Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco

1

CONTROL

DE

CALIDAD INTERNO

QUE DEBEMOS HACER ? El primer paso es gestionar la disponibilidad de un freezer a – 20 ºC, y de un suero en cantidad suficiente para fraccionarlo en 100 o más alícuotas. QUE TIPOS DE SUERO USAR EN CONTROL DE CALIDAD INTERNO ? Lo ideal es utilizar un suero comercial con elevada confiabilidad, de valores conocidos para cada analito y método de medición. En nuestro medio, es posible acceder a sueros comerciales que presentan valores obtenidos por métodos de referencia, o por métodos de rutina, en laboratorios de referencia. Esta opción tiene la desventaja de agregar un costo adicional al laboratorio, aunque no resultan elevados. Otra opción mas económica es preparar un pool de sueros partir de las muestras que obtenemos todos los días. Veremos esta opción. COMO PREPARAR UN POOL DE SUEROS ? 1- Guardar diariamente entre 2 y 8 ºC, los sueros sobrantes. 2- Lavar muy bien y enjuagar con agua destilada, un erlenmeyer de 250 ml. 3- Calcular el volumen necesario para tener sueros por 4 meses. Lo primero es sumar los volúmenes de muestra de cada una de las determinaciones de Química Clínica que realizamos. Supongamos por ej., que obtenemos un volumen total de 500 ul . Sumar 100 ul para cubrir eventuales repeticiones. Para realizar el Control de Calidad Interno de todas las determinaciones de Química Clínica todos los días hábiles del mes, tendremos: 0.6 ml/día x 22 días /mes x 4 meses= 52.8 ml Conviene preparar casi el doble del volumen calculado para asegurar no quedarse sin pool de suero. 4- Diariamente, descargar los sueros de días anteriores en este erlenmeyer hasta obtener el volumen que necesitamos (casi dos veces el vol. calculado). Mantener este erlenmeyer en freezer a – 20 ºC. No incluír sueros hemolizados, lipémicos, ictéricos, y de pacientes positivos para HIV, HVB, y de pacientes internados. 5-Desfreezar, colocando el erlenmeyer a temperatura ambiente, homogeneizar muy bien por rotación suave durante 3 minutos. Puede utilizarse un vortex. Filtrar con gasa cuádruple, a un vaso de precipitados limpio, seco y estéril. 6- Distribuír en alícuotas, en conos tipo ependorf, con tapa ermética. El volumen a alicuotar = vol calculado + 100 ul 7- Rotular fecha de preparación, y freezar la gradilla con los conos. El límite de 4 meses se debe al deterioro que se ha observado en la actividad de algunas de las enzimas que dosamos. Considerar el pool de sueros como potencialmente contagioso, como cualquier muestra que ingresa al laboratorio. Una vez que disponemos de alícuotas de un mismo suero por al menos por 4 meses, podemos iniciar los procedimientos de Control de Calidad Interno

durante 20 días......intra.. Límite aceptable del C.V. ... para evaluar presencia y magnitud de errores analíticos dentro de un ensayo.. Permite: 1..e.......Detectar presencia de un error sistemático o desvío..Conocer el grado de REPRODUCTIBILIDAD de cada medición. donde la imprecisión intraensayo es óptima (baja) . según se observe un nivel de imprecisión intraensayo aceptable o nó.. ... y que en concentraciones bajas o altas......Evaluar la zona óptima de concentraciones.... Concentrac. e. Estima la variabilidad analítica de nuestras mediciones debido a fuentes de imprecisión. Obtenemos así 20 duplicados de resultados a diferentes niveles de concentración. la imprecisión es inaceptable (muy elevada). 6.. Se calcula luego.e.......) Si se grafica C.. 2. Cómo? Procesando duplicados de todas las muestras del día. dentro de un ensayo.....Aceptar o rechazar un ensayo.. desvío estándar intraensayo. Esta imprecisión no es la misma a diferentes niveles de concentración ( o actividad enzimática).. y Coeficiente de Variación intraensayo (C... y uno para detectar desvío intraensayo. y establecer los límites fuera de los cuales no deben validarse los resultados.V... y Objetivar las mejoras introducidas.... solo desarrollaremos uno para medir la imprecisión intraensayo. media aritmética......Realizar acciones correctivas o de mejora del procedimiento analítico... 2 Es necesario tener un alto grado de Reproductibilidad de cada medición. independientemente del tratamiento... intraensayo... Intr..V.. intra..intra.V.. 5. Rango óptimo Se ve claramente que existe una zona de concentraciones...Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco CONTROL DE CALIDAD INTERNO INTRAENSAYO Es una herramienta de calidad. Se pueden realizar varios procedimientos. MEDICIÓN DE LA IMPRECISION INTRAENSAYO.... versus nivel de concentración... si se pretende ser confiable en la valoración de la efectividad de un tratamiento o de la evolución de una enfermedad.e. 3. De allí que debemos obtener el “perfil de precisión de nuestro ensayo”... se obtendrá C..

si obtenemos un resultado que supera el rango óptimo.V. 4. debemos elevar la cantidad de muestra hasta lograr una concentración dentro del rango óptimo. con un 95% de confianza (X ± 2 DS = 95% de los valores obtenibles en la repetición de una medición) Xi = resultado del pool ubicado al inicio del ensayo.e. Por lo tanto. Permite detectar y valorar errores aleatorios y algunos errores sistemáticos. tarde y noche. Xf = resultado del pool ubicado al final del ensayo. 2. registrar 20 valores obtenidos. para minimizar los errores detectados. a mitad o al final del mismo. y S.. La presencia de un desvío intraensayo indica que al comienzo del ensayo.e y C. y al final de nuestro ensayo ( el ensayo debe tener mas de 12 muestras) Si no existe desvío intraensayo. no se tiene la misma respuesta de señal. 1 – CONSTRUCCION DE CARTAS DE CONTROL DE LEVY JENNINGS Para cada analito. . para una misma concentración. o entre días ) Comprende 5 procesos: 1.Realización de acciones preventivas. La detección se realiza procesando por duplicado nuestro pool de sueros .Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco 3 SOLO ES LICITO VALIDAR RESULTADOS QUE ESTEN DENTRO DEL RANGO OPTIMO.Ejecusión de acciones correctivas. Si se procesa solo en el turno mañana.Construcción de las Cartas de Control de Levy -Jennings. tomar los valores de 20 días. el estandar ofrece la misma lectura. Lo ideal es procesar una alícuota en cada turno de trabajo del día. al comienzo. Si es una concentración muy baja. En conclusión: la presencia de un desvío intraensayo invalida el uso de un estandar o calibrador para obtener las diferentes concentraciones de nuestras muestras. 5.. debemos diluír la muestra lo suficiente para que la concentración a medir esté dentro de este rango. estamos suponiendo que en cualquier ubicación dentro del ensayo.i. = desvío estandar intraensayo CONTROL DE CALIDAD INTERNO INTERENSAYO Estima la variabilidad analítica de nuestras mediciones debido a fuentes de imprecisión entre ensayos consecutivos ( entre turnos mañana. i. DETECCION DEL DESVIO INTRAENSAYO Cuando realizamos una medición en un ensayo validado con un único estandar o calibrador. 3-Aplicación del Sistema Multireglas de Westgard para aceptar o rechazar cada ensayo.Cálculo del nivel de imprecisión interensayo: DS i. la diferencia entre el resultado al inicio y al final del ensayo debe ser menor que 2 veces el desvío estandar intraensayo Xi – Xf < 2 x S.i.

y en el mismo sentido. Para aceptar o rechazar el nivel de dispersión interensayo. a dos niveles de concentración y de actividad enzimática. 3. o desde un Programa de Acreditación en el que está inscripto el laboratorio. En términos generales..e.V. Revisar todas las fuentes de error analítico.V. al igual que las 3 anteriores. 3s = la medición tiene mas de 3 DS . Interensayo debe ser < 5% para determinación de concentraciones y < 10 % para actividades enzimáticas.Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco 2. 3 s= la medición se ubica fuera del límite media +/-3 DS. = DS x 100 % promedio Calcular límites de aceptabilidad: media + 1 DS y media – 1 DS media + 2 DS y media – 2DS media + 3 DS y media .valor hallado. Utiliza reglas o criterios de decisión. a partir de comparar la ubicación de nuestra medición en la Carta de Control de Levy Jennings. Regla 10 X = la medición.) ² n -1 Coeficiente de Variación i. que pueden ser definidos intralaboratorio. Revisar todas las fuentes de error sistemático en nuestro procedimiento y método.3 DS Graficar en papel milimetrado ó en formato electrónico si se dispone del programa. Reglas que detectan y evalúan errores aleatorios Regla 1 . se comparan los valores hallados de DS. Regla 4 .i. Revisar todas las fuentes de error sistemático en nuestro procedimiento y método. Reglas que detectan y evalúan errores sistemáticos: Regla 1. Revisar todas las fuentes de error analítico.1s= la medición tiene entre 1 y 2 DS .i. el C. se ubica del mismo lado de la media. Calcular media aritmética (valor medio o promedio). desvío estandart y coeficiente de variación interensayo (ie): 4 Desvío estandart DS ie = ? (promedio .APLICACION DE L SISTEMA MULTIREGLAS DE WESTGARD Permite detectar errores sistemáticos y aleatorios. con estándares de calidad. Lo ideal es calcular DS y C. y compararla con su ubicación en días anteriores consecutivos. para cada determinación.e. y de C. y tomar la decisión de aceptar o rechazar todo el ensayo.V. junto a las 9 anteriores.e. Rechazar todo el ensayo. .VALORACIÓN DEL NIVEL DE IMPRECISIÓN INTERENSAYO. Rechazar todo el ensayo.

Se pueden utilizar las gráficas de Levy Jennings. no permite detectar todas las fuentes de inexactitud. 5. pero sí que se revisen todas las fuentes de error analítico. es mayor.Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco Regla R.EJECUSION DE ACCIONES CORRECTIVAS. El Control de Calidad Interno puede mostrarnos muy buena reproducibilidad. se puede validar todo el ensayo. sistemáticas si el error detectado es sistemático. Esta regla no indica el rechazo. Solo una vez obtenido un valor que no tiene criterios de rechazo. 4s = la medición se ubica a mas de 4 DS respecto a la anterior. por ej. pero no nos permite detectar que estamos midiendo una menor actividad enzimática. y todas si es una regla que no diferencia entre estos errores. Debe corregirse el error.Para superar estas limitaciones. Si se utilizan 2 pooles de sueros control de diferentes concentraciones . es que no permite cuantificar el error sistemático total intra o interensayo. Es importante recordar que el Control de Calidad Interno. la sensibilidad para detectar errores con estas reglas. se utiliza el Control de Calidad Externo. no detecta todos los errores sistemáticos. y repetir todo el ensayo. Si se obtiene un Criterio de no aceptación. Otra limitación del Control de Calidad Interno. sin olvidar que alcanzamos así una validación parcial de nuestras mediciones. Revisar todas las fuentes de error analítico. aleatorias si es una regla de errores aleatorios. deben investigarse todas las fuentes de variabilidad analítica. . es decir. mediremos una menor actividad enzimática. si luego realizamos dosaje de actividades enzimáticas por métodos cinéticos. y se evalúa cada una de las reglas. donde se ubica nuestra medición del día. podemos programar trabajar a 37 ºC pero en realidad la cubeta de reacción está a 35 ºC. si tenemos una deficiente termostatización de la cubeta de incubación. Rechazar todo el ensayo. 5 Reglas que detectan y evalúan errores sistemáticos ó aleatorios Regla 2 DS = la medición tiene una distancia > 2 DS respecto a la anterior.

E. P.P.S. cuando se superen los Criterios de 4.e.Vc ) x 100 % Vc B.S : A.E.S. Valor de concenso = Vc E.ERROR SISTEMÁTICO ( E.Aplicar un Criterio de Aceptación o Rechazo de nuestros Errores Analíticos: ES . al Valor de Concenso= promedio de los resultados informados por todos los laboratorios intervinientes en el Programa.V. También informa el C.S.): Pueden calcularse dos E. se expresa como porcentaje. Se asume aquí como Valor verdadero. se denomina Desvío Relativo Porcentual. a partir de una sola medición realizada con la muestra recibida en el Programa de Control de Calidad Externo. = (Vh .) D. E . nuestro Error Sistematico (ES ). .Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco 6 CONTROL DE CALIDAD EXTERNO QUE DEBEMOS HACER ? EL C.) y el Error Analítico Total ( ET) 2.S.E. interensayo aceptable para cada analito y método lo que posibilita valorar nuestro nivel de imprecisión interensayo.Calcular para cada procedimiento analítico. .Realizar acciones preventivas. Interensayo.R. donde su fabricante informa un valor verdadero para cada analito y método.S. Valor hallado en nuestro lab = Vh. que utilizaron igual muestra y método.Ejecutar acciones correctivas.Valor verdadero) Valor verdadero Cuando el E. 1. comprende 4 procedimientos: 1. para minimizar los errores detectados. (D.C. el Error Aleatorio interensayo (EA i. 1 . a partir del promedio de 20 mediciones de un mismo pool de suero comercial .R. EA y ET 3. Aceptación. (ie) = (Valor promedio . el Desvío Relativo Porcentual (DRP). = ( Vm – Vv ) x 100% Vv .S.

un ETM = 20 % . Es el Criterio mas utilizado en nuestro país. EA y ET. con el DRPA definido para cada determinación.Para todos los analítos donde se determina una concentración. en el Programa de Control de Calidad Externo. 2.Utilizar un Error Total Máximo aceptable fijo. El DRPA sería entonces nuestro Estandar de Calidad para el nivel de error por fuentes de inexactitud 2.V. 1.) establece: para glucemia.hipoclorito de Na. deben revisarse todas las fuentes de variabilidad analítica. Si el DRP hallado es superior al DRPA. i. = D S i. Por ejemplo.T.DRPA de un Programa de Control de Calidad Externo.3 .1.A. DRPA = 5% Debe compararse el DRP calculado en nuestro laboratorio. ie= 2 x C. Es el Criterio menos utilizado. + E. un ETM = 5 % 2.ERROR ALEATORIO interensayo : E. 2.E.ie 2. Para cada analito.Utilizar los Criterios de Aspen.E.APLICAR UN CRITERIO DE ACEPTACIÓN O RECHAZO DE L ERROR ANALITICO Para aceptar o rechazar nuestro ES. se tiene un valor de DRPA.Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco 1. para uremia por método ureasa. se pueden aplicar uno de los cuatro criterios siguientes.3. se toma como límite admisible un Error Total Máximo = 10 % . que son valores de DRP fijados por el Programa de Control de Calidad Externo en el que esta inscripto el laboratorio. según el tipo de determinación 2. con el Objetivo de corregirlos o disminuírlos lo suficiente para obtener un DRP menor al DRPA. un DRPA = 8%.A.P. en especial las de errores sistemáticos. Criterios de aceptación de errores analíticos: 2.Para los iones. para calcemia por método azul de metiltimol.Utilizar los Criterios de Tonks 2. el Programa de Evaluación Externa de la Calidad de la Fundación Bioquímica Argentina (P.4. 2.C.3. x 100 % media 1.Error Total (Interensayo) E.2.R. según tipo de determinación: .V. 2.ie = D.ETM calculado según los CRITERIOS DE TONKS .salicilato.e.e.Para las actividades enzimáticas.ERROR TOTAL MÁXIMO ACEPTABLE FIJO. un DRPA = 10% . Ie 7 Coeficiente de Variación interensayo C. por método glucosa oxidasa-peroxidasatrinder.Utilizar los valores de Desvío Relativo Porcentual Aceptable ( DRPA).

la variabilidad biológica interindividuo.R. etc.25 = 11 % 90 mg% Para calcemia el Int. deben investigarse todas las fuentes de variabilidad analítica.V.EJECUTAR ACCIONES CORRECTIVAS. No olvidar que con este Control de Calidad Externo. alcanzamos una validación parcial de nuestras mediciones. EMT (Tonks) = 2 mg% x 0. Aleatorio 3. x 0. Biológica x 0.25 = 5. LA VALIDACION ANALITICA TOTAL SE LOGRA AL OBTENER VALORES ACEPTABLES EN LOS CONTROLES DE CALIDAD INTERNO Y EXTERNO.5 Error Total Máximo (Aspen) = Error Aleatorio total = 2 x C. ( sistemáticas y aleatorias ). de Ref es 70 a 110 mg% ETM = (110 – 70) mg% x 0. para disminuír estas fuentes de varabilidad.ETM calculado según los CRITERIOS DE ASPEN 8 Tiene en cuenta. Si se obtiene un Error analítico superior al ETM usado como Criterio de aceptación.interind)² ] ½ C. Asume un Error Sistemático = 0 . Biológica) ² = [ (C. y repetir todo el ensayo. intraind)² + (C. EJERCICIOS DE APLICACION . las variabilidades biológicas intra e interindividuo. que afecta directamente al Intervalo de referencia del analito en la muestra donde se realiza la medición. Por ej. V. de Ref = 8 a 10 mg% .V.5 % 9 mg% 2. se puede validar todo el ensayo. V.V. ETM = Interv de Ref. si para glucemia utilizamos el Int. Deben realizarse modificaciones en el procedimiento y /o en la calibración. Solo una vez obtenido un valor que cumpla con los Criterios de aceptación. aleatorio = C. RECIEN ENTONCES LOGRAMOS UNA ALTA CONFIABILIDAD EN NUESTRAS MEDICIONES. y/o funcionamiento del instrumental.Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco Tiene en cuenta.V.4.25 valor medio del I. lo cual es una limitación importante (C.

V. Na= 147 meq/l La media de los 1412 laboratorios intervinientes= 149.Dirección de Laboratorios de Salud Pública del Chaco 1. calcule el Error Total. cuyo Intervalo de Ref. se obtiene para el dosaje de Na por método de ión selectivo.40 mg%. según el Criterio de Tonks.V. interensayo= 2.67 meq/l El Programa de CC Externo informa como DRPA = 2% Calcule DRP e indique si es aceptable para las normas de este Programa. y fuentes de error aleatorio. aplicando como Criterio de aceptación un E.Proponer acciones de prevención para evitar que el error detectado se reitere. e indique si es aceptable.Construír la carta de control o gráfica de Levy Jennings 9 4. y proponer acciones correctivas para cada ejemplo de error detectado.Presentar dos ejemplos de error aleatorio y dos de error sistemático.Practicar la detección de errores aleatorios y sistemáticos.5%. 7. al medir Na. y para Na cuyo Int de ref =135 – 145 meq/l. a partir de 20 mediciones de glucemia.Listar fuentes de variabilidad analítica. Si Ud ya determinó que en su laboratorio. 2. su C. M = 5 % 6. 5.T. DS y C. . 3. aplicando las Reglas de Westgard.Calcular el EMT para uremia. 8. =20 . clasificadas en fuentes de error sistemático.En un Programa de Control de Calidad Externo .Calcular media.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful