Introduccin a los Mtodos Instrumentales

Tema 1 INTRODUCCION A LOS METODOS INSTRUMENTALES DE ANALISIS

Los mtodos que utiliza la Qumica Analtica para la caracterizacin de la materia suelen clasificarse en Qumicos e Instrumentales.
Anlisis Cualitativo METODOS QUIMICOS Anlisis Cuantitativo Opticos Electroqumicos Otros

METODOS INSTRUMENTALES

Los mtodos qumicos estn basados en interacciones materiamateria, esto es, en reacciones qumicas*. Estos mtodos fueron durante un gran periodo de tiempo esencialmente empricos, implicando, en la mayora de los casos, una gran destreza experimental. Actualmente, se utilizan conceptos, fenmenos y propiedades que han contribuido a aumentar y consolidar la base sobre la que se asientan los antiguos mtodos empricos, as como a desarrollar otros nuevos. Por otro lado, la revolucin tecnolgica e industrial, a la vez que plantea nuevos problemas, ha impulsado el desarrollo de nuevos mtodos, de forma que actualmente, puede afirmarse que todas las propiedades de la materia pueden utilizarse para el establecimiento de un mtodo de anlisis. Surgen as una gran cantidad de mtodos instrumentales, basados en interacciones materiaenerga, que emplean algn aparato distinto de la balanza y la bureta para realizar la medida y para los cuales no es
* En realidad, los denominados mtodos clsicos, o mtodos qumicos, son todos aquellos que se basan casi

exclusivamente en reacciones qumicas, y en los que la instrumentacin es escasa (balanzas, sistemas potenciomtricos, conductimtricos o de algn otro tipo para detectar el punto final de las valoraciones, etc.). Por otra parte, muchos mtodos analticos instrumentales emplean reacciones qumicas, y no se les considera dentro del grupo de mtodos qumicos, debido a que en ellos el instrumento tiene mayor peso en el conjunto de la determinacin.

Claudio Gonzlez Prez esencial el concurso de una reaccin qumica.

Un mtodo analtico se considera fsico cuando no incluye reaccin qumica alguna y la operacin de medida no modifica la composicin qumica del sistema, como, por ejemplo, cuando se trata de medir la intensidad del color de una disolucin de permanganato (la cual es proporcional a la concentracin). Sin embargo, en muchas ocasiones, simultneamente con la medida de la propiedad fsica elegida, es necesario emplear reacciones qumicas (por ejemplo, puede determinarse hierro colorimtricamente mediante la formacin del complejo Fe2+o,fenantrolina). Por ello, a veces, se utiliza el trmino de mtodos fisco-qumicos de anlisis.

Breve panorama histrico

Puede decirse que la aplicacin de las tcnicas instrumentales al anlisis comenz con el siglo actual, pues en 1903, Kuster y Gruters sentaron las bases de las valoraciones conductimtricas, desarrollndose posteriormente las valoraciones potenciomtricas aplicadas a reacciones redox y de precipitacin. En la dcada de los treinta se construyeron los primeros electrodos de vidrio sensibles al pH, lo cual constituy un avance importante al hacer posible la determinacin rpida y continua del pH, con la consiguiente aplicacin a las volumetras cidobase. Anteriormente, en 1922, Heyrovsky haba descubierto la polarografa, lo que constituy un importante avance para el anlisis a nivel de trazas. En este sentido, hay que mencionar que durante el primer tercio de siglo se puso de manifiesto la necesidad de analizar componentes trazas, a concentraciones inferiores a 0.01 %, en una gran variedad de muestras, as como de efectuar numerosos anlisis de productos industriales en tiempo muy corto, requisitos que no se conseguan con los tradicionales mtodos gravimtricos y volumtricos. La necesidad de solucionar estos problemas provoc el desarrollo espectacular de los mtodos instrumentales que se produjo a partir de los aos treinta, si bien, los avances conseguidos nicamente se notaron en los pases ms industrializados. En estos pases (Estados Unidos, Alemania, Inglaterra, etc.) al comenzar la dcada de los cuarenta ya se utilizaban de forma rutinaria los espectrofotmetros de ultravioleta e infrarrojo, los espectrmetros de emisin, los fluormetros, los polargrafos, etc., tecnologa que an tardara algn tiempo en llegar a Espaa y hacerse asequible a los laboratorios universitarios e industriales. Durante la primera mitad de la dcada de los cuarenta, una serie de hechos relacionados con los acontecimientos blicos que tuvieron lugar en esa poca,

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condicionaron la evolucin de las Ciencias, y en particular de la Qumica. El proyecto Manhattan, relacionado con la construccin de la primera bomba atmica, impuls considerablemente los mtodos instrumentales, as como el anlisis de trazas, el microanlisis y las separaciones por cambio inico. Las tcnicas cromatogrficas, especialmente la cromatografa en fase gaseosa y de capa fina, experimentaron un desarrollo continuo desde mediados de los aos cincuenta, lo cual, unido a los progresos alcanzados en la elucidacin de estructuras por espectrofotometra infrarroja y posteriormente por espectrometra de masas y por resonancia magntica nuclear, posibilitaron un gran avance en el campo de la Qumica Orgnica. En anlisis inorgnico se introdujo en esa poca la espectroscopia de absorcin atmica, con la que se consigui mejorar notablemente los resultados obtenidos con la tcnica de fotometra de llama. En muy poco tiempo, la absorcin atmica se hizo casi insustituible para el anlisis de metales a nivel de trazas. El anlisis de una gran cantidad de especies inorgnicas a niveles de partes por milln se haba conseguido fcilmente a finales de los aos sesenta, si bien, pronto se hizo necesario disminuir esos niveles, lo cual provoc el perfeccionamiento de las tcnicas que ya existan, as como el desarrollo de otras nuevas. Finalmente, durante los aos ochenta, se ha producido la irrupcin de la informtica, lo cual ha modificado profundamente las tcnicas analticas instrumentales, tanto en forma de microordenadores para controlar los instrumentos, como en la manipulacin de la abundante informacin obtenida en las medidas experimentales. Por ejemplo, un computador puede controlar tiempos de muestreo o aparatos de inyeccin mediante activacin elctrica con conmutadores. Una vez obtenidos los resultados analticos, puede procesar los datos, realizando operaciones tales como la generacin de derivadas de espectros o transformadas de Fourier. Adems, puede evaluar los resultados estadsticos y comparar los resultados analticos con datos almacenados en su memoria, as como comparar espectros y otros datos.

INSTRUMENTOS ANALITICOS
El objeto de la Qumica Analtica lo constituye la materia, y su finalidad es caracterizarla. Con este fin es necesario utilizar ciertas propiedades (propiedades analticas) que presente la propia materia y mediante las cuales se pueda establecer lo

Claudio Gonzlez Prez

ms claramente posible su composicin cuali o cuantitativa. Estas propiedades pueden ser observadas directamente de la materia (algo consustancial con ella) o, y en el caso ms general, pueden ser provocadas mediante un proceso fsico o mediante una reaccin qumica. En cualquier caso, puede afirmarse que la medida de la propiedad elegida es la etapa experimental definitiva en el proceso analtico, tanto si se trata de establecer la presencia (o ausencia) de un determinado grupo qumico, como si se trata de determinar la proporcin de un determinado componente en una muestra. La medida puede referirse a la simple percepcin sensorial de una propiedad (formacin de un precipitado, presencia de un color, etc.) o a la "determinacin" de la intensidad de dicha propiedad, con ayuda de una aparato ms o menos complicado. As, puede considerarse que un instrumento analtico es un dispositivo que convierte una

seal, que no suele ser detectable directamente por el ser humano, en una forma que s lo es.
Un instrumento analtico tpico consta de los cuatro componentes representados en la figura 1.1.

El generador de seales produce una seal directamente relacionada con la presencia (y tambin, frecuentemente con la concentracin) del analito. En ocasiones es una especie producida por el propio analito, como cuando se trata de determinar el pH, donde la seal son los iones H+. Otras veces, el proceso de generacin de la seal es ms complicado, como, por ejemplo, en espectrofotometra, donde, adems de la propia muestra, se necesita una fuente de radiacin y un monocromador. El detector, tambin llamado transductor de entrada* es un dispositivo que convierte un tipo de seal en otro. Cuando se trata de medir el pH, el detector es un electrodo de vidrio que transforma la actividad de los iones H+ en un potencial elctrico, mientras que en espectrofotometra ultravioleta o visible, el detector es un tubo fotomultiplicador que transforma la energa radiante en una corriente elctrica. La seal procedente del detector, se modifica en el procesador de seales, adaptndose al dispositivo de lectura. En muchas ocasiones se produce simplemente una amplificacin, si bien, a menudo, simultneamente las seales se filtran para reducir el ruido de fondo.

* Douglas A. Skoog y James J. Leary, "Anlisis Instrumental". Ed. McGraw-Hill. Madrid (1993)

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Ejemplos Medida del pH Generador de seales Seal analtica Detector Seal de entrada Procesador de seales Seal de salida Dispositivo de lectura Medidor de escala Unidad digital Medidor de escala Unidad digital Muestra Actividad iones H + Electrodos (vidrio y ref.) Potencial elctrico Amplificador Digitalizador Medida del color Lmpara Monocromador Muestra Radiacin electromagntica Fotomultiplicador Corriente elctrica

0.946

.
Figura 1.1. Componentes bsicos de un instrumento analtico.

Finalmente, el dispositivo de lectura transforma la seal procesada en otra seal inteligible para el observador. Esta puede ser, por ejemplo, el desplazamiento de la aguja en una escala, una serie de nmeros, un trazo en un papel, el ennegrecimiento en una placa fotogrfica, etc.

CARACTERISTICAS DE LOS METODOS INSTRUMENTALES

Los mtodos qumicos cuantitativos tienen carcter absoluto. En ellos, la propiedad medida es funcin directa de la concentracin o de la cantidad, de acuerdo con una relacin de proporcionalidad, P=KC, donde P representa la magnitud de la propiedad medida, y C es la concentracin o la cantidad. Adems, la constante, K es nica, esto es, tiene un valor perfectamente definido, deducible de las leyes estequiomtricas. En estos mtodos, basta una simple medida para efectuar la determinacin. As, por ejemplo, en un mtodo volumtrico, una sola lectura del

Claudio Gonzlez Prez

volumen de reactivo aadido desde la bureta puede ser suficiente para determinar la concentracin del componente de inters. Por su parte, los mtodos instrumentales tienen carcter relativo. Tambin se basan en la medida de una propiedad, P, (normalmente fsica), que es funcin de la concentracin, P=KC. Sin embargo, a diferencia de los mtodos qumicos, la constante de proporcionalidad no es nica, al depender de las condiciones experimentales. As, por ejemplo, en espectrofotometra, la absorbancia, A, (propiedad medida) est relacionada con la concentracin por: A=bC donde es la absortividad y b el espesor de la muestra. En polarografa, la relacin entre la propiedad medida (intensidad de corriente) y la concentracin es ms complicada: Id = 607nD1/2m2/3t1/6C donde D es el coeficiente de difusin, m el flujo de mercurio y t el tiempo de goteo. Es evidente, que si se conocen todos los parmetros implicados en la constante K ( y b en espectrofotometra, y n, D, m y t en polarografa) estos mtodos adquieren carcter absoluto. Sin embargo, en la prctica, estas relaciones apenas se usan, muchas veces por la dificultad de medir las variables implicadas. Por ello, la concentracin de la muestra se determina preferentemente por comparacin con muestras patrn. En principio, puede utilizarse un solo patrn, llevando a cabo una medida, P1, sobre una muestra de concentracin conocida, C1, con lo que se obtiene el valor de K. A continuacin, manteniendo constantes las condiciones experimentales (es decir, K) se realiza la medida de la propiedad, P, sobre la muestra, C, con lo que se tiene que,
P C = P 1 C1

donde, P, P1 y C1 son magnitudes conocidas. En consecuencia, se deduce C por comparacin con C1, la cual se conoce exactamente, o se puede determinar con un mtodo qumico absoluto. De aqu, la importancia de estos mtodos en la puesta a punto de los mtodos instrumentales. Sin embargo, operando con una sola muestra patrn se tiene el inconveniente de que el resultado estar afectado del error indeterminado propio de la medida de ese

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patrn. Por ello, resulta ms conveniente comparar respecto a varias muestras patrn incluidas en un calibrado. Estos calibrados minimizan el efecto de los errores indeterminados propios de la medida con un patrn nico.

TIPOS DE CALIBRADOS
Los tres mtodos de comparacin con patrones empleados ms frecuentemente son los que utilizan curvas de calibrado obtenidas mediante series de patrones, el mtodo de las adiciones estndar y el mtodo del patrn interno.

Curvas de calibrado
La utilizacin de curvas de calibrado obtenidas a partir de series de patrones es, posiblemente, el mtodo ms utilizado. Consiste en medir la propiedad analtica de inters, P1, P2, P3, etc. en una serie de muestras de composicin conocida, C1, C2, C3, etc. y preparadas todas ellas en las mismas condiciones (figura 1.2.A.) .
P4 P3
P
o o

1.2
o

A
o

0.8
o
o

P2 P 1
o

.
yy= 7554 xx0.038 = 7554 0.038 r = 0.999 puntos) r = 0.999 (8(8 puntos)

o o o o

0.4

C1

C2 C
A

C3

C4

0.4

0.8

1.2

1.6

2.0

[FeSCN 2+ ] x 10 4 M

B
Figura 1.2. Curvas de calibrado.

El calibrado obtenido se emplea para determinar la cantidad o concentracin en una muestra desconocida midiendo la magnitud de P en idnticas condiciones que los patrones y obteniendo C por interpolacin. La curva de calibrado se representa siempre con la respuesta del instrumento en el eje vertical (y) y las concentraciones sobre el eje horizontal (x). El valor de C se puede acotar teniendo en cuenta la precisin de las medidas para

Claudio Gonzlez Prez las diversas concentraciones, y a tal fin existen mtodos estadsticos adecuados.

Generalmente se utilizan calibrados en los que existe una relacin lineal entre la seal analtica (y) y la concentracin (x), tomando precauciones experimentales para asegurar que la linealidad de la respuesta se conserve en un amplio margen de concentraciones. En estos casos la forma de proceder consiste en obtener la recta de regresin de y sobre x (esto es, la "mejor" lnea recta a travs de los puntos de la grfica de calibracin, y que puede obtenerse, por ejemplo, por el mtodo de mnimos cuadrados) y utilizarla para estimar la concentracin de muestras problema por interpolacin, as como tambin para estimar el lmite de deteccin del procedimiento analtico. En la figura 1.2.B. se muestra la ecuacin de la recta de regresin de los primeros 8 puntos del calibrado que relaciona la absorbancia con la concentracin de FeSCN2+, as como el coeficiente de correlacin, r (parmetro que se utiliza para estimar el grado de ajuste de los puntos experimentales a la recta). En la prctica, es muy frecuente que la grfica de calibracin sea lineal a bajas concentraciones de analito y se vuelve curva a altas concentraciones. En este caso, se suele prescindir de los puntos que se apartan de la linealidad, para lo cual existen mtodos estadsticos adecuados*. En otras ocasiones, como por ejemplo, la respuesta de algunos electrodos selectivos de iones, la grfica es curva para todas las concentraciones. En estos casos, los problemas estadsticos son mucho ms complicados, aunque, si la curvatura no es demasiado severa, y los puntos experimentales no estn demasiado separados (lo que normalmente sucede), puede usarse un mtodo sencillo, aunque aproximado, consistente en trazar una lnea recta entre cada par de puntos y calcular las concentraciones utilizando la interpolacin lineal, es decir, trazar la curva como una serie de pequeos segmentos rectos*.

Mtodo de las adiciones estndar

El mtodo consiste en aadir sobre una serie de alcuotas, cantidades conocidas del componente a determinar, y medir la magnitud de la propiedad analtica de inters tras las diferentes adiciones. Para llevar a la prctica el mtodo, usualmente se toman volmenes iguales de disolucin problema, y se aaden cantidades conocidas y diferentes de analito a todas las muestras, excepto a una, diluyendo, finalmente, todas al mismo volumen.
* J. C. Miller y J. N. Miller. "Estadstica para Qumica Analtica". Ed. AddisonWesley Iberoamericana (1993).

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Seguidamente se obtienen las seales instrumentales para todas esas disoluciones, y los resultados se representan como en la figura 1.3.. La seal medida se representa en el eje y, mientras que en el eje x, la escala se expresa en trminos de las cantidades de analito aadidas, ya sea como masa o como concentracin. La recta de regresin calculada se extrapola al punto del eje x donde y=0. La concentracin de la muestra se puede deducir por extrapolacin, como se demuestra por simple igualdad de tringulos, ya que el C (figura 1.3.) necesario para producir un incremento de P es el mismo cuando se parte del blanco o de la propia muestra. En consecuencia, la base del tringulo en unidades de C proporciona la concentracin de la muestra. El mtodo se utiliza mucho en absorcin atmica, as como en emisin y en algunas tcnicas electroanalticas (ver en el captulo 9, su aplicacin al anlisis polarogrfico). Resulta especialmente til para los casos en los que la composicin variable de las muestras desconocidas hace difcil la preparacin de patrones con la misma matriz de las muestras. De alguna forma, todas las medidas se realizan sobre la propia muestra.
o

P
o o o

C
P

Figura 1.3. Mtodo de las adiciones estndar.

En trminos estadsticos, el principal inconveniente es que se trata de un mtodo de extrapolacin; por lo tanto, menos preciso que los de interpolacin. De hecho, el resultado se obtiene en una zona de la grfica donde no hay puntos experimentales, por lo que cualquier variacin en la pendiente de la recta por errores indeterminados se traduce en una variacin apreciable en el resultado. En este sentido, influye el tamao de la adicin, pues hay que procurar que el tramo incierto no sea demasiado grande. Por otra parte, el mtodo de las adiciones estndar puede ser difcil de automatizar, y suele necesitar cantidades de muestra mayores que cuando se utilizan otros mtodos.

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Mtodo del patrn interno

En este mtodo, una sustancia pura, ausente en la muestra, se aade en concentracin fija y conocida a los patrones y a la muestra. Se miden luego las respuestas del analito y del patrn interno, se calculan los cocientes entre ambas respuestas y se representan frente a las concentraciones de los patrones (figura 1.4.). El mtodo se utiliza frecuentemente en espectrometra de emisin y en algunos mtodos de rayos X. Su principal ventaja es que con l se eliminan los problemas de fluctuacin instrumental, ya que tanto el componente de inters (analito), como el patrn interno experimentan las mismas variaciones.

P4/p P/p
1 2 3 4

P3/p P /p 2 P/p 1
o o

C1 +c P p 1

C +c
2

C3+c P p 3

C +c
4

P p 2

P p 4

C1C 2C3 C4= concentraciones de analito patrn

C= concentracin del patrn interno

C1
Figura 1.4. Mtodo del patrn interno.

C2

C3 C C4

Para que una sustancia sea adecuada para usarla como patrn interno, debe cumplir ciertos requisitos, basados en una analoga de comportamiento con el elemento a determinar. As, por ejemplo, en espectrometra de emisin, ambos elementos deben presentar las mismas caractersticas de volatilizacin, anlogos potenciales de ionizacin y las lneas elegidas para el analito y para el patrn deben tener longitudes de anda parecidas y su intensidad no diferir demasiado. Adems, la concentracin del patrn interno deber ser del mismo orden de magnitud que la del analito, con objeto de minimizar el error al calcular los cocientes.

EMPLEO DE LOS METODOS INSTRUMENTALES

Los mtodos instrumentales se pueden emplear para desarrollar "mtodos directos", o bien para "determinar el punto final" en las valoraciones. Los "mtodos directos" se basan en la comparacin de la magnitud de una propiedad del componente de inters de la muestra problema con la muestra patrn,

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utilizando los calibrados ya mencionados. Por ejemplo, espectrofotometra visible y ultravioleta, absorcin atmica, polarografa, etc. Por otra parte, los mtodos instrumentales se pueden emplear para "determinar el punto final de la valoracin", midiendo una propiedad de la disolucin que vare durante la valoracin. Esto da lugar a una curva de valoracin que permite determinar el punto final. Por ejemplo, valoraciones fotomtricas, amperomtricas, etc. Las curvas de valoracin pueden ser lineales o logartmicas. En las lineales, existe proporcionalidad directa entre las dos variables medidas, y estn constituidas por dos tramos rectos bien diferenciados, cuya interseccin permite determinar el punto final. As, por ejemplo, consideremos la reaccin A + B > C. Si la especie A es electroactiva y se mide la intensidad de la corriente a un potencial adecuado, la citada intensidad disminuir a medida que se aade B, hasta hacerse prcticamente despreciable (figura 1.5.A.)
IA E

P.F. A

Vol. de B
Figura 1.5. Curvas de valoracin.

P.F. B

importantes para el trazado son los alejados del punto final.

El punto final es el que corresponde a la interseccin de los tramos rectos, aunque en las proximidades del punto de equivalencia suele presentarse una porcin curva que depende de la cuantitatividad. En estas curvas de valoracin, los puntos Por su parte, las curvas denominadas logartmicas, tienen forma de S, y el ejemplo ms representativo lo constituyen las curvas de valoracin potenciomtricas (figura 1.5.B.). El punto final se deduce de la posicin del punto de inflexin de la curva. En este caso, los puntos ms importantes de la curva son los prximos al punto de equivalencia.

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COMPARACION ENTRE METODOS QUIMICOS E INSTRUMENTALES

La comparacin de estos mtodos se puede realizar sobre la base de sus caractersticas de bondad, concretadas en la precisin, exactitud, sensibilidad, selectividad, rapidez y coste.

Precisin
La precisin de un conjunto de mediciones est ntimamente relacionada con la presencia de errores indeterminados (o aleatorios) y se considera como una medida de la reproducibilidad* de los resultados. Para describir la precisin se utiliza fundamentalmente la desviacin estndar, si bien tambin se usa la desviacin estndar relativa de la media, el coeficiente de variacin y la varianza.

trminos absolutos que los mtodos instrumentales.

En relacin con la precisin, los mtodos qumicos suelen ser ms precisos en

Exactitud
La exactitud mide el error sistemtico o determinado de un mtodo analtico. Se puede determinar por comparacin con muestras patrn y por comparacin con un mtodo patrn. Comparacin con muestras patrn. Cuando se dispone de muestras patrn con una composicin conocida o aceptada, m, la forma de proceder es realizar n determinaciones, obtenindose el valor medio x. La exactitud vendr dada por la diferencia:

exactitud = x
Esas diferencias se pueden atribuir nicamente a errores indeterminados cuando el valor de t deducido de la ecuacin
t=x
n ; s=desviacin estndar s

es menor que el tabulado para un determinado nivel de probabilidad (suele tomarse el

* Existe una diferencia entre los trminos repetitividad y reproducibilidad. El primero se refiere a un conjunto de medidas repetidas en una sucesin rpida; por ejemplo, cinco valoraciones de la misma muestra utilizando la misma serie de disoluciones, el mismo material de vidrio, la misma disolucin de indicador, y en las mismas condiciones de temperatura, humedad, etc. Por su parte, la reproducibilidad se refiere a cuando cada una de las medidas se han realizado en situaciones diferentes. Por ejemplo, las cinco valoraciones anteriores realizadas con distintos recipientes de vidrio, distintas disoluciones de indicador, y en diferentes condiciones del laboratorio.

Introduccin a los Mtodos Instrumentales 95%).

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Comparacin con un mtodo patrn. Cuando no se dispone de muestras patrn, se compara el valor medio de np resultados obtenidos por el mtodo patrn, x p, con el valor medio de n resultados (en muchas ocasiones, np=n) obtenidos por el mtodo ensayado, x . En primer lugar es necesario comprobar que la precisin de ambos mtodos es la misma dentro de los lmites de probabilidad especificados. Ello puede hacerse por el criterio F, definido por la relacin de las varianzas (cuadrado de la desviacin estndar) de ambos mtodos:

F=

sp s
2

s p > s : en el numerador se coloca el trmino mayor

Si el valor de F obtenido es menor que el tabulado, para un nivel de probabilidad del 95 %, no hay diferencia significativa entre sp y s; esto es, los dos mtodos tienen una precisin que no es significativamente diferente. Una vez comprobado que la precisin de los mtodos que se comparan es esencialmente la misma, se emplea el criterio t, expresado por la relacin: xp x 1 1 + t= np n sc

donde sc es la desviacin estndar conjunta que se obtiene con las series de datos a comparar:

sc =

np 1 s p + n 1 s np + n 2

El valor de t obtenido se compara con el valor de t tabulado para np+n2 grados de libertad. Si el valor de t experimental es menor que el valor tabulado para un nivel de probabilidad del 95 %, no existen diferencias significativas entre la exactitud conseguida por ambos mtodos.

Los mtodos qumicos son ms exactos para altas concentraciones, aumentando el error de estos mtodos a medida que la concentracin disminuye, condiciones en las que los mtodos instrumentales son ms exactos.

Lmite de deteccin y sensibilidad

como aquella concentracin que proporciona una seal instrumental significativamente El lmite de deteccin de un analito por un mtodo instrumental, puede definirse

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diferente de la seal del "blanco" o seal de fondo. El trmino significativamente diferente debe aclararse en trminos estadsticos.
Si se realizan infinitas determinaciones sobre una muestra en blanco, los resultados se distribuirn en forma de curva de Gauss (figura 1.6.A.).

Y ybl B A L M 3 sbl
Figura 1.6. Lmite de deteccin.

mC C ybl C

Tomando un nivel de probabilidad del 95 % se puede definir un lmite, L, por encima del cual se encuentren nicamente el 5 % de los resultados (parte sombreada en la figura 1.6.). Podra considerarse que ste es el lmite de deteccin, por cuanto que un resultado situado por encima de L tiene nicamente un 5 % de probabilidades de pertenecer al blanco. Sin embargo, una muestra con una seal media, L, tendr una distribucin normal (curva B en la figura 1.6.), por lo que, en realidad, la probabilidad de concluir que esta muestra no difiere de la del blanco es del 50 %. Por ello, resulta ms adecuado considerar el valor medio, M, de una distribucin gaussiana (figura 1.6.C.) tal que el 5 % de sus valores se encuentren situados por debajo de L. Esto sucede cuando la distancia entre ybl y M es aproximadamente 3 veces la desviacin estndar del blanco (exactamente, 3.28), de forma que la mnima seal analtica distinguible, ym, sera*: ym = ybl + 3 sbl Cuando se utiliza una recta de regresin convencional para la calibracin, se tiene que, y = m C + ybl donde y es la seal medida, m la pendiente y C la concentracin (figura 1.6.). En el lmite de deteccin, ym = m Cm + ybl, con lo que la concentracin lmite
ybl +10sbl definido como "lmite de cuantificacin" o "lmite de determinacin", si bien, en la prctica no se utiliza de forma generalizada.
* Esta definicin de lmite de deteccin es completamente arbitraria. De hecho, se ha sugerido el valor

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(cantidad mnima de sustancia apreciable o determinable por unidad de volumen), Cm, es:
Cm =

y m y bl 3 s b l = m m

Los trminos "lmite de deteccin" y "sensibilidad" no son exactamente sinnimos. La sensibilidad de una tcnica se define correctamente como la pendiente del calibrado, y si ste es lineal, puede medirse en cualquier punto de l. Sin embargo, el lmite de deteccin de un mtodo se calcula con ayuda de la zona del calibrado prximo al origen, y para ello se utiliza, tanto la pendiente, como la ordenada en el origen. El "intervalo til" de un mtodo analtico se considera como el margen de concentraciones comprendido entre la concentracin ms pequea a la que pueden realizarse medidas cuantitativas (lmite de cuantificacin, LC en la figura 1.7.) y la concentracin a la que el calibrado se desva de la linealidad (LL en la figura 1.7.)

LL Y

Cm

LC intervalo til C
Figura 1.7. Intervalo til.

El intervalo til de los mtodos analticos deber ser, al menos, de dos rdenes de magnitud. implica que son capaces de detectar y determinar cantidades de analito mucho ms pequeas que los mtodos clsicos, lo cual los hace particularmente tiles para el anlisis de trazas, de gran importancia, por ejemplo, en muestras biolgicas y medioambientales. En anlisis instrumental, un factor que degrada la exactitud y la precisin de un anlisis, y contribuye a hacer menos favorable el lmite de deteccin, es el ruido. Este

Los mtodos instrumentales son ms sensibles que los mtodos qumicos. Esto

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factor est presente siempre en todas las seales analticas instrumentales, en mayor o menor grado (figura 1.8.)

seal S/N = 5

S/N = 50
Figura 1.8. Relacin seal/ruido.

El origen del ruido puede ser muy diverso, si bien, suele distinguirse entre ruido qumico y ruido instrumental. El primero procede de una multitud de variables incontroladas directamente relacionadas con la qumica del sistema: posicin del equilibrio qumico, variaciones indetectadas de la temperatura, presin, etc. Por su parte, el ruido instrumental es el relacionado con los distintos componentes del instrumento utilizado: generador de seales, detector, etc. En relacin con este parmetro, suele utilizarse, para describir la calidad de un mtodo analtico o el funcionamiento de un instrumento, la relacin seal/ruido (S/N), definida como:
S x = N s

donde x representa la media de la seal medida, y s la desviacin estndar. Evidentemente, las condiciones ms favorables para efectuar la medida se tendrn para altas relaciones S/N (figura 1.8.)

Selectividad
La selectividad hace referencia al grado de interferencia de unas especies sobre la identificacin de otras. El caso ms favorable de selectividad es aquel en el que ninguna otra sustancia interfiere y la reaccin o el mtodo son completamente caractersticos de la sustancia que se determina. Se dice entonces que el mtodo es especfico. La selectividad se representa cuantitativamente por el coeficiente de

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selectividad, el cual se define, para una sustancia B, potencialmente interferente sobre un determinado analito, A, como: kB,A = mB/mA donde mB y mA son las pendientes del calibrado a la concentracin de inters, de B y de A respectivamente. El coeficiente de selectividad puede variar desde cero (no hay interferencia) hasta valores superiores a la unidad. Es un parmetro de bastante utilidad, si bien, su uso se centra casi exclusivamente, para caracterizar el funcionamiento de los electrodos selectivos de iones. algunos muy selectivos, en especial, algunos mtodos pticos.

La selectividad de los mtodos instrumentales es muy diversa, existiendo

Rapidez
Con respecto a la rapidez, los mtodos instrumentales son ms rpidos para determinaciones en serie o de rutina. Requieren un tiempo de puesta a punto, pero luego suelen ser rpidos. Adems, suelen ser fcilmente automatizables, ya que muchos dan respuestas rpidas y continuas, haciendo posible su adaptacin a anlisis de control, lo cual permite, tras una interpretacin, pasar a la accin en poco tiempo. En la industria, normalmente se parte de unos materiales que, despus de someterlos a una serie de manipulaciones se transforman para originar unos productos finales.
.
Materiales de . partida
Proceso global
. Productos finales

El control puede efectuarse en cualquier punto del proceso, para lo que se necesitan mtodos rpidos que permitan tomar decisiones en poco tiempo, por si es necesrio alterar el proceso de fabricacin.

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Coste
Finalmente, en cuanto a la economa, podra parecer, en principio, que los mtodos qumicos son ms econmicos que los instrumentales, y, si bien, sto es cierto en cuanto al material, no lo es tanto en relacin con el tiempo necesario para llevarlos a la prctica ni en relacin con el personal, pues, en contra de lo que pueda parecer a primera vista, se precisa mayor tiempo de adiestramiento para utilizar un mtodo clsico, que para aprender a manejar un instrumento. Esto hace que los mtodos instrumentales puedan ser rentables para trabajos en serie.

EJERCICIOS
1. En la determinacin de una especie X por un mtodo instrumental en el que P = k Cx se obtuvieron los siguientes datos de calibracin:
Concentr. de X, ppm Seal analtica, P

0 0.031

2 0.173

6 0.422

10 0.702

14 0.956

18 1.248

Sabiendo que la desviacin estndar del blanco es s=0.0079, a) Calcular el lmite de deteccin y el lmite de cuantificacin. b) Representar la curva de calibracin. c) Calcular la concentracin molar de X en una muestra si al medir la intensidad de la seal analtica se obtiene un valor de 0.532 (masa molecular de X=207.2) 2. La determinacin de metales pesados puede llevarse a cabo polarogrficamente por medida de la intensidad de corriente originada en su reduccin con un electrodo de gotas de mercurio. Para determinar cadmio en una muestra de aguas residuales se obtuvo una corriente de 41 mA, operando en determinadas condiciones. El calibrado se obtuvo operando en las mismas condiciones sobre muestras de cadmio de concentracin conocida, obteniendo los siguientes valores:

Introduccin a los Mtodos Instrumentales

20

Cd2+,M I, mA

1.0x104

2.0x104

3.0x104

4.0x104

5.0x104

6.0x104

8.0x104

10.x104

20

29

39

48

56

73

87

Obtener la concentracin de cadmio en la muestra problema.

3. Para la determinacin de amoniaco en una pecera se utiliza un sensor potenciomtrico, en el que la propiedad medida (potencial) responde a la ecuacin: E(mV) = Cte. + m.log CNH3. Los datos obtenidos al calibrar el sensor son: E, mV NH3, M 268 1.105 310 5.105 327 1.104 368 5.104 386 1.103 428 5.103

a) Representar la curva de calibracin. b) En una muestra de 100 mL de agua de la pecera, despus de ponerla en condiciones adecuadas, se introduce el sensor y se obtiene una seal de 339 mV. Obtener la concentracin de amoniaco en el agua. 4. Se llev a cabo la determinacin de hierro en vinos por espectrofotometra de absorcin atmica, utilizando el mtodo de adicin estndar. Para ello, en cinco matraces aforados de 50 mL se ponen 10 mL de vino. A continuacin se aaden a cada uno de ellos 0, 5, 10, 15 y 20 mL de una disolucin patrn de hierro, conteniendo 10 ppm de Fe. Seguidamente, se enrasan con agua desionizada y se mide la absorbancia atmica del hierro, obteniendo los valores de 0.040, 0.062, 0.081, 0.102 y 0.135 respectivamente. Calcular la ecuacin de la recta de regresin y obtener la concentracin de hierro en el vino (en mg/L).