja. Una porcin de una clula de raz no infectada se ve a la derecha.

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5.1.2 La biologa molecular de la fijacin de nitrgeno La compleja interaccin de la bacteria y el hospedero requiere la accin coordinada de los genes NOD en el hospedero que codifica la nodulacin y la leghemoglobina (un hemoprotena encontrado en los ndulos de la raz que fijan nitrgeno en leguminosas), y los genes nod, nif y fix en la bacteria para codificar la infeccin, la especificidad del hospedero y los componentes de la nitrgeno-fijacin. Figura 75. El maravilloso y sorprendente ciclo de la comunicacin entre la bacteria simbiotica fijadora de nitrgeno del gnero Rhizobium (cada especie leguminosa tiene su propia especie simbitica de Rhizobium) y la planta de leguminosa a la que considera su hogar.

5.1.3 Bioqumica de la fijacin del nitrgeno La fijacin de nitrgeno requiere 16 moles de ATP por mol de nitrgeno y las condiciones casi anaerobias creado por la unin del oxgeno a la leghemoglobina. Las bacterias en el citoplasma estn rodeados por la membrana peribacteroide. La fijacin del nitrgeno es catalizada por dinitrogenase en tres etapas: (i) reduccin de la Fe-protena, (ii) reduccin de la protena MoFe por la Fe-protena (requiere ATP), (iii) reduccin del nitrgeno por la MoFe-protena (Figura 76). El nitrgeno se exporta en compuestos de alto contenido de nitrgeno como los aminocidos o los ureidos. Figura 76. Fijacin del nitrgeno. Los electrones son llevados por la ferredoxina reducida; la reductasa transfiere 8 e-, uno cada vez que se repite el ciclo; 2 molculas de ATP se

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hidrolizan por ciclo; el O2 lo inhibe, para ello la planta suministra leghemoglobina; la planta suministra las necesidades de energa (e-)

5.2 Ciclo del nitrgeno Los seres vivos cuentan con una gran proporcin de nitrgeno en su composicin qumica. El nitrgeno oxidado que reciben como nitrato (NO3) a grupos amino, reducidos (asimilacin). Para volver a contar con nitrato hace falta que los descomponedores lo extraigan de la biomasa dejndolo en la forma reducida de ion amonio (NH4+), proceso que se llama amonificacin; y que luego el amonio sea oxidado a nitrato, proceso llamado nitrificacin (Figura 77, Tabla 12.).

Tabla 12. Estados de oxidacin de los compuestos de nitrgeno Nitrato NO3N =+5 Nitrito NO2N = +3 Amonaco NH3 N=3 Amonio NH4+ N=3 Grupo amino en aminocidos NH2 N=3 Al igual que el carbono, el nitrgeno puede tener varios nmeros de electrones en ms o menos orbitales de enlace estables. La carga parcial de nitrgeno puede ser el resultado de sumar las cargas parciales sobre los protones (+ 1) y los oxgenos (2). La reduccin de nitrato a nitrito requiere dos electrones; la reduccin del nitrito en amonaco requiere seis.

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As parece que se cierra el ciclo biolgico esencial. Pero el amonio y el nitrato son sustancias extremadamente solubles, que son arrastradas fcilmente por la escorrenta y la infiltracin, lo que tiende a llevarlas al mar. Al final todo el nitrgeno atmosfrico habra terminado, tras su conversin, disuelto en el mar. Los ocanos seran ricos en nitrgeno, pero los continentes estaran prcticamente desprovistos de l, convertidos en desiertos biolgicos, si no existieran otros dos procesos, mutuamente simtricos, en los que est implicado el nitrgeno atmosfrico (N2). Se trata de la fijacin de nitrgeno, que origina compuestos solubles a partir del N2, y la desnitrificacin, una forma de respiracin anaerobia que devuelve N2 a la atmsfera. De esta manera se mantiene un importante depsito de nitrgeno en el aire (donde representa un 78% en volumen). Figura 77.Ciclo del Nitrgeno.

5.2.1 Fijacin del nitrgeno El primer paso en el ciclo es la fijacin (reduccin) del nitrgeno atmosfrico( N2) a formas distintas susceptibles de incorporarse a la composicin del suelo o de los seres vivos, como el ion amonio (NH4+) o los iones nitrito (NO2) o nitrato (NO3) (aunque el amonio puede ser usado por la mayora de los organismos vivos, las bacterias del suelo derivan la energa de la oxidacin de dicho compuesto a nitrito y ltimamente a nitrato); y tambin su conversin a sustancias atmosfricas qumicamente activas, como el dixido de nitrgeno (NO2), que reaccionan fcilmente para originar alguna de las anteriores (Figura 78). 113

Fijacin abitica. La fijacin natural puede ocurrir por procesos qumicos espontneos, como la oxidacin que se produce por la accin de los rayos, que forma xidos de nitrgeno a partir del nitrgeno atmosfrico. Fijacin biolgica de nitrgeno. Es un fenmeno fundamental que depende de la habilidad metablica de unos pocos organismos, llamados diaztrofos en relacin a esta habilidad, para tomar N2 y reducirlo a nitrgeno orgnico: N2 + 8H+ + 8e + 16 ATP 2NH3 + H2 + 16ADP + 16 Pi La fijacin biolgica la realizan tres grupos de microorganismos diazotrofos: Bacterias gramnegativas de vida libre en el suelo, de gneros como Azotobacter, Klebsiella o el fotosintetizador Rhodospirillum, una bacteria purprea. Bacterias simbiticas de algunas plantas, en las que viven de manera generalmente endosimbitica en ndulos, principalmente localizados en las races. Hay multitud de especies encuadradas en el gnero Rhizobium, que guardan una relacin muy especfica con el hospedador, de manera que cada especie alberga la suya. Cianobacterias de vida libre o simbitica. Las cianobacterias de vida libre son muy abundantes en el plancton marino y son los principales fijadores en el mar. Adems hay casos de simbiosis, como el de la cianobacteria Anabaena en cavidades subestomticas de helechos acuticos del gnero Azolla, o el de algunas especies de Nostoc que crecen dentro de antoceros y otras plantas. La fijacin biolgica depende del complejo enzimtico de la nitrogenasa. 5.2.2 Amonificacin La amonificacin es la conversin a ion amonio del nitrgeno que en la materia viva aparece principalmente como grupos amino (-NH2) o imino (-NH-). Los animales, que no oxidan el nitrgeno, se deshacen del que tienen en exceso en forma de distintos compuestos. Los acuticos producen directamente amonaco (NH3), que en disolucin se convierte en ion amonio. Los terrestres producen urea, (NH2)2CO, que es muy soluble y se concentra fcilmente en la orina; o compuestos nitrogenados insolubles como la guanina y el cido rico, que son purinas, y sta es la forma comn en aves o en insectos y, en general, en animales que no disponen de un suministro garantizado de agua. El nitrgeno biolgico que no llega ya como amonio al sustrato, la mayor parte en ecosistemas continentales, es convertido a esa forma por la accin de microorganismos descomponedores. 5.2.3 Nitrificacin La nitrificacin es la oxidacin biolgica del amonio al nitrato por microorganismos aerobios que usan el oxgeno molecular (O2) como receptor de electrones, es decir, como oxidante. A estos organismos el proceso les sirve para obtener energa, al modo en que los hetertrofos la consiguen oxidando alimentos orgnicos a travs de la respiracin celular. El C lo consiguen del CO2 atmosfrico, as que son organismos auttrofos. El proceso fue

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descubierto por Sergi Vinogradski y en realidad consiste en dos procesos distintos, separados y consecutivos, realizados por organismos diferentes: Nitritacin. Partiendo de amonio se obtiene nitrito (NO2). Lo realizan bacterias de, entre otros, los gneros Nitrosomonas y Nitrosococcus. Nitratacin. Partiendo de nitrito se produce nitrato (NO3). Lo realizan bacterias del gnero Nitrobacter. La combinacin de amonificacin y nitrificacin devuelve a una forma asimilable por las plantas, el nitrgeno que ellas tomaron del suelo y pusieron en circulacin por la cadena trfica. 5.2.4 Desnitrificacin La desnitrificacin es la reduccin del ion nitrato (NO3), presente en el suelo o el agua, a nitrgeno molecular o diatmico (N2) la sustancia ms abundante en la composicin del aire. Por su lugar en el ciclo del nitrgeno este proceso es el opuesto a la fijacin del nitrgeno. Lo realizan ciertas bacterias hetertrofas, como Pseudomonas fluorescens, para obtener energa. El proceso es parte de un metabolismo degradativo de la clase llamada respiracin anaerobia, en la que distintas sustancias, en este caso el nitrato, toman el papel de oxidante (aceptor de electrones) que en la respiracin celular normal o aerobia corresponde al oxgeno (O2). El proceso se produce en condiciones anaerobias por bacterias que normalmente prefieren utilizar el oxgeno si est disponible. El proceso sigue unos pasos en los que el tomo de nitrgeno se encuentra sucesivamente bajo las siguientes formas: nitrato nitrito xido ntrico xido nitroso nitrgeno molecular Expresado como reaccin redox: 2NO3- + 10e- + 12H+ N2 + 6H2O Como se ha dicho ms arriba, la desnitrificacin es fundamental para que el nitrgeno vuelva a la atmsfera, la nica manera de que no termine disuelto ntegramente en los mares, dejando sin nutrientes a la vida continental. Sin l la fijacin de nitrgeno, abitica y bitica, habra terminado por provocar la deplecin (eliminacin) del N2 atmosfrico. La desnitrificacin es empleada, en los procesos tcnicos de depuracin controlada de aguas residuales, para eliminar el nitrato, cuya presencia favorece la eutrofizacin y reduce la potabilidad del agua, porque se reduce a nitrito por la flora intestinal, y ste es cancergeno.

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Figura 78. El ciclo del nitrgeno: fijacin de nitrgeno, la nitrificacin, reduccin de nitratos y desnitrificacin son los componentes de un ciclo qumico esencial que convierte el gas nitrgeno atmosfrico en iones de amonio y nitrato -las formas de nitrgeno que pueden ser absorbidos por las plantas- y devuelve N2 a la atmsfera.

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Figura 79. Ciclo del nitrgeno. Existe abundante N2 en la atmosfera, la fijacin por bacterias = reduccin a NH3 (NH4+). La nitrificacin, en el suelo (NH4+) se oxida a nitrito y nitrato. Las plantas y muchas bacterias convierten el nitrato y el nitrito a (NH4+) y aminocidos, etc. Los animales obtienen los aminocidos de las plantas. La desnitrificacin es la conversin de nitratos a N2.

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6. Crecimiento y desarrollo Crecimiento y desarrollo El crecimiento implica la divisin celular seguido de alargamiento celular (Figura 82). Los meristemos primarios producen colecciones de las clulas en anillos concntricos, que forman los tejidos principales de la planta. El desarrollo ocurre cuando las clulas y los 118

tejidos cambian de forma y de funcin para dar los rganos y estructuras necesarias durante el ciclo de vida de una planta. El crecimiento se origina en las clulas nuevas que forman los meristemos. Crecimiento celular El crecimiento celular se produce cuando la pared celular se hace flexible por las enzimas. La fuerza motriz para la expansin celular es la presin de turgencia, que empuja a la membrana plasmtica contra la pared celular. La direccin del crecimiento se rige por la orientacin de las fibras de celulosa en la pared. Embriognesis El vulo fecundado se divide para dar primero una clula apical y otras basales. Las clulas basales forman el suspensor y la cofia, la clula apical da la raz, tallos y cotiledones de la plntula. Los linajes de la clula pueden trazarse desde la plntula a travs de las diferentes etapas de la divisin celular, la etapa octante, la etapa dermatogena y el embrin en forma de corazn. Desarrollo de los tejidos Las clulas establecidas en el meristemo forman todos los tejidos de la planta. La primera etapa del desarrollo es la determinacin, en el que se establece la especializacin de la clula en una lnea de cambio. La clula se convierte y se diferencia en su nueva funcin. La determinacin y diferenciacin implican alteraciones en la expresin gnica. Cultivo de tejidos y totipotencia En el cultivo de tejidos, los trasplantes de tejido diferenciado se usan para formar un callo y, a continuacin rediferenciarlo variando las hormona u otras condiciones de crecimiento. Las clulas aisladas en cultivo pueden demostrar ser totipotentes, ya que pueden regenerarse para formar una planta entera (Figura 80). Comunicacin clula-clula La comunicacin de clula a clula se produce a travs de los plasmodesmos conectando las filas o bloques de clulas por va del simplasto. Desarrollo comparado de plantas y animales Las paredes celulares impiden los movimientos celulares que son caractersticos del desarrollo animal. El tejido embrionario vegetal se mantiene a travs de la vida de la planta, mientras que los animales tienen distintas fases embrionarias. Esto da una mayor plasticidad al desarrollo de las plantas. Las clulas vegetales muestran totipotencia, la capacidad de las celdas individuales para regenerar un organismo completo. La comunicacin clula a clula en las plantas se limita a los plasmodesmos.

Figura 80. Teoricamente cualquier clula vegetal, excepto las no nucleadas o las que estn envueltas por una pared rgida lignificada, son capaces de regenerar el organismo del cual derivan, por eso se denominan totipotentes. Los grupos de clulas similares forman tejidos, los tejidos y los sistemas de tejidos estn organizados en rganos, y la disposicin espacial de los rganos constituye el organismo. Las plantas se regenerar in vitro a partir de rganos 119

(pices de races y vstagos, yemas laterales y yemas vestigiales, primordios foliares, embriones en desarrollo, catafilos, etc.); tejidos (mdula, corteza, epidermis, floema, nucela); clulas (parnquima, colenquima, granos de polen uni o binucleados); y protoplastos. El esquema ilustra algunas de las vas para conseguir la regeneracin de una planta completa.

6.1 Crecimiento y desarrollo El crecimiento se produce cuando las nuevas clulas y tejidos se forman por divisin celular, seguido por la elongacin de la clula. El desarrollo es el proceso mediante el cual las clulas cambian de forma y funcin para formar los tejidos especializados, los rganos y las estructuras necesarias durante el ciclo de vida de una planta. Comienza con la primera divisin celular despus de la fecundacin del vulo y contina a travs del desarrollo de 120

semillas, la germinacin de semillas, el desarrollo de la plntula hacia una planta madura, la floracin y produccin de la prxima generacin de vulos. Tambin incluye los procesos de muerte celular y la senescencia de las plantas. Todos estos procesos son regulados por las plantas a travs de diferentes mecanismos (Figura 81). Figura 81. Regulacin del crecimiento y desarrollo de las plantas.

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Figura 82. Posibles tipos de divisin celular.

El crecimiento de las plantas es acumulativo, las nuevas clulas se aaden constantemente en los meristemos, las regiones que, en esencia siguen en estado embrionario durante la vida til de la planta. El crecimiento de la planta comienza con la divisin celular. El alargamiento de la clula y el cambio en la forma y la funcin le siguen posteriormente. En los meristemos, clulas que se dividen rodean el centro de reposo donde no se producen divisiones celulares. Como las nuevas clulas estn rodeadas por una pared celular, la migracin de las clulas a nuevos lugares es imposible. Por lo tanto, las filas (o hileras) de las clulas formadas (por lo general en anillos concntricos) predicen los futuros tejidos de la raz o de las ramas. Dado que el crecimiento primario se produce por la formacin de nuevos tejidos en las puntas de crecimiento, las diferentes clulas y tejidos en la misma planta son de diferentes edades. El crecimiento de una hierba dicotilednea se puede considerar que se producen como sucesivos phytomeros compuestos de tallo, brotes y una hoja (Figura 83).

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Figura 83. La planta puede ser considerado como un nmero de unidades que se repiten (phytomeros) que en esta dicotiledneas comprende una hoja o las hojas, un nudo, un entrenudo y un brote.

El crecimiento celular en las plantas slo puede ocurrir cuando la pared celular se hace flexible por la accin de las enzimas que descomponen los enlaces cruzados de la celulosa. La direccin de la expansin celular est regulada por la orientacin de las grandes fibras (fibrillas de celulosa) en la pared. La fuerza motriz para la expansin celular es la presin de turgencia, que empuja a la membrana plasmtica en contra de la pared celular. El crecimiento celular se produce en gran medida separado de la divisin celular. 6.2 Embriognesis El plan bsico de la planta se establece poco despus de que el vulo es fecundado, en las primeras etapas del desarrollo del embrin (embriognesis) en la formacin de la semilla. La embriognesis en Arabidopsis, una dicotilednea, se muestra en la Figura 84. El vulo fertilizado se divide para dar dos clulas: la clula apical y la clula basal. Las clulas basales forman el suspensor, que conecta el embrin al tejido materno, y al meristemo de la cofia. La clula apical sufre muchas divisiones celulares. La primera etapa es la etapa octante (nombre de las ocho clulas que se forman en dos niveles). Esto es seguido por la etapa dermatogena (donde las divisiones celulares tangenciales se han producido dando la creacin de capas de tejido). Por ltimo, se forma el embrin en forma de corazn. sta contiene los orgenes de todas las estructuras principales de la plntula. Los lbulos de la forma de corazn son los cotiledones, y entre ellos se encuentra el brote del meristemo. El centro del corazn, forma el hipocotilo y las capas inferiores la raz. Como las clulas de las

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plantas no pueden migrar durante el desarrollo, es posible rastrear linajes celulares desde las etapas dermatogena y octante. Estos linajes se ilustran en la Figura 84. Figura 84. Embriognesis en una dicotilednea tpica

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Figura 85. El desarrollo de un embrin en una planta eudicotiledonea. Para cuando el vulo se convierte en una semilla madura y los tegumentos se endurecen y se hace mas densa dentro de la cubierta de la semilla, el cigoto ha dado lugar a una planta embrionaria con los rganos rudimentarios.

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Figura 86. Los cotiledones verticales puede dar al embrin una forma de torpedo, y por este punto, el suspensor se est degenerando y los brotes de los meristemos apicales y la sala de los meristemos apicales estn establecidos. Estos meristemos darn lugar a las estructuras adultas de la planta despus de la germinacin. El impulso de crecimiento de los cotiledones resulta en el torpedo y las etapas de bastn. En este punto, la embriognesis se detiene, y la semilla madura se deshidrata y permanece latente hasta la germinacin.

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Figura 87. En las imgenes siguientes, los descendientes de la clula apical se muestran en amarillo, y los descendientes de los de clulas basales se muestran en color rosa.

6.3 Hormonas del crecimiento vegetal Una hormona se define como una sustancia orgnica que se encuentra en la naturaleza en bajas concentraciones, ejerce una profunda influencia en un proceso fisiolgico y no es parte de una va metablica importante. Las hormonas vegetales coordinan procesos tan diversos como el desarrollo del embrin y la respuesta al estrs (Figura 81, Figura 88, Figura 89). Como el desarrollo de la planta muestra algunas diferencias importantes desde el desarrollo de los animales, no es de extraar que las hormonas vegetales tengan muchas diferencias en cuanto a naturaleza y modo de accin respecto de las hormonas de los mamferos. Para evitar esta confusin se han utilizado otros trminos, como sustancia del crecimiento vegetal (PGS) y fitohormonas. Un resumen de las caractersticas principales de hormonas vegetales, y cmo se diferencian de los animales, se presenta en la Tabla 13 y Tabla 14. Tabla 13. Diferencias y similitudes entre las hormonas de las plantas y de los animales. Animal Planta Molcula orgnica de Si Si origen natural orgnica ejerciendo un efecto

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profundo en procesos fisiolgicos Activo en bajas concentraciones

Sintetizado en un rgano o tejido diferente alejado del punto de accin Transportados en un sistema circulatorio

Si (10x la gama habitual entre los inactivos y en actividad plena) Si

S (puede ser unas 1,000x el rango entre inactivos y activos)

Si

Tiene una o pocas funciones Requerir receptores especficos en la clula para funcionar

Si

Si

No necesariamente; la sntesis podra difundir a travs de la planta o en, o cerca del punto de accin Ni hay sistema circulatorio, el transporte es en una direccin especfica, por ejemplo en el xilema, o de una clula a otra) puede ocurrir A menudo respuestas mltiples, dependiendo del tejido, la edad y otros factores S. A la vista de los mltiples efectos de las hormonas vegetales, la presencia de protenas receptoras especficas es fundamental para determinar la respuesta final

Figura 88. Recordemos el modelo generalizado de una va de transduccin de seales activadas por hormonas

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Figura 89. Mecanismos de acciones de las hormonas vegetales.

Figura 90. Vas de respuesta hormonal. Las hormonas actan a travs de la unin a protenas llamadas receptores. Las respuestas hormonales son a manudo amplificados y avanzan por rutas bioqumicas a travs de compuestos intermediarios llamados segundos mensajeros. Muchas de las respuestas a hormonas vegetales son mediadas a travs de transformaciones en la expresin gnica dentro del ncleo. Genes especficos son activados o desactivados como resultado de la accin hormonal. Finalmente, las hormonas afectan el crecimiento celular al causar cambios en la arquitectura y en las propiedades qumicas de la pared celular.

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Tabla 14. Las hormonas vegetales (fitohormonas) y sus efectos. Efectos fisiolgicos y funciones Auxina cido 3-indolactico, cido Dominancia apical, fenilactico gravitropismo y fototropismo, diferenciacin vascular, inhibicin de la abscisin, estimulacin de la sntesis de etileno, inhibicin o induccin de la floracin (en pia tropical), estimulacin del desarrollo del fruto (fruto partenocrpico), induccin de races en esquejes 6 Citocina Derivados de N -adenina Dominancia apical, compuestos de fenilurea crecimiento del brote, desarrollo del fruto, demora en la senescencia foliar Etileno CH2=CH2 Maduracin de frutos (especialmente climatricos, como manzanas, pltanos y aguacates), senescencia de hojas y flores, abscisin. Giberelina cido giberlico (GA3) Estimulacin de la GA1 floracin en plantas de da largo y en bienales, elongacin del brote, regulacin de la produccin de enzimas en las semillas de cereales. cido abscsico ABA Cierre de estomas, en algunas especies puede ser necesario para la abscisin y la latencia (dormancia). 6.4 Auxinas

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La auxina ms importante en las plantas es el cido indol-3-actico (IAA). Un nmero de otros compuestos con actividad de auxina incluyen el cido fenoxiactico y cido indol 3butrico (Figura 91).

Figura 91. Estructuras qumicas de las auxinas. cido indol-3-actico (IAA) es la auxina de mayor actividad que se encuentra en las plantas. cido actico naftaleno (ANA), cido 2,4diclorofenoxiactico (2,4-D) y el cido 2,4,5-triclorofenoxiactico (2,4,5-T) son las auxinas sintticas con aplicaciones comerciales.

6.4.1 Efectos de las Auxinas Crecimiento de elongacin. El principal efecto de la auxina es la de regular el crecimiento del tallo. Para ello, estimula el crecimiento de las clulas en la direccin de elongacin (Figura 92). Los brotes se estimulan por la auxina de 10-6 a 10-7 M. La elongacin de las races, por el contrario, es mucho ms sensible, con la mxima estimulacin del crecimiento en la auxina a 10-9 a 10-10 M, y la inhibicin en concentraciones ms altas (Figura 96).

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Figura 92. Elongacin celular por medio de la hiptesis del crecimiento cido. IAA estimula las bombas H + en la membrana celular. La bombas de H+ secretan H+ hacia la pared celular, reduciendo su pH. Esto acidifica la pared celular que activa las enzimas dependientes de pH y rompe los enlaces entre las microfibrillas de celulosa. La pared se "afloja" por los enlaces rotos y la presin de turgencia expande la clula.

Dominancia Apical: una caracterstica del crecimiento de muchas plantas es el crecimiento dominante de la yema apical. Cuando este botn se retira, el crecimiento de yemas axilares se forma un poco detrs de la punta es estimulada, hasta que uno de ellos se convierte en dominante y el crecimiento de los dems se suprime. La sustitucin de la yema apical con auxina inhibe las yemas axilares, lo que sugiere que las altas concentraciones de auxina generados en el pice inhiben las yemas axilares. La aplicacin de citoquininas a las yemas axilares les libera de la inhibicin, por lo que las interacciones auxina-citocinina son responsables del fenmeno (Figura 93).

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Figura 93. Dominancia apical en Coleus. (a) La auxina que se sintetiza en el meristemo apical caulinar se difunde hacia abajo, reprimiendo el crecimiento de las yemas axilares. Cuanto mayor sea la distancia entre el pice y la yema axilar, menor ser la concentracin de auxina, y menor ser la represin sobre la yema. (b) Si el meristemo apical se corta, eliminndose la produccin de auxina, las yemas axilares quedan desinhibidas y comienzan a crecer vigorosamente.

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Figura 94. a, las plntulas de hierba tienen una vaina llamada coleptilo que rodea el primer conjunto de hojas. El crecimiento del coleptilo depende de la punta, y con la eliminacin de la punta se detiene el crecimiento. Al aadir de nuevo la punta asimtrica muestra que el efecto promotor del crecimiento se desplaza hacia abajo y no hacia lateral, causando que la plntula se doble porque un lado est creciendo ms rpido que el otro. La auxina puede reemplazar la punta para lograr este efecto. b, el corte del tallo puede ser inducida por la auxina para producir races. c, Las fresas dependen de la auxina producida por las semillas en desarrollo para la expansin y maduracin. Si las semillas se quitan, se produce poco crecimiento. El crecimiento normal se puede restablecer con la auxina.

Divisin celular y diferenciacin. Cuando un callo, una masa amorfa de clulas indiferenciadas (Tema F1) se cultiva en una placa de agar con nutrientes, el grado de divisin y diferenciacin celular para formar las races y los brotes puede variar al modificar la relacin auxina: citoquinina. Ambas hormonas son necesarias; La Figura 95, resume los resultados de este experimento. Estos efectos tambin se encuentran en las plantas donde las auxinas inducen la formacin de races laterales en esquejes.

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Figura 95. La regulacin del crecimiento y desarrollo por la relacin auxina:citoquinina. Explantes cultivados en un medio que contiene agar nutritivo pueden ser inducidos a formar callos amorfos, o races, tallos, hojas y capullos, variando la relacin auxina: citoquinina.

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Figura 96. Las auxinas y el alargamiento celular y la curvatura de los tallos hacia la luz. (a) Con el estmulo luminoso, la auxina se desplaza hacia el lado oscuro del tallo, (b) con lo que aumenta la concentracin de la hormona en ese lado. (c) En estas clulas, la mayor concentracin de auxina estimula el transporte de H+ del citoplasma a la pared celular (flechas negras curvas). La acidez que se origina activa una enzima de la pared celular que rompe los enlaces puente entre las molculas de celulosa, con lo que la plasticidad de la pared se ve aumentada. El agua que entra por smosis en la vacuola celular hace aumentar la turgencia (flechas azules verticales) y la clula se alarga (d). Las clulas situadas en el lado iluminado no se alargan (e) y, como resultado, el brote se curva hacia la luz

Gravitropismo A diferencia de lo que ocurre con el estmulo luminoso unilateral, la gravedad no acta en forma de gradiente entre las partes superiores e inferiores de un rgano. Todas las partes de una planta experimentan el estmulo gravitacional de forma semejante. Cmo detectan las clulas de una planta la gravedad? La nica forma en que la gravedad puede ser detectada es a travs del movimiento de un cuerpo cayendo o en estado de reposo. Unos buenos candidatos en las clulas vegetales son los grandes y densos amiloplastos presentes en muchas de estas clulas. Estos amiloplastos son lo suficientemente densos con respecto al citoplasma donde se encuentran como para que se sedimenten en el fondo de las clulas debido a la gravedad (Figura 97). Los amiloplastos que las plantas emplean para detectar la gravedad se denominan estatolitos y se encuentran en clulas especiales denominadas estatocitos.

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Figura 97. Clulas centrales de la caliptra. (A) En su orientacin vertical normal. (B) Despus de que la raz se haya colocado horizontalmente. Los cuerpos globulares oscuros que contienen almidn son los amiloplastos (estatolitos). Se observa como su posicin en la clula cambia al variar la posicin de la raz

En las races, que tienen gravitropismo positivo, los estatocitos se localizan entre las clulas de la cofia. Siempre que la raz est creciendo adecuadamente, los estatolitos estarn sedimentados en las paredes basales de las clulas. Sin embargo, cualquier variacin en la direccin del crecimiento har que los estatolitos se desplacen hacia las paredes laterales de los estatocitos, alterando as la correcta redistribucin de auxina entre las clulas radicales (Figura 98)

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Figura 98. Modelo propuesto para la redistribucin del calcio y de la auxina durante el gravitropismo en las races. El AIA es sintetizado en el tallo y transportado a la raz va sistema vascular. Cuando la raz est vertical, los estatolitos se depositan en la parte basal de las clulas de la caliptra. Los iones Ca2+ y la auxina (que se transportan acropetalamente en la raz) se reparten por igual dentro de la corteza en la zona de elongacin, promoviendo la elongacin. Cuando la raz est horizontalmente, los estatolitos se caen por su peso hacia las paredes laterales de las clulas, lo que dispara el transporte de Ca2+ y la auxina hacia un sola mitad de la cofia. La llegada a la corteza de concentraciones muy elevadas de auxina produce la inhibicin del crecimiento y provoca la curvatura de la raz

6.4.2 Sntesis de auxinas Las auxinas son en su mayora sintetizados a partir del aminocido triptfano, principalmente en las hojas jvenes, brotes de los meristemos y frutos en desarrollo, donde las clulas se multiplican rpidamente. IAA tambin se crea por una bacteria (Agrobacterium tumifaciens) y existen diferentes vas, entre ellos uno en el que la AIA se sintetiza a partir de fosfato indol o indol-3-glicerol en lugar de triptfano (Figura 99).

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Figura 99. Biosntesis del cido indolactico (indol 3-acetato; auxina) a partir de triptfano en plantas y en bacterias. Las enzimas que slo se presentan en bacterias estn marcadas con un asterisco. El NAD+ y el NADP+ se sintetizan tambin a partir del triptfano

6.4.3 Transporte de auxinas Auxinas muestra transporte polar (unidireccional). Se mueve baspeto (desde el vrtice a la base) en coleptilos aislados (la vaina encierra la hoja primaria en una hierba) y los tallos. Pequeas cantidades de auxinas son producidas en el pice de la raz y tambin pueden tener desplazamiento baspeto (en este caso de la punta de la raz hasta la raz), pero esta se limita en comparacin con la del brote. El transporte polar en los tallos se produce en el parnquima que rodea los tejidos vasculares que afectan protenas especficas de transporte de auxina. Su transporte puede ser inhibida por los inhibidores del transporte de auxina, como el cido 1-N-naftilftalamico (NPA). Las auxinas sintetizadas en las hojas tambin se transporta en una forma no polar en el floema, este proceso es aproximadamente 10 veces ms rpido que en el transporte polar. Los estudios en Arabidopsis han revelado un gen, AUX1, expresado en el pice de la raz, codifica una protena de transporte de auxina que participa en la elongacin de direccin, por ejemplo, en gravitropismo (Figura 103). Figura 100. El transporte de auxina es polar y basipeta (no acropeta). El transporte de auxina ha sido estudiada desde mediados del siglo 20 cuando se pudo marcar con radioistopos. El experimento tpico para mostrar esto es como se ilustra. Cuando la seccin del coleptilo se coloca sin voltear entre los dos bloques de gelatina, la auxina puede pasar a travs de ella

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hasta el bloque receptor que se encuentra debajo. No hay paso de auxinas cuando se invierte el fragmento de coleptilo.

Una familia de posibles protenas exportadoras de auxina, conocidas como protenas PIN (nombre que procede de las inflorescencias en forma de pino formadas por el mutante pin1 de Arabidopsis) estn localizadas precisamente, como predice el modelo, en los extremos basales de las clulas conductoras. Las protenas PIN tienen de 10 a 12 segmentos transmembrana caractersticos de una gran superfamilia de transportadores bacterianos y eucariticos, que incluyen protenas de resistencia a frmacos y transportadores de azucares (Figura 101). Figura 101. Topologa, de la protena PIN1 en los diez segmentos transmembrana y un gran bucle hidrofilico en el medio.

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Figura 102, Recirculacin de PIN dependiente de auxina entre la membrana plasmtica y un compartimento endsomico. Los inhibidores del transporte de auxinas, TIBA y NPA, interfieren en la relocalizacin de las protenas PIN1 en las membranas plasmticas basales despus del lavado para eliminar BGA. Esto sugiere que estos inhibidores del transporte de auxina interfieren en la recirculacin de PIN1.

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Figura 103. a) Raz lateral. Pins conducen la auxina del centro de la raz (estela) a la nueva punta de la raz (las auxinas se indican en verde y el transporte de auxinas se indica con flechas rojas), y despus otra vez por medio de la epidermis. Esto forma la base de la 'fuente' del modelo de formacin de las races laterales. b) Embrin. La auxina es tomada por el embrin muy joven a travs de la PIN7 (izquierda). En una etapa posterior (a la derecha), el flujo de auxina se invierte con PIN1, PIN4 y PIN7 que conducen la auxina fuera del embrin. El transporte por PIN1, PIN4 y PIN7 se indica con flechas de color azul, verde y rojo, respectivamente . c) vstagos del meristemo apical. La auxina es redirigido hacia el sitio de formacin de nuevas hojas (primordios P1 y P2 y el primordio incipiente l1) en la capa epidrmica. El pice del brote se indica en azul. d) Hojas. Las auxinas intervienen en el desarrollo de los tejidos vasculares (indicado como lneas verdes ininterrumpidas) y en el patrn de desarrollo en la hoja a travs de PIN1 no polares. Las flechas indican los sitios de produccin de auxina y los crculos rojos indican la acumulacin de auxina. e) Raz principal. Los Pins determinan el flujo de auxina hacia la punta de la raz desde el centro de la raz, y de nuevo hacia la epidermis. Este movimiento constituye la base de la capacidad de la raz para responder con rapidez a la gravedad.

6.4.4 Cmo actan las auxinas

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La auxina incrementa la plasticidad de la pared celular. Cuando la pared celular se ablanda, la clula se dilata debido a la presin del agua dentro de su vacuola (presin de turgencia). A medida que se reduce la presin del agua, por dilatarse la clula, sta toma ms agua y de este modo continua agrandndose hasta que la pared opone resistencia. Segn parece, el ablandamiento de la pared celular no es debido a la interaccin directa entre el AIA y los constituyentes qumicos de la pared. Tanto la biosntesis del ARN como la de protenas son necesarias para que se d este efecto de ablandamiento; si son inhibidas, no se observa ni ablandamiento ni crecimiento. Estudios realizados en clulas caulinares demostraron que el AIA incrementaba la biosntesis de celulasa, la enzima que digiere la celulosa. Los tejidos vegetales tratados con AIA tienen de 12 a 14 veces ms celulasa que los no tratados, en condiciones idnticas. As, es presumible que, por lo menos, algunos de los efectos producidos en la pared celular por la auxina provengan de la produccin de nuevo RNA mensajero codificador de la celulasa, la cual rompe las trabazones que impiden el crecimiento de la pared celular (Figura 104). Figura 104. Posibles etapas en la accin de la auxina. (1) El AIA se enlaza a un receptor de membrana especfico (sealado en la membrana plasmtica); (2) el complejo AIA-receptor interacta con otros ligandos, iniciando una cadena de eventos bioqumicos; (3) las bombas de protones de la membrana se activan, acidificando la pared celular y causando su debilitamiento; (4) se estimulan la sntesis y secrecin de los componentes de la pared celular; (5) protenas reguladoras migran desde el citosol al ncleo; (6) estas protenas se enlazan a sus sitios reguladores en genes especficos, estimulando la transcripcin; (7) la traduccin de los ARNm regulados por auxina conducen a protenas que intervienen en el crecimiento celular

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Figura 105. Resumen de las funciones de la auxina (cido indolacetico).

6.5 Giberelinas Las giberelinas se descubrieron en la dcada de 1930 por cientficos japoneses que investigaban una enfermedad del arroz causada por el hongo Gibberella fujikuroi, que resulta en plantas altas y sin semillas. Cerca de 100 giberelinas se han identificado en las plantas aunque muchos no tienen actividad biolgica. El ms estudiado, y probablemente ms significativo es giberelina GA3. Al igual que las otras giberelinas, tiene una estructura basada en ent-gibberellane (Figura 106).

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Figura 106. Algunas giberelinas activas e inactivas. Todos se basan en una estructura conocida como ent-gibberellane. Tres de las ms de 65 giberelinas que han sido aisladas de fuentes naturales. El cido giberlico (GA3) es la ms abundante en hongos y la biolgicamente ms activa en muchos test.

6.5.1 Funciones de la giberelinas Respuestas al medio ambiente. Muchas especies permanecen como plantas de roseta hasta que hayan sido expuestos a temperaturas bajas (vernalizacin) o a un nmero de das largos. Las espinacas, por ejemplo, mantiene un forma achaparrada, hasta que aumenta la longitud del da, que es cuando empieza a crecer hacia arriba y florece. Los niveles de giberelina son bajos en las plantas de roseta, pero aumenta dramticamente en respuesta al nuevo entorno, e iniciar la respuesta de crecimiento. AG1 es el ms significativo en las respuestas de elongacin y GA9 en la floracin. Los resultados ms manifiestos se observan cuando se aplican giberelinas a algunas plantas con enanismo debido a un solo gen mutante (Figura 107). Tratadas con giberelina, tales plantas llegan a confundirse con las normales. Este efecto espectacular hace pensar que el resultado de la mutacin, en trminos bioqumicos, ha sido una prdida de la capacidad de la planta para sintetizar sus propias giberelinas.

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Figura 107. Aspecto de plantas de juda (Phaseolus vulgaris) mutantes y normales. (A) Mutante ultra-enano que no produce GAs. (B) Mutante enano que slo produce GA20. (C) Planta normal que produce GA1. (D) Planta mutante enana a la que se aaden GAs exgenas.

Induccin de la germinacin. En algunas semillas que muestran latencia, la aplicacin de giberelina rompe con esa latencia. En otras semillas, las giberelinas son esenciales en la coordinacin de los procesos de germinacin, el aumento de la actividad sobre la rehidratacin de la semilla y el inicio de la actividad de las hidrolasas que movilizan las reservas de almacenamiento de la semilla. El papel de las giberelinas en la germinacin de la cebada es de importancia econmica en el proceso de malteado, que forma parte de la fabricacin de la cerveza (Figura 108, Figura 109). Las semillas de la mayora de las plantas precisan un perodo de letargo antes de que puedan germinar. En determinadas plantas, normalmente el letargo slo puede ser interrumpido por la accin del fro o de la luz.

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En muchas especies, entre las que cabe incluir la lechuga, el tabaco, y las avenas espontneas, las giberelinas pueden sustituir el factor que interrumpe el letargo, promoviendo as el crecimiento del embrin y la salida de la plntula (Figura 110). Especficamente, las giberelinas aumentan la elongacin celular, haciendo posible que las races puedan atravesar las cubiertas de las semilla. Este efecto de las giberelinas tiene, al menos, una aplicacin prctica. El cido giberlico acelera la germinacin de las semillas y por ello asegura uniformidad en la produccin de la malta de cebada usada en cervecera. Figura 108. La GA estimula la germinacin de semillas de especies que se mantienen en suspenso, por el cido abscsico. Un organismo que ha sido ampliamente estudiado por los fisilogos vegetales en este sentido es la cebada (Hordeum vulgare). Esta semilla se germina (malteada) para producir cerveza. El proceso de germinacin implica, en parte, la conversin de almidn en el endospermo de la semilla en maltosa (un disacrido). Esta maltosa se convierte en alcohol y dixido de carbono por la fermentacin del extracto de la semilla por la levadura (hongos) durante la fabricacin de cerveza.

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Figura 109. Las giberelinas rompen la latencia de las semillas que requieren bajas temperaturas (termoperodo) o luz para germinar (fotoperodo), como es el caso de las semillas de aliso (Alnus acuminata) en que 5 ppm de giberelina sustituye el requerimiento de luz. En algunas semillas, las giberelinas estimulan la actividad de enzimas hidrolasas que promueven la movilizacin de las reservas del endospermo durante el proceso de germinacin.

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Figura 110. (A) Las coles, una planta de da largo, permanece como planta en roseta durante los das de tipo da corto y slo espigar despus de haber pasado por una poca de das de tipo da largo. (B) Sin embargo, la aplicacin exgena de giberelinas induce el espigamiento y la floracin sin necesidad de haber sido estimulada naturalmente por das tipo da largo.

Otros efectos de las giberelinas: las giberelinas estn involucradas en la regulacin de la transicin de forma juvenil a maduro en el crecimiento de algunas especies perennes como la hiedra (Hedera helix) tal cmo se puede observar en la Figura 111, en el inicio de la floracin y la promocin de la formacin de frutos.

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Figura 111. Diferentes morfologa foliar de la hiedra (Hedera helix). (a) Forma juvenil. (b) Forma adulta

6.5.2 Sntesis Las giberelinas son cidos de diterpeno sintetizados por la va de los terpenos. Los terpenos son compuestos construidos por la repeticin de unidades de isopreno:

La ubicacin de las primeras etapas de la sntesis de giberelinas es el plasto, donde la sntesis del isopreno se produce a partir de gliceraldehdo-3-fosfato y piruvato. Las etapas posteriores se producen en plastos de meristemas y en las enzimas del retculo endoplsmico (RE) y el citoplasma. Las giberelinas se sintetizan prcticamente en todas las partes de la planta, pero especialmente en las hojas jvenes. Tambin se puede encontrar grandes cantidades de giberelinas en los embriones, semillas y frutos, y es posible que ah que ah se sinteticen. Esos rganos son fuentes excelentes de giberalinas para extraccin y estudio. Aun cuando algunas giberalinas se sintetizan en las races, estas sustancias prcticamente no tienen efecto alguno en el crecimiento radicular, e incluso pueden llegar a inhibir la iniciacin de primordios de races en los fragmentos de tallos, a diferencia de las auxinas.

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6.5.3 Transporte Las giberelinas viajan rpidamente en todas direcciones a travs de la planta: en el xilema y el floema, a lo largo del parnquima cortical o de otros tejidos parenquimatosos. A diferencia del IAA, su transporte no es polar. Figura 112. El efecto del cido giberlico sobre el crecimiento de las uvas Thompson Seedles, un cultivar de Vitis vinifera. El racimo de la izquierda contiene uvas no tratadas, mientras que el de la derecha fue tratado con cido giberlico.

6.5.4 Como actan las giberalinas Las giberelinas incrementan tanto la divisin como la elongacin celular, debido a que tras la aplicacin de giberelinas se incrementa el nmero de clulas y la longitud de las mismas. En el caso de las auxinas, el debilitamiento de la pared celular, necesario para el alargamiento celular, est mediado en parte por la acidificacin de la misma. Sin embargo, ste no parece ser el mecanismo de accin de las giberelinas. Las giberelinas pueden inducir el crecimiento a travs de una alteracin de la distribucin de calcio en los tejidos. Los iones calcio inhiben el crecimiento de los hipoctilos de lechuga, y esta inhibicin puede ser revertida por la aplicacin de giberelina (GA3). Los estudios ms importantes sobre el mecanismo de accin de las giberelinas y de las fitohormonas en general han sido llevados a cabo simultneamente por investigadores de Japn, Australia y Estados Unidos. Estos estudios, que fueron hechos sobre semillas de cebada, sealan la secuencia de cambios que ocurren en el embrin en vas de crecimiento y demuestran el papel principal desempeado por la giberelina es esta secuencia. Adems,

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suministran uno de los mejores ejemplos de como las hormonas integran la bioqumica y la fisiologa de los diferentes tejidos de una planta. En las semillas de cebada (Hordeum vulgare) y de otras gramneas hay una capa de clulas especializadas, la capa de aleurona, que est inmediatamente por debajo del episperma. Estas clulas son ricas en protena. Cuando las semillas empiezan a germinar tras la imbibicin de agua, el embrin desprende giberelina, segn han puesto de manifiesto estos estudios. Por efecto de la giberelina, las clulas de aleurona producen enzimas hidrolticos, de las cuales la principal es la -amilasa, que desdobla el almidn en azcares (Figura 113). Figura 113. La liberacin de azcar desde el endospermo puede ser inducida por el tratamiento con giberelinas (GA3). Estos datos muestran que los azcares slo se producen cuando est presente la capa de aleurona. Esta es, de hecho, la fuente de la enzima -amilasa que digiere el almidn almacenado en el endospermo.

Las enzimas digieren las reservas nutritivas almacenadas en el endospermo amilceo, que son entonces utilizables para el embrin, en forma de azcares y aminocidos, que son absorbidos por el escutelo y transportados a continuacin hacia el embrin (Figura 114). De este modo, el embrin pide anticipadamente las sustancias necesarias para su propio crecimiento, las cuales estarn a su disposicin en el momento que las necesite.

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Figura 114. Accin del cido giberlico (GA3) en semillas de cebada. Las giberelinas son sintetizadas (1) por el coleoptilo y el escutelo del embrin y liberadas en el endospermo (2); las giberelinas difunden hacia la capa de aleurona; (3) las clulas de la capa de aleurona son inducidas a sintetizar y segregar enzimas (a-amilasas y otras hidrolasas) en el endospermo amilceo. (4) el almidn y otros polmeros son degradados a pequeas molculas; (5) los solutos liberados (monmeros) son transportados hacia el embrin donde son absorbidos y utilizados para el desarrollo del embrin

Los investigadores creen que la giberelina activa ciertos genes que sintetizan molculas de ARNm, las cuales, a su vez, se encargan de la sntesis de las enzimas. No ha sido demostrado que la giberelina acte directamente sobre el gen, aunque los investigadores han demostrado que tanto la sntesis de RNA como la de protenas son necesarias para la aparicin de las enzimas. Por otro lado, no se conoce cul pueda ser la relacin entre el modo de actuacin de la giberelina en estas semillas y sus efectos en otros rganos de la planta. 6.6 Citocininas El descubrimiento de la auxina estimul a muchos investigadores a buscar otros tipos de compuestos qumicos que regulasen el crecimiento debido a que, al igual que ocurre en los

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animales, pareca improbable que el crecimiento y desarrollo de las plantas estuviese regulado slo por una hormona. La bsqueda se concentr, especialmente, en hormonas que regulasen la divisin celular. Estos compuestos se han encontrado en todas las plantas, particularmente en los tejidos que se dividen de forma activa como meristemas, semillas en germinacin, frutos en maduracin y races en desarrollo. Estas hormonas se llamaron citocininas (de citocinesis) o citoquininas. Los estudios sobre la accin de las citocininas en la divisin celular han demostrado que son necesarias en algunos procesos posteriores a la replicacin del ADN pero anteriores a la mitosis. En 1892, Wiesner propuso la existencia de factores estimulantes de la divisin celular. En 1913, Gottlieb Haberlandt descubri que un compuesto encontrado en el floema tena la capacidad de estimular la divisin celular en clulas de parnquima. En 1941, Johannes van Overbeek y ms tarde F.C. Steward y sus colaboradores, descubrieron que el endosperma lquido del coco tambin tena esta capacidad. En 1954, Jablonski and Skoog ampliaron el trabajo de Haberlandt mostrando que los tejidos vasculares contienen sustancias que estimulan la divisin celular.

Miller y Skoog descubrieron la kinetina, una citocinina artificial. En 1955, tras experiencias previas realizadas con ADN de esperma de arenque, Folke Skoog y Carlos Miller consiguieron preparar por tratamiento trmico de ADN un compuesto, el 6-furfurilamino purina, que promova la divisin celular. Denominaron a esta sustancia kinetina y llamaron a los reguladores que se incluan dentro de este grupo citocininas, debido, como dijimos anteriormente, a su aparente implicacin en los procesos de citocinesis, o divisin celular. Como se observa en la Figura 115, la kinetina se parece a la base prica adenina, que fue la clave que condujo a su descubrimiento. Figura 115. Notar las similitudes entre la purina adenina y estas cuatro citocininas. La kinetina y la 6-benzilamino-purina (BAP) son citocininas sintticas comnmente usadas. La Zeatina y la i6Ade se han aislado de plantas.

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La kinetina, que probablemente no existe en las plantas de modo natural, tiene una estructura relativamente simple, y los bioqumicos han sido capaces de sintetizar una gran variedad de otros compuestos relacionados que se comportan como citocininas. bullet En 1964, Letham y sus colaboradores aislaron una citocinina natural a partir de semillas de maz (Zea mays), a la que denominaron zeatina, la cual es la citocinina natural ms activa que se conoce. bullet Actualmente se han aislado citocininas de muchas especies diferentes de plantas, donde se encuentran, fundamentalmente, en rganos cuyos tejidos se estn dividiendo de forma activa, es decir, en semillas, frutos, y races. Recientemente, las citocininas se han identificado en dos plantas vasculares sin semilla, un equiseto (Equisetum arvense) y el helecho Dryopteris crassirhizoma. 6.6.1 Efectos de las citocininas Estimula la divisin celular: los estudios de las interacciones que envuelven a la auxina y a las citocininas estn ayudando a los fisilogos a entender cmo las hormonas de las plantas (fitohormonas) trabajan para producir el patrn de crecimiento global de cada planta. Es obvio que una clula vegetal indiferenciada tiene dos opciones: bien puede alargarse, dividirse, alargarse, y volverse a dividir de nuevo, o bien puede alargarse sin sufrir posteriores divisiones. Las clulas que se dividen repetidamente permanecen esencialmente indiferenciadas, o meristemticas, mientras que las clulas que se alargan tienden a diferenciarse, o especializarse. En estudios realizados con tallos de tabaco, la adicin de AIA a los cultivos de tejidos produjo una rpida expansin celular, por lo que se formaron clulas gigantes. La adicin de kinetina sola tuvo poco o ningn efecto. El AIA ms la kinetina produjo una rpida divisin celular, por lo que se produjo un gran nmero de clulas relativamente pequeas e indiferenciadas. En otras palabras, la adicin de kinetina, junto con el AIA (aunque no con kinetina slo) condujo a las clulas a un estado meristemtico. Estimula la morfognesis: alterando ligeramente las concentraciones relativas de auxina y citocinina, los investigadores han podido modificar el desarrollo de las clulas indiferenciadas de los cultivos de tejidos. Una concentracin ms o menos igual de las dos hormona, hace que las clulas sigan indiferenciadas, formando masas de tejido llamadas callos. Cuando la concentracin de auxina es superior, el tejido indiferenciado organiza races. Con una concentracin superior de citocinina, se forman yemas. Con un cuidadoso equilibrio de las dos hormonas se puede producir races y yemas, y por lo tanto, una plantita incipiente. (Figura 116).

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Figura 116. Esquema del control de la diferenciacin ejercido por la interaccin de la auxina con las citocininas. Las piezas de los tejidos de la mdula del tabaco se cultivaron aspticamente en un medio nutritivo (cultivo de tejidos) completando varias con varias concentraciones de dos hormonas. Segn las proporciones relativas de auxina y citocinina, el callo de varias especies de plantas continuar creciendo como tejido sin diferenciar, y podr formar races o formar yemas y tallos.

Retrasan la senescencia: otra funcin, al parecer independiente, de las citocininas es la de prevenir la senescencia o envejecimiento de las hojas. En la mayora de las especies de plantas, las hojas comienzan a volverse amarillas tan pronto como se extraen de la planta. Este amarillamiento, el cual se debe a la prdida de clorofila, puede prevenirse usando citocininas (Figura 117).

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Figura 117. Efecto de las citoquininas sobre la senescencia en hojas. La aplicacin de citoquininas a la hoja de la derecha, procedente de una plntula de juda (Phaseolus vulgaris), inhibe su senescencia normal. Comparar con el aspecto de la hoja de la izquierda, que no fue tratada con la hormona.

Las hojas de cadillo (Xanthium strumarium), por ejemplo, cuando son arrancadas y dejadas en agua del grifo, se vuelven amarillentas en el trmino de unos 10 das. Si se aade una pequea cantidad de kinetina (10 mg por litro) al agua, se conserva gran parte de la clorofila y, en consecuencia, la apariencia fresca de la hoja. Si las hojas arrancadas son rociadas con soluciones de kinetina, las zonas mojadas permanecen verdes, mientras que el resto de la hoja se amarillea. No obstante, si la hoja rociada con citocininas contiene aminocidos radiactivos marcados con 14C, se puede ver que los aminocidos emigran hacia las zonas que han sido tratadas con citocininas. Tales estudios, que han sido llevados a cabo sobre rbanos y otras plantas, propician la hiptesis de que el envejecimiento en las hojas, y probablemente en otras partes de la planta, resulta del progresivo "despido" de fragmentos de ADN, y de la consiguiente mengua en la produccin de ARNm y en la sntesis de protenas. Estas investigaciones sugieren la hiptesis de que las citocininas previenen la prdida de fragmentos de ADN, permitiendo as que contine la sntesis de enzimas y la produccin de otros compuestos tales como la clorofila. Una interpretacin de la prevencin por las citocininas de la senescencia en hojas arrancadas es la de que las hojas normalmente no sintetizan suficiente citocininas como para satisfacer sus propios requerimientos. Por esto, una cuestin importante y todava sin resolver implica al lugar o lugares de produccin de las citocininas dentro de las plantas. Basndose en

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algunas lneas de evidencia, una posible localizacin es la raz. Un segundo lugar podra ser la zona de elongacin situada debajo del pice caulinar.

Figura 118. Algunas funciones de las citoquininas en el crecimiento y desarrollo de las plantas.

6.6.2 Sntesis de citoquinina Al igual que las giberelinas, citoquininas contienen subunidades de isopreno. La primera etapa consiste en la reaccin de pirofosfato isopentenil con adenosina monofosfato (AMP), catalizada por la enzima citoquinina sintasa para producir ribotide adenina isopentenil. A partir de este compuesto se forman, ribotides citoquinina, ribosides y citoquininas (Figura 119). Las citoquininas tambin son sintetizados por productos de los genes derivados de la insercin de genes de bacterias de Agrobacterium tumifaciens. La TI (inductor de tumores) del plsmido de A. tumifaciens introduce el gen de la isopenteniltransferasa. Esta enzima genera isopentenil adenina, que se convierte en trans-zeatina y dihidrozeatina en la planta. Estas hormonas, junto con la auxina producida por otro producto gnico del plsmido TI, causa la formacin de un tumor o agalla en el sitio de la infeccin (Figura 120).

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Figura 119. Sntesis de citocininas

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Figura 120. La infeccin de Agrobacterium puede causar un tumor inducido por desarrollar citocinina y la planta puede ser "curado" de sus bacterias mantenindolos a 42 C. El Agrobacterium inyecta un plsmido (ADN circular desnudo) en las clulas del hospedero (en este caso del tomate). Este plsmido se llama plsmido Ti (inductor de tumores). Este fragmento de ADN procariota tiene dos segmentos de ADN llamados borde izquierdo" y borde derecho" con los genes en el medio. Estos bordes permiten la recombinacin de los genes con el genoma del husped. Los genes se activan la sntesis de citoquininas.

6.6.3 Transporte de citocinina Las citocininas se sintetizan en diferentes tejidos y rganos, a travs del meristemo apical de la raz que es un sitio importante para su produccin. Han sido identificados en el flujo del xilema de races cortadas, lo que sugiere que esta puede ser una va para el transporte de larga distancia de citoquininas travs de la planta (transporte acropeto). Las citoquininas en el xilema de raz son predominantemente zeatina ribosides, que se convierten rpidamente en citoquinina libre en las hojas. La inactivacion de la citoquinina se produce cuando se oxida a adenina por la enzima citoquinina oxidasa. 6.6.4 Como funcionan las citocininas Desde el primer aislamiento de citocininas a partir de muestras de cidos nucleicos, los fisilogos vegetales han sospechado siempre que estas hormonas han de estar de algn modo relacionadas con los cidos nucleicos. Cuando Holley y sus colaboradores desvelaron por primera vez la estructura de una molcula de ARNt, se encontraron con que la molcula

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contena un cierto nmero de bases atpicas. Ms tarde se descubri que en algunos tipos de ARNt la citocinina natural i6Ade (6N-isopenteniladenina), que es a su vez una base atpica, est incorporada en la molcula. La i6Ade se encuentra, por ejemplo, en las molculas de ARNt para la serina y para la tirosina, en las cuales est ubicada inmediatamente junto al anticodn. Sin embargo, todava no se sabe si su presencia o su ubicacin en molculas de ARNt est relacionada con su actividad promotora de la divisin celular. Se conoce que el ltimo efecto de las citocininas implica cambios en la expresin gnica, probablemente a nivel transcripcional. Modos de accin: Regulan la sntesis proteica. Afectan las etapas post-transcripcionales en algunas especies. Su presencia en los ARNt pueden regular la sntesis proteica. 6.7 Etileno Durante un perodo de aos, el descubrimiento de la auxina condujo, ms o menos directamente, al aislamiento de la kinetina y el reconocimiento de los efectos de las citocininas sobre el crecimiento de las plantas y su desarrollo. El etileno, por otro lado, era un compuesto que se conoca desde antiguo y se saban sus efectos sobre el crecimiento mucho antes de que se le relacionase con la auxina; era considerado ya como una fitohormona. El etileno fue usado en la prctica desde el antiguo Egipto, en donde se trataban con gas los higos para estimular su maduracin. En la antigua China se quemaba incienso en locales cerrados para incrementar la maduracin de las peras. La historia botnica del etileno, un hidrocarburo sencillo (H2C=CH2), se remonta al siglo pasado, cuando las ciudades se iluminaban con lmparas de gas. En Alemania, se demostr que el gas que se perda desde las lmparas de gas era el principal causante de la desfoliacin que ocurra en los rboles que se encontraban en las calles. Como el gas comenz a usarse de modo intensivo para la iluminacin de las calles, este fenmeno fue registrado por muchos investigadores. En 1901, D. Neljubov demostr que el etileno era el componente activo del gas que se empleaba en iluminacin. Neljubov not que la exposicin de plntulas de guisante a dicho gas en oscuridad (plantas etioladas) reduca el elongamiento del tallo, incrementaba el crecimiento lateral, y produca un anormal crecimiento horizontal de la plntula (gravitropismo negativo), condiciones que ms tarde se denominaron la triple respuesta. Cuando los componentes gaseosos del gas fueron probados individualmente se demostr que todos eran inactivos excepto el etileno, que produca la triple respuesta a concentraciones tan bajas como 0.06 partes por milln (ppm) en el aire. Los descubrimientos de Neljubov han sido confirmados por muchos otros investigadores, y se sabe que el etileno ejerce una influencia principal sobre la mayora, sino todos, los aspectos del crecimiento, desarrollo, y senescencia de las plantas. La primera indicacin de que el etileno era un producto natural de los tejidos vegetales fue descrita por H.H. Coussin en 1910. Coussin observ que cuando se mezclaban naranjas con bananas en el mismo contenedor, las bananas maduraban prematuramente.

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En 1917, Doubt descubri que el etileno estimulaba la abscisin. En 1934, R. Gane identific al etileno qumicamente como un producto natural del metabolismo de las plantas, y debido a sus efectos sobre el desarrollo de las mismas se le clasific como una fitohormona. En 1935, Crocker propuso que el etileno era la hormona vegetal responsable de la maduracin de los frutos. El etileno, aunque es un gas en condiciones normales de presin y temperatura, se disuelve en cierto grado en el citoplasma de las clula. Se considera como una hormona vegetal debido a que es un producto natural del metabolismo y a que interacciona con otras fitohormonas en cantidades traza. Los efectos del etileno pueden ser apreciados particularmente durante perodos crticos maduracin de los frutos, abscisin de frutos y hojas, y la senescencia del ciclo de vida de una planta. Los ambientes estresantes y las concentraciones elevadas de auxinas promueven la produccin de etileno en los tejidos vegetales. El etileno es normalmente la hormona ms fcil de ensayar. Puesto que es un gas que se libera por los tejidos, no requiere extraccin ni purificacin antes de su anlisis por cromatografa gaseosa. La biosntesis del etileno comienza con el aminocido metionina, el cual reacciona con ATP para formar un compuesto conocido como S-adenosilmetionina, abreviadamente SAM (Figura 121).

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Figura 121. Biosntesis del etileno y su regulacin. El aminocido metionina es el precursor del etileno en los tejidos de todas las plantas superiores. La etapa limitante de la ruta biosinttica es la conversin de la S-adenosilmetionina (SAM) en el intermediario precursor del etileno, el cido 1-aminociclopropano-1- carboxlico (ACC), etapa catalizada por la ACC sintasa. Otras abreviaturas: AVG, aminoetoxivivilglicina; AOA, cido aminooxiacetico.

A continuacin, el SAM se excinde en dos molculas diferentes, una de las cuales contiene un anillo compuesto de tres tomos de carbono. Este compuesto, conocido como cido 1aminociclopropano-1-carboxlico (ACC), se convierte en etileno, CO2, y amonio por una enzima presente en el tonoplasto, todava no aislada, denominada enzima formadora de etileno (EFE). Aparentemente, la reaccin formadora de ACC es la etapa de la ruta que es afectada por algunos tratamientos o estados fisiolgicos (por ejemplo, altas concentraciones de auxina, heridas, polucin atmosfrica, maduracin de los frutos, senescencia de las flores, encharcamiento, etc.) que estimulan la produccin de etileno por los tejidos vegetales. El etileno (eteno) fue descubierto en el ao 1900 como un gas que regula la maduracin de frutos. Se haban dado cuenta de que la proximidad de fruta madura, como las naranjas o las manzanas, acelera la maduracin de otras frutas, como el tomate y el pltano. Regulacin de la maduracin, y por lo tanto el etileno, se ha convertido en una parte importante del almacenamiento, transporte y comercializacin de la fruta de todo el mundo. El etileno tiene una variedad de otras funciones en las plantas, incluida la senescencia de las hojas y de la fruta, el alargamiento de las races, y las respuestas a las inundaciones y otros estados de estrs. Aunque es una molcula muy simple, sus efectos son muy especficos.

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6.7.1 Efectos del etileno Maduracin de la fruta. Muchas frutas al madurar muestran un aumento en la produccin de etileno que precede al inicio de la maduracin. Las frutas que producen y responden al etileno en la maduracin son los frutos climatricos (manzanas, tomates y pltanos); el climaterio es un estallido caractersticos de respiracin que se produce justo antes de la etapa final en que tiene lugar la maduracin. La produccin de etileno en las frutas climatricas es autocataltica, es decir, el etileno estimula su propia produccin, el rpido aumento de la concentracin de etileno provoca a continuacin, el estallido rpido de la respiracin (Tabla 15, Tabla 16, Tabla 17, Figura 122). Tabla 15. Cambios que tienen lugar en el fruto durante la maduracin.

Tabla 16. Algunos frutos climatricos

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Tabla 17. Concentracin interna de etileno en varios frutos climatricos y no climatricos.

Figura 122. Efecto del etileno sobre la maduracin de los frutos. La caja de tomates de la derecha fue mantenida durante 3 das en una habitacin con una atmsfera que contena 100 ppm de etileno. La caja de la izquierda fue mantenida en una atmsfera normal, sin etileno.

La triple respuesta. Los brotes tratados con etileno (por ejemplo, plantas de guisantes) muestran tres respuestas de crecimiento caracterstico de forma simultnea: epinastia (curvatura hacia abajo de las hojas) (Figura 123); elongacin y disminucin de la expansin celular lateral (es decir el aumento de tallo en anchura) y la prdida de respuesta a la gravedad para dar crecimiento horizontal (Figura 124). La epinastia inducida por etileno da al pice de las plntulas jvenes de dicotiledneas la apariencia de un 'gancho'.

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Figura 123. Epinastia de hojas causada por el etileno. La planta de Coleus de la derecha fue expuesta durante 2 das a una atmsfera de etileno; la planta de la izquierda era un control.

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Figura 124. Efecto del etileno sobre el crecimiento. Un incremento en la concentracin de etileno produce sobre la plntula del guisante (Pisum sativum) un acortamiento, un engrosamiento, y una tendencia al crecimiento horizontal (triple respuesta) del tallito de la misma a medida que la concentracin de la hormona aumenta

El etileno y las respuestas a la inundacin. Mientras que el etileno normalmente inhibe el crecimiento de elongacin, en algunas especies de tierra hmeda (pantanosa), como el arroz, el etileno induce el crecimiento rpido de elongacin, lo que permite que la planta alcance el aire. La formacin del aernquima (espacios de aire en la corteza de la raz, formada por la muerte celular programada) tambin es inducida por el etileno, que se sintetiza en respuesta a bajos niveles de oxgeno y se acumula en las races inundadas (Figura 125, Figura 126).

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Figura 125. Micrografa electrnica mostrando la corteza ms joven de la raz de arroz, donde las lneas radiales de las clulas vivas intactas alternan con espacios llenos de gas creados por la muerte celular programada.

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Figura 126. Resumen de las posibles etapas en la formacin del aernquima en las races de Zea mays inducida por la escasez parcial de oxgeno externo a la raz y mediada por el aumento de la sntesis de etileno que a su vez induce una forma de muerte celular programada en las clulas diana de la corteza.

Otras funciones del etileno. Las altas concentraciones de etileno (> 10 l l-1) inducen la formacin de races adventicias y de pelos de radicales. En la abscisin de la hoja, el etileno acelera la sntesis de la pared celular y las enzimas de degradacin (celulasas y poligalacturonasas) de la capa de abscisin, una capa de clulas especializadas en el pulvinulo de la hoja y que se separan de las clulas adyacentes permitiendo a la hoja al caer de la planta.

Una ampliacin en el tallo por debajo de la hoja; tambin una ampliacin de la base del peciolo.

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Figura 127. Esquema del balance hormonal durante la abscisin de una hoja. De acuerdo a este modelo, la auxina favorece la persistencia de la hoja durante la fase de mantenimiento. En la fase de induccin a la abscisin, el nivel de auxina disminuye, mientras que el nivel de etileno aumenta. Estos cambios en el equilibrio hormonal, incrementan la sensibilidad de las clulas diana al etileno, lo cual dispara los acontecimientos que aparecen en la fase de separacin. Durante esta etapa, enzimas especficos segregados por las clulas diana hidrolizan los polisacridos de las pared celular, lo cual conduce, finalmente, a la abscisin de la hoja

6.8 cido abscsico El cido abscsico (ABA) se encuentra en todas las plantas superiores y musgos. ABA regula la latencia y es fundamental para la respuesta al estrs de la planta. La naturaleza de la molcula significa que puede existir en varias formas. En primer lugar, el grupo carboxilo al final de la cadena lateral puede ser cis o trans (Fig. 4), mientras que el C en la posicin uno del anillo es asimtrico y le da (+ ) o (-) (S R) enantimeros . La forma activa de la ABA es (+ ) cis ABA; (+ )-2-trans-ABA tambin existe en las plantas y es activo en algunas de las respuestas del ABA a largo plazo, puede ser convertido a la foma cis (+ ) en los tejidos.

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Figura 128. Las estructuras qumicas de las formas (+) y (-) del ABA. (+) Cis ABA es activo; (-) cis ABA es activo en las respuestas lentas de ABA, pero no en los rpidos como el cierre de los estomas. (+) Trans ABA es inactivo, pero se puede convertir a (+) cis ABA.

6.8.1 Efectos del cido abscsico El ABA tiene una variedad de efectos relacionados con (1) latencia de las semillas y (2) las respuestas al estrs. Inicialmente los niveles de ABA durante el desarrollo del embrin son altos dentro de la semilla y posteriormente disminuyen. ABA regula la expresin de los genes de las protenas en el embrin para que se prepare para las etapas finales del desarrollo de la semilla en la que la semilla se reseca y se vuelve inactiva, sino que tambin activa los genes de las protenas de almacenamiento de semillas. ABA tambin guarda algunas semillas en estado latente hasta que el ambiente se convierte en el adecuado para el crecimiento. El control de la latencia es muy importante en climas templados donde la germinacin precoz puede llevar a la muerte de la plntula. ABA tambin se acumula en las yemas latentes de las especies leosas, aunque el control de la latencia aqu es probable que sea el resultado de la accin de varias hormonas. El ABA regula tambin varias respuestas al estrs de la planta. El aumento del nivel de ABA en el estrs hdrico causa inicialmente cierre de los estomas (Figura 129 y Figura 130) y, posteriormente, aumenta la capacidad del tejido de la raz para llevar el agua, tambin promueve el crecimiento de las races e inhibe el crecimiento de brotes.

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Figura 129. El cierre de los estomas est mediado por la reduccin de turgencia en las clulas oclusivas, que es causada por flujo de salida de K + y aniones de las clulas oclusivas, la eliminacin de sacarosa y una conversin paralela de los cidos orgnicos malato a almidn osmticamente inactivo. ABA desencadena el aumento del calcio citoslico ((Ca2+) cyt). En las clulas oclusivas de A. thaliana, el ABA induce oscilaciones de Ca2+ que se producen con un perodo de 10.3 min, y por lo tanto demasiado lentos para codificar una seal que active los canales de aniones con un tiempo de retraso de 2 min. Las elevaciones de (Ca2+) cyt activan dos diferentes tipos de canales de aniones: S-Type (Activacion lenta prolongada) y R-Type (transitorio rapido). Ambos median la liberacin de aniones de las clulas oclusivas, causando la despolarizacin.

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Figura 130. Modelo para la accin de ABA en las clulas oclusivas de los estomas. (1) El ABA se enlaza en un receptor, todava sin caracterizar, situado en la membrana plasmtica. La unin del ABA a este receptor dispara una cascada de seales. (2) El ABA produce la apertura de los canales de Ca2+, y una despolarizacin temporal de la membrana. (3) Esta despolarizacin temporal promueve la apertura de los canales de Cl-, que posteriormente despolarizan la membrana. (4) El ABA incrementa los niveles de IP3. (5) El IP3 abre los

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canales de Ca2+ dependientes de IP3, produciendo una liberacin de calcio desde la vacuola. (6) El incremento del calcio citoslico activa la apertura de los canales de Cl- (de salida) e inhibe la de los canales de K+ (de entrada). Este flujo neto de cargas negativas se traduce en una gran despolarizacin de la membrana. (7) El ABA causa un incremento en el pH citoslico. (8) Este incremento de pH produce la apertura de los canales de K+ y la salida de K+ al exterior. La turgencia de las clulas guarda disminuye por ello, y los estomas se cierran.

6.8.2 Sntesis de acido abscsico El ABA es un compuesto que existe naturalmente en las plantas. Es un sesquiterpenoide (15 carbonos) que es parcialmente producido a partir del cido mevalnico en cloroplastos y otros plastos. Otros autores proponen una ruta biosinttica a partir de la degradacin de los carotenoides (40 carbonos) (Figura 131). El cido abscsico (ABA) se obtiene principalmente de las bases ovricas de los frutos. El fruto del algodn (Gossypium) se caracteriza por proporcionarlo en gran cantidad. Las proporciones ms elevadas de ABA se dan durante la poca de la cada de los frutos Figura 131. Rutas biosintticas del cido abscsico. Algunos autores proponen una va directa a partir del cido mevalnico. Otros proponen una va indirecta a partir de la degradacin de ciertos carotenoides. La violaxantina es el carotenoide de partida. Esta es isomerizada y escindida va una reaccin de isomerizacin seguida de una de oxidacin. Se

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produce una molcula de xantoxina que es inestable y cambia espontneamente a ABA aldehido. El ABA aldehido se oxida a ABA.

6.8.3 Transporte del cido abscsico El ABA se sintetiza en las races y brotes, y en niveles mucho ms altos en los tejidos sometidos a estrs. La escasez de agua en las races, por ejemplo, producen hasta 1000 veces ms ABA que es transportado a travs del xilema hacia las hojas. El ABA tambin se transporta desde los brotes hasta la raz a travs del floema (Figura 132).

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Figura 132. Representacin esquemtica del transporte, recirculacin y redistribucin del ABA y el ABA-GE en tallos de plantas. Las flechas indican los flujos de ABA libre y la ABA-GE (azul). El transporte del ABA en el floema de las hojas a las races es de color marrn. El ancho de las flechas simbolizan la intensidad de los flujos de ABA libre y conjugada.

6.9 Otras fitohormonas BRASINOESTEROIDES Hay aproximadamente 60 compuestos esteroideos conocidos como brasinoesteroides lleva el nombre del primero de ellos que se identifico, brassinlido, que fue encontrado en el polen de mostaza. Sus efectos incluyen: 1. La estimulacin de la elongacin del tallo. 2. La inhibicin de crecimiento de las races y el desarrollo. 3. Promocin de la biosntesis de etileno y epinastia. SALICILATOS Los salicilatos son conocidos por estar presentes en la corteza de sauce durante bastante tiempo. El cido saliclico se sintetiza a partir del aminocido fenilalanina. Los efectos incluyen

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1. Termognesis en las flores Arum. 2. Estimula la resistencia de patgenos en las plantas en la produccin de protenas de patognesis vegetal. 3. Reportado para aumentar la longevidad de la flor (la prctica de aadir un poco a las flores cortadas). 4. Se reporta que inhiben la biosntesis de etileno. 5. Se reporta que inhiben la germinacin de semillas. 6. Bloquea la respuesta a heridas. 7. Invierte los efectos del ABA. JASMONATOS Los Jasmonatos estn representados por el jasmonato y su ster metlico. Se aisl por primera vez de la planta de jazmn en el que el ster metlico es un producto importante en la industria del perfume. El cido jasmnico es sintetizado a partir del cido linolnico, que es un cido graso importante. Los jasmonatos tienen una serie de efectos tales como: 1. La inhibicin de muchos procesos como el crecimiento y la germinacin. 2. La promocin de la senescencia, abscisin, formacin de tubrculos, maduracin de la fruta, formacin de pigmentos, y el enrollamiento de los zarcillos. 3. Parece que tienen un papel importante en la defensa de las plantas mediante la induccin de la sntesis de la proteinasa: mecanismo de defensa contra los hongos POLIAMINAS Existe cierta controversia sobre si estos compuestos deben clasificarse con las hormonas. Ellas estn muy extendidas en todas las clulas y ejercen el control regulatorio sobre el crecimiento y el desarrollo a niveles muy bajos. El desarrollo se ve afectado en las plantas que tienen bajos niveles de poliaminas. Las poliaminas tienen una amplia gama de efectos sobre las plantas. Ellos parecen ser esenciales en el crecimiento y divisin celular. Otras hormonas similares incluyen los pptidos SISTEMINAS y BATASINAS. 6.10 La luz como seal para el desarrollo

6.10.1 Fotomorfognesis Fotomorfognesis es la influencia directa de la luz sobre el crecimiento y el desarrollo. Se trata de respuestas a ciertas longitudes de onda de luz que son percibidos por los pigmentos fotorreceptores. 6.10.2 Fotoperiodismo Fotoperiodismo es la respuesta de una planta a la longitud del da. Se regula procesos como la latencia y la floracin. Las especies pueden ser de da largo, de da corto o de da neutro en su respuesta a la duracin del da.

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6.10.3 Fitocromo Fitocromo es una protena fotorreceptora. Se sintetiza como Pr que absorbe la luz roja (666 nm) y se convierte en Pfr que absorbe la luz roja lejana (720 nm), e inicia los acontecimientos de sealizacin celular que conducen a la fotomorfognesis. Muchas respuestas de los fitocromos se iniciados por la luz roja se invierten por la luz roja lejana. Cinco genes de fitocromos, PHYA-PHYE, han sido identificados. PHYA se expresa en altos niveles en tejidos etiolados. A la luz roja su expresin se apaga y la protena se degrada rpidamente. PHYB-E se expresa constantemente a bajos niveles en los tejidos y participa en las respuestas de otros fitocromos. Las respuestas de los fitocromos incluyen: etiolacin / desetiolacin, los ritmos circadianos, tales como movimiento de las hojas y ptalos, y la germinacin de semillas. Los fitocromos regulan los procesos que implican cambios en la turgencia de la clula (por ejemplo, los movimientos de la hoja) mediante la alteracin del transporte de protones y de potasio en la membrana celular. Las respuestas de los fitocromos a largo plazo implican fitocromos activados por genes.

6.10.4 Floracin Garner y Allard consiguieron probar y confirmar su descubrimiento con otras muchas especies de plantas. Encontraron que las plantas son de tres tipos denominados plantas de da corto (PDC), plantas de da largo (PDL) y plantas de da neutro (PDN). Las PDC florecen a principios de primavera o en otoo ya que deben tener un perodo de luz inferior a un cierto valor crtico. Por ejemplo, en el cadillo (Xanthium strumarium) la floracin es inducida por 16 horas o menos de luz (Figura 133). Otros ejemplos de PDC son los crisantemos, las dalias, las poinsetias, algunas compuestas, las judas, las fresas y las primaveras.

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Figura 133. La longitud relativa del da y la noche determina el momento de floracin de las plantas. Las cuatro curvas representan los cambios anuales en la longitud del da en ciudades de Norteamrica que estn a diferentes latitudes (Miami, 26 N; San Francisco, 37 N; Chicago, 40 N; y Winnipeg, 50 N). Las lneas horizontales nos muestran el fotoperodo efectivo de tres plantas de da corto diferentes (el cadillo, 16 horas; la soja Biloxi, 14 horas; el tabaco, Maryland Mammoth, 12 horas). El cadillo, por ejemplo, necesita 16 horas o menos de luz. EN Miami puede florecer tan pronto como madura, pero en Winnipeg las yemas no aparecen hasta principios de agosto, tan tarde que, probablemente las heladas matan a la planta antes de que las semillas sean dispersadas.

Las PDL, que florecen principalmente en verano, slo lo hacen si los perodos de iluminacin son mayores que un valor crtico. La espinaca, algunas variedades de patata, algunas variedades de trigo, los gladiolos, los lirios, la lechuga y el beleo (Hyoscyamus niger) son ejemplos de PDL. Las PDN florecen sea cual sea la longitud del da. Ejemplos de PDN son el pepino, el girasol, el tabaco, el arroz, el maz y el guisante. Hay que tener claro que las designaciones da corto y da largo son puramente fisiolgicas. Una PDC es una planta que responde a una longitud del da menor que un valor crtico, mientras que una PDL es una planta que responde a una longitud del da superior a un valor crtico. El tiempo absoluto de iluminacin no es lo importante. Por ejemplo, el cadillo (una PDC) y la espinaca (una PDL) florecern si se exponen a 14 horas diarias de luz. La PDC florecer puesto que el fotoperodo es menor de 16 horas, su valor crtico, mientras que la PDL tambin lo har puesto que el fotoperodo, 14 horas, corresponde a su valor crtico. Actualmente, algunos investigadores han propuesto un cuarto grupo de plantas, las plantas de da intermedio (PDI). Estas plantas, como la caa de azcar, slo florecen si se exponen a

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perodos de luz de longitud intermedia. Si el perodo es mayor o menor que ese rango intermedio, la planta no florece. La respuesta fotoperidica puede ser extraordinariamente precisa. A 22.5 C, la PDL Hyoscyamus niger (beleo) florecer cuando se exponga a fotoperodos de 10 horas y 20 minutos (Figura 134). Sin embargo, a esta temperatura no florecer si el fotoperodo es de 10 horas. Las condiciones ambientales tambin afectan al comportamiento fotoperidico. Por ejemplo, a 28.5 C el beleo requiere 11 horas y media de luz, mientras que a 15.5 C slo requiere 8 horas y media. Figura 134. Las plantas de da corto (PDC) florecen cuando el fotoperodo est por debajo de un valor crtico. El cadillo (Xanthium strumarium) necesita 16 horas de luz para florecer. El beleo (Hyoscyamus nger) necesita unas 10 horas (segn la temperatura) o ms para florecer. Las barras de la parte superior indican la duracin de los perodos de luz y de oscuridad en un da de 24 horas.

La respuesta vara con las diferentes especies. Algunas plantas slo requieren una nica exposicin al ciclo crtico luz-oscuridad, mientras que otras, como la espinaca, necesitan varias semanas de exposicin. En muchas plantas existe una correlacin entre el nmero de ciclos de induccin y la rapidez de la floracin o el nmero de flores que se forman. Algunas plantas deben alcanzar un cierto grado de madurez antes de florecer, mientras que otras son capaces de responder al fotoperodo adecuado cuando son plntulas. Otras plantas, al envejecer, finalmente acabarn floreciendo an cuando no estn expuestas al fotoperodo adecuado. Sin embargo, florecern mucho antes con la exposicin adecuada. Las plantas controlan el fotoperodo midiendo las horas de oscuridad.

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Hammer y Bonner hicieron un experimento crucial y totalmente inesperado. Si el perodo de oscuridad se interrumpa tan slo un minuto con luz de una bombilla de 25 vatios, la floracin no se produca. La interrupcin del perodo de iluminacin con oscuridad no tena ningn efecto sobre la floracin (Figura 135). Figura 135. Como vimos en la figura 15.2, las plantas de da corto (PDC) florecen cuando el fotoperodo est por debajo de un valor crtico mientras que las de da largo (PDL) lo hacen cuando el fotoperodo es superior a un valor crtico. En esta figura vemos como el cadillo (Xanthium strumarium) necesita 16 horas de luz para florecer mientras que el beleo (Hyoscyamus nger) necesita unas 10 horas (segn la temperatura) o ms para florecer. Sin embargo, si el perodo oscuro se interrumpe con un solo destello de luz, el beleo tambin florecer en un perodo de da corto. Un pulso de luz durante el perodo de oscuridad tiene un efecto opuesto en las plantas de da corto: evita la floracin. Las barras de la parte superior indican la duracin de los perodos de luz y de oscuridad en un da de 24 horas.

La parte del perodo de oscuridad ms sensible a la interrupcin luminosa fue la central. Si una PDC como el cadillo, se expone a un perodo de luz de 8 horas y luego a un amplio perodo de oscuridad, puede demostrarse que la planta pasa a un estado de creciente sensibilidad a las interrupciones de luz que dura aproximadamente 8 horas, seguido por un perodo en el que las interrupciones de luz van disminuyendo su efecto. De hecho, un minuto de luz despus de 16 horas de oscuridad estimula la floracin. Basndose en los hallazgos de Garner y Allard, los cultivadores de crisantemos haban encontrado que podan retrasar la floracin de las plantas de da corto alargando la duracin 182

del da con luz artificial. Fundamentndose en los nuevos experimentos de Hammer y Bonner, fueron capaces de retrasar la floracin simplemente encendiendo la luz durante un corto perodo en medio de la noche. Qu pasa con las PDL? Tambin ellas miden la oscuridad. Una PDL que florece si se mantiene en un laboratorio durante 16 horas de luz y 8 de oscuridad tambin florecer con 8 horas de luz y 16 de oscuridad si se interrumpe la oscuridad aunque sea con una breve exposicin de luz (Figura 136, Figura 137). Figura 136. Diagrama que ilustra como la interrupcin luminosa durante el perodo de oscuridad (fotoperodos cortos) previene la floracin en una planta de da corto y la promueve en una de da largo.

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Figura 137. Experimentos de Chailakhyan con especies de crisantemo (Chrysanthemum sp.), una PDC. La floracin ocurra cuando las hojas estaban sometidas a fotoperodos de da corto aunque las yemas florales estuviesen en condiciones de da largo. Sin embargo, cuando las hojas estaban en condiciones de da largo, la floracin no se produca aunque las yemas estuviesen en fotoperodos de da corto.

6.10.5 Germinacin La siguiente clave importante en la comprensin de la respuesta de las plantas a las proporciones relativas de luz y oscuridad la aport el trabajo de los investigadores de la Estacin de Beltsville, en Maryland, perteneciente al U.S.D.A. La clave se encontr en el informe de un estudio previo realizado con semillas de lechuga (Lactuca sativa). Las semillas de lechuga germinan solamente si se han expuesto a la luz. Muchas semillas pequeas tienen este requerimiento, ya que necesitan germinar en un suelo seco y cerca de la superficie para que las plntulas aseguren su emergencia. Los primeros investigadores, al estudiar los requerimientos de luz para que las semillas de lechuga germinaran, demostraron que la luz roja estimulaba la germinacin, y que la luz de una longitud de onda ligeramente superior (rojo lejano) la inhiba an de forma ms efectiva que la ausencia total de iluminacin.

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El grupo de Beltsville observ que, cuando despus de un destello de luz roja se aplicaba un destello de luz roja lejana, las semillas no germinaban. La luz roja ms efectiva para inducir la germinacin de las semillas fue una luz de la misma longitud de onda que la que estaba implicada en la floracin, aproximadamente a 660 nm. Adems, encontraron que la luz ms efectiva para inhibir el efecto producido por la luz roja era la luz de una longitud de onda de 730 nm. La secuencia de destellos de rojo y de rojo lejano poda repetirse una y otra vez; el nmero de destellos no importaba, pero s la naturaleza del destello final. Si la secuencia acababa con un destello de rojo lejano la mayora de las semillas no germinaban (Figura 138).

Figura 138. La luz y la germinacin de las semillas de lechuga. Figura superior: Control de la germinacin en semillas de lechuga por la luz roja (R) y por la luz roja lejana (RL). Si la ltima exposicin de las semillas es a la luz roja, la mayora de ellas germina. Sin embargo, si la ltima exposicin es de luz roja lejana entonces se mantiene el estado de latencia. En la tabla de la figura intermedia se indican, en forma de porcentaje, el nmero de semillas germinadas en base a la secuencia de iluminacin recibida. Las germinacin de las semillas depende de la longitud de onda final de la serie de exposiciones la luz roja promueve la germinacin, y la luz roja lejana la inhibe). En la figura inferior: Control de la germinacin de semillas de lechuga por la luz roja y por la luz roja lejana. Las semillas germinan cuando la luz es roja, pero no cuando la luz es roja lejana.

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